包材微生物检测

谁知道药包材都要检测哪些微生物？方法和标准是什么？谢谢！

各位同仁： 我们公司做药品包装材料的。现在公司要求我们要对产品进行微生物检测。请教各位同行,对于药品包装材料进行微生物检测要怎样取样。急！！！ （我们公司产品主要是塑胶瓶）

[size=14px]点击链接查看更多：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-24988.html[/url]医药包材[font=&]生物相容性试验检测需要动物试验来完成测试，通过包材在动物身上的反应来进行医药包材生物相容性评价试验，评价医药包材的质量，通常需要做生物相容性的除了医药包材生物相容性检测，以及医疗器械生物相容性检测，口罩无纺布类生物相容性测试服务，测试项目有细胞毒性检测，皮肤刺激试验，热源、血[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]容性、遗传毒性等，国联质检建立有全国仅有大型GLP安评实验室，并获得实验动物使用许可资质，不仅可以提供给生物相容性检测服务，还可从事保健食品、消毒产品、农药、兽药、危废等毒理检测项目，总部设立在陕西西安，检测实验室遍布200个主要市区，服务全国300地市区，覆盖范围有北京市,河南省,郑州,江苏省,南京,四川省,成都,山西省,太原,山东省,济南,广东省,广州,江西省,南昌,甘肃省,兰州,青海省,西宁,湖北,武汉,湖南，长沙，福建，福州，新疆，乌鲁木齐,内蒙，呼和浩特,宁夏，银川,广西,南宁，浙江，杭州,上海,天津,重庆,安徽，合肥,黑龙江,哈尔滨,吉林，长春,辽宁，沈阳,河北，石家庄,贵州，贵阳,云南等，出具报告全国认可。[/font][/size][align=center][size=14px][font=&][img=神马logo.jpg]https://img2.17img.cn/pic/kind/20201223/20201223162154_1123.jpg[/img][/font][/size][/align][size=14px][font=&]生物相容性测试主要标准[/font][/size][size=14px]ISO10993测试也叫医疗器械生物学评价 目前需要做生物相容性测试的产品一般都是医疗用品，包括医疗器械以及医疗药物，测试所参照的标准主要是ISO10993和GB/T16886，两种标准的内容基本一致。主要测试项目一般保含以下几个部分：[/size][size=14px]第 1部分:评价与试验 [/size][size=14px]第 2部分:动物保护要求 [/size][size=14px]第 3部分:遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验 [/size][size=14px]第 4部分:与血[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]互作用试验选择 [/size][size=14px]第 5部分:体外细胞毒性试验 [/size][size=14px]第 6部分:植人后局部反应试验 [/size][size=14px]第 7部分:环氧乙烷灭菌残留量 [/size][size=14px]第 8部分:生物学试验参照材料的选择与定量指南 [/size][size=14px]第 9部分:潜在降解产物的定性与定量框架 [/size][size=14px]第 10部分:刺激与迟发型(持续型)超敏反应试验 [/size][size=14px]第 11部分:全身毒性试验 [/size][size=14px]第 12部分:样品制备与参照样品 [/size][size=14px]第13部分:聚合物医疗器械的降解产物的定性与定量 [/size][size=14px]第14部分:陶瓷降解产物的定性与定量 [/size][size=14px]第 15部分:金属与合金降解产物的定性与定量 [/size][size=14px]第 16部分:降解产物和可溶出物的毒代动力学研究设计 [/size][size=14px]第 17部分:可溶出物允许限量的确立 [/size][size=14px]第 18部分:材料化学表征。[/size][size=14px]测试项目比较多，但不是所有的产品都要做全套的测试项目，主要是根据产品的使用方法以及产品的作用性能决定的!目前做的zui多的测试主要是第 5部分:体外细胞毒性试验和第 10部分:刺激与迟发型(持续型)超敏反应试验。[/size][size=14px]目前国内能做该测试机构不多，主要是一些大型外资测试机构和国内的部分研究院，而且测试周期和测试价格相差非常大，有的公司要1万多，有的公司要四五千，所以企业在选择测试机构的时候就会非常头疼，不知道哪家机构是正规的，更不知道到底需要多少费。在选择测试机构的时候我们需要注意非常重要的一点，是检测报告单上必须标有CMA或CNAS标志，不然该报告是没有法律效应的。[/size][align=center][img=gl_20161012110932_61720.jpg]https://img2.17img.cn/pic/kind/20201223/20201223161822_8777.jpg[/img][/align][size=14px]国联质检专业检测试验机构，提供的价格和服务非常不错，自有检测实验室，一站式检测试验服务，实惠和贴心，大学研究机构合作，国联质检9年的检测经营具有专业技术人员非常了解试验的要求和方法，会提供给企业很多优化建议，使检测的通过率大大提高 如果企业检测的通过率偏低，那会浪费很多的财力和时间，而且影响产品的销售，从而影响公司效率和效益!企业如有需要进行测试的。请直接咨询国联质检[/size]

摘 要：食品用玻瓶是不可或缺的一部分，市场中玻璃材质瓶体食品市场占有率很高。根据相关数据显示食品用的比例约为20%左右。玻璃瓶装食品的无菌保证不仅取决于生产过程中过滤、终端灭菌等生产工序的控制，包装材料的密封性也尤为重要。采用微生物侵入法对食品包装密封性中检验方法进行研究。 本次实验应用《GB 4789.26-2023食品安全国家标准 食品微生物学检验 商业无菌检验》1]和《GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》2]方法对玻璃瓶产品进行检验时，只能产看检验结果，不能清晰确定商业无菌或菌落总数检验后产品微生物不合格的具体原因。所以采用制作型式缺陷样品。采用激光打孔制备不同缺陷的低硼硅玻璃瓶做为型式缺陷样品，并在包装中填充样品、污染铜绿假单胞菌样品、培养基的方式，通过微生物菌落计数、无菌检查的方法确定玻璃瓶包装密封性情况，并形成检验方法。 关键词：微生物；包材检验；密封性；商业无菌；GB 4789.26-2023；玻璃材质 中图分类号：Q93-33 Abstract: Glass bottles for food are an indispensable part, and the market share of glass bottle bodies for food is very high. According to relevant data, the proportion of food used is about 20%. The sterility assurance of glass bottled food depends not only on the control of production processes such as filtration and terminal sterilization, but also on the sealing of packaging materials. Study on the inspection method of food packaging sealing using microbial invasion method. When using the methods of "GB 4789.26-2023 National Food Safety Standard Microbiological Examination of Food - Commercial Aseptic Inspection" and "GB 4789.2-2022 National Food Safety Standard Microbiological Examination of Food - Determination of Total Bacterial Count" toinspect glass bottle products in this experiment, only the inspection results can be observed, and the specific reasons for the product's microbiological failure after commercial aseptic or total bacterial count inspection cannot be clearly determined. So we adopt the production of defective samples. Low borosilicate glass bottles with different defects were prepared using laser drilling as type defect samples, and the packaging was filled with samples, contaminated with Pseudomonas aeruginosa samples, and culture medium. The sealing condition of the glass bottle packaging was determined by microbial colony counting and sterile inspection, and an inspection method was developed. Keywords: microorganisms Packaging material inspection Sealing performance Commercial sterility GB 4789.26-2023； Glass material 1绪论 1.1研究对象 玻璃瓶材质食品包装的密封性能和微生物污染程度，检测方法多用商业无菌或者菌落总数的检验方法进行测试。但随着食品种类的持续增多，一些不容易被人们发现的食品污染正悄然出现在市场中，由此引发了严重的食品安全问题，给人们的生命安全造成了严重威胁3]。出现密封不严、微生物不合格时，很难排查出具体根本原因。微生物污染包括细菌性污染、病毒和真菌及其毒素的污染。据世界卫生组织估计，在全世界每年数以亿计的食源性疾病患者中，70%是由于食用了各种致病性微生物污染的食品和饮水造成的。玻璃罐装的食品呈现配方多样化、成分复杂化，包材的密封不严直接导致产品微生物不合格。严格包装密封性能至关重要。对包材密封性进行重点监控检测，保障终端产品安全。本文旨在利用微生物侵入的方法对包材密封性能进行研究，对培养基 、菌液、缺陷样品、正常产品进行分析验证，并得出有效结论。 1.2立题依据 食品微生物检验是食品安全防控工作的重要环节。适宜的检验技术和规范的检验操作是有效控制食品质量和安全、保证食品卫生、为人们提供健康的食品供应的关键4]。微生物侵入法检测食品包材密封性能，适用于所有玻璃材质包装的食品。研究表明微生物检测技术能够检出食品中的致病微生物，分辨具体种类，应用价值良好5]。此种方法将样品中的内容物完全侵入到稀释后的菌液中，通过真空、正压力、常压测试，利用内容物中商业无菌和菌落总数检验的方法，实现包材密封性能的测试检验。在微生物侵入法在实际应用过程中表现出灵敏、准确并且重复性好等多方面优点，且不受包材外观及形状的影响。经过验证微生物侵入法可作为各种包材密封性能测试的有效方法。 2材料 2.1仪器 稳定性试验箱（上海博迅医疗生物仪器股份有限公司）、培养室生化培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）、立式压力蒸汽灭菌器（上海博迅医疗生物仪器股份有限公司）、BL-220H千分之一电子天平（日本岛津）、ZF-920自动培养基分装器（上海昨非）、激光打孔机、压力真空表、温度计。 2.2试剂、标准品、耗材 胰酪大豆胨液体培养基（GCP168A）、铜绿假单胞菌（CICC 24649)、水为GB/T 6682-20086]规定的一级水。 3方法与结果 3.1 利用培养基模拟食品密封性检验 1）培养基模拟物制作 胰酪大豆胨液体培养基作为非选择性培养基，适合铜绿假单胞菌（CICC 24649)生产，为菌落生长提供营养支持。准确称取胰酪大豆胨液体培养基45g，加入70℃以上的水1.5L,搅拌使其溶解均匀，做好标识备用。培养基装入玻璃容器中，控制培养基液体经0.45μm过滤器过滤后进入分液器，利用分液器加入培养基，并充入氮气。整体进行121℃灭菌30min。取出全部灭菌产品进行外观完整性检查。 2）培养基模拟物型式缺陷样品制作 模拟食品包装填充培养基后，制作缺陷样品。采用激光打孔机器对食品用玻璃瓶体打孔，设计了实验进行分析如表1： 表1分析实验设计 Table 1 Analysis Experiment Design 玻璃瓶规格漏孔位置漏孔尺寸500mL瓶身2μm5μm 3）验证培养基可以作为模拟物实验 分别将玻璃瓶内装入培养基、型式缺陷样品于20～25℃培养7天。为了达到极限条件再置于30～35℃培养7天。后逐支进行商业无菌和菌落总数检验，结果均合格，符合GB 4789.26-2023食品安全国家标准 食品微生物学检验 商业无菌检验》的要求。说明培养基可以作为模拟物用于本次微生物侵入法在食品密封性中检验方法研究。检验结果如表2： 表2检测结果 Table 2 Test Results 样品名称样品编号商业无菌检测结果菌落总数检测结果培养基模拟物制作1符合商业无菌未检出（＜10 CFU）2符合商业无菌未检出（＜10 CFU）3符合商业无菌[/font]未检出（＜10 CFU）4符合商业无菌未检出（＜10 CFU）5符合商业无菌未检出（＜10 CFU）培养基模拟物型式缺陷样品制作6符合商业无菌未检出（＜10 CFU）7符合商业无菌未检出（＜10 CFU）8符合商业无菌未检出（＜10 CFU）9符合商业无菌未检出（＜10 CFU）10符合商业无菌未检出（＜10 CFU） 3）培养基促菌生长能力检验 为了确定经过14天放置的培养基仍然具备菌株促生长能力，对检验后的培养基进行促菌生长能力检验。将培养基在无菌条件下倒入灭菌的18×180mm试管内，每个管内12ml，其中两管各接入铜绿假单胞菌100cfu，另外一管作为阴性对照，在30～35℃下培养7天。后培养后的培养基进行菌落计数检查。结果均有大量菌落生长，同时对照样品无菌落生长。说明培养基放置仍然具备促生长能力。检验结果如表3： 表[font=宋体]3检测结果Table 3 Test Results 样品名称样品编号接入铜绿假单胞菌数量培养后菌落总数检测结果培养基模拟物制作1100 CFU/mL1.6×106 CFU/mL2100 CFU/mL2.9×106 CFU/mL3100 CFU/mL1.3×106 CFU/mL4100 CFU/mL9.1×106 CFU/mL5100 CFU/mL3.2×106 CFU/mL培养基模拟物型式缺陷样品制作[font=宋体]6100 CFU/mL1.2×108 CFU/mL7100 CFU/mL3.7×107 CFU/mL8100 CFU/mL1.9×108 CFU/mL9100 CFU/mL5.1×108 CFU/mL10100 CFU/mL7.2×105 CFU/mL 3.2 微生物侵入试验 1）确定实验用铜绿假单胞菌的活力 为保证本次实验使用铜绿假单胞菌（CICC 24649)的冷冻甘油管的浓度＞108cfu/mL。取冷冻甘油管1支，全部接种至200ml胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24h，取培养后的铜绿假单胞菌10-7[font=宋体]～10-9稀释液各1ml，用胰酪大豆胨琼脂培养基15～20ml注皿，各平行测定两皿，30～35℃培养48h，在24小时与48小时分别计数。铜绿假单胞菌菌悬液计数，结果菌液浓度均＞108cfu/mL。说明铜绿假单胞菌活力正常可用于微生物侵入实验。 2） 微生物侵入实验 将铜绿假单胞菌培养物加入装有适宜胰酪大豆胨液体培养基的不锈钢密封槽（200mL培养物加入16L胰酪大豆胨液体培养基中），搅拌均匀，作为微生物侵入试验用菌悬液。将试验用菌悬液置于10L密封不锈钢罐中作为侵入实验装置。取培养基模拟物样品和培养基模拟物型式缺陷样品各15瓶，同时放入到10L密封不锈钢罐中，使样品全浸泡于菌悬液中，确保瓶体部分与菌悬液充分接触后。分别模拟真空、高压、常压的放置条件对样品进行侵入实验。其中负压真空值-0.025MPa保持3小时；正压0.025MPa保持3小时；常压浸泡3小时。 从不锈钢罐中取出浸泡菌悬液后样品。先置装有0.2%新洁尔灭的不锈钢密封槽中浸泡10分钟，然后取出浸泡于另外一装有新洁尔灭的容器中，浸泡10分钟后，再用杀孢子消毒液消毒玻璃瓶表面，最后用纯化水冲洗，擦干瓶外残余液体备用。分别单独装入低密度聚乙烯袋中密封。置于30～35℃下培养7天，逐日观察瓶内培养基中微生物生长情况并做好记录。逐日观察并记录生长情况。结果其中正常培养基模拟物样品在三种条件下均符合商业无菌要求，没有菌落生长；培养基模拟物型式缺陷样品在三种条件下均不符合商业无菌要求，有大量菌落生长。说明在此工艺条件和灌装密封过程能够保证玻璃瓶体密封。检验结果如表4： 表4检测结果 Table 4 Test Results 样品名称样品编号测试条件商业无菌检测结果菌落总数检测结果培养基模拟物制作1负压真空值-0.025MPa保持3小时符合商业无菌未检出（＜10 CFU）2符合商业无菌未检出（＜10 CFU）3符合商业无菌未检出（＜10 CFU）4符合商业无菌未检出（＜10 CFU）5符合商业无菌未检出（＜10 CFU）6正压0.025MPa保持3小时符合商业无菌未检出（＜10 CFU）7符合商业无菌未检出（＜10 CFU）8符合商业无菌未检出（＜10 CFU）9符合商业无菌未检出（＜10 CFU）10[font=宋体]符合商业无菌未检出（＜10 CFU）11常压浸泡3小时符合商业无菌未检出（＜10 CFU）12符合商业无菌未检出（＜10 CFU）13符合商业无菌未检出（＜10 CFU）14符合商业无菌未检出（＜10 CFU）15符合商业无菌未检出（＜10 CFU）培养基模拟物型式缺陷样品制作1负压真空值-0.025MPa保持3小时不符合商业无菌1.3×109 CFU/mL2不符合商业无菌2.9×106 CFU/mL3不符合商业无菌3.8×103 CFU/mL4不符合商业无菌5.5×106 CFU/mL5不符合商业无菌1.8×109 CFU/mL6正压0.025MPa保持3小时不符合商业无菌1.5×105 CFU/mL7不符合商业无菌1.6×106 CFU/mL8不符合商业无菌1.1×106 CFU/mL9不符合商业无菌7.2×104 CFU/mL10不符合商业无菌6.3×106 CFU/mL[/font]11常压浸泡3小时不符合商业无菌5.1×106 CFU/mL12不符合商业无菌2.8×106 CFU/mL13不符合商业无菌4.3×106 CFU/mL14不符合商业无菌6.9×106 CFU/mL15不符合商业无菌3.6×105 CFU/mL 4讨论 《GB 4789.26-2023食品安全国家标准 食品微生物学检验 商业无菌检验》和《GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》方法对产品进行检验时只能作为最终结果的判定检验依据，不能作为生产过程微生物异常原因的排查检验方法。利用培养基加入菌液后，在常规和非常规条件下对包材的密封性能进行检验，最终得到有效测试方法。其中为确保在实验过程中菌液具备良好的促生长能力，对模拟实验后的菌液活力、数量进行确认测试。结果表明该方法能够用于包材密封性能测试，可以作为实验室日常检验玻璃瓶包材密封性能的方法。 综上所述，在培养基中加入菌液，将整个玻璃瓶包材侵入菌液内，能够快速排查出异常产品微生物不合格的原因。整个测试方法简单易行，结果准确。本文可作为后续日常监测玻璃品密封性能的实验室方法提供一定的参考。 [font=宋体]参考文献 GB 4789.26-2023食品安全国家标准 食品微生物学检验 商业无菌检验. GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定. 闫香君，食品工程中化学污染的控制策略医药卫生科技 工程科技Ⅰ辑，2022.28.007，https://tr.oversea.cnki.net/. 王婷婷，浅析食品微生物检验技术研究进展及质量控制《食品安全导刊》2021年第24期43-43,47，https://www.xueshushe.cn/shi-pin-an-quan-dao-kan. 张丽，范鹏飞，微生物检测技术在食品检验中的检测结果分析实验室检测.2024年5月，第2卷 第5期.http://www.chinatreeqk.com/. GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法.

各位做包材微生物检测时是如何取样的？好像国标没有相关标准

摘要： 　　微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。　　概述：　　一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。　　生长量测定法　　体积测量法：又称测菌丝浓度法。　　通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。　　称干重法：　　可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。　　比浊法：　　微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。　　菌丝长度测量法：　　对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。微生物计数法　　血球计数板法:　　血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1 mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。　　染色计数法：　　为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。　　比例计数法：　　将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。　　液体稀释法：　　对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN（most probably number）得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。　　平板菌落计数法：　　这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9cm的平板上出现50-500个菌落为宜。但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。　　试剂纸法：　　在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。　　膜过滤法：　　用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。　　生理指标法：　　微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。测定含氮量：　　大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。　　测定含碳量：　　将少量（干重0.2-2.0 mg）生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在100 0C下加热30分钟后冷却。加水稀释至5毫升，在580nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。　　还原糖测定法：[/si

各位大侠，对于内包材如瓶盖、玻璃瓶等如何进行微生物检验，方法和标准能否提供参考，望老师不吝赐教

点击链接查看更多[color=#009900]：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-3130.html[/url]产品介绍：[/color]微生物是包括：细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，与人类关系密切。涵盖了有益跟有害的众多种类，广泛涉及食品、医药、工农业、环保等诸多领域。[color=#009900]检测产品：[/color][list][*][*]农产品[*][*]水产品[*][*]畜产品[*][*]各类食品等[/list][color=#009900]检测项目：[/color]致泻大肠埃希氏菌、大肠杆菌计数、大肠埃希氏菌、大肠菌群、粪大肠菌群、菌落总数、霉菌和酵母、志贺氏菌、阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、溶血性链球菌、乳酸菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌罐头食品的商业无菌[hr/][color=#009900]科仪阳光检测服务：[/color][back=#fafafa][/back]如果您有农药残留检测分析方面的需求，请联系我们，科仪阳光检测依据各国标准及企业标准，为您提供专业的农药残留检测分析服务。更多农药残留检测分析服务咨询 请联系我们！

初来乍到，发个小文章。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=75074]鲜切蔬菜微生物总菌数的检测方法[/url]

要建一个检测芽胞杆菌的微生物实验室需要哪些设备？

检测食品中微生物的仪器主要包括以下几种：　　无菌均质器：这种仪器广泛应用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备。它具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点。样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，有助于预防交叉污染。　　微生物鉴定系统/药敏分析仪：细菌鉴定药敏分析仪适用于对病原微生物进行种类鉴定和体外抗生素敏感试验、分析。其检测范围广泛，菌种库包含2000种以上，可鉴定临床致病菌550种以上，测试200种以上药物的敏感性。这种仪器能够实现细菌鉴定的自动化、标准化和药物试验的定量化，对于食品安全国家标准GB4789系列所要求的食源性致病菌(如弯曲杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌等)的分离鉴定非常有用。　　微生物检测仪：便携式微生物检测仪广泛应用于活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、粪肠球菌(链球菌)、酵母(酵母菌)等微生物的快速检测。这种仪器便携一体化，防水抗压，可随时随地进行检测。　　微生物限度仪：如JC-WX600微生物限度检测系统，采用不锈钢金属材料制成，配有内置隔膜液泵，不需外接抽滤瓶，液体直接通过隔膜液泵排除，减少了抽滤瓶使用上的繁琐，避免了连接不好造成抽滤速度慢等缺点。　　以上这些仪器都是食品微生物检测中常用的设备，它们为食品的安全和质量控制提供了强有力的技术支持。

在BCEIA展会上，看到大的仪器厂家开始向小型化仪器方面发展，其中有一款便携式ATP,主要检测细菌总数，非常快速，我联想到我们水质菌落总数是需要培养的，时间很长。那我们是不是菌落总数也可以采用这样的方法？？ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少。

请问，老师们，环境中厌氧微生物的检测如何做？环境中厌氧微生物的检测不能像需氧微生物那样，可以直接暴露在空气中取样？请问环境中厌氧微生物的检测，如何取样？

10个／克)—72小时(菌数≤10个／克)。 第二：类快速检测方法一般在6—12小时内得 出检验结果。典型的方法有放射性示踪法和阻抗 测定法。 放射性示踪法是以放射性标记物作碳源，测 定经微生物发酵产生的有放射性标记的CO2量，从 而确定样品中含菌量。测定菌数小于1000个／毫 升的样品，大约需要7小时。 阻抗测定法可根据食品的微生物污染程度在 一天内完成检测。这种方法依据的原理是：微生 物在培养基中不断缯殖，其代谢产物的增加会导 致液体培养基中电阻的变化，使介质的导电性增 强，即电阻减小。只有当微生物数目达到106~107 个／毫升时，这种电阻的变化才能被记录到。样品 最初的含菌量越高，电阻的可检测变化就越容易 被确定。电阻或导电性变化达到可检测的时刻，称 为检出时间。 阻抗测定法可以用于各种食品的总菌数测 定。鲜肉表面菌数为107个／cm2时。检出时间为2小 时；作猫狗粮的动植物性原料中需氧菌检测，约需 要6小时(106个／克)—10小时(105个／克)；色拉中 乳酸菌的检测需要15—20小时(104个／克)；浓缩 果菜汁小酵母菌检测约需要9—15小时(104个／毫 升)；蔬菜汁小芽孢杆菌营养体的检测约需要10小 时(104个/毫升)~18小时(102个／毫升)。 应注意，对代谢不活跃的微牛物不能用阻抗 代谢法测定。除了检测需氧菌菌数，这一类方法还 可以进一步用于食品中非致病菌和致病菌的选择 性检测及其它领域。例如，抗生素—抗药性检测、 消毒剂检测、维生素检测、药物和化妆品中微生物 检测及生物胺的检测等方面。 第三类食品中微生物快速检测的方法一般可 以在1~3小时内得出结果，其中较为典型的方法 有：Limulus—测试法，ATP测定法，直接表面荧光 过滤技术以及氧气消耗测定法等。

微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。　　概述：　　一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。　　生长量测定法　　体积测量法：又称测菌丝浓度法。　　通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。

河南省科教仪器设备招标有限公司受委托就周口师范学院生物食品检测实验室、生物食品分析实验室等项目包A、C重招进行公开招标采购，按规定程序进行了开标、评标、定标，现就本次招标的中标结果公布如下：一、招标项目名称及招标编号：项目名称：周口师范学院生物食品检测实验室、生物食品分析实验室等项目包A、C重招招标编号：豫财招标采购-2014-1001号-AC-CZ二、招标公告媒体及日期：2014年9月5日在河南省政府采购网上发布招标公告三、评标信息：评标日期：2014年9月26日评标地点：河南省科教仪器设备招标有限公司五楼会议室评标委员会名单：闫国进、李尉卿、王月影、崔东茂、李俐俐四、中标信息：包A中标商：河南金之诚商贸有限公司中标价：1416600.00元中标商地址：郑州市金水区东风路东段11号1311号包C中标商：河南安盛仪器设备有限公司中标价：466000.00元中标商地址：郑州市金水区东风路南、勤工路东（米兰阳光）6幢1单元26层2602房五、本次招标联系事项：招标公司联系人：王老师联系电话：0371－66398656 各有关当事人对采购结果如有异议，可以在采购结果公告发布之日起七个工作日内与河南省科教仪器设备招标有限公司联系。请未中标的投标人速到我公司办理保证金退还手续。河南省科教仪器设备招标有限公司 2014年9月26日

微生物细菌检测仪是一种专门用于检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面ATP(三磷酸腺苷)含量的装置。ATP是所有活细胞和一些非细胞生物(如病毒、霉菌和酵母菌等)所含的核苷酸之一，因此微生物细菌检测仪可以通过检测表面ATP含量来检测这些生物的存在。　　微生物细菌检测仪的工作原理是通过荧光素酶作用的ATP检测试剂将样品表面的ATP转化为荧光素，然后利用荧光素酶催化的发光特性来测定样品表面的ATP含量。这种测量方法快速、准确、简单，一般检测时间不超过30秒。　　微生物细菌检测仪的作用和用途非常广泛，它可以用于以下领域：　　食品生产和加工：检测食品生产和加工过程中的卫生情况，确保食品质量和安全。　　医疗设备和药品检测：用于检测医疗设备、药品和患者样本中的微生物，确保患者的安全和健康。　　环境监测：检测水源和空气中的微生物污染，评估环境质量。　　化妆品和医药产品检测：确保这些产品的生产和储存过程中的卫生条件符合标准。　　此外，微生物细菌检测仪的使用方法通常包括打开机器、放入试子、采集样品、挤压拭子头、将拭子插入仪器中检测等步骤。在操作过程中，需要遵循相关操作规范，以确保检测结果的准确性和可靠性。　　总之，微生物细菌检测仪是一种重要的检测工具，它可以帮助我们快速、准确地检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面的微生物含量，为食品安全、医疗、环境监测等领域提供有力的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405091048555937_3652_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

水污染生物监测和检测方法及其研究进展摘 要: 扼要介绍了生物监测的理论、方法和特点。综述了近年来水污染生物监测的发展趋势及其研究动态与方向。阐述了水污染生物监测近期研究方向。关键词：水污染 生物监测 研究进展1 引言生物监测是系统地利用生物反应来评价环境的变化，并将其信息应用于环境质量控制程序中的一门科学。生物监测的目的是希望在有害物质还未达到受纳系统之前，在工厂或现场就以最快的速度把它检测出来，以免破坏受纳系统的生态平衡；或是能侦察出潜在的毒性，以免酿成更大的公害[1]。生物监测是理化监测的重要补充，对于评价环境质量状况有着十分重要的作用。理化监测一般只考虑瞬时污染状况，要做到长期连续监测，在经济上往往是不合适的。要了解污染的累积效应，采用生物监测更合适。同时，仅利用污染物质的浓度值来反映污染程度及危害也是不全面的，因为某些污染物质在环境中的含量极微不等于毒性极微，反之亦然。用生物监测进行配合，充分利用指示生物对污染物毒性反应的敏感性，便能较准确地反映真实的污染状况。2 水污染的生物监测2.1 水污染生物监测的理论依据在一定条件下，水生生物群落和水环境之间互相联系、互相制约，保持着自然的、暂时的相对平衡关系。水环境中进入的污染物质，必然作用于生物个体、种群和群落，影响生态系统中固有生物种群的数量、物种组成及其多样性、稳定性、生产力以及生理状况，使得一些水生生物逐渐消亡，而另一些水生生物则能继续生存下去，个体和种群的数量逐渐增加。水污染生物监测就是利用这些变化来表征水环境质量的变化[2]。2.2 水污染生物监测的特点同理化监测相比，生物监测有自己的特点：生物监测能反映各种污染物的综合影响；理化监测是定期采样，结果不能反映采样前、后的情况，而水中生物，汇集了整个生长期环境因素改变的情况；有些水生生物对污染物很敏感，有些连精密仪器都测不出的微量元素的浓度，却能通过“生物放大”作用在生物体内积累而被测出[2]。生物监测也有自己的不足之处：生物监测不能定性和定量地测定水质污染；检测的灵敏性和专一性方面不如理化检测；某些生物检测需时较长。2.3 水污染生物监测的方法2.3.1利用指示生物在水体中的出现或消失、数量的多少来监测水质许木启 [3]利用白洋淀水体中浮游动物群落优势种的变化来判断水体的污染程度和自净程度。结果表明，府河—白洋淀水体从上游至下游，浮游动物耐污种类逐渐减少，广布型种类逐渐出现较多，在下游许多正常水体出现的种类均有分布；同时，原生动物由上游的鞭毛虫至中游出现纤毛虫，在下游则发现很多一般分布在清洁型水体的种类，表明府河—白洋淀水体从上游到下游水体的污染程度不断减轻，水体具有明显而稳定的自净功能。2.3.2利用水生生物群落结构的变化来监测水质蒋昭凤等 [4]用底栖动物的变化趋势评价湘江水质污染，结果发现湘江干流底栖大型无脊椎动物种类数和物种的多样性指数从上游到下游呈减少趋势，表明毒杀生物的有毒物质对湘江的污染较为明显，并且可根据湘江干流各断面种类数的减少程度判断出各断面的污染程度；同时也观察到，随着时间的推移，底栖大型无脊椎动物种类数和多样性指数也呈减少趋势，说明这种有毒污染仍在发展之中。2.3.3水污染的生物测试水污染的生物测试是利用水生生物受到污染物质的毒害所产生的生理机能的变化，测试水质污染状况。Belding [5]根据鱼的呼吸变化指示有毒环境，在有污染物存在的情况下，鱼腮呼吸加快且无规律。德国[6]从1977年开始研究利用鱼的正趋流性开展生物监测，在下游设强光区或适度电击，控制健康鱼向下游的活动；或间歇性提高水流速度，迫使鱼反应。如果鱼不能维持在上游的位置，则表明污染产生了危害。3 国内外水污染生物监测的研究进展近几年来，应用生物监测环境技术的研究广泛开展，出现了一些新方法、新材料和新的监测物，提高了生物检测的灵敏性。3.1 水污染生物监测及其检测的新方法3.1.1 利用遗传毒理学监测水体污染环境污染物质对人类及其它生物危害最为严重的问题是对细胞遗传物质造成的损害。因此，近20年来环境生物检测技术的研究和应用，尤其是细胞微核技术和四分体微核技术在动植物以及人类染色体受外界理化因子的损伤等方面的分析、诱变剂的测试筛选，以及应用于环境监测的研究得到了广泛的发展[7]。微核在生物细胞内的形成途径以及与染色体畸变的相关性早已被人们所认识，用微核测定法替代染色体畸变方法来监测环境污染物对生物遗传物质的损伤具有简便、快速、灵敏度高等优点。最常用的蚕豆根尖细胞微核试验技术是一种以染色体损伤及纺锤丝毒性等为测试终点的植物微核监测方法，该技术自1982年由Degrassi等建立以来，在环境诱变和致癌因子的检测研究中，特别是在水质污染和致突变剂检测研究中得到了广泛应用[8]。吴甘霖 [9]在利用水花生根尖微核技术（MCN）对马鞍山市废水的监测研究中，发现利用水花生根尖微核可作为监测水体污染的新材料。其根尖细胞微核率 MCN（‰），不仅可用于监测不同废水的污染程度，而且由于该植物长期生活在污染水体中，还能反映不同废水的污染物富集程度及现状。当外界环境中存在一定浓度的致突变物时，可使细胞发生损伤，从而使微核细胞率上升。另外微核细胞率的上升，提示环境中存在有致突变物，即受试水样中含有能打断DNA分子的诱变剂或能打断纺锤丝的纺锤丝毒剂，从而表现出遗传毒性。单细胞凝胶电泳（SCGE），即彗星试验也是一种通过检测DNA链损伤来判别遗传毒性的技术。它比微核试验更有益，因为环境中的遗传毒物浓度一般很低，而彗星试验检测低浓度遗传毒物具有高度灵敏性，所研究的细胞不需要处于有丝分裂期。同时，这种技术只需要少量细胞。目前它已经被用于检测哺乳动物、蚯蚓、一些高等植物、鱼类、两栖动物以及海洋无脊椎动物的细胞[11]。Mirjana Pavlica等 [10]用暴露在五氯苯酚（PCP）中的淡水蚌类（Dreissena polymorpha Pallas）血细胞进行彗星试验，观察血细胞中DNA损伤程度。在进行实验室实验和原位实验后，发现高浓度的PCP(80g/L)会引起血细胞中DNA断裂，表明用彗星试验检测DNA损伤能够监测水体中PCP污染。SOS显色法[12]是国内在20世纪80年代发展起来的一种遗传毒性检测新方法，具有快速、准确、灵敏及假阳性率低的特点，被广泛用于遗传毒性的测定中。其原理是：在DNA分子受到外因引起的大范围损伤、其复制又受到抑制的情况下，会导致一种容易发生错误的修复。所有这些在遗传毒物处理后大肠杆菌中出现的一系列反应统称为SOS应答。SOS显色法有许多优于Ames的特点：（1）快速、简便，测定过程只需7ｈ；（2）灵敏，被处理的细胞全产生或不产生SOS反应，用分光光度法测定β-ONPG(邻硝基苯β-Ｄ-半乳糖苷)分解产物非常灵敏；（3）准确，SOS显色法测定的是遗传毒物对细胞原发的直接反应，其阳性结果十分可信，而Ames试验的假阳性率较高。因此，SOS显色法已引起人们的密切关注，成为一种值得推广的水质监测评价方法。

环境监测是了解环境现状的重要手段，它包括环境化学分析、物理测定和生物监测三个部分。生物监测是一个利用生物对环境污染所发出的各种信息来判断环境污染状况的过程。生物长期生活于自然环境中，不仅能够对多种污染作出综合反映，也能对污染的历史状况作出反映。因此，生物监测取得的结果具有重要的参考价值。微生物监测是生物监测重要组成部分具有其独特的作用。 一、水体污染的微生物监测 （一）、粪便污染指示菌 人畜粪便中携带有大量致病性微生物。如果将这类污染物排人水体，就可能引起各种肠道疾病和某些传染病的暴发流行。因此，对水体的粪便污染状况进行监测具有重要意义。直接检测各种病原菌十分烦琐和耗时耗费。此外，由于水中的致病菌少，直接检测也很困难，即使检测结果阴性，也不能保证水中不含致病微生物。因此，在水质卫生学检查中，通常采用易检出的肠道细菌作为指示菌，取代对病原菌的直接检测。若水样中检出这类指示菌，即认为水体曾受粪便污染，有可能存在致病菌。检测到的指示菌越多，污染越严重。肠道细菌中的大肠菌群是普遍采用的粪便指示菌。在水质卫生学检查的结果中，常用“大肠菌群指数”和“大肠菌群值”作指标。大肠菌群指数是指每 L 水中所含的大肠菌群细菌的个数。大肠菌群值则是指检出一个大肠菌群细菌的最少水样量（ ml 数）。两者间的关系可表示为：大肠菌群值 =1000 ／大肠菌群指数我国饮用水的质量标准规定，大肠菌群指数不得大于 3 ，大肠菌群值不得小于 333ml 。

[size=16px]　　atp测定仪适合检测哪些类型的微生物　　ATP测定仪是一种基于生物发光原理的快速检测仪器，通过测量样品中的ATP含量来评估微生物的活性水平。由于ATP是所有活细胞(包括微生物)的能量来源，因此ATP测定仪能够广泛应用于多种微生物的检测。　　具体来说，ATP测定仪适合检测的微生物类型包括但不限于：　　病原微生物：这是指那些能够引起疾病的微生物，例如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。这些微生物常常存在于食品、水源和环境中，对人体健康构成威胁。ATP测定仪能够快速检测这些病原微生物的存在，有助于及时采取防控措施。　　环境微生物：环境中的微生物种类繁多，包括细菌、真菌、病毒等。ATP测定仪可以用于评估环境样本(如土壤、水体、空气等)中的微生物污染程度，为环境监测和治理提供数据支持。　　食品微生物：食品中的微生物污染是食品安全领域的重要问题。ATP测定仪可以检测食品样品中的微生物活性，包括菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母等，从而评估食品的卫生状况和质量安全。　　需要注意的是，ATP测定仪检测的是ATP分子本身，而不是细胞数量或种类。因此，它更适用于快速评估样品中生物活性和细菌污染的程度，而不是用于鉴定具体的细菌种类。　　总的来说，ATP测定仪在多个领域都有广泛的应用，能够为微生物检测提供快速、准确的方法，有助于保障人们的健康和安全。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403151354328485_5049_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

1. 包装材料的大肠埃希菌检查？答：根据包装材料的不同，大肠埃希菌的检查方法大致有两种，一种是将浸提液合并后，取一部分，接种胆盐乳糖培养基进行检查；另一种是将浸提液合并后，薄膜过滤，然后按规定的方法检验。2. 抗真菌药品的微生物限度检查法答：这类产品的霉菌和酵母菌计数方法需要进行调整，可以根据产品剂型的不同，选择薄膜过滤法或培养基稀释法等方法。3. 为什么在日常样品检测中还需要做阳性对照（国外不需要）？答：为了确保每一次检测对可能存在的微生物都是有效的。4. 对于同一个品种，药典为什么不规定统一的检测方法？答：本版药典进行过这样的尝试，也有某些品种已经收载了统一的检测方法，如注射用头孢类抗生素的无菌检查。之所以没有大量收载，主要是由于检测方法还没有经过必要的复核。将微生物检验的统一方法收载在品种的各论项下，始终是努力的方向。5. 梭菌检查中需置厌氧条件下培养48小时，是否指在厌氧培养箱中？答：需要在厌氧培养装置中进行培养，未必一定是厌氧培养箱。6. 控制菌检查方法验证时，采用多种方法均未检出控制菌，如何处理？答：在确保所使用的各种方法都没有错误的情况下，如果仍无法使试验菌生长，则应该采用薄膜过滤法进行检查。理由是该方法能够最大程度地去除产品的抑菌作用。7. 常规的监督抽样检品（包括原料）在进行微生物限度检查时，是否一定要进行活螨检查并在原始记录与报告书中体现？答：需要进行检查。可以在原始记录中体现，报告书上可以不出现，除非当发现有活螨检出。8. 药包材微生物限度检查规定了合格质量水平，通常产量下取样8个，要求8个瓶子均符合规定，如何进行？答：每个瓶子分别进行实验。9. 大肠埃希菌具体操作规程？答：参见中国药品检验标准操作规程。10. 动物组织及动物类原药材的提取物入药，是否需要检沙门菌？答：需要进行沙门菌检查。11. 关于中国药典菌落计数结果的判断还存在疑义，望能举例说明。答：不清楚所指的存在疑义是指哪方面。2010年版对结果报告进行了较大篇幅的修订，目前的规定应该比05版更为清晰、明确。12. 需做沙门菌检验样品量的确定？答：10g（ml）用于样品计数检验和其他控制菌检查，10g（ml）用于沙门菌检查，10g（ml）用于沙门菌检查的阳性对照。需要进行沙门菌检查的样品，检验用量应为30g（ml）。13. 日常的实验室装备能否达到梭菌无氧的培养要求？答：完全可以。可以采用厌氧培养盒（罐）。14. 如果一个产品有两个规格，是否可以取其中之一做阳性对照？答：每个规格均需进行阳性对照。15. 细菌数为100g/g的，样品稀释级只做1:10,1:100的倍数就可以了吗？答：可以。16. 培养时间3天，5天，可理解为72小时，120小时吗？答：可以。这样更为严谨。17. 中国药品检验标准操作规范“已做验证试验的供试品，在检查时刻不必再做阳性对照”如何理解？答：该标准操作规范中在无菌检查法中规定“供试品无菌检查应进行阳性对照试验”，表明不论是否进行了方法验证，在产品的每一次检验过程中，还必须进行阳性对照。在控制菌检查的大肠埃希菌项下，指出“已做验证试验的供试品，在该供试品检查时不必再作阳性对照”。该规定仅适用方法验证与供试品检查同时开展的情况。2005年版药典和2010年版药典在控制菌检查中均对阳性对照试验有明确规定，“进行供试品控制菌检查时，应做阳性对照试验。”产品检验中应以药典规定为准。18. 无菌检查和微生物限度检查中，产品中规定的溶解液是否可以换成其他的溶液？答：可以。19. 制剂通则中，没有微生物检查项目的，是否可不进行微生物项目检测？答：可以。主要是二部制剂通则中口服片剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂。20. 在细菌、霉菌和酵母菌计数中，适用性检查细菌是培养48小时，霉菌和酵母菌是培养72小时，供试品检查中细菌是培养3天，霉菌和酵母菌是培养5天，那方法验证中应参照哪个时间进行培养。答：应按照供试品检验时的条件，即细菌3天，霉菌和酵母菌5天。21. 测定纯化水微生物限度时，每张滤膜过滤量是多少合适？需要先稀释吗？过滤完后需不需要冲洗？假如我取10ml纯化水通过双杯体封闭式薄膜过滤器过滤，每张滤膜上的计数是以5ml为单位还是10ml为单位？答：过滤量应以培养后出现的微生物数不超过100cfu/膜为标准。一般可不稀释。不需要冲洗。每张滤膜的过滤量为5ml。22. 药典中关于纯化水的微生物限度是：细菌、霉菌及酵母菌总数每1ml不得过100个。这句话的意思是细菌总数每1ml不得过100个，霉菌及酵母菌总数不得过100个，还是细菌+霉菌+酵母菌总数每1ml不得过100个。如果是三者总数的话，那细菌总数限度是多少？霉菌及酵母菌总数限度又是多少？答：是总数不得过100个。没有必要考虑各自的限度值。

前段时间毒胶囊事件爆发，来询这个能力验证的人挺多。不过这个侧重于微生物检测。国内参加的企业和质监单位很少。只有某些国际明胶生产厂商在国内的分厂每年会持之不懈的参加。QGS是通过UKAS认证，由LGC（承担英国计量院职能）与Gelatine Manufacturers of Europe (GME)（欧洲明胶制造者协会）合作开发的能力验证计划，对水解明胶进行微生物分析。 测试材料 分析项目 水解明胶Enumeration:计数Sulphite-reducing bacteria, Total aerobic mesophilic count.亚硫酸盐还原菌，总好氧嗜温菌 Presence/absence:定性Clostridium perfringens, Coliforms, Escherichiacoli, Staphylococcus aureus, Salmonella species.产气荚膜梭菌，大肠菌群，大肠埃希氏菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌类

微生物检测，公司是否可以让另一家集团内公司（在同一楼办公）代做车间环境微生物检测（本公司无产品微生物检测要求），自己公司化验室无微生物检测设备和条件。这样是否合规和认可？有什么好方法解决。

生物发光技术在细胞学检测中的应用摘要：本文就生物发光技术的种类、机理、及其技术特点进行了综述，并就其在细胞学检测中的应用与研究进展展开了讨论。关键词：生物发光； ATP；荧光素酶；细胞凋亡；细胞内游离Ca2+自从20多年前，Marlene A DeLuca’s第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来，生物发光(Bioluminescenc，BL)作为一个古老而又年轻的技术, 近年来得到了很大的发展和广泛的应用。而近几年来，随着分子生物学的进展以及一些新生物技术工具的出现，尤其在某些关键技术如生物传感器、基因序列分析、活体细胞ATP 测定]等方面取得了一些突破，使生物发光的应用进入了一个新时代，极大提高了生物发光的检测和快速应用，其应用范围更进一步扩大[1]。1 生物发光的种类和特点尽管自然界中的生物体普遍存在发光现象，它们的发光机理、强度和光谱范围存在着很大差异。目前，国际上根据发光的机理不同将生物发光分为：受激荧光，发光生物发光，化学发光和生物的超微弱发光[3,4]。1.1 受激荧光受激荧光是指生物体在受到外界光辐射的作用时，体内固有的荧光物质或吸收的荧光标记物发光的现象。在生物学领域中，由于分析物质荧光的方法敏感性极高，而且几乎所有的有机分子都能够直接或经过适当的化学处理后发生荧光，故很早就受到重视，并逐渐发展成为生物学和医学中的荧光分析。在生物医学领域应用荧光分析最多的是荧光显微技术，基本工具为荧光显微镜。但一般的荧光显微镜某些情况下荧光的亮度不足，使观察困难随着光电技术和计算机技术的进步，已经发展出的激光共聚焦显微镜，操作更加方便，实验可重复性提高，使受激荧光的应用更加广泛[5]。1.2 发光生物发光在生物发光领域中最容易被人们所接受的发光现象就是以萤火虫的闪光为代表的发光生物发光[3]。现在，已了解各种发光生物发光的基本反应，在这个领域中也取得了一些新的进展，例如在体外重组虫荧光素酶，用基因工程技术在大肠杆菌中表达；人工合成荧光素；体外模拟细菌发光体系已获成功；细菌的发光基因已被提出，同样也已用基因工程方法在大肠杆菌中表达。水母发光蛋白已经分离纯化，一级结构已经清楚。由于生物发光的量子效率极高，所以研究生物发光能量的转化具有重要的理论与实际意义。近年来被广泛应用的发光蛋白，如GFP、YFP、CFP 等，其发光原理就是源自动物的自发发光，从而为生物医学研究提供了新的手段[6]。1.3 化学发光化学发光是在化学反应过程中(主要为氧化还原反应)发出可见光的现象[6]。化学发光反应是由两个关键步骤组成：激发和发射。许多化学反应进行时能释放足够的自由能而把参加反应的物质之一激发到能发射光的电子激发态，生成一种激发态产物，在它回到基态时，剩余能量转变成光子能量产生发光现象。随着化学发光物质合成技术的进步，化学发光在生物医学及其它领域的应用越来越广泛[7,8]，将化学发光与免疫反应结合起来建立的化学发光免疫测定法和化学发光标记是继荧光标记，放射性核素标记，酶标记三大标记技术之后，发展起来的最新检测技术[8]。1.4 生物超微弱发光 随着生物发光研究的进一步深入，发现人体的器官、组织、细胞、乃至大分子都在发光，不过发光强度更弱。这些有关生物超微弱发光(ultra-weak bioluminescence)的研究课题，构成了当前生命科学发展前沿中的一个极其重要的研究领域——生命系统的超微弱光子辐射(ultra-weak photon emission from living system) [8]。20世纪60~70 年代以来，各国先后出现了一些研究小组专门进行这方面的探讨，如日本的稻场文男小组(1991)研究了鼠肝核的超微弱天然光子发射；德国F.A. Popp小组提出了“生物光子”概念和一系列的相干理论[9]。目前研究已涉及到细胞、亚细胞乃至生物大分子的层次[ 9,10]。越来越多的实验表明，DNA 是生物超微弱发光的一个辐射源。1.5 生物发光特点研究发现生物发光有以下几个特点：① 生物发光的颜色范围很宽，可从红光到深蓝光；② 氧是几乎所有生物发光系统中必须的因素；③ 生物发光是由“荧光素酶”与“荧光素”的化学反应所引起的；④ 所有的生物发光反应似乎都是酶-底物类型的反应，但复杂程度不同，某些生物发光反应涉及3 种或4种底物，而另一些生物发光反应甚至需要3个或4个酶的体系[8]。[/size]

维权声明：本文为xuliang1013原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。摘要：智舌是以电化学传感器为基础的，组合脉冲弛豫谱为信号激发响应模式，检测和评价溶液整体品质特征的现代化新型分析检测仪器。本文利用智舌样品检测无需前处理，检测评价溶液整体品质特征的特点，以酵母菌为例，通过评价酵母生长过程中培养基组分的变化状况，探索智舌在微生物快速检测中的应用。试验结果显示，通过计算智舌特征值的总功率，利用S曲线模型中的Logistic模型的拟合总功率与时间变化曲线，能够得到与OD值曲线基本一致的酵母生长曲线。并且，通过对拟合曲线阈值的确定，建立了响应时间与原始酵母接种量之间的线性模型。智舌有望成为微生物快速检测或微生物生长状况监测评价的现代化新型技术。关键词：智舌；总功率；酵母模型智舌是一种以具有低选择性、非特异性和交互敏感性的化学传感器阵列，结合合适的模式识别方式或多元统计方法构成的，检测溶液整体质量品质特征的现代化分析检测仪器。智舌能够很好的显示液态样品的综合信息而成为液体食品诸如酒类、饮料等的品种区别、真假鉴别和示踪货架期品质变化的一种新型检测技术，因其具有无损样品、息量丰富、易智能化、使用寿命长、成本低廉、快速简便等优点而成为当前国内外有关领域关注的焦点和研究的热点，已经在液体食品的品质检测中有较多的研究和应用。微生物快速检测分析一直是食品工业以及食品安全控制的研究热点。快速、简便、经济、可靠的微生物的检测技术，是监测、监管、预防、质控和及时诊断等多方面有效实施的保障，是多级检验检疫部门的迫切需求。传统的微生物检测方法，一般首先通过培养基对微生物数量进行扩增，然后通过镜检或是特异性显色反应的方法进行判断，但是消耗的时间长，效率低。而微生物在培养基的生长过程中，会经历延滞期、指数期、稳定期、衰亡期的四个变化过程。微生物在四个变化过程中，不但其数量存在明显的变化规律，同时，其赖以生存的培养基组分也存在显著的变化过程。特别是在延滞期进入指数期的阶段，细胞进入以几何级数增长的时期，培养基的变化非常显著。而延滞期的长度又和菌种的接种量有关。本研究利用智舌样品无需前处理、检测速度快、评价溶液整体变化特征的特点，主要针对培养基中的还原、氧化活性物质进行响应，通过它得到关于微生物在一定的液体培养基中和确定的培养时间后的综合信息。通过微生物经历延滞期的时长来确定其原始的接种量。本文以酵母菌为例，探索电子舌在微生物快速检测中的应用方法。研究结果显示，智舌能够作为一种新型的快速技术应用于微生物快速检测当中。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 菌种：本研究用的酵母菌是由安琪酵母股份有限公司提供的高活性干酵母。由于安琪酵母的高活性，本研究没经过前增菌和培养的过程，直接选取活性干酵母不做任何前处理作为检测样本，无菌操作称取不同质量的干酵母接入灭菌的培养基进行培养，每隔2小时取样检测，一个样品检测6次。实验做3个平行。同一样品，用浊度法测其生长曲线，用721型分光光度计，波长560 nm测其OD值。以OD/560为纵坐标，时间为横坐标作曲线。以此国标方法的测定结果作为本研究的对照。1.1.2 培养基：40g葡萄糖、4g硫酸铵、4g硫酸镁、2g磷酸二氢钾、4g氯化钠配制成2000ml液体培养基。该培养基置于115[/co

COSMETICS是由LGC（承担英国计量院职能）组织、检测化妆品中微生物与化学指标的能力验证计划。COSMETICS的年度计划从当年4月到第二年3月，具体测试轮，每轮包含的测试项，测试样品，样品派发日期及测试截止日期参见当年年度申请表。一般来说每年度会有4轮测试（每年发样品4次），总共有7个检测项（不同测试样品和测试项目）可供选择：目前本测试年度还剩2次，一次11/26，另一次明年2/18。测试材料测试项　化学检测:唇膏、唇彩、粉饼和乳液镉，铬，铅，镍　　　对苯二酚　　霜（乳液）、液态、固体化妆品微生物检测: 计数　好氧嗜温菌，肠杆菌科细菌，铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌　酵母菌和霉菌 (总数)。　　　定性　好氧嗜温菌，大肠杆菌，绿脓杆菌，金黄色葡萄球菌。

乳粉微生物的检测 我们检测菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌、阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌 还用微生物检测B12、叶酸、游离生物素 现在我们检测菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌偶尔用测试片做，测试片检测的结果还算可以 简单、方便、不污染 在做微生物的时候 每次消毒很彻底 却污染 有时候不彻底消毒 却不污染 微生物到底是一个什么样的东西呢？ 一个看不见 摸不到的东西 大家谈谈对微生物的检测和微生物的理解