上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国重实验室科学家基于naica?微滴芯片数字PCR系统建立了肺炎克雷伯菌的数字PCR检测方法。数字PCR检测灵敏度最低检出限可达到3.37copies/μL;方法的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于25%;本研究利用优化后的数字PCR方法共检测了28 株临床菌株,检测到14株为肺炎克雷伯菌,14株为其他种属,该方法特异性好、灵敏度高、准确度高,适合肺炎克雷伯菌的核酸检测和定量分析,也为其他临床病原菌的分子检测提供了新的技术参考。
数字PCR是继普通PCR和qPCR(real time PCR,实时荧光定量PCR)之后的第三代PCR技术,与qPCR相比,数字PCR具有更高的灵敏度,且无需标准品,采用终点信号扫描计数,不依赖Ct值,能有效克服PCR抑制剂的影响,能灵敏地验出ASFV病毒,深蓝云生物科技开发非洲猪瘟病毒的数字PCR检测方法,尽早发现,有效防控。