蛋白定量检测

20 - 40%)。串联质谱多反应监测 (MRM/SRM)定量方法，一直以来就是定量的黄金标准，在小分子定量上早已成熟使用，随着液相色谱和串联质谱技术的提高，越来越多的生蛋白（肽段）定量的意义及出现 MRM 质谱技术平台的缘由化实验室开始大量采用串联质谱技术为基础的蛋白（肽段）定量流程。MRM 肽段定量方法的优点很多，它利用蛋白专属的肽段序列完成定量分析，一次运行可同时分析几十到几百种的蛋白，具备高通量的定量分析能力。特别是 2012 年，方法论领域的权威期刊《Nature Methods》将基于三重四极杆质谱 (QQQ) 平台的 MRM/SRM 定量思路的靶向蛋白质组学 (Targeted proteomics) 技术列为当年的年度方法，确立了目标蛋白定量分析的权威策略。近年来该杂志陆续发表了多篇论文，对 QQQ-MRM/SRM 思路成功应用于目标蛋白定量分析进行了持续报道。随着质谱灵敏度的大幅提高，以大流速常规液相色谱 (LC) 取代纳流液相色谱 (Nano-LC) 所组成的 MRM 肽段定量方法，代表着蛋白定量分析的最高技术标准，极大地促进生物化学及各种新应用快速向前发展，广泛应用在蛋白质组学、生物制药等研究领域，并迅速朝着诸如食品、环境、临床等更宽的应用范围发展。

BCA 蛋白定量法是一种快速灵敏、稳定可靠的蛋白定量测定方法，其测定范围是10－2000ug/ml，是比Lowry 法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。

大豆分离蛋白是植物蛋白中为数不多的可替代动物蛋白的种类之一，一般用低温脱溶大豆粕为原料生产，是一种全价蛋白类食品添加剂。大豆分离蛋白中蛋白质含量一般在90%以上，氨基酸种类约有20 种，并含有人体必需氨基酸，不含胆固醇，广泛的应用于食品加工行业。　　为评价大豆分离蛋白的质量，本文介绍大豆分离蛋白中蛋白水解氨基酸的检测方法。

得益于增强型主动离子管控技术（AIM+），TSQ Altis三重四极杆适用于复杂生物学样本中低丰度蛋白的分析，可以完成蛋白组学中的相对定量和绝对定量实验，全面提升了蛋白组学中的定量验证能力。此外，基于高分辨Orbitrap的蛋白质组学的发现型研究到基于TSQ Alits的蛋白质组学定量可以实现无缝对接，用于潜在生物标志物的发现、验证和确认。

EMT即上皮间质转化，在此过程中，上皮细胞的极性丧失，迁移和运动能力增强，同时上皮表型丢失而逐渐获得间质表型。伴随表型变化，许多基因的表达发生了改变，上皮表型相关蛋白，如角蛋白、E-钙粘蛋白、紧密连接蛋白-1、闭锁小带蛋白等含量下降，间质表型相关蛋白，如波形蛋白、N-钙粘蛋白、α -平滑肌肌动蛋白、纤维连接蛋白等含量上升，同时一系列转录因子的表达也发生了变化。蛋白表达量的变化多通过Western Blot和免疫荧光及免疫组化的方式来检测，其中Western Blot可以使用组织和细胞实现蛋白的定性和半定量，免疫荧光可以使用细胞爬片检测细胞中蛋白的定位以及定性分析，免疫组化可以使用组织切片检测细胞中蛋白的定位以及定性分析，针对不同的样品类型，可以采用不同方式来检测EMT导致的蛋白表达变化。

本实验使用Thermo ScientificTM Q Exactiv HF 超高分质谱仪测试了超高场Orbitrap在DIA分析方面的性能。实验使用1小时梯度，分析仅500ng上样量的Hela细胞总蛋白裂解液，重复三针。结果显示，三针DIA分别定量到27558、27604、27483种肽段和4067、4080、4073种蛋白。谱图库中95%的蛋白都获得了可靠的DIA解析(Q0.01)，灵敏度极高；峰面积CV值20%的肽段占90.3%，重现性极佳。

人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)检测试剂盒人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)抗原、生物素化的人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)检测试剂盒人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)抗原、生物素化的人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)抗原、生物素化的人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

大豆蛋白仪是一种用于测定大豆及其制品中蛋白质含量的仪器。以下是一般的实验操作步骤，但请注意，具体步骤可能因使用的仪器型号而有所不同。在进行实验之前，请务必查阅你使用的大豆蛋白仪的操作手册以获取详细的指导。大豆蛋白仪检测大豆中蛋白质含量的实验操作步骤：样品制备：将大豆样品磨成粉末，确保样品的均匀性。从样品中取得适当量的代表性样品。确保样品的质量和数量是可测量的。

人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)检测试剂盒人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)抗原、生物素化的人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)检测试剂盒人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)抗原、生物素化的人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

乳铁蛋白是一种具有多种生理活性的天然蛋白质，参与调节免疫功能、抗微生物、调节铁吸收、促进肠道细胞增殖分化等多种生理过程。近日，《GB 5009.299-2024 食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定》的发布，规定了食品中乳铁蛋白的提取与检测方法，纳谱分析紧随国标要求，推出了适用于样品前处理的SelectCore Heparin肝素亲和柱和适用于液相色谱分析的ChromCore 300Ǻ C4-T色谱柱，本文依照国标方法进行验证，结果均符合国标要求，为食品中乳铁蛋白的检测提供有效地整体解决方案。适用范围本方法适用于巴氏杀菌乳、调制乳、含乳饮料、调制乳粉及乳基婴幼儿配方食品中牛乳铁蛋白含量的测定。

人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)检测试剂盒人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)抗原、生物素化的人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)检测试剂盒人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)抗原、生物素化的人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

本文使用岛津在线蛋白酶切高效液相色谱仪Perfinity iDP和LCMS-8060液质联用系统建立了牛奶中A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白定性定量分析方法。首先结合Skyline软件实现A1β和A2β-酪蛋白特征肽段筛选以及MRM能量优化，然后利用在线蛋白酶切高效液相色谱仪Perfinity iDP优化在线酶解和液相条件，从而实现A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白的全自动在线酶切和特征肽段定量分析。两种蛋白的标准曲线相关系数均大于0.99，特征肽段的准确度范围在88.1~114.0%之间。

奶粉中乳铁蛋白的检测方法

“总蛋白归一化”或TPN变得越来越流行，可以避免依赖看家蛋白进行归一化的许多缺点。不易受样品之间蛋白变化的影响，不是观察一种蛋白的强度，而是每条泳道的总灰度值。由于TPN技术消除了许多与信号归一化相关问题，因此发表文章越来越多地要求使用总蛋白信号进行归一化。

本文建立了一种使用岛津三重四极杆液质联用仪检测重组胶原蛋白中氨苄西林抗生素残留的方法。样品经乙腈沉淀蛋白，离心滤过后上机分析。采用外标法定量，在0.05~100 ng/mL范围内，相关系数大于0.9999。三个浓度下保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）分别在0.05~0.15 %和0.97~4.26 %之间。该方法灵敏可靠，氨苄西林定量限为0.05 ng/mL；三个浓度样品加标回收率在95.9~100.4%之间，每个浓度平行处理三次，测试结果的RSD在1.11~4.73%之间；可为重组胶原蛋白中氨苄西林抗生素残留测定提供参考。

关于皮肤的发光，最被人们熟知的是由于使用某些含有荧光剂的化妆品而造成的荧光，其实我们的真皮层中的一些物质，本身就可以发出荧光。为什么正常皮肤会发出荧光呢？这是因为胶原蛋白的存在，胶原蛋白是皮肤组织中的结构性蛋白，其数量和健康关系到外表皱纹的生成与皮肤的老化现象，由于胶原蛋白具有自体荧光，根据胶原蛋白的种类或交联状态的不同，真皮层荧光光谱或强度会发生变化[1]，因此可以根据皮肤的荧光光谱来检验胶原蛋白含量及结构，此检测法更具实时性与非侵入性，目前，市面上一些胶原蛋白产品也用这种方法来判断产品对于改变皮肤状态的功效。

CEM 提出并研发了以特殊氨基酸作为蛋白质表征的iTAGTM的标签技术，iTAGTM的标签技术的核心，是基于用特殊氨基酸作为蛋白质的表征的原理。 iTAGTM的标签技术，直接检测真蛋白质含量，而非总氮含量传统的蛋白测定方法，通过iTAGTM标签技术实现了对真蛋白含量的测定，避免了非蛋白氮添 加物、残留物对于测试结果的影响。使得蛋白测定结果更为科学可信。例如三聚氰胺、尿素、皮革水解蛋白等非法添加物不会造成测定结果虚高。 iTAGTM标签技术是直接测量法，用氨基酸表征蛋白质，根据氨基酸含量反推蛋白质含量，与传统方法有本质的区别。目前凯氏定氮法和杜马斯燃烧定氮法都无法排除非蛋白氮的干扰，无法直接测定真实蛋白质 含量。iTAGTM标签技术彻底超越了用无机氮或单质氮表征蛋白质含量，即凯式定氮法所出现的问题。

美国兰博天津应用研发中心使用氨基酸分析仪，利用牛乳和大豆蛋白质的氨基酸组成含量差异对牛乳中掺入的大豆蛋白进行定性定量检测，弥补了现有方法耗时长检测不灵敏的不足。

人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)检测试剂盒人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)抗原、生物素化的人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)检测试剂盒人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)抗原、生物素化的人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

使用格哈特公司杜马斯燃烧法全自动蛋白质测定仪 杜马森DUMATHERM 检测酸乳清蛋白的蛋白质含量

乳铁蛋白的检测需要用到C4色谱柱，美正生物始终致力于为食品检测实验室的老师们提供完整的解决方案，我们于2024年5月上线了Robussil C4色谱柱，为乳铁蛋白的高效液相检测又提供了一大助力。

动态光散射 （DLS） 是确定蛋白质粒径的标准工具，但该方法不提供浓度信息。AccuSizer® 单颗粒光学计数（SPOS） 系统是测定大于 150 nm 的聚集蛋白大小和浓度（以颗粒/mL 为单位）的理想技术。图 1 显示了对单克隆抗体进行热应激前后的 Nicomp® DLS 结果。蓝色的谱图为应力后结果，显示了高分辨率的多峰结果，包括从~150 nm开始的较大聚集峰。AccuSizer 无法检测低至 10 nm 的单体尺寸，但可以提供指示聚集程度的 150 nm颗粒计数的定量数据。在这项研究中，AccuSizer FX Nano 用于研究各种制剂配方稳定剂如何影响 NIST 标准蛋白的最终聚集状态。同时，AccuSizer 粒子计数器也可用于 USP 亚可见颗粒物测试。1

人本周蛋白(BJP) 检测试剂盒人本周蛋白(BJP) 检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人本周蛋白(BJP) 含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人本周蛋白(BJP) 水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人本周蛋白(BJP) 抗原、生物素化的人本周蛋白(BJP) 抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人本周蛋白(BJP) 呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人抗胰蛋白酶(AT)检测试剂盒人抗胰蛋白酶(AT)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗胰蛋白酶(AT)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗胰蛋白酶(AT)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗胰蛋白酶(AT)抗原、生物素化的人抗胰蛋白酶(AT)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗胰蛋白酶(AT)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)检测试剂盒人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)抗原、生物素化的人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度