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虽然酶标仪价格低廉、仪器简单、方便操作,但在越来越多的项目检测中,化学发光免疫分析仪逐渐取代酶标仪的使用。 化学发光的优点到底在哪里呢?从原理上说,酶标仪是通过对酶标板中液体的吸光值检测,获得一个OD值后进行定性或半定量的分析,达到检测的目的。化学发光免疫分析仪是化学发光反应(酶促发光或直接发光)产生的光信号通过光电倍增管进行信号转换后等到相应的信号值,用RLU(相对光单位)表示,以达到定量或定性的检测目的,其更加灵敏,线性范围更宽,而且可以做定量检测,可进行全自动操作,而酶标仪无论检测还是线性范围都不如发光仪,且只能做定性检测,但是目前国内酶标仪较为成熟,化学发光尚处于成长期。
[size=16px] 酶联免疫分析(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子(如蛋白质、抗体、激素等)在样本中的定量或定性测量的实验技术。以下是使用酶联免疫分析仪检测生物实验的一般步骤: 准备实验材料和试剂: 样本:可以是血清、尿液、细胞上清等。 标准品:已知浓度的目标分子,用于绘制标准曲线以计算未知样本中的浓度。 酶标抗体:用于与目标分子结合的抗体,被标记上酶以便后续检测。 捕获抗体:涂覆在微孔板上,用于捕获目标分子和酶标抗体复合物。 涂覆微孔板: 向微孔板中加入捕获抗体,使其在孔底吸附。 将孔板放置在冰箱或其他适当条件下孵育,让抗体吸附稳定。 加入样本和标准品: 加入待测样本和一系列已知浓度的标准品到不同的孔中。 标准品的浓度通常是一个浓度梯度,用于绘制标准曲线。 孵育和洗涤: 孵育样本和标准品,使目标分子与捕获抗体结合。 之后,使用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。 加入酶标抗体: 加入带有酶标记的抗体,它会与样本中的目标分子结合形成复合物。 孵育和洗涤: 孵育酶标抗体,使其与捕获的目标分子结合。 再次用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。 加入底物: 加入含有底物的溶液。底物被酶催化后会产生颜色或荧光,信号强度与目标分子的浓度成正比。 停止反应: 加入停止液终止底物的反应,防止颜色或荧光的继续产生。 测量信号: 使用酶联免疫分析仪读取每个孔的颜色或荧光信号强度。 将信号与标准曲线进行比较,计算样本中目标分子的浓度。 数据分析: 根据标准曲线和信号强度,计算样本中目标分子的浓度。 请注意,每个实验都需要根据具体的样本和目标分子进行优化和调整。操作过程中应严格遵循实验操作规程,以确保结果的准确性和可重复性。如果你是初次进行ELISA实验,建议在有经验的实验室或专业人士的指导下进行。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311608055074_5122_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]
化学发光酶标仪与化学免疫分析仪的是什么区别?