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电泳设备

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电泳设备相关的论坛

  • 【求助】 毛细管电泳仪PA800Plus的设备结构

    我们要做毛细管电泳仪PA800Plus的再确认,主要是电压测定、气压测定和温度测定方面的项目。设备都选好了。现在的问题是不太清楚设备结构。咨询过计量人员,应该是要拆开设备的部件来做,但从哪里拆开,是否有专门的测定口之类的还不清楚。想问问有没有相关的设备资料。

  • 【求助】 毛细管电泳仪PA800Plus的设备结构

    我们要做毛细管电泳仪PA800Plus的再确认,目前已经确定的项目包括电压测定、气压测定、温度测定等,相关设备都选好了。现在的问题是不清楚该设备的结构。之前咨询过计量人员,做上面的项目应该是要拆仪器的,但现在不清楚怎么拆开,或者说是否有专门用于计量的窗口。求该设备的设备资料

  • 【资料】电泳知识介绍(二)凝胶电泳仪器的发展

    凝胶电泳仪器的发展 电泳系统虽然只是作为生化分离分析所必需的常规仪器,但它的进展与其他大型仪器设备一样,同样是非常迅速的。从1809年的第一次电泳实验所用的雏型装置到1946年第一台商品自由移界电泳系统问世经历了一个多世纪。但此后的50多年电泳仪器的发展却极其迅猛,特别是电泳介质由流动相改为凝胶后,各种各样的凝胶电泳装置便层出不穷以适应各种研究工作和生产实践的需要。

  • 电泳涂装业发展及应用

    我的资料中心可免积分下载  电泳涂装技术研究起于一百多年前,基于人们对金属表面防腐防锈要求的不断提高而相关表面处理工艺技术又不能较好地解决这种需求的压力下,而被逐渐研制开发。直到60年代才由George Brewer博士及福特汽车公司研制开发成功阳极电泳漆。其最早应用于福特汽车公司的涂装线,随着阳极电泳漆生产使用,日渐暴露其漆膜中包含有金属离子造成抗蚀性差的缺陷,因而,高抗蚀性的阴极电泳漆于七十年代被开发成功,并被人们等认可并大力推广应用。之后,电泳技术发展日新月异,产品品种由环氧型树脂型发展到丙烯酸型及聚氨脂型。产品的保护品种也由汽车行业引申到自行车、摩托车及家电、轻工饰品行业,如:空调、彩电、洗衣机、摩托车、眼镜、锁具、灯具及饰品、发夹、领带夹及各个金属行业以及铝材表面防锈行业。二、电泳涂漆之优势三、电泳漆之工作原理 四、不同类型之电泳漆之工艺路线及原因上挂→预清洗→脱脂→热水洗→冷水洗→酸洗→水洗→表调→磷化→水洗→水洗→纯水洗→纯水洗→电泳→回收→回收→纯水洗→纯水洗→进烘箱→下挂 五、电泳漆设备要求及性能指标六、电泳漆之维护及故障处理

  • 【讨论】把我现在使用电泳的设备和试剂说一下,大家讨论讨论

    由于实验室内仪器众多,也做些电泳,只是会做而已,远远谈不上精通。实验室的电泳是常见的蛋白质凝胶电泳,用于定性分析,看工厂的产品酶是否有杂蛋白。1.使用的染色剂:考马斯亮蓝coomassie Brilliant Blue R,是Sigma的试剂配制而成,溶剂是乙醇和冰醋酸,在室温下可以放置2个月。2.使用的脱色剂:就是乙醇和冰醋酸按照一定的比例混合的溶液。在室温下可以放置2个月。3.胶和running buffer都是买的现成的,自己不用配置,用的都是invitrogen公司的。4.需要做的就是把样品稀释到合适的浓度,然后在85摄氏度的条件下震荡2分钟,冷却后加到胶的泳道即可。5.使用的仪器是:invitrogen X-cell Surelock Mini Cell6.上机条件:电压125V,时间1.5小时7.走完后,把配置好的考马斯亮蓝加热到60摄氏度,放入用清水冲洗过的胶,震荡染色10分钟,过后再用洗脱剂洗脱,时间大概要40分钟。8.标准的谱带用的是Sigma的。上面大概说了说,不知道大家的情况如何?可以共同讨论。

  • 【求助】电泳槽缓冲液容量

    想请教一下各位老师,关于电泳实验里面,电泳槽的缓冲液容量对实验有什么影响没,容量大小对设备的评估有什么意义么?非常感谢。[em09508]

  • 电泳涂装业发展及应用[综述]

    电泳涂装业发展及应用[em29]我的资料中心可免积分下载[em29]  电泳涂装技术研究起于一百多年前,基于人们对金属表面防腐防锈要求的不断提高而相关表面处理工艺技术又不能较好地解决这种需求的压力下,而被逐渐研制开发。直到60年代才由George Brewer博士及福特汽车公司研制开发成功阳极电泳漆。其最早应用于福特汽车公司的涂装线,随着阳极电泳漆生产使用,日渐暴露其漆膜中包含有金属离子造成抗蚀性差的缺陷,因而,高抗蚀性的阴极电泳漆于七十年代被开发成功,并被人们等认可并大力推广应用。之后,电泳技术发展日新月异,产品品种由环氧型树脂型发展到丙烯酸型及聚氨脂型。产品的保护品种也由汽车行业引申到自行车、摩托车及家电、轻工饰品行业,如:空调、彩电、洗衣机、摩托车、眼镜、锁具、灯具及饰品、发夹、领带夹及各个金属行业以及铝材表面防锈行业。二、电泳涂漆之优势三、电泳漆之工作原理 四、不同类型之电泳漆之工艺路线及原因上挂→预清洗→脱脂→热水洗→冷水洗→酸洗→水洗→表调→磷化→水洗→水洗→纯水洗→纯水洗→电泳→回收→回收→纯水洗→纯水洗→进烘箱→下挂 五、电泳漆设备要求及性能指标六、电泳漆之维护及故障处理 [em29]

  • 【原创大赛】浅谈毛细管电泳

    http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1009.gifhttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1007.gif 实验室搬新楼了,原来做QTL定位开发标记的同学面临一个新的挑战,由于聚丙烯酰胺凝胶电泳污染较严重,而且这种污染不可控制,所以新的实验楼规定,一律不准装用使用聚丙酰胺凝胶电泳设备。 上有政策,下有对策。于是,老师们狠下心斥“巨资”买了几台新型仪器-毛细管凝胶电泳仪,替代PAGE。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09503.gif 大家也是厌烦了标记室的脏乱,对于新的仪器充满了期待。这不,新的仪器刚到,都开始围观了。在仪器工程师讲解使用方法时,纷纷拿出笔和本子全程跟踪记录学习,热情高涨。。。按理来说,接下来就是如火如荼的进行试验了。如果真是这样的话我也就不必大肆渲染大家买仪器是的激动心情了。事实是这样的,经过半个月的试用,旧楼的标记室又热闹了起来。反观新仪器,反而是冷清的在那里歇着,无人问津。这是怎么回事呢,可以从毛细管电泳和PAGE的优缺点来分析。1 优点。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif 实验环境整洁干净,整个实验需要的就只有一台电泳设备和一台电脑,占地面积小,实验过程中也不需要把板子什么的从一个槽子拿出换到另一个槽子,实验只在一台电泳仪上就可以完成;实验操作简单,PAGE需要先做洗板子,擦板子,做板子,上样预热,点样,下板子,染色,显色多个步骤,但是毛细管电泳其他试剂都是先配好可以多次使用的,电泳时只需看一下胶和缓冲液的亮量,准备好样品即可,通过电脑设置运行即可,中途不需要其他操作,十分方便;实验污染毒害小,实验过程中不需要用到TEMED,过硫酸铵,硅化剂,甲醛等有害物质,因此污染少很多,对实验操作人员带来了很好的保护;带型清晰,因为毛细管电泳时紫外显色,电脑读取数据,因此在电泳时可以实时观测跑胶情况,条带可以通过调节背景和条带亮度分析等来判别。2 缺点。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09508.gif 费时间,一次只能跑一板样,一天下来只能跑10板左右;读带费时,有些标记背景条带多,读带时好不区分主带和杂带;维护复杂,毛细管管径很小,对样品浓度,PH等都有要求,每周需要清洗维护,在维护方面比PAGE室要更花心思;对标记要求高,有些标记不好,杂带多的话不适用于该电泳仪;成本高,试剂都要向公司购买,成本相对PAGE高一些。 凡事都有两面性。总的来说,毛细管的发明方便了我们的实验操作,但是关于他的适用性还需要进一步改进。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

  • 电泳图片光密度分析原理与方法

    无论是DNA电泳图片还是RNA电泳图片,或者是蛋白的凝胶电泳图片包括Western blot膜、或者是化学发光膜图片,在图像分析的角度来看,都是同样的一种条带光密度分析的问题。分析电泳条带有专门的一类图像分析软件。常见的是Bandscan, Quantity One, 由各个凝胶电泳成像系统厂商自己编制的软件就更多了。我喜欢用的是Labworks, 是UVP公司生产的凝胶电泳成像系统上配用的拍摄与分析软件,实际上就是传说中大名鼎鼎的gel-pro。这个软件可以看作是Image-pro plus应用在电泳条带分析上的专业版。所以用惯了IPP后对gel-pro就会感觉很熟悉。很快就能学会使用。现在UVP已经不使用labworks了,另弄了一个visionworks软件,用起来就是没gel-pro舒服。实际上所有的电泳条带分析软件在分析原理与功能上都没什么差别。只是软件界面与操作程序上各有不同。所以,了解了条带的分析原理后也就能自己学会各种软件的使用了。分析电泳条带也是从拍摄电泳照片开始的。用平时玩的数码相机拍摄的电泳条带一般不能用来进行定量的分析。而必须使用专门的拍摄设备。大家一般称它为“凝胶成像系统”。它集中了观察,拍摄与分析凝胶的所有功能。一个凝胶成像系统包括了三个部分,暗箱,相机与电脑上的控制分析程序。让我们从使用成像系统的操作方法中来了解如何正确地拍摄与分析凝胶吧。 0 http://img.dxycdn.com/upload/2009/05/02/72294527.jpg

  • 电泳仪分类

    根据电泳仪原理、电泳仪功能、电泳仪的使用方法、电泳仪的用途不同可以为:琼脂糖凝胶电泳、毛细管电泳、凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜电泳、高效毛细管电泳、琼脂糖电泳、SDS-PAGE凝胶电泳、蛋白质电泳、血清蛋白电泳、dna电泳、血红蛋白电泳、蛋白质双向电泳、免疫电泳、等电聚焦电泳、单细胞凝胶电泳、蛋白质凝胶电泳、质粒电泳、对流免疫电泳、变性电泳等。电泳仪分类:1、毛细管电泳仪:其主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的弹性石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器,前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。 2、常规电泳仪:其组成部件为可调稳压稳流电源,垂直电泳槽,水平电泳槽,电极连接线,支持体【非凝胶性支持体区带电泳(支持体有:①淀粉②纤维素粉③玻璃粉,硅胶等) ;凝胶支持体区带电泳支持体有:①淀粉液②聚丙烯酰胺凝胶③琼脂(糖)凝胶】;陶瓷板,抽水泵,输水管,冰水曹等部件组成。3、其他电泳仪:Tiselius或微量电泳、显微电泳、等电点聚焦电泳技术、等速电泳技术、密度梯度电泳等。是一种非支持体的电泳仪也称为自由电泳法的发展并不迅速,因为其电泳仪构造复杂、体积庞大,操作要求严格,价格昂贵等很少使用。毛细管电泳仪、凝胶电泳仪、垂直电泳仪、微电泳仪、高压电泳仪、水平电泳仪、高效毛细管电泳仪、双向电泳仪、bio rad 电泳仪、脉冲场电泳仪、伯乐电泳仪、北京六一电泳仪上海巴玖均可提供!

  • 【资料】电泳知识介绍(三)电泳槽

    电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分,其系统的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据电泳的原理,凝胶都是放在两个缓冲腔之间,电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之问的接触可以是直接的液体接触,也可以间接通过凝胶条或滤纸条。管状凝胶电泳和垂直板状电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场,但在装置设计上有一些困难,如液体泄漏,电安全和操作麻烦等问题。水平板状电泳槽大多通过间接方式,用滤纸桥搭接以及最近使用缓冲液制作的凝胶条和滤纸条搭接,即半干技术,后种方式使装置简化,操作也大大方便。

  • 电泳微流控芯片:生物分析的里程碑

    电泳微流控芯片是一种结合了电泳和微流控技术的创新型生物分析工具。该技术整合了微流体学的优势,通过微小尺度的通道、电场和高度灵活的流动控制,实现了对生物分子的高效分离、检测和分析。[align=center][img=图片]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/uepic/434f44d0-8ac9-452a-bfa1-fd7840c0c1cc.jpg[/img][/align][b]——技术原理——[/b]电泳原理:在电解质溶液中,位于电场中的带电离子在电场力的作用下,以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象。电泳微流控芯片技术可以分为两种主要类型:毛细管电泳和芯片上电泳。毛细管电泳利用单根毛细管作为分离通道,而芯片上电泳则将电泳所需的缓冲液、电极等组件集成到一个微流控芯片上,实现设备的微小化和自动化。这种集成化设计使得电泳微流控芯片具有高通量、高效率、低样品消耗和快速分离等优点。电泳微流控芯片的原理主要基于电场驱动下的带电粒子在微尺度流道中的迁移与分离。具体来说,电泳微流控芯片利用微加工技术在芯片上构建微米级的流道,这些流道用于容纳电泳缓冲液。当在芯片两端施加电场时,缓冲液中的带电粒子(如DNA、蛋白质等)会根据其电荷和电场方向发生迁移。不同带电粒子由于其电荷、质量和形状的差异,在电场中的迁移速度会有所不同,从而实现粒子的分离。[b]——应用领域——[/b]电泳微流控芯片的应用领域非常广泛,涵盖了多个重要的科学和工业领域。以下是其主要的应用领域:1、生物医学:在生物医学领域,电泳微流控芯片技术主要用于DNA片段、多肽、蛋白质等生物分子的分离和分析。它被认为是后基因时代中最有希望攻克蛋白质研究、基因临床诊断等科学难题的分离分析手段之一。此外,电泳微流控芯片技术也被用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应,可以大大简化操作步骤,显著提高检测效率。2、新药物合成与筛选:电泳微流控芯片技术在新药研发过程中发挥着重要作用。它可以用于药物分子的分离和筛选,从而加速新药的研发进程。3、食品和商品检验:电泳微流控芯片技术可以用于食品中添加剂、污染物等的检测和分析,确保食品的安全和合规性。同时,它也可以用于商品的质量控制和检验。4、环境监测:在环境监测领域,电泳微流控芯片技术可用于水、土壤、空气等环境样本中有害物质的检测和分析,为环境保护和污染治理提供科学依据。5、刑事科学:电泳微流控芯片在法医学中具有重要的应用,特别是在DNA分离、检测和分析方面,对于个体身份的鉴定和犯罪现场的物证分析具有重要意义。6、其他科学领域:此外,电泳微流控芯片技术还广泛应用于军事科学、航天科学等其他重要科学领域,为这些领域的研究和发展提供了强大的技术支持。[b]——优势——[/b]1、高分辨率和快速分离:微流控芯片中的通道尺寸小,因此具有较高的分辨率和更快的分离速度。这使得它能够在短时间内准确地分离和识别出各种生物分子,如DNA、蛋白质等。2、低样品和试剂消耗:由于微流控芯片中的流体通道尺寸微小,所需的样品和试剂量大大减少。这既降低了分析成本,也减少了生物样本的浪费,对于珍贵的生物样本尤其重要。3、高通量分析能力:微流控芯片可以并行处理多个样品,实现高通量分析。这大大提高了分析效率,使得在短时间内能够处理更多的样本,适用于大规模的生物分子分析任务。4、易于集成和自动化:电泳微流控芯片可以与其他技术(如质谱联用)实现联合分析,进一步提高分析的准确性和灵敏度。此外,微流控芯片技术易于实现自动化,减少了人为操作的误差,提高了分析的准确性和可靠性。5、微型化和便携性:电泳微流控芯片采用微型化设计,使得整个分析系统更加紧凑和便携。这使得它可以在现场进行实时分析,无需复杂的实验室设备,为现场检测和即时分析提供了便利。[b]保利微芯公司简介[/b]保利微芯科技有限公司隶属中国保利集团公司,由保利置业集团有限公司投资,设计研发微流控生物芯片,公司具备技术先进的微流控生物芯片设计制造能力,已形成创新性的、技术领先的微流控芯片整体解决方案。可以承接国内外芯片设计、应用公司的微流控芯片生产订单,为即时诊断(POCT)、基因测序、环境保护、食品安全和科学研究等应用领域的客户提供有核心竞争力的高性价比芯片产品。[来源:保利微芯][align=right][/align]

  • DNA的快速电泳

    SuperBuffer(100X)简介主要用途DNA的快速电泳,取代传统的TAE和TBE。产品介绍SuperBuffer是一种革命性的超快高分辨核酸电泳液,由于其产热低,故可以以高达20-25V/cm的电压电泳,并且分辨率比传统电泳液更高。该产品能彻底替代TAE、TBE等传统DNA电泳液。主要特点1:快速工作电压可高达20-25v/cm,比TAE和TBE的5-8V/cm(见分子克隆手册)高2-4倍,电泳时间只有使用TAE或TBE时的1/4。分辨率要求不高的定性检测(如PCR检测和酶切检测)可以在十分钟内完成。2:高分辨快速电泳防止了DNA的扩散,用0.5%的胶得到的电泳分辨率与用2-3%的胶(TAE或TBE电泳)得到的相当(效果图见www.tiandz.com网站相关内容)。3.不影响后续的杂交,回收和连接等反应。4.节约成本,0.5-1%的胶适合于分离大小在100bp-50kb之间的DNA,不需要高浓度胶。本产品能反复使用数次。5.销售价格与市售国产TBE更便宜,产品有粉剂、预配液两种规格供客户选择。物理特性无色液体,4度或常温保存二:SuperBuffer(100X)的使用SuperBuffer(100X)必须在使用前用水稀释100倍,其后的使用方法跟TAE或TBE的使用完全一样。如果使用高电压则有以下建议。1.琼脂糖胶浓度分离从100bp到50kb的DNA片段均可使用0.5-1%的胶并能得到较高的分辩率。使用SuperBuffer电泳时由于可以高压电泳,胶浓度似乎越低电泳效果越好,也许是因为电泳速度越快,小片段DNA的弥散现象越轻,速度对小片段DNA弥散的影响超过了胶浓度对它的影响,故不必靠高浓度的胶来提高分辨率。使用高浓度的胶反而会使电泳时间加长,得不偿失。2.EB染色如果使用20-25V/cm电压,最好不要把EB加入上样液中,否则EB很容易在高压下与DNA分离。建议在倒胶前将EB直接加入琼脂糖中, EB的最佳终浓度为0.4 -0.5μg /ml。原理上SuperBuffer与EB以外的其它核酸染料(如SYBR Green)兼容,但天泽基因暂时没有进行相关实验,有待用户自己实验验证。3.样品的离子强度SuperBuffer比TAE和TBE对样品离子强度更敏感。如果待测样品(如酶切产物,PCR产物)的离子强度与DNA分子量对照(如DNA ladder)的离子强度不同,则离子强度低的泳动稍快,估算得到的DNA分子大小可能稍有误差。如果需要准确估计,建议电泳使分子量标准和待测样品的盐浓度一样(在分子量标准中加酶切或PCR缓冲液)。4:电泳液用量与电压的关系 如果电泳槽的容量在100-200ml左右的(迷你型电泳,电极距离10cm左右),可以使用200-250V电压进行电泳。电压如果超过20V/cm,则电泳时间不宜超过三十分钟 (在此电泳条件下,电泳三十分钟足够将0.1-5kb的DNA分开)。如果电泳槽的容量为600ml或更大,22.5V/cm(按正负两极距离)电泳一小时以上一般没有任何问题。5:SuperBuffer的重复使用SuperBuffer缓冲液最多可重复使用4-5次左右(如果电泳槽的容量为600ml的话);重复使用前最好将其搅拌混匀并放置片刻,以恢复其缓冲能力。随着重复使用次数增加,相同电压下DNA电泳速度会稍微加快,但分辨率变化不大。6:电流电压降低现象若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象,请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限,如果有上限设置,需将其调高使之与电泳电压匹配。如果原因不明,请与仪器生产厂家联系。部分电泳仪器做最高使用电压为200V。7:与RNA变性胶, 碱变性胶,脉冲电泳和PAGE的兼容性天泽基因没有进行相关兼容性实验。

  • 【转帖】安捷伦收购电泳仪制造商Lab901

    安捷伦收购电泳仪制造商Lab901美国时间2011年2月28日,安捷伦科技宣布收购领先的电泳设备及耗材供应商Lab901公司。财务及收购其他条款尚未披露。Lab901公司总部位于英国爱丁堡,开发和生产用于DNA、RNA和蛋白质研究的电泳产品,其主要产品是TapeStation台式电泳仪和ScreenTape及以塑料为基础的消耗品和相关试剂。【详细】

  • DNA的快速电泳

    SuperBuffer(100X)简介主要用途DNA的快速电泳,取代传统的TAE和TBE。产品介绍SuperBuffer是一种革命性的超快高分辨核酸电泳液,由于其产热低,故可以以高达20-25V/cm的电压电泳,并且分辨率比传统电泳液更高。该产品能彻底替代TAE、TBE等传统DNA电泳液。主要特点1:快速工作电压可高达20-25v/cm,比TAE和TBE的5-8V/cm(见分子克隆手册)高2-4倍,电泳时间只有使用TAE或TBE时的1/4。分辨率要求不高的定性检测(如PCR检测和酶切检测)可以在十分钟内完成。2:高分辨快速电泳防止了DNA的扩散,用0.5%的胶得到的电泳分辨率与用2-3%的胶(TAE或TBE电泳)得到的相当(效果图见www.tiandz.com网站相关内容)。3.不影响后续的杂交,回收和连接等反应。4.节约成本,0.5-1%的胶适合于分离大小在100bp-50kb之间的DNA,不需要高浓度胶。本产品能反复使用数次。5.销售价格与市售国产TBE更便宜,产品有粉剂、预配液两种规格供客户选择。物理特性无色液体,4度或常温保存二:SuperBuffer(100X)的使用SuperBuffer(100X)必须在使用前用水稀释100倍,其后的使用方法跟TAE或TBE的使用完全一样。如果使用高电压则有以下建议。1.琼脂糖胶浓度分离从100bp到50kb的DNA片段均可使用0.5-1%的胶并能得到较高的分辩率。使用SuperBuffer电泳时由于可以高压电泳,胶浓度似乎越低电泳效果越好,也许是因为电泳速度越快,小片段DNA的弥散现象越轻,速度对小片段DNA弥散的影响超过了胶浓度对它的影响,故不必靠高浓度的胶来提高分辨率。使用高浓度的胶反而会使电泳时间加长,得不偿失。2.EB染色如果使用20-25V/cm电压,最好不要把EB加入上样液中,否则EB很容易在高压下与DNA分离。建议在倒胶前将EB直接加入琼脂糖中, EB的最佳终浓度为0.4 -0.5μg /ml。原理上SuperBuffer与EB以外的其它核酸染料(如SYBR Green)兼容,但天泽基因暂时没有进行相关实验,有待用户自己实验验证。3.样品的离子强度SuperBuffer比TAE和TBE对样品离子强度更敏感。如果待测样品(如酶切产物,PCR产物)的离子强度与DNA分子量对照(如DNA ladder)的离子强度不同,则离子强度低的泳动稍快,估算得到的DNA分子大小可能稍有误差。如果需要准确估计,建议电泳使分子量标准和待测样品的盐浓度一样(在分子量标准中加酶切或PCR缓冲液)。4:电泳液用量与电压的关系 如果电泳槽的容量在100-200ml左右的(迷你型电泳,电极距离10cm左右),可以使用200-250V电压进行电泳。电压如果超过20V/cm,则电泳时间不宜超过三十分钟 (在此电泳条件下,电泳三十分钟足够将0.1-5kb的DNA分开)。如果电泳槽的容量为600ml或更大,22.5V/cm(按正负两极距离)电泳一小时以上一般没有任何问题。5:SuperBuffer的重复使用SuperBuffer缓冲液最多可重复使用4-5次左右(如果电泳槽的容量为600ml的话);重复使用前最好将其搅拌混匀并放置片刻,以恢复其缓冲能力。随着重复使用次数增加,相同电压下DNA电泳速度会稍微加快,但分辨率变化不大。6:电流电压降低现象若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象,请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限,如果有上限设置,需将其调高使之与电泳电压匹配。如果原因不明,请与仪器生产厂家联系。部分电泳仪器做最高使用电压为200V。7:与RNA变性胶, 碱变性胶,脉冲电泳和PAGE的兼容性天泽基因没有进行相关兼容性实验。

  • DNA的快速电泳

    SuperBuffer(100X)简介主要用途DNA的快速电泳,取代传统的TAE和TBE。产品介绍SuperBuffer是一种革命性的超快高分辨核酸电泳液,由于其产热低,故可以以高达20-25V/cm的电压电泳,并且分辨率比传统电泳液更高。该产品能彻底替代TAE、TBE等传统DNA电泳液。主要特点1:快速工作电压可高达20-25v/cm,比TAE和TBE的5-8V/cm(见分子克隆手册)高2-4倍,电泳时间只有使用TAE或TBE时的1/4。分辨率要求不高的定性检测(如PCR检测和酶切检测)可以在十分钟内完成。2:高分辨快速电泳防止了DNA的扩散,用0.5%的胶得到的电泳分辨率与用2-3%的胶(TAE或TBE电泳)得到的相当(效果图见www.tiandz.com网站相关内容)。3.不影响后续的杂交,回收和连接等反应。4.节约成本,0.5-1%的胶适合于分离大小在100bp-50kb之间的DNA,不需要高浓度胶。本产品能反复使用数次。5.销售价格与市售国产TBE更便宜,产品有粉剂、预配液两种规格供客户选择。物理特性无色液体,4度或常温保存二:SuperBuffer(100X)的使用SuperBuffer(100X)必须在使用前用水稀释100倍,其后的使用方法跟TAE或TBE的使用完全一样。如果使用高电压则有以下建议。1.琼脂糖胶浓度分离从100bp到50kb的DNA片段均可使用0.5-1%的胶并能得到较高的分辩率。使用SuperBuffer电泳时由于可以高压电泳,胶浓度似乎越低电泳效果越好,也许是因为电泳速度越快,小片段DNA的弥散现象越轻,速度对小片段DNA弥散的影响超过了胶浓度对它的影响,故不必靠高浓度的胶来提高分辨率。使用高浓度的胶反而会使电泳时间加长,得不偿失。2.EB染色如果使用20-25V/cm电压,最好不要把EB加入上样液中,否则EB很容易在高压下与DNA分离。建议在倒胶前将EB直接加入琼脂糖中, EB的最佳终浓度为0.4 -0.5μg /ml。原理上SuperBuffer与EB以外的其它核酸染料(如SYBR Green)兼容,但天泽基因暂时没有进行相关实验,有待用户自己实验验证。3.样品的离子强度SuperBuffer比TAE和TBE对样品离子强度更敏感。如果待测样品(如酶切产物,PCR产物)的离子强度与DNA分子量对照(如DNA ladder)的离子强度不同,则离子强度低的泳动稍快,估算得到的DNA分子大小可能稍有误差。如果需要准确估计,建议电泳使分子量标准和待测样品的盐浓度一样(在分子量标准中加酶切或PCR缓冲液)。4:电泳液用量与电压的关系 如果电泳槽的容量在100-200ml左右的(迷你型电泳,电极距离10cm左右),可以使用200-250V电压进行电泳。电压如果超过20V/cm,则电泳时间不宜超过三十分钟 (在此电泳条件下,电泳三十分钟足够将0.1-5kb的DNA分开)。如果电泳槽的容量为600ml或更大,22.5V/cm(按正负两极距离)电泳一小时以上一般没有任何问题。5:SuperBuffer的重复使用SuperBuffer缓冲液最多可重复使用4-5次左右(如果电泳槽的容量为600ml的话);重复使用前最好将其搅拌混匀并放置片刻,以恢复其缓冲能力。随着重复使用次数增加,相同电压下DNA电泳速度会稍微加快,但分辨率变化不大。6:电流电压降低现象若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象,请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限,如果有上限设置,需将其调高使之与电泳电压匹配。如果原因不明,请与仪器生产厂家联系。部分电泳仪器做最高使用电压为200V。7:与RNA变性胶, 碱变性胶,脉冲电泳和PAGE的兼容性天泽基因没有进行相关兼容性实验。

  • 【资料】什么是电泳!

    溶液中带电粒子(离子)在电场中移动的现象。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。1937 年瑞典学者 A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造了移动界面电泳仪 ,分离了马血清白蛋白的3种球蛋白,创建了电泳技术。  在确定的条件下,带电粒子在单位电场强度作用下,单位时间内移动的距离(即迁移率)为常数,是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同,或虽所带电荷相同但荷质比不同,在同一电场中电泳,经一定时间后,由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。  在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。胶体有电泳现象,证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同,它们吸附的离子不同,所以带有不同的电荷。利用电泳可以确定胶体微粒的电性质,向阳极移动的胶粒带负电荷,向阴极移动的胶粒带正电荷。一般来讲,金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子,带正电荷;非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子,带负电荷。因此,在电泳实验中,氢氧化铁胶体微粒向阴极移动,三硫化二砷胶体微粒向阳极移动。利用电泳可以分离带不同电荷的溶胶。例如,陶瓷工业中用的粘土,往往带有氧化铁,要除去氧化铁,可以把粘土和水一起搅拌成悬浮液,由于粘土粒子带负电荷,氧化铁粒子带正电荷,通电后在阳极附近会聚集出很纯净的粘土。工厂除尘也用到电泳。利用电泳还可以检出被分离物,在生化和临床诊断方面发挥重要作用。本世纪40年代末到50年代初相继发展利用支持物进行的电泳,如滤纸电泳,醋酸纤维素膜电泳、琼脂电泳;50年代末又出现淀粉凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳等。目前,电泳技术已广泛应用于分析化学、生物化学、临床化学、药理学、免疫学、微生物学、遗传学等科学中。

  • 【转帖】电泳涂装过程中电泳涂料再循环的重要性

    电泳涂装过程中电泳涂料再循环的重要性 -------------------------------------------------------------------------------- 发布时间: 2007-10-16 11:54:24 浏览次数: 32 电泳涂装过程中电泳涂料再循环的重要性: 一、使电泳涂料均匀分散。防止产生电泳涂膜的色斑现象,进而影响中涂、面涂的涂膜外观质量。 二、去除反应气体。通过给予车身表面适当流速的循环,防止涂膜形成时车身表面生成的反应气体留在涂膜中,使涂膜形成缺陷。 三、防止车身表面的温度上升。 四、迅速去除形成涂膜缺陷的杂质。 资讯来源: 电泳涂装过程中电泳涂料再循环的重要性 发布人: 全球电镀网

  • 【资料】电泳技术

    电泳技术发展简史 1809年俄国物理学家Рейсе首次发现电泳现象。他在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极,加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊,即带负电荷的粘土颗粒向正极移动,这就是电泳现象。 1909年Michaelis首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。他用不同pH的溶液在U形管中测定了转化酶和过氧化氢酶的电泳移动和等电点。 1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius对电泳仪器作了改进,创造了Tiselius电泳仪,建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法,并首次证明了血清是由白蛋白及α、β、γ球蛋白组成的,由于Tiselius在电泳技术方面作出的开拓性贡献而获得了1948年的诺贝尔化学奖。 1948年Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法,对氨基酸的分离进行过研究。 从本世纪50年代起,特别是1950年Durrum用纸电泳进行了各种蛋白质的分离以后,开创了利用各种固体物质(如各种滤纸、醋酸纤维素薄膜、琼脂凝胶、淀粉凝胶等)作为支持介质的区带电泳方法。 1959年Raymond和Weintraub利用人工合成的凝胶作为支持介质,创建了聚丙烯酰胺凝胶电泳,极大地提高了电泳技术的分辨率,开创了近代电泳的新时代。30多年来,聚丙烯酰胺凝胶电泳仍是生物化学和分子生物学中对蛋白质、多肽、核酸等生物大分子使用最普遍,分辨率最高的分析鉴定技术,是检验生化物质的最高纯度:即“电泳纯”(一维电泳一条带或二维电泳一个点)的标准分析鉴定方法,至今仍被人们称为是对生物大分子进行分析鉴定的最后、最准确的手段,即“Last Check”。 由80年代发展起来的新的毛细管电泳技术,是化学和生化分析鉴定技术的重要新发展,己受到人们的充分重视。4.2 电泳的基本原理 电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。 电泳过程必须在一种支持介质中进行。Tiselius等在1937年进行的自由界面电泳没有固定支持介质,所以扩散和对流都比较强,影响分离效果。于是出现了固定支持介质的电泳,样品在固定的介质中进行电泳过程,减少了扩散和对流等干扰作用。最初的支持介质是滤纸和醋酸纤维素膜,目前这些介质在实验室已经应用得较少。在很长一段时间里,小分子物质如氨基酸、多肽、糖等通常用滤纸或纤维素、硅胶薄层平板为介质的电泳进行分离、分析,但目前则一般使用更灵敏的技术如HPLC等来进行分析。这些介质适合于分离小分子物质,操作简单、方便。但对于复杂的生物大分子则分离效果较差。凝胶作为支持介质的引入大大促进了电泳技术的发展,使电泳技术成为分析蛋白质、核酸等生物大分子的重要手段之一。最初使用的凝胶是淀粉凝胶,但目前使用得最多的是琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。蛋白质电泳主要使用聚丙烯酰胺凝胶。 电泳装置主要包括两个部分:电源和电泳槽。电源提供直流电,在电泳槽中产生电场,驱动带电分子的迁移。电泳槽可以分为水平式和垂直式两类。垂直板式电泳是较为常见的一种,常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质的分离。电泳槽中间是夹在一起的两块玻璃板,玻璃板两边由塑料条隔开,在玻璃平板中间制备电泳凝胶,凝胶的大小通常是12cm ? 14 cm,厚度为1mm~2 mm,近年来新研制的电泳槽,胶面更小、更薄,以节省试剂和缩短电泳时间。制胶时在凝胶溶液中放一个塑料梳子,在胶聚合后移去,形成上样品的凹槽。水平式电泳,凝胶铺在水平的玻璃或塑料板上,用一薄层湿滤纸连接凝胶和电泳缓冲液,或将凝胶直接浸入缓冲液中。由于pH值的改变会引起带电分子电荷的改变,进而影响其电泳迁移的速度,所以电泳过程应在适当的缓冲液中进行的,缓冲液可以保持待分离物的带电性质的稳定。

  • DNA的快速电泳

    SuperBuffer(100X)简介主要用途DNA的快速电泳,取代传统的TAE和TBE。产品介绍SuperBuffer是一种革命性的超快高分辨核酸电泳液,由于其产热低,故可以以高达20-25V/cm的电压电泳,并且分辨率比传统电泳液更高。该产品能彻底替代TAE、TBE等传统DNA电泳液。主要特点1:快速工作电压可高达20-25v/cm,比TAE和TBE的5-8V/cm(见分子克隆手册)高2-4倍,电泳时间只有使用TAE或TBE时的1/4。分辨率要求不高的定性检测(如PCR检测和酶切检测)可以在十分钟内完成。2:高分辨快速电泳防止了DNA的扩散,用0.5%的胶得到的电泳分辨率与用2-3%的胶(TAE或TBE电泳)得到的相当(效果图见www.tiandz.com网站相关内容)。3.不影响后续的杂交,回收和连接等反应。4.节约成本,0.5-1%的胶适合于分离大小在100bp-50kb之间的DNA,不需要高浓度胶。本产品能反复使用数次。5.销售价格与市售国产TBE更便宜,产品有粉剂、预配液两种规格供客户选择。物理特性无色液体,4度或常温保存二:SuperBuffer(100X)的使用SuperBuffer(100X)必须在使用前用水稀释100倍,其后的使用方法跟TAE或TBE的使用完全一样。如果使用高电压则有以下建议。1.琼脂糖胶浓度分离从100bp到50kb的DNA片段均可使用0.5-1%的胶并能得到较高的分辩率。使用SuperBuffer电泳时由于可以高压电泳,胶浓度似乎越低电泳效果越好,也许是因为电泳速度越快,小片段DNA的弥散现象越轻,速度对小片段DNA弥散的影响超过了胶浓度对它的影响,故不必靠高浓度的胶来提高分辨率。使用高浓度的胶反而会使电泳时间加长,得不偿失。2.EB染色如果使用20-25V/cm电压,最好不要把EB加入上样液中,否则EB很容易在高压下与DNA分离。建议在倒胶前将EB直接加入琼脂糖中, EB的最佳终浓度为0.4 -0.5μg /ml。原理上SuperBuffer与EB以外的其它核酸染料(如SYBR Green)兼容,但天泽基因暂时没有进行相关实验,有待用户自己实验验证。3.样品的离子强度SuperBuffer比TAE和TBE对样品离子强度更敏感。如果待测样品(如酶切产物,PCR产物)的离子强度与DNA分子量对照(如DNA ladder)的离子强度不同,则离子强度低的泳动稍快,估算得到的DNA分子大小可能稍有误差。如果需要准确估计,建议电泳使分子量标准和待测样品的盐浓度一样(在分子量标准中加酶切或PCR缓冲液)。4:电泳液用量与电压的关系 如果电泳槽的容量在100-200ml左右的(迷你型电泳,电极距离10cm左右),可以使用200-250V电压进行电泳。电压如果超过20V/cm,则电泳时间不宜超过三十分钟 (在此电泳条件下,电泳三十分钟足够将0.1-5kb的DNA分开)。如果电泳槽的容量为600ml或更大,22.5V/cm(按正负两极距离)电泳一小时以上一般没有任何问题。5:SuperBuffer的重复使用SuperBuffer缓冲液最多可重复使用4-5次左右(如果电泳槽的容量为600ml的话);重复使用前最好将其搅拌混匀并放置片刻,以恢复其缓冲能力。随着重复使用次数增加,相同电压下DNA电泳速度会稍微加快,但分辨率变化不大。6:电流电压降低现象若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象,请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限,如果有上限设置,需将其调高使之与电泳电压匹配。如果原因不明,请与仪器生产厂家联系。部分电泳仪器做最高使用电压为200V。7:与RNA变性胶, 碱变性胶,脉冲电泳和PAGE的兼容性天泽基因没有进行相关兼容性实验。

  • 【讨论】电泳能做什么工作?我们借助电泳手段做了什么?

    欢迎大家参与讨论。本期话题——电泳的工作![em44] 电泳能做什么工作?我们借助电泳手段做了什么?电泳分为很多种,有DNA电泳,SDS-PAGE,等点聚焦,免疫电泳,二维电泳,醋酸纤维素膜电泳。。。。等等,大家目前在使用哪种电泳?做的是什么方面的工作?是否能达到预期目的?有什么心得体会?欢迎积极参与讨论,踊跃发言!!(不要灌水哦[em08] )讨论时间:一个月(2007年6月15日至7月15日)本版将根据讨论情况给予奖励![em33]

  • 关于水平电泳.......

    求教,关于用水平电泳仪,跑基因电泳,能否用排枪一次加样.......听说国内有这种梭子...有谁知道啊,谢谢啦。。。

  • 【原创大赛】电泳仪检测方法及注意事项

    1 基本知识1.1 电泳:在分散体系中,荷电颗粒在外加电场的影响下,向电极移动的现象叫电泳。1.2 电泳技术:利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。电泳技术广泛地应用于分析化学、生物化学、临床化学、毒剂学、药理学、免疫学、微生物学、食品化学等各个领域。主要用于蛋白质、核酸、酶,甚至病毒与细胞的研究。由于某些电泳法设备简单,操作方便,具有高分辨率及选择性特点,已成为医学检验中常用的技术。1.3 电泳仪:专为进行电泳提供外加电场的直流电源,其输出电压或电流或功率要求相对稳定或按特定规律变化。2 检测项目及技术指标2.1 输出电压稳定度:≤1.0 %;2.2 输出电流稳定度:≤2.0 %;2.3 输出功率稳定度:≤3.0 %;2.4 时间漂移:≤5.0 %;2.5 输出电压调整率:≤2.0 %;2.6 输出电流调整率:≤3.0 %;2.7 输出功率调整率:≤5.0 %。3检测设备和实验条件3.1 环境条件3.1.1温度:(5~40)℃,每4小时温度变化小于1℃;3.1.2相对湿度:≤80%;3.1.3电源电压:单相交流电220V,允差:±10%;3.1.4电源频率:50Hz,允差:±2%。3.2 检测设备3.2.1交流稳压电源:稳定度不大于1%,输出波形失真不大于5%;3.2.2调压器:(0~250)V;3.2.3交流电压表:0.5级;3.2.4直流电压表:0.5级;3.2.5直流电流表:0.5级3.2.6负载电阻器;3.2.7秒表。4 检测方法仪器检测前需在输出功率为额定值的条件下预热30分钟。4.1 稳定度按图1连接仪器。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191701_669366_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609261030_612125_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610184069_01_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609261030_612126_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610192840_01_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610211790_01_1638093_3.bmp4.2 时间漂移4.2.1输出电压的时间漂移按图1连接电路,输入电压为标称值,输出电压为额定值,输入电流为其额定功率下最大值的50%,连续工作8h,每30min通过直流电压表读取一次输出电压实测值,选择其最大值和最小值按公式6计算。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610221057_01_1638093_3.bmp4.2.2输出电流的时间漂移按图1连接电路,输入电压为标称值,输出电流为额定值,输入电流为其额定功率下最大值的50%,连续工作8h,每30min通过直流电流表读取一次输出电流实测值,选择其最大值和最小值按公式7计算。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610225306_01_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610233404_01_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610242799_01_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610245723_01_1638093_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016092610253111_01_1638093_3.bmp5 检测周期每年检测一次,仪器修理后应重新检测,确保符合使用要求后再使用。并建议每3个月对输出电压、输出电流、输出功率的稳定度进行一次核查。6 仪器使用中的注意事项6.1 电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。  6.2 仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。  6.3由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。  6.4 在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。  6.5 某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。6.6 使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。

  • 做电泳实验需要知道的基础知识

    [b]*样品制备[/b][list][*]样品必须完全溶解于上样缓冲液,否则不能在凝胶中移动。样品太浓可能产生假相。[*]样品缓冲液包含盐类(维持样品)、甘油(增加重量从而使样品下沉至点样孔)、以及示踪染料(以便监测电泳进程)。[*]样品缓冲液可以分装成小部分冻存。[*]缓冲液加到凝胶上之后才能点样。[*]样品缓冲液中的示踪染料可以指示什么时候终止电泳。两种最常用的染料是漠酚蓝(BPB) 与二甲基苯青FF 。[/list][b]*标准分子质量[/b][list][*]标准分子质量应同时电泳,用来检测电泳进展以及分析结果。[*]使用相适应的标准分子质量。[*]胶连同分子质量标准物一起拍照。标上各条带的大小。[*]标准分子质量有带标记的与不带标记的两种。标记可以是荧光、发光体或者放射性元素。如果手边没有带标记的标准物,可以将染色后的胶与事后标记的印迹相比较。[*]在每一块胶的同一泳道点上标准物。把标准物加在第一个泳道,就能知道胶的方向。[*]点上正对照与负对照。[/list][b]*样式[/b][list][*]琼脂糖凝胶一般以水平方向进行电泳,而聚丙烯酰胺凝胶则是以垂直方向进行电泳。潜水型胶是一种水平方向胶,凝胶被浸淹在电泳槽的底部。[*]凝胶可以制成多种大小。测序胶必须制成大胶,但是对于大多筛选与转移用胶,甚至包括双向凝胶来说,只要不是把分子量相近的条带区分割,小型胶就可以了。[*]毛细管电泳利用开口狭小的毛细管来进行DNA 、蛋白质和其他小分子的自动高效分离。分离是与检测分析相连,就像色谱仪器一样。只有专门实验室才有毛细管电泳设备。[/list][b]*凝胶[/b][list][*]聚丙烯酰胺VS 琼脂糖。尽管凝胶电泳可以在滤纸、醋酸纤维素、淀粉或者其他基质上进行,大多数研究者还是只采用聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶。两种都是多孔性胶,像分子筛样起作用(聚丙烯酰胺或者琼脂糖的百分比越高孔越小)。理论上,任何一种都可以用来分离DNA 、RNA 或者蛋白质。但是,聚丙烯酰胺在低百分比浓度时很软,难以用手操作。一般采用高百分比浓度,用以分析蛋白质和小核苷酸。[*]低百分比琼脂糖凝胶相对较硬,易于操作,用来分离目的分子,如DNA和RNA或者巨大的蛋白质和蛋白质复体。[*]胶的浓度必须与片断大小相适应。[*]每次切去胶的同一小角。这样,万一胶掉落、翻转或在转移过程中放置凝胶,都能给定位做参考。[/list][b]*缓冲液[/b][list][*]大多数电泳缓冲液配成高浓度母液,在电泳前稀释。[*]每一种缓冲液在某一电流时会有特定的电压。要认识每一种缓冲液的特性,这样,出错时,就马上可以注意到。[/list][b]*电源[/b][list][*]电源输出有几种模式:稳压(mV) 、稳流(安培,或者简称安)以及稳功率(瓦特,瓦) 。许多型号允许设定程序,在各种模式之间自动转换。这样可以使用最佳的电压( 在电泳过程中可能发生变化)同时不超出容量。[*]不是所有的电源输出装置都相同,所以不能简单地将电泳装置接到任意装置上。要清楚你需要什么电流或者电压,然后找出需要的装置。[*]大多数实验室都有不止一个电源装置用于测序胶(要求高电压)、电泳转移(要求高电流)以及用于琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳(使用大范围的电压)的装置。很少有电源装置能同时满足所有的要求。[*]变性蛋白胶与DNA和RNA胶中的样品会从负极(阴极)移到正极(阳极) 。用红色导线接正极(+),黑色导线接负极(一)。可以用同一个电源输出装置同时进行几块胶的电泳,但是没问过其他人前不要这样做,因为电泳条件会发生变化。[*]设置闹钟提醒自己察看胶。特别是当你要察看低分子质量的分子时,样品很容易跑出胶进入缓冲液中。[*]接触任何东西前,确信电泳装置必须处于断电状态。如果电源没被切断,不要进行任何操作! 电流效应[/list][b]固定[/b][list][*]凝胶是否需要固定取决于用途。需要染色的胶一般需要固定,而用于转移的胶则不需要固定。[/list][b]*干燥[/b][list][*]通过出去胶上的水,胶基质变薄。干燥之后的胶在放射自显影后条带更清晰。[*]在凝胶干燥仪上干燥一块胶不需1小时。凝胶干燥仪可以加热,从而加快干燥过程。[/list][b]*染色[/b][list][*]DNA与RNA的染色可以通过在电泳前把染料加到样品中完成,也可以在事后染色。[*]蛋白质胶在电泳后染色。[/list][b]*记录[/b][list][*]凝胶经溴化乙锭染色后的Polaroid照片与蛋白质凝胶的35 mm照片是最常用的记录方式。[*]数字记录与分析系统最常使用,所有数据可以直接用来演示。[*]各种转移的记录方式取决于体系与实验。例如,放射自显影与化学发光结果可以记录在X射线胶片上,而信号可用光密度计定量。[/list][b]*确定分子质量[/b][list][*]蛋白质的分子质量可用SDS-PAGE确定,而DNA与RNA的分子质量可以由琼脂糖凝胶电泳来确定。对某一分子而言,其分子质量的对数与其Rf(相对迁移距离)存在线性关系。以标准物的迁移距离对其分子质量的对数作图,得到标准曲线,而样品的Rf 值一也就是分子质量一可以由图外推得到。1.制胶,胶的浓度应最适宜分离分子质量相近的分子。同时电泳分子质量标准物,其范围涵盖有目的分子的大致大小。2.跑胶,防止染料前沿跑出胶的边际。3.胶染色,拍照。如果样品是放射性标记的,你可以使用放射性标记的标准物或者把胶与放射自显影胶片相比较。4.测定从样品孔到每一标准条带的距离。计算每个数值的对数,画到常规图纸的Y 轴上。X 轴上是迁移的距离(以厘米计最方便)。对大多数标准物条带应该得到一条盲线。5.把样品迁移距离画到图上。外推标准曲线,确定分子质量。[/list]

  • 毛细管区带电泳和等速电泳有什么区别??

    最近按老板要求写实验方案 查阅文献发现等速电泳的分离效果良好,现在师姐用的是毛细管区带电泳方法,想问如果换成等速电泳需要改变的只是缓冲体系吗??仪器为安捷伦1600毛细管电泳仪,求助各位大神!!

  • 对电泳胶上的斑点做定量,用凝胶成像分析系统好,还是用薄层扫描仪好?

    我在做一个课题,将糖类用琼脂糖凝胶电泳分离后,染色,再定量。现在的问题是到底用凝胶成像系统准确些,还是用薄层扫描仪效果好些?看国外的文献,用的是一种叫做“光密度计”的设备,国内难以找到。我的老板曾去相关实验室访问,他说对方用的是薄层扫描仪。我在想是否凝胶成像系统会更好些。不知各位高人有无好的建议给我?

  • 【原创】第一次用六一电泳仪做蛋白电泳时出的chou

    以前一致用伯乐的蛋白电泳仪,现第一次用六一的工具做了SDS-PAGE胶,上电泳,结果电压加到250v了电流还只有9mA,电泳了很久也没有太大的变化,开始以为是电泳液有问题,重装重配还是这样,终于电泳完了,很丑的结果。为什么会这样呢,在拆胶的时候发现配胶用的胶条还在上面,原来是胶条阻止了电流通过!望大家注意哟!!哈

  • 电泳仪电源使用推荐

    简单的说,电泳仪电源一般可分为两类:精简型和多用型,精简型均为双稳型,而多用型都是三稳(三恒)型。无论有几种稳定功能,电泳仪电源在实际工作时只能稳其中一种参数,至于稳哪一种参数,要看电泳仪电源的设定以及电泳仪的等效负载电阻而定。市面上销售的电泳仪电源,按电压分为高压1500~5000V、中压500~1500V、低压500V以下三种;按电流分为大电流500mA~2000mA、中电流100~500mA、小电流100mA以下三种;按功率分为大功率200~400W、中功率60~200W、小功率60W以下三种。从电压的角度来看,用于核酸(琼脂糖)水平电泳、PCR电泳、DNA回收、印迹转移等实验只需最高电压300V;用于蛋白垂直电泳、种子纯度电泳、醋酸纤维膜电泳等需要使用最高电压600V左右的电泳仪;用于DNA测序(SSR分子标记)、等点聚焦电泳、双向电泳等要求最高电压3000V;用于DNA测序电泳(AFLP分子标记)要求最高电压3800V。电泳仪电源输出的所有参数根据其型号的不同都有一个特定的工作范围,如果实际需要超过这一范围,就应当选择能够满足使用的另外型号的电泳仪电源。因为高、低压电泳仪内部结构特征不同,由于高压电泳仪常附加着多功能,而且高压电泳仪决不能空载运行(容易造成人身伤害内部器件损坏),导致操作上难易程度的不同等。因此,选用合适规格的电泳仪很重要。用户如果需要一台电泳仪电源带几个电泳槽工作时,首先要确定总电流不要超过仪器的最大范围,其次各电泳仪之间是并联的,因而每个电泳仪的电压都是相同的,总电流为各电泳仪电流之和。使用时注意不能超出电泳仪电源额定的范围。

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