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现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益广泛, 这些技术要求一定的实验条件和试剂,如市面上使用广泛的徕卡染色机及其配套的徕卡透明试剂。相对而言,组织化学技术则具有无需复杂的实验条件和试剂、操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。 组织化学染色的方法很多,这里仅介绍几种常用的组织化学染色在病理诊断中的应用。一、胶原纤维的染色凡是间叶组织细胞都可产生网织纤维,也可产生胶原纤维,纤维母细胞是产生胶原纤维的主要细胞。胶原纤维是结缔组织中的主要纤维,是结缔组织中起支持作用的重要部分,具有一定的韧性和坚固性,能抵抗一定的牵[fo
各位大神前辈们~我想问一下自己怎么用四氧化钌染色呢?用来做透色电镜的,样品是塑料片,是不是要先去切片然后再自己染?是用四氧化钌溶液浸泡吗。查了些文献说国内很少四氧化钌固体卖,不知道各位大神是怎么染的。望大家赐教!另查文献查到这个方法,不知道大家是不是这样做的。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]染色又是怎么个操作?[img=,690,248]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707270908_01_3058919_3.png[/img]
一、染色方法1863年由waldeyer率先倡导用苏木素染液染细胞核,后来Mallory、Mayer等也阐述过苏木素的应用。近年来特殊染色和组织化学方法也屡有创新。Shikata(1973),Tanka等(1981年)分别介绍了用地依红和维多利亚蓝混合液显示乙型肝炎表面抗原的方法;1987年Crocker J等推出了核仁组成区嗜银蛋白染色的技术方法以及1991年进行的乳腺肿瘤核仁组成区的研究方法等。特殊染色的分类:特殊染色方法按照所染目的物进行分类,有结缔组织、肌肉组织、神经组织、脂类物质、糖类、色素、病理的内源性沉着物、病原微生物、内分泌物质、单种细胞和性染色质、骨、血液及造血组织、核酸、酶类等。特殊染色的命名:对于特染的命名至今尚无统一的规定,多数均按发明者的姓名命名,如van Geison染色等;有的则按所用染色液命名,如甲基绿一派若宁染色、苏丹Ⅲ染色等;有的按目的物命名,如网织纤维染色;还有的采用混合命名,如试剂十人名等。二、染色目的未加染色的任何组织切片在镜下只能辨认细胞和胞核的轮廓,看不清楚其他任何结构。染色的目的就是将组织切片浸入染色剂内,经过一定的时间,将组织或细胞及其他异常成分染上不同深浅的颜色,便于在光学显微镜下进行观察。三、染色原理 染色过程是染色剂和组织细胞相结合的过程。其机理尚未完全清楚。 1、有学者认为从物理学角度看,染色剂和组织细胞的结合是“溶解”或“吸收”。例如苏丹类染色剂使脂质着色,就是利用染色剂在脂质中的溶解度大于在洒精等溶剂中的溶解度这一特性。有些染色剂是染色剂分子通过渗透和毛细血管作用而被吸收或沉淀到组织、细肋的小孔中去而着色的‘这种机制的染色是很少的。2、另有学者认为染色是染色剂相组织、细胞之间的化学性结合。如显示含铁血黄素的普鲁士反应是最典型的例子。但是,大量染色的化学反应并不象铁反应那样明确。大多数染色的原理至今仍未搞清楚,有些可能是物理性的,有些可能是化学性的,有些则可能2种机制都起作用。正因为人们对染色的原理还没有完全掌握,所以还不能很好地运用原理来控制它,在相当程度上需凭工作经验。四、染色的分类(一)普通染色最广泛应用于常规制片的苏木素和伊红染色,又称为常规染色。(二)特殊染色1.定义 专门用于显示某些特定目的物的染色方法称为“特殊染色”,它又可以理解为“选择性染色”。特殊染色对目的物的选择性是相对的。有些方法具有相对的特异性,加油红O等脂质染色,显阳性者可以肯定为脂质;有些则显示的是一类物质,如PAS呈阳性反应者有糖原、粘蛋白、网织纤维、软骨、阿米巴原虫、霉菌等许多物质和组织结构,并不能确定是哪一种具体成分。所谓特殊染色的相对性,就是一种方法可以显示多种目的物,一种目的物可以用多种方法显示,其中有些方法可能呈阳性,而有些方法则呈阴性,这就需要我们拿捏多种方法,因为有时只有依靠多种方法才能确定所要确认的目标。2.特殊染色的意义1)可以显示在常规HE染色切片中不明显的目的物,例如当病变中霉菌数量较少时,应用Gridley染色就容易发现。2)可以区别胶原纤维和平滑肌,苏丹染色可区别脑浆内的脂肪变和水池变。3)可以显示某些HE染色中不能看到的目的物。如网织纤维、星形细胞的突起、结核杆菌、螺旋茵等,都可用相应的特殊染色法显示。因此,特殊染色是常规染色的必要补允,也是染色技术中不可缺少的组成部分。它在病理诊断中起着辅助作用。