酶联免疫检测仪

酶联免疫检测，哪些物质会造成假阳性？

[color=#333333]酶联免疫检测技术在食品卫生和安全检测中都有哪些应用[/color]

食品安全检测试剂盒。现已有氯霉素、克伦特罗（瘦肉精）、磺胺嘧啶、沙丁胺醇、链霉素等快速检测试剂盒。沙丁胺醇酶联免疫检测试剂盒检测灵敏度达0.1ng/ml。ruojun 楼主，这里是技术交流，不能做广告，你可以选择技术特点，检测过程，问题等进行。

请问双流相酶联免疫检测读数仪和酶标仪有什么区别？就是GB5413.37-2010上第4法的仪器，和普通的酶标仪有什么区别？急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。

酶联免疫检测试剂中的预包被板稳定性不好的原因可能有哪些？1，包被浓度未达到最佳浓度或者说包被时间太短。也是灵敏度低的原因之一。2，封闭前的一步洗板洗涤过强，造成包被浓度减弱。也是灵敏度低的原因之一。3，封闭不完全。4，干板不彻底，这也是为什么有些试剂盒中的预包被板连同干燥剂一起封包，并且抽真空的最主要原因。

免疫测定（immunoassay，IA）是应用免疫学技术测定标本的方法，其基本原理是抗原抗体的特异性识别。酶联免疫吸附试验 （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是实验室比较常用的免疫检测方法。因为可用于农残的初筛,所以特转载本专题为您详细讲解免疫检测中的基础知识、实验操作步骤、影响因素及质量控制。希望大家能对它有所了解.

一些基础知识。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=18246]免疫检测的基础知识[/url]食品伙伴网

采用酶联免疫法（Elisa）检测系统，需要配置仪器主要为酶标仪。该系统2小时左右出结果。可以检测氯霉素、链霉素、四环素、磺胺、硝基呋喃、庆大霉素、新霉素、沙星等。大家知道每个项目的具体检出限值吗？

[font=宋体][b]免疫检测技术以广泛应用于生物科学的各个领域。[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]免疫疾病诊断[/font][/font][font=宋体][font=宋体]用免疫血清学方法对人和动物传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病和变态反应疾病进行诊断，是免疫技术最突出的应用。尤其是酶标抗体技术，已成为多种传染病的常规诊断方法，如已有的人各型肝炎、猪瘟等[/font] [font=Calibri]ELISA [/font][font=宋体]试剂盒，它们简便、快速，又具有高度的敏感性和可重复性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]动物植物生理活动研究[/font][/font][font=宋体][font=宋体]动植物中存在一些如激素、维生素等活性物质，它们在体内含量极微少，但在调节机体的生理活动中起重要作用，因此通过分析测定这些生物活性物质的含量及变化来研究机体的各种生理功能（如生长生殖等）。由于这些物质含量极低，用常规化验方法难以准确测出。目前放射免疫测定和酶免技术已能精确测出[/font] [font=Calibri]ng(10 -9 g) [/font][font=宋体]及 [/font][font=Calibri]pg(10 -12 g) [/font][font=宋体]水平的物质，它们已成为测定动物、植物、昆虫中微量激素及其它活性物质，研究动物、植物生理和生物防治的重要手段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]物种及微生物鉴定[/font][/font][font=宋体]各种生物之间的差异都可表现在抗原性不同，物种种源越远，抗原性差异越大，因此可用区分抗原性的血清学反应进行物种鉴定、物种的分类等工作。血清学反应在细菌、病原菌等微生物鉴定和血清型及亚型的分析方面已得到广泛应用。但对动物种源，植物和昆虫分类方面还是一个新的领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]动物、植物性状的免疫标记[/font][/font][font=宋体]通过分析动物、植物的一些优良性状（如高产、优质、抗逆性等）的特异性抗原，然后用血清学方法进行标记选择育种，这是一个很有前途的方向，它比分子遗传学标记选择育种简便。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]免疫增强药物和疫苗的研究[/font][/font][font=宋体]疫苗研究中需用血清学反应和细胞免疫技术测定免疫的效果。在研究一些免疫增强药物，尤其研究肿瘤药物时，需用细胞免疫技术分析测定它们对机体细胞免疫功能的增强作用。因为细胞免疫是机体抗肿瘤、抗病毒的一个重要机制。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]发病机理研究[/font][/font][font=宋体]传染病的病原从机体特定部位感染，并在特定组织细胞内增殖，引起发病。一荧光抗体感染或免疫酶组化染色，可在细胞水平上确定发病等病原微生物的感染细胞，还可用于研究自身免疫病和变态反应性疾病的发病机理，如免疫复合物的沉积部位的分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]分子生物学研究[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在基因工程的分离、克隆的筛选，表达产物的定性与定量分析，表达产物的纯化等均涉及到免疫技术。如通常用免疫沉淀方法分离[/font] [font=Calibri]mRNA [/font][font=宋体]基因，酶标抗体核酸探针（地高辛核酸探针）检测筛选克隆，免疫转印技术分析表达产物的分子量、 [/font][font=Calibri]ELISA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]RIA [/font][font=宋体]分析表达量、免疫亲和层析纯化表达产物，免疫方法分析表达产物的性质如免疫原性。免疫技术已是分子生物学研究中必不可少的工具。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州建立了全面的免疫学检测平台，包括[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Flow Cytometry[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IP/Co-IP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Biacore[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Octet[/font][font=宋体]等检测技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]具体[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunoassay-service][b]免疫学检测服务[/b][/url]类型：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/spr-bli-assay-services][b][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]亲和力检测服务[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]检测服务[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫组化[/font] [font=Calibri](IHC) [/font][font=宋体]单染服务[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫荧光[/font] [font=Calibri](IF) [/font][font=宋体]单染检测服务[/font][/font][font=宋体]多重染色服务[/font][font=宋体][font=Calibri]HE[/font][font=宋体]染色及特殊染色服务[/font][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service][b][font=宋体]流式细胞[/font] [font=Calibri](FACS) [/font][font=宋体]检测服务[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA/ELISpot[/font][font=宋体]检测服务[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IP/Co-IP[/font][font=宋体]技术服务[/font][/font][font=宋体]石蜡组织芯片定制服务[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注义翘神州免疫学检测服务[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunoassay-service[/font][/font]

孔雀石绿用酶联免疫法检测，假阳性高吗？

为什么酶联免疫法检测的波长大多为450 nm？

[font='calibri'][size=13px]免疫学检测优缺点有哪些？免疫学检测方法分享[/size][/font]免疫学检测优缺点介绍：免疫学检测具有快速、简便、高灵敏度和特异性等优点，因此在医学诊断和治疗中广泛应用。但是，免疫学检测也存在一些缺点，例如价格较高，对于某些特定的毒素可能无法检测，并且检测过程中可能会受到多种因素的干扰，例如操作不规范、实验条件不严格等。总之，免疫学检测具有很多优点，但也存在一些缺点，需要在实验设计、操作规范和质量控制等方面加强管理，以提高检测的准确性和可靠性。免疫学检测方法包括以下几种：①抗原抗体反应的相关检测，主要是免疫组化、免疫荧光、血凝抑制、放射免疫等。其中，免疫组化是应用标记的特异性抗体，在组织细胞原位，通过抗原抗体反应和酶底物的显色反应，对细胞中的抗原进行定位、定性的检测方法，是比较常用的一种方法。②免疫细胞的检测，主要包括细胞毒试验、FCM流式细胞术等。其中，细胞毒试验常用于肿瘤的免疫移植、排斥反应和病毒感染等方面的研究。③酶联免疫吸附试验（ELISA），是目前应用最广泛的免疫检测方法。该方法是将二抗标记上酶，抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来，根据酶作用底物后的显色颜色变化来判断试验结果，其敏感度可达ng水平。④免疫金胶体技术、胶体金技术等，是将二抗标记上胶体金颗粒，利用抗原抗体间的特异性反应，最终将胶体金标记的二抗吸附于渗滤膜上，此方法简单、快速、广泛应用于临床筛查。义翘神州建立了全面的免疫学检测平台，义翘神州免疫学检测服务优势：? 拥有成熟的免疫检测体系；? 大量优质的蛋白和抗体产品支撑；? 先进的实验仪器，经验丰富的技术员；? 优良的实验环境，完善的实验平台，为您提供最优质的服务。同时包括ELISA、Western Blot、IHC、IF、Flow Cytometry、IP/Co-IP、Biacore、Octet等检测技术。更多免疫学检测服务尽在https://cn.sinobiological.com/services/immunoassay-service

从蒙牛黄曲霉毒素M1超标后，社会更加关注黄曲霉毒素的问题。现在黄曲霉毒素的检测方法有很多，其中酶联免疫法是最经济快速的。然而在用试剂盒检测黄曲霉毒素B1时，却会遇到检测结果与液质检测结果偏离较大的情况。是黄曲霉毒素B1的酶联免疫法检测 的干扰因素很多吗？在饲料粮食等中有哪些东西能干扰检测？又如何去除这些干扰？

评价酶联免疫试剂盒、胶体金检测卡的程序、标准操作或方法有哪些？

[align=left][font='calibri'][size=13px][color=#232323]ELISA[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]与[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]ELISpot[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]检测有什么区别？[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]酶联免疫吸附测定[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]服务优势[/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px]酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]酶联免疫斑点技术 (enzym[/size][/font][font='宋体'][size=16px]e-linked immunospot assay, ELISpot) 是细胞免疫学研究中最敏感的检测方法之一，能够区分活化的T细胞亚群，可以在单细胞水平对抗体分泌细胞及细胞因子分泌细胞进行检测。在疫苗研究中，ELISpot是一种标准工具，用于通过测量激发强大T细胞反应的能力 (通常是干扰素-γ的分泌) 来确定疫苗的有效性。为满足客户的检测需求，义翘神州可提供ELISA检测服务和ELISpot检测服务。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]酶联免疫吸附测定（ELISA）检测服务[/size][/font][font='宋体'][size=16px]优势：拥有庞大的产品库：6,000多种优质ELISA应用抗体，500多种ELISA试剂盒。技术人员长期从事于抗体质控工作，经验丰富，实验结果可靠。价格优惠[/size][/font][font='宋体'][size=16px]周期：3-5个工作日[/size][/font][font='宋体'][size=16px]服务类型：双抗夹心法ELISA检测、间接法ELISA检测、竞争法ELISA检测[/size][/font][font='宋体'][size=16px]ELISpot检测服务[/size][/font][font='宋体'][size=16px]优势：[/size][/font][font='宋体'][size=16px]高灵敏度：百万分之一阳性细胞检测率。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]高通量检测 (一块 ELISpot 板可作 96 test）：每天可检测数百个样品。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]直观、可信度高。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]周期：[/size][/font][font='宋体'][size=16px]2-3个工作日[/size][/font][font='宋体'][size=16px]交付内容[/size][/font][font='宋体'][size=16px]提供斑点图像、阴阳性检测结果、对比免疫反应强弱及细胞因子分泌量比较等多项结果分析数据[/size][/font][font='宋体'][size=16px]这两项服务义翘神州均可提供！[/size][/font]

用酶联免疫法检测三聚氰胺时，哪家的试剂盒好用？分享心得时，高分奖励。

B 1 的酶联免疫吸附测定原理：利用固定相酶联免疫吸附原理，将 AFB 1 特异性抗体包被于聚苯乙烯量反应板的孔穴中，再加入样品提取液（未知抗原）及酶标 AFB 1 抗原（已知抗原），使两者与抗体之间进行免疫竞争反应，然后加酶底物显色，颜色的深浅取决于抗体和酶标 AFB 1 抗原结合的量 , 即样品中 AFB 1 多，则被抗体结合酶标 AFB 1 抗原少，颜色浅，反之则深，用目测法或仪器法与 AFB 1 标样比较判断样品中AFB 1 的含量。最低检测浓度为0 。 01ug/kg 。

GB 5009.206-2016河豚毒素酶联免疫法，检测河豚组织要分别检测吗

[font=宋体]流式细胞分析是一种在生物学和医学领域广泛应用的实验技术，它可以实现对细胞群体的快速、准确分析和分类。本文将详细介绍流式细胞分析的步骤和流式免疫检测的应用，帮助读者全面了解这一技术的原理、方法和应用。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]流式细胞分析方案主要分为[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]个步骤： [/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①样品制备：应通过机械分离方法或化学解离技术制备单细胞悬液，如采用酶溶液或钙螯合试剂。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②封闭：通常采用抗[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]抗体稀释液悬浮细胞，防止一抗非特异性结合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③抗体孵育：流式细胞分析的孵育步骤涉及多种组分，包括一抗、二抗、链霉亲和素和荧光染料。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④流式细胞仪检测：将处理后的细胞通过流式细胞仪进行检测和分析，获取细胞的各项指标数据。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]适当的对照[/b][/font][font=宋体]除了目标细胞之外，每次进行流式细胞实验还应包含以下对照：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]至少一份未染色样品，与试样同时进行每一步的缓冲液孵育，以优化实验的流速和电压。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一份适当的阴性对照样品，与试样基本相同，但用在一抗的宿主种属中生产的同型对照替代试样中的一抗。该对照用于非特异性结合二抗。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]如有需要也可准备一份已知表达所有目标抗原的细胞组成的阳性对照，并与试样共同孵育，但仅用单色检测。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]流式免疫检测方法与应用[/b][/font][font=宋体]同其他免疫检测应用一样，流式细胞分析也可通过多种方法利用抗体探测特定的细胞基元。两大常用方法为：直接检测法和间接检测法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]直接检测法[/font][font=宋体][font=宋体]直接检测法采用一步染色工艺，仅需一抗即能特异性结合目标抗原，无需额外步骤，可直接与支持成像或其他结合状态检测的分子结合。在探测细胞表面抗原时，应避免固定细胞，因为固定可能导致抗体探针无法与目标抗原充分接触。因此，保持细胞活力对于数据采集至关重要。若需查找适用于直接检测法的抗体，推荐使用[/font][font=Calibri]Antibody Explorer[/font][font=宋体]抗体搜索工具，将搜索范围限定为“仅限一抗”，并将应用选择为“流式细胞分析”。这样，您将能够快速找到适合您实验需求的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]间接检测法[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]间接检测法首先使用纯化抗体与目标抗原进行结合，然后使用荧光染料标记的二抗（能够特异性靶向一抗的宿主同型）与一抗进行特异性结合，形成一抗[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]荧光二抗复合物。通过将纯化的一抗与各种波长（或颜色）的荧光染料标记的二抗（特异性针对产生一抗的宿主同型）进行搭配，可以增强抗体库的模块化程度。这种方法能够提高实验的灵敏度和特异性，同时减少背景干扰和误差。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service]流式细胞检测技术服务[/url]，其优势：[/b][/font][font=宋体][font=宋体]①具有 [/font][font=Calibri]20,000 [/font][font=宋体]次以上流式抗体筛选鉴定经验及多年流式诊断抗体研发经验，在实验方案设计、样品制备、数据分析等方面确保科学性、准确性和可靠性[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]②拥有 [/font][font=Calibri]1,000 [/font][font=宋体]余株自产精品流式抗体，覆盖细胞膜、胞内、核内及分泌抗原；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]③自产 [/font][font=Calibri]Annexin V/7-AAD [/font][font=宋体]凋亡检测试剂盒，并储备多种流式检测常用试剂，大大节约购买试剂的等待时间和实际费用；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]④可以提供近 [/font][font=Calibri]200 [/font][font=宋体]种细胞系选择，省去细胞样本寄送过程中的风险，并可以免费提供健康人外周血细胞对照品。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service[/font][/font]

GB 5009.206-2016河豚毒素酶联免疫法，检测河豚组织要分别检测吗

请问：酶联免疫法检测的结果可以用31650来判定么？

1．概述REAGEN™尼卡巴嗪酶联免疫反应测试盒利用竞争性酶联免疫反应原理，对饲料中尼卡巴嗪的残留进行定量检测。该试剂盒有以下特点：Ø 高回收率(80-105%以上)，快速(10-30分钟之内完成提取过程)提取。Ø 检测过程只需要不到1.5小时。Ø 高重复性。2．试剂盒原理REAGEN™尼卡巴嗪酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有尼卡巴嗪的抗体已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同酶标共同被添加到板孔中。如果样品中含有尼卡巴嗪，会竞争抗体，抑制酶标与板上包被的抗体结合。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中尼卡巴嗪的浓度成反比。

1．概述REAGEN™恩诺沙星酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理，用于饲料、肉类组织（牛肉、鸡肉和猪肉）、鱼虾、牛奶、组织、血清和尿液中恩诺沙星残留的定量检测。该试剂盒具有以下特点：Ø 快速，高回收率(75-105%)，多种样品的低成本提取方法。Ø 高灵敏度（0.1ng/g或ppb），低检测下限（牛奶0.5ng/g或ppb）。Ø 高重复性。Ø 检测过程只需要不到1.5小时。 2．试剂盒原理REAGEN™恩诺沙星酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有恩诺沙星的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物，会竞争一抗，抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗，形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

1．概述 REAGEN™ 萘啶酸酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理，用于鱼、虾和肉中萘啶酸残留的定量检测。为食品加工厂和政府监督管理部门提供了检测限为5ppb的快速检测技术。满足消费者对食品安全问题的需求。该试剂盒有以下特点：Ø 快速鱼虾肉提取方法且回收率达到75-105%。Ø 快速的检测（在不考虑样品数量的情况下只需50min）。Ø 高重现性。 2．试剂盒原理REAGEN™萘啶酸酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有萘啶酸抗体已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同萘啶酸酶标记物共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物，会竞争萘啶酸抗体，抑制酶标记物与板上包被的萘啶酸抗体结合。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中萘啶酸的浓度成反比。

1．概述环丙沙星酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理，用于饲料、肉类组织（牛肉、鸡肉和猪肉）、鱼虾、牛奶、组织、血清和尿液中环丙沙星残留的定量检测。该试剂盒具有以下特点：Ø 快速，高回收率(75-95%)，多种样品的低成本提取方法。Ø 高灵敏度（0.35ng/g或ppb），低检测下限（饲料有机提取法0.525ng/g或ppb）。Ø 高重复性。Ø 检测过程只需要不到1.5小时。 2．试剂盒原理环丙沙星酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有环丙沙星抗体的药物已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同HRP酶标记物共同被添加到板孔中。如果样品中含有环丙沙星，会竞争包被抗体，抑制HRP酶标记物与板上包被的抗体结合。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

1．概述REAGEN™头孢噻呋酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理，用于牛奶、尿液、组织（肝、肾、肉）、蛋、血清和血浆中头孢噻呋残留的定量检测。该试剂盒具有以下特点：Ø 快速，高回收率(75-105%)，多种样品的低成本提取方法。Ø 高灵敏度（2ng/g或ppb）。Ø 高重复性。Ø 检测过程只需要不到2小时。 2．试剂盒原理REAGEN™头孢噻呋酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，头孢噻呋已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同头孢噻呋捕获蛋白共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物，会竞争捕获蛋白，抑制捕获蛋白与板上包被的药物结合。加入酶标记的二抗，形成包被药物-捕获蛋白-酶标二抗复合物。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

名称：酶联免疫吸附试验标准操作规程(SOP)关键词：ELISA 抗原 抗体目的：1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。背景知识：ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。原理：ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。主体内容：【操作步骤】方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O•D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O•D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。　　方法二　用于检测未知抗体的间接法：　　　　　　用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，　　　　　　每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。　　　　　　　　　　　　　　↓　　　　　　加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔　　　　　　中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)　　　　　　　　　　　　　　↓　　　　　　于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，　　　　　　37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。[font='Helvetica Neue', Helvetica, Arial

用酶联免疫试剂盒检测黄曲霉毒素时,试剂盒里面的酶标记物有沉淀,是什么原因？