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蛋白电泳分析仪

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蛋白电泳分析仪相关的论坛

  • 【求助】有谁用毛细管电泳分析了无机离子?

    我准备用毛细管电泳分析重要中的无机阴离子和阳离子但是许多都是用电化学检测的有没有谁用紫外检测的?分析了那些离子?用的什么缓冲液?那种进样方式?谢谢了哈请各位老大帮个忙!

  • 【求助】蛋白复合体

    我是个新手,现有一个蛋白复合体,用凝胶电泳分析三个部分:名称 分子量 pI1st band 18.0KD 6.682nd band 13.5KD 5.473rd band 12.2KD 8.2没有标品,如何用毛细管电泳分离并相对定量。不用毛细管凝胶电泳行不行。我的e-mail: htx761229@sina.com谢谢!

  • 【转帖】蛋白分析系统

    蛋白分析系统在我们选择蛋白分析工具的时候,通常是根据不同的蛋白来选择不同的分析手段,如凝胶电泳、化学荧光染色、质谱等等。但是目前已经研制出的蛋白分析工具的种类繁多,从这一方面也在一定程度上反映了蛋白分析的复杂性。以下是一些近期推出的蛋白分析系统,希望能帮助您轻松完成研究工作。

  • [课件]高效毛细管电泳分析法

    第1节 概述.ppt 第2节 高效毛细管电泳的理论基础.ppt 第3节 高效毛细管电泳仪.ppt 第4节 高效毛细管电泳分离模式.ppt 第5节 应用与进展.ppt[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=23629]高效毛细管电泳分析法[/url]

  • 牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品嘛

    牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息:  功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。  乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。  优点与特点:  准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。  快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。  适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。  在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。  综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • [推荐]蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用zz

    褚福亮,王福生, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室 北京市 100039项目负责人 王福生, 100039 ,北京市丰台路26号, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室. fswang@public.bta.net.cn电话:010-66933332 传真:010-63831870收稿日期 2002-08-15 接受日期 2002-09-03摘要新近广泛应用蛋白质芯片(ProteinChipâ Array)系统成功鉴定出了一些重要疾病(如肿瘤和危害性较大的传染病)新的、特异性的生物标记(biomarkers),后者不仅在生物医学的基础方面具有重要的科学价值,而且在临床疾病的诊断、治疗和预防发挥重要的指导作用,显示了良好的发展前景.本文就表面增强的激光解析电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.此外,我们就蛋白质谱分析技术在病毒性肝炎、肝硬化和肝癌等一系列肝病方面的应用策略和前景进行了分析.褚福亮,王福生. 蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用.世界华人消化杂志 2002 10(12):1431-14350 引言人类基因组计划已经进入后基因组时代-即功能基因组时代[1],作为基因功能的直接体现者-蛋白质,及其之间的相互作用越来越引起基础和临床科学家们的关注[2-6] .因为要彻底了解生命的本质,只把基因测出来还是不够的,还必须要了解其在生物生长、发育、衰老和整个生命过程中的功能、不同蛋白质之间的相互作用以及他们与疾病发生、发展和转化的规律[7-14] .正因为如此,有关上述问题的蛋白质组学研究成了今天生命科学最重要的焦点之一[15] .为了阐明蛋白质在上述生命现象中的作用和相关机制,人们设计了许多新的方法技术,如:二维电泳、质谱分析、微距阵列、酵母双杂交和噬菌体展示等,这些方法在一些特定的情况下,虽然显示出了他们各自不同的优点,但是同样也存在着较大的局限性,难以开展大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质等方面的分析,因而设计更全面、同时研究多种蛋白质相互作用的技术,在功能基因组和蛋白组学的研究中建立一个更有效的技术平台,成为本领域中优先关注的问题[16] .近来,美国Ciphergen(赛弗吉)公司研制的ProteinChipâ Array的仪器,并建立了一种新的蛋白质飞行质谱-表面增强的激光解析离子化-飞行时间-质谱(surface-enhanced laser desorption/inionation-time of flight-mass spectra, SELDI-TOF-MS),已取得可喜的进展,筛选出了许多与疾病相关的新型生物标志,不仅为临床疾病的诊断和治疗等提供了新的选择,而且在基础科学、新药研制和疾病预防等方面具有广泛的应用前景[16-18] .本文就SELDI-TOF-MS相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.1 ProteinChipâ Array系统和SELDI-TOF-MS的特点1.1 蛋白质芯片系统的组成和原理 蛋白质芯片系统由三部分组成:蛋白质芯片、芯片阅读器和芯片软件.供研究用芯片上有6-10芯池,不同的芯片表面上的化学物质不同,芯片表面分为两大类:一类为化学类表面,包括经典的色谱分析表面,如:结合普通蛋白质的正相表面,用于反相捕获的疏水表面,阴阳离子交换表面和捕获金属结合蛋白的静态金属亲合捕获表面;另一类称为生物类,特定的蛋白质共价结合于预先活化的表面阵列,可以用来研究传统的抗体一抗原反应,DNA和蛋白质作用,受体、配体作用和其他的一些分子之间的相互作用[19] . 根据检测目的不同,可以选用不同的芯片,或者自己设计芯片.将样本和对照点到芯池上以后,经过一段时间的结合反应,用缓冲液或水洗去一些不结合的非特异分子,再加上能量吸收分子(energy absorbing molelule,EAM)溶液,使样本固定在芯片表面.当溶液干燥后,一个含有分析物和大量能量吸收分子“晶体”就形成了.能量吸收分子对于电离来说非常重要.经过以上步骤,就可经把芯片放到芯片阅读器中进行质谱分析. 在阅读器的固定激光束下,芯片上、下移动,使样本上每一个特定点都被“读”到.激光束的每一次闪光释放的能量都聚集在该区一个非常小的点上(focused laser beam,聚焦激光束).这样,每个区都含有丰富的,可寻址(addressable)的位置.蛋白质芯片处理软件精确控制激光寻读过程.当样本受到激发,就开始电离和解除吸附.不同质量的带电离子在电场中飞行的时间长短不同,计算检测到的不同时间,就可以得出质量电荷比,把他输入电脑,形成图像[19].Ball et al [20]采用一种称为人工神经网络(artifical neural network,ANN)的算法处理出现的成千上万的峰,鉴定出三个分子量为13 454、13 457和14 278的生物标记分子,使疾病预测率达到97.1 %.1.2 ProteinChipâ Array芯片和SELDI-TOF-MS的特点 新型蛋白芯片与以往的蛋白芯片不同之处:SELDI-TOF-MS,他是在MALDI(matrix-assisted laser desorption/inionation)[21,22]基础上,改进后实行表面增强的飞行质谱.SELDI-TOF-MS优于MALDI-TOF表现为他不会破坏蛋白质,或使样本与可溶的基质共结晶来产生质谱信号.对SELDI-TOF来说,可以直接将血清、尿液、组织抽取物等不需处理直接点样检测[40] 由于一部分非特异结合的分析物被洗去,因而出现的质峰非常一致,有利于后期分析[23,24] . 与二维电泳相比:二维电泳分析蛋白质的分子量在30 KDa以上时电泳图谱较清楚,对在组织抽提物中占很大比例的低丰度的蛋白质不能被检出;其次,二维电泳胶上的蛋白质斑点很大一部分包含一种以上的蛋白质;而且,二维电泳耗时长,工作量大,对象染色转移等技术要求高,不能完全实现自动化.而SELDI-TOF在200 Da-500 KDa区间都可以给出很好的质谱,对一个样本的分析在几十分钟内就可以完成[19],处理的信息量远远大于二维电泳;对于低丰度物质,即使浓度仅attomole(10-18)的分子,只要与表面探针结合,就可以检测到,这也是二维电泳所不具备的[24,25] . 对于微距阵蛋白芯片来说,需要一种不破坏折叠的蛋白质构象的固定技术,再与另外的蛋白质反应,经检测莹光来观察蛋白质之间的作用[26] .而基于SELDI-TOF-MS的ProteinChip分析蛋白质不需溶解、不需染色、廉价、针对性强. 因而蛋白质芯片仪具有以下优势:(1)可直接使用粗样本,如:血清、尿液、细胞抽提物等[27] .(2)使大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质成为可能;(3)他不仅可发现一种蛋白质或生物标记分子,而且还可以发现不同的多种方式的组合蛋白质谱,可能与某种疾病有关[28] (4)推动基因组学发展,验证基因组学方面的变化,基于蛋白质特点发现新的基因.可以推测疾病状态下,基因启动何以与正常状态下不同,受到那些因素的影响,从而跟踪基因的变化[2,14,15] . 其存在的问题:对于不同的样本,根据检测的目标采取或者设计几种芯片,理论上可以把所有的相同性质蛋白质捕获,但是实际上仍有少量的分子没与表面探针结合.使用SELDI-TOF-MS,仅能给出蛋白质的分子量,不能给出C端、N端的序列,也没法知道蛋白质的构型,因此需要将蛋白质充分纯化后,用蛋白酶消化芯片上的蛋白质,分析肽段,再用生物信息学方法鉴定蛋白质序列[18,24] .另外,在国内,该芯片费用较高,分析质谱需要大量后续工作支持.

  • 【求助】有人做过GPO的蛋白电泳吗?

    有人做过GPO的蛋白电泳吗?今天做GPO(甘油磷酸氧化酶,MW:75KD)的还原型SDS-PAGE电泳,5%浓缩胶,12%的分离胶,理论上应该可以进行的,但什么都没有染出(其他蛋白都是正常的)。

  • 蛋白电泳小技巧2

    4. 电泳时虽然小电泳分离效果要好一些,但2小时以上的等待的时间实在是痛苦,因此可以提高电泳至150V,但需要将整个电泳槽放在放满冰水的脸盆里散热,这样跑出来的胶分离效果丝毫不比低电压来的差,关键是时间大大节省,不需1h即可看结果了。5. 做SDS-PAGE的时候,除了蛋白量上样一致,最好体积也一致,这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽,方便后面的比较,特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致,否则跑出来会有的宽有的窄,特别是上样体积相差较大的。

  • 【原创】第一次用六一电泳仪做蛋白电泳时出的chou

    以前一致用伯乐的蛋白电泳仪,现第一次用六一的工具做了SDS-PAGE胶,上电泳,结果电压加到250v了电流还只有9mA,电泳了很久也没有太大的变化,开始以为是电泳液有问题,重装重配还是这样,终于电泳完了,很丑的结果。为什么会这样呢,在拆胶的时候发现配胶用的胶条还在上面,原来是胶条阻止了电流通过!望大家注意哟!!哈

  • 蛋白等电聚焦凝胶电泳技术

    1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在电场中移动;当蛋白质迁移至其等电点位置时,其静电荷数为零,在电场中不再移动,据此将蛋白质分离。 等电聚焦中,只有在凝胶两端给以高电压时,才能获得较好的蛋白质条带分辨率,这就需要非常有效的凝胶冷却系统(否则会导致烧胶),即凝胶同期周围液体之间的热传递效率要高。由于平板胶热传递能力高,并可方便的同时比较多种蛋白质样品,所以平板胶用在等电聚焦上的居多。由于等电聚焦对蛋白质的电荷差异非常敏感,若要好的重复性,制备蛋白样品时一定要小心,要避免任何对蛋白质化学组成和结构的修饰。另外,蛋白质-脂类、蛋白质-蛋白质相互作用可引起电荷改变,进而导致等电点迁移或纹理现象。除非特殊需要研究蛋白质-蛋白质相互作用或者必须保持蛋白质的生物学功能,等电聚焦通常在含有尿素的变性凝胶系统中进行。使用非离子去垢剂也可以提高分辨率。 2.主要仪器、试剂仪器:微型电泳系统、电源、注射器、固定和染色用容器 试剂:丙稀酰胺、双-丙稀酰胺、载体两性电解质、尿素、过硫酸胺、TEMED、TritonX-100、2-巯基乙醇、溴酚蓝、磷酸、氢氧化钠、氯化钾、三氯乙酸、考马斯亮蓝、甲醇、乙酸。 储存液:1)30%(w/v)丙稀酰胺,1%(w/v)双-丙稀酰胺;2)20%Triton X100;3)10%三氯乙酸;4)1%三氯乙酸;5)1%溴酚蓝;6)考马斯亮蓝染色液;7)考马斯亮蓝脱色液;

  • 【第三届原创参赛】糖类的毛细管电泳分析

    11),使糖基上的羟基去质子而带负电(因此糖类的分析一般是由负极进样的),直接进行电泳分离,用紫外(195 nm)检测,但这样检测限很高。为降低检测限,可以选用硼酸盐缓冲液,加入硼酸盐不仅会生成络合阴离子,而且会导致195 nm处的吸光度增加2~20倍,但这时,糖分子的吸光度还是很低,检出限只能限制在nmol水平。为进一步降低检测限,可采用间接紫外法,即在缓冲液中加入强紫外吸收物质,形成背景电解质,使无吸收的物质产生负吸收而进行检测的一种方法。但更多的是采用紫外或荧光衍生试剂,如2-氨基吡啶、2-氨基喹啉、8-氨基萘-1,3,6-三磺酸(ANTS)等对单糖进行标记,既可以使糖带上一定的电荷,也可以增加检测的灵敏度。或是采用质谱检测。聚糖包括寡糖和多糖。简单单糖的分析方法也适于简单寡糖的分析。多糖一般利用酸解或酶解的方法将其转化为寡糖后进行分析。多糖也可以直接在合适的条件下进行电泳,但这方面的报道不多。3 糖类化合物的毛细管电泳分析最新进展进行阐述3.1 多糖的直接测定一般而言毛细管常用的检测器是UV、荧光(包括激光诱导荧光)或是MS。但也有其他检测器的报道,如Mikus et al. 使用电导检测器测定了肝素原料中的肝素含量。文中肝素样品未经前处理,并且样品中含有等渗的生理盐水,通过一根300μm i.d. (650μm o.d.) 由乙烯丙烯氟化物制成的长21cm的毛细管作为分离毛细管,通过在运行电解质的添加高聚物(如右旋糖酐)改善分离的选择性,整个分析过程灵敏、快速、简单、并具有良好的重现性。比以往利用凝胶色谱法控制肝素质量有了很大的进步。另一种我们在药学工作中常见的多糖类物质就是淀粉。不同来源的淀粉如玉米淀粉、马铃薯淀粉中支链和直链淀粉的比例不同,造成其制剂学上性质的不同,而建立简便、快速、准确测定二者的含量的方法一直是分析工作者研究的方向。Herrero-Martinez 报道了使用毛细管电泳检测直链淀粉与支链淀粉比例的方法,原理是在缓冲液中加入碘,毛细管电泳作为分离手段,由于淀粉与碘具有亲和作用,可形成复合物并在560nm有吸收而被检测。整个分离过程仅用时7min,该研究中还使用到了气泡形的检测池,使其检测线达到了0.1mg/ml同样是利用亲和作用的原理,Anikó利用脂多糖与蛋白质具有强烈的亲和作用的特性。开发了一种新的检测内毒素的方法,原理是血红素与内毒素形成复合物并在415nm有吸收而被检测,与前述的实验方法不同,血

  • 单链融合蛋白毛细管分离

    各位前辈好,有谁做过融合蛋白的还原性毛细管电泳分析吗?做单抗的话分离效果很好,但是做单链融合蛋白的就很少,烦请赐教,不胜感激

  • 蛋白电泳溴酚蓝水溶液的配置

    亲们,跑蛋白电泳时,0.05%的溴酚蓝水溶液怎么配比较好呢,因为它不溶于水。还有SDS溶液应该怎么配,它也不溶于水啊,一搅拌全是泡沫

  • 【分享】高效毛细管电泳法测定畜禽肌肉中肌红蛋白和血红蛋白

    采用P/ACETM MDQ高效毛细管电泳仪,电泳缓冲液为50mmol/L 柠檬酸-20mmol/L 柠檬酸三钠,pH2.6,电泳温度25℃,电压22kV,紫外检测波长196nm。结果表明:肌肉中肌红蛋白和血红蛋白含量测定结果相对标准偏差为0.69% 和0.90%,后加标准品和前加标准品回收率分别为93.26%~97.84%、90.32%~97.46% 和79.89%~84.14%、79.52%~83.65%。该方法简单、快速、对同时测定畜禽肌肉色素物质肌红蛋白和血红蛋白含量准确度良好,是评价肉品质参数的一种值得推广应用的新方法。

  • 蛋白质氨基酸残基组成分析以及蛋白预测软件

    http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/09/06/A1378379551.jpg 氨基酸是蛋白质的基础组成单位,通过研究蛋白质中氨基酸的性质和组成来预测蛋白质的结构和功能,蛋白质氨基酸残基组成分析主要是通过氨基酸分析仪来完成的,本文推荐了2个基于氨基酸组成进行蛋白质预测软件。基于氨基酸组成的蛋白质预测软件根据组成蛋白质的20种氨基酸的物理和化学性质可以辨析电泳等实验中的未知蛋白质,也可以分析已知蛋白质的物化性质。ExPASy工具包包涵的程序:AACompIdent:与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同,AACompIdent工具利用未知蛋白的氨基酸组成去确认具有相同组成的已知蛋白。该程序分析时需提交的相关信息包括:蛋白质的氨基酸组成、等电点pI和分子量(如果知道)、正确的物种分类及特别的关键词。此外,用户还需在六种氨基酸“组合”中作出选择,这影响到分析如何进行。例如,某种“组合”会把残基Asp/Asn(D/N)和Gln/Glu(Q/E)组合成 Asx(B)和Glx(Z);或者某种残基会在分析中被完全除去。对数据库中的每一个蛋白序列,算法会对其氨基酸组成与所查询的氨基酸组成的差异打分。由电子邮件返回的结果被组织成三级列表:第一张列表中的蛋白都基于特定的物种分类而不考虑pI和分子量;第二张列表包含了不考虑物种分类、pI和分子量的全体蛋白;第三张列表中的蛋白不但基于特定物种分类,并且将 pI和分子量也考虑在内。虽然计算所得结果各不相同,但零分表明了该序列与提出的组成完全相符。AACompSim:AACompIdent的一个变种,AACompSim提供类似的分析,但与前者以实验所得的氨基酸组成为依据进行搜索不同,后者使用SWISS-PROT中的序列为依据。有报道称,氨基酸组成在物种之间是十分保守的(Cordwell等,1995),并且通过分析氨基酸的组成,研究者能从低于25%序列相似性的蛋白之间发现弱相似性(Hobohm和Sander,1995)。因此,在“传统的”数据库搜索基础上辅以组成分析,能为蛋白质之间关系提供更多见解。PROSEARCH:PROPSEARCH也提供基于氨基酸组成的蛋白质辨识功能。用144种不同的物化性质来分析蛋白质,包括分子量、巨大残基的含量、平均疏水性、平均电荷等,把查询序列的这些属性构成的“查询向量”与SWISS-PROT和PIR中预先计算好的各个已知蛋白质的属性向量进行比较。这个工具能有效的发现同一蛋白质家族的成员。可以通过Web使用这个工具,用户只需输入查询序列本身。分子量搜索(MOWSE)分子量搜索(MolecularWeightSearch,MOWSE)算法利用了通过质谱(MS)技术获得的信息。利用完整蛋白质的分子量及其被特定蛋白酶消化后产物的分子量,一种未知蛋白质能被准确无误地确认,给出由若干实验才能决定的结果。由于未知蛋白无需再全部或部分测序,这一方法显著地减少了实验时间。MOWSE的输入是一个纯文本文件,包含一张实验测定的肽段列表,分子量范围在0.7到4.0Kda之间。计算过程基于在OWL非冗余蛋白质序列库中包含的信息。打分基于在一定分子量范围内蛋白中一个片段分子量出现的次数。输出的结果是得分最佳的30个蛋白的列表,包括它们在OWL中的条目名称、相符肽段序列、和其它统计信息。模拟研究得出在使用5个或更少输入肽段分子量时,准确率为99%。该搜索服务可通过向mowse@daresburg.ac.uk发送电子邮件实现。为获得更多关于查询格式的细节信息,可以相该地址发送电子邮件,并在消息正文中写上“help”这个词。蛋白质氨基酸组成分析用盐酸在110 ℃将蛋白或多肽水解成游离的氨基酸,用氨基酸分析仪测定各氨基酸的含量。采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似,但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。分析效果:从目前已知的氨基酸分析方法比较来看,除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:0.5 pmol;氨基酸分析仪:10 pmol),其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面,都优于其他分析方法。蛋白质氨基酸残基组成分析的主要步骤包括:首先是蛋白被水解为氨基酸,其次是采用离子色谱等方法进行游离的氨基酸含量和组成的分析。总之利用蛋白可以分析氨基酸,利用氨基酸也可以研究蛋白质。

  • SDS-PAGE蛋白质电泳常见问题分析1

    Q:SDS-PAGE电泳的基本原理?A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与1.4g去污剂结合。当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。

  • 安捷伦推出自动化平行毛细管电泳系统新品 可大幅提升蛋白分析效率

    [font=arial][size=14px]1月17日,安捷伦[/size][/font][font=arial][size=14px]宣布在[/size][/font][font=arial][size=14px]第[/size][/font][font=arial][size=14px]23[/size][/font][font=arial][size=14px]届[/size][/font] [font=arial][size=14px]PepTalk[/size][/font] [font=arial][size=14px]会议[/size][/font][font=arial][size=14px]期间正式发布用于蛋白质分析的新型自动化平行毛细管电泳系统——Agilent ProteoAnalyzer系统。这款新平台简化并提高了复杂蛋白质混合物的分析效率,而这项分析则是制药、生物技术、食品分析和学术界分析工作流程的核心。第 23 届PepTalk会议于当地时间1月16日至19日在美国加利福尼亚州圣地亚哥举办。[/size][/font][font=arial][size=14px]毛细管电泳[/size][/font][font=arial][size=14px] [/size][/font][font=arial][size=14px]([/size][/font][font=arial][size=13px]Capillary[/size][/font][font=arial][size=13px] [/size][/font][font=arial][size=13px]Electrophoresis[/size][/font][font=arial][size=13px] [/size][/font][font=arial][size=13px],简称[/size][/font][font=arial][size=14px]CE[/size][/font][font=arial][size=14px])可提供快速的高分离度分析,且样品消耗量极少,因此已成为蛋白质分离不可或缺的工具。生物制药公司对单克隆抗体以及具有潜在治疗意义的其他蛋白靶点的兴趣日益扩大,因此推动了[/size][/font][font=arial][size=14px]CE[/size][/font][font=arial][size=14px]解决方案需求的预期增长。[/size][/font][align=center][img=,400,400]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/b45216df-c79c-4c9a-bc4c-c5560e0fe70f.jpg[/img][/align][align=center][font=arial][size=14px]用于蛋白质[/size][/font][font=arial][size=14px]CE-SDS[/size][/font][font=arial][size=14px]分析的[/size][/font][font=arial][size=14px]Agilent ProteoAnalyzer[/size][/font][font=arial][size=14px]系统[/size][/font][font=arial][size=14px]外观[/size][/font][/align][font=arial][size=14px]Agilent ProteoAnalyzer[/size][/font][font=arial][size=14px]系统具有更高的效率、多功能性和可靠性,尤其适用于蛋白质[/size][/font][font=arial][size=14px]QC[/size][/font][font=arial][size=14px]工作流程。自动执行分离、数据处理和简化前处理步骤,从而简化分析工作流程,提高效率,降低培训和相关人力成本。该系统还可以分析从粗裂解物到纯化组分的多种样品类型。它可以在单次运行中分析不同大小和类型的蛋白质,并始终提供准确的结果,减少了耗时且昂贵的重复分析。[/size][/font][font=arial][size=14px]安捷伦副总裁兼生物分子分析事业部总经理[/size][/font][font=arial][size=14px]Knut Wintergerst[/size][/font][font=arial][size=14px]表示:“[/size][/font][font=arial][size=14px]Agilent ProteoAnalyzer[/size][/font][font=arial][size=14px]系统将蛋白质分析的效率、多功能性和可靠性提升至新的水平。自动化平行毛细管电泳可简化复杂混合物的分析,使从制药到学术界的各个领域均受益良多。兼具出色的精密度和可靠性,可降低人工成本,并改进分析工作流程。”[/size][/font][font=arial][size=14px]安捷伦整合基因组学事业部产品经理[/size][/font][font=arial][size=14px] Kyle Luttgeharm [/size][/font][font=arial][size=14px]将于当地时间[/size][/font][font=arial][size=14px]1[/size][/font][font=arial][size=14px]月[/size][/font][font=arial][size=14px]18[/size][/font][font=arial][size=14px]日(周四)中午[/size][/font][font=arial][size=14px]12:25[/size][/font][font=arial][size=14px]在[/size][/font][font=arial][size=14px]PepTalk [/size][/font][font=arial][size=14px]举办研讨会,主题为《[/size][/font][font=arial][size=14px]了解[/size][/font][font=arial][size=14px] ProteoAnalyzer [/size][/font][font=arial][size=14px]系统:独树一帜的自动化蛋白质分析[/size][/font][font=arial][size=14px]》[/size][/font][font=arial][size=14px]。[/size][/font][font=arial][size=14px]安捷伦是[/size][/font][font=arial][size=14px]CE[/size][/font][font=arial][size=14px]市场的[/size][/font][font=arial][size=14px]领导企业[/size][/font][font=arial][size=14px]之一,其自动化电泳系统广泛应用于核酸分析,如[/size][/font][font=arial][size=14px]NGS QC[/size][/font][font=arial][size=14px]和[/size][/font][font=arial][size=14px]IVT RNA[/size][/font][font=arial][size=14px]应用。安捷伦希望通过扩展适用于相关生物分子类别的[/size][/font][font=arial][size=14px]ProteoAnalyzer CE[/size][/font][font=arial][size=14px]产品组合,巩固其作为质量控制分析解决方案主要供应商的市场地位。[/size][/font][来源:仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

  • 【每周读报】基于核酸适配子毛细管电泳分析技术的肝癌诊断新方法

    以下转自http://gi.cmt.com.cn/detail/253665.html基于核酸适配子毛细管电泳分析技术的肝癌诊断新方法 目的 在前期工作中我们筛选出一批针对肝癌血清特异的核酸适配子。毛细管电泳是一种微量分析技术。本研究旨在建立一种基于毛细管电泳技术的核酸适配子与血清结合程度的分析方法,为适配子在肝癌诊断中的应用提供一种简便有效的新方法。  方法 人工合成5’端FAM标记的核酸适配子;将等差梯度浓度的适配子溶液进行毛细管电泳,以确定适配子的合适用量;将合适用量的适配子与等差梯度体积的肝癌混合血清孵育后进行毛细管电泳,以确定血清标本的合适用量;以适配子的合适用量为中心,将梯度浓度的适配子分别与合适用量的肝癌混合血清和正常混合血清孵育及检测,确定最佳的适配子用量;重复性试验分析毛细管电泳检测适配子与血清结合程度的精确性;以最佳的适配子用量与血清用量为条件进行临床标本检测,评价其对肝癌的诊断价值。  结果 本研究以适配子AP-HCS-9-90为模型,确定的最佳适配子用量为0.9pmol,合适的血清标本用量为1ml,毛细管电泳检测适配子与血清结合程度的重复性良好。以上述优化条件检测了41例肝癌血清标本和34例正常血清标本。适配子与血清孵育后毛细管电泳可显示A、B、C三个峰。肝癌血清标本的A、B、C峰面积分别为77949±158035、1328940±1882435、49909±9481,正常血清标本的A、B、C峰面积分别为15273±21043、377308±680039、50178±6868,两组间以B峰面积差异具有极显著性意义(t=3.009, P=0.004),A峰面差异有显著性意义(t=2.513, P=0.016),C峰面积差异无统计学意义(t=0.138, P=0.891)。B峰的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.869,诊断肝癌的敏感度为82.9%,特异度为79.4%,准确度分别为81.3%。多因素Logistic回归分析建立诊断模型,诊断价值可进一步提高,AUC为0.885,诊断肝癌的敏感度为90.2%,特异度为82.4%,准确度为86.7%。  结论 成功创建起基于毛细管电泳技术的核酸适配子与血清结合程度的检测方法,并在基于核酸适配子的肝癌诊断中具有良好的价值。

  • 天研|牛奶蛋白质分析仪的原理是什么

    牛奶蛋白质分析仪的原理主要基于光学测量技术,特别是光谱分析法。具体地说,它采用红外光谱法来测量牛奶中乳清蛋白和酪蛋白的含量。首先,将牛奶样品制成透明薄片,然后使用近红外光电传感器和光源对其进行扫描。牛奶中的蛋白质对特定波长的红外光有特定的吸收特性,通过测量这些吸收特性,可以分析出牛奶中蛋白质的种类和含量。此外,仪器会将牛奶光谱与事先建立的标准光谱进行比较,通过复杂的算法处理,从而得出各种蛋白质形态的含量。这种比较和计算过程确保了测量结果的准确性和可靠性。总的来说,牛奶蛋白质分析仪通过光学测量和光谱分析技术,能够快速、准确地测定牛奶中蛋白质的含量和种类,为乳制品生产、质量控制和科学研究提供了有力的支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404291701212298_2595_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

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