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对广大版友来说,可能从事的都是分析,不知道有没从事研究的版友,这是我看到的一篇论文,感觉有一定用处,特转贴和大家分享! 五种化学试剂的蛋清凝固效果及其防腐应用价值 姜吉良 吴 斌 邓香群 【摘要】目的:为尸体防腐剂改良研究积累资料。方法:将所选的五种化学试剂各配成几种不同浓度的溶液,加入蛋清作为指示剂,观察其蛋白质的凝固过程及效果。结果:甲醛、乙醇、醋酸、戊二醛、苯酚均能使蛋清凝固 它们的适宜浓度分别是2%~15%、35%~80%、5%~30%、0.8%~4%、1.5%~10% 常用浓度下乙醇凝固蛋清的速度最快,其次是戊二醛,甲醛最慢。结论:蛋清是较好的蛋白质凝固指示剂 甲醛、戊二醛和苯酚对蛋清固定效果较好,乙醇和醋酸对蛋清固定效果较差。 【关键词】化学试剂 蛋清 蛋白质凝固 适宜浓度 指示剂 尸体腐败主要是因各种酶对组织中的大分子物质不断分解,使组织结构逐渐解体所致。导致腐败发生的酶来源有二:机体自身的组织细胞和自然界中无处不在的微生物(特别是细菌),前者引起“自溶”,后者引起“它溶”。众所周知,酶属于蛋白质,具有强大的催化作用,故任何可以使蛋白质变性凝固的化学试剂都可通过抑制酶的生物活性而起到防腐作用。换句话说,保证化学防腐效果的有效途径就是寻找性能优良的蛋白质凝固剂。使蛋白质变性凝固的化学试剂主要有醛类、醇类、酚类、重金属盐类及某些酸。笔者从其中选择五种有代表性、使用较广的化学试剂,并以蛋清为指示剂进行实验,观察它们凝固蛋白质的过程及效果,以期丰富防腐剂改良研究的资料和实验方法。1 材料和方法1.1 材料准备: 实验前准备好的材料包括:蛋清300ml,蒸馏水1500 ml,分析纯甲醛、乙醇、戊二醛、醋酸、苯酚等化学试剂,100 ml和50 ml烧杯各30支,20 ml和50 ml注射器各两支,量筒、滴管、玻璃棒若干。1.2 溶液配制: 以各种试剂的常用浓度为标准配成中浓度溶液 以常用浓度的3/4、1/2配成两种低浓度溶液 以常用浓度的1.5倍、2倍配成两种高浓度溶液。每种浓度的溶液配制量均为50 ml。1.3 指示剂的使用: 为了便于观察蛋白质的凝固过程和效果,选择合适的指示剂是必要的。蛋清的蛋白质含量高,不含脂肪,新鲜时呈无色透明的胶状,不搅拌时不与水混溶,两者之间有明显的分界。实验时,通过注射器向每一杯配制好的溶液中缓慢加入10 ml蛋清。1.4 蛋清凝固过程观察及判断: 实验中,蛋清的蛋白质凝固时使蛋清发生三个方面的明显变化:一是颜色变化 二是透明度减低 三是流动性改变。当溶液中的蛋清表面形成一层完整的变色层,伴有流动性降低时,提示蛋清已发生显效凝固。当溶液中的蛋清团流动性丧失,用玻璃棒触碰无波动现象时,提示蛋清完全凝固。1.5 蛋清凝固效果检查: 蛋清完全凝固后,先记取杯中的溶液总量,然后将杯中的溶液到出并测量其量,用前者减去后者便得出杯中蛋清凝块的体积。取出蛋清凝块,观察其颜色、硬度、弹性、脆性等,然后再将蛋清凝块放入原烧杯中,进行开放气象保存。1.6 补充实验: 在各种试剂的高浓度组中,如最高浓度溶液中的蛋清凝固时间最短,则配制更高浓度的溶液进行补充实验,直至浓度增加不能缩短蛋清的凝固时间 在试剂的低浓度组中,如两周内溶液中的蛋清全部凝固,则配制更低浓度溶液继续实验,直至两周内蛋清只出现显效凝固,不发生完全凝固。2 结果2.1 试剂的适宜浓度: 笔者将适宜浓度定义为化学试剂用来进行防腐处理时的合适浓度范围。在此范围内,既能保证试剂的防腐效果,又能控制其毒性和避免浪费。最短时间内使蛋清全部凝固的最低浓度为最高适宜浓度,在观察期内(两周)只能使蛋清产生显效凝固,不出现全部凝固的最低浓度为最低适宜浓度。根据实验得出:甲醛、乙醇、醋酸、戊二醛、苯酚的适宜浓度分别是2%~15%、35%~80%、5%~30%、0.8~4%、1.5%~10%。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/11/200811230941_119910_1643419_3.gif[/img]
冬天用d6-DMSO很容易凝固,有时测试中也会凝固,导致峰形很差。有什么好办法可以抑制凝固么?
发现甘油以后的150年人类一直没办法让甘油结晶,一直到1920年有一次在运送甘油的货船里有一桶甘油突然结晶了,科学家就把这些结晶作为晶种带回实验室打算制作甘油结晶,但是神奇的发现,这以后时候即使没有放入晶种的甘油也可以结晶了。这是历史上的故事。冬天时候,气温还是比较低的。有时候,装上的一桶桶甘油在冰天雪地中,10桶中有2,3桶结晶。室外温度大概在-4℃左右(南方天气)结晶给客户带来了如何取出的困难。实际上甘油结晶正说明了甘油纯度很高。以下是测试的结果。 同一批号的甘油(留样是从客户处取来的结晶甘油)。项目结晶甘油留样甘油表观晶体甘油,20℃水浴融化成甘油液体。液体甘油。红外和标准红外谱图相同和标准红外谱图相同含量99.77%99.81%相对密度(25℃)1.2615g/ml1.2616 g/ml水分0.16% (KF)0.12% (KF)色谱没有发现杂峰没有发现杂峰粘度(cP)12891312结晶甘油红外http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104141144_288718_1626663_3.jpg留样甘油红外http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104141147_288721_1626663_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104141148_288724_1626663_3.jpg结果及讨论1. 红外图谱分析,结晶甘油的各峰和留样甘油相同,并且与标准甘油红外谱图相同。定性说明,结晶甘油就是甘油。2 .结晶甘油GC图谱仅一个峰,说明其不含杂质,并且该峰的保留时间和甘油标准品相同。也说明结晶甘油就是甘油。3.结晶甘油含量和留样结果几乎相似。水分略多一点点,粘度稍小一点点。但是都远远高于药典注射级甘油要求。由于甘油吸水和引湿,有可能造成含量稍微低一点点,水分多一点点。4.结晶的原因,我自己杜撰下,由于甘油含有羟基,会形成分子间和分子内氢键。在冬天,运输过程中,存在摇晃。我们知道结构决定性质。摇晃过程中,键角可能发生变化。只要桶内有一点点分子键角达到了在-4℃左右的角度,形成一个晶核,引起多米诺骨牌效应,其他甘油分子在晶核作用下,凝结起晶体。同样道理,由于产生晶核一定要一部分分子达到同样的特定键角度,过,或不及都不能形成晶核,所以形成晶体是一个随机事件。故会发生十桶有2,3个发生结晶。 由于氢键作用,所以甘油凝固点和熔点是相差很多的。好像甘油凝固点在-15到 -3 0℃(对一般情况下,不摇动,范围宽也说明是有氢键作用),熔点在17℃左右。这说明凝固的甘油 打开氢键,才能融化。而要达到一个特定凝固的氢键键角,需要冷点温度,这样分子定型容易和摇晃。5.我们可以看到冬天买来的一箱20瓶冰醋酸在4℃时候又的是液体,有的是固体。同样也可以用我杜撰的看法来解释。醋酸同样包含氢键。所以 甘油结晶 正说明甘油纯度高。