超声细胞粉碎仪

[color=#444444]各位好，我现在接触一个新样品，标准方法需要用到超声波细胞粉碎仪来提取，可是我们实验室只有昆山的超声清洗仪，请问各位大侠，能用它来代替吗？样品不多，实在不想专门买一台仪器了，两者有什么区别？谢谢[/color]

超声波细胞粉碎机经常报警是怎么回事？

我用QuEChERS法，先用食品加工器将蔬菜打为浆状，再加入乙腈以及其他的药品，在上离心机之前要用到匀浆机，实验室没有，可以用超声波细胞粉碎仪代替吗？

我知道超声波细胞粉碎机和超声波细胞破碎仪是一回事，那么它和超声波均质机有什么区别？还是就是一回事？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09512.gif

如题，衬管一般超声洗多久呀？多大频率？实验室只有超声波细胞破碎仪，可以用这个来洗衬管吗？谢谢`

超声波细胞破碎仪是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎。常规使用方法是把要破碎的材料放到烧杯中，开电源设定时间（震动时间和间歇时间），将破碎仪的探头放到材料中。使用过程中，超声波发生器电路将50/60Hz的市电转换成18-21KHz的高频高压电能，因此破碎过程中会大量产热，一般在冰浴下破碎。超声波细胞破碎仪的两大组成部件为超声波发生器和换能器（有的配置有隔音箱）。1、超声波发生器：工作原理：由信号发生器来产生一个特定频率的信号，这个特定频率就是换能器的频率，一般应用在超声波设备中的超声波频率为20KHz、25KHz、28KHz、33KHz、40KHz、60KHz。2、换能器组件：换能器组件主要由换能器和变幅杆组成。3、隔音箱：可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音，保持实验室安静。超声波细胞破碎仪在我国的行业推广已进入成熟阶段，而应用仍不够普及!该仪器(设备)应用范围非常广泛，这是其它仪器设备所不能比拟的。也正因如此，该仪器(设备)的市场潜力很大，所以生产厂家也日趋增多，这也同时造成了超声清洗行业及市场的相对混乱，可以用八个字来形容“鱼龙混杂，良莠不齐”!超声波细胞破碎仪分类如下：一、按探头（“tip”）直径分类处理不用体积的样品需要选择不同“tip”头的超声波破碎仪。由于各制造厂家的产品结构不同，其“tip”头直径不尽相同。一般“tip”头从微量5mm(适合1ml处理量)到25mm(适合1000ml处理量)，有连续流探头，处理量可达80升/小时。可能会发生磨损的高能应用中会用到可更换“tip”头。当能量通过“tip”头被传递时，金属表面留下痕迹的地方会发生腐蚀。随着时间的推移，发生腐蚀的地方会产生轻微的蚀损斑。“tip”头可以用砂纸或纱布来打磨，除非是损坏到一定的程度；当这种情况发生时，“tip”头将很难进行调谐频率，取而代之的可能是发出长而尖的噪音，最终产生裂纹。 要有效地加工给定剂量的样品，有两个主要的因素需要考虑：“tip”头尺寸和输出功率。这两个因素必须同时匹配才能获得最佳效果。小功率大“tip”头，则“tip”头无法工作；而太大的功率则“tip”头可能损坏。购买时请注意所需型号附件。二、按功率分类超声波细胞破碎仪的功率大小是客户的首选指标，它决定着被破碎物的数量、大小、质量及效果。所以各生产厂家对此指标也都非常重视。一般情况下，实验室、化验室、研究所、药品检验所等科研单位，使用的功率都不大，（一般在500W以下）；而生物公司、制药厂、化工企业等生产单位，所用的功率大都在500W-2000W左右。由于各制造厂家的产品结构不同，其功率的标注方法也不尽相同。不过按照用户常用的惯例，一般有以下几种：50W、100W、150W、250W、300W、350W、500W、1000W、2000W。一般超声波细胞破碎仪输出功率可根据需要适度调节。 标准超声波细胞粉碎机产品的额定工作频率是20千赫兹。一些超声波细胞粉碎机有自动调谐功能可以使频率在一个小的范围内变化。

[align=center][size=16px][color=#000000]【仪器心得】：[/color][/size][size=16px][color=#000000]JYD-L[/color][/size][size=16px][color=#000000]超声波细胞粉碎机使用心得[/color][/size][/align][color=#000000]该仪器可广泛应用[/color][color=#000000]环境、生物领域，可进行半挥发性有机物萃取、动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎等前处理。[/color][color=#000000]1[/color][color=#000000].[/color][color=#000000]操作步骤[/color][color=#000000]1[/color][color=#000000].1 [/color][color=#000000]确保仪器电源线已正确连接，打开仪器后面电源开关，等待仪器自检完毕，即可使用。[/color][color=#000000]1[/color][color=#000000].2[/color][color=#000000]方法编辑[/color][color=#000000] [/color][color=#000000]?左移按键[/color][color=#000000]在设置状态时，按下此键可从[/color][color=#000000]LCD[/color][color=#000000]显示屏下排右边起向左选择移位，移到所需要设定的一位，该位数据闪烁，表示该位数据可以改变。在运行和暂停状态时，此键不起作用。[/color][color=#000000]▼减或下翻键[/color][color=#000000]在设置状态时，如果无数据位闪烁，按下此键可向下依次翻出所存储的程序数据。如果有数据闪烁，按下此[/color][color=#000000]键可是[/color][color=#000000]闪烁数据位的数据减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000]，从[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在运行状态时，按下此键可使功率调整值减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000]。直至减为[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]止。[/color][color=#000000]●运行或停止按键[/color][color=#000000]设置状态和运行状态的工作状态切换按键。在设置状态时，按下此键可以进入当前程序的运行状态；在运行状态下，按下此键则终止当前程序的运行，切换到设置状态。[/color][color=#000000]▲加或上翻按键[/color][color=#000000]在设置状态时，如果无数据位闪烁，按下此键可向上依次翻出所存储的程序。如果有数据位闪烁，按下此键可使闪烁的数据加一，从[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在运行状态时，按下此键可使功率调整加一。直至加到[/color][color=#000000]99[/color][color=#000000]为止。[/color][color=#000000]?右移或暂停按键[/color][color=#000000]在设置状态时，按下此键可从上排显示器左边起向右选择移位，移到需要设定的一位，该位数据闪烁，表示该位数据可以改变。[/color][color=#000000]在运行状态时，按下此键可进入或退出暂停状态。[/color]1.3 样品超声萃取将需要超声萃取的样品预先放入合适的容器内。打开箱门，将换能器插入样品容器内，前端探头放入水位上1/3处，关上箱门，按[color=#000000]●开始运行。[/color]1.4关机步骤使用结束后，关闭仪器后侧电源开关，并将换能器取出用清水清洗、干燥并妥善保存。 2.日常使用维护保养2.1每次仪器结束工作时，应保持超声波发生器、换能器组件清洁，可使用软布沾清水擦拭。2.2长期不工作时，取出换能器组件洗净、干燥并妥善保存。2.3 使用中若发现变幅杆末端被空化腐蚀而发毛，可使用油石或锉刀锉平，否则会影响工作效果。3.仪器使用注意事项 3.1温度保护设置点必须比室温或样品温度高5℃以上，否则仪器会出现超温报警。3.2严禁在变幅杆未插入液体内时开机，否则会损坏换能器或超声波发生器。3.3用一定时间后变幅杆末端会被空化腐蚀而发毛，可用油石或锉刀锉平，否则会影响工作效果。3.4在超声波破碎时，由于超声破在液体中会起空化效应，使液体温度会很快升高，建议采用短时间（每次不超过5秒），同时可外加冰浴冷却。

带您参观一下我的超细深冷粉碎机不知道天瑞是否有超微粉碎机，嘿嘿！先带大家看下我的粉碎机。目录1、粉碎机原理2、粉碎机部件图片及功用3、粉碎机维护4、粉碎前后样品变化5、总结

http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C119298%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 宁波新芝生物科技股份有限公司 的 Scientz-IID 超声波细胞粉碎机(Scientz-IID)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来，这款产品已经被多家单位采用，如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解，欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动，并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介： 应用领域：生命科学：对细菌、病毒、孢子及其它细胞结构的裂解、破碎、浸出、萃取动物细胞内DNA、蛋白质的提取、修剪DNA/RNA,染色质免疫沉淀技术。材料化学：对纳米材料如碳纳米管，石墨烯等材料的分散、均质土壤、岩石样本、有色金属、稀土等颗料物的崩解、乳化、均质、破碎。另外可用于中草药的分散、萃取。可以用于其他样品的分散化均质及加速反应进程，也适用于化工、医疗、考古、地质、海洋等领域的样品前处理。 性能特点：采用PWM控制开关电源，功率连续可调仪器采用液晶大屏显示，高分辨率中央微机集中控制超声时间、功率任意设定样品温度检测显示、实际频率显示、频率微机跟踪、故障自动报警隔间装置采用ABS材质，模具化设计，带门锁功能专利号：ZL94244314.4 200630105827.5频率20-25KHz频率自动跟踪功率950W（1%-99%）显示方式 7寸TFT触摸屏显示显示内容 时间，功率，温度破碎容量0.5-600ml占空比0.1-99.9%随机变幅杆Φ6可选配变幅杆Φ2、3、10、15 mm存储数据50组温度报警0-99℃报警超温、过载、时间定时0-999分钟工作模式间隙、连续标准配置发生器（主机）一台，密封换能器一只，Φ6mm变幅杆一支，隔间箱一台电源220/110V 50Hz/60Hz电源箱+换能器重量14.3kg电源机箱尺寸及净重400×280×220（mm）;12.2kg特点用PWM控制开关电源，功率连续可调，稳定性好外包装尺寸534×295×435mm【了解更多此仪器设备的信息】

细胞，生活中无处不在，我们身体里有细胞：脑细胞，造血细胞……路边的小草也有细胞，就连我们看不到的细菌都是细胞构成的。细胞与生活息息相关，所以说细胞决定人类健康。　　[b][url=http://www.xo-yq.net/]智能超声波细胞破碎仪[/url][/b]，一款将电能通过转换器变成声能，然后这种能量通过液体介质而变成一个个小气泡，这些小气泡会在短时间内迅速炸裂，产生能量，从而起到破碎细胞的作用。　　生病是人之常情，免不了吃药。药品是怎么来的呢？　　首先通过观察细菌，通过分析细菌的组成，然后讲细胞提取出小部分，导入化合物，最后确定候选物，漫长的过程肯定需要[b]智能超声波细胞破碎仪[/b]啊。　　南京先欧科技，专业制造[b]智能超声波细胞破碎仪[/b]，[b]超声波细胞粉碎机、裂解仪[/b]……[img=智能超声波细胞破碎仪,50,50]http://www.xo-yq.net/img/%E6%99%BA%E8%83%BD%E8%B6%85%E5%A3%B0%E6%B3%A2%E7%BB%86%E8%83%9E%E7%A0%B4%E7%A2%8E%E4%BB%AA.jpg[/img]

超声波细胞破碎仪是利用一种超声波在液体中产生的空化效应而使目标细胞破碎的多功能、多用途的仪器。超声波细胞破碎仪的原理：由换能器将电能转换为超声能，超声能量作用于液体介质产生密集的空泡，随着空泡的生长破裂，产生巨大的剪切力及高温高压，从而起到将目标细胞破碎乳化的目的。超声波细胞破碎仪用途广泛：1、超声波提取生物纳米在超声波化学反应中，由空化效应产生的强压力脉冲，能够产生许多化学合成所要求的高温高压，超声波化学合成所利用的正是空化效应的能量，利用这些能量能在一些特殊粉末表面合成出需要的纳米粒子。 2、超声波制药（1）注射用药的细化、均化——将磷脂类与胆固醇混合用适当方法与药物混合在水溶液中，经超声细化、均化得到更小的利于静脉注射的微小药物粒子。（2）中草药提取——利用超声分散破坏植物组织，加速溶剂穿透组织作用，提高中草药有效成分提取率。如金鸡纳树皮中全部生物碱用一般方法侵出需5小时以上，采用超声分散只要半小时即可完成。（3）制备混悬剂——在超声空化和强烈搅拌下，将一种固体药物分散在含有表面活性剂的水溶液中，可以形成1um左右口服或静脉注射混悬剂。例如“静注喜树碱混悬剂”、“肝脏造影剂”、“硫酸钡混悬剂”等。（4）疫苗制备——将细胞或病菌借助于超声作用将其杀死以后，再用适当方法制成疫苗。 3、超声波对化妆品的分散为了更进一步提取药物精华和粒子微细化，并节约生产成本，达到分散、乳化效果，使化妆品更深入渗透到肌肤里层，让肌肤很好的吸收，发挥药物的效力和作用，采用超声波乳化可达到非常理想的效果。 4、超声波对酒的醇化酒味醇厚的主要影响因素是酸的形成、酯化。刚出厂的白酒含有戍醇，有辛辣味，传统制造时，这种气味要经过很长时间贮藏才能使酒味变醇。而利用超声波处理的白酒可使酒的老熟时间缩短1/3到1/2。超声波细胞破碎仪可以并且已经被广泛用于生物化学、微生物学药理学、物理学、动物学、农学、医学、制药等领域的教学、科研、生产。

1. [color=#000000]编制目的[/color][color=#000000]本文[/color][color=#000000]用于[/color][color=#000000]指导[/color][color=#000000]JYD-L[/color][color=#000000]超声波细胞粉碎机设备的具体操作和使用时的注意事项，以保证仪器设备及人员的安全。[/color]2. [color=#000000]适用范围[/color][color=#000000]该仪器可广泛应用[/color][color=#000000]环境、生物领域，可进行半挥发性有机物萃取、动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎等前处理。[/color][color=#000000]3[/color][color=#000000].[/color][color=#000000]设备组成[/color][color=#000000]3[/color][color=#000000].1 [/color][color=#000000]超声波发生器[/color][color=#000000]3[/color][color=#000000].2 [/color][color=#000000]换能器[/color][color=#000000]4.[/color][color=#000000]主要技术参数[/color][color=#000000]4.1[/color][color=#000000]功率调整范围[/color][color=#000000]：[/color][color=#000000]额定功率[/color][color=#000000]0%[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]99%[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]4.2[/color][color=#000000]温度设定范围[/color][color=#000000]：[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]℃[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]99[/color][color=#000000]℃[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]4.3[/color][color=#000000]超声时间范围：[/color][color=#000000]0s[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]99s[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]4.4[/color][color=#000000] [/color][color=#000000]间隙时间范围：[/color][color=#000000]0s[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]99s[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]5.[/color][color=#000000]工作原理[/color][color=#000000]本机采用了单片机控制技术和锁相环频率自动跟踪，通过简单的键盘操作即可设置数据和控制工作状态。功率放大器与换能器的振动频率经相位取样使锁相环实现自动跟踪。功率检测和温度测量电路使单片机实现超声波发射功率超限自动调整和超温保护及报警功能。[/color][color=#000000]6.[/color][color=#000000]环境条件[/color][color=#000000]6[/color][color=#000000].1[/color][color=#000000]仪器工作环境温度控制在[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]℃~55℃[/color][color=#000000]，湿度控制在[/color][color=#000000]20%~90%[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]6.2[/color][color=#000000]仪器室及其周围不能有震源、火源、电火花、强大磁场和电场、易燃易爆和腐蚀性物质等存在，以免干扰分析或发生意外。[/color][color=#000000]6[/color][color=#000000].3[/color][color=#000000]应尽可能降低室内空气含尘量，减少尘埃落入仪器内部，以免影响仪器性能，注[/color][color=#000000]意保持仪器和室内清洁。[/color][color=#000000]7[/color][color=#000000].[/color][color=#000000]操作步骤[/color][color=#000000]7[/color][color=#000000].1[/color][color=#000000]开机步骤[/color][color=#000000]7.1.1 [/color][color=#000000]确保仪器电源线已正确连接，打开仪器后面电源开关，等待仪器自检完毕，即可使用。[/color][color=#000000]7[/color][color=#000000].2[/color][color=#000000]测定步骤[/color][color=#000000]7.2.1[/color][color=#000000]方法编辑[/color][color=#000000] [/color][color=#000000]?左移按键[/color][color=#000000]在设置状态时，按下此键可从[/color][color=#000000]LCD[/color][color=#000000]显示屏下排右边起向左选择移位，移到所需要设定的一位，该位数据闪烁，表示该位数据可以改变。在运行和暂停状态时，此键不起作用。[/color][color=#000000]▼减或下翻键[/color][color=#000000]在设置状态时，如果无数据位闪烁，按下此键可向下依次翻出所存储的程序数据。如果有数据闪烁，按下此[/color][color=#000000]键可是[/color][color=#000000]闪烁数据位的数据减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000]，从[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在运行状态时，按下此键可使功率调整值减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000]。直至减为[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]止。[/color][color=#000000]●运行或停止按键[/color][color=#000000]设置状态和运行状态的工作状态切换按键。在设置状态时，按下此键可以进入当前程序的运行状态；在运行状态下，按下此键则终止当前程序的运行，切换到设置状态。[/color][color=#000000]▲加或上翻按键[/color][color=#000000]在设置状态时，如果无数据位闪烁，按下此键可向上依次翻出所存储的程序。如果有数据位闪烁，按下此键可使闪烁的数据加一，从[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]～[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在[/color][color=#000000]运行状态时，按下此键可使功率调整加一。直至加到[/color][color=#000000]99[/color][color=#000000]为止。[/color][color=#000000]?右移或暂停按键[/color][color=#000000]在设置状态时，按下此键可从上排显示器左边起向右选择移位，移到需要设定的一位，该位数据闪烁，表示该位数据可以改变。[/color][color=#000000]在运行状态时，按下此键可进入或退出暂停状态。[/color]7.2.2 样品超声萃取将需要超声萃取的样品预先放入合适的容器内。打开箱门，将换能器插入样品容器内，前端探头放入水位上1/3处，关上箱门，按[color=#000000]●开始运行。[/color]7.3关机步骤使用结束后，关闭仪器后侧电源开关，并将换能器取出用清水清洗、干燥并妥善保存。 8.维护保养8.1日常维护8.1.1每次仪器结束工作时，应保持超声波发生器、换能器组件清洁，可使用软布沾清水擦拭。8.1.2长期不工作时，取出换能器组件洗净、干燥并妥善保存。8.1.3使用中若发现变幅杆末端被空化腐蚀而发毛，可使用油石或锉刀锉平，否则会影响工作效果。9. 注意事项 9.1 温度保护设置点必须比室温或样品温度高5℃以上，否则仪器会出现超温报警。9.2 严禁在变幅杆未插入液体内时开机，否则会损坏换能器或超声波发生器。9.3 用一定时间后变幅杆末端会被空化腐蚀而发毛，可用油石或锉刀锉平，否则会影响工作效果。9.4 在超声波破碎时，由于超声破在液体中会起空化效应，使液体温度会很快升高，建议采用短时间（每次不超过5秒），同时可外加冰浴冷却。9.5 本机应安放在干燥、无潮湿。无阳光直射。无腐蚀性气体的地方工作。9.6 严格按照超声波发生器。换能器组件性能参数范围工作。9.7 严禁液体溅入超声波发生器内部。9.8 仪器室及其周围不能有震源、火源、电火花、强大磁场和电场、易燃易爆和腐蚀性物质等存在，以免干扰分析或发生意外。9.9 应尽可能降低室内空气含尘量，减少尘埃落入仪器内部，以免影响仪器性能，注意保持仪器和室内清洁。9.10室内必须严禁烟火，照明应使用防爆型灯具，必须备有灭火器，落实好有关防火防爆等安全措施，以免发生意外事故。9.11 使用仪器时，注意个人安全防护，小心触电，以及超声破碎时产生的噪音对人耳朵的影响。

超声波细胞破碎仪是一种利用超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途仪器；用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎，同时可用来乳化、分立、裂解、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等。主要技术参数：1.超声功率常用超声输出功率有150W、250W、650W、1000W、1200W、1800W不等，亦有功率可调类型。因此超声破碎仪可以按照功率大小分150W到1800W等各个型号； 2．破碎容量超声波细胞破碎仪的破碎容量有0.5-500ml、0.5-600 ml、10-100 ml、50-1000 ml、550-1200 ml不等，所配破碎杯根据实验样品的量选择；一般根据超声功率和破碎容量即可选定型号。 3．温度控制一般超声输出功率650W以上都配有温度控制功能，可以防止样品过热破坏样品；4．控制面板控制面板有传统的旋钮式操作面板与较先进的大屏液晶显示两种类型，液晶显示操作简便，并带有程序存储功能。

目前国内对细胞破碎机的研究局限于实验研究,仅对某种结构均质阀的均质效果进行验证与分析,或是选择结构参数。实验研究的局限性使这种分析不够全面。高压细胞破碎机是目前生物工程领域广泛使用的一种细胞破碎机。作者结合近期国外对高压细胞破碎机的理论研究工作,应用半经验半理论的方法,分析探讨了高压细胞破碎机的均质理论。高压细胞破碎机的结构及工作原理： 高压细胞破碎机由高压泵和破碎阀两部分组成,高压泵通常采用柱塞往复泵,其结构与一般柱塞泵相同。破碎阀安装在柱塞泵的排出管路上,一般由阀芯和阀座构成,阀芯和阀座的结构形式对破碎效果、能耗以及阀的磨损影响极大。国外对破碎阀的结构进行了大量研究,设计出许多不同结构的破碎阀,研究主要围绕下列问题进行：1，在较低操作压力下提高破碎效果2，提高阀的使用寿命。意大利Niro Soavi公司为此，开发出R型细胞破碎阀，经过多年的实际使用，获得用户的认可。高压细胞破碎机工作原理： 高压细胞破碎机有一个或数个往复运动的柱塞，物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中，经过特定宽度的限流缝隙（工作区）后，瞬间失压的物料以极高的流速（1000米/秒，最高可达1500米/秒）喷出，碰撞在阀组件之一的碰撞环上，产生三种效应： 空穴效应：被柱塞压缩的物料内积聚了极高的能量，通过限流缝隙时瞬间失压，造成高能释放引起空穴爆炸，致使物料强烈粉碎细化。（主要应用于均质） 撞击效应：物料通过可调节限流缝隙的以上述极高的线速度，喷射到用特殊材料制成的碰撞环上，造成物料粉碎。（主要应用于细胞破碎） 剪切效应：高速物料通过泵腔内通道和阀口狭缝时会产生剪切效应。（主要应用于乳化）经过这三种效应处理过的物料可均匀细化到0.1μm-2μm粒径。

我想问超声破碎仪能用于细胞器分离吗？有人做过相关实验吗？其中的原理是怎么样的呢，是用不同的能量打碎不同的细胞器吗？还是……？

大肠杆菌表达外源蛋白，在超声破碎的时候，用含有1%triton-X-100的PBS悬浮，然后超声的效果较好，1%triton-X-100的作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用，比如链霉菌。 细菌沉淀直接加样品1buffer，再加5ul的巯基乙醇，混匀，离心，煮沸10min，直接上样，染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min 就可以。 在表达重组蛋白后超声波破碎细胞，采用冰浴，400w，破2s停1s，但是不一会就产生大量泡沫，影响了破碎功率，pbs和tris缓冲液都是这样，最后都是破碎不完全，而我的目的蛋白就在这些未破碎的细胞中。1*会产生气泡是因为你的探头位置没放好。探头一定要接近底部，约1cm（我一般是距底部0.5mm）。功率根据仪器不同会有所不同，但你可以观察液面，有波动但不要太剧烈就好。2*破3S停10S，破个二三十次看看。 3*变幅杆位置摆放也要注意，听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。 在破碎时试着加大体积,强度最好不要超过60%. 4*尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说，你的方法很难散热，导致蛋白变性产生气泡，最好停顿时间稍长一些，这种情况多见于包涵体形式的蛋白。链霉菌（放线菌）超声破碎的，用的方法条件是什么？前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。使用超声破碎时采用的具体条件是：(1)取细菌的24 h培养液于5 000 r／min 下离心5 min收集菌体．(2)用pH 7．5的Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤3次，再用该缓冲液将菌体配成1：3的菌悬液．置于40 mL大塑料试管内．(3)将大塑料试管置于冰浴中，采用超声波破碎(功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S)．(4)破碎液于12 000 r／min下高速冷冻离心30 min，收集细胞碎片和上清夜． 超声破菌流程与 上述基本一致，就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris－HCl，洗涤一次就可以。另外，超声剂量随样品量、菌体改变比较大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数，有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。 放线菌属于原核生物系统进化树上的（G＋C）摩尔百分含量（mol％）高的革兰氏阳性菌（Eubacteria）分枝类群，它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性，但在其不同类群中，细胞壁的化学组分变化很大。 在做大肠杆菌超声时，采用的是400W，超5停5的方法，效果不错，但是用在链霉菌上，似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢，因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。 再有镜检是检验破碎效果,但是细胞破碎程度和我需要的酶获得之间有正比关系吗？破碎时间长也会影响到酶的活性。所以想问问anaisai战友，你提供的“功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S”的条件好像是用于破碎链霉菌孢子的，也可以用于发酵离心后的菌泥吗？如果可以，你破碎的全程时间大概是多少呢？ 如果你需要的是胞内酶，细胞破碎程度和需要的酶获得之间基本上有正比关系。破碎时间长的确会影响到酶的活性。这就需要在最佳的破碎时间和酶活性之间做出判断，最直接的办法是先绘制相关曲线（酶活性和时间的关系曲线）。 实验中，破碎的是棒状杆菌（也是很难破壁的G+菌），破碎时间控制在30min左右，酶活较好。

超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用，能引起生物体的功能和结构发生变化，即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热（42-43℃），因为正常组织的临界致死温度为45.7℃，而肿瘤组织比正常组织敏感性高，故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍，DNA、RNA、蛋白质合成受到影响，从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡，使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外，空化泡破裂时产生瞬时高温（约5000℃）、高压（可达500×104Pa），可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。工作原理 同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用，能引起生物体的功能和结构发生变化，即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热，因为正常组织的临界致死温度为45.7℃，而肿瘤组织比正常组织敏感性高，故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍，DNA、RNA、蛋白质合成受到影响，从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡，使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外，空化泡破裂时产生瞬时高温、高压，可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小炸弹一样的能量，从而起到破碎细胞等物质的作用

以前在一家单位做分析，但是有相关搞种植产业。其中有一项工作，就是品种筛选。白话点说吧，我们单位种的除虫菊（是一种花，不过可以用来提取精油的，杀虫用的哦）：以前都是采集种子之后再分发给农民种植，种子的挑选比较不专业。后来思量之后研究，植株的花里面检测，含量高的可以留下做种子，这样优选淘汰。而我所做的工作，就是对这些花进行含量检测。过程：采集花朵——烘干——粉碎——定量称量——定容——超声提取——提取液测定含量在粉碎的过程中，总是有一些粉碎的不好的（因为是花朵，所以有花瓣、花蒂、花托等），这样粉碎不到均匀的话，测出来的是不是不准确的？？可是类似这种情况，怎么才能让他一致性呢？我们那会每天要处理的花都上百朵呢

随着分子生物学的快速发展，许多实验的目标物质都是细胞内物质，要进行实验研究或产物收集就必须将细胞破壁，使产物得以释放，才能进一步提取，因此细胞破碎就变成了提取胞内产物的关键步骤，破碎方法的得当与否，直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将常用的几种细胞破碎方法介绍如下。1.超声波破碎 　 利用超声波高强度声能产生的空化现象引起冲击波和剪切力进行细胞破碎。超声破碎的效率与超声频率、超声功率、处理时间、细胞浓度及处理量等因素有关。 　 不足及须加强的问题：超声波破碎在实验室规模应用较普遍，处理少量样品时操作简便，液量损失少，但超声波产生的化学自由基团可能使某些敏感性活性物质变性失活影响实验结果。且大容量装置声能利用率低，装置散热性差。2.生物酶溶法 　　就是用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1．3-葡聚糖酶、蛋白酶等。 　　不足：易造成产物抑制作用，这可能是导致胞内物质释放率低的最主要因素。而且溶酶价格高，限制了大规模利用。若回收溶酶，则又增加分离纯化溶酶的操作。另外酶溶法通用性差，不同菌种需选择不同的酶。3.物理珠磨法 　　微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合，珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞，使细胞壁破碎，释出内容物，在珠波分离器的协助下，珠子被滞留在破碎室内，浆液流出，从而实现连续操作，破碎中产生的热量由夹套中的冷却液带走。缺陷：效能利用率仅为1％左右，且破碎过程产生大量的热能无法利用。4.化学渗透法 　　某些有机溶剂（如苯、甲苯）、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使细胞内容物物有选择地渗透出来。其作用机理；化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。 　　不足：时间长，效率低；化学试剂毒性较强，同时对产物也有毒害作用，进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂；通用性差。

细菌工程菌胞内表达主要分为两种形式，一种是在强启动子条件下的高效表达，由于蛋白的过度表达，使蛋白不能及时有效折叠而发生无规则卷曲，以固体颗粒的形式堆积于胞间质中，这就是所说的包涵体，另外一种是间质内的可溶性表达，即可以发生正常折叠，具有生物活性。一般情况下，细菌只要被正常破壁就可以通过离心的形式将包涵体和可溶性表达的蛋白分离开。超声破碎的条件一般是300 w，10 s/10 s，20分钟，具体条件可根据自身情况而定。 超声前菌体的准备：菌液离心后，先用PBS将菌沉淀洗2-3遍，然后按原菌液体积的1/5-1/10加入裂解液重悬菌体，裂解液的成分：50 mMTris-HCl, pH8.0, 2 mM EDTA，100 mM NaCl，加溶菌酶至100 ug/ml，0.1%Triton X-100。切记冰浴超声！ 如何判断是否超声完全：根据网友的经验，一般有以下几个方面： 1. 外观判断：超声前菌悬液是浑浊的，超声完全后变的透明、清澈。2. 液体的粘滞性：超声后菌液从枪头滴下不粘连。3. 高速离心：有用高速离心检测超声破碎程度的（一般用6,000 g 10 min, 比一般离心收集菌体的转速高一点）。 沉淀是未破碎或破碎不完全的菌体。 4. 染色：破碎后的菌液涂片，革兰氏结晶紫溶液染色0.5分钟，镜检。超声后加入核酸酶消除核酸对蛋白的污染。一些需要注意的问题： 1. 蛋白以包涵体形式表达，追求的是高破碎率，要求细胞碎片很小，而另一种蛋白是可溶形式表达，所以细胞碎片不能很小，两种情况要求不同但目的相同，都是便于后期的固液分离。2. 如果超声时出现黑色沉淀，说明超声功率太强。3. 超声时间太长、功率太高对蛋白活性肯定有影响。4. 尽量防止泡沫的产生。

随着重组DNA技术得到广泛应用以来，生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质，必须将细胞破壁，使产物得以释放，才能进一步提取，因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤，破碎方法的得当与否，直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一下。 　　1. 高压匀浆法 　　设备是高压匀浆器，它由高压泵和匀浆间组成，美国Microfluidics公司和ATS公司均有产品出售。其破碎机理：细胞在一系列过程中经历了高速造成的剪刀，碰撞以及由高压到常压的变化从而造成细胞的破碎。 　　存在的问题；较易造成堵塞的团状或丝状真菌，较小的革兰氏阳性首以及有些亚细胞器，质地坚硬，易损伤匀浆阀，也不适合用该法处理。 　　2. 高速珠磨法 　　设备是珠后机，瑞士WBC公司和德国西门子机械公司均制造各种型号的珠磨机，其破碎机下：微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合，珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞，促使细胞壁破碎，释出内含物，在珠波分离器的协助下，珠子被滞留在破碎室内，浆液流出，从而实现连续操作，破碎中，生的热量由夹套中的冷却液带走。 　　存在的问题：操作参数多，一般赁经验估计并且珠子之间的液体损失30％左右。 　　3. 超声破碎 　　频高于15-20KHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎。其破碎机理：可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关。 　　存在问题；超声波破碎在实验室规模应用较普遍，处理少量样品时操作简便，液量损失少，但是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。而且大容量装置声能传递，散热均有困难。 　　4. 酶溶法 　　就是用生物酶将细胞壁和细胞腊消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1．3-葡聚糖酶、蛋白酶等。 　　存在的问题；易造成产物抑制作用，这可能是导致胞内物质释放率低的一个重要因素。而且溶酶价格高，限制了大规模利用。若回收溶酶，则又增加百分离纯化溶酶的操作。另外酶港法通用性差，不同菌种需选择不同的酶。 　　5. 化学渗透法 　　某些有机溶剂（如苯、甲苯）、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理；化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。 　　存在的问题；时间长，效率低；化学试剂毒性较强，同时对产物也有毒害作用，进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂；通用性差：某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。 　　本文介绍了几种细胞破碎的方法，可谓各有千秋，在实际应用中，应尽量考虑全面，选择最科学、有效的方法。

超声破碎的原理：超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它既是一种波动形式,又是一种能量形式。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热（42－43℃）。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡。另外，空化泡破裂时产生瞬时高温（约5000℃）、高压（可达500×104Pa），可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。损伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。所以如果使用玻璃管，可能会碎裂，而通常使用的是塑料试管。 1、大肠杆菌表达外源蛋白，在超声破碎的时候，用含有1%triton-X-100的PBS悬浮，然后超声的效果较好，1%triton-X-100的作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用，比如链霉菌。 2、3、酵母破碎的问题/a、一般的PROTOCOL都是用glass beads，破碎酵母细胞sigma G-8772 酵母破碎效果好的我所做过的方法中还是玻璃珠，效率很高，而且对目的蛋白活性不会有什么影响。一般应该用这个方法。 b、化学裂解的方法，10g酵母 加1ml的乙酸乙酯，充分搅拌至液体状。此法的裂解效果不错的。加尿素裂解液（尿素8mol/L, NaCl 0.5mol/L,Tris 20mmol/L, EDTA 20mmol/L, 2%SDS, PH值8.0），据说效果可以c、毕氏酵母细胞破碎法文献上的方法： The pelleted cells were resuspended in 200 ll 1±8 M NaOH, 1±2 M b-mercaptoethanol, and incubated for 5 min on ice. After addition of 200 ll 10%TCA, the mixture was incubated for 5 min, centrifuged, and the pellet was resuspended in 50 ll 2?SDS-PAGE loading buffer and neutralized at pH 7±0 by adding 5±10 ll 1 M Tris base. The samples were heated to 95 °C for 3 min before loading onto SDS-PAGE gels (12% acrylamide). 若是想得到胞内蛋白可以用蜗牛酶处理，效果比较好！

粉碎机是将大尺寸的固体原料粉碎至要求尺寸的机械。粉碎机由粗碎、细碎，风力输送等装置组成，以高速撞击的形式达到粉碎机之目的。利用风能一次成粉，取消了传统的筛选程序。主要应用矿山，建材等多种行业中。粉碎机-分类　　根据被碎料或碎制料的尺寸可将粉碎机区分为[url=http://baike.baidu.com/view/2365054.htm][color=#136ec2]粗碎机[/color][/url]、[url=http://baike.baidu.com/view/4781850.htm][color=#136ec2]中碎机[/color][/url]、细磨机、超细磨机。　　在粉碎过程中施加于固体的外力有压轧、剪断、冲击、研磨四种。压轧主要用在粗、中碎，适用于硬质料和大块料的破碎；剪断主要用在细碎，适于韧性物料的粉碎；冲击主要用在中碎、细磨、超细磨，适于脆性物料的粉碎；研磨主要在细磨、[url=http://baike.baidu.com/view/3581639.htm][color=#136ec2]超细磨[/color][/url]，适于小块及细颗粒的[url=http://baike.baidu.com/view/689316.htm][color=#136ec2]粉碎[/color][/url]。

由于实验需要，实验室需要粉碎那种 粒型 的分子筛（硬度比较高），前不久从淘宝上买了个 万能粉碎机（300元），用了不到10次就彻底歇菜了，请问有没有哪位同行 能够推荐一款 高性价比的粉碎机，http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif，非常感谢！

名 称：骨髓细胞的提取目的：分离并培养骨髓间充质干细胞原理：先分离出单核细胞然后再通过培养分离出骨髓间充质干细胞内容：步骤一：小鼠骨髓细胞的获取1． 断颈处死小鼠（7-12周，雌雄均可），投入盛有250ml左右的0.1%新洁尔灭或75%酒精中浸泡3-5分钟，拎出后将小鼠仰面翻铺于超净台上一个消毒托盘上。2． 用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。将它们放入另外一个消毒托盘中，并换一套新的剪子和镊子。手术器械事先均必须消毒。3． 小心剥离肌肉，分别剪下Femurs and Tibias, 剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。4． 拿两支5ml无菌注射器，每支吸取5ml IMDM(10%FBS, 50/50u/ml Pen/Strep)，换装一个4号针头（又称皮针）或1ml注射器的针头，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，对准一个无菌15ml离心管，将细胞冲出。每根骨用2.5ml IMDM培养液左右即可基本冲下骨髓腔内的细胞。5． 300C下离心，1200转/10分钟，去上清，但留1ml，以便用于在振荡器上悬浮细胞。6． 加进氯化铵溶液（NH4Cl: 8.99g/L, KHCO3: 1g/L, Na4-EDTA: 0.037g/L ，过滤灭菌, 40C储存）裂解红细胞，按1: 9比例，即1ml 细胞悬液，加进9ml氯化铵溶液，混匀，冰上10分钟。 7． 300C离心，1200转/10分钟，去上清。步骤二：淋巴细胞分离液分离小鼠骨髓细胞1． 按步骤二方法采集小鼠骨髓细胞，并破红细胞2． 细胞用4ml培养液悬浮，缓慢留置于8ml淋巴细胞分离液液面上，2000rpm for 20min.3． 小心吸取云雾状底层的基质细胞约1.5ml的体积，置于1个盛有1ml无菌细胞培养用PBS的15ml离心管中，颠倒混匀，1200rpm for 10min, 去上清4． 如果是注射用细胞，则用5ml PBS洗涤细胞2次；5． 离心沉淀下来的细胞用50-200ul PBS，计数细胞，并计算所需细胞体积数铺板培养

测颗粒度时超声的时间如何确定？见标题，时间太长会造成颗粒粉碎，如何选择最佳的时间呢?

最为大陆地区畅销的重压研磨式超微粉碎机的原型机---台湾超微粉碎机的光芒已经不在耀眼，当大陆第一次接触这类粉碎机时被其原理和结构所折服，一款小型超微粉碎机对于中药尤其是纤维性中药的粉碎效果比大型设备和其他新型设备都要更好，于是我们开始了踏上了一条漫漫长路，从测绘到研究仿制我们只用了三个月，但是从本辰的第一台原型机到今天系列化的产品我们却用了将近十年。台湾粉碎机进入大陆时我们的技术还很薄弱，正确的来说我们的眼光还很短浅，如何突破当时粉碎机行业发展的瓶颈是一个很大的难题，台湾荣聪精密机械的新型重压研磨式小型中药超微粉碎机的出现犹如寂静的水平投下了一颗石子，他对于当时大陆地区机械式粉碎机行业来说是个不大不小的震撼，真是这款机器将中药粉碎机行业的一道难题解决---中药纤维性物料的超微粉碎机难题。 每当看到车间内那台已经落满灰尘被我们拆散的台湾粉碎机原型机时总是倍加感慨，想想当年第一次见到它时的惊奇，看看现在车间内最基本型的设备，企业发展的每一幕又浮现在眼前。台湾超微粉碎机采用的是单电机结构，也就是一台电机同时带动粉碎机研磨轮和风机转动，如此小型的设备做到如此结构而且做工精细足见台湾同胞的认真。目前我公司的CWF系列古船式中药超微粉碎机全部采用双机双变频型，也就是两台电机其中一台大功率电机带动主机研磨轮转动，另一台小型电机带动集料风机转动，每台电机分别由一台变频器控制速度，这样针对不同物料可以实现不同的粉碎力度和速度，而物料比重的不同实现精确分级收集在第二台小型电机的变频器上也恩能够轻松实现。如今本辰系列古船式超微粉碎机以及实现一体化设计，并且结合工业冷水机实现低温粉碎，伴随着气压控制系统的开发，更加精准控制研磨力度的想法也得以实现，三研磨轮的新型产品也已经下线，产量从每小时几百块到每小时几十几百公斤实现了全系列涵盖。本辰系列中药超微粉碎机CWF系列的工作原理和传统中医研船，脚踏碾轮粉碎原理相同。碾轮在轨道上圆周滚动，加上适当压力，在反复碾轧的过程中使物料粉碎并达到需要的细度。由于碾轮双边刃口有剪切作用，也协同粉碎，特别是纤维性物料。粉碎过程中细的物料飘浮起来被风机吸入，排到旋风集料罐，布袋排出气体，成品料粉留在袋内。，结构紧凑，占地小，非常适合各类实验室及小批量试制，生产使用。可广泛用于中药、西药、农药、生物、化妆品、食品、饲料、化工等多行业干性纤维性和脆性物料的超微粉碎需求。尤其对于纤维性（如中草药、灵芝等）、高韧性（动物角类、棉花等）、高硬度（如玻璃等）物料的粉碎效果良好。全新的气动压力调节系统可以有效延长核心部件的使用寿命，使操控性更加良好。 每次去台湾交流或者经停台湾总会跟那边的老朋友聊上很久，每当他们听说我们又有新的产品出现时总是表现的比我们还要高兴，正如我们第一次接触时一样，台湾同胞也在深切盼望祖国大陆的中药机械发展的更快更好，让中药超微粉碎机这一经典机械发挥它的作用，为中药造福国人走向世界贡献力量。如今台湾粉碎机行业的发展也可以用日新月异来形容，众多新型粉碎设备不断推出，而台湾粉碎机行业赖以生存的质量更是达到了炉火纯青的地步，目前国内小型中药粉碎机厂家包括我们石家庄本辰公司还没有一家的产品质量和做工能够匹敌台湾企业，这一点通过台湾佑崎实验室超微粉碎机FDV和荣聪机械的气流式超微粉碎机RT-25以及RT系列小型高速粉碎机在大陆地区的畅销程度可见一斑，作为一家人大陆和台湾实现了在中药粉碎机方面的共同发展，最为大陆中药超微粉碎机的老师我们真诚的对台湾朋友说一声谢谢。

作为精密科研仪器，大家在使用LC-CS650超声波细胞破碎仪时要注意哪些呢？下面就是几点常见的注意要点。1、切记将超声变幅杆插入样品后才能开机，防止空载对仪器的损伤。2、变幅杆探头入水深度：1到2 厘米之间，液面高度宜30mm以上，探头居中不可贴壁。3、超声参数设置： 1）时间：时间设定应以超声短时多次原则，超声工作时间应小于5秒，间隙时间应大于或等于超声时间，以便于热量散发。2）超声功率： 不宜太大，以免样品飞溅或起沫。小于10ml样品容量，功率应在200w以内,选用2mm超声探头（2MM的小探头功率严禁超过350W）；10-200ml样品容量，功率应在200－400w，选用6mm超声探头；200ml以上的样品容量，功率在300-600w，选用10mm超声探头；（2MM的小探头功率严禁超过350W）3）破碎容器选择：根据样品量选择破碎杯（可用烧杯代替）；参数设定实例：如100ml大肠杆菌样品设置参数：300W， 70次，超声5秒，间隙5秒（总时间为10分钟）。

[b][font=微软雅黑][size=10.5pt]一、机械破碎法：[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器[/font] [font=微软雅黑]等将细胞破碎开来[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1. 高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]二、物理破碎法：[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt]指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1．用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器）。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]机制：可能与强声波作用溶液时，气泡产生、长大和破碎的空化现象有关，空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]超声波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。（使用时注意降温，防止过热）。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 高压破碎：细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上，被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化，从而破碎释放内含物。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]这是一种温和的、彻底破碎细胞的较理想的方法。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]3. 反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]三、化学破碎法：[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜，使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（[/font]SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]四、酶学破碎法[/font] [font=微软雅黑]：[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]选用合适的酶，使细胞壁遭到破坏，进而在低渗溶液中将原生质体破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果更好。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]裂解液标准配方[/font]: ：50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]综合叙述：无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（[/font]DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力，但不是全部，而且应该在破碎的同时多加几次；另外，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使这些条件都要适合于目的物质的提取。[/size][/font]

1、高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度http://www.39kf.com/Txt2Img/ju.png此法适用于动物内脏组织、植物肉质http://www.39kf.com/Txt2Img/named.png子等。　　2、玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机http://www.39kf.com/Txt2Img/iuy87612.png高，适用于量少和动物脏器组织。　　3、超声波处理法：用http://www.39kf.com/Txt2Img/2008-9-13.png定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法http://www.39kf.com/Txt2Img/kmmn675.png适用于微生物材料，用http://www.39kf.com/Txt2Img/datu.png肠杆菌制备各种酶，常选用50-100毫克菌体/毫升浓度，在1KG至10KG频率下处理10-15分钟，此法的缺点是在处理过程会产生大量的热，应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。　　4、反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。　　5、化学处理法：有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏，细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果http://www.39kf.com/Txt2Img/877667jkdkk.png好。　　　　无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活力，但不是全部，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使http://www.39kf.com/Txt2Img/jsdh766289sdmkxu.png些条件都要适合于目的物质的提取。