法平板导定仪

关于大肠菌群平板计数法还有哪些困惑？1.导读经常用来衡量食品卫生情况的重要指标，绝大部分食品都会要求检测的项目。在食品微生物实验室里，大肠菌群和菌落总数的检测频次应该是最高的，但检测过程中总会有一些小问题困扰着大家，以下来讲解一下大肠菌群平板计数法的注意事项。2.方法选择相比于MPN计数法，平板计数法更适用于大肠菌群含量较高的食品。但大肠菌群多少算是含量较高呢？国标里没有明确规定，但通常认为，产品大肠菌群以100CFU/g(mL)为界，超过这个含量一般认为是含量较高。但具体什么时候选用平板计数法进行大肠菌群的检测，大部分情况还是要看你的产品执行的标准。假如产品标准要求大肠菌群含量的单位为CFU/g(mL)，那必须选用平板计数法。若是/g(mL)或者MPN/100g(mL)，就应选择MPN计数法，MPN法具体选用哪版国标此处不再赘述。因此，根据自己产品的情况选择适当的检测方法。件、酸3.培养基的要求平板计数法使用的培养基为结晶紫中性胆盐琼脂培养基，简称VRBA。无论是国标，还是培养基的使用说明中都明确表示，VRBA是不需要进行灭菌的，煮沸2min即可使用。特地点出这一点是因为很多朋友都在问VRBA的灭菌条件，对不灭菌的培养基不信任，害怕出现检测异常，那是因为这些小伙伴们对其中的原理不清楚。大肠菌群的定义是在一定培养条件下能够在发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，因此大肠菌群是不能形成芽孢的，在VRBA培养基煮沸的过程中，即使有大肠菌群存在也会被杀灭，所以从培养基带入污染的可能性是没有的。当然盛装培养基的容器是需要进行灭菌的，以免容器引入污染。另外，VRBA是一种选择性的培养基，含有的结晶紫对革兰氏阳性菌有比较强的抑制作用而对革兰氏阴性菌几乎没有作用，而且平板培养产生的菌落还需要进行复发酵的验证，因此VRBA培养基就不需要进行灭菌了。但值得注意的是，VRBA需要现配现用，配制出的培养基应当在3h之内使用完毕。4.稀释度的确定国标中要求选择2-3个适宜的连续稀释度。什么样的稀释度是合适的呢？这要根据计数来决定。计数环节要求选择菌落数在15CFU-150CFU的平板进行计数，因此培养后菌落数在这个范围内的稀释度就是适宜的稀释度。实验室经常检测的产品的大肠菌群的水平检测人员可以预计的，但是对盲样，我们能做的只有根据实际情况多检测几个稀释度了。这里需要提一句，液体样品的检测稀释度可以包括原液。5.证实试验需要从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，少于10个菌落的挑取全部的典型和可疑菌落进行BGLB肉汤管验证。这里挑取的菌落也是应当有选择的，典型菌落和可疑菌落的比例应当与平板上培养的两种菌落的比例相同或相近，这样能够降低检测过程中的误差。6.计数的报告报告过程是很多朋友存在疑问的地方，因为平板计数法的结果报告需要结合培养基菌落数和复发酵验证两方面进行计算。存在疑问的情况主要有以下几种：6.1、所有稀释度都不在计数范围内怎么办？这种情况一般都是最低稀释度的平板都小于15CFU，这种情况就是以最低稀释度的平板菌落数乘以验证试验的比例来计算。例如10倍稀释的两个平板上菌落数分别为10、8，菌落数为10的平皿挑取10个菌落复发酵中有8个菌落产气，菌落数为8的平皿挑取8个菌落复发酵中有7个菌落产气，则计算过程是这样的：(10*8/10+8*7/8)/2*10=75CFU/g(mL)。6.2、连续两个稀释度的四个平皿的菌落数都在计数范围内怎么办？这个需要参考菌落总数检测国标里7.1.2里的公式计算。我们需要先计算每个平皿的验证后的菌落数，再代入公式计算即可。例如10倍稀释度两个平皿菌落数为120和125,100倍稀释度两个平皿的菌落数为17和16，经过复发酵验证产气的管数分别为7、8、8、8，则我们先计算每个平皿上的菌落数分别为120*7/10=84,125*8/10=100,17*8/10=13.6（我们14）,16*8/10=12.8（我们计13）,然后将84、100、14、13四个数代入公式：（84+100+14+13）/（2+0.2）*10=959，结果应报告960 CFU/g(mL)。6.3、只有一个稀释度的一个平皿的菌落数在计数范围，其他均不在计数范围怎么办？这样我们只需要复发酵验证这一个平皿即可，根据这一个平皿的菌落数进行报告。例如10倍稀释度两个平皿菌落数为160和142,100倍稀释度两个平皿的菌落数为12和13，则我们只需要从菌落数为142CFU的平皿里挑取10个菌落进行复发酵验证即可，假如共有7支发酵管阳性，则应计算142*7/10=99.4，结果报告99CFU/g(mL)。其实只要是平板菌落计数的相关问题，我们都应按照GB 4789.1-2016里要求的结果与报告要求进行计算和报告即可，无论那种情况，都是万变不离其宗的。

请教下各位：倒完培养基后未凝固的平板能不能放到培养箱里等它凝固再倒置呢？

岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]有分流平板吗，岛津和安捷伦是一样的方式分流的吗？

A:普通平板玻璃与浮法玻璃都是平板玻璃。只是生产工艺、品质上不同。普通平板玻璃是用石英砂岩粉、硅砂、钾化石、纯碱、芒硝等原料，按一定比例配制，经熔窑高温熔融，通过垂直引上法或平拉法、压延法生产出来的透明五色的平板玻璃。普通平板玻璃按外观质量分为特选品、一等品、二等品三类。按厚度分为2、3、4、5、6mm五种。B:浮法玻璃是用海沙、石英砂岩粉、纯碱、白云石等原料，按一定比例配制，经熔窑高温熔融，玻璃液从池窑连续流至并浮在金属液面上，摊成厚度均匀平整、经火抛光的玻璃带，冷却硬化后脱离金属液，再经退火切割而成的透明五色平板玻璃。玻璃表面特别平整光滑、厚度非常均匀，光学畸变很小的特点。浮法玻璃按外观质量分为优等品、一级品、合格品三类。按厚度分为3、4、5、6、8、10、12mm七种。　　C:普通平板玻璃外观质量等级是根据波筋、气泡、划伤、砂粒、疙瘩、线道等缺陷多少而判定。浮法玻璃外观质量等级是根据光学变形、气泡、夹杂物、划伤、线道、雾斑等缺陷多少来判的。

UV平板打印机，虽然方便快捷，一次成型，环保，但UV平板打印机来说也比一般的机器来得贵重，这么贵重的机器改如何维护和保养呢，下面富发uv打印机厂家给大家讲解一下：1、确保UV平板打印机周围环境的清洁。工作环境灰尘太多，容易导致小车导轴润滑不良，使打印喷头在打印过程中的移动受阻，引起喷绘位置不准确或撞击机械框架造成损伤及死机。当打印喷头未回到初始位置而重新开机时，UV平板打印机首先会让打印喷头回到初始位置，接着将进行清洗喷头的操作，所以会造成墨水不必要的浪费。解决这个问题的方法是经常将导轴上的灰尘擦掉，并对导轴进行润滑。2、必须确保UV平板打印机有一个稳固的工作平台，不要在UV平板打印机顶端放置任何物品。喷绘机在工作时必须关闭其前盖, 以防止灰尘进入机内或其它坚硬物品阻碍喷绘机小车的运动。禁止带电插拔打印机电缆，这样会损坏喷绘机的喷绘口以及PC的并行口, 严重的甚至会损坏PC的主板。如果打印输出不太清晰，可用喷绘机的自动清洗功能清洗喷头，但要消耗少量墨水。若连续清洗几次之后打印仍不满意，这时可能墨水已用完，需要更换墨盒。3、关机前，让打印喷头回到初始位置(UV平板打印机在暂停状态下，打印喷头自动回到初始位置)。这样做一是避免下次开机时UV平板打印机重新进行清洗喷头操作浪费墨水，二是因为喷头在初始位置可受到保护罩的密封，使喷头不易堵塞。4、墨盒在长期不使用时应置于室温下避免日光直射。因为在这种环境中墨水蒸发得很快，很容易造成喷头堵塞。另外在低温潮湿的环境下，打印喷头电路与墨水都易出问题。5、换墨盒时一定要按照操作手册中的步骤进行，特别注意要在电源打开的状态下进行上述操作。因为更换墨盒后，UV平板打印机将对墨水输送系统进行充墨，而这一过程在关机状态下将无法进行，UV平板打印机也无法检测到重新安装上的墨盒。另外，有些UV平板打印机对墨水容量的计量是使用喷绘机内部的电子计数器来进行的(特别是在彩色墨水使用量的统计上)，当该计数器达到一定数值时，UV平板打印机判断墨水用尽。而在墨盒更换过程中，喷绘机将对其内部的电子计数器进行复位，从而确认安装了新的墨盒。6、此外UV平板打印机的光栅条，也要做好保护，不要用手去摸，不要让它沾染灰尘，以防定位不准。做好了以上几点，可以保证机器在工作和使用中长时间的不出问题，从而开足马力生产，为赚取更我的利润和以后多上机器提供可靠坚实的保障!需要购买或了解UV平板打印机可以直接到我们公司进行实地考察， 现场看机器，现场打印效果

一、实验目的了解稀释平板计数的原理，掌握涂抹平板培养法和混合平板培养法，认识细菌、放线菌、霉菌的菌落特征。二、实验原理 稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。一般用于某些成品检定（如杀虫菌剂等）、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。三、实验器材 1．活材料：苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）菌剂。2．培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（附录三、1）3．器材：90ml无菌水、9ml无菌水、无菌平皿、lml无菌吸管、天平、称样瓶、记号笔、玻璃刮铲等。四、实验方法 1．样品稀释液的制备 准确称取待测样品l0g，放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中，用手或置摇床上振荡20 min，使微生物细胞分散，静置20-30s，即成10-1稀释液；再用1ml无菌吸管，吸取10-1稀释液lml，移入装有9ml无菌水的试管中，吹吸3次，让菌液混合均匀，即成10-2稀释液；再换一支无菌吸管吸取10-2稀释液1 ml，移入装有9ml无菌水的试管中，也吹吸三次，即成l0-3稀释液；以此类推，连续稀释，制成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀释菌液（图22-1）。图22-1 平板计数法中样品的稀释和稀释液的取样培养用稀释平板计数时，待测菌稀释度的选择应根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多时，稀释度应高，反之则低。通常测定细菌菌剂含菌数时，采用10-7、10-8、10-9稀释度，测定土壤细菌数量时，采用10-4、10-5、10-6稀释度，测定放线菌数量时，采用l0-3、10-4、10-5稀释度，测定真菌数量时，采用10-2、10-3、10-4稀释度。2．平板接种培养 平板接种培养有混合平板培养法和涂抹平板培养法两种方法。 （1）混合平板培养法 将无菌平板编上10-7、10-8、10-9[fo

[color=#5f9cef][b]二者范围不同：[/b][/color]GB4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》范围中规定：“本标准第一法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数；第二法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。”[color=#f96e57]这里所说的含量高低通常以100CFU为准，即含量低于100CFU采用MPN法，含量高于100CFU采用CFU法。[/color][b][color=#5f9cef]概念不同：[/color][/b][color=#f96e57]• MPN（most probable number）法：[/color]即最近似数法，也称为最可能数法，是食品检验中常用的方法。1915年，McCrady首次发表了用MPN法 (最大可能数法) 来估算细菌浓度的方法， 这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法。[color=#f96e57]• 平板计数法 (colony forming units）：[/color]CFU 即菌落形成单位，样品经过处理培养后我们数出平板上所生长出的菌落个数，从而计算出每毫升或每克待检样品中可以培养出多少个菌落，以CFU/ml或CFU/g报告之。[color=#f96e57]• 滤膜法（membrane filter method）：[/color]将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的菌落，依据过滤水样计算每升或每100毫升水样中的菌落总数。[color=#f96e57]• 菌落：[/color]是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。[b][color=#5f9cef]原理不同：[/color][/b][color=#f96e57]• MPN法：[/color]利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰，并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。因为细菌在样本内的分布是随机的，所以检测细菌时，可应用概率理论计算菌数，实验结果以MPN值表示，但MPN值并不能表示实际菌落数， 实际菌落数有可能落在置信区间内的任何一点，MPN值是落在这个置信区间内概率最大的一点。举例说：稀释度为 0.01，0.001，0.0001所对应的阳性管数分别为 2-0-0 ；查MPN检索表可知：MPN值为92 CFU/ml(g), 当置信度为95%，则其下限和上限分别为14，380，即对应的菌落浓度区间为14~380 CFU/ml(g)，意思是：这个检验结果显示细菌浓度落在14-380 CFU/ml(g)区间均有可能，只不过92 CFU/ml(g)出现的概率最大，概率为31.9%. [color=#f96e57]平板计数法[/color]：平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散为单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。[color=#f96e57]滤膜法：[/color]在压力差的作用下，悬浮液中的液体（或气体）透过可渗性介质（过滤介质），直径大于网孔直径的菌体为介质所截留，从而实现样品和菌体的分离。然后将滤膜放在适当的培养基上进行培养，菌体可直接在膜上生长，从而可直接计数。[b][color=#5f9cef]MPN优缺点[/color][/b][color=#f96e57]优点：[/color]操作简便、灵敏度较高，时间短，可直接观察试管得出结论，每个接种稀释度均有重复，重复次数越多，误差就会越小。[color=#f96e57]缺点：[/color]要求样品具有均一性，适合检验液体样品，且只能用于检验在发酵培养基中产气的菌种。[color=#f96e57]注意事项：[/color]需选择合适的稀释度和接种量。[b][color=#5f9cef]平板计数法优缺点[/color][/b][color=#f96e57]优点：[/color]1、能测出样品中的活菌数，直观，能够直接读数2、平板菌落计数法通常做梯度稀释，所以计数的线性范围大。3、由于是菌悬液倾注或涂布，所以比较均匀，能较好的反应菌落的疏密程度。4、灵敏，平行性较好。[color=#f96e57]缺点：[/color]1、手续较繁，而且测定值常受各种因素的影响。2、厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，比较难检测出。3、菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。4、长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。5、检验时间长。[color=#f96e57]注意事项：[/color]样品需要充分均匀以及选择合适稀释度和接种量，检验过程必须严格无菌，以防污染杂菌。[b][color=#5f9cef]滤膜法优缺点 [/color][/b][color=#f96e57]优点：[/color]1、可以检测大量的样品。2、浓缩效应使微生物检测的准确度提高。3、带有菌落的滤膜，可作为检测的永久记录存档。4、可见的菌落和样品量直接对应，得出定量结果。[color=#f96e57]缺点：[/color]1、成本高。2、操作要求高。[color=#f96e57]注意事项：[/color]对样品的流动性要求比较高，并且含菌量不能太高。[b][color=#5f9cef]分类以及操作方法[/color][/b][color=#f96e57]MPN法：[/color]根据需要以及检验的精度不一样可使用9管法以及15管法；其中9管法通常用作食品检验，而15管法用在饮用水的检验（15管法的精度要高些）；基本操作：样品梯度稀释——接种——培养——观察结果——查表报告。[color=#f96e57]平板计数法：[/color]有平板倾注法，一般检验使用的方法；平板涂布法，用于细菌含量比较高，并且要求知道细菌菌落形态（只计数特定细菌）；以及滤膜法，检测特定种类菌常用方法，应用越来越广泛；基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。（滤膜法是：样品——过滤——贴滤膜——培养 ——计数报告。）[b][color=#5f9cef]适用性[/color][/b][color=#f96e57]MPN法：[/color]适用于具有特殊生理功能的微生物类群或者检测带有大量竞争菌的食品及其原料和未经处理的含少量金黄色葡萄球菌的食品（土壤、污水、牛奶等）。[color=#f96e57]平板计数法：[/color]应用广泛，是检验、菌种分离、纯化等用得最多的方法（固体、液体样品均可）。[color=#f96e57]滤膜法：[/color]主要应用于洁净度较高的样品，并且样品的流动性决定了可操作性。[b][color=#5f9cef]卫生学意义[/color][/b]两者都是检测的活菌数，MPN是通过极大近似值然后估计，求出分布函数中的参数、置信区间，再估计；但是CFU通过数据直接求数学期望，平均值和方差。测定结果判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，一定程度反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。

刚换了柱子，隔垫（绿色低温隔垫），衬管，老化完柱子后打甲苯溶剂噪音很高，千万级别，到处都是149，也就分流平板没换了，应该是分流平板脏了，不知道哪个知道岛津GCMS分流平板怎么卸下来，如何清洗？[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09508.gif[/img]

各位，在用平板沉降法（普通营养琼脂培养基）检测室内空气细菌时，标准规定的5min，经过平板采样培养后，菌落数偏少，基本在1-3个。可以把采样时间延长至10分钟的吧，或者各位，在对空气细菌检测过程中需要注意哪些？？

2011年，平板电脑已经进入到百花齐放的年代，众多品牌的平板电脑群雄奋起，其性能也在翻番。近日，我在采购一款样品前处理设备时看到，厂家紧跟潮流，也配置了iPad。这样一来，远程监测分析仪器，就有了可能。你认为明年起，跟光谱仪器配套的电脑，会改为平板电脑吗？

请问，平时在测量罐体高度时，用作基准平面的花岗岩平板，也需要检定或是校准吗？谢谢

一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使其成单个细胞存在，否则一个菌落就不只是代表一个细胞，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。一般用于某些产品检定，如根瘤菌剂等产品检定，生物制品检验，土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。自然条件下，微生物常以群落状态存在，这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物，必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。在自然界中，土壤是微生物生活的良好环境，其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的，因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关，肥沃的土壤中多，贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质，如通气、pH有关，例如在通气良好的菜园土中，好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌，并进行数量测定。分离微生物时，一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同，供给它们适宜的生活条件，或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长，不利于其它菌种生长的环境，从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法，根据不同的材料，可以采用不同方法，其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落，必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时，还可以同时测定待分离的微生物的数量。放线菌与细菌同属原核微生物，是重要的抗生素产生菌，在土壤中的数量仅次于细菌，尤其是在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多。本实验采用高氏一号琼脂培养基分离和计数菜园土中的放线菌。真菌在土壤中的数量次于细菌和放线菌，主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性土壤中较多。分离土壤中的真菌并不难，但由于其菌落大，容易扩展，计数准确性较低。本实验采用加有氯霉素或庆大霉素和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数菜园土中的真菌。按一般资料介绍为链霉素，但此种抗生素要先配成一定浓度的溶液，且应于倒平板前才加入培养基中。在此培养基上，放线菌和细菌被氯霉素或庆大霉素和孟加拉红所抑制，但大多数真菌能够生存，且其菌落受孟加拉红的抑制而较小，从而避免了某些真菌的扩散蔓延而带来的数量上的误差。

[font=宋体, SimSun]涂布平板法是一种常用的微生物学实验技术，主要用于分离、纯化和计数微生物。以下是该方法的详细介绍：[/font] [font=宋体, SimSun][color=#021eaa][b]实验原理[/b][/color][/font] [font=宋体, SimSun]涂布平板法的基本原理是通过[b][color=#ab1942]将微生物悬液进行稀释，然后将稀释后的悬液均匀涂布在固体培养基表面。[/color][/b]这样，微生物在培养基上生长时能够形成单个菌落，从而实现微生物的分离和纯化。[/font] [font=宋体, SimSun][color=#021eaa][b]操作步骤[/b][/color][/font] [list][*] [font=宋体, SimSun]准备培养基：选择适当的固体培养基，如营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂等，按照说明书或实验要求配制并灭菌。待培养基冷却至适宜温度后，倒入无菌平板中，使培养基在平板底部均匀铺展。[/font] [/list][align=center] [/align][list][*][font=宋体, SimSun]稀释微生物悬液：取一定量的微生物悬液，用无菌生理盐水或其他适当的稀释液进行逐步稀释。通常需要进行10倍系列稀释，以获得不同浓度的微生物悬液。[/font][*][font=宋体, SimSun]涂布平板：取适量稀释后的微生物悬液，用无菌玻璃刮刀或涂布器均匀涂布在固体培养基表面。涂布时要保持手法的稳定性和一致性，以确保微生物在培养基上分布均匀。[/font][*] [font=宋体,SimSun]培养微生物：将涂布好的平板倒置放入恒温培养箱中，设置适当的温度和湿度条件进行培养。[b]培养时间根据微生物的种类和生长特性而定，一般需要24~48小时。[/b][/font] [/list] [font=宋体, SimSun][color=#021eaa][b]注意事项[/b][/color][/font] [list][*][font=宋体, SimSun]无菌操作：实验过程中要使用无菌器具和培养基，并在无菌工作台或超净工作台上进行操作，以避免微生物污染。[/font][*][font=宋体, SimSun]稀释倍数的选择：选择合适的稀释倍数是实现微生物分离和纯化的关键。稀释倍数过高可能导致微生物在培养基上无法形成菌落；稀释倍数过低则可能导致微生物在培养基上过度生长，形成菌落重叠。[/font][*] [font=宋体, SimSun]涂布技巧：[color=#ab1942][b]涂布时要保持手法的稳定性和一致性，涂布速度要适中，避免过快导致微生物分布不均或过慢导致培养基干燥。[/b][/color][/font] [/list] [font=宋体, SimSun][color=#021eaa][b]结果分析[/b][/color][/font] [font=宋体, SimSun]通过对涂布平板法得到的平板进行观察和计数，可以估算出原始微生物悬液中的微生物数量。观察平板上菌落的形态、大小和颜色等特征，可以初步判断微生物的种类和生长状态。[/font] [font=宋体, SimSun][color=#021eaa][b]稀释涂布平板法计数微生物的计算公式[/b][/color][/font] [font=宋体,SimSun]稀释涂布平板法是一种常用的微生物计数方法，通过对样品进行稀释并将稀释液均匀涂布于平板上，再根据平板上生长的菌落数量进行统计计算。在该方法中，每克样品中的菌株数可以通过以下公式计算得出：[color=#ab1942][b]菌株数 = （C ÷ V） × M。[/b][/color][/font] [font=宋体, SimSun]其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用稀释液的体积，M代表稀释倍数。通过这个公式，我们可以准确地根据实验结果计算出样品中微生物的数量，为微生物学研究和实验提供了重要的定量依据。[/font] [align=center] [/align][font=宋体, SimSun][color=#3daad6][b][size=17px]误区一——对平均菌落数的理解[/size][/b][/color][/font] [font=宋体,SimSun]在微生物实验中，对平均菌落数的理解至关重要，它反映了样品中微生物的数量，并直接影响到实验结果的准确性和可靠性。[b]在实验过程中，如果空白对照显示有菌生长，说明可能存在污染现象，即质控不在控，此时就不能简单地将所有实验得到的菌落数取平均值。[/b]相反，需要分析可能的污染原因并重新进行实验，以确保实验结果的可信度。[/font] [font=宋体, SimSun]另外，重复实验也是确保实验结果准确性的重要手段。通过在同一稀释度下涂布多个平板并统计菌落数的平均值，能够减小实验误差并提高数据可靠性。在重复实验中，如果某个平板的菌落数与其他平板相差较大，说明可能存在操作失误，这时应该舍弃该数据，并找出原因进行修正。[/font] [font=宋体, SimSun]在计算每克样品中某种菌株数量时，应只考虑符合该菌落特征的菌落数的平均值，避免将其他菌种形成的菌落数计入其中，以确保数据的准确性和可比性。深入理解平均菌落数的概念和正确运用相关原则，能够为微生物实验结果的可靠性提供保障。[/font] [font=宋体, SimSun][color=#3daad6][b][size=17px]误区二——对稀释倍数的判定[/size][/b][/color][/font] [font=宋体, SimSun]在微生物计数实验中，稀释倍数的合理设定对于确保有效活菌数的准确测定至关重要。稀释倍数过大会导致菌落数过少，可能引起计数误差过大；而稀释倍数过小会导致菌落数过多，使计数变得困难。因此，在选择稀释倍数时，需要根据待测样品中微生物数量的预估值来合理设定，以求得准确可靠的实验结果。[/font] [font=宋体, SimSun]举例来说，若测定土壤中细菌数量，[color=#ab1942][b]一般选择10[sup]4[/sup]、10[sup]5[/sup]和10[sup]6[/sup]倍稀释，因为土壤样品中细菌数量可能较为丰富；而测定放线菌数量时，一般选用10[sup]3[/sup]、10[sup]4[/sup]和10[sup]5[/sup]倍稀释，因为放线菌的数量相对较少[/b][/color]。对于真菌数量的测定，则一般选用10[sup]2[/sup]、10[sup]3[/sup]和10[sup]4[/sup]倍稀释。对于自来水中大肠杆菌数量的测定，一般不需要进行稀释，可以直接进行涂布培养。[/font] [font=宋体, SimSun]通过合理选择稀释倍数，可以使待测样品中微生物的数量落在适宜计数范围内，既能保证准确性又能提高实验的操作性。因此，对稀释倍数的判定不宜盲目一致，而应根据具体实验需要和待测微生物数量进行科学合理的设定，以确保微生物计数实验结果的可靠性和准确性。[/font] [font=宋体, SimSun][color=#3daad6][b][size=17px]误区三——对体积与质量的单位换算[/size][/b][/color][/font] [font=宋体, SimSun]在微生物计算中，涂布平板时所用的稀释液体积通常表示为V，一般为0.1mL（毫升）。[b]然而，当待测样品中微生物数量较少时，接种0.1mL稀释液到平板上培养后菌落数未达到30，这时可以考虑增大接种量，例如接种1mL稀释液，以增加菌落数的检测灵敏度。[/b][/font] [font=宋体, SimSun]在实验中，可以通过体积和质量的单位换算公式来进行计算，即体积 = 质量 / 密度(V = m / ρ)。水的密度为1g/cm3，因此质量为1g的水的体积为1cm3，也等于1mL。这意味着1cm3等于1000μL，1mL等于0.001L。通过这样的换算公式，可以方便地在体积和质量之间进行转换，确保实验中的计量单位正确无误。[/font] [font=宋体, SimSun]因此，在微生物实验中，正确理解和使用体积与质量的单位换算是确保实验数据准确性和可靠性的重要步骤。合理选择适宜的接种体积，可以提高微生物计数的准确度，从而获得更可靠的实验结果。[/font] [font=宋体, SimSun][color=#3daad6][b][size=17px]误区四——对统计误差的分析[/size][/b][/color][/font] [font=宋体, SimSun]从稀释涂布平板计数的原理来看，该方法统计的菌落数往往会低于活菌的实际数量，这主要是因为样品难以完全分散为单个细胞，当存在两个或多个活细胞连在一起时，在平板上观察到的只会形成一个菌落。[/font] [font=宋体, SimSun][b]在整个稀释涂布平板计数的过程中，稀释倍数的选择是否合适、涂布是否均匀、培养环境是否能够促进微生物正常生长，以及计数过程是否存在漏计或重复计数等情况，都会对实际统计结果产生影响。[/b][/font] [font=宋体, SimSun]除了以上因素外，还需要考虑到培养时间对菌落数的影响。菌落数目应该在一定时间间隔内进行统计，选择菌落数目相对稳定时的记录作为最终结果。这样能够避免因培养时间不足而导致漏计菌落的情况发生。[/font]

怎样倒平板才能尽量少的产生冷凝水，说说你的经验和心得。体会

大肠菌群平板法培养24小时没有生长，培养38小时后生长，这是什么原因呢？

同一批倒的平板，个别菌落总数平板浑浊不清亮是什么原因？涂抹和空气沉降从来不会有这种现象，同一个样品有时两个同时浑浊的比较多，有时偶尔一个

发现分流平板肉眼可见脏了，打算清洗下。按照步骤拿走衬管、拆调色谱柱头、保温套，1/2扳手拧螺丝——拧不动，换大哥拧——依然不动。有点慌，可以暴力拧吗？搜索有拧断的，请问怎么办？PS：感谢楼下各位，换了位大哥拧开了。中心有深色斑点，倒是倒不出来的，擦也擦不掉。超声能变浅一点

以前初学微生物检测时师傅教俺说倒完培养基后平板左三圈右三圈使培养基跟样液混匀但前段时间在一标准上说混匀时只能朝一个方向各位平时是咋弄的呀？

请教各位、培养后出完结果的平板应该是正着放还是倒着放！！

我请教过几个人，他们对这个问题的回答不一致，有人说倒置是怕染菌，还有人说倒置是因为怕培养皿顶部的水珠滴到平板上，不易形成清晰规则的菌落。我昨天培养酵母时，实验室的人告诉我酵母不用倒置。为什么？？

前天我进行了金葡的国标定量法与3M测试片的对比实验，是称取了25g的香辣酱，挑取了之前保留的金葡质控样长出的菌放在样液里；今天出平板的结果，一共做了六个梯度，只有-3的三个板长了菌，昨天出的测试片的结果，一个都没有长。我想请教一下这是什么情况，第一次遇见。

有些自制的平板，因煮沸的过程会产生一些气泡，倒出后会留在平板的边缘部分，看着和用着都有点美中不足，不知道有没有办法解决？

给位高手，谁能告诉我分流平板在哪里？最好发段视频，呵呵！！我们现在用的是6890N，分流不分流（毛细柱）进样口，现在感觉进样口好像有点污染，想拆下来清洗一下，拆了好几次，就是没找到分流平板，哪位高手知道！！

[font=SimSun, STSong, &]菌落总数测定时，培养基是卵磷脂、吐温80-营养琼脂，200ml培养基加了0.5%TTC 2ml, 平板上细菌围着平板长了一圈，是什么原因？麻烦各位大神帮忙解答下。[/font]

[font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（1）菌落长在一起有三种情况：[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]①平板上存在杂菌，杂菌污染造成菌落集中在一起；[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]②配制培养基时没有将样品混匀，使营养物质分布不均匀，导致菌落长在一块；[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]③稀释涂布平板法：在稀释涂布时，未能均匀涂布；平板划线法：划线太重，接种针的原菌种未能分散开来。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（2）菌落和菌苔有什么区别？[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]①菌落：是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]②菌苔：是细菌在固体培养基接种线上由母细胞繁殖长成的一片密集的、具有一定形态结构特征的细菌群落，一般为大批菌落聚集而成。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]③菌落与菌台的区别：[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]菌落：圆形边缘整齐，表面光滑，半透明，小凸起；在伊红美蓝琼脂平板上：深紫黑色、光滑、湿润、带有金属光泽的圆形菌落。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]菌苔：边缘光滑整齐；表面较透明；显出鲜艳的颜色；显得湿润，易被接种环挑起。[/color][/size][/font]

记得看过一个帖子，说是分流平板脏了，需要清洗，这个平板起到什么作用？对应于岛的仪器的哪一个部件？如果脏了会有什么症状？需要如何操作清洗？大家来讨论一下！相关链接：点击打开链接

很多时候遇到倒平板时会有气泡导致计数麻烦培养基第二次使用加热后会产生很多气泡这些气泡如何避免呐?

7寸平板，好大个。你买那个，还不如买个笔记本。同样配置的，笔记本肯定比平板便宜吧。要买平板，就买3.5寸的。支持多点触控，就行了。3.5寸的，看个文档，比如pdf,word文档，都没问题的。上网，应该没问题吧。关键这个尺寸正好。你拿个7寸的到处跑....也太扎眼了，呵呵。