小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用
目的 改良树脂包埋复数小鼠不脱钙胫骨的方法,提高树脂包埋法的效率及稳定性,探索减少树脂切片脱片的方法。方法 取15只B6小鼠共30胫骨,标记、固定、脱水、渗透后将其包埋于直径4 mm的圆柱型树脂块中,胫骨近端1/4处切断后再对剩余的3/4胫骨包埋。在包埋时将5个胫骨切面贴于平整树脂板并包埋于同一树脂块中。分别在包埋液制备、切片、染色3个阶段随机将样本分为对照组及实验组,分别在3个改良组中采用以下方案处理,包括:向包埋液冲入CO2;在切面上涂抹包埋液;在脱塑水化前以95 ℃加热切片15 min。分析树脂凝固时间、切片脱片率及骨形成、成骨细胞定量指标。结果成功包埋6个树脂块,每个树脂块内有5个胫骨,胫骨横截面于同一平面上,树脂块凝固完全,适于切片。向包埋液冲入CO2可以缩短树脂块凝固时间,提高凝固成功率。在切面上涂抹包埋液可以显著降低切片时的脱片率(P0.05)。在脱塑前加热切片可以显著降低脱塑水化后的脱片率(P0.05)。结论 复数小鼠不脱钙胫骨的树脂包埋改良法有效可行,这可能是一种理想的不脱钙骨组织研究方法。关键词:树脂包埋;不脱钙;复数胫骨包埋;预防脱片