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水分蛋白定仪

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水分蛋白定仪相关的论坛

  • 蛋白胨和胰蛋白胨

    本文引用自cheney《蛋白胨和胰蛋白胨简介》蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的主要原料,在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大。不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽,因此存在着各种蛋白胨,一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白(豆类)等两种。能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。因此,蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨和植物性蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨,而大豆蛋白胨等则是植物性蛋白胨。动物性来源的蛋白胨还有:蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。   不同来源的蛋白质和不同的水解条件,其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水,过热不凝固,在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料,也有用作啤酒等产品的稳定剂。胰蛋白胨,又称胰酪蛋白胨(Casein Tryptone)、胰酶消化酪蛋白胨(Pancreatic digest of casein),是一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等,可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定,以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。胰蛋白胨还广泛应用于高品质的抗生素、维生素、医药工业,氨基酸、有机酸、酶制剂、黄原胶等发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大,临床用于抗炎消肿,工业上用于皮革制造,生丝处理,食品加工。在国际市场上,胰蛋白胨也属于货紧价昂的短线品种之一。   胰酪蛋白胨质量标准及其检验标准:   常规各项理化指标:   1. 澄清度(磷酸盐、碱性沉淀):无沉淀、澄清   2. 2%水溶液:透明   3. 酸碱度:6-7   4. 氨基氮:≥3%   5. 色氨酸:≥0.8%   6. 胨含量:≥80%   7. 总氮:≥13%   8. 水份:≤5%   9. 灰份:≤6%   10. 氯化钠:≤0.2%胰蛋白胨特指用胰蛋白酶酶解酪蛋白生成的蛋白胨产物,与一般蛋白胨的区别在于酶解工艺处理上,属于水解度更高、胨分子量更小更均衡的蛋白胨。

  • 影响凯氏定氮法测定粗蛋白准确性应注意的细节问题

    影响凯氏定氮法测定粗蛋白准确性应注意的细节问题摘 要 阐述了影响凯氏定氮法测定粗蛋白准确性应注意的一些细节问题,并进行了相关分析,且提出了相应的解决办法。关键词 凯氏定氮法;粗蛋白;测定;准确性;问题随着饲料行业的飞速发展,饲料原料及其饲料产品的价格也居高不下。而粗蛋白的检测是评定饲料原料及其产品的重要指标之一,目前常用的为凯氏定氮法,即国家颁布的《饲料中粗蛋白的测定方法》(GB1996-6432)。但是该方法也存在着测定过成较复杂、费时等缺陷,测定时除严格按照规定程序操作外,还需要一定的实验技巧和实践经验。因此有很多饲料企业在实际操作过程中总是出现各种问题,导致检测结果异常而不知如何去分析。下面,笔者以GB/T6432—1994为准,针对影响凯氏定氮对测定结果标准性应注意的细节问题和大家共同探讨。1 试剂的配制粗蛋白测定中所用的化学药品如浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、硼酸、硫酸铜、硫酸钾(硫酸钠)、硫酸铵、蔗糖等均为化学纯,标定盐酸标准溶液用的无水碳酸钠为基准试剂。在配制试剂前一定要用PH试纸或酸度计检测一下蒸馏水是否为中性,所用的烧杯、试剂瓶等配液设备清洗干净。1.1 盐酸标准溶液的配制配制的盐酸标准溶液尽量为低浓度,一般C(HCl)=0.02~0.05mol·L-1。低浓度虽然用量大,但可减少操作误差和读数误差。配制盐酸标准溶液一定要严格按照标准操作进行,基准无水碳酸钠已定于270~300℃灼烧至恒重,称准至0.0001g,做4~6个平行样,去掉最高值和最低值后取平均值,同时还要做空白试验。盐酸标准溶液的配制量尽量不要太多、使用时间太长,防止水分蒸发和盐酸挥发而影响其浓度的准确性。1.2 其他试剂的配制400g·L-1氢氧化钠溶液、20g·L-1硼酸溶液、混合指示剂(1g·L-1甲基红乙醇溶液与5g·L-1溴甲酚绿乙醇溶液等体积混合)等主要是在称量时要做到快、准、稳,再就是防止使用时间太长,特别是混合指示剂不要超过3个月。

  • 大豆分离蛋白有什么特性呢?

    [size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆分离蛋白有什么特性呢?[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]一、乳化性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆分离蛋白是表面活性剂,它既能降低水和油的表面张力,又能降低水和空气的表面张力。易于形成稳定的乳状液。在烤制食品、冷冻食品及汤类食品的制作中,加入大豆分离蛋白作乳化剂可使制品状态稳定。[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆分离蛋白沿着它的肽链骨架,含有很多极性基,所以具有吸水性、保水性和膨胀性,分离蛋白的吸水力比浓缩蛋白要强许多,而且几乎不受温度的影响,分离蛋白在加工时还有保持水份的能力,最高水分保持能力为14g水/g蛋白质。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]二、吸油性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]分离蛋白加入肉制品中,能形成乳状液和凝胶基质防止脂肪向表面移动,因而起着促进脂肪吸收或脂肪结合的作用,可以减少肉制品加工过程中脂肪和汁液的损失,有助于维持外形的稳定,分离蛋白的吸油率为154%。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]三、凝胶性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]它使分离蛋白具有较高的粘度、可塑性和弹性,既可做水的载体,也可做风味剂、糖及其它配合物的载体,这对食品加工极为有利。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]四、发泡性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆蛋白中,分离蛋白的发泡性能最好,利用大豆蛋白质的发泡性,可以赋予食品以疏松的结构和良好的口感。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]五、结膜性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]当肉切碎后,用分离蛋白与鸡蛋蛋白的混合物涂在其纤维表面,形成薄膜,易于干燥,可以防止气味散失,有利于再水化过程,并对再水化产品提供合理的结构。[/font][/size]

  • 【“仪”起享奥运】来源不同的蛋白质---植物蛋白,动物蛋白

    [font=宋体, SimSun][size=15px]蛋白质按来源可以分为动物蛋白和植物蛋白,两者所含的氨基酸是不同的。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]一般说,植物蛋白和动物蛋白从本质上没有太大的区别,但是在氨基酸组成和数量上有一定的不同。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]尽管植物蛋白取材来源广泛,但其蛋白的种类和相对数量与人体的要求有一定差距。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]例如,植物蛋白中缺乏免疫球蛋白[i][/i],谷类中则相对缺乏赖氨酸等。植物蛋白的消化、吸收要比动物蛋白差,但是植物蛋白的优势是不含有胆固醇。动物蛋白相对与人类的营养结构比较吻合,其蛋白质的种类和结构更加接近人体的蛋白结构和数量,而且一般都含有人体必需的8种氨基酸(特别是蛋制品和奶制品),所以动物蛋白质比植物蛋白质营养价值高。[/size][/font]

  • 【“仪”起享奥运】食品加工用植物蛋白的类型

    [align=left][b][font=Arial, 宋体, sans-serif][size=16px]食品加工用植物蛋白的类型[/size][/font][/b][/align][size=16px][/size][b][font=Arial, 宋体, sans-serif][size=16px]1.植物蛋白[/size][/font][/b][font=Arial, 宋体, sans-serif][size=16px]以植物为原料, 去除或部分去除植物原料中的非蛋白成分(如水分、 脂肪、 碳水化合物等) , 蛋白质含量不低于40%的产品。[/size][/font][font=Arial, 宋体, sans-serif][size=16px][/size][/font][font=Arial, 宋体, sans-serif][size=16px]其主要产品有豆类(如大豆、 豌豆、 蚕豆) 蛋白、 谷类(如小麦、 玉米、 大米、 燕麦)蛋白、 坚果及籽类(如花生) 蛋白、 薯类(如马铃薯) 蛋白及其他植物类蛋白。[/size][/font][font=Arial, 宋体, sans-serif][size=16px][/size][/font][size=16px][b][font=Arial, 宋体, sans-serif]2.粗提蛋白[/font][/b][font=Arial, 宋体, sans-serif]通过初级提取, 部分去除植物原料中的非蛋白成分(如水分、脂肪、碳水化合物等) 而制得的产品。蛋白质含量在40%-65%。[/font][/size][size=16px][font=Arial, 宋体, sans-serif][/font][b][font=Arial, 宋体, sans-serif]3.浓缩蛋白[/font][/b][font=Arial, 宋体, sans-serif]通过提取、浓缩、分离等工艺, 去除或部分去除植物原料中的非蛋白成分(如水分、脂肪、碳水化合物等) 而制得的产品。包括通过提取、 加热凝固等工艺制得的马铃薯凝固蛋白。蛋白质含量在65 %-80%。[/font][/size][size=16px][font=Arial, 宋体, sans-serif][/font][b][font=Arial, 宋体, sans-serif]4.分离蛋白[/font][/b][font=Arial, 宋体, sans-serif]通过提取、浓缩、分离、精制等工艺, 去除或部分去除植物原料中的非蛋白成分(如水分、脂肪、碳水化合物等) 而制得的产品。蛋白质含量大于等于80%。[/font][/size][size=16px][font=Arial, 宋体, sans-serif][/font][b][font=Arial, 宋体, sans-serif]5.植物水解蛋白[/font][/b][font=Arial, 宋体, sans-serif]植物蛋白经酶适度水解制得的以蛋白质为主要成分的产品。[/font][/size][size=16px][font=Arial, 宋体, sans-serif][/font][b][font=Arial, 宋体, sans-serif]6.组织蛋白[/font][/b][font=Arial, 宋体, sans-serif]以植物蛋白为原料, 经挤压或纺丝工艺加工制成的、 具有特定组织结构的产品。[/font][/size][size=16px][/size][font=Arial, 宋体, sans-serif][size=15px][color=#48494d][/color][/size][/font]

  • 药物绑定靶蛋白的效果首次可直接测量

    新技术有助于开发更好的药物2013年07月06日 来源: 中国科技网 作者: 陈丹 科技日报讯 据物理学家组织网7月5日(北京时间)报道,瑞典卡罗林斯卡医学院的研究人员开发出一种方法,首次能够直接测量药物抵达其位于细胞中的目标蛋白的效果。《科学》杂志上描述的这项新技术,对于开发新的、改良型的原料药将是一个重大贡献。 大多数药物都是通过与一种或多种蛋白质结合并影响其功能来发挥效力的,但药物开发也因此面临两个常见问题:认定正确的目标蛋白,并设计能够有效地找出和绑定它们的药物分子。此前没有任何一种手段可用于直接测量药物分子定位和绑定其靶蛋白的效率,这使得药物开发过程的很多阶段都存在一定程度的不确定性。在某些情况下,候选药物在人体临床试验中没有达到预期效果,经证实正是由于药物分子没有与正确的蛋白质结合造成的。 而卡罗林斯卡医学院研究人员利用靶蛋白与药物分子结合时通常会变得稳定的观念,开发出了这个被称为CETSA(细胞热转移分析)的新技术。他们认为,这项技术可作为药物开发过程中一个重要的控制阶段,也可作为对其他方法的一个补充。“我们已经证明,该方法适用于多种靶蛋白,使我们能够直接测量药物分子是否抵达了其位于细胞或动物模型中的目标。”该医学院医学生物化学与生物物理学系首席研究员帕尔·诺德隆德说,“我们相信,CETSA技术最终将帮助提高许多药物的效率,并有助于开发更好的药物分子和更有效的治疗方案。” 研究人员还对可能导致细胞耐药性的工序进行了仔细检查,并表示,这一技术能够确定现有药物是否适合个别患者,因此其具有应用于个性化治疗的潜在价值。 “我们认为,该方法可以为癌症治疗提供一个重要的诊断工具,比如,从原则上来说,CETSA技术让我们能够确定哪种药物针对肿瘤中的蛋白质最有效,临床医生也可以在早期治疗阶段确定肿瘤是否已经具备了某种抵抗力、哪种治疗方案对病人更合适。”诺德隆德的同事丹尼尔·马丁内兹·莫利纳说,他带领的团队正在开展一个旨在将CETSA技术用于病患研究的项目。(记者陈丹) 总编辑圈点 体温可以测量,骨密度可以测量,就连药物绑定靶蛋白的效果也可以直接测量,让人不得不慨叹医学技术发展的速度之快。文中提到的细胞热转移分析技术,就好比狙击手的瞄准镜,能帮助狙击手调整位置以便更准确地击中目标。这样一来,不仅可以更好地提高药效,还尽可能地减少副作用,其实际应用价值非同一般。那种“杀敌一千,自损八百”的诊疗方法或将成为过去,那些原本被认为的绝症或将“绝”处逢生。 《科技日报》(2013-07-06 一版)

  • 【求助】牛血清白蛋白对UV吸光度检测是否有影响?哪里有供应质量稳定的牛血清白蛋白?

    最近在做公司产品含药量的释放情况,释放液是加了牛血清白蛋白的PBS液,释放后产品从释放液中取出,注射用水洗净后晾干。产品上残留药品再用乙酸乙酯超声洗脱,用UV测定乙酸乙酯中的药品浓度。因最近新换了牛血清白蛋白,后来实验数据与前比似乎有点偏低,怀疑产品上牛血清白蛋白没洗干净,对UV吸收有影响?牛血清白蛋白对UV吸光度值有什么影响呢?哪里有供应质量稳定的牛血清白蛋白?

  • 稳定细胞系助力重组蛋白高效生产

    [b][font=宋体]前言[/font][/b][font=宋体]在蛋白质研究领域,稳定细胞系的应用已成为生产高质量结构生物学蛋白质的关键手段。随着技术的不断进步,稳定细胞系的生成与筛选方法得到了显著改进,从而推动了蛋白质生产的高效化与精准化。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]细胞系的建立和应用[/font][font=宋体][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞系[/font][/font][/b][font=宋体]因其稳定的蛋白表达和适当的翻译后修饰而被广泛用于结构生物学研究。这些细胞系能有效地生产具有复杂糖基化模式的蛋白质,这对于确保蛋白质的功能和稳定性至关重要。糖基化缺陷细胞系通过特定的基因改造,能够分泌脱糖基化糖蛋白,为蛋白质生产提供了更加纯净的原料。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]稳定细胞系的生成[/font][/b][font=宋体][font=宋体]传统的稳定细胞系生成技术如瞬时转染,虽然方法简便,但存在整合频率低、转基因沉默等问题。为了克服这些困难,研究者们开发出了一系列新技术,如细胞分选技术、位点特异性重组(如[/font][font=Calibri]FLP/FRT[/font][font=宋体]系统)、转座子系统(如[/font][font=Calibri]piggyBac[/font][font=宋体])、慢病毒系统以及噬菌体整合酶等,提高了稳定细胞系的生成效率和稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]序列特异性基因组工程也为稳定细胞系的生成提供了新的思路。通过敲除或修饰特定的基因,研究者们能够实现对细胞功能的精准调控,从而优化蛋白质生产的效率和纯度。例如,一种同时缺乏[/font][font=Calibri]GnTI[/font][font=宋体]和谷氨酰胺合成酶([/font][font=Calibri]GS[/font][font=宋体])活性的[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞系被成功开发出来,为高效筛选具有[/font][font=Calibri]GS[/font][font=宋体]标记的稳定细胞系提供了有力工具。[/font][/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]稳定细胞系与瞬时转染的比较[/font][/b][font=宋体]稳定细胞系相较于瞬时转染具有多个优点,包括能够进行大规模生产和保持高水平的蛋白表达稳定性。尽管瞬时转染在某些情况下能快速产生大量蛋白,但其表达水平和重复性通常不如稳定细胞系。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]展望[/font][/b][font=宋体]近年来,利用稳定细胞系高效生产结构生物学蛋白质已成为研究的热点和趋势。通过引入新技术、优化筛选方法和改进整合系统,不仅能够提高蛋白质生产的效率和纯度,还能够为结构生物学研究提供更加精准、可靠的实验工具。随着基因编辑和细胞工程技术的进步,预计在未来,通过精确的基因操作能够更有效地创建和利用稳定细胞系。这些技术的进步将促进结构生物学和药物开发中蛋白质的高效和可持续生产。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]本文由义翘神州进行整理,同时提供[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][u][font=宋体][color=#0000ff]稳定细胞系构建服务[/color][/font][/u][/url][font=宋体],详情可点击了解![/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]参考文献:[/font][font=Calibri]Büssow K. Stable mammalian producer cell lines for structural biology. [/font][i][font=Calibri]Curr Opin Struct Biol[/font][/i][font=Calibri]. 2015 32:81-90. doi:10.1016/j.sbi.2015.03.002[/font]

  • 【转帖】胶原蛋白 你该怎么补

    胶原蛋白在被大众知晓的短短几年间,就以其与美丽、健康的密切关系,迅速蹿红起来,成为尽人皆知的美容圣品。但是,胶原蛋白到底应该怎么补,你又知道吗?   20岁开始补充胶原蛋白 胶原蛋白(collagen)是人体内含量最多的一种蛋白质,约占人体蛋白质总量的25%~33%,它遍及全身的各个组织器官,如:肌肤、骨骼、软骨、韧带、角膜、各种内膜、筋膜等,是维持肌肤与组织器官形态、结构的主要成分。因此,胶原蛋白对人体的健康和美丽扮演着举足轻重的角色,有紧肤平皱、保湿滋润、恢复弹性、乳房挺拔、关节灵活、防止妊娠纹等作用。 女性在20岁时胶原蛋白已经开始流失,含量逐年下降,25岁后进入流失的高峰期,40岁时含量不到18岁时的一半。在肌肤当中,胶原蛋白负责为肌肤提供弹性和紧致度,并扮演着“深层水库”的角色为表皮提供水分。胶原蛋白的流失,导致肌肤出现干燥、粗糙、松弛、皱纹、毛孔粗大、暗淡、色斑等衰老现象。可以说肌肤衰老的过程,就是胶原蛋白流失的过程。因此,女性20岁以后就要注意胶原蛋白的补充了。 补充胶原蛋白,你选哪样? 目前,补充胶原蛋白的方式主要有3种:1.添加在护肤品中:含胶原蛋白的化妆品有一定保湿、抗皱效果,但仅作用于表皮,很难进入真皮层。2.外部注射:直接皮下注射胶原蛋白,有立竿见影的效果,但存在肌肤排斥、过敏的风险,并且价格昂贵,维持的时间也较短暂。3.口服食用:口服胶原蛋白是最直接有效的补充方式,但要坚持2个月的周期,因为长时间流失掉的胶原蛋白,没有一定时间是难以补回来的。 从饮食上摄取胶原蛋白,如猪蹄、肉皮、牛蹄筋、鱼皮、软骨等可以在一定程度上补充胶原蛋白。但是,这些食物中的胶原蛋白由于是大分子蛋白质,很难被人体直接消化吸收,并且这类食物大多脂肪含量较高,不适合爱苗条的女性经常食用。因此,选择服用提炼加工后的胶原蛋白饮料是补充胶原蛋白最好的方式。刘纳老师还提醒,晚上睡前是服用胶原蛋白饮料的最佳时间,因为夜间10点到凌晨2点是肌肤修复和更新的最佳时段。 选择胶原蛋白的三个重要标准 标准一 胶原蛋白的分子量越小越好 人体在吸收胶原蛋白时,分子量是非常关键的因素,分子量越小越易被人体吸收。刘纳老师指出,胶原蛋白的分子量要在3000道尔顿以下,才适宜被人体吸收。 标准二 胶原蛋白的数量越多越好 人体在每天的自我更新中会不断流失胶原蛋白,女性从20岁开始每天要流失5000mg的胶原蛋白,随着年龄的增长,这一数值还在不断增加。因此,刘纳老师提醒,每天服用的胶原蛋白饮料中胶原蛋白的含量不应少于5000mg。 标准三 胶原蛋白不可缺少的搭档 刘纳老师告诉记者,胶原蛋白饮料中只含有胶原蛋白其效果不会长久,只有在胶原蛋白饮料中同时添加了透明质酸和弹性蛋白这两种物质,才能保证胶原蛋白的效果被完全发挥出来。   胶原蛋白产品推荐 1、FANCL胶原蛋白果味饮料?? 容量:50ml×10瓶/盒 价格:298元 自我介绍:特有的HTC胶原蛋白含大量三肽氨基蛋白,无需消化肌肤能直接吸收,有效促进皮肤胶原蛋白的新生。 2、Fine胶原蛋白饮料?? 容量:500ml/瓶 价格:1680元 自我介绍:以日本本地猪胎盘和鱼的胶原蛋白为主要原料,再加以DNA、弹性蛋白、透明质酸、维生素等成分制成。 3、Lumi(康魄)胶原蛋白液态饮料? 容量:50ml×8瓶/盒 价格:216元 自我介绍:胶原蛋白源自日本深海无污染鱼类的鱼皮,并且提取的是分子量为1000道尔顿以下的超细肽分子。 4、海姿丽海洋胶原蛋白果汁饮料? 容量:50ml×10瓶/盒 价格: 258元(基础型) 498元(加强型) 自我介绍:胶原蛋白源自无污染的深海三文鱼鱼皮,有基础型和加强型两种规格可以选择

  • “蛋白变性”的望文生义

    现在人们是越来越注重食品健康了,于是任何关于某种食品不健康的说法都能吸引一堆眼球。有人说自己买的乳清蛋白粉不容易溶在水中,立刻有人跳出来说千万不能用热水,蛋白质会变性。于是有一堆看起来对蛋白质有一点了解的人纷纷附和,大谈如何保持蛋白不变性。 很多人看到“蛋白变性”这个词,就望文生义地想到“变质”“变坏”,仿佛“变性”了就有害健康了。最常见的还有一个例子,反对微波炉的人总是说微波炉会导致蛋白质的变性。 蛋白质通常是由20种不同的氨基酸组成的,不同的蛋白质只是各种氨基酸的组成和连结方式不同。因为各种氨基酸的理化特性不同,它们会互相影响,最后会像积木一样形成一定的空间结构。通常也就说是蛋白质的天然构象。如果因为某种原因,蛋白质分子失去了它的天然构象,被称为变性。而蛋白质被吃到肚子里,首先要被水解(消化)成一个个的氨基酸分子,才能被吸收。而在多数情况下,变性的蛋白更容易被水解。可见,蛋白质变性对于食物来说,不仅不是“变质”,而且是好事。 我们所吃的所有蛋白,比如肉、鱼、鸡蛋、牛奶、豆浆、豆腐,作熟的过程就是蛋白质变性的过程。豆浆中的蛋白质不变性是变不成豆腐的。而作为商品出售的各种蛋白粉,多数都经过了高温灭菌和干燥处理,早已经变性了。对于某些产品而言,适当的工业处理甚至能够提高蛋白质的品质。比如大豆中的蛋白,其蛋白质质量指数(蛋白质消化校正计分)是0.91 ,但是经过分离纯化高温干燥等处理之后,就能达到1了。还有相当多的蛋白质产品甚至经过了酶解处理,以获得更好的理化特性。那些蛋白质,不仅是空间构象,连化学结构都变了,更是“变性”得深入。

  • 蛋白液顶空测乙腈残留

    本人刚接触气相没多久 最近做了一个蛋白液的乙腈残留,参考了药典白介素的方法,精密量取1ml顶空进样(1ml定量环),80℃平衡30min,4ml/min柱流速,45摄氏度等温,分流比5:1。对照为0.0004%乙腈,超纯水稀释,峰面积大约35左右。样品为蛋白液,其中有多种无机盐,twen80。问题:现在做了挺多样品,对照品出峰重现性还可以接受,倒是样品峰面积直接差到姥姥家了,几乎每次都相差很大,一个峰面积为5,下一针可能就是20!求有这方面经验的大神不吝赐教啊!

  • 膜蛋白的类型及功能详解

    [b][font=宋体]什么是膜蛋白?[/font][/b][font=宋体]膜蛋白是一类广泛存在于生物体细胞膜上的蛋白质分子。它们在维持细胞结构完整性、调控物质运输和信号传导等方面起着重要作用。根据蛋白分离的难易及在膜中分布的位置,膜蛋白基本可分为三大类:外在膜蛋白或称外周膜蛋白、内在膜蛋白或称整合膜蛋白和脂锚定蛋白。膜蛋白包括糖蛋白,载体蛋白和酶等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通常在膜蛋白外会连接着一些糖类,这些糖相当于会通过糖本身分子结构变化将信号传到细胞内。研究膜蛋白结构的技术包括[/font][font=Calibri]X[/font][font=宋体]射线衍射等,常用于重组膜蛋白的表达系统有真核表达系统。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]膜蛋白的类型:[/font][/b][font=宋体]目前存在不同类型的膜蛋白,例如:[/font][font=宋体]①整合膜蛋白[/font][font=宋体]②外周膜蛋白[/font][font=宋体]③脂质结合蛋白[/font][font=宋体]④两性蛋白[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]膜蛋白的特点:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]膜蛋白有多种形状和大小,执行多种任务,但它们总是依赖于一些关键特征。[/font] [font=宋体]膜蛋白的一些区别特征如下。[/font][/font][font=宋体]①跨膜域: 跨膜结构域是延伸到脂质双层全长的蛋白质片段。 疏水性氨基酸残基是这些结构域的共同特征,它们介导与膜磷脂疏水性尾部的相互作用。[/font][font=宋体]②疏水和亲水区域: 膜蛋白包含疏水和亲水结构域,使它们能够与脂质双层和两侧的水环境进行交流。[/font][font=宋体]③选择性:膜蛋白的一个共同特征是它们能够调节某些分子或离子的通过。 通常是蛋白质的独特结构和电荷决定了它的选择性。[/font][font=宋体]④受体位点: 当膜蛋白上的受体区域与各自的目标分子或离子结合时,这些区域就会被激活。 大多数时候, 分子 或由受体检测到的离子在受体上具有与该位点结构或化学相容的结合位点。[/font][font=宋体]⑤构象变化: 当膜蛋白结合特定分子或离子时,它通常会发生构象变化,从而引发生物反应或允许蛋白质将结合的分子转运穿过膜。[/font][font=宋体]⑥锚固:多种机制,包括与其他蛋白质的相互作用和与膜中脂质分子的结合,可用于将膜蛋白锚定到细胞膜。[/font][font=宋体]⑦糖基化:碳水化合物链通过称为糖基化的过程与几种膜蛋白结合。 这种改变可以作为防止蛋白水解的保护措施,并作为细胞中下游蛋白质的信号。[/font][font=宋体][font=宋体]跨膜结构域、疏水和亲水区域、选择性、受体位点、构象变化、锚定和糖基化都是膜蛋白的特性,对它们在细胞膜中的功能至关重要。[/font] [font=宋体]由于这些特性,膜中的蛋白质能够运输分子、发送信号、提供结构支持和催化反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]膜蛋白的功能:[/font][/b][font=宋体]①运输功能[/font][font=宋体]膜转运蛋白分为载体蛋白和通道蛋白两种。主动运输和协助扩散都需要载体蛋白。水分子进去细胞时需要水通道蛋白,还有一种离子通道蛋白,需要注意的是通过通道蛋白进出细胞因为不需要能量所以属于协助扩散。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②识别功能[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]两个不相邻细胞间信息交流是通过信号分子(如激素、神经递质、淋巴因子等)来完成的,而细胞膜上能与信息分子结合的便是细胞膜上的特异性受体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞与细胞之间可以通过相互接触而相互识别,例如精子与卵细胞的相互识别,效应[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞与靶细胞之间的相互识别就是依靠糖蛋白来完成的[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③催化功能[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]膜蛋白可能是某些反应所需要的酶。例如[/font][font=Calibri]Na+-K+[/font][font=宋体]泵中存在[/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]水解酶;光反应、有氧呼吸之所以在膜上发生的原因之一就是膜上存在反应所需的相关酶。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④抗原功能[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]表面抗原能和特异的抗体结合,如人细胞表面有一种蛋白质抗原[/font][font=Calibri]HLA[/font][font=宋体],是一种变化极多的二聚体。不同的人有不同的[/font][font=Calibri]HLA[/font][font=宋体]分子,器官移植时,被植入的器官常常被排斥,这就是因为植入细胞的[/font][font=Calibri]HLA[/font][font=宋体]分子不为受体所接受之故。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白制备[/b][/url]平台及跨膜蛋白详解:详情可查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 蛋白电泳小技巧3

    5. 做SDS-PAGE的时候,除了蛋白量上样一致,最好体积也一致,这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽,方便后面的比较,特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致,否则跑出来会有的宽有的窄,特别是上样体积相差较大的。6. 在把蛋白胶做成干胶时,很多时候会因为有气泡使胶裂掉,我的经验是在做胶时加上层膜前在胶上多加些水就不容易进气泡了,还有就是高温烘胶(管家哥提醒慎用),我喜欢放到60度烘箱里烘,这样水分蒸发速度快,即使有一些小的气泡也不会有影响。

  • 【“仪”起享奥运】酵母蛋白---素食者的蛋白新思路

    [size=16px]素食者在蛋白质摄入上一直面临着挑战,尽管素食食品富含多种营养成分,但素食者在蛋白质摄入方面存在不足。首先,植物性食品中的蛋白质含量相对较低,且氨基酸组成不如动物性蛋白完整,素食者需要摄入更多的植物性食品才能满足蛋白质的需求。然而,过多的植物性食品摄入可能导致热量过剩、膳食纤维过多等问题。其次,一些素食者可能存在对某些植物性食品的过敏或不耐受情况,例如大豆、坚果等食品中的蛋白质可能引发人体过敏反应,而谷物中的麸质[i][/i]则可能引起不耐受反应等。此外,植物性蛋白质的生物利用率较低,需要素食者通过合理搭配食物来提高蛋白质的摄入效率。[/size][size=16px]在传统素食者蛋白质摄入不足的背景下,素食蛋白棒产品正逐渐在素食者中普及起来。[/size][size=16px]素食蛋白棒是一种高蛋白、低脂肪、便携的零食,能够方便素食者在日常饮食中补充蛋白质,满足素食者对蛋白质的需求。素食蛋白棒的热量和脂肪含量相对较低,使得素食者可以在控制热量摄入的同时,获得足够的蛋白质补充。[b]一是丰富的营养价值[/b]:作为素食蛋白棒中重要蛋白来源的酵母蛋白,是一种来源于酿酒酵母的优质完全蛋白,拥有高蛋白质含量与优质氨基酸配比,其蛋白质含量高达80%以上,富含人体所需的全部8种必需氨基酸,且其氨基酸配比合理,易被人体吸收利用。酵母蛋白除了赋予素食蛋白棒高蛋白质含量外,还提供B族维生素和矿物质等多种营养成分,有助于维持身体的正常代谢和健康状态。研究表明,酵母蛋白中的活性成分能够调节肠道菌群平衡,促进有益菌的增殖,抑制有害菌的生长,从而改善肠道环境,提高肠道健康水平。[b]二是环保与可持续性和性价比优势[/b]:酵母蛋白来源于微生物发酵,相比动物源蛋白和植物源蛋白更加环保和可持续,它不需要大量的土地、水和饲料资源,也不产生温室气体排放。目前,酵母蛋白的生产已完全工业化,生产效率高、成本低,使得酵母蛋白与乳清蛋白等动物蛋白相比在价格上具有一定的优势,同时避免了动物源蛋白和植物源蛋白可能带来的过敏源问题。[/size]

  • β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分?

    β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分?最近看到有两种版本,其一,说是属于乳白蛋白里面的一种成分,乳白蛋白包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和血清白蛋白。乳球蛋白即免疫球蛋白。其二,乳白蛋白包括α-乳白蛋白和血清白蛋白,乳球蛋白包括β-乳球蛋白和免疫球蛋白。现在不知道哪种说法对,请各位指教!!!谢谢!!!

  • 重组蛋白是什么?融合蛋白和重组蛋白的区别

    [font=宋体][b]什么是重组蛋白?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白[/b][/url]的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白和重组蛋白的区别[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、重组蛋白[/font][/font][font=宋体]重组蛋白是指应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。[/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白是指通过重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术将你要表达的目的蛋白基因同表达载体上融合蛋白基因相连,这样表达出的蛋白质就会是同时具有目的基因蛋白和融合基因蛋白两个部分的重组蛋白。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白与重组蛋白不是一个层次上对立的概念,融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。融合蛋白又称标签([/font][font=Calibri]Tag[/font][font=宋体]),常用的[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总结:在生物制药领域,重组蛋白具有较高的活性和纯度,更易吸收,安全性也更高的特点。重组蛋白的利用率也更高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为了生产重组蛋白,基因被分离并克隆到表达载体中。重组蛋白的生产需要蛋白表达系统、蛋白纯化系统和蛋白识别系统。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]获取重组蛋白的基本步骤:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]目标基因的扩增。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]插入克隆载体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]亚克隆到表达载体中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]转化到蛋白表达宿主中[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]细菌[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大肠杆菌[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、酵母细胞、哺乳动物细胞或杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞系统[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]重组蛋白鉴定试验[/font][font=Calibri](Western blot[/font][font=宋体]或荧光[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]大规模生产。[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大规模发酵[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要考虑多种因素:[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]选择哪个宿主系统?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]如何分离和纯化重组蛋白?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]选择适当的表达宿主或使用正确的纯化方法并不容易,应考虑目标重组蛋白的性质。下面列出了一些重要因素:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]? 膜结合[/font][font=宋体]? 溶解度[/font][font=宋体]? 单或多结构域[/font][font=宋体][font=宋体]? 大小[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]分子量[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体]? 表达位置[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于大多数没有足够经验来表达和分离重组蛋白的人来说,重组蛋白的生产是非常耗时的。许多生物公司为各种不同规模的重组蛋白表达提供良好的服务,例如义翘神州[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]参考重组蛋白生产的详细服务清单)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]等相关信息,详情可以关注[/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白生产:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font]

  • 【原创大赛】基于近红外光谱分析技术的人纤维蛋白原工艺过程纤原产品水分的快速检测

    中文摘要: 目的 利用近红外光谱分析技术可以有效的对纤原冻干产品的水分含量进行实时测定,优化冻干过程。 方法 选取冻干完成后制品为研究对象,制备了水分含量有一定梯度的样品共60个,用积分球漫反射模块采集其近红外光谱,然后用卡尔费休容量滴定法测定每个样品的水分含量作为一级数建立近红外模型,以R2、RMSEC、RMSECV、RMSEP对模型进行评价。结果 模型各项参数为:R2=0.881,RMSEC=0.4426,RMSECV=0.8370,RMSEP=0.6311。 结论 所建立模型可作为在线监控纤原冻干过程水分含量的基础,将冻干设备进行相关的改造后,借助光纤可实现产品水分含量的实时监测。关键词:近红外光谱分析;人纤维蛋白原;水分人纤维蛋白原(HumanFibrinogen,Fg)是血浆的主要成分,含量高达2~4 g/L。在人凝血反应的最后阶段在凝血酶与人凝血因子ⅩⅢ、Ca2+作用下形成纤维蛋白凝胶,将血液有形成分包绕其中,达到止血的目的。纤维蛋白原的原液经配制、分装后,进行冷冻干燥,使产品的水分含量控制在5%以下。人纤维蛋白原工艺过程纤原产品水分的检测是使用卡尔费休水分测定方法,该传统方法费时费力,对产品具有破坏性,极易引入误差而使测定不准确。在制药领域,NIRS作为一种重要的PAT工具,已成功用于药物的原辅料质量评价、关键过程的监测和控制、成品的快速放行和质量检测等各个环节,为保证产品质量、降低生产成本、革新生产过程发挥了重要的作用。利用近红外光谱分析技术可以有效的对纤原冻干产品的水分含量进行实时测定,从而极大地优化冻干过程。1材料1.1试剂人纤维蛋白原(冻干剂,山东泰邦生物制品有限公司,批号201409S02);甲醇(分析纯,国药集团化学试剂有限公司);卡尔·费休试剂(KFR-06型,天津市科密欧化学试剂有限公司)。1.2仪器Antaris Ⅱ傅里叶变换近红外光谱仪(美国ThermoFisher scientific公司),附件配置:积分球漫反射检测器;KF-4型自动水分测定仪(南京科环分析仪器有限公司);EL204电子天平(METTLER TOLEDO公司)。2方法2.1样品制备取若干瓶纤原样品,开盖后置于37℃水浴锅中,通过放置不同的时间,制备出水分含量有一定梯度的样品,样品取出后加盖密封,平衡一段时间。共得到60个样品。2.2采集近红外光谱用Antaris Ⅱ傅里叶变换近红外光谱仪的积分球采样模块对60个纤原样品进行光谱采集,扫描范围为10000-4000 cm-1,分辨率为8 cm-1,扫描次数64次,每小时扫描一次背景。2.3测定样品水分含量依据2010版中国药典规定,采用卡尔费休容量滴定法,测定样品的水分含量。测定用KF-4型自动水分测定仪完成,先进行标定,记录10mg蒸馏水所消耗的卡尔费休试剂的体积,然后进行测定,向反应杯中加入一定量的样品粉末,记录滴定至终点时所消耗的卡尔费休试剂的体积,最后通过计算得到样品的水分含量。2.4划分校正集和验证集采用K-S分类的方法将样品划分为校正集和验证集,二者的比例为2:1,得到40个校正集样品和20个验证集样品。2.5预处理方法的选择通过对原始光谱数据进行平滑、微分等预处理,可消除仪器背景或基线漂移等对光谱的影响。本次建模过程考察了MSC、SNV、一阶导数SG11点平滑、二阶导数SG11点平滑,以及MSC、SNV分别和二阶导数联用的多种方法,依据处理后的建模结果确定最终使用的方法。2.6选择光谱区间通过光谱变量的筛选,可去除大量的无关变量,大大减少建模的计算量,节省时间。本次建模过程考察了相关系数法和iPLS两种变量选择的方法,并依据模型的结果确定最终的光谱区间。3结果3.1样品的水分含量测定结果依据药典三部附录VIID 水分测定法第一法,测得60个样品的水分含量范围为1.7244-7.2012,将其作为建模用的一级数据。3.2纤原样品的近红外光谱图1为积分球漫反射模块采集的60个样品的光谱。从图中可以看出,样品的近红外光谱谱带较宽且重叠严重,而且基线漂移比较严重,不能从光谱直接得到样品水分含量的信息,需要采用化学计量学的方法对光谱进行处理和信息提取,最终建立水分含量的定量分析模型。data:image/png;base64,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

  • 整合蛋白和跨膜蛋白区别?跨膜蛋白制备详解

    [b][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白定义:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白是两类重要的蛋白质,它们在细胞分子水平上起着重要的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]整合蛋白,也称为内在蛋白或跨膜蛋白,部分或全部镶嵌在细胞膜中或内外两侧,以非极性氨基酸与脂双分子层的非极性疏水区相互作用而结合在质膜上。它们是生物膜的基本结构成分,许多具重要生理功能的膜蛋白均属整合蛋白,如膜结合的酶类、载体蛋白、通道蛋白、膜受体等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]跨膜蛋白,是可以跨越细胞膜的蛋白,它在细胞的信号传递系统中担当着重要的角色。跨膜蛋白在结构上可以分为单次跨膜、多次跨膜、多亚基跨膜等,它们具有能够跨越细胞膜的能力。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白在位置、结构和功能上存在显著的差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①位置:整合蛋白主要存在于细胞质内,细胞核或其他非细胞膜结构中,它们容易在细胞中自由移动。而跨膜蛋白则嵌入细胞膜中,一部分位于细胞膜的胞外侧,另一部分位于细胞膜的胞内侧,形成了一个穿过细胞膜的通道。[/font][font=宋体][font=宋体]②结构:整合蛋白的结构通常由两个独立的部分组成,一个是靠近细胞膜的膜结合区域([/font][font=Calibri]TM[/font][font=宋体]),另一个是靠近细胞骨架的非膜结合区域([/font][font=Calibri]N-TM[/font][font=宋体])。当接受到外界的信号时,整合蛋白的[/font][font=Calibri]TM[/font][font=宋体]区域会被激活,把来自外界的信号转化为细胞内可以识别的信号,直接参与细胞信号传导系统中。[/font][/font][font=宋体]③功能:整合蛋白主要是用来从外界传达信号到细胞内,充当细胞与外界信号的桥梁。而跨膜蛋白则在细胞的信号传递系统中担当着重要的角色。[/font][font=宋体]总的来说,整合蛋白和跨膜蛋白在位置、结构和功能上存在显著的差异,这些差异使得它们在生物体中扮演着不同的角色。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白表达与制备服务[/b][/url],制备流程图:基因合成[/font][font=宋体]→载体构建→细胞转化[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]转染→蛋白表达→细胞收集→细胞破碎→膜脂提取→膜脂增溶→蛋白纯化→质量检测,同时义翘拥有[/font][/font][b][font=宋体]三大跨膜蛋白制备平台[/font][/b][font=宋体],可以为客户提供全面的多次跨膜蛋白产品和服务。同时,为基础研究和药物研发提供更加优质的原材料。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达,类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜,形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒(直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米),不含病毒核酸,不能进行自主复制,生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台,它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面,这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构,同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域,跨膜蛋白与膜的结合非常紧密,需要用去垢剂([/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体])才能从膜上洗涤下来,[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子,疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域,亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础,当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体],临界胶束浓度)时会形成微团,增溶后,去垢剂将蛋白周围的磷脂置换,从而实现收集目标膜蛋白的目的,后续再进行蛋白纯化,最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台,利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定,与天然的生物膜非常相似,使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式,一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物([/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体])组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台,如下图(左)所示,它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白,使其变为可溶性蛋白,组装完成的蛋白样品很稳定,更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白([/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体])的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台(下图右),它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来,然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例,可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台,利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性,制备出稳定的产品,满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font]

  • 跨膜蛋白与通道蛋白的区别:跨膜蛋白制备平台详解

    [font=宋体]跨膜蛋白是生物体内广泛存在的一类蛋白质,它们在细胞膜上以不同的方式与其相互作用,从而发挥各种生物学功能。根据不同的结构和功能,[/font][b][font=宋体]跨膜蛋白可以分为三种类型:通道型跨膜蛋白、受体型跨膜蛋白和泵型跨膜蛋白。[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通道型跨膜蛋白是跨膜蛋白中最为简单的类型,它们主要的功能是在细胞膜上形成一些具有选择性通透性的孔道,使得离子和小分子物质能够通过。通道型跨膜蛋白具有多个跨膜域,通常由[/font] [font=宋体]α 螺旋和 β 折叠两种二级结构组成。α 螺旋通道如 [/font][font=Calibri]K+ [/font][font=宋体]通道能够容纳阳离子,β 折叠如离子泵[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase [/font][font=宋体]能够承载各种离子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]受体型跨膜蛋白是一类比较复杂的蛋白质,它们能够接受信号分子的结合,从而调节细胞内的生物学路径。受体型跨膜蛋白通常由单个跨膜域和两个不同构的端基组成,其中一个端基是细胞外的受体结构域,能够特异性地与信号分子结合;另外一个端基是细胞内的调节结构域,能够将受体活性传递到细胞内部。受体型跨膜蛋白具有多种作用方式,如酪氨酸激酶受体,转录因子受体等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]泵型跨膜蛋白是一类能够通过能量输入来驱动物质运输的蛋白质。它们能够将离子或者小分子物质从低浓度区域转运到高浓度区域,从而维持细胞内的化学平衡和稳态。泵型跨膜蛋白一般由多个跨膜域组成,并能借助外源性能量如[/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]进行运输。常见的泵型跨膜蛋白有[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase, H+/K+-ATPase[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供跨膜蛋白制备平台,包括:[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][font=Calibri]/Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达,类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜,形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒(直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米),不含病毒核酸,不能进行自主复制,生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台,它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面,这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构,同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]利用[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台制备跨膜蛋白具有以下优势:[/font][/font][font=宋体]? 全长跨膜蛋白,保持完整的天然构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测、抗体筛选等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州搭建了基于[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]表达系统的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]virus-like particle[/font][font=宋体])技术平台,能够将目的膜蛋白完整展示在[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]表面,使其能够像普通蛋白一样进行检测,义翘神州目前可以为客户提供膜蛋白定制服务,助力药物研发进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域,跨膜蛋白与膜的结合非常紧密,需要用去垢剂([/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体])才能从膜上洗涤下来,[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子,疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域,亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础,当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体],临界胶束浓度)时会形成微团,增溶后,去垢剂将蛋白周围的磷脂置换,从而实现收集目标膜蛋白的目的,后续再进行蛋白纯化,最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台,利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体]去垢剂技术平台的优势:[/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体]? 胶束为膜蛋白疏水基团提供保护并稳定构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测等[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定,与天然的生物膜非常相似,使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式,一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物([/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体])组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台,如下图(左)所示,它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白,使其变为可溶性蛋白,组装完成的蛋白样品很稳定,更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白([/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体])的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台(下图右),它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来,然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例,可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台,利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性,制备出稳定的产品,满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台的优势:[/font][/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]共聚物包裹的膜蛋白稳定性更好,有助于更好地研究膜蛋白的结构和功能[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测及细胞实验等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 蛋白修饰与蛋白质鉴定

    现在,在实验研究基础上,借助多方面的生物信息学方法,可以快速高通量的预测和进行蛋白质鉴定蛋白翻译后修饰。分泌蛋白和膜相关蛋白附着于细胞膜上的或将被排泄出去的蛋白质是由细胞内质网膜上附着的核糖体合成。附着有核糖体的内质网被称为糙面型内质网。这类蛋白质都含有一个N-末端(或氨基端),我们称之为信号序列或信号肽。这个信号肽通常情况下含有13-36个主要疏水性残基,同时它含有多蛋白复合物,我们称之为信号识别粒子(SRP)。这种信号肽在通过内质网膜之后会被去除。信号肽的去除过程是在信号肽酶催化作用下完成的。含有一个信号肽的蛋白质被称为前蛋白,有别于原蛋白。然而,某些用于分泌的蛋白在分泌之后会进一步被蛋白水解,因此包含有原蛋白的序列。这类蛋白质被称为前原蛋白。蛋白水解性裂解许多蛋白质在翻译之后会经历水解性裂解过程。其中最为简单的形式是去除起始蛋氨酸。许多蛋白质合成了不活跃的前体细胞,这些细胞只能在合适的生理条件下通过限制性蛋白水解过程产生活性。在凝血过程中使用到的胰腺酶和酶类就是后者的例证。多肽去除时产生活性的不活跃的前体蛋白,我们称之为原蛋白。前原蛋白的翻译后加工过程的一个复杂的例子就是脑垂体分泌合成的前阿黑皮素原的裂解过程(有关前阿黑皮素原的讨论,见肽类激素页)。这类前原蛋白经过复杂的裂解,根据合成的前阿黑皮素原的细胞定位而不同,其路径也有所不同。另一个前原蛋白的例子就是胰岛素。由于胰岛素是由胰腺分泌的,因此它有一个前肽。随着含24个氨基酸的信号肽的裂解,这类蛋白也折叠成了胰岛素原。胰岛素原进一步分裂,产生活跃的胰岛素,它包含两个肽链,由二硫键进行连接。但仍有其他的蛋白(酶类)被合成为非活跃的前体细胞,被称为酶原。酶原在蛋白水解性裂解时会产生活性,在凝血串联蛋白质链的若干蛋白质中都会发生这种现象。甲基化作用蛋白翻译后的甲基化过程主要发生在氮原子和氧原子上。活性甲基供体是活性腺苷甲硫胺酸(SAM)。最常见的甲基化作用发生在赖氨酸残基的ε-amine上。脱氧核糖核酸组蛋白中赖氨酸残基的甲基化作用可调节核染色质结构,因此可调节其转录活性。赖氨酸原本被认为是一种常设共价标记,可提供长期信号,甚至包括转录记忆时的组蛋白依赖机制。然而,最近的临床研究表明赖氨酸甲基化作用与其他共价修饰体相似,作用时间短,并能通过反脱甲基化活动进行动态调节。最近的组学研究发现表明,赖氨酸残基的甲基化作用不仅发生在核染色质层面,而且还通过修订转录因子影响基因表达。组氨酸的咪唑环,精氨酸的胍基部分以及谷氨酸盐和天冬氨酸盐的R组酰胺(R-group amides )上,都发现了额外的氮甲基化作用。谷氨酸盐和天冬氨酸盐的R组羧化物也会发生氧甲基化作用并形成甲基酯。蛋白可能在半胱氨酸的R[

  • 饲料检测_饲料水分检测_饲料粗蛋白检测

    [font=&][size=16px][color=#333333][url=https://www.woyaoce.cn/service/info-39790.html]点击打开链接:https://www.woyaoce.cn/service/info-39790.html[/url][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#333333]服务背景[/color][/size][/font]饲料是一种以大豆、豆粕、玉米、鱼粉、氨基酸、杂粕、添加剂、乳清粉、油脂、肉骨粉、谷物、甜高粱等十多种不同的饲料原料制成的饲料。饲料安全在动物产品中占有举足轻重的地位。通常情况下,只有植物的饲料才是饲料,包括草、各种谷物、块茎、根等。[font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]物理指标:感观(外观及气味)、粒度、水分、灰分、pH、混合均匀度营养成分:钙、粗脂肪、粗纤维、盐分、蛋白质、粗蛋白、维生素、微量元素含量、牛磺酸等微生物:细菌总数、霉菌数、沙门氏菌、乳酸菌、大肠菌群、酵母菌数等有毒有害物质:黄曲霉毒素B1、水溶性氯化物、挥发性盐基氮、氰化物、亚硝酸盐、三聚氰胺、重金属残留、农药残留[font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]饲料[/td][td]钙、粗脂肪、粗纤维、盐分、蛋白质、粗蛋白、维生素、微量元素含量、牛磺酸[/td][td]实验室方法[/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]菲优特检测服务形式委托检测:环境检测、食品/医药/保健品检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测等。科研服务:高校科研服务(氨基酸类、维生素类、脂肪类、糖代谢类、有机酸类、动/植物激素类、核苷酸类、生物胺类、花青素类、黄酮酚酸类、皂苷类、氮代谢类、植物提取物类、神经递质类等。生物项目研发(毒理测试、动物饲养、动物模型构建、保健食品功能性评价服务、动物实验技术服务等)。仪器共享:HPLC检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]检测平台、动物实验服务平台。方法开发及咨询:实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等

  • 【转帖】蛋白分析系统

    蛋白分析系统在我们选择蛋白分析工具的时候,通常是根据不同的蛋白来选择不同的分析手段,如凝胶电泳、化学荧光染色、质谱等等。但是目前已经研制出的蛋白分析工具的种类繁多,从这一方面也在一定程度上反映了蛋白分析的复杂性。以下是一些近期推出的蛋白分析系统,希望能帮助您轻松完成研究工作。

  • 一种新型的重组蛋白A柱

    一种新型的重组蛋白A柱

    http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif一种新型的重组蛋白A柱 洗脱条件温和,充分防止蛋白变性蛋白A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,能特异性地与人和哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区结合。因而,将蛋白A与琼脂糖凝胶以一定的方式结合,可制备用于抗体纯化的亲和填料。早期的蛋白A柱结合的都是天然蛋白A。天然蛋白A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成,分子量约42KD,结构如图一所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强,可以吸附大量的lgG。但同时,天然蛋白A的其他非结合域会和非目标蛋白结合,这样被洗脱下来的蛋白质纯度不够,会影响到后续的试验。为了解决这些问题,科学家们运用基因工程技术,克隆出蛋白A的基因,并对其进行改造,除去了一些不重要的非结合域。偶联这种重组蛋白A的琼脂糖凝胶柱在蛋白质纯化中,的确是提高了产物的纯度。目前,市场上绝大部分重组蛋白A柱都是这种产品。但是,纯化时所用的洗脱液一般为pH=2.7的甘氨酸溶液,如果洗脱效果不是很理想,还要降低pH,采用pH=1.9的甘氨酸溶液。由此可见,此法洗脱条件比较剧烈,最后收集的蛋白质很有可能变性,或者是复性困难。 这种洗脱条件剧烈的柱子结合的重组蛋白A一般具有5个串联结构域:E、D、A、B、C。虽然每个域均可以和IgG的Fc段结合,但不同的域结合强度略有差异。因此洗脱条件不均一,而且经常需要较低的pH值。GE的重组蛋白A柱即为这种类型,如图二所示。考虑到减少串联结构域的个数,并且采取同型结构域串联,就可以避免不同结构域与抗体Fc 段亲和性的差异从而使洗脱条件温和而均一,Putus研制出了含有三个串联B结合域的重组蛋白A,如图二所示。同时,我们用Putus重组蛋白A柱和GE重组蛋白A柱纯化人血浆,纯化的结果用于比较两种纯化柱的纯化效果,结果如图三所示。GE Putus 图二、重组蛋白A结构示意图待纯化样品:人血浆实验材料:GE公司的重组蛋白A柱(E、D、A、B、C结构域串联,见图二)Putus公司的重组蛋白A柱(3个B结构域串联,见图二)实验方法:分别按照每个公司的说明书来操作,洗脱条件分别为pH值3.0和4.5, SDS-PAGE检测结果如下: 上图从左边起,泳道1为标准蛋白Marker,泳道2为经过GE填料洗脱后抗体,泳道3为经过Putus填料洗脱抗体,泳道4为人血浆。从图中,我们可以看出,与GE 重组蛋白A填料从人血浆纯化抗体纯度比较,拥有3个同型结构域的Putus填料可以获得同样纯度的抗体。但是,后者的洗脱条件仅为4.5,高于前者的洗脱条件3.0。由此可见,使用具备较少B结构域的重组蛋白A柱也能获得高纯度的IgG,并且洗脱条件温和,能防止蛋白质聚集,保护蛋白质活性。http://cp00a3cee71b5f96adf6e669b5d7f56a9f11.jpg/http://C:\Documents and Settings\adim\桌面\001.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191653_632703_1672347_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912021052_187444_1672347_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912021052_187445_1672347_3.jpg

  • 酶标仪测定蛋白浓度注意事项

    1.标准蛋白溶液的配置,一定要注意吸光度不要超出仪器的量程;2. 选择合适的点数及标准蛋白的浓度;3. 加样到96孔板一定不要有气泡,4.按照试剂盒说明控制孵育时间。

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