显微镜下西达本胺影响HCT-15细胞形态细胞经不同浓度药物处理后形态发生变化(图),随着药物浓度及作用时间的增加,细胞形态变为长 梭形,触角增多,细胞内颗粒物增多,并且可见空泡 同时相邻细胞之间连接疏松,细胞膜折光度下降,细胞数 量也随之减少[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306302200230901_4314_5389809_3.png[/img]
http://gene.bjmu.edu.cn/news/ap1.gif 细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1 光学显微镜和倒置显微镜 （1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。 贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 （2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割 成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342)，HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。 DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml。 结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased），部分染色质出现浓缩状态；Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；Ⅱb期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体(图1)。 3 透射电子显微镜观察 结果评判：凋亡细胞体积变小，细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期（pro-apoptosis nuclei）的细胞核内染色质高度盘绕，出现许多称为气穴现象（cavitations）的空泡结构(图2)；Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；细胞凋亡的晚期，细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体。
高内涵技术优势高内涵细胞成像分析系统由三个部分组成：全自动高速显微成像，全自动图像分析和数据管理。全自动高速显微成像在短时间内生成大量的图像，全自动图像分析从这些图像中提取大量的数据，数据管理软件负责建档存储、注释比较、检索分享这些图像和数据。高内涵，意味着丰富的信息。这些信息包括：单个细胞图像和各项指标，细胞群体的统计分析结果，细胞数量和形态的改变，亚细胞结构的变化，荧光信号随时间的变化，荧光信号空间分布的改变等等。人们往往因为特定的问题去设计实验，在图像中找到答案的同时，其他的信息会带来意外的新发现。
iCELLigence全自动细胞分析仪让您远离MTT实验不断重复还无法得到统一结果的烦恼，让您不再因只看到其中的一个点而损失了其它的细胞生物学信息而无计可施，因为它可以清楚的记录下细胞完整的一生！ 一：全自动细胞分析仪仪器原理 iCELLigence实时无标记全自动细胞分析仪是一款新型的细胞分析平台，具有实时监测、高信息量、无需标记、全自动化、高灵敏度和高准确性等独特优点。该细胞分析仪通过嵌在E-plate板上孔底的微电子感应器阻抗变化去感受细胞的有无以及贴壁、黏附和生长程度的改变。在细胞毒性检测中，可实时、直观的反应细胞增殖、存活、凋亡、形态变化等细胞生物学变化。 二：全自动细胞分析仪仪器优势 iCELLigence全自动细胞分析仪的传感器阻抗技术在细胞分析中具有其独特的优势：它为整个的细胞毒性检测分析过程中提供了全程无损伤的监控，实时、连续显示的数据让您可以更加自信更加清楚的进行细胞毒性检测操作和其它的细胞分析，而不是假定细胞处于合适的处理阶段。一连串实时获取和显示的数据让您处理每一步结果都可以通过机理来预测，同时也可以结合全自动细胞分析仪实时的读数来决定传统终点细胞毒性检测分析的最佳时间点。只需几个简单的操作步骤您就可以获得高信息量的、直观的、准确的结果，就可以让您的细胞实验变得更加省时高效。 三：全自动细胞分析仪的应用领域基于iCELLigence全自动细胞分析仪的技术优势，该系统在基础生命科学领域具有广泛的应用，如细胞质量控制、细胞毒性检测、细胞粘附和细胞伸展等。
[font='宋体'][size=16px]不同浓度（[/size][/font][size=16px]0[/size][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]I[/size][size=16px]C20[/size][size=16px]、[/size][size=16px]I[/size][size=16px]C50[/size][font='宋体'][size=16px]）西达本胺作用于[/size][/font][size=16px]H69[/size][size=16px]细胞[/size][size=16px]48[/size][size=16px]及[/size][size=16px]7[/size][size=16px]2[/size][size=16px] h[/size][size=16px]后在显微镜下观察细胞形态改变如图所示。随着药物浓度及作用时间的增加，[/size][size=16px]SCLC[/size][size=16px]细胞系形态发生了变化，细胞增殖率减低。[/size][size=16px]H[/size][size=16px]69[/size][size=16px]团状细胞减少，单个凋亡细胞增多[/size][size=16px]。[/size][size=16px]由此可见，低剂量西达本胺即可影响[/size][size=16px]S[/size][size=16px]CLC[/size][size=16px]细胞形态，促进细胞凋亡。[/size][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308301954210149_5675_5389809_3.png[/img]
[b][i]Deepcell周一表示，已与英伟达合作开发用于单细胞研究应用的生成人工智能技术。[/i][/b][align=center][b][i][img=image.png,113,83]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/174b29e0-2f00-4d45-af22-8d08603d1fda.jpg[/img][/i][/b][/align][align=center][b][i][img=e763286044be6f856573c041d533273b_logo_with_R.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/ee51f257-73e0-4f4c-beab-da55f87c445f.jpg[/img][/i][/b][/align]通过合作，公司将利用英伟达的计算专业知识和Clara一套专注于医疗保健的计算平台和软件，为基于细胞形态的分析应用程序构建新的算法，这些算法可以与Deepcell最近推出的REM-I高维细胞分析和分选平台等工具结合使用。Deepcell联合创始人、总裁兼首席技术官Mahyar Salek在一份声明中表示：“我们看到了将多模式和生成性人工智能融入我们的平台的多种可能性，并利用我们拥有的数十亿细胞图像的专有数据库来训练更多的人工智能模型。我们与英伟达的关系将帮助我们加快此类增强，并将这些进步带给我们的客户。”总部位于加利福尼亚州门洛帕克的Deepcell成立于2017年，是斯坦福大学的子公司，于2022年初筹集了7300万美元的B轮资金。Deepcell 是人工智能（AI）驱动的单细胞分析领域的先驱，旨在推动深度生物学发现，早在2023年2 月 6 日宣布，它已经发布了三个数据集，使研究人员能够探索新的高维形态数据。这些数据集是在 Deepcell 的高通量平台上生成的，该平台由成像和分选仪器、AI 模型和软件套件组成。Deepcell的首席技术官 Mahyar Salek曾经表示:“Deepcell的数据表明，深度学习可以实现较高的分类准确率，揭示了精确描述细胞特征和表型的新方法，并能够对感兴趣的细胞进行无标记分离，以进行进一步的深度分析。这项技术为生物医学界的科学家、转化研究机构和制药行业提供了一种新的工具，以从细胞形态学数据中获得对细胞的深度认识。”[b]关于 Deepcell[/b]Deepcell 是一家生命科学公司，它将 AI 引入细胞生物学，开启了称为形态组学的高维生物发现新领域。通过 Deepcell 的人工智能成像和微流体解决方案 REM-I 平台，该公司正在利用细胞形态学进行无限发现，从而实现新规模的细胞生物学研究和单细胞分析。Deepcell 的平台利用其 AI 模型，即人类基础模型，根据形态差异来识别和分类细胞，有助于推动基础和转化研究，并提供诊断测试和治疗靶向方面的未来应用。该公司于 2017 年从斯坦福大学分拆出来，已筹集近 1 亿美元的风险投资。[来源：仪器信息网译] 未经授权不得转载[align=right][/align]
[font='宋体'][size=16px]不同浓度（[/size][/font][size=16px]0[/size][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]I[/size][size=16px]C20[/size][size=16px]、[/size][size=16px]I[/size][size=16px]C50[/size][font='宋体'][size=16px]）西达本胺作用于[/size][/font][size=16px]H[/size][size=16px]446[/size][size=16px]细胞[/size][size=16px]48[/size][size=16px]及[/size][size=16px]7[/size][size=16px]2[/size][size=16px] h[/size][size=16px]后在显微镜下观察细胞形态改变如图所示。随着药物浓度及作用时间的增加，[/size][size=16px]SCLC[/size][size=16px]细胞系形态发生了变化，细胞增殖率减低。[/size][size=16px]H[/size][size=16px]446[/size][size=16px]贴壁细胞减少，凋亡细胞增多，触角伸长，形状变得不规则[/size][size=16px]。[/size][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308301955281629_7570_5389809_3.png[/img]
自去年我公司推出全自动核酸分析系统的免费试用后，今天我们又再次为各位老师奉上强大的细胞分析平台：一款可以解决您MTT实验烦恼、无需标记、全自动化，带给您高信息量、高灵敏度和高准确性的iCELLigence全自动细胞分析仪将会出现在您的面前。iCELLigence全自动细胞分析仪通过嵌在E-plate板上孔底的微电子感应器阻抗变化去感受细胞的有无以及贴壁、黏附和生长程度的改变，无需标记即可实时、直观的反应细胞增殖、存活、凋亡、形态变化等细胞生物学变化。iCELLigence全自动细胞分析仪的传感器阻抗技术在细胞分析中具有其独特的优势：它为整个的实验分析过程包括细胞黏附、细胞增殖和细胞融合提供了全程无损伤的监控，实时、连续显示的数据让您可以更加自信更加清楚的进行细胞操作和细胞增殖等分析，而不是假定细胞处于合适的处理阶段。一连串实时获取和显示的数据让您处理每一步结果都可以通过机理来预测，同时也可以结合iCELLigence全自动细胞分析仪连续的读数来决定传统终点细胞分析的最佳时间点。只需几个简单的操作步骤您就可以获得高信息量的、直观的、准确的结果，就可以让您的细胞增殖等分析实验变得更加省时与高效。莫再犹豫，快来参加体验吧，经历过你就会发现有时候细胞增殖等实验会是这么的easy。赶快报名，免费的试用在等着您哦···活动期间，凡是参与试用的用户均可获得昊诺斯8GU盘或瑞士军刀背包一个（奖品以实物为准）。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647437_1622715_3.jpg真心英雄活动第二关试用报名网址：http://www.instrument.com.cn/custom/SH100700/20130522/free.shtml另外，您也可以致电北京昊诺斯科技有限公司市场部产品负责人孙健13710746995sunjian@herosbio.com（因为区域划分，活动仅限北方区域，具体问题欢迎来电垂询）。
[font='宋体'][size=16px]不同浓度（[/size][/font][size=16px]0[/size][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]I[/size][size=16px]C20[/size][size=16px]、[/size][size=16px]I[/size][size=16px]C50[/size][font='宋体'][size=16px]）西达本胺作用于[/size][/font][size=16px]H526[/size][size=16px]细胞[/size][size=16px]48[/size][size=16px]及[/size][size=16px]7[/size][size=16px]2[/size][size=16px] h[/size][size=16px]后在显微镜下观察细胞形态改变如图所示。[/size][size=16px]H[/size][size=16px]526[/size][size=16px]细胞体积缩小，由片状变为球形团块，周围散在大量凋亡细胞[/size][size=16px]。[/size][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308301956152059_3999_5389809_3.png[/img]
流式细胞胞仪的分析及分选原理流式细胞仪由液流系统、光学与信号转换测试系统和数字信号处理及放大的计算机系统三大基本结构组成。在对细胞悬液中的单个细胞或其超微结构进行多参数快速自动分析过程中，每秒钟能测量数千个至数万个细胞，能在分析过程中按实验设计要求对特定细胞进行分析，带细胞分选系统的流式细胞仪还可按实验设计要求分选出具相同特征的同类型细胞，用于培养或进一步研究。一、工作原理流式细胞仪的工作原理借鉴了荧光显微镜技术，将荧光显微镜的激发光源改为激光，使其具有了更好的单色性与激发[/
定义：单细胞研究，就是针对单个细胞的研究，这是相对于群体细胞的研究。研究意义：细胞是生命活动的基本单位，研究细胞的结构功能及行为，有利于揭示复杂生命体的生命活动规律，探究生理生化现象，获得统计平均结果。然而，现代研究表明，单个细胞内的成分存在巨大差异，平均分析结果不能反映单个细胞内成分的真实情况，会带来误导信息。癌症等疾病总是从个别细胞的变异开始，极少量异常细胞信号会被群体信号所掩盖，不能及时获得有关病变的信息。另外，细胞间的信号传导，应激反应等活动在细胞内迅速发生，传统方法无法做到实时监测。对于数量较少且较为珍贵的细胞样本，如干细胞、元祖细胞及患者样本，传统分析方法需要大量的细胞样本，并不适宜。关于物质在细胞内的空间分布，亚细胞结构如细胞器的分析，传统方法也不能满足。这些都要求我们在一定范围内从单细胞水平研究细胞的生命活动。单细胞分析方法：毛细管电泳、微流控芯片、图像分析、动力学分析及纳米技术等。目前单细胞分析存在的难点：首先无论是针对一个特异性大分子，还是在OMIC水平上进行分子分析，都存在单细胞提取物数量少，难以分析的困难，这甚至可以说是不可能完成的，因此增加灵敏度势在必行。除此之外高通量分析也是一个瓶颈，要想获得单细胞分析确切的分析结果，研究人员必须快速而准确的分析多个细胞，这并不容易。另外单细胞分析也常常需要进行多种方式分析，这不仅是由于细胞存在于一种异质性环境汇总，而且也在同一时间，也需要测量多个参数。
[font='宋体'][size=16px]不同浓度（[/size][/font][size=16px]0[/size][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]I[/size][size=16px]C20[/size][size=16px]、[/size][size=16px]I[/size][size=16px]C50[/size][font='宋体'][size=16px]）西达本胺作用于[/size][/font][size=16px]D[/size][size=16px]MS114[/size][size=16px]细胞[/size][size=16px]48[/size][size=16px]及[/size][size=16px]7[/size][size=16px]2[/size][size=16px] h[/size][size=16px]后在显微镜下观察细胞形态改变如图所示。随着药物浓度及作用时间的增加，[/size][size=16px]SCLC[/size][size=16px]细胞系形态发生了变化，[/size][size=16px] [/size][size=16px]D[/size][size=16px]MS114[/size][size=16px]由椭圆形变为长梭形，细胞内颗粒物增多，可见空泡，出现凋亡小体。[/size][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308301953282482_3858_5389809_3.png[/img]
【线上讲座233期】实时细胞分析技术在肿瘤研究和病毒抗体疫苗检测中的应用 主讲人：周尧 活动时间：2013年10月9日-10月19日 热烈欢迎 周尧 老师光临生命科学仪器版面进行讲座！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647975_2685866_3.gif引言实时无标记细胞分析技术（RTCA, Real Time cell Analysis）是艾森生物全球独有的专利核心技术，该技术采用特殊工艺，将微电极列阵整合在细胞培养板的每个细胞生长孔底部，用以构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感系统。该技术可广泛应用于生物活性因子测定、细胞增殖检测、大规模抗肿瘤药物筛选、细胞毒性检测等研究。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647975_2685866_3.gif提要一、 实时细胞分析技术原理 1.传统终点检测与实时无标记动态检测 2. 实时细胞分析技术原理 3. 实时细胞分析技术优势二、 实时细胞分析技术平台产品简介三、 实时细胞分析技术在肿瘤、药物细胞毒性检测领域的应用 1.RTCA实时动态细胞毒性检测 2.肿瘤与微环境之间的相互作用RTCA实时动态检测 四、 实时细胞分析技术在病毒、细胞毒素、中和抗体及疫苗检测与评估领域的应用 1.RTCA实时动态检测病毒Cytopathic Eff ect效应 2.RTCA实时定量检测病毒侵染效力及评估中和抗体效价http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647975_2685866_3.gif提问时间：2013年10月09日--10月19日答疑时间: 2013年10月09日--10月19日特邀佳宾：生命科学仪器版面版主、专家以及同行们参与人员：仪器论坛全体注册用户活动细则：1、请大家就ATR技术知识的相关问题进行提问，直接回复本帖子即可，自即日起提问截至日期2013年10月19日2、凡积极参与且有自己的观点或言论的都有积分奖励（1-50分不等），提问的也有奖励在活动期间我们将评选出20名积极参与奖和5名精彩问答奖。3、提问格式：为了规范大家的提问格式，请按下面的规则来提问 ：周尧老师您好！我有以下问题想请教，http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647975_2685866_3.gif说明：本讲座内容仅用于个人学习，请勿用于商业用途，由此引发的法律纠纷本人概不负责。虽然讲座的内容主要是对知识与经验的讲解、整理和总结，但是也凝聚着笔者大量心血，版权归tianzhen老师和仪器信息网所有。本讲座是根据笔者对资料的理解写的，理解片面、错误之处肯定是有，欢迎大家指正。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647975_2685866_3.gif
菌落长菌了，想用显微镜看一下它的细胞形态，怎么做，望老师不吝赐教
[align=left][font='times new roman'][size=18px]细胞培养及[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]形态学观察[/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1[/size][/font][font='宋体'][size=16px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞复苏：从液氮中取出细胞后，将细胞冻存管用细胞复苏[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]盒迅速[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]转移至[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]37[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]℃[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]恒温水浴锅中，轻摇使细胞迅速解冻。细胞解冻后立即吸取至[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]10 mL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]预热的完全培养基中，吹打混匀，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]9[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]00 rpm [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]离心[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]min[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]吸弃上[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]清，用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]5 mL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]完全培养基重悬细胞，将细胞接种至[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]25 cm[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]培养瓶中，沿培养瓶瓶底吹打，使细胞附着在培养瓶瓶底，恒温[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]37[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]℃[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]5% CO[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]条件下培养。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='宋体'][size=16px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞传代：[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]H[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]446[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]为半贴壁半悬浮细胞，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]D[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MS114[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]为贴壁细胞，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]H[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]69[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]H[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]526[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]为悬浮细胞。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]吸弃培养基[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]后用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]5 mL 1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]×[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]PBS[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]清洗[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]次，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]吸弃上[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]清，每[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]25 cm[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]培养瓶或[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6 cm[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]培养皿加入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1 mL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]胰酶消化[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2 min[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。镜下观察细胞变圆形或轻拍开始脱落，加入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2 mL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]完全培养基终止消化（悬浮细胞不需胰酶消化），移入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]15 mL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]离心管内，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]9[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]00 rpm[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，离心[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] min[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]吸弃上清液[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，加入新鲜培养基重悬细胞并吹打混匀。将细胞按实验需求接种于培养瓶或培养皿中，培养条件同上。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）细胞计数：制备细胞悬液（实验步骤同细胞传代），吹打混匀，取[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]200 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]μ[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]L[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的细胞悬液至[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1.5 mL EP[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]管内，再加入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]200 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]μ[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]L[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]台盼蓝[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]染色剂，充分吹打混匀细胞悬液。取适量细胞悬液滴加于细胞计数板上，在显微镜下观察并计数（被[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]台盼蓝[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]染成蓝色的细胞为死细胞，死细胞不计数），分别计数视野中计数板上四个大格子中细胞的数量，并计算平均值。细胞密度[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]=[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]平均值×[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]10[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，即每毫升培养基中细胞的数量。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞冻存：将处于对数生长期的细胞制备成细胞悬液（步骤同上）并计数。每[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]0.8-1.0[/size][/font][font='arial'][size=16px]×[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]10[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]个细胞加入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1 mL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞冻存液，轻轻吹打混匀，每支冻存管加[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1 mL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的细胞悬液（标记清楚冻存细胞代数，所用培养基，细胞来源，冻存日期，冻存者姓名缩写）。将冻存管用封口胶封好后放入细胞冻存盒（含异丙醇）中，放入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]-80[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]℃[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]冰箱保存，第二天将细胞移至液氮罐中以长期保存。[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]细胞形态学观察[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）铺板[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]取[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]对数生长期[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] H446[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]H[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]69[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]H[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]526[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]D[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MS114[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]计数，分别接种等量细胞至[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]孔板，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]“[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]十字形[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]”[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]晃动，使细胞分布均匀，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]继续[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]培养。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）药物处理[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]待细胞融合率约[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]80%[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]加入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]不同浓度（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]0[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]IC20[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]IC50[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）含药培养基[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。每组均设置[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]D[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MSO[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]对照组。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）放入培养箱培养[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]48[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]72[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]h[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]后观察细胞形态并拍照。[/size][/font]
热销细胞网推出的流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来.细胞热销网是针对细胞的一个专业平台，在这里有关于细胞的设备，仪器等产品。
[align=center][font='Segoe UI', sans-serif] -[/font]基于阻抗方法实时、无标记、长期监测细胞表型[/align][align=center]（[color=#333333]可用于[/color][b][font=宋体][color=#F76464]细胞增殖、肿瘤免疫、细胞毒性及活力检测、药物筛选、信号通路[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464](GPCR/CFTR)[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]、细胞间相互作用[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464] ([/color][/font][font=宋体][color=#F76464]屏障功能[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464])[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]、病毒学研究及细胞迁移[/color][/font][/b][color=#333333]等细胞表型研究。[/color]）[/align][font=等线][size=16px]细胞表型是涉及基因和蛋白表达的多个细胞过程的集合体，这些过程导致细胞特定的形态和功能。细胞表型检测主要类型有：[b]细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭、活力、信号通路及屏障功能[/b]等。[/size][/font][font=等线][/font][align=left][b][font=宋体][color=#333333]基本原理：[/color][/font][/b][font='Segoe UI',sans-serif][color=black] [/color][/font][font=宋体][color=black]将细胞样本置于[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=black]CytoView-Z[/color][/font][font=宋体][color=black]阻抗板中（底部埋入电极的[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=black]96[/color][/font][font=宋体][color=black]孔培养板）进行培养，当细胞贴附于电极并伸展开后，将微小的电信号施加于电极上，细胞间形成的联接将阻挡这些电信号的通过，导致阻抗值的读数增加，而细胞结构形态上的细微改变（比如源于受体介导的信号传递或细胞形态学变化）也会影响阻抗值。也就是说，细胞的贴壁、黏附、增殖及形变等过程都会引起阻抗的变化，细胞的增殖数量与阻抗呈现一个正相关的关系。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black][img=,553,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112291044022777_5012_4146479_3.jpg!w553x180.jpg[/img][/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]阻抗检测会计算有多少电信号（上图中青色箭头所示）被电极－细胞的界面所阻挡。当电极未被覆盖时，电信号能轻松穿过，这时阻抗值比较低。当细胞盖住电极时，能够通过的电信号就变少了，相应的阻抗值就会增大。当细胞死亡或者脱离电极时，阻抗值就会恢复到基线水平。[/color][/font][/align][font=等线][/font][align=left][font=宋体][color=black]阻抗方法相比于传统的标记方法，具有[/color][/font][/align][align=left][b][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464]1.[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]灵敏度高[/color][/font][/b][/align][align=left][font=宋体][color=black]能够检测出成像技术难以捕捉的、微小的细胞形态、构象变化；[/color][/font][/align][align=left][b][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464]2.[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]长时间持续监测[/color][/font][/b][/align][align=left][font=宋体][color=black]不会错过药物反应时间框，在给药前可通过增殖曲线判断细胞状态；[/color][/font][/align][align=left][b][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464]3.[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]无标记、原位[/color][/font][/b][/align][align=left][font=宋体][color=black]测量过程完全不会影响细胞生物学特性，无需优化抗体用量、染料浓度；[/color][/font][/align][align=left][b][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464]4.[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]孵育时间等参数[/color][/font][/b][/align][align=left][font=宋体][color=black]自动采集数据，中间无需手动操作。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]目前阻抗平台可用于[/color][/font][b][font=宋体][color=#F76464]细胞增殖、肿瘤免疫、细胞毒性及活力检测、药物筛选、信号通路[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464](GPCR/CFTR)[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]、细胞间相互作用[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464] ([/color][/font][font=宋体][color=#F76464]屏障功能[/color][/font][font='Segoe UI',sans-serif][color=#F76464])[/color][/font][font=宋体][color=#F76464]、病毒学研究及细胞迁移[/color][/font][/b][font=宋体][color=black]等细胞表型研究。[/color][/font][/align]
摘要：细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1. 光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。(2) 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。2. 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342)，HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml。结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased)，部分染色质出现浓缩状态;Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;Ⅱb期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体(图1）。 http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/08/A1376376278_small.jpg3 透射电子显微镜观察结果评判：凋亡细胞体积变小，细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期（pro-apoptosis nuclei）的细胞核内染色质高度盘绕，出现许多称为气穴现象（cavitations）的空泡结构(图2)；Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；细胞凋亡的晚期，细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体。 http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/08/A1376376295_small.jpg二、磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法)磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记，以标记了的Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin-V与PI匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/08/A1376376296_small.jpg方法1. 悬浮细胞的染色：将正常培养和诱导凋亡的悬浮细胞(0.5~1×106)用PBS洗2次，加入100 ul Binding Buffer和FITC标记的Annexin-V(20ug/ml)10 ul，室温避光30 min，再加入PI(50 ug/ml)5 ul，避光反应5 min后，加入400 ul Binding Buffer，立即用FACScan进行流式细胞术定量检测(一般不超过1 h)， 同时以不加AnnexinV-FITC及PI的一管作为阴性对照。2. 贴壁培养的细胞染色：先用0.25%的胰酶消化，洗涤、染色和分析同悬浮细胞。3. 爬片细胞染色：同上，最后用荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜进行观察。结果 http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/08/A1376376298_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/08/A1376376300_small.jpg
超微量细胞自动分析技术在常规的细胞学实验中，无论是对于细胞培养中的细胞数量检测，还是药物对于细胞的毒性杀伤作用研究，或者是在下游实验前的细胞密度确认，都需要对细胞进行计数，有些时候还需要以染色的方法进行细胞存活率分析。目前，大部分实验室仍旧采用的是显微镜结合细胞计数板的计数方法，虽然成本低廉，但是操作繁琐，大部分细胞需要先稀释再计数，并且计数结果因人而异，系统偏差较大，另外计数板需要清洗，一旦清洗不够彻底会带来样品的交叉污染，因此，一旦样品较多就会消耗大量时间，影响研究的效率。也有一些实验室购置了能够自动进行细胞计数的仪器，可是当前的细胞计数仪均存在需要专门的试剂清洗以及样品进样针容易被细胞团堵塞等问题，无论是使用成本还是维护成本都居高不下。这些问题的存在不仅影响了自动化细胞计数的普及，同时也继续使细胞计数成为常规研究中的速度瓶颈。一款使用维护成本低，自动化程度高的细胞计数仪成为了许多细胞学研究者的呼声。根据这些用户的需求，GE Healthcare Life Sciences 最新推出了具有革命性进化设计的全自动细胞计数分析仪--Cytorecon，该仪器采用了高分辨率的CCD成像技术及自動軟件分析功能，仪器可以快速完成包括贴壁细胞、悬浮细胞、白细胞、培养细胞、酵母细胞等细胞样品的计数和浓度计算，结合成熟的台盼蓝染色技术，还可以快速完成细胞存活率的分析。除了细胞样品以外，仪器出色的性能甚至支持一些细菌和微生物样品的浓度计算。在进样的设计上，Cytorecon采用了20孔的特制样品盘设计，只需要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]在样品盘上点上11ul样品，即可直接检测。即使超过107浓度的细胞，也能不需稀释即完成浓度分析。采用样品盘进样不仅通量高，而且一次规避了后续运行需要购买专门试剂、样品需要稀释、进样针会堵塞、不能同时测多个样品等一系列传统细胞计数仪器存在的问题。仪器内置了方便上手的控制分析软件，通过简单的参数设置就可以设定拍摄的样品数量，以及完成细胞大小、对比度和存活性的定义。有了如此方便的帮手，相信细胞计数将会变得无比轻松，您再也无需枯燥地对着显微镜，以损耗视力的代价通过人工逐个逐个进行细胞计数了。
目前血细胞分析仪检测原理包括电学和光学两种，电学包括电阻抗法和射频电导法，光法包括激光散射法和分光光度法。电阻抗法根据Coulter原理及血细胞非传导的性质，以电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定。当有细胞通过小孔时，由于电阻增加，于瞬间引起电压变化及通过脉冲。细胞体积越大，脉冲振幅越高，细胞数量越多，脉冲数量也越多。脉冲信号经过：放大、阈值调节、甄别、整形、计数而得出细胞技术结果。电阻抗法可准确量出细胞（或类似颗粒）的大小，是三分类血液分析仪的主要应用原理，并与光学检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。激光散射法应用了流式细胞术检测原理及细胞通过激光束被照射时，产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接受的散射光信息进行综合分析，即可准确区分正常类型的细胞。激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时，比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。射频电导法是用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞的导电性，提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。射频电流是每秒变化大于10000次的高频交流电磁波，能够通过细胞壁。分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测血红蛋白的原理，它利用血红蛋白与溶血剂在特定波长下比色，吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成比例。
产品简介:保存液快速对脱落上皮细胞、腺细胞、白细胞等进行很好的保存和固定，保持标本采集时的原始细胞形态，防止细胞在保存过程中发生变形、自溶等。并通过制片使细胞均匀涂布在载玻片上制成薄层细胞涂片。染色后细胞结构在显徵镜下清晰易辨，同时把血液、粘液和炎症细胞减少到最底程度，从而易发现和确认异常细胞。更有利于从细胞的形态变化判定细胞的病变程度，使判定结果更加准确可靠,提高异常细胞的检出率，大大提高宫颈癌筛查方法的特异性和诊断的准确率。·产品性能特点：:红细胞处理能力强：无需另加裂解液，既可将全部红细胞彻底清除，同时完美保存有诊断价值的各种有核细胞形态，从而对于临床上重度宫颈糜烂病人（或大量血细胞标本）能轻松一次性处理干净·消化分解黏液能力强：充分消化粘黏液，去除标本中普遍存在的黏液等干扰成份，释放具有诊断价值的细胞，保留有价值的诊断背景，有效提高检出率,检测结果准确。·细胞形态：核结构完整，其中核膜、核仁、核染色质颗粒及分布清晰可见，胞浆的嗜染性正常，有利于鉴别细胞的类别及来源。 细胞萃取:采用梯度离心分离萃取及红细胞处理专利技术和黏液消化技术多合一去除液基细胞学标本中的血液、黏液等干扰成份，富集提取细胞及诊断成份。 ·兼容性强：保存的细胞同时可做免疫细胞化学、HPV-DNA和衣原体等病原微生物的分子生物学检测，无需多次采样的烦恼。·应用广泛:细胞保存液临床运用非常广泛，除了运用宫颈细胞学检查外，还有胸腹积液、尿液、滑膜液、支气管冲洗液、脑脊液、针吸穿刺细胞及痰液标本细胞检测。·保存时间长：细胞在保存液中保存30天形态不变，真正保持细胞原始形态，更接近本身的组织学结构，更有利于恶性病变与良性反应性改变的鉴别诊断。·保存液细胞包裹技术，可以使细胞均匀悬浮，保证操作者在涂片标本时的随机性，任意取样涂片都具有代表性。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106231241_301155_2324710_3.jpg
[size=24px][b]课程详情[/b][/size]肿瘤的发生及发展机制是当前生命科学和基础医学的重要研究领域，对应的抗肿瘤药物和细胞治疗方法的研发也是行业研究热点。本次讲座将围绕肿瘤细胞和细胞治疗研究方法，介绍赛多利斯提供的活细胞水平检测方法及整体解决方案。[size=18px][b]讲师简介：[/b][/size]黄雯琪:黄雯琪，女，就职于赛多利斯公司生物分析部门，负责细胞检测产品线的应用支持、产品培训等业务，在细胞生物学检测技术及实验方法方面具有丰富的经验。[size=18px][b]相关领域：[/b][/size](生物产业)-(综合)[size=18px][b]相关仪器：[/b][/size](生命科学仪器及设备)-(细胞生物学仪器)-(高内涵细胞成像分析系统)点击链接立即报名：[url]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_13888.html[/url]
大家还记得我吗？好久好久没有来发帖了，肯定都快被遗忘了。一直在忙着养细胞，这次过来给大家分享一些自己的心得体会。↓↓↓养了很久的细胞，有一些经验和体会总结一下，和大家分享一下。关于如何把细胞养的形态很好更漂亮。1.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。这个是我师兄发明的，谢谢他了。这个方法真的很好用！3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性塑料瓶相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比塑料瓶内好。这可能是因为塑料瓶比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在塑料瓶这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，塑料瓶比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，塑料瓶会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。今天就先分享到这里吧，等下次有时间来逛帖的时候再来分享。大家一定要注意：要想把细胞养的漂亮，一定要保持实验室干净整洁。至于怎么保持，方法很重要，更重要的是要有责任心。方法的话，可能每个人都会有自己的一套方法，不过能走捷径的还是可以走的。像我们实验室，现在很多都是利用软件来管理的。还记得之前给你们推荐的那款软件吗？我们实验室现在还在用，倒是真的蛮好用的，至少大家做实验的时候不会再乱堆乱放了（因为有领用记录）可能新朋友不知道，或者没有看过我上篇帖子的人不了解，如果相信我的推荐，可以看下我上一篇帖，谢谢，希望能帮到大家！差点忘了，那款软件更新成了iLab，不叫Mr.F了。其他不多说，省得被当成打广告的！
十三.流式细胞术在血液学中的应用 淋巴瘤免疫分型 目前淋巴瘤的分类方法已从LSG的形态学分类逐渐转变为REAL分类法, REAL分类法是以肿瘤发生源为基础的分类方法,在原来的形态学基础上加上免疫学分型后再加以分类,这种分类方法不仅能够推断肿瘤的发生源,对治疗也有指导意义。因此淋巴瘤的免疫分型越来越重要。如同白血病免疫分型一样，淋巴瘤的免疫分型也是利用单克隆抗体检测淋巴瘤细胞的细胞膜和细胞浆抗原,分析其表现型,以了解被测淋巴瘤细胞所属细胞系列及其分化程度。流式细胞仪能对多数的淋巴瘤细胞的细胞膜和细胞浆抗原迅速客观地做出检测，在淋巴瘤的免疫分型中起着不可替代的作用。临床淋巴瘤的免疫分型的检测标本一般是淋巴结、脾脏、胸水、腹水等。在临床淋巴瘤的免疫分型工作中常可遇到以下四种情况：①B细胞系淋巴瘤②T/NK细胞系淋巴瘤③淋巴细胞系以外的造血细胞肿瘤④造血细胞以外的肿瘤。REAL分类淋巴瘤的免疫表型见表12.8。*：弱表达或阴性。BLBL :前B原始淋巴细胞淋巴瘤/白血病; BSLL: B-小淋巴细胞淋巴瘤; LPL:淋巴浆细胞样淋巴瘤; MCL: 斗篷细胞淋巴瘤; FCL:滤泡中心淋巴瘤; MZL: 边缘带B细胞淋巴瘤; SMZL :脾MZL ;HCL:毛细胞白血病; PC:浆细胞瘤;DLBL: B-弥漫性大细胞淋巴瘤; BL: Burkitts淋巴瘤; HBLB:高度B细胞淋巴瘤, Burkitts样; TLB L: 前T原始淋巴细胞淋巴瘤/白血病; TPLL: T幼淋细胞白血病; LGLT:大颗粒淋巴细胞白血病, T细胞型[col
大家还记得我吗？好久好久没有来发帖了，肯定都快被遗忘了。一直在忙着养细胞，这次过来给大家分享一些自己的心得体会。↓↓↓养了很久的细胞，有一些经验和体会总结一下，和大家分享一下。关于如何把细胞养的形态很好更漂亮。1.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。这个是我师兄发明的，谢谢他了。这个方法真的很好用！3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性塑料瓶相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比塑料瓶内好。这可能是因为塑料瓶比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在塑料瓶这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，塑料瓶比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，塑料瓶会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。今天就先分享到这里吧，等下次有时间来逛帖的时候再来分享。大家一定要注意：要想把细胞养的漂亮，一定要保持实验室干净整洁。至于怎么保持，方法很重要，更重要的是要有责任心。方法的话，可能每个人都会有自己的一套方法，不过能走捷径的还是可以走的。像我们实验室，现在很多都是利用软件来管理的。还记得之前给你们推荐的那款软件吗？我们实验室现在还在用，倒是真的蛮好用的，至少大家做实验的时候不会再乱堆乱放了（因为有领用记录）可能新朋友不知道，或者没有看过我上篇帖子的人不了解，如果相信我的推荐，可以看下我上一篇帖，谢谢，希望能帮到大家！差点忘了，那款软件更新成了iLab，不叫Mr.F了。其他不多说，省得被当成打广告的！
全自动血细胞分析仪——能依靠它们去计数吗？库尔特原理库尔特原理指出：悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时，在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化，产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。这主要是根据血细胞与稀释剂相比，血细胞是不良导体的特性而提出的。起初，原始的库尔特计数器只能计算和测量红细胞。后来，随着技术的不断发展和设备的不断改进，临床医生还可以利用它来计算和测量白细胞。到20世纪70年代，技术的进一步发展使技术人员能够分离血小板。全自动细胞计数器的演进传统意义上的血细胞计数器是通过研究外周血涂片，使用血细胞仪和白细胞分类计数而手动完成的（也称为100个细胞涂片分类，手动白细胞分类计数或手动计数器）。根据库尔特原理导致了库尔特计数器的发明，随后又开发出了技术先进的全自动血液细胞分析仪。自此，仪器的技术水平得到不断提高。由于技术的进步，一台仪器可以分析越来越多的参数，从而大大提高了血液检测的效率，减少在多台仪器上分析一个样品的情况。现代的细胞分析仪能够测量白细胞（WBC）、白细胞分类（五分类）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、平均红细胞体积（MCV）、平均血小板体积，并且可以自动计算血细胞比容（HCT）、平均红细胞血红蛋白（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度，血小板比积和血小板分布宽度。自动分析仪的其他重要因素包括它们运行的速度和每批次可以处理的样本数量（大处理容量可以减少周转时间）。即时检验（POCT）即时检验（[/
题名：自动化毛细管电泳的快速单细胞分析（Automated Capillary Electrophoresis System for Fast Single-Cell Analysis）作者：Alexandra J. Dickinson , Paul M. Armistead , andNancy L. Allbritton （一群美国滴家伙）杂志：Analytical Chemistry年卷页： 2013, 85 (9), pp 4797–4804 正文：毛细管电泳在单细胞分析上显示了其独特而强有力的优势，这是HPLC和UPLC等难望其项背的优势之一。以下就给大家介绍一个该项技术在单细胞分析上的应用，很牛很强大~ 为了介绍全面一点，我把整段摘要给翻译了。毛细管电泳用于单细胞分析是一种非常有前景的技术，但是在生物研究上其具有低通量的局限性。本文提出了一个微型细胞捕获器和三通道体系的自动化分析平台，在该系统上可进行快速缓冲液交换以进行快速单细胞分析。导入的细胞跟荧光素和俄勒冈绿一起被分离分析，通量为3.5 细胞/分，荧光素和俄勒冈绿的分离度为2.3±0.6。细胞蛋白激酶B（PKB）的活性是通过检测免疫荧光染色后的二氧膦基-PKB来检测的。结果显示，PKB在并没有变化，说明在CE分析过程中应激活化蛋白酶没有被上调，而且在细胞溶膜之前基底细胞的生理机能也没有被扰乱。在癌细胞中鞘氨醇激酶(SK)通常情况下是会被上调的。在此实验中，通过将神经胺-荧光黄(SF)基底引入细胞中而对SK进行检测。SF、神经胺-1-磷酸荧光黄（S1PF）和1/3荧光种类在单细胞中得到分析。219个细胞中，单细胞通量为2.1细胞/分钟。虽然这些亚种群细胞（此类细胞SK活性差异很大，这些差异跟种群均值有关）很容易被测定到，但88%的细胞具有上调SK的活性。该系统稳定，重现性好，可用于上百个贴壁和非贴壁细胞的生物组分的分离分析；还可用于检测非表征的生物学现象。生物方面的知识翻译起来颇费功夫，有些地方翻译得不一定地道。不过生物知识在这里不是重点，亮点在仪器上。比如微型细胞捕获器，这个装置至于毛细管入口端上面50微米处，那个三通道系统也一副牛掰哄哄的样子。如下图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/01/201401202053_488354_1624715_3.png其他参数：溶膜方式：激光脉冲生理盐水和分离缓冲液的控制方式：接地电位进样方式：电动进样（-5kV，1s），此时横跨毛细管的电压设为0，1s，毛细管被从air gap移动到分离缓冲溶液中。结语：如果没有多年的科研积累和强大的平台是做不出这样的实验的。纵观这两年发到AC上的文章，动则CE-MS，剩下的就是类似这种：需要很多电化和物化知识外加搞技术难度的仪器创新。革命尚未成功，同志们需多努力啊~~~~~~~
用途： 流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节 分辨率为零。 流式细胞仪主要由四部分组成。它们是：流动室和液流系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统 参数测量原理荧光信号主要包括两部分：①自发荧光，即不经荧光染色细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光；②特征荧光，即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光，其荧光强度较弱，波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中，对于结合水平不高的荧光抗体来说，如何提高信噪比是个关键。一般说来，细胞成分中能够产生的自发荧光的分子（例核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞/活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。 减少自发荧光干扰、提高信噪比的主要措施是：①尽量选用较亮的荧光染料；②选用适宜的激光和滤片光学系统；③采用电子补偿电路，将自发荧光的本底贡献予以补偿。仪器的操作和使用 ①打开电源，对系统进行预热； ②打开气体阈，调节 压力，获得适宜的液流速度；开启光源冷却系统； ③在样品管中加入去离子水，冲洗液流的喷嘴系统； ④利用校准标准样品，调整仪器，使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上，0和90散射的荧光强度最强，并要求变异系数为最小； ⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等，在同样的工作条件下测量样品和对照样品；同时选择计算机屏上数据的显示方式，从而能直观掌握测量进程； ⑥样品测量完毕后，再用去离子水冲洗液流系统； ⑦因为实验数据已存入计算机硬盘（有的机器还备有光盘系统，存贮量更大），因此可关闭气体、测量装置，而单独使用计算机进行数据处理； ⑧将所需结果打印出来。热销细胞网是采用Accuri 型2号流式细胞仪，指示符®软件和工作站电脑供应在对市场价格领先的系统的一小部分的功能齐全的流式细胞仪的所有功能。在C6系统包括蓝色和红色激光，四色探测器和正向和侧向散射检测器加上软件，非常直观，你通常将和内收到您的Accuri小时运行的系统。
[font='times new roman'][size=18px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=18px][color=#000000]顺铂的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=18px][color=#000000]细胞毒性实验及细胞形态学观察[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]）当[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]H1299[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]细胞融合到[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]80%-90 %[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]左右，消化处理细胞并计数。将[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]H1299[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]细胞以[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]10[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]5[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]个[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]/[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]孔的比例接种到[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]96[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]孔板中，保证细胞分布均匀，培养过夜使细胞[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]贴[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]壁。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]2[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]）分别配置[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]0[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]10[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]100[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1000[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]μ[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]M[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]含顺铂[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]培养基，沿着侧壁加入到[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]96[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]孔板中，每孔[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]200[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]μ[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]L[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，每个浓度设置[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]6[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]个复孔。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]96[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]孔板外围加入[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]100[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]μ[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]L[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]PBS[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]缓冲液[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，防止边缘效应[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]3[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]）将[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]96[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]孔板放入培养箱培养[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]3[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]天后，用倒置相差显微镜观察细胞形态并拍照。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]4[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]）用[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MTS[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]法测定细胞活力，每孔加入[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]20[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]μ[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]L[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000] MTS[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]试剂，全程避光，继续培养[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]3 h[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。利用酶标仪[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]490 nm[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]波长检测各孔[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]OD[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]值。用[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODtreat[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]/[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODcontrol[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]表征细胞活力，计算细胞活力。细胞活力测定数据是基于三次独立的实验。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在细胞迁移过程中，细胞内上皮间充质转化（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）相关蛋白的表达量会发生相应的变化。为了检测外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体与细胞孵育时间对[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]相关蛋白的影响，实验[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]测定了加入[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1×[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]10[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]10[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]个外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体颗粒后[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]第[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]天[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]相关蛋白的表达[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]量[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]变化[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。如图所示，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]E-Cad[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]蛋白的表达量在第[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]天逐渐减少至[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]最初[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]0.7[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]倍。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]N-Cad[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Vimentin[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]蛋白在第[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]天的表达量分别增加了[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1.5[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]倍和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1.4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]倍。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]以上结果说明[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]与细胞共培养[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]天后，细胞内[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]相关蛋白变化更为显著。[/size][/font][table][tr][td][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108012221112395_9347_5111497_3.jpeg[/img][/align][/td][/tr][/table][align=center][font='times new roman']图[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']外[/font][font='times new roman']泌[/font][font='times new roman']体与[/font][font='times new roman']H1299[/font][font='times new roman']细胞孵育时间对[/font][font='times new roman']EMT[/font][font='times new roman']相关蛋白的影响[/font][/align][font='times new roman'][size=16px]为了进一步在蛋白水平上验证外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可以促进细胞迁移，我们提取共育[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]天的细胞蛋白质，检测[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]相关蛋白的表达变化。实验结果显示，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]随着外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体浓度的增加，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]E-Cad[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]蛋白表达降低，而[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]N-Cad[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]蛋白和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Vim[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]en[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]tin[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]蛋白表达增加。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]上述[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]结果可进一步证明捕获的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可以诱导[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]迁移[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]具有良好的生物活性。[/size][/font]
甲基态锑。锑(Ш)与红细胞具有高亲和性，其毒性是锑(V)的10倍 。锑及其化合物已被美国环境保护协会(USEPA)和欧共体(EU)认定为优先检出的有毒元素之一，它可与巯基结合，抑制琥珀酸氧化酶等的活性，破坏细胞内离子平衡，使细胞内缺钾，引起体内代谢紊乱，导致多系统、多脏器损害。长期吸入锑粉和含锑烟雾,还可引起“锑尘肺”或“锑末沉着症”和肺癌。土壤中锑的形态及其生物的有效性不仅是锑污染的重要的研究方向，也是评估锑污染土壤的修复效率的重要参数。成都是四川的政治、经济、文化中心，是全国重点农业基地所在地。因此，开展对成都市蔬菜基地中锑的形态调查与研究，探讨耕作层与非耕作层中锑的分布规律，将为判断土壤中锑的来源、迁移和转化行为提供重要依据。同时，其分析结果对于指导蔬菜的科学种植具有一定的理论和实际意义。
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