肠菌群测定仪

水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液，以及其他行业(如餐饮业、食品加工等)排入地表水中的污水，快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。1．方法原理应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的甲臜(Formazane)产生红色色素，即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。2．水样采集用采水器或其他灭菌器采集水样500ml放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的废水，需加1．5％硫代硫酸钠5ml除去余氯。3．方法和步骤 每份预监测水样，接种水样总量为55．5ml，分别接种大纸片五张，小纸片10张。每张大纸片接种10ml水样，五张小纸片每张接种1ml，另五张小纸片接种1：10稀释的水样lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上，用手轻轻压平，作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘中。测总大肠菌群37℃±l℃培养18～24h观察结果，测粪大肠菌群44．5℃±l℃培养18～24h，观察结果。4．判定标准①纸片上出现紫红色菌落，周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强阳性。②纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。③纸片呈紫红色或紫色，菌落周围无黄圈者为阴性。④酸性水样接种后纸片变黄，经培养无紫红色菌落者为阴性。⑤纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者，应作复发酵进行验证。5．报告结果根据阳性纸片张数，查MPN值表(如水样污染较重可采取适当稀释后接种，查表5-2-10 MPN表后乘以稀释倍数，报出结果)，报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。

各位大神好，最近刚接触大肠菌群和粪大肠菌群实验，遇到了一些问题，请各位指教，谢谢1. 大肠菌群测定中，需要取菌群的一小部分进行涂片、革兰氏染色、镜检。请问这里的镜检的意义是什么？就是看是阴性还是阳性吗？不需要数镜片上有多少个菌？2. 大肠菌群测定中，进行平板分离后革兰氏染色，阳性就不需要做复发酵了吗？那报告怎么出结果？革兰氏阴性的话，要做复发酵，然后根据检数表来计算每升水样中的大肠菌群群数，再换算成每克污泥的大肠菌群数？3. 称取污泥样品1g，最后是1：:10均匀菌液（100mL），每升水样中总大肠菌群数是170，从每升水样中的大肠菌群群数，换算成每克污泥的大肠菌群数是这样算吗：170*0.1/1=17 个/g

请问由美国Idexx公司提供的，并通过美国EPA认可的“压膜机”法，所测定出来的总大肠菌群再经过紫外灯照射呈蓝色的结果是总粪大肠菌群还是E氏大肠菌群？

环保部发布《水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法》(HJ 755-2015)已经近一年了，有使用过“纸片快速法”测定大肠菌群的朋友吗？效果如何？目前网上能买到那些品牌的大肠菌群检验纸片？我看好像只有广州绿洲生化公司出品的，一份要20元，做一个水样要20元成本。

我一般用测定食品细菌总数SNO168-92、大肠菌群SNO169-92的方法测定，后听人说它有自己的测定标准,请问是什么

关于大肠菌群测定方法，到底该采用10版，还是03版。故此发此贴，希望能给大家带来一些帮助。 10版与03版相比，最主要的差别为初发酵试剂不同。10版为月桂基，03版为乳糖胆盐。月桂基与乳糖胆盐相比，稳定性好、可抑制革兰氏阳性菌增长、对损伤的大肠有修复作用。简而言之就是10版提高了灵敏度和检测率。 其次为判定方法和依据不太一样，对比下就可以发现，10版与03版采用单位不同、MPN检索表也不同，所以不能简单以10倍或者100倍进行换算。两者没有直接的换算关系。 综上，我们可以简单的认为10版与03版大肠菌群的测定，为两种完全不同的方法，并且表示单位不同，没有可比性。 故此，若你的产品卫生标准采用的是03版的单位，你就必须用03版的方法进行测定；若你的产品卫生标准采用的是10版的单位，就必须用10版的方法。 打一个比方，就像数星星一样，我先用肉眼观察，并定出了一个标准：100颗星星以上为晴天，30-100颗为阴天,30颗以下为雨天。那判定天气时就必须同样用肉眼观察，你不能拿望远镜观测后得出结论，今天星星有5000颗为晴天。因为两种观测方法的检出率不同。判定时就必须依照当初制定这个标准所用的方法。 希望此观点对大家有用。2009年卫生部16号文《卫生部关于规范食品中大肠菌群指标的检测工作的公告》 2009年 第16号为规范食品中大肠菌群指标的检测工作，现公告如下：现行食品标准中规定的大肠菌群指标以“MPN/100克或MPN/100毫升”为单位的，适用《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》（GB/T4789.3-2003）进行检测；以“MPN/克或MPN/毫升”、“CFU/克或CFU/毫升”为单位的，适用《食品卫生微生物学检验大肠菌群计数》（GB/T4789.3-2008）进行检测。特此公告。 二○○九年十月二十六日

请问大家测定饮用水大肠菌群一般使用什么方法？多管发酵法、滤膜法、酶底物法那种方法简单，准确度高？

大家好，因为有看到这里前些年有讨论粪大肠菌群的 帖子，近期我们单位准备开展 粪大肠菌群的测定 这个任务交给我，由我负责从实验室的建立到工作的开展，因为之前没有涉及，还请各位大神大发慈悲，帮帮我，不胜感激。主要是实验室的规划 ，一间房子。30平米 ，一个窗户，该怎么规划设计。

如题，现在2003版的大肠菌群还没有作废 ，而2010版的大肠菌群的测定也早就实施了，这两个标准使用上有什么区别啊，还有哪些产品分析时要使用2003版的，哪些产品使用时又要使用2010版的呢，谢谢

大肠菌群的测定有单料和双料乳糖胆盐发酵管试验。不管双料还是单料，最终微生物使用得成分都是单料得浓度，因为加入的检测样的体积不一样，所以才会配制不同浓度。比如10ml单料加1ml样品跟10ml双料加10ml样品后培养基的浓度几乎没有差别。10ml单料加1ml样品跟10ml双料加10ml样品后培养基的浓度几乎没有差别，这个怎么会浓度几乎没有差别呢，怎么计算？还有分装乳糖胆盐发酵管培养基的量一般是10mL，接种量1mL样液用18*180这种规格的试管，如果做10mL双料乳糖胆盐发酵管的，试管规格要用多少的啊，也用18*180这种规格吗？

哪位大侠有 医院大肠菌群测定的原始记录？

水质 粪大肠菌群测定，复发酵接种EC培养液具体怎么操作？

生活饮用水也属于食品，可否用GB 4789.3 测定其大肠菌群。

各位前辈，新手刚开始做粪大肠菌群的测定，用的滤膜法，想请教一下计数计算问题。在做了三个梯度体积的过滤之后，按照标准要求是滤膜上生长的菌落数为20—60个，有时候会出现以下情况：1.三个体积的滤膜上菌落数均不在20-60之间，例如78、6、0 2.有其中一个体积的滤膜在20-60之间，例如45、3、0。请问以上两种情况应该如何进行结果表示，谢谢大家。

环境标准《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》已编制完成，目前开始征求意见，附件是该标准的征求意见稿。

看到饮用水中的大肠总菌群及大肠杆菌的测定方法有3种一、多管发酵法二、滤膜法三、酶底物法针对这三种方法，有一些商品化的东西出现了，比如说，三、酶底物法 中 美国EPA提到了两种试剂盒，在中国也有用的：Colilert 和 Colitag 我想问问，在中国，酶底物法还有其他一些什么进口的试剂盒么？滤膜法对应的在中国有什么品牌试剂盒么？

MPN法大肠菌群测定中乳糖胆盐发酵管里看产不产气，用玻璃管，但是玻璃管倒着放下去就有气泡，怎样才能让里面没有空气呢？

采集测定总余氯和粪大肠菌群的水样如何保存呢？谢谢！！！

求电子版NY/T 1665-2008 畜禽饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法。谢谢！

请教多管发酵法测定水中粪大肠菌群的不确定度评定

我们是用平板法做肉制品大肠菌群，在VRBA 上长了密密麻麻的疑似菌（特别小），接种BGLB做确认时没有产气的现象，这样正常吗？

各位，谁能给我说一下监测污水中粪大肠菌群所用的仪器和器皿？都是什么规格？需要几个？越详细越好，如果有过程和图片更好，感激呀感激http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em0817.gif

请教多管发酵法测定水中粪大肠菌群的不确定度评定急手下擤盱感想

求助粪大肠菌群复发酵时转接到EC培养液应注意事项？谢谢！

HJ 347.2-2018 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法（部分代替HJT 347-2007）中结果计算，实际样品最大接种量f是什么，怎么算呀

我是刚接手水质中细菌的检测工作，有几个问题请教大家，烦请抽空解答哈~~1、根据测定粪大肠菌群的行标HJ/T 247-2007，复发酵试验是对“轻微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管”，这句话怎么理解？是对所有初发酵阳性都要进行复发酵，还是对初发酵的时候产气不明显，轻拍有小气泡升起的这类样品作复发酵呢？2、复发酵的时候是要求水浴的，请问水浴的作用是什么？有些单位直接用恒温培养箱培养，没有水浴的，这个影响大不大？因为现在搞扩项，很多不懂，麻烦各位解答解答啊~~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09508.gif

做海水大肠杆菌的检测，可是只找到了粪大肠菌群的检测。三种检测方法有什么不一样的？好多文献大肠杆菌用的就是总大肠菌群的检测方法，不知对结果会有多少影响

[align=center][b] 检验标准：[/b]HJ/T 347-2007[/align][b]仪器设备：[/b]生物安全柜SZSB-286，电热恒温培养箱 SZSB-310，微生物显微镜 SZSB-098[b]主要试剂：[/b]（1）乳糖蛋白胨培养液 批号：120409 产地：北京[b] [/b]（2）EC肉汤 批号：120219 产地：北京[b]1. 验证样品的制备[/b]： 无菌操作取样品100ml加入到装有适量玻璃珠的灭菌三角瓶内，充分振荡混匀，共制做三份，作为验证用供试液。[b]2 验证用菌液的制备[/b] 分别取大肠埃希氏菌（ATCC 25922），金黄色葡萄球菌（ATCC 6538），经36℃培养18〜 24h新鲜培养物至营养肉汤培养基中，培养18～24小时，分别用0.85%灭菌生理盐水按10倍稀释法逐级稀释菌液，选择浓度为50〜 100cfu/ mL的菌液备用。[b]3 实验操作[/b]3.1 取制备好的三份100ml供试液，一份不加菌作为供试品检查，一份加入1ml（50〜 100cfu/ml）大肠埃希氏菌菌液作为试验组，一份加入1ml（50〜 100cfu/ml）金黄色葡萄球菌菌液作为阴性对照。3.2 用1mL灭菌吸管吸取上述制备样液1mL，注入到含有9mL0.85%灭菌生理盐水的试管内，振摇试管混匀，制成1:10的稀释液。按同样方法依次做10倍递增稀释液。3.3 分别取制备样液10mL、1mL，1:10制备样1mL接种于乳糖蛋白胨培养液发酵管内，每个稀释度接种5根管，接种10mL的用含5ml三倍乳糖蛋白胨培养液发酵管，接种1ml的用单倍乳糖蛋白胨培养液发酵管，将发酵管置37℃恒温箱内培养24h。3.4 将3.3中产气的发酵管，分别用接种环沾取一环接种至EC肉汤发酵管中，置44.5℃恒温培养24h后。观察产气情况。根据产气情况报告粪大肠菌群阳性或阴性。3.5 以上试验重复进行三次。[b]4 实验结果判断依据[/b]粪大肠菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。乳糖蛋白胨培养液发酵产酸产气，EC肉汤发酵管复发酵产气者可判断为粪大肠菌群阳性。根据粪大肠菌群阳性管数，检索MPN表，报告每100ml样品中粪大肠菌群的MPN值，也可按照标准的要求，乘以相应的稀释倍数，换算成每L样品中粪大肠菌群的MPN值。[b]5 记录及报告[/b]第一次试验 [table][tr][td=1,3] [align=center]实验组别[/align] [/td][td=6,1] [align=center]阳性管数[/align] [/td][td=1,3] [align=center]结果[/align] [align=center]MPN/100ml[/align] [/td][/tr][tr][td=3,1] [align=center]乳糖蛋白胨培养液初发酵[/align] [/td][td=3,1] [align=center]EC肉汤复发酵[/align] [/td][/tr][tr][td]10ml*5[/td][td] [align=center]1ml*5[/align] [/td][td] [align=center]0.1ml*5[/align] [/td][td]10ml*5[/td][td] [align=center]1ml*5[/align] [/td][td] [align=center]0.1ml*5[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]供试品组[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]/[/align] [/td][td] [align=center]/[/align] [/td][td] [align=center]/[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]实验组[/align] [/td][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] 5[/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]46[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]阴性对照组[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]/[/align] [/td][td] [align=center]/[/align] [/td][td] [align=center]/[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][/tr][/table]第二次试验 [table][tr][td=1,3] [align=center]实验组别[/align] [/td][td=6,1] [align=center]阳性管数[/align] [/td][td=1,3] [align=center]结果[/align] [align=center]MPN/100ml[/align] [/td][/tr][tr][td=3,1] [align=center]乳糖蛋白胨培养液初发酵[/align] [/td][td=3,1] [align=center]EC肉汤复发酵[/align] [/td][/tr][tr][td]10ml*5[/td][td] [align=center]1ml*5[/align] [/td][td] [align=center]0.1ml*5[/align] [/td][td]10ml*5[/td][td] [align=center]1ml*5[/align] [/td][td] [align=center]0.1ml*5[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]供试品组[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]0[/align] [/td][td] [align=center]/[/align] [/td][td] 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347-2007标准要求及方法学验证依法检查在3次独立的平行试验中，在供试品组粪大肠菌群阴性，MPN值2MPN/100ml，阴性对照组粪大肠菌群阴性，MPN值2MPN/100ml的同时，试验组粪大肠菌群阳性，MPN值分别为46MPN/100ml、33MPN/100ml、49MPN/100ml。方法具有专属性，符合方法学验证规定。故我公司对医疗废水中粪大肠菌群的测定符合标准HJ/T 347-2007的要求。

[align=left]为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护生态环境，保障人体健康，规范生态环境监测工作，现批准《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》等五项标准为国家环境保护标准，并予发布。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　标准名称、编号如下。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　一、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688590.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》（HJ 347.1-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　二、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688592.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ 347.2-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　三、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688594.shtml]《水质 细菌总数的测定 平皿计数法》（HJ 1000-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　四、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688595.shtml]《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》（HJ 1001-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　五、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688596.shtml]《水质 丁基黄原酸的测定 液相色谱-三重四极杆串联质谱法》（HJ 1002-2018）。[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　以上标准自2019年6月1日起实施，由中国环境出版集团出版，标准内容可在生态环境部网站（kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/）查询。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　自以上标准实施之日起，《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T 347-2007）废止。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　特此公告。[/align][color=#000000][/color][align=right]　　生态环境部[/align][color=#000000][/color][align=right]　　2018年12月26日[/align]

环境监测行业里，测水样的粪大肠菌群，是用HJ347.2-2018标准，测总大肠菌群，是用GB/T 5750.12-2006。 那假如同一个水样，测粪大肠菌群，也要测总大肠菌群。那是不是总大肠菌群的结果一定大于粪大肠的结果呢？是否像总氮氨氮一样有必然的从属关系呢？一直很困惑。