AKATA制备型液相色谱蛋白分析仪纯化蛋白步骤很简单的,比较适合初学者。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=113913]AKATA制备型液相色谱蛋白分析仪纯化蛋白步骤[/url]
牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息: 功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。 乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。 优点与特点: 准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。 快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。 适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。 在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。 综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]
不知有谁使用过这个机器,是否能提供DU530核酸/蛋白分析仪使用说明书,谢谢!
请教一下各位:用氨基酸分析仪能检测皮革水解蛋白吗?
牛奶蛋白质分析仪的原理主要基于光学测量技术,特别是光谱分析法。具体地说,它采用红外光谱法来测量牛奶中乳清蛋白和酪蛋白的含量。首先,将牛奶样品制成透明薄片,然后使用近红外光电传感器和光源对其进行扫描。牛奶中的蛋白质对特定波长的红外光有特定的吸收特性,通过测量这些吸收特性,可以分析出牛奶中蛋白质的种类和含量。此外,仪器会将牛奶光谱与事先建立的标准光谱进行比较,通过复杂的算法处理,从而得出各种蛋白质形态的含量。这种比较和计算过程确保了测量结果的准确性和可靠性。总的来说,牛奶蛋白质分析仪通过光学测量和光谱分析技术,能够快速、准确地测定牛奶中蛋白质的含量和种类,为乳制品生产、质量控制和科学研究提供了有力的支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404291701212298_2595_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]
糖尿病是一种慢性病,随着经济生活水平的提高和社会老龄化的加剧,近年来患者人数在全球包括中国逐年递增,目前已严重威胁到国民的健康。对糖尿病的监测也越来越受到国家和人们的重视。作为全球公认的糖尿病检测"金标准",糖化血红蛋白(HbA1c)能够稳定可靠地反映出受检人在检测前90天到120天内的平均血糖水平,不受抽检时间、空腹与否或胰岛素等因素的干扰,经过国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)的技术验证和推广使用,使得糖化血红蛋白检测已成为诊断糖尿病的一种趋势。我们国家也参考国际公认的HPLC-LC-MS/MS方法,已经基本建立了自己的糖化血红蛋白检测一级参考体系。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/10/201510221629_570638_1587_3.jpg糖尿病检测方法以及主流仪器分析使用最先进的流体技术和产品,为您打造最优秀的HbA1c分析仪项目难度以及如何解决各类流路问题糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪市场情况以及前景分析立即报名参与讲座:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1689
http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/09/06/A1378379551.jpg 氨基酸是蛋白质的基础组成单位,通过研究蛋白质中氨基酸的性质和组成来预测蛋白质的结构和功能,蛋白质氨基酸残基组成分析主要是通过氨基酸分析仪来完成的,本文推荐了2个基于氨基酸组成进行蛋白质预测软件。基于氨基酸组成的蛋白质预测软件根据组成蛋白质的20种氨基酸的物理和化学性质可以辨析电泳等实验中的未知蛋白质,也可以分析已知蛋白质的物化性质。ExPASy工具包包涵的程序:AACompIdent:与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同,AACompIdent工具利用未知蛋白的氨基酸组成去确认具有相同组成的已知蛋白。该程序分析时需提交的相关信息包括:蛋白质的氨基酸组成、等电点pI和分子量(如果知道)、正确的物种分类及特别的关键词。此外,用户还需在六种氨基酸“组合”中作出选择,这影响到分析如何进行。例如,某种“组合”会把残基Asp/Asn(D/N)和Gln/Glu(Q/E)组合成 Asx(B)和Glx(Z);或者某种残基会在分析中被完全除去。对数据库中的每一个蛋白序列,算法会对其氨基酸组成与所查询的氨基酸组成的差异打分。由电子邮件返回的结果被组织成三级列表:第一张列表中的蛋白都基于特定的物种分类而不考虑pI和分子量;第二张列表包含了不考虑物种分类、pI和分子量的全体蛋白;第三张列表中的蛋白不但基于特定物种分类,并且将 pI和分子量也考虑在内。虽然计算所得结果各不相同,但零分表明了该序列与提出的组成完全相符。AACompSim:AACompIdent的一个变种,AACompSim提供类似的分析,但与前者以实验所得的氨基酸组成为依据进行搜索不同,后者使用SWISS-PROT中的序列为依据。有报道称,氨基酸组成在物种之间是十分保守的(Cordwell等,1995),并且通过分析氨基酸的组成,研究者能从低于25%序列相似性的蛋白之间发现弱相似性(Hobohm和Sander,1995)。因此,在“传统的”数据库搜索基础上辅以组成分析,能为蛋白质之间关系提供更多见解。PROSEARCH:PROPSEARCH也提供基于氨基酸组成的蛋白质辨识功能。用144种不同的物化性质来分析蛋白质,包括分子量、巨大残基的含量、平均疏水性、平均电荷等,把查询序列的这些属性构成的“查询向量”与SWISS-PROT和PIR中预先计算好的各个已知蛋白质的属性向量进行比较。这个工具能有效的发现同一蛋白质家族的成员。可以通过Web使用这个工具,用户只需输入查询序列本身。分子量搜索(MOWSE)分子量搜索(MolecularWeightSearch,MOWSE)算法利用了通过质谱(MS)技术获得的信息。利用完整蛋白质的分子量及其被特定蛋白酶消化后产物的分子量,一种未知蛋白质能被准确无误地确认,给出由若干实验才能决定的结果。由于未知蛋白无需再全部或部分测序,这一方法显著地减少了实验时间。MOWSE的输入是一个纯文本文件,包含一张实验测定的肽段列表,分子量范围在0.7到4.0Kda之间。计算过程基于在OWL非冗余蛋白质序列库中包含的信息。打分基于在一定分子量范围内蛋白中一个片段分子量出现的次数。输出的结果是得分最佳的30个蛋白的列表,包括它们在OWL中的条目名称、相符肽段序列、和其它统计信息。模拟研究得出在使用5个或更少输入肽段分子量时,准确率为99%。该搜索服务可通过向mowse@daresburg.ac.uk发送电子邮件实现。为获得更多关于查询格式的细节信息,可以相该地址发送电子邮件,并在消息正文中写上“help”这个词。蛋白质氨基酸组成分析用盐酸在110 ℃将蛋白或多肽水解成游离的氨基酸,用氨基酸分析仪测定各氨基酸的含量。采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似,但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。分析效果:从目前已知的氨基酸分析方法比较来看,除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:0.5 pmol;氨基酸分析仪:10 pmol),其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面,都优于其他分析方法。蛋白质氨基酸残基组成分析的主要步骤包括:首先是蛋白被水解为氨基酸,其次是采用离子色谱等方法进行游离的氨基酸含量和组成的分析。总之利用蛋白可以分析氨基酸,利用氨基酸也可以研究蛋白质。
大多数婴儿都是吃奶粉长大的,因为奶粉里面的营养物质是非常多的,能够针对孩子的成长阶段,有不同的奶粉搭配,不同阶段的奶粉里面的营养成分不一样,酪蛋白是婴儿比较需要的一种物质,这种物质能够帮助婴儿分解身体内的蛋白质,促进蛋白质的吸收,那么酪蛋白在奶粉中都有什么作用呢? 一些婴儿的蛋白质分解能力很差,仅为成人的五分之一,因此牛奶中的大分子很难被儿童肠道吸收,这可能会导致蛋白质过敏。蛋白质奶粉的水解意味着首先处理奶粉中的蛋白质,并且通过水解来减少原来的蛋白质分子,这使得对蛋白质过敏的人更容易吸收,因为蛋白质分子减少了,所以身体中的免疫系统不会对它们起作用,也不会出现过敏症状。 酪蛋白具有防止矿物质流失、预防龋齿、预防骨质疏松和佝偻病、治疗缺铁性贫血和镁缺乏性神经炎等多种功能,特别是其促进主要元素(钙、镁)和微量元素(铁、锌、铜、铬、镍、钴、锰、硒)有效吸收的功能特性。一方面,它能有效防止钙在小肠的中性或微碱性环境中沉淀,另一方面,它能让钙在没有VD参与的情况下被肠壁细胞吸收,因此它是最有效的钙吸收促进剂之一。低蛋白膳食(植物蛋白)能抑制黄曲霉毒素诱发癌症,而且,即使癌症已经发生,低蛋白膳食也能显著地遏制癌症病情的恶化。而高蛋白膳食(动物蛋白)则能对黄曲霉毒素诱发癌症起到“推波助澜”的作用。事实上,膳食蛋白质对癌症的影响是非常显著的,只需要调整蛋白质的摄入量,就可以激活或者抑制癌症的发生和发展。
蛋白质分析仪的校准
蛋白分析系统在我们选择蛋白分析工具的时候,通常是根据不同的蛋白来选择不同的分析手段,如凝胶电泳、化学荧光染色、质谱等等。但是目前已经研制出的蛋白分析工具的种类繁多,从这一方面也在一定程度上反映了蛋白分析的复杂性。以下是一些近期推出的蛋白分析系统,希望能帮助您轻松完成研究工作。
把蛋白完全水解成氨基酸,可以在pmol到nmol水平上分离和定量。虽然氨基酸的序列信息已经无法得到,但是组成蛋白的氨基酸种类及含量信息可以得到,利用氨基酸的指纹信息可以鉴定蛋白。
最近在做几个酸性蛋白的CIEF。贝克曼的方法比较适用于中性和偏碱性的蛋白分析,对于酸性蛋白分析效果不太理想。氨水迁移法比较适合酸性蛋白,但是据说很伤柱子,做不了几个样品。讨论一下,有没有人遇到同样的问题,是怎么优化方法的呢?我尝试调整占位剂的配比,暂时也没有得到理想的结果。
维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维定性分析的研究维纶基大豆蛋白纤维是迄今为止我国获得的唯一完全知识产权的纤维发明,在纺织行业得到了快递的发展,广泛的应用,但与维纶基大豆蛋白纤维一样由我国企业自主研发的维纶基牛奶蛋白纤维也申请到专利好几年了,但迟迟没有相关标准的出台,使这一我国自主研发的新型纤维得不到有效利用新型纤维的不断推出,为我们提供了更多的纤维原料,但同时由于国家标准的相对滞后,给检测工作者带来了很大的难题,下面就目前市场上两种新型蛋白复合纤维给予试验,进行定性分析。主要原理是在观察了维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维显微结构和燃烧性状后,研究两者在常用化学试剂中的溶解性。试验结果表明,维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维在88%甲酸和浓硝酸中都能够部分溶解;在沸腾水浴中,维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维能够完全溶解于75%硫酸和98%硫酸牛奶蛋白纤维是再生蛋白质纤维,是以牛奶为原料经脱水、脱脂、分离、纯化、浓缩制成牛奶酪蛋白,与高分子化合物共混、共聚制成纺丝液,再经湿法纺丝而成;牛奶酪蛋白与聚乙烯醇制得的纤维称为维纶基牛奶蛋白纤维;牛奶酪蛋白与纤维素共聚制得粘胶基牛奶蛋白纤维。牛奶蛋白纤维含有多种氨基酸,具有良好的亲肤性和吸湿导湿性,抗菌防蛀,服用性强,受到消费者的青睐。维纶基牛奶蛋白纤维呈浅黄色,是由牛奶酪蛋白和聚乙烯醇大分子共混、共聚、醛化、揉和、脱泡,湿法纺成的纤维,克服了合成纤维吸湿性差和天然纤维强度低的不足,其比电阻介于天然纤维和合成纤维之间,吸湿性也优于聚乙烯醇纤维,在直接染料、弱酸性染料、活性染料和中性染料中都有良好的上染能力。本文在观察维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维显微结构和燃烧性状后,研究两者在常用化学试剂中的溶解性,为纤维检测提供参数。大豆蛋白纤维属于再生植物蛋白纤维类,是以榨过油的大豆豆粕为原料,利用生物工程技术,提取出豆粕中的球蛋白,通过添加功能性助剂,与腈基、羟基等高聚物接枝、共聚、共混,制成一定浓度的蛋白质纺丝液,改变蛋白质空间结构,经湿法纺丝而成. 其有着羊绒般的柔软手感,蚕丝般的柔和光泽,棉的保暖性和良好的亲肤性等优良性能,还有明显的抑菌功能,被誉为“新世纪的健康舒适纤维”。大豆纤维是以脱去油脂的大豆豆粕作原料,提取植物球蛋白经合成后制成的新型再生植物蛋白纤维,是由我国纺织科技工作者自主开发,并在国际上率先实现了工业化生产的高新技术,也是迄今为止我国获得的唯一完全知识产权的纤维发明。1 试验1. 1试验材料、仪器和试剂纤维细度成分显微分析仪,万分之一电子天平;SHA-C水浴振荡器;鼓风恒温烘箱; 索氏萃取器;酒精灯;具塞三角瓶若干。甲酸(88%);硫酸(75%);浓硫酸(98%);浓硝酸;1MOL/L次氯酸钠溶液;石油醚(馏程为40℃~60℃)。1.2试验方法显微结构试验:用纤维细度成分显微分析仪观察纤维的显微结构。 以下试验维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维同一方法分别做一次燃烧性状试验:点燃酒精灯,用镊子夹取10mg左右纤维束,徐徐靠近火焰,观察试样对热的反应情况。将纤维移入火焰,观察纤维的燃烧情况;然后离开火焰,观察纤维的燃烧情况,并用鼻子闻试样燃烧刚熄灭的气味。最后,待试样熄灭冷却,观察残留物灰分的状态。预处理:取纤维5g左右,用定量滤纸包好,置于索氏萃取器中,用石油醚萃取1h,每小时至少循环6次,待试样中的石油醚挥发后,把试样浸入冷水中浸泡1h,再在(65±5)℃的水中浸泡1h,浸泡过程中时时搅拌。水(mL)与试样(g)之比为100:1。然后抽吸脱水,晾干。溶解性试验:准确称取试样1g置于具塞三角瓶中,加入100mL化学试剂,在搅拌条件下观察不同温度下纤维和试剂随时间的变化情况。待一定时间后,洗涤,抽吸排液,烘干。2 试验结果2.1显微结构在显微镜下观察维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维的横截面呈腰圆形或哑铃形,纵向有沟槽,两种纤维在显微镜下几乎无差别,无法区分这两种纤维。2.2燃烧性状维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维靠近火焰时现象都是熔融并卷曲;进入火焰,熔融、卷曲并燃烧;离开火焰,燃烧,有时会自然熄灭。燃烧过程中散发出蛋白质燃烧时所特有的臭味。纤维燃烧的一端形成黑褐色硬块。两种纤维在燃烧情况下,火焰颜色,气味几乎无差别,无法区分这两种纤维。2.3溶解性取维纶基牛奶蛋白纤维与和维纶基大豆蛋白纤维分别置于88%甲酸、75%硫酸、浓硫酸、浓硝酸和1MOL/L次氯酸钠溶液中进行溶解性试验, 品名/溶液88%甲酸[/ali
大家好,氨基酸分析仪与蛋白质测序仪有主要区别在什么地方呢?目前实验室需要进行氨基酸的测序分析,究竟买一台蛋白质测序仪好呢,还是氨基酸分析仪好呢?价格大概有多少呢?这些仪器有没有国产的呢 QQ:2392795357
[font=宋体][font=宋体]在生物科学领域,[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification][b]蛋白质纯化[/b][/url]是一个至关重要的过程,它有助于获取单一、高纯度的蛋白质,以便进行结构和功能分析。在这个过程中,二硫苏糖醇([/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体])作为一种常用的还原剂,扮演着不可或缺的角色。本文将详细探讨[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]在蛋白纯化中的重要作用。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一、[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]的作用机制[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]是一种小分子化合物,具有很强的还原能力。其主要作用是还原蛋白质中的二硫键。在蛋白质中,二硫键的形成对于维持蛋白质的高级结构和功能至关重要。然而,在进行蛋白质纯化时,这些二硫键有时会成为障碍,影响蛋白质的分离和纯化。此时,[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]就派上了用场。通过与二硫键反应,[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]能够将其还原为巯基,从而打破原有的二硫键,降低蛋白质的聚合倾向,使其更容易进行后续的纯化步骤。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]二、[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]在蛋白纯化中的应用[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]打破二硫键:在许多蛋白质中,二硫键的形成维持了蛋白质的高级结构。在纯化过程中,为了更好地分离和纯化蛋白质,需要打破这些二硫键。[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]的引入可以有效地实现这一目标。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]防止蛋白质聚合:某些条件下,蛋白质可能会发生聚合,这会影响纯化的效果。[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]可以通过还原二硫键,降低蛋白质的聚合倾向,从而提高纯化的效率和效果。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]辅助蛋白质的分离和纯化:在某些情况下,蛋白质的电荷性质会因为二硫键的存在而受到影响,这会影响到蛋白质在电泳或离子交换等分离技术中的行为。此时,[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]可以改变蛋白质的电荷性质,使其更容易被分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]三、使用[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]时的注意事项[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]虽然[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]在蛋白纯化中具有广泛的应用,但使用时仍需谨慎。首先,[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]具有一定的还原性,可能会影响某些实验的准确性或导致非特异性反应。因此,在使用[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]处理蛋白质样品时,应充分考虑其对实验的影响。其次,[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]的处理时间、浓度等条件需要进行优化,以避免对目标蛋白造成不必要的修饰或破坏。最后,处理过的蛋白质样品应及时进行下一步分析或保存,以避免重新形成二硫键或发生其他变化。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、总结[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]总的来说,[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]在蛋白纯化中起到了重要的作用,它能够还原二硫键、打破蛋白质的高级结构、降低蛋白质的聚合倾向等。然而,使用[/font][font=Calibri]DTT[/font][font=宋体]时也需要注意其对实验的影响和可能带来的问题。未来随着研究的深入和技术的发展,我们期待更加高效、准确的蛋白纯化方法出现,为生物科学领域的研究提供更多可能性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白纯化详情可以关注义翘神州![/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]
主管部门说:我们要保证食品的营养,所以要规定方便面里的蛋白质含量;生产厂家说:我们的“高端”方便面用的是低蛋白的面粉,蛋白含量的规定阻碍了“高端”产品的发展;消费者说:方便面里的蛋白含量比牛奶还高?黑心厂家会不会往里加三聚氰胺?那么,方便面里到底应该含有多少蛋白质呢?
1 设备凯氏定氮蒸馏仪消化炉2 原理试样在催化剂存在下用硫酸消解,反应产物用碱中和后蒸馏。释放出的氨被硼酸溶液吸收,吸收液用硫酸溶液滴定,测定氮含量并计算粗蛋白质含量。3 实验步骤蛋白质的测定常用凯氏定氮法进行检测。凯氏定氮法主要包括试样的消煮、氨的蒸馏、滴定三个环节。本实验主要研究试样的消煮对蛋白质的检测结果的影响。4 消煮时间和温度对检测结果的影响采用温度分别420℃和350℃,时间分别为2h、3h、4h的消化条件,对鱼粉(高蛋白质含量)、豆粕(中蛋白质含量)、DDGS(低蛋白质含量)三种样品进行检测分析。详细如表1和表2。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512162213_578369_2721667_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512162213_578370_2721667_3.png 4.1 消煮时间对蛋白质的检测结果的影响从表1和表2中可以明显看出,相同消煮温度下,样品的消煮效果随着消煮时间的延长而提高。4.2 消煮温度对蛋白质的检测结果的影响从表1和表2中可以明显看出,相同消煮时间下,样品的消煮效果随着消煮温度的提高而提高。5 结论蛋白质的检测需要足够的消煮时间和温度。建议按420℃消煮4h。6 参考文献 GBT6432-1994 饲料中粗蛋白测定方法
蛋白柱常见问题和日常维护在蛋白分离时选择了合适的蛋白柱,有时往往不能成功地完成蛋白的分离,同一根蛋白分离柱在不同的使用者手中可能会有不同的柱寿命及分离效果,正确的使用蛋白柱和正确的日常维护是保证成功分离蛋白及延长柱寿命的关键。不论使用什么类型的蛋白柱,首先必须对其填料的性能有基本了解。如该柱适用什么样的溶剂,什么类型的样品,流速及耐压范围等,GAT提供的各种类型的蛋白柱,在柱箱内均有详细的说明书,使用柱子前,务必要仔细阅读,以保证正确使用这些柱子。下面就蛋白分离中常出现的问题进行讨论。①样品不保留:在用离子交换柱分离蛋白时,流动相的pH值对保留值影响很大,当选用阴离子型蛋白分析柱时,如#####若流动相的pH值小于蛋白的pI值时,蛋白分子阳离子状态,则在柱上没有保留,只有当流动相的pH值大于蛋白的pI值时,蛋白分子呈阴离子,才能在阴离子交换柱上得到保留。另外,当流动相或样品中的离子强度过大时,也会造成蛋白在离子交换柱上不保留。此外,上样量过大,亦会使蛋白样品保留变弱,一般样品的上样量不应超过该填料结合蛋白量的20%,在选用GPC柱时,应特别注意填料的孔径及相应的可分离蛋白的分子量范围,若蛋白的分子量超过填料的孔径极限则蛋白样品也不保留。在用反相色谱分离蛋白时,流动相中有机溶剂的比例会影响蛋白的保留值。有机溶剂比例过高,会使蛋白的样品与填料的作用变弱而过早地洗脱。流动相中的三氟乙酸可作为离子对试剂和pH调节剂,有利于蛋白的保留。②回收率(质量回收率)低蛋白质量回收率低往往发生在使用凝胶过滤柱时,特别是以硅胶为基质的凝胶蛋白分析柱时,尽管硅醇基已经过双醇封口,但残留的硅醇基仍会与蛋白的碱性基团发生非GFC效应,造成回收率低,分离度差等现象,解决这一现象的方法是在流动相(通常是水)中加入0。M-0。3M盐作为改性剂以减少这种非GFC效应。③柱压过高 柱压过高的原因在于柱入口的堵塞及填料间的缝隙的减小或堵死,这些原因有:非硅胶填料的颗粒膨胀(主要是由于使用过高比例有机溶剂引起);来自样品,流动相的颗粒堵塞、细菌生长,流速过高等,为防止柱压过高,应使用符合要求的流动相组成。样品,流动相使用前严格过滤。为了保存时防止细菌生长。以硅胶为基质的柱子可使用20%有机水溶液保存。其它柱子在保存液中加入0。02%的叠氨钠。④性能改变蛋白柱在使用一段时间后,其性能会有所改变(保留值变化,柱效下降等)。原因之一是被分离样品中细胞碎片,类脂,酸等的污染,对聚合物基质的柱子可用0。1-1。0N NaOH溶液清洗,注意以硅胶为基质的柱子(如Protein Pak凝胶柱)不能用NaOH清洗。(转贴[em07] )
[font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] 黄原胶是一种水溶性生物多糖,是由野油菜黄单胞菌发酵产生的,其流变学特性良好,能快速溶解于水中,且能与多种盐溶液混溶,耐盐性好,对 热现酸碱有很好的稳定性,这些特性使其在食品中具有改善质构和口感、提高稳定性、增加持水性、延长保质期等特殊作用。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]蛋白棒是一类富含蛋白质的食物棒,所含有的植物蛋白和动物蛋白协同互补,可以有效地补充优质蛋白,对缓解疲劳和恢复体力具有一定的效果。 [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]在食品物性学中,通常用质构来表示食品的组织、结构、口感及滋味等。质构剖面分析法 (Textureprofileanalysis,TPA)又被称为2次咀嚼测试,它是人们模仿食品质地的感官评价而开发的力学测试。物性分析仪能够对样品进行TPA测试,主要是通过模仿口腔咀嚼动作来客观地反映食品的硬度、弹性、黏着性、凝聚性和咀嚼性等质构特性,同时通过所连接的微机可以得到样品的质构特征曲线。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]本文通过在蛋白棒中添加不同量的黄原胶,并采用物性分析仪对蛋白棒进行质构分析,研究黄原胶对蛋白棒质构的影响,为蛋白棒的加工生产提供 技术支持。 [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][b][size=20px][color=#403f3f] 蛋白棒的感官评定结果[/color][/size][size=20px][color=#403f3f][/color][/size][/b][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]感官评定是通过视觉、嗅觉、触觉、味觉和听觉等对食 品的品质状况作出客观的评价。本文主要对蛋白棒样品的色泽、外观形态、硬度、咀嚼性、黏性和凝聚性等感官指标进行考察。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]蛋白棒的感官评定结果见表2。 [/color][/size][/font][img=,690,132]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051209138271_7059_6545943_3.png!w690x132.jpg[/img] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]由表2可知,添加黄原胶的蛋白棒总分均高于空白对照组,其中添加0.3%黄原胶组的蛋白棒得分最高。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]与空白对照相比,添加黄原胶后蛋白棒的色泽、外观形态得分无明显差异,通过肉眼观察,蛋白棒表面均为巧克力涂层,涂层薄厚一致且完整;产品块型完整,表面光滑,边缘整齐,无裂缝,无缺角,无明显变形。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]与空白对照相比,添加黄原胶后蛋白棒的硬度、凝聚性和黏性都得到了改善;空白对照组蛋白棒最硬,添加黄原胶能够降低蛋白棒的硬度,添加0.3%黄原胶组的蛋白棒硬度适中;添加黄原胶能够提高蛋白棒的凝聚性,添加0.3%黄原胶组的蛋白棒外观形态保持最完整,最不易形成碎渣;添加0.4%黄原胶组的蛋白棒稍微有些黏牙,而添加0.2%黄原胶组 和0.3%黄原胶组的蛋白棒口感好,黏性得到了适当降低。 [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]综合感官评价各指标得分,发现添加0.3%的黄原胶对改善蛋白棒质构的效果最好。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][b][size=20px][color=#403f3f]蛋白棒的质构特征曲线[/color][/size][size=20px][color=#403f3f][/color][/size][/b][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]Szczesniak等人在食品质构方面做了许多研究,首次提出食品质构可以通过仪器进行测定,并采用TPA反映食品质构的机械特性,把食品质构的机械特性按照进食的先后分为一次特性和二次特性。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]其中一次特性包括硬度、脆性、凝聚性、弹性和黏着性,日常描述的词汇包括柔软、坚硬、酥、脆、弹性、发黏等,这些是人们对食品人口的最初感觉。利用物性分析仪检测探头2次下压得到蛋白棒的TPA质构特征曲线。 [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]蛋白棒的 TPA质构特征曲线见图1。 [img=,412,244]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051209498284_4974_6545943_3.png!w412x244.jpg[/img] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]由图1可知,第1次压缩周期中,蛋白棒的TPA质构特征曲线较为平滑,无 明显的脆性峰,这说明蛋白棒质构特性均匀。随着探头的下压,作用力逐渐增大,样品表现出对外力的抵抗,其所能达到的最大受力峰值即为蛋白棒的硬度。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]弹性是样品经过第1次压缩以后能够再恢复的程度,用2次压缩周期中的时间比表示,试验结果显示压缩后蛋白棒的结构没有发生严重的破损,但恢复程度降低。黏着性是探头上行所受到的阻力,用第1次压缩曲线达到零点到第2次压缩曲线开始之间的曲线下方的负面积表示。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]凝聚性是TPA曲线中第2次压缩面积与第1次压缩面积之比。咀嚼性是硬度、凝聚性及弹性三者的乘积。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][b][size=20px][color=#403f3f] 黄原胶对蛋白棒硬度的影响 [/color][/size][size=20px][color=#403f3f][/color][/size][/b][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]硬度是使蛋白棒达到一定变形所需的力,是TPA测试时第1次压缩样品时的压力峰值,它是评价蛋白棒质构的主要指标。黄原胶对蛋白棒硬度的影响见图2。 [img=,495,270]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051210545802_8378_6545943_3.png!w495x270.jpg[/img] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]由图2可知,制作蛋白棒时添加黄原胶能够导致蛋白棒硬度的降低,且黄原胶添加量越多,蛋白棒硬度越低。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]结合感官评定发现,添加0.3%黄原胶组的蛋白棒硬度适中、口感好。黄原胶具有良好的亲水性和稳定性,添加到蛋白棒中可以使蛋白棒内部形成弱凝胶结构,并保持良好的持水能力,从而降低蛋白棒样品的硬度,改善口感。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][b][size=20px][color=#403f3f]黄原胶对蛋白棒黏着性的影响[/color][/size][/b][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]在TPA质构特征曲线中,黏着性可以用第1次压缩曲线达到零点到第2次压缩曲线开始之间的曲线下方的负面积来表示,其对应的数值是负的,负号代表方向,纵坐标表示的是黏着性数值的大小。黄原胶对蛋白棒黏着性的影响见图3。 [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f][img=,500,277]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051211273863_8551_6545943_3.png!w500x277.jpg[/img] 由图3可知,添加黄原胶能引起蛋白棒黏着性的明显降低。对照空白样品,添加0.3%黄原胶对蛋 白棒黏着性的降低作用最大,反映在咀嚼这种蛋白棒时,蛋白棒对舌头、牙齿、上腭等接触面黏着性小。黏着性即通常说的黏牙感觉,结合感官评定发现,添加黄原胶能够适当降低蛋白棒的黏着性,对蛋白棒的品质是有利的。 [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][b][size=20px][color=#403f3f]黄原胶对蛋白棒凝聚性的影响[/color][/size][size=20px][color=#403f3f][/color][/size][/b][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [img=,510,267]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051211539079_8255_6545943_3.png!w510x267.jpg[/img] 由图4可知,与空白组样品相比,添加黄原胶能使蛋白棒的凝聚性提高,不同黄原胶添加量的蛋白棒凝聚值由大到小依次为0.3%黄原胶组、0.2%黄原胶组、0.4%黄原胶组。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]凝聚值最大的是添加0.3%黄原胶组的蛋白棒,反映了该种蛋白棒的内部组织结合力最大,咀嚼该种蛋白棒时蛋白棒抵抗受损并紧密连接,使蛋白棒保持完整性最强。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]对照感官评定发现,添加黄原胶后蛋白棒能保持良好的胶体形态且不易形成碎渣,品尝时口感相对比较细腻。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f][/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][b][size=20px][color=#403f3f]黄原胶对蛋白棒弹性的影响[/color][/size][size=20px][color=#403f3f][/color][/size][/b][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]弹性是样品经过第1次压缩后能够再恢复的程度。黄原胶对蛋白棒弹性的影响见图5。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f][img=,499,273]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051212215083_2140_6545943_3.png!w499x273.jpg[/img] 由图5可知,与空白组样品相比,黄原胶对蛋白棒的弹性有一定的增加作用,黄原胶的添加可以改善蛋白棒的结构,这可能是由于黄原胶分子量的充分伸展,与蛋白棒中的大豆蛋白、乳清蛋白等结合发生了黏合作用,使蛋白棒形成柔软且有弹性的胶体形态。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]但是分别添加0.2%,0.3%和0.4%黄原胶的3组蛋白棒样品的弹性变化不大,这说明黄原胶添加量的多少对蛋白棒弹性的影响不大。 [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f] [/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][b][size=20px][color=#403f3f] 黄原胶对蛋白棒咀嚼性的影响 [/color][/size][size=20px][color=#403f3f][/color][/size][/b][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]咀嚼性反映了蛋白棒对咀嚼的持续抵抗性。黄原胶对蛋白棒咀嚼性的影 响见图6。 [/color][/size][/font] [img=,511,269]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051212444931_8053_6545943_3.png!w511x269.jpg[/img] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]由图6可知,黄原胶的添加能够引起蛋白棒咀嚼性的降低,且黄原胶添加量越多,蛋白棒咀嚼性越低,越容易被嚼碎,这与蛋白棒硬度的变化规律 是一致的。明添加黄原胶可以减少蛋白棒咀嚼时所需要做的功。[/color][/size][/font] [font=宋体, SimSun][size=15px][color=#403f3f]添加0.3%黄原胶对应的蛋白棒咀嚼性适中,结合感官评定发现,添加0.3%黄原胶含量的蛋白棒口感较好。 [/color][/size][/font]
牛奶蛋白质分析仪是一种专业的检测设备,主要用于对牛奶中的蛋白质进行快速、准确地分析。该仪器在乳制品行业中发挥着重要的作用,能够帮助消费者了解牛奶的质量和营养成分,同时也能为乳制品生产企业提供科学的指导,优化生产工艺,提高产品质量。 牛奶蛋白质分析仪的工作原理主要基于光谱分析技术,通过测量牛奶中蛋白质对特定波长光线的吸收来计算蛋白质的含量。该仪器具有操作简便、快速、准确等特点,可广泛应用于各类乳制品的生产、加工、质检等领域。 具体来说,牛奶蛋白质分析仪在乳制品生产线上具有以下应用: 原料奶检测:确保原料乳的质量符合生产要求,通过快速检测原料奶中蛋白质的含量,确保生产过程中的原料质量稳定。 加工过程控制:实时监测加工过程中蛋白质的变化情况,指导生产商及时调整工艺参数,确保产品品质。 产品质量检验:质检部门和乳制品企业可以利用牛奶蛋白质分析仪对市场上的乳制品进行抽检,判断其蛋白质含量是否符合国家标准。这有助于打击假冒伪劣产品,保障消费者的合法权益。 此外,牛奶蛋白质分析仪还可以检测牛奶中的其他营养成分,如脂肪、糖等,从而全面评估牛奶的营养价值。通过使用这种仪器,乳制品企业可以及时发现并解决生产过程中的问题,提高产品的竞争力,并保障食品安全。 总之,牛奶蛋白质分析仪是乳制品行业中不可或缺的重要检测工具,其在保障产品质量和消费者健康方面发挥着重要作用。如需更多信息,可以访问牛奶蛋白质分析仪生产厂商官网或咨询乳制品行业专家。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404291700285525_1260_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]
采用CEX分析蛋白电荷异质性,与主峰的相对保留时间差十分钟左右的是酸性或碱性峰么?通常情况下是不是酸性峰中性峰碱性峰三者挨着?谢谢
求购 质谱分析的蛋白标准品,MALDI-TOF-MS上用的。 分子量在400--30000da 的或者接近这个质量范围的,如有请联系我。直接给我这个留言就可以,谢谢!
生物质谱在糖蛋白结构分析中的应用项目完成人:桑志红 蔡 耘项目完成单位:国家生物医学分析中心 随着人们对糖蛋白参与生命活动机理的日益深入了解,对天然糖蛋白及重组糖蛋白类药物的分析越来越受到重视。重组糖蛋白类药物的质量控制更是直接关系到药物的疗效及至人类的健康。九十年代以来,随着带有反射功能的基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和纳升电喷雾串联质谱(nano-ESI-Q-TOF)等具有软电离方式的现代质谱 技术的发展,质谱以其高灵敏度和强有力的分析混合物的能力,提供了生物大分子的分子量、序列、一级结构信息以及结构转换、修饰等方面的信息,使糖基化分析有了重要的进展。 通常研究糖蛋白的方法是把蛋白链上的寡糖切下来,分别研究蛋白部分和寡糖部分的结构,因此无法研究与两部分共同相关的结构问题,也不能区分不同糖基化位点上切下来的寡糖。自90年代初,国外有人开始用质谱法研究糖蛋白的结构,同时描述了各个位点的不均一性。我们用建立的现代生物质谱技术研究糖蛋白一级结构的方法,将其应用与基因重组糖蛋白的结构分析。为糖蛋白结构分析及基因重组糖蛋白类药物的质量控制提供新的手段。一、 生物质谱研究糖蛋白结构方法的建立实验所用仪器为:1.德国BRUKER 公司的REFLEXIII型基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱仪,N2激光器,波长337nm,线性飞行距离150cm,加速电压2kv。2.英国Micromass 公司Q-TOF型电喷雾串联质谱仪。源温80°C,气体流速40L/h,枪头电压650V,检测频率2.4S,氩气碰撞池压力6*10-5mbar。1. 基质的选择,在MALDI-TOF-MS分析中,基质起着相当重要的作用。不同的基质对不同类的物质响应不同,a-氰基-4-羟基肉桂酸用于测定糖蛋白核糖核酸酶B效果相对较好。2. 糖蛋白分子量的测定,糖蛋白核糖核酸酶B由124个氨基酸组成,在34位Asn处连有一个高甘露糖型N-糖链。由于糖链的微不均一性,与普通蛋白质及核酸不同,其分子离子峰在MALDI-TOF-MS 质谱图上表现为一簇峰,各峰之间约相差一个糖基。正是由于这种微不均一性,使得其分子离子峰变宽,灵敏度降低。糖链分子量越大,峰越宽,灵敏度越低,所以一般只有糖链较短,蛋白的质量不太大的糖蛋白才能测定其平均分子量。用MALDI-TOF可直接测定糖蛋白核糖核酸酶B的平均分子量为 15208.6Da。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103211511_284179_1604317_3.jpg3. 糖含量的测定,采用O聚糖酶及内糖苷键酶F分别作用于核糖核酸酶 B,只有内糖苷键酶F能够是其分子量发生变化,表明核糖核酸酶B分子中不存在O-连接糖链存在着N-连接糖链。内糖苷键酶F切断N-糖链五糖核心最内侧的GlcNAc-GlcNAc糖苷键,得到含一个GlcNAc的肽链,减去GlcNAc,可以计算出准确的肽链分子量T=13695.6,与糖蛋白平均分子量之差为糖链的平均分子量G=1513.4,平均糖含量为:(糖链大小/糖蛋白分子量)×100%=9.95%。4. 糖基化位点的确定,研究糖基化类型及糖基化位点的策略:采用蛋白酶酶解与糖苷内切酶酶解相结合的方法,通过酶切前后含糖肽片的位移,结合网上数据库检索,可以确定糖基化类型和糖基化位点。以不同类型的糖苷内切酶作用于糖蛋白(N-糖苷键酶或O-糖苷键酶),在MALDITOF-MS 上观察其质量的变化,可以直接确定糖蛋白中是否含有响应类型的糖链,这是我们确定糖蛋白中糖苷键类型的基础。我们采用先将核糖核酸酶B还原烷基化,加Glu-C酶切,产物再用内糖苷肩酶F酶切,可观察到含糖肽段出现位移,将核糖核酸酶B的肽质量指纹图进行数据库检索,证实发生位移的肽段中含有N-糖链特异连接位点,由此确定34位Asn为糖基化位点。另外我们采用内糖苷键酶F及肽-N-聚糖酶F两种酶进行差位酶切法对含糖肽段进行验证,两种酶酶切后分子离子峰的差值除以GlcNAc的质量,结果就是N-糖基化位点的个数5. 质谱测定氨基酸序列, 我们对核糖核酸酶B肽质量指纹谱中的含糖肽段进行了串联质谱测定,首先在一级质谱图中选择离子4972.23,在串联质谱的碰撞活化室以氩气与其碰撞产生碎片,从碎片的质荷比推算出此肽片中的一段氨基酸序列,检索结果为核糖核酸酶B,从而判断其理论序列是否一致。6. 糖链结构的研究,凝集素对糖肽的亲和提取,进一步分析糖肽序列及糖链结构的关键是含糖肽段的提取。核糖核酸酶B中糖链为高甘露糖型,我们选用对其有特异性吸附的伴刀豆球蛋白对其进行提取利用这种简捷的亲和质谱的方法,对糖肽段进行了分析。建立了亲和质谱分析糖肽类物质的方法,为今后糖肽序列分析及糖链结构分析奠定了基础。二、基因重组糖蛋白人促红细胞生成素(rhEPO)的结构分析。 利用以上建立的方法,我们对样品重组人促红细胞生成素进行了分析,断定此样品为非完全糖基化,样品中只存在N-连接的糖链,无O-糖链。应用酶切法用肽-N-聚糖酶处理后,得到两个含糖肽段,进行数据库检索,测得38位及83位为N-糖基化位点,与文献报道相符,结果可靠。因此,该项课
哪家正在使用三菱公司生产的全氮分析仪?我们检测原淀粉的蛋白,在使用过程中遇到一些问题。请和我联系。xiaohong_wang@cornchina.com
维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维定性分析的方法研究 维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维都是由聚乙烯醇和蛋白共混制得,所以化学性质及其相似,一直以来由于维纶基牛奶蛋白纤维没有相关的检测方法,检测机构对维纶基牛奶蛋白纤维出具的检测报告都是维纶基大豆蛋白纤维 维纶基大豆蛋白纤维的成分定量分析方法是先用次氯酸钠溶液溶解掉蛋白质,然后用盐酸溶解聚乙烯醇,同样维纶基牛奶蛋白纤维也是可以用这种方法进行溶解,下面看看常规的检测方法能不能分析出这两种纤维1.维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维,其纤维成分定性的基本方法:①.显微镜法: 在显微镜下观察维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维的横截面呈腰圆形或哑铃形,纵向有沟槽;②.燃烧: 维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维靠近火焰时现象都是熔融并卷曲;进入火焰,熔融、卷曲并燃烧;离开火焰,燃烧,有时会自然熄灭。燃烧过程中散发出蛋白质燃烧时所特有的臭味;③.溶解法:共同的维纶基,加上都是蛋白质,化学性质非常接近,在75%硫酸、浓硫酸、浓硝酸和0.1MOL/L次氯酸钠溶液中,溶解现象和状态都是一样的,都无法将两者定性2.个人通过研究和分析认为,只有通过两者氨基酸的组分不同进行定性,从而确定纤维牛奶中氨基酸的组成表”取自《乳与乳制品的生理功能特征》一书。“大豆蛋白质的氨基酸组成表”取自《大豆制品工艺学》一书。大豆蛋白质的氨基酸组成可以参考“全酸沉淀蛋白”的氨基酸组成,做为比较的依据。因为大豆蛋白纤维使用的是大豆分离蛋白,即是酸沉蛋白。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121130_463904_2154459_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121130_463905_2154459_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121130_463907_2154459_3.jpg3.维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维的通过测其氨基酸的组成不同,可以定性出大豆蛋白与牛奶蛋白,如果是大豆蛋白复合纤维,然后用GB/T2910.101-2009大豆蛋白复合纤维和其他纤维的混合物-定量化学分析进行测试。完全溶解,则为维纶基大豆蛋白纤维,如果是维纶基牛奶蛋白纤维,也可以用此方法进行定量法定性,相关详细步鄹如下:3.1 试验3.1.1试验材料、仪器和试剂万分之一电子天平;SHA-B水浴振荡器;鼓风恒温烘箱;索氏萃取器,离心机,具塞三角瓶,1MOL/L次氯酸钠溶液,氢氧化钠,20%盐酸溶液等3.1.2目前行业内认为定性牛奶蛋白纤维的最好方法:牛奶蛋白纤维在2.5%NaOH 溶液下,100℃恒温加热30分钟,即可出现牛奶蛋白特有的现象。状态:在整个溶解的过程下,纤维体积膨胀渐呈冻胶状,颜色会从本色逐渐变成深红色,然后再有深红色褪色至浅黄色。此方法经试验,并不是所有的牛奶蛋白复合纤维都出现此特有现象,有时不是很明显,只能作为判断的一种辅助方法,不能作为定性的标准方法。3.1.3在显微镜下观察牛奶蛋白复合纤维或大豆蛋白复合纤维,能确定是其中的一种,然后用1MOL/L次氯酸钠溶液,常温下振荡溶解30分钟,此时,蛋白全部溶解,剩余纤维抽滤,冲洗干净,取少量纤维在显微镜下查看,初步判定为聚乙烯醇,然后燃烧,根据味道和燃烧现象,确定其为维纶基蛋白纤维3.2需要确定蛋白质纤维为何种纤维,经初步试验分析,常规方法无法准确定性,下面是维纶基牛奶纤维的专利拥有者在相关国家检测机构取得的检测报告http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121131_463909_2154459_3.jpg以上报告可能确定是维纶和牛奶蛋白复合,但其报告检测依据个人不是特别认同,也咨询过相关人员,没有给予明确答复,检测的具体方法没有明确,国家并没有发布相关的检测标准,不能作为判断纤维的依据,所以目前情况下仍然不能使该纤维大面积推广使用。3.3个人认为,只有通过两者氨基酸的组分不同进
褚福亮,王福生, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室 北京市 100039项目负责人 王福生, 100039 ,北京市丰台路26号, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室. fswang@public.bta.net.cn电话:010-66933332 传真:010-63831870收稿日期 2002-08-15 接受日期 2002-09-03摘要新近广泛应用蛋白质芯片(ProteinChipâ Array)系统成功鉴定出了一些重要疾病(如肿瘤和危害性较大的传染病)新的、特异性的生物标记(biomarkers),后者不仅在生物医学的基础方面具有重要的科学价值,而且在临床疾病的诊断、治疗和预防发挥重要的指导作用,显示了良好的发展前景.本文就表面增强的激光解析电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.此外,我们就蛋白质谱分析技术在病毒性肝炎、肝硬化和肝癌等一系列肝病方面的应用策略和前景进行了分析.褚福亮,王福生. 蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用.世界华人消化杂志 2002 10(12):1431-14350 引言人类基因组计划已经进入后基因组时代-即功能基因组时代[1],作为基因功能的直接体现者-蛋白质,及其之间的相互作用越来越引起基础和临床科学家们的关注[2-6] .因为要彻底了解生命的本质,只把基因测出来还是不够的,还必须要了解其在生物生长、发育、衰老和整个生命过程中的功能、不同蛋白质之间的相互作用以及他们与疾病发生、发展和转化的规律[7-14] .正因为如此,有关上述问题的蛋白质组学研究成了今天生命科学最重要的焦点之一[15] .为了阐明蛋白质在上述生命现象中的作用和相关机制,人们设计了许多新的方法技术,如:二维电泳、质谱分析、微距阵列、酵母双杂交和噬菌体展示等,这些方法在一些特定的情况下,虽然显示出了他们各自不同的优点,但是同样也存在着较大的局限性,难以开展大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质等方面的分析,因而设计更全面、同时研究多种蛋白质相互作用的技术,在功能基因组和蛋白组学的研究中建立一个更有效的技术平台,成为本领域中优先关注的问题[16] .近来,美国Ciphergen(赛弗吉)公司研制的ProteinChipâ Array的仪器,并建立了一种新的蛋白质飞行质谱-表面增强的激光解析离子化-飞行时间-质谱(surface-enhanced laser desorption/inionation-time of flight-mass spectra, SELDI-TOF-MS),已取得可喜的进展,筛选出了许多与疾病相关的新型生物标志,不仅为临床疾病的诊断和治疗等提供了新的选择,而且在基础科学、新药研制和疾病预防等方面具有广泛的应用前景[16-18] .本文就SELDI-TOF-MS相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.1 ProteinChipâ Array系统和SELDI-TOF-MS的特点1.1 蛋白质芯片系统的组成和原理 蛋白质芯片系统由三部分组成:蛋白质芯片、芯片阅读器和芯片软件.供研究用芯片上有6-10芯池,不同的芯片表面上的化学物质不同,芯片表面分为两大类:一类为化学类表面,包括经典的色谱分析表面,如:结合普通蛋白质的正相表面,用于反相捕获的疏水表面,阴阳离子交换表面和捕获金属结合蛋白的静态金属亲合捕获表面;另一类称为生物类,特定的蛋白质共价结合于预先活化的表面阵列,可以用来研究传统的抗体一抗原反应,DNA和蛋白质作用,受体、配体作用和其他的一些分子之间的相互作用[19] . 根据检测目的不同,可以选用不同的芯片,或者自己设计芯片.将样本和对照点到芯池上以后,经过一段时间的结合反应,用缓冲液或水洗去一些不结合的非特异分子,再加上能量吸收分子(energy absorbing molelule,EAM)溶液,使样本固定在芯片表面.当溶液干燥后,一个含有分析物和大量能量吸收分子“晶体”就形成了.能量吸收分子对于电离来说非常重要.经过以上步骤,就可经把芯片放到芯片阅读器中进行质谱分析. 在阅读器的固定激光束下,芯片上、下移动,使样本上每一个特定点都被“读”到.激光束的每一次闪光释放的能量都聚集在该区一个非常小的点上(focused laser beam,聚焦激光束).这样,每个区都含有丰富的,可寻址(addressable)的位置.蛋白质芯片处理软件精确控制激光寻读过程.当样本受到激发,就开始电离和解除吸附.不同质量的带电离子在电场中飞行的时间长短不同,计算检测到的不同时间,就可以得出质量电荷比,把他输入电脑,形成图像[19].Ball et al [20]采用一种称为人工神经网络(artifical neural network,ANN)的算法处理出现的成千上万的峰,鉴定出三个分子量为13 454、13 457和14 278的生物标记分子,使疾病预测率达到97.1 %.1.2 ProteinChipâ Array芯片和SELDI-TOF-MS的特点 新型蛋白芯片与以往的蛋白芯片不同之处:SELDI-TOF-MS,他是在MALDI(matrix-assisted laser desorption/inionation)[21,22]基础上,改进后实行表面增强的飞行质谱.SELDI-TOF-MS优于MALDI-TOF表现为他不会破坏蛋白质,或使样本与可溶的基质共结晶来产生质谱信号.对SELDI-TOF来说,可以直接将血清、尿液、组织抽取物等不需处理直接点样检测[40] 由于一部分非特异结合的分析物被洗去,因而出现的质峰非常一致,有利于后期分析[23,24] . 与二维电泳相比:二维电泳分析蛋白质的分子量在30 KDa以上时电泳图谱较清楚,对在组织抽提物中占很大比例的低丰度的蛋白质不能被检出;其次,二维电泳胶上的蛋白质斑点很大一部分包含一种以上的蛋白质;而且,二维电泳耗时长,工作量大,对象染色转移等技术要求高,不能完全实现自动化.而SELDI-TOF在200 Da-500 KDa区间都可以给出很好的质谱,对一个样本的分析在几十分钟内就可以完成[19],处理的信息量远远大于二维电泳;对于低丰度物质,即使浓度仅attomole(10-18)的分子,只要与表面探针结合,就可以检测到,这也是二维电泳所不具备的[24,25] . 对于微距阵蛋白芯片来说,需要一种不破坏折叠的蛋白质构象的固定技术,再与另外的蛋白质反应,经检测莹光来观察蛋白质之间的作用[26] .而基于SELDI-TOF-MS的ProteinChip分析蛋白质不需溶解、不需染色、廉价、针对性强. 因而蛋白质芯片仪具有以下优势:(1)可直接使用粗样本,如:血清、尿液、细胞抽提物等[27] .(2)使大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质成为可能;(3)他不仅可发现一种蛋白质或生物标记分子,而且还可以发现不同的多种方式的组合蛋白质谱,可能与某种疾病有关[28] (4)推动基因组学发展,验证基因组学方面的变化,基于蛋白质特点发现新的基因.可以推测疾病状态下,基因启动何以与正常状态下不同,受到那些因素的影响,从而跟踪基因的变化[2,14,15] . 其存在的问题:对于不同的样本,根据检测的目标采取或者设计几种芯片,理论上可以把所有的相同性质蛋白质捕获,但是实际上仍有少量的分子没与表面探针结合.使用SELDI-TOF-MS,仅能给出蛋白质的分子量,不能给出C端、N端的序列,也没法知道蛋白质的构型,因此需要将蛋白质充分纯化后,用蛋白酶消化芯片上的蛋白质,分析肽段,再用生物信息学方法鉴定蛋白质序列[18,24] .另外,在国内,该芯片费用较高,分析质谱需要大量后续工作支持.
RT 咨询 迪马科技的蛋白分析柱子http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09501.gif最近想做蛋白的液相http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09502.gif能否推荐一款柱子呢保护柱 也说一下吧http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09505.gif我们是重组的胶原蛋白 蛋白的分子量在9万7左右 http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif想要柱子的范围在20万内 官人能不能推荐一款柱子 http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif
我的硕士研究课题是乳制品中非乳蛋白的检测,主要针对于研究植物水解蛋白和动物水解蛋白,想请教有谁做过皮革,羽毛等动物水解蛋白的蛋白质成分分析,这方面的文献很少,希望得到大家的帮忙!正在焦急中[em30] [em06] [em53]
8.0,加入后需静置20min),进行超声破碎,超声条件:400W,工作5秒,间隔5秒,重复一定次数,(根据我们的仪器找出一个比较好的工作条件)。直至菌体溶液变清澈为止,大约花费时间 。2.2.2 取少量经超声破碎后的菌液,10000rpm离心10分钟,分别对上清和沉淀进行检测,并用全菌作为阳性对照,检测菌体破碎程度及目标条带占总蛋白的含量。注意事项:(1) 超声破碎具体条件可根据实验情况而定,要掌握好功率和每次超声时间,降低蛋白被降解的可能。(2) 功率大时,每次超声时间可缩短,不能让温度升高,应保持在4度左右,超声时保持冰浴。(3)菌体破碎后总蛋白浓度的测定可用Bradford 法或者紫外吸收法。(4)可通过SDS-PAGE 电泳观察菌体破碎程度及目标条带占总蛋白的含量。
求分析小分子蛋白(分子量5000左右)用的常用内标。谢谢各位先![em61]