微生物培养检测

大家的微生物培养箱每日检测几次？怎样的频次？望老师不吝赐教

[color=#444444]微生物的检测是用自制的培养基培养好，还是[/color][color=#444444]petrifilm[/color][color=#444444]测试片好。它们之间有什么区别？[/color]

检测饮用水中的细菌总数，总大肠菌群等项目时，在采样记录的培养时间是48小时时期、24小时，还是这几点到几点？

微生物检测中冷藏菌种培养基的冰箱用校准吗？还是直接校准温度计，每天对其核查就行？

我们是引用水分析实验室，在实验室的建设规划图上，看到在微生物区域的无菌操作室，也就是放超净工作台的房间，设置了镜检及细菌，大肠菌的培养箱。第一次看到感觉很吃惊，一般说来，培养箱都是放在外面的，我个人认为既然是无菌室，还在里边培养细菌，进行镜检，那还能是无菌室吗？简单的紫外照射可以去除空气中因培养镜检所带入的污染源吗？不知道这种安排出于什么理论，请大家赐教。

环境第三方检测机构，做粪大肠菌群，新的标准需要做培养基检验。我们买了大肠埃希氏菌定性标准菌株（环凯微生物G0049DX），现有几个问题请教各位大神：1. 怎么确定浓度，，证书、说明书上都没有提供。2.传代是什么意思，具体怎么操作。3.是不是发酵以后全为阳性反应就证明培养基合格？

单位打算检测食品企业生产用水微生物指标，但没有专门检水所用的培养基，可以用GB4789中用到的培养基吗？

欧洲药典里（2005CH2.6.12）细菌和真菌检测such as mediumB和such as mediumC培养基。

微生物培养的仪器问题对于微生物的研究，拥有大量的实验材料是十分必要的，这就需要进行微生物的培养。而且，对于某些微生物病原体的检测，也是需要进行微生物的培养。所以微生物培养用的培养基的制作也就成为了最基本的实验技术。 然而现今培养基已经可以工业化生产，技术也比较成熟，也就对培养基不是那么重视了。常识性的，培养基分为天然的（Defined Media）和合成的（Complex Media） 。天然培养基是提供接近于微生物生长的自然环境的营养物质，然而为此付出的代价是我们并不完全清楚其中的物质的组成或其含量，这种培养基可以用于实验用基本培养基和生产，但在作某些实验时得到的数据会不稳定。合成的培养基是用多种高纯化学试剂配制成的，各种成分和含量都是已知的。虽然制作成本高，也很烦琐，但成分精确，重复性强，用于对于营养、代谢、生理生化特性的研究等要求较高的工作。然而可以在这种微生物培养基上生长的微生物十分有限，原应是许多微生物的生长代谢我们并不完全了解，无法配出微生物满意的营养基质。现在的微生物培养技术已经相当成熟了，然而其中总有令人不满的地方。比如，无论何时空气中总有微生物，无论是制作培养基过程中还是将微生物接种到培养基上时总会和空气接触，很容易想到不久后长出的菌落到底是谁的，样品的？还是空气的？这些也许是无法避免的，但确实会带来很多麻烦。整个过程充满着失败的可能性，没有先进的仪器设备就无法降低这种可能性，对于研究这种时时处处在身边的小东西我们总显得有点力不从心。用铁丝接种环划线就很容易弄坏培养基，更别说分离出单菌落了。这需要经验和技术，对于一个研究微生物的人来说本不该去关心的经验和技术。前人也许是这样的，但我们未必也需要这样。对于无法用肉眼观察的东西，研究和培养是很困难的，尤其是没有先进的仪器设备的时候，那种痛苦是可想而知的。我们现在用的固体培养基大都是用琼脂。在琼脂发现以前，想要做细菌的纯培养是非常困难的，那时候只有液体培养基，根本无法进行纯培养。后来用凝胶培养基，但很多细菌都无法在基质上正常生长，直到琼脂被用来做固体培养基的基质，才解决了这个难题。应为琼脂是多聚糖的硫酸盐，其中主要是D-半乳糖，一般微生物很难分解利用它。这在微生物培养上是一次很大的革新。由于材料容易获得，而且本身的特性又很好，所以至今仍在使用。然而，微生物的培养依旧受到很大限制。我们对微生物的了解还不够多，许多微生物的培养只能用天然培养基，这在要求可重复的实验中会带来很大的麻烦；另外，条件的限制导致很多实验都无法达到无菌环境，实验结果有多少是可靠的，很难说明。微生物的培养只是一种手段，但却是一种很重要的手段。虽然只要能说明研究成果就可以了，但在实际操作中也确实有着非常繁琐，难以操作的地方存在，只要做过微生物培养的实验便可以知道，想要做出漂亮的结果是非常困难的，其中需要改进的地方有很多，比如有没有办法就算再不是无菌的环境下也能尽量减少空气中细菌的干扰，可不可以用更柔软的材料做接种环来划线，有没有其他的方法来给涂布棒灭菌。不然实验失败很难找出其中的原因。虽然实验失败的可能性很多，但我们至少应该减少它发生的可能性。微生物培养基是微生物实验必不可少的组成，它以及与它有关的组成构成了微生物培养的装置，这些仪器和操作中的不确定因素太多，这样做出的实验结果是没有说服力的。这些仪器和操作有待于改进。（因为我的基础太差，所以无法指出其中需要改进的地方到底应该改成怎样，但已经明显体会到了这些仪器以及操作的不足之处。）

求《微生物干粉培养基质控图解手册》，还有《常见细菌及检验实用技术》，都是陆桥出版微生物检测技术工具书。

做微生物培养时培养皿上会有水珠，一般是上层的培养皿会有水珠，往下面就会逐渐减少至没有水珠出现。请问出现这种问题是什么原因啊！

http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1004.gif大家好，想请教个问题，有关设备表面微生物的培养问题？主要有1、设备表面微生物培养用擦拭发检测用到的棉签有什么要求？市场有售吗？2、表面微生物培养用什么培养基？怎么转移呢?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif

对于微生物培养，大家常用的是恒温培养箱、霉菌培养箱、震荡培养箱、恒温水浴箱、发酵罐等，满足了日常工作需要；当然，这都是针对好氧菌而言。 而对于厌氧菌和兼性好氧菌，则需要考虑选用合适的厌氧、微好氧/低氧培养装置（如厌氧培养盒/袋、厌氧罐以及专业的厌氧培养箱、厌氧工作站、微好氧/低氧培养箱、厌氧发酵罐/反应池等）。 常规的动物细胞培养，一般选用CO2培养箱、滚瓶培养装置、悬浮培养装置、生物反应器/细胞培养罐等。为更接近或模拟体内微环境，三气培养箱（即CO2培养箱加配O2传感器）逐渐为人们所熟知！当然，更专业的Biospherix 系列O2/CO2控制器加培养盒、H35微好氧/低氧细胞培养箱、X vivo 一体化细胞工作站等三气培养装置也给大家提供了更多的选择！

最近想总结下微生物检测指标用到的一些培养基的有效期，比如菌落总数用的营养琼脂培养基，标准有的写了有的没写，所以大家有没有知道的，告诉我一下呀～我现在知道的是品红亚硫酸钠培养基是冷藏两周，MFC是96小时，其他的营养琼脂，乳糖蛋白胨，伊红美蓝，EC培养基有没有知道的小伙伴？

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落，通常是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。获取单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。值得指出的是，从微生物群体中经分离生长在平板上的单个菌落并不一定保证是纯培养。因此，纯培养的确定除观察其菌落特征外，还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定，有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到。 土壤是微生物生活的大本营，它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此土壤是微生物多样性的重要场所，是发掘微生物资源的重要基地，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。本实验将采用不同的培养基从土壤中分离不同类型的微生物。 将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，则实验结果就不可靠，影响下一步工作的进行。

1．分批培养（batchculture）将微生物置于一定容积的培养基中，经培养，最后一次收获，谓分批培养。在分批培养中，培养基一次加入，不予补充，不再更换。由于营养消耗，代谢产物积累，对数生长期不能长期维持。2．连续培养（continuous culture）在培养器中不断补充新鲜营养物质，并不断排出部分培养物（包括菌体和代谢产物），以保持长时间生长状态的一种培养方式。主要有恒浊连续培养和恒化连续培养两类。恒浊连续培养通过不断调节流速，使培养液浊度保持恒定，因而可不断提供具有一定生理状态的细胞，并可得到以最高生长速率进行生长的培养物。恒化连续培养通过控制恒定的流速使营养物浓度基本恒定，从而使微生物保持恒定的生长速率。用不同浓度的限制性营养物进行恒化培养，可得到不同生长速率的培养物。3．半连续培养（semi－continuous culture）在发酵罐中的一部分发酵液保留下来作为菌种液，放出其余部分进入提练加工工序，在剩余的培养液中加满新的未接种的培养液，继续培养，如此反复，谓之半连续培养。4．补料分批培养（fed－batch culture）补料分批培养又称半分批培养，是指在分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养液，但不取出培养物。待培养到适当时期，将其从反应器中放出，从中提取目的生成物（菌体或代谢产物）。若放出大部分培养物后，继续进行补料培养，如此反复进行，则称为重复补料分批培养（repeated fed－batch culture）。与传统分批发酵相比，补料分批发酵的优点在于使发酵系统中的基质浓度维持在低水平，这有以下优点：①可除去快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，以减轻供氧矛盾；②避免有毒代谢物的抑菌作用；③大为减少了无菌操作要求十分严格的接种的次数。与连续发酵相比，补料分批培养不会产生菌种老化和变异等问题。故其应用范围十分广泛。5．同步培养 能使培养的微生物处于较一致的，生长发育在同一阶段上的培养方法叫同步培养法。利用同步培养法控制细胞的生长，使它们处于同一生长阶段，所有细胞都能同时分裂，这种生长方式叫同步生长（图3—4）。用同步培养法得到的培养物叫同步培养物（synchronous culture）。这样，群体和个体行为一致，即可用研究群体的方法来研究个体水平上的问题。由于同步群体的个体差异，同步生长往往最多维持2个～3个世代，然后又逐步变为随机生长。

[font=宋体][color=black][back=white]富集培养法是采用培养的方法对水样中目标微生物进行增殖[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]以达到富集的目的。根据微生物呼吸类型[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]富集培养法可分为好氧培养与厌氧培养。但是大多数微生物[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]大多数细菌、霉菌、放线菌等[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white])[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]需要有氧条件下进行培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养的方法主要有[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]:(1)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]固体培养法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]——[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在培养基表面[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]如斜面与平板表面[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white])[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]完成微生物增殖培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white] (2)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]液体培养法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]——[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]把微生物接种到液体培养基中进行增殖培养。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Wang[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等开发了经过[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]10[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]24 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养后用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检测水中大肠埃希氏菌和肠球菌的方法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检出限可达到[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.2 MPN/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Strakova[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等通过一种基于离心、细菌运动和选择性培养条件的新型培养方法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]对废水和地表水中的耐热弯曲杆菌进行分离[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]44%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]的样品中检出弯曲杆菌阳性。从现有的研究来看[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]富集培养法在致病菌的富集浓缩中应用较多[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]对病毒和原虫的富集浓缩常采用的是鸡胚及鸡胚器官培养和细胞培养的体外培养模型[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]但这种方法目前主要应用于药物的开发[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在水体中的应用较少。[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]鉴于细菌培养过程中大部分选择性培养基只能培养特定的目标菌株[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]无法满足多种致病菌高通量检测的需求[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]开发多重选择性培养液以实现多种致病菌的同时培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]目前成为了一个新的研究热点。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Suo[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等开发了一种可以同时培养大肠埃希氏菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]O157:H7[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、沙门菌属和单核细胞增生李斯特氏菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]种致病菌的[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]SEL(Salmonella, E. coli O157:H7 and L. monocytogenes) [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养液[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white], [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]100 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]接种浓度下[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],3[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]种目标菌株经过[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]非选择性恢复期[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white], [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]37 ℃[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]选择性培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]20 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]后均可富集到[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1×108[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1×109 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Qu[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等开发了一种可以同时培养沙门菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]O157:H7[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和单核细胞增生李斯特菌的[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]SSEL (Salmonella, Staphylococcus aureus, E. coli O157:H7and L. monocytogenes) [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养液[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white], [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]10[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]100 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]接种浓度下[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],4[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]种目标菌体[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]37 ℃[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]18 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]后均可富集到[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1×105 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]富集培养法的优点是可以选择性培养目标菌株[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]同时可排除死菌和其他杂质的干扰[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]如非腐殖质生物、腐殖质等[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]),[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]但该方法培养过程耗时且只适用于可培养的细菌或真菌的富集[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]限制了其在致病微生物检测前处理过程中的研究和应用。[/back][/color][/font]

微生物培养的污染因素及预防方法随着现代生物学研究的发展，微生物培养成为了重要的实验手段之一。然而，在进行微生物培养过程中，存在着许多污染因素，这些污染因素可能会对实验结果产生影响或者导致实验结果不准确。下面将介绍一些常见的微生物培养的污染因素以及相应的预防方法。1、风速与风向培养箱内的风速和风向对于保持温度的均一性以及避免污染都非常重要。一般来说，适当的风速和风向可以帮助培养箱内的温度保持均一，有利于微生物的正常生长。然而，当风速过大时，可能会导致培养基干裂，从而影响培养结果的准确性。另外，药典要求培养皿倒置培养，这是因为经过多次验证发现，当培养箱运行时的风向与培养皿盖的朝向不一致时，容易引入空气中的灰尘、杂菌等，从而污染培养物。因此，在使用培养箱的过程中，需要注意风速和风向的控制，并尽量与培养皿盖的朝向一致。2、培养皿的密闭性培养皿由平底和盖组成，一些微生物实验室常用的培养皿直径为90mm，采用顶盖封装。然而，由于不同厂家制造的培养皿的成型工艺和参数不同，平底和盖之间的间隙也存在差异。这些间隙虽然能够满足需氧型微生物对氧气的需求，但也增加了污染的可能性。经过实验证实，在同样的培养条件下，间隙大的培养皿比间隙小的培养皿更容易受到污染。此外，间隙的大小不同还会导致培养皿内培养基的水分蒸发不一致，从而影响培养结果数据的一致性。因此，在使用培养皿的过程中，需要选择质量可靠的培养皿，并注意平底和盖之间的间隙情况。3、培养箱内的湿度微生物生长需要一定的湿度条件。湿度对微生物生长的影响是通过影响微生物细胞内水分活度进而影响其新陈代谢来实现的。不同微生物的生长对湿度有一定的要求，一般来说，细菌最为敏感，酵母和霉菌次之。降低湿度会使微生物的水分活度降低，从而减慢其生长速度。因此，在微生物培养的过程中，需要保持适宜的温度和湿度，以有利于微生物的生长。培养箱内湿度的来源主要有培养基的水分散失、湿度自动调控系统以及培养箱所在的环境。因此，在使用培养箱的过程中，需要控制湿度，保持适宜的生长环境。4、培养物溢洒培养物溢洒是指含有生物危险物质的液体或固体物质意外与包装材料分离的过程。一旦发生生物危害物品的溢出，尤其是含有病原微生物的培养物的溢出时，会导致微生物的生长和繁殖，从而引起培养箱的污染。为了预防交叉污染，当发生培养物溢洒时，需要及时清理和消毒培养箱。应该使用有效的消毒剂对培养箱的内壁以及接触溢出物品的材料进行消毒或高压灭菌。此外，如果溢洒物中含有破碎的玻璃等材料，不得直接用手取走或弃置，应该使用硬纸板和镊子等工具处理，并将处理物放置在安全的废弃物容器中。最后，对清洁工具也需要进行消毒处理，以确保卫生安全。5、自然环境污染培养箱需要放置在洁净、干燥、通风良好的自然环境中。如果环境中空气洁净度不够高，容易滋生细菌、真菌和病毒等微生物，并通过平底和盖之间的间隙污染培养基，从而影响培养结果数据的准确性。因此，在使用培养箱的过程中，需要注意放置环境的卫生和通风状况，尽量避免自然环境的污染。综上所述，微生物培养过程中存在着多种污染因素，这些因素可能会对实验结果产生影响或导致实验结果不准确。为了保证实验结果的准确性，需要在使用培养箱进行微生物培养时，注意控制风速和风向、选择合适的培养皿、控制湿度、避免培养物溢洒以及注意自然环境的卫生状况。只有这样，我们才能够获得可靠且准确的微生物培养结果。

无菌操作技术不仅在微生物学研究和应用上起着举足轻重的作用，在许多生物技术中也被广泛应用，例如转基因技术、单克隆抗体技术等。 无菌室，微生物实验室内专辟的一个小房间，室外设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭，无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污纳垢、便于清洗，室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。工作台的台面应该处于水平状态，无菌室和缓冲间都装有紫外线灯（距离工作台面1米），工作人员进入无菌室应穿戴灭过菌的服装、帽子。 超净台，主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃，通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面，使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。在条件较困难的地方，也可以用木制无菌箱代替超净台（正面开有两个洞，不操作时用推拉式小门挡住，操作时可以将双臂伸进去；正面上部装有玻璃，便于在内部操作，箱内部装有紫外线灯，从侧面小门可以放进去器具和菌种、细胞株等）。 微生物的培养 在微生物的培养过程中，要保持培养物纯净性；培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。 （一）培养基1.认识培养基的基本组成成分，从生物体构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。2.培养基的用途和种类：液体和固体两大类。3.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方；尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。4.培养基是否合格（无菌试验）：培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长（液体不变浑浊），说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）无菌技术 1. 无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。日常的生活环境中，每时每刻每处都存在着微生物，任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培养物中。在具备无菌环境和获得无菌材料后，还要始终保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学叫做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的技术：彻底灭菌和防止污染是无菌技术的两个方面。此外，要有效避免操作者自身被微生物感染，还要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的实验容器中逃逸到外界环境中去（生物安全）。无菌操作非常重要，无论是倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。 2. 消毒与灭菌的概念（1）培养细菌用的培养基与培养皿（需要灭菌）（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（需要灭菌）（3）实验操作者的双手（需要消毒）（4）接种环、针、涂布棒：灼烧灭菌（外焰）。 3.倒平板（1）灭菌后，培养基冷却到55 [font='宋

[color=#444444]食品微生物检测中霉菌和酵母菌的检测方法有什么区别，如果我两种菌都检验，可以放在一个培养箱里吗？[/color]

培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配制而成的一种混合营养基质，用以培养或分离各种微生物。因此，营养基质应当有微生物所能利用的营养成分（包括碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素）和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 一、按成分的不同分1. 天然培养基主要成分是复杂的天然有机物质，如马铃薯、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等。这些复杂天然有机物质的成分不完全了解，每次所用的原料，其中各成分的数量也不恒定。这类培养基是实验室常用的培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基等。 2. 合成培养基用化学成分完全了解的纯试剂配制而成的培养基，如高氏1号培养基，查氏培养基等。一般用于营养代谢、分类鉴定、菌种选育、遗传分析等。 二、按培养基的物理状态分1. 固体培养基在液体培养基中加入凝固剂即为固体培养基。实验用的凝固剂有琼脂、明胶和硅胶，后者用于配制自养微生物的固体培养基。对其他多数微生物来讲，以琼脂最为合适，一般加入1．5-2．5%即可凝固成固体。此培养基可供分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等用。 2. 半固体培养基在液体培养基中加入少量凝固剂即为半固体培养基，例如琼脂只需加入0．2-0．7%。常用作细菌动力检查和菌种保存、噬菌体制剂的制备等。 3. 液体培养基没有加琼脂，配好后成液体状态的培养基。常用于生理代谢的研究和工业发酵等。

由于蜜饯生产流程：[img]http://p3.qhimg.com/t0134c6f9da345d4ccb.png[/img] 2.[img]http://p4.qhimg.com/t0109d30f8123bd1a38.png[/img]3.因此需要对生产过程中每个流程中的样品进行无菌检查，取样培养，看有没有微生物污染。因此需要微生物培养箱。

微生物培养时菌落表面渗出的小液滴是啥呀，可能是微生物产生的毒素吗

今天突然想到个问题，微生物培养箱里都有灯，光照对微生物培养有什么作用吗？还是培养箱里的灯就是为了照明用的？大家积极讨论哦，生命仪器版块大力鼓励大家交流^_^

做微生物培养使用的培养箱需要是有湿度要求吗？

请教一下所谓的“微生物的过夜培养”是指培养多少小时？谢谢！

微生物培养基在资料上有很多类：http://wenku.baidu.com/view/8b6d9262caaedd3383c4d3ee.html 同一类微生物又有不同培养基供选择：http://www.hopebiol.com/medium.asp。那用选择培养在培养分离各种细菌的时候怎么选用培养基配方呢？例如培养高盐浓度下球衣细菌的选择培养基？

最近需要购买一台生物培养箱.用于药品的微生物检测.目前市场上品牌较多,不知哪位能推荐些性价比高的产品.不胜感谢!

单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，称为菌落（colony）。当固体培养基表面众多菌落连成一片时，便成为菌苔（lawn）。不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。大多数细菌、酵母菌、以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落，采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。所谓平板，即培养平板（culture plate）的简称，它是指固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛固体培养基的平皿。这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。固体培养基用琼脂或其它凝胶物质固化的培养基，每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落，形成的菌落便于移植。最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。这种由Kock建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行，100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。　　　1. 稀释倒平板法（pour plate method）　　先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000......），然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。　　　2. 涂布平板法（spread plate method）　　由于将含菌材料先加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。　　3. 平板划线法（streak plate method）　　用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。　　　4. 稀释摇管法（dilution shake culture method）　　用固体培养基分离严格厌氧菌有它特殊的地方。如果该微生物暴露于空气中不立即死亡，可以采用通常的方法制备平板，然后置放在封闭的容器中培养，容器中的氧气可采用化学、物理或生物的方法清除。对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物，纯培养的分离则可采用稀释摇管培养法进行，它是稀释倒平板法的一种变通形式* 。先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右，将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释，试管迅速摇动均匀，冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。培养后，菌落形成在琼脂柱的中间。进行单菌落的挑取和移植，需先用一只灭菌针将液体石蜡--石蜡盖取出，再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间，吹入无菌无氧气体，将琼脂柱吸出，置放在培养皿中，用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察和菌落的移植。