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色谱长柱

仪器信息网色谱长柱专题为您提供2024年最新色谱长柱价格报价、厂家品牌的相关信息， 包括色谱长柱参数、型号等，不管是国产，还是进口品牌的色谱长柱您都可以在这里找到。 除此之外，仪器信息网还免费为您整合色谱长柱相关的耗材配件、试剂标物，还有色谱长柱相关的最新资讯、资料，以及色谱长柱相关的解决方案。

色谱长柱相关的论坛

  • 怎样才能延长色谱柱的使用寿命？

    在气相色谱分析工作中，色谱柱是一个很昂贵的耗材，价格动则几千或上万。一根气相色谱柱使用的次数越多，时间越久，其摊分到单次检测上的成本就越低，因此了解影响色谱柱寿命的因素，采取措施延长色谱柱的使用寿命具有重要的意义。那么影响色谱柱寿命的主要因素有哪些？怎样才能延长色谱柱的使用寿命？

  • 【求助】求长使用寿命色谱柱

    做地红霉素用的是国家药典标准：采用C18色谱柱(5μm,4.6×150mm)为固定相;乙腈-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾1.41g与磷酸氢二钾6.91g加水至1000ml)-甲醇(44:37:19)为流动相;检测波长为205nm;流速1ml／min;柱温40℃。现在用的这支进口BDS色谱柱的使用寿命不足4个月。求助高手用哪个品牌的色谱柱做的峰形又好，使用寿命又长的呢？麻烦各位高手推荐下。

  • 【分享】-----如何延长色谱柱的使用寿命

    如何延长色谱柱的使用寿命验室的经费有限，所以尽量延长柱子的使用寿命也是我们做实验要考虑的。1.我是先将样品处理的尽可能的单一，（只做一种类型样品分析，也会用的时间长一些）不需要分析的在进柱之前尽量将它们去除掉，免得污染以后费大力气再搞，一定要过0.45μm的微孔 滤膜。2.要用进口的，国产的很难说啊。装上预柱可以很有效的保护你的色谱柱不受污染。3.我是做中药的，每针分析完之后，我都要简单的把柱子洗一下，要不然柱效会下降的。4.做完一次分析后，用水、10％甲醇、40％甲醇、70％甲醇、纯甲醇依次冲洗一下柱子。再保存好。

  • 【分享】如何延长色谱柱的使用寿命

    如何延长色谱柱的使用寿命 色谱柱的使用寿命，除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外，最主要的是与日常的委会密切相关。为延长色谱柱的使用寿命，维护您的利益，请仔细阅读此部分。 色谱柱的使用寿命主要是分局柱效和柱压两指标来衡量，如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高，通常被认为该色谱柱已经结束。因此，延长色谱柱使用寿命的关键是，消除引起柱效下降和柱压升高的因素。以下是色谱柱的日常维护方法：一、流动相的PH应在使用的范围内 Welch公司的色谱柱除反相氰基柱PH1.5-9.0外，其反相色谱柱的PH范围均为1.5-10，由于填料中存在Si-C和Si-O键，流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂，使柱效下降，使用寿命变短。由于流动相的PH 控制不当而对色谱柱造成的损害，通常很难是色谱柱恢复，因此必须认真对待，严格控制流动相的PH值。二、去除样品和流动相中的固体颗粒 样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板，筛板被堵住不仅会引起柱压的升高，而且也会引起柱效下降，因为筛板的堵塞会引起液流不均，导致色谱峰型拖尾、变宽，从而使柱效下降。因此，建议使用超纯水和色谱纯试剂，在分析样品前对样品进行针筒过滤，流动相过0.45μm滤膜。三、使用保护柱或在线过滤器 样品和流动相经过滤后并不能完全消除固体颗粒物质，因为泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质，些固体颗粒被流动相带入色谱柱，堵塞筛板，导致柱压升高、柱效下降。保护柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱孔径相同，因此可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的堵塞。由于柱压升高在分析故障中占很大 比例，因此，除对样品和流动相进行过滤外，建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。 如果去人色谱柱柱压升高是由于进样端筛板被堵引起的，科选择一下方式进行补救：1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器，然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲色谱柱180min。2、先在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器，然后反向使用。四、正确使用缓冲盐 缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此缓冲盐使用不当会使其析出，堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙，使填料板结，柱压上升；同时阻碍了基质上键合的碳链自由舒展，使色谱柱的保留能力下降，柱效降低。缓冲盐析出后，去除非常困难，因此，正确的使用缓冲盐对延长色谱柱使用寿命非常重要。 正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出，因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话：使用前要过滤，使用后要冲洗。具体方法如下：1、等度条件：使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗60min；使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0.2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。2、梯度条件：用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前，用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗60min，再用该过渡流动相以1.0ml/min冲洗色谱柱120min。含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓，以避免梯度过程中缓冲盐析出。 注意：过渡流动相是指有机相和水相的组成与分析流动相相同，区别只是过渡流动相不含缓冲盐。3、缓冲盐析出的补救方法：1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35摄氏度条件下反向冲洗色谱柱120min2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。五、防止强保留物质在色谱柱上存留 强保留物质和大分子化合物在色谱柱中累积，对样品中的化合物产生额外的保留行为，不仅引起峰型变宽、拖尾，使柱效下降，同时也会引起保留时间的变化，累积到一定程度时还会导致柱压升高。由于强保留物质和大分子化合物对色谱分离的影响是一个累积效应，需要一定的时间才会体现出来，但对许多药品特别是复杂样品而言，很难判断其是否是含有强保留物质，因此要防止强保留物质的累积，需要在每天的日常维护中用纯甲醇或乙氰清洗色谱柱。清洗方法：1、未使用缓冲盐：每天分析完成后，先用上述方法除去缓冲盐，然后再用甲醇或乙氰反向冲洗色谱柱60min。2、使用过缓冲盐：分析完成后，先用上述方法除去缓冲盐，然后在用纯甲醇或乙氰反向冲洗色谱柱60min3、补救方法：水——乙氰——氯仿（或异丙醇）——乙氰——水每一步以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱60min。

  • 如何才能更好地保护色谱柱，延长色谱柱寿命？经验之谈

    在与用户接触过程中，发现很多时候色谱柱的寿命，往往是操作不当或不正确使用导致的。一般情况下，迪马的色谱柱，正常操作+前处理，色谱柱的寿命还是很长滴～～，下面安给大家总结一下，如何才能更好地保护色谱柱，延长色谱柱寿命？（以反相柱为例）1.柱子的PH值使用范围　　反相柱大部分是以硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况，色谱柱人口处会塌陷。同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时，建议选择PH范围大的柱子，例如迪马公司的Inspire色谱柱PH1-11或Diamonsil Plus色谱柱的PH 1.5-10。2、样品的前处理 a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不 可逆吸附的杂质。 c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。例如：迪马的FitMax针头式过滤器，目前团购活动中，每一个1元多一点。还是很实惠滴～～3、流动相的配制： a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中（或长时间保留在柱中）。 b、含水流动相最好在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最好加入叠氮化钠，防止细菌生长。（这一点很重要，最好是随用随配，可以有效防止细菌生长，经常我们遇到客户色谱柱堵塞的原因就出在这里） c、使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。（为了保护色谱柱最好能用HPLC级的流动相，如果是进口的更好，这样在杂质方面控制较好。比如：迪马的DikmaPure溶剂，原瓶原装进口，品质保证）4. 色谱柱的平衡：　　反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长! 操作步骤： a.平衡开始时将流速缓慢地提高，用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂流速如果较低，则需要较长的时间来平衡） b. 如果使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。

  • 如何延长液相色谱柱的使用寿命

    [align=left] 1.使用”保护柱”，能够延长色谱柱的使用寿命。简单的说，”保护柱”即是很短的色谱柱，填装和所使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱相同的填料。正确使用装在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱前面的”保护柱”，可以阻拦一些容易损坏[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱的物质。而达到延长柱子寿命的效果。如果使用”保护柱”不当。会造成反效果。因为在保护柱使用过程中。如污染达到一定程度而没有及时更换，累积的杂物很可能会冲入色谱柱中，反而会造成色谱柱损坏。因此。使用”保护柱”时，最重要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必须要立即更换。[/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left] 2.选择高品质的柱子，并注意使用方法；可以延长柱子的使用寿命。一般认为同一厂牌、同一型号的柱子之间的品质都相同，对品质管理很严格的厂家而言，这说法是成立的。但如果厂家品质管理不够严格，即使是同一批号的新柱子之间的品质也有差异。所以，选用柱子时必须选择管理严格的高品质柱子，我们知道，任何柱子使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用，柱子更易产生变化。因此，应尽量选用pH适用范围大的柱子。在开发新分析方法时，许多专家建议不要使用旧柱子。因柱子一经使用。柱性会改变；如此一来，使用旧柱子开发出来的新分析方法，很可能在再使用同厂牌的新柱子分析时。发生无法达到预定效果的情况。总的说。开发新分析方法时要使用品质好的新柱子；并且一支柱子最好使用在一种分析方法上；则柱子寿命可以延长。[/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left] 3.定期冲洗柱子可以延长柱子使用寿命。我们知道柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内。这些杂质不会随着流动相出来，自然会逐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上出现。而造成出现怪峰、基线不平等现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。最好是在每次分析某一产品完成后冲洗。如果分析时使用缓冲剂时﹐最好用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动相冲洗缓冲剂。接着再用100%有机溶剂冲洗。如果不先用有机和水的混合溶液冲洗，而直接用100%有机溶剂冲洗的话，缓冲剂很可能会沉淀出来，而损坏柱子的品质。使用10-20倍柱体积的量来冲洗基本就足够了。专家建议最好将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析实验程序完毕地最后，如此一来每天在开机前都会用100%机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理﹐即是在将冲洗前将柱子倒反接后再冲洗。打算使用反冲洗处理前，最好先参考柱子的保养说明书。所以要真正保护柱子，使柱子的寿命延长，最好是使用”保护柱”和定期冲洗柱子[/align]转自食品伙伴网

  • 如何有效的延长气相色谱柱使用寿命的

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱作为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]分析的主要部分，大家是如何有效的延长[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱使用寿命的？

  • 【分享】色谱柱预防性保护与柱寿命的延长

    通常，一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好，但也有的柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响柱寿命和其它问题的因素很多，而有些因素是操作者很难控制的，如果被分析的样品（如分析生物样品），怎么净化样品也是“脏”的，好于色谱柱的影响是非常大的。然而采取下列措施后，在多数情况下总能够人为地减少柱上故障，达到延长柱寿命的目的。

  • 【原创】如何延长液相色谱柱的使用寿命

    1.使用”保护柱”，能够延长色谱柱的使用寿命。简单的说，”保护柱”即是很短的色谱柱，填装和所使用液相色谱柱相同的填料。正确使用装在液相色谱柱前面的”保护柱”，可以阻拦一些容易损坏液相色谱柱的物质。而达到延长柱子寿命的效果。如果使用”保护柱”不当。会造成反效果。因为在保护柱使用过程中。如污染达到一定程度而没有及时更换，累积的杂物很可能会冲入色谱柱中，反而会造成色谱柱损坏。因此。使用”保护柱”时，最重要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必须要立即更换。 2.选择高品质的柱子，并注意使用方法；可以延长柱子的使用寿命。一般认为同一厂牌、同一型号的柱子之间的品质都相同，对品质管理很严格的厂家而言，这说法是成立的。但如果厂家品质管理不够严格，即使是同一批号的新柱子之间的品质也有差异。所以，选用柱子时必须选择管理严格的高品质柱子，我们知道，任何柱子使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用，柱子更易产生变化。因此，应尽量选用pH适用范围大的柱子。在开发新分析方法时，许多专家建议不要使用旧柱子。因柱子一经使用。柱性会改变；如此一来，使用旧柱子开发出来的新分析方法，很可能在再使用同厂牌的新柱子分析时。发生无法达到预定效果的情况。总的说。开发新分析方法时要使用品质好的新柱子；并且一支柱子最好使用在一种分析方法上；则柱子寿命可以延长。 3.定期冲洗柱子可以延长柱子使用寿命。我们知道柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内。这些杂质不会随着流动相出来，自然会逐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上出现。而造成出现怪峰、基线不平等现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。最好是在每次分析某一产品完成后冲洗。如果分析时使用缓冲剂时﹐最好用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动相冲洗缓冲剂。接着再用100%有机溶剂冲洗。如果不先用有机和水的混合溶液冲洗，而直接用100%有机溶剂冲洗的话，缓冲剂很可能会沉淀出来，而损坏柱子的品质。使用10-20倍柱体积的量来冲洗基本就足够了。专家建议最好将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析实验程序完毕地最后，如此一来每天在开机前都会用100%机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理﹐即是在将冲洗前将柱子倒反接后再冲洗。打算使用反冲洗处理前，最好先参考柱子的保养说明书。所以要真正保护柱子，使柱子的寿命延长，最好是使用”保护柱”和定期冲洗柱子

  • 关于色谱柱出厂时间的问题

    各位专家好，我有一个关于色谱柱出厂时间的问题：我们实验室有很多历年来购买的色谱柱（估计不少于40根，有安捷伦、瓦里安、岛津、沃特世、菲罗门、迪马、依利特、ACE、SCIENHOME等等各种品牌），由于以前实验室管理相对比较松散，没有对这些色谱柱登记造册，所以现在就搞不清楚没跟色谱柱到底是什么时候生产、什么时候购买的。而且几乎所有色谱柱都没有生产日期，仅有部分色谱柱在包装里附带的合格证（验证谱图）上有谱图进样时间。现在我想通过某种方式来查询这些色谱柱的生产日期，请各位专家指导该怎么查询？谢谢！或者仪器信息网能否建立这样的查询系统？呵呵！

  • 关于色谱柱出厂时间的问题

    各位专家好，我有一个关于色谱柱出厂时间的问题：我们实验室有很多历年来购买的色谱柱（估计不少于40根，有安捷伦、瓦里安、岛津、沃特世、菲罗门、迪马、依利特、ACE、SCIENHOME等等各种品牌），由于以前实验室管理相对比较松散，没有对这些色谱柱登记造册，所以现在就搞不清楚没跟色谱柱到底是什么时候生产、什么时候购买的。而且几乎所有色谱柱都没有生产日期，仅有部分色谱柱在包装里附带的合格证（验证谱图）上有谱图进样时间。现在我想通过某种方式来查询这些色谱柱的生产日期，请各位专家指导该怎么查询？谢谢！或者仪器信息网能否建立这样的查询系统？呵呵！

  • 【资料】如何延长液相色谱柱的使用寿命

    1.使用“保护柱”﹐能够延长色谱柱的使用寿命。简单的说﹐“保护柱”即是很短的色谱柱﹐填装和所使用液相色谱柱相同的填料。正确使用装在液相色谱柱前面的“保护柱”﹐可以阻拦一些容易损坏液相色谱柱的物质﹐而达到延长柱子寿命的效果。如果使用“保护柱”不当﹐会造成反效果。因为在保护柱使用过程中﹐如污染达到一定程度而没有及时更换﹐累积的杂物很可能会冲入色谱柱中﹐反而会造成色谱柱损坏。因此﹐使用“保护柱”时﹐最重要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必须要立即更换。2.选择高品质的柱子﹐并注意使用方法﹔可以延长柱子的使用寿命。一般认为同一厂牌﹑同一型号的柱子之间的品质都相同﹐对品质管理很严格的厂家而言﹐这说法是成立的。但如果厂家品质管理不够严格﹐即使是同一批号的新柱子之间的品质也有差异。所以﹐选用柱子时必须选择管理严格的高品质柱子﹐我们知道﹐任何柱子使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用﹐柱子更易产生变化。因此﹐应尽量选用pH适用范围大的柱子。在开发新分析方法时﹐许多专家建议不要使用旧柱子﹐因柱子一经使用﹐柱性会改变﹔如此一来﹐使用旧柱子开发出来的新分析方法﹐很可能在再使用同厂牌的新柱子分析时﹐发生无法达到预定效果的情况。总的说﹐开发新分析方法时要使用品质好的新柱子﹐并且一支柱子最好使用在一种分析方法上﹔则柱子寿命可以延长。 3.定期冲洗柱子可以延长柱子使用寿命。我们知道柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内。这些杂质不会随着流动相出来﹐自然会逐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上出现﹐而造成出现怪峰﹑基线不平等现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。最好是在每次分析某一产品完成后冲洗。如果分析时使用缓冲剂时﹐最好用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动相冲洗缓冲剂﹐接着再用100%有机溶剂冲洗。如果不先用有机和水的混合溶液冲洗﹐而直接用100%有机溶剂冲洗的话﹐缓冲剂很可能会沉淀出来﹐而损坏柱子的品质。使用10-20倍柱体积的量来冲洗基本就足够了。专家建议最好将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析实验程序完毕地最后﹐如此一来每天在开机前都会用100%机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理﹐即是在将冲洗前将柱子倒反接后再冲洗。打算使用反冲洗处理前﹐最好先参考柱子的保养说明书。所以要真正保护柱子﹐使柱子的寿命延长﹐最好是使用“保护柱”和定期冲洗柱子。

  • 【分享】延长液相色谱柱寿命的5种方法

    [color=#000000]色谱柱的使用寿命，除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外，最主要的是与日常的维护密切相关。为延长色谱柱的使用寿命。色谱柱的使用寿命主要是分局柱效和柱压两个指标来衡量，如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高，通常被认为该色谱柱已经结束。因此，延长色谱柱使用寿命的关键是，消除引起柱效下降和柱压升高的因素。[/color][align=center][/align][b]以下是色谱柱的日常维护方法[/b]一、流动相的PH应在使用的范围内色谱柱除反相氰基柱PH1.5-9.0外，其反相色谱柱的PH范围均为1.5-10，由于填料中存在Si-C和Si-O键，流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂，使柱效下降，使用寿命变短。由于流动相的PH控制不当而对色谱柱造成的损害，通常很难是色谱柱恢复，因此必须认真对待，严格控制流动相的PH值。二、去除样品和流动相中的固体颗粒样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板，筛板被堵住不仅会引起柱压的升高，而且也会引起柱效下降，因为筛板的堵塞会引起液流不均，导致色谱峰型拖尾、变宽，从而使柱效下降。因此，建议使用超纯水和色谱纯试剂，在分析样品前对样品进行针筒过滤，流动相过0.45μm滤膜。三、使用保护柱或在线过滤器样品和流动相经过滤后并不能完全消除固体颗粒物质，因为泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质，这些固体颗粒被流动相带入色谱柱，堵塞筛板，导致柱压升高、柱效下降。保护柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱孔径相同，因此可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的堵塞。由于柱压升高在分析故障中占很大比例，因此，除对样品和流动相进行过滤外，建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。如果色谱柱柱压升高是由于进样端筛板被堵引起的，可选择以下方式进行补救：1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器，然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲色谱柱180min.2、先在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器，然后反向使用。[align=center][/align]四、正确使用缓冲盐缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此缓冲盐使用不当会使其析出，堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙，使填料板结，柱压上升；同时阻碍了基质上键合的碳链自由舒展，使色谱柱的保留能力下降，柱效降低。缓冲盐析出后，去除非常困难，因此，正确的使用缓冲盐对延长色谱柱使用寿命非常重要。正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出，因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话：使用前要过滤，使用后要冲洗。具体方法如下：1、等度条件：使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗60min；使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0.2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。2、梯度条件：用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前，用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗60min，再用该过渡流动相以1.0ml/min冲洗色谱柱120min.含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓，以避免梯度过程中缓冲盐析出。注意：过渡流动相是指有机相和水相的组成与分析流动相相同，区别只是过渡流动相不含缓冲盐。3、缓冲盐析出的补救方法：1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35摄氏度条件下反向冲洗色谱柱120min 2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。五、防止强保留物质在色谱柱上存留强保留物质和大分子化合物在色谱柱中累积，对样品中的化合物产生额外的保留行为，不仅引起峰型变宽、拖尾，使柱效下降，同时也会引起保留时间的变化，累积到一定程度时还会导致柱压升高。由于强保留物质和大分子化合物对色谱分离的影响是一个累积效应，需要一定的时间才会体现出来，但对许多药品特别是复杂样品而言，很难判断其是否是含有强保留物质，因此要防止强保留物质的累积，需要在每天的日常维护中用纯甲醇或乙氰清洗色谱柱。清洗方法：1、未使用缓冲盐：每天分析完成后，先用上述方法除去缓冲盐，然后再用甲醇或乙氰反向冲洗色谱柱60min.2、使用过缓冲盐：分析完成后，先用上述方法除去缓冲盐，然后在用纯甲醇或乙氰反向冲洗色谱柱60min 3、补救方法：水——乙氰——氯仿（或异丙醇）——乙氰——水，每一步以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱60min。

  • 【干货】三个保护步骤教你如何延长色谱柱寿命

    【干货】三个保护步骤教你如何延长色谱柱寿命

    [align=center][b][i][color=#39a5ef]让你的柱子永远不坏？[/color][/i][/b][/align][align=center][b][i][color=#39a5ef]没那么夸张，但是可以使柱子不那么快就坏。[/color][/i][/b][/align] 有时候你会发现好像你用了大部分的实验室经费在不停的买液相色谱柱。为什么色谱厂家不能把柱子的寿命延长一些呢？实际上，在合理的维护下，柱子可以成为液相分析花费里面很小的一部分。举一个例子，一根典型的反相柱子的花销在3405-4087元之间， 如果它能进样500-1000次，那么每一次进样的花费是3.4-6.8块钱。 尽管费用会随着实验室和特定方法不同而变化，完成一次常规的进样分析，340块钱的总费用是合理的，这也可由做委托检测业务的第三方实验室对类似分析的定价所确认。 因此，我们上面谈到色谱柱的花费在总分析成本中只占1-2%，我们想方设法使柱子的寿命延长一倍，即使单根柱子的成本还是很高，实际上这样做并不能在整个分析成本上降低很多。我自己个人的感觉是如果你用一根柱子进了500针，那这样就已经很划算了。 什么是合理的期望值？ 首先，先看一下其他几个色谱学家的经验。 Ron Majors，在他的“色谱柱观察”专栏的某期连载文章中，已经包含了针对色谱各个方面的用户调查结果。他有关色谱柱寿命的大部分专栏文章是在2012年发表的，将作为我们目前讨论的基础。图1是基于Ron Majors 2011年用户调查数据的饼型图。可以看到有回应的调查对象中接近四分之三的进样寿命在500针以上，而且有近二分之一达到了至少 1000次的进样寿命。这个结果对我来说是非常吃惊的，因为它包含了对所有类型的色谱柱的寿命调查，不仅仅是现代液相中的最吃苦耐劳的用得最多的主力色谱柱，4.6×150mm，5μm反相柱，相对于其它种类色谱柱，它甚至有点刀枪不入的味道。[align=center][img=,640,356]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712011335_01_3232762_3.jpg!w640x356.jpg[/img][/align][align=center][color=#888888]图1 分析柱的典型进样次数。数据基于2011 年调查[/color][/align] 为了看清随着时间变化情况改变的情形，我做了一个1997年到2011年四个调查结果的比较图，见图2。可以看到有几个明显的趋势。第一，我注意到灰柱，灰柱代表的是在柱子损坏之前进样小于1000次的百分比，从1997年的76%跌倒了2011年的53%；同时有明显对比的是代表能进样1000以上的黄柱高度增加很快。在上面我有提到我把进样500次作为柱子使用寿命的一个平衡点，我们可以发现在柱子坏之前进样次数达不到500次的用户的数量明显下降，从1997年的接近一半到2011的四分之一。[align=center][img=,640,356]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712011335_01_3232762_3.jpg!w640x356.jpg[/img][/align][align=center][color=#888888]图2 在LC柱子损坏之前进样次数的比较[/color][/align] 最后我们可看到，有着可怕经历的用户的数量，即那些只能做到100或者更少的进样次数的用户，比例基本上没有改变，徘徊在10%附近。找出这种改变的原因只能是出于推测，但是我很乐意做此推断。我不认为柱子寿命有明显的提升是因为柱子工艺的改进。不可否认，在某个时期，柱子塌陷，或者是柱床中有空腔形成的情况非常普遍，但是在1997年开展调查的时间段，装柱工艺就已经非常成熟了，由于装柱工艺导致柱子损坏的情况很少见。我认为柱子寿命延长的主要原因是用户受到更好的培训，从而对样品前处理和柱子的物理保护更好了。柱子的保护方法就是我想在下文着重说明的。我同时也推断，进样次数很稳定的小于100，与其说是柱子本身的原因，还不如说是实验室操作存在问题，或者说是某些应用方法本身就是“柱子终结者”。 不要未处理样品就进样 在我的LC课堂中，我经常开玩笑的说，延长柱子寿命的最好方法是不要打开色谱柱的盒子。一旦你开始进样，就开始了柱子走向灭亡的道路。[b]样品有两个主要方面可以影响色谱柱—化学性质和物理性质。我们把样品中不要的化学污染物和微型颗粒清除的越好，柱子的寿命就越长。[/b] 使用SPE(Solide-Phase extraction)，液液萃取和其他技术来除去化学污染物是LCGC中“Sample Prep Perspectives”专栏常有这样的文章，我就不在这里多说了。一言以蔽之，越多的样品前处理，越少的化学污染物进入色谱柱，柱子寿命就越长。你还得平衡一下样品前处理费用和它带来的好处。比如，你买了柱芯和试剂，并加上你投入时间的费用，你在每个样品上SPE的花费会很容易超过34块钱，这是可以承受500次进样量的反相柱在每个样品分析上分摊成本的5倍多，这差不多需要将色谱柱进样次数从500次延长至2500次才扯平了。 另一方面，如果没有做过任何处理的血浆样品直接进样了，柱子可能就只能进样10次左右。你也要考虑到当更多的样品处理步骤加入的时候的数据质量。我知道，在我们的实验室中，这些措施可以让我们在低浓度的时候收集到有用的数据并得到一致的结果，而不是比较少的前处理步骤可能得到的结果。不论你做没做其他前处理步骤，几乎所有的样品都会从样品过滤，离心或者两者中得到好处。样品经过一个一次性的过滤膜过滤来移除可能堵住柱子进口筛板的细颗粒物。滤膜的孔径不能大于柱子进口筛板的孔径。[b] 大部分3μm填料颗粒的柱子用2μm孔径的筛板，3μm填料粒径的柱子则一般用0.5μm的筛板，填料粒径3-μm的柱子，比如UHPLC，一般用0.2μm的进口筛板。最常用的样品过滤膜是0.45μm孔径的，这个对除了亚2μm之外的其它柱子都已经足够，亚2μm柱子，则需用0.2μm的滤膜。[/b]滤膜可作为预装在一次性注射器中的柱芯，也作为96孔板的过滤板。即使这些过滤装置一般是有效的，但我不是非常强烈的推荐使用。至少有4点使我不同意过滤样品。[quote][color=#999999][b]第一，样品过滤成本比较昂贵，上一次我比较过价格，一次性购买1000份，每份的价格都要高于3.4元，这个与柱子在每次分析中的分摊费用几乎一样。第二，用0.5μm滤膜过滤很慢，而0.2μm滤膜则更慢。第三，如果你在一个监管严格的环境中工作，每一个样品的处理步骤都必须一样，这就是说，如果你过滤了一个样品，那么其他剩余的样品也都要过滤，无论实际上需不需要。最后，如果你要验证你的LC方法，就需要验证所有的过滤步骤。在过滤的过程中，样品会有损失——如果50μL样品经过滤膜，得到的样品就少于50μL。[/b][/color][/quote] 你得证明样品不是选择性的损失，特别是在高浓度或者低浓度的时候。因此，我们可以看到，样品过滤是需要花很多功夫和金钱的。但是你要是不怕麻烦和不要求成本，样品过滤是在大部分的情况下都是能提高柱子的寿命的。[b] 样品过滤的一个替代方法（或者是补充）是在进样之前离心。这是一个简单又相对便宜的方法。只要把样品放进离心管，Eppendorf 离心管或者一个96孔的离心板，再放到小型台式离心机里，调整转速到其最大速度，旋转5-10min。[/b] 这会使会引起筛板堵塞的颗粒沉积到样品瓶的底部，然后把样品转移到进样瓶或板中继续进行分析。这种技术我们在实验室中对需要沉淀蛋白质的样品中已经使用了很多年，而且极少出现颗粒物质相关的问题。 我曾经见过这样的例子，[b]用0.2μm的滤膜过滤之后的样品，UHPLC进样，这种样品还是有一点浑浊并且引起了柱子堵塞，但是这个些微浑浊的样品离心至澄清之后，柱子堵塞的情况就会减少很多。[/b] 使用在线过滤器 我非常认同一个在线的过滤器是LC或者UHPLC中使用成本最低的附加装置，可以提供最大的投资回报。这种过滤器是一个非常简单的改装管配件，其中包含了一个特定孔径的筛板，安装在自动进样器和柱子（保护柱，如果用到的话）之间。现在最普遍的装置是一个直径接近37.5px，长度62.5px不锈钢配件，其中包含一个0.5或者0.2μm孔径的可替换的筛板。另外一种装置是包含相同孔径大小筛板的PEEK手紧配件。这种PEEK过滤器整体是一次性的，但是因为它比不锈钢过滤器中的一次性使用的筛板要贵，使用成本会比较昂贵。这种在线过滤器孔径会选择比柱子筛板孔径小一点，因此它会在柱子堵塞之前先被堵塞。当系统压力开始增加的时候，你就知道在线过滤器中筛板已经开始堵了，需要在完全堵住之前替换掉。[b] 在线过滤器可以起到单独的样品过滤器一样的功能，但在样品前处理时，不需要额外的人力工作。如果你样品离心了，偶尔有一些颗粒没有过滤掉，也会被下游的在线过滤器拦截住。 在线过滤器的另一优点是它能够很便捷的更换——如果你动手能力强，在5min内你可以关掉泵、替换筛板、打开系统并继续实验。[/b]你可能想要重新进一针系统适应性样品来检查一下系统有没有出问题，使用在线过滤器不需要大量的调节和校准，而这些在更换保护柱时都需要重新做过。[b]在线过滤器的最后一个好处是可以过滤掉泵密封件和进样阀因磨损产生的颗粒物。[/b]我强烈建议在每一个LC系统中都安装一个在线过滤器，即使你已经在使用保护柱了。保护柱 保护柱（也叫做预柱）是一种很短的装在分析柱上游的色谱柱。这种柱子长度一般为10-20mm，包含与分析柱一样的填料，使用不大于分析柱筛板孔径的入口筛板和出口筛板。[b] 保护柱有双重功能，第一，入口筛板拦截可能堵塞分析柱的颗粒物，第二，填料与分析柱相同，它可以捕抓住那些可能会强烈或者不可逆附着在分析柱填料上的物质。总所周知，保护柱会延长分析柱的寿命，然而，保护柱有几个潜在的问题。[/b][quote][color=#888888][b]第一，他们比较贵——价格高出分析柱的40%甚至更多，考虑到增加的成本时，你柱子的寿命是否有足够的延长？[/b][/color][color=#888888][b] [/b][/color][color=#888888][b]第二，保护柱到底能持续多长时间？你得知道更换柱子的时间，在保护柱上的化学污染物积累太多之前，就要想办法避免污染物进入到分析柱中。因此，需要对进样次数计数或者做一个系统适应性实验来决定什么时候更换保护柱。[/b][/color][color=#888888][b] [/b][/color][color=#888888][b]第三，你要判断怎么来清洗保护柱。为了防止把污染物冲洗到分析柱中，保护柱和分析柱需要分开来清洗吗？[/b][/color][color=#888888][b] [/b][/color][color=#888888][b]最后，你可能期望将一个20mm长的保护柱加装到150mm长的分析柱上，使柱效提高10%，但是这种情况很少出现。原因是接入一根保护柱后，系统管路中会增加两个柱头连接件和一段管路，而且保护柱没有分析柱装柱那么容易安装，以上两个方面都会降低系统性能。结果就是如果你运气好的话，你会得到一样的理论塔板数，但常见的情况是柱效会稍有降低。[/b][/color][/quote] 要不要用保护柱的选择权在你。[b]保护柱确实能延长分析柱的寿命，但是我个人认为在大多数情况下，这并不值得。 如果你选择使用保护柱，我还是推荐在自动进样器和保护柱之间连接使用一个在线过滤器。[/b]过滤器的钱只有保护柱的零头，它还能延长保护柱的使用寿命，就像它能延长分析柱寿命一样。总结 尽管你不能让你的分析柱寿命无限延长，但还是能用一些非常简单的方法来延长色谱柱这个系统中比较昂贵部件的寿命。首先，按照要求对样品进行前处理。样品前处理的最后一步必须是过滤或者离心。其次，使用在线过滤器来保护保护柱和分析柱，免于被样品中或者系统其它部分产生的颗粒物堵塞。再次，如果保护柱对你的应用有意义的话，则使用保护柱来保护分析柱。最后，在每批样品分析之后，使用强溶剂来冲洗柱子，除去在柱子上的任何强保留物质。 此文章主要是针对柱子污染问题，但色谱柱寿命也取决于检测品种的方法耐用性，如果是难度很大的项目， 譬如化学药品有多个有关物质测定，或中药的指纹谱图，往往方法耐用性 （robustness）较差，柱子寿命也会受到影响。[b]挑选不同选择性的色谱柱来改善分离度是提高方法耐用性的最佳选择。[/b]

  • 仪器是否必须配原厂色谱柱？

    现在，虽然色谱柱生产厂家很多，但又相当一部分消费者不敢轻易换色谱柱用，因为好多仪器厂家经常对客户说，必须要用原厂生产的配件，否则仪器出了问题，厂家不负责维修。。。等等。这就像用手机一样，每个厂家都强调必须要用自己原装的电池和充电器一样。高效液相是否必须用原厂色谱柱？不用，有什么危害？

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