微型分光光度计

看了tutm老师几篇关于微型分光光度计发展的帖子，很受启发，现在有几个疑问，希望版上了解的前辈们不吝赐教。1、微型光度计采用微型光谱仪分光检测，比色皿或者点样台/头置于光谱仪前端，则样品吸收的是全波长光，这样吸光度是不是非常不准确？但是已经有很多仪器做出来了，这个应该不是大问题，只是按照我目前的水平难以理解2、经过样品后进入微型光谱仪再进行分光检测（其实是延续了第一个问题），光栅固定，这时通过CCD阵列去选择关注波长的吸光度即可？有时需要进行全波长扫描，为扫描要全波长扫描，目的是什么？这个全波长扫描是通过光栅分的单色光在CCD不同位置所记录下的光强来实现的是吗?那么设计时CCD阵列就要宽到光谱色散开的宽度是吗？3、一般微型分光光度计采用的光栅是闪耀还是其他类型？（注：网上没有查到他们用的光栅类型，希望有了解的人给予解答）若为闪耀光栅，则光强大部分集中在所闪耀的波长上，全波长扫描还有意义吗？这时如果需要测量其他样品，仪器是不是就需要换光栅，或者说换一台仪器？4、微型分光光度计光路传输采用光纤，而ND2000C采用点样头和比色皿共用方式测量，那么光路怎么实现切换，点样头相当于一根光纤中部切断这个比较容易理解，从氙灯出来的光如何经过微量比色皿？两根光纤？还是从氙灯出来的光纤分成相等的两路？PS：新手，问题比较多，也很白痴，望大家见谅，先谢过

721型分光光度计构造、使用与维修 分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。 T = I/Io lg(Io/I)=εcb 式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度，A为消光值(吸光度)，ε为吸收系数，b为溶液的光径长度，c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化的。 721型分光光度计的构造 721型分光光度计允许的测定波长范围在360～800nm，其构造比较简单，测定的灵敏度和精密度较高。因此，应用比较广泛。 721型分光光度计的仪器构造见图5-5。从光源灯发出的连续辐射光线，射到聚光透镜上，会聚后，再经过平面镜转角90°，反射至入射狭缝。由此入射到单色器内，狭缝正好位于球面准直物镜的焦面上，当入射光线经过准直物镜反射后，就以一束平行光射向棱镜。光线进入棱镜后，进行色散。色散后回来的光线，再经过准直镜反射，就会聚在出光狭缝上，再通过聚光镜后进入比色皿，光线一部分被吸收，透过的光进入光电管，产生相应的光电流，经放大后在微安表上读出。721型分光光度计的使用方法 ①首先接通电源，打开电源开关1，指示灯亮，打开比色皿暗箱盖8，预热20分钟。 ②波长选择旋钮6，选择所需的单色光波长，用灵敏度旋钮2选择所需的灵敏档。 ③放入比色皿，旋转零位旋钮5调零，将比色皿暗箱盖合上，推进比色皿拉杆3，使参比比色皿处于空白校正位置，使光电管见光，旋转透光率调节旋钮4，使微安表9指针准确处于100%。按上述方法连续几次调整零位和100%位，即可进行测定工作(仪器面板见 图5-6)。 721型分光光度计使用和维护中应注意事项： ①连续使用仪器的时间不应超过2小时，最好是间歇0.5小时后，再继续使用。 ②比色皿每次使用完毕后，要用去离子水洗净并倒置晾干后，存放在比色皿盒内。在日常使用中应注意保护比色皿的透光面，使其不受损坏或产生划痕，以免影响透光率。 ③仪器不能受潮。在日常使用中，应经常注意单色器上的防潮硅胶(在仪器的底部)是否变色，如硅胶的颜色已变红，应立即取出烘干或更换。 ④在托运或移动仪器时，应注意小心轻放

求助朋友们，哈希DR 4000型分光光度计和DR 5000型分光光度计有什么不同?

分光光度法在分析领域中的应用已经有数十年的历史,至今仍是应用最广泛的分析方法之一。随着分光元器件及分光技术、检测器件与检测技术、大规模集成制造技术等的发展,以及单片机、微处理器、计算机和DSP技术的广泛应用,分光光度计的性能指标不断提高,并向自动化、智能化、高速化和小型化等方向发展。 在分光元器件方面,经历了棱镜、机刻光栅和全息光栅的过程,商品化的全息闪耀光栅已迅速取代一般刻划光栅。在仪器控制方面,随着单片机、微处理器的出现以及软硬件技术的结合,从早期的人工控制进步到了自动控制。在显示、记录与绘图方面,早期采用表头(电位计)指示、绘图仪绘图,后来用数字电压表数字显示,如今更多地采用液晶屏幕或计算机屏幕显示。在检测器方面,早期使用光电池、光电管,后来更普遍地使用光电倍增管甚至光电二极管阵列。阵列型检测器和凹面光栅的联合应用,使仪器的测量速度发生了质的飞跃,且性能更加稳定可靠,受到仪器用户的青睐,最具有代表性的当数安捷伦的HP8452/8453。在仪器构型方面,从单光束发展为双光束,现在几乎所有高级分光光度计都是双光束的,有些高精度的仪器采用双单色器,使得仪器在分辨率和杂散光等方面的性能大大提高,如Varian (瓦里安)的Cary1/3/400。随着集成电路技术和光纤技术的发展,联合采用小型凹面全息光栅和阵列探测器以及USB接口等新技术,已经出现了一些携带方便、用途广泛的小型化甚至是掌上型的紫外可见分光光度计,如OceanOptics(海洋光学)的S系列、USB2000及PC2000。而光电子技术和MEMS技术的发展,使得有可能将分光元件和探测器集成在一块基片上,制作微型分光光度计。我国重庆大学在微型多通道光谱仪方面开展了卓有成效的研究工作,承担的国家自然科学基金项目“微型多道光谱分析系统集成化技术研究”已经通过了技术鉴定。随着发光二极管(LED)光源技术及产业的日益成熟,以LED为光源的小型便携又低廉的分光光度计已成为研究开发的热点。除了空间色散的分光方式,也有人对声光调制滤光和傅立叶变换光谱在紫外可见区的应用进行了研究。 仪器的软件功能可以极大地提升仪器的使用性能和价值,现代分光光度计生产厂商都非常重视仪器配套软件的开发。除了仪器控制软件和通用数据分析处理软件外,很多仪器针对不同行业应用开发了专用分析软件,给仪器使用者带来了极大的便利。

751型分光光度计的保养与维修 附件

分光光度计的基本工作原理是基于物质对光（对光的波长）的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。 T = I/Io lg（Io/I）=εcb式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度，A为消光值（吸光度），ε为吸收系数，b为溶液的光径长度，c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化的。721型分光光度计的构造721型分光光度计允许的测定波长范围在360～800nm，其构造比较简单，测定的灵敏度和精密度较高。因此，应用比较广泛。721型分光光度计的仪器构造见图5-5。从光源灯发出的连续辐射光线，射到聚光透镜上，会聚后，再经过平面镜转角90°，反射至入射狭缝。由此入射到单色器内，狭缝正好位于球面准直物镜的焦面上，当入射光线经过准直物镜反射后，就以一束平行光射向棱镜。光线进入棱镜后，进行色散。色散后回来的光线，再经过准直镜反射，就会聚在出光狭缝上，再通过聚光镜后进入比色皿，光线一部分被吸收，透过的光进入光电管，产生相应的光电流，经放大后在微安表上读出。721型分光光度计的使用方法①首先接通电源，打开电源开关1，指示灯亮，打开比色皿暗箱盖8，预热20分钟。②波长选择旋钮6，选择所需的单色光波长，用灵敏度旋钮2选择所需的灵敏档。③放入比色皿，旋转零位旋钮5调零，将比色皿暗箱盖合上，推进比色皿拉杆3，使参比比色皿处于空白校正位置，使光电管见光，旋转透光率调节旋钮4，使微安表9指针准确处于100%。按上述方法连续几次调整零位和100%位，即可进行测定工作。721型分光光度计使用和维护中应注意事项：①连续使用仪器的时间不应超过2小时，最好是间歇0.5小时后，再继续使用。②比色皿每次使用完毕后，要用去离子水洗净并倒置晾干后，存放在比色皿盒内。在日常使用中应注意保护比色皿的透光面，使其不受损坏或产生划痕，以免影响透光率。③仪器不能受潮。在日常使用中，应经常注意单色器上的防潮硅胶（在仪器的底部）是否变色，如硅胶的颜色已变红，应立即取出烘干或更换。④在托运或移动仪器时，应注意小心轻放。

751型分光光度计的保养与维修,大家相互学习，分享了啊。。。

分光光度计是用不连续的波长采样反射物体或透射物体的一种测量仪器。由于不同物体分子的结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同，因此，每种物体都具有特定的吸收光谱。能从含有各种波长的混合光中，将每一种单色光分离出来，并测量其强度的仪器叫做分光光度计。分光光度计所使用的波长范围不同，可分为紫外光区，可见光区、红外光区以及全波段分光区。因此，分光光度计可分为可见光分光光度计。紫外／可见光分光光度计、荧光分光光度计、红外分光光度计等。无论是哪一类分光光度计主要都是由光源、单色器、狭缝、吸收器检测器系统5部分组成的。分光光度计通常提供用白光采样的照明光源。以及包括扩散后折射的反射光，而且允许测量在不连续波长时反射的总光量。分光光度计的准确度是由很多因素决定的，但是最重要的因素之一是光谱波段（即在所测量的光谱中每点波长的范围）。使用分光光度计可以绘制吸收光谱曲线，具有尖峰分光光度法曲线的介质要求分光光度计能通过狭窄的波段，典型的波长间隔是5nm，比较便宜的仪器通常能通过1Onm或20nm的波段。

721型分光光度计只有480nm有光通过是什么原因？谢谢!

仪器的性能指标对于一款分析仪器非常重要，仪器的外观精美度在用户心里同样非常重要，美学性是指紫外可见分光光度计仪器的外形是否美观，色系是否和谐，仪器的外形美观，会给人以文明、舒适、新鲜的感觉。会给人眼前带来一抹亮色，在使用一款心仪的仪器时，自己是处在一个很优美的环境下工作，这对分析工作本身都是有益的。仪器的外形美观，会使人对它更倍加爱护、维护和保养，这对延长仪器的使用寿命也是有益的。一般来讲，紫外可见分光光度计仪器的外形要色调和谐、美观大方。也就是说，要求仪器的外形要漂亮。目前，国际上紫外可见分光光度计仪器的美学性，很多紫外可见分光光度计美观大方。 一般来说，美国、日本等国家生产的紫外可见分光光度计，比较讲究美学性，但是,俄罗斯及东欧(如德国、罗马尼亚等)等国家生产的紫外可见分光光度计，外形并不大好看，而且都显得很笨重。而我国过去学俄罗斯的较多，所以，在过去的较长时间里，对分析仪器的外形也不大重视，仪器外形不好看。这是设计观念及当时大环境的问题。 在改革开放以后，国产分析仪器外形设计开始引起重视，特别是近10多年来，国产紫外可见分光光度计仪器的外形有很大改观。目前,国产紫外可见分光光度计仪器已经非常美观。外形优美流畅、色调和谐、美观大方。 哪一款仪器符合你的美学欣赏呢？

紫外一可见光分光光度法是一种灵敏、快速、准确、简单的分析方法，它在分折领域中的应用已有三十多年的历史。虽然在这段期间内各种分析方法有较大的发展，然而紫外一可见光分光光度法仍然是今日分析领域中应用最广泛的分拆方法之一。随看科学技术和分光光度法的发展，分光光度计也处在迅速发展与改善之中。 分光光度计的发展趋势可以从下列两个方面来看：(1)分光光度计的组件(如单色器、检测器、显示或记录系统、光源等)的改善与发展(2)分光光度计的结构(如单波长，双波长快速扫描、微处理机控制等)的发展。现分述如下。(一)从分光光度计的组件看发展 全息光栅正在迅速取代机刻光栅 早期的分光光度计几乎都采用各种棱镜作为色散元件，随着光栅制造技术，尤其是复制光栅的不断提高，成本不断降低，近几年来绝大多数分光光度计都改用光栅。最近，随着全息光栅技术的发展与商品化(它杂散光很少，无鬼线)，全息闪耀光栅正在迅速取代一般的闪耀光栅。例如美国珀金—埃尔默554型和Lambda 3型的紫外一可见光双光束分光光度计和英国Pye Unicam SP8—200，SP8—250双光束紫外一可见光分光光度计等均采用全息光栅。 电视式显示和电子计算机绘图(Computer graphics)初露锋芒 老式分光光度计都采用表头(如电位计)指示分析结果。随着数字电压表的商品化，表头很快就被数字电压表所取代。近年来随着微型计算机技术的迅速发展与价格日益便宜，因此和其他类型的分析仪器一样，分光光度计亦已经配用电视式显示和计算机绘图装置，如美国珀金—埃尔默555型分光光度计就已配用这类型的数据处理台 电视型检测器已开始采用 早期分光光度计多采用光电管作为光电检测元件，少数简易型分光光度计，例如国产72型，还采用光电池。近几年来，除了少数分光光度计，例如国产751、721、125型等，仍采用光电管外，绝大多数都已采用光电倍增管，因其灵敏度高，响应速度快。近来，电视型检测器颇受重视，并已作了不少的探讨工组作。最近，Update仪器公司展出的SFRSS型Stopped—f1ow快速扫描分光光度计就采用光二极管固体电路阵列(photodiodo array)作为检测器。 4． 激光光源用于光声光谱仪。 以激光光源作为光声光谱仪研究的报道并不罕见，但还未见商品化的以激光为光源的光声光谱仪。 (二)从分光光度计的构型看发展 电子计算机控制的分光光度计日见增多 初期的分光光度计多用手控单光束的构型，例如英国产品SP500型、H700型和我国751型都属这一类。六十年代的产品多用双光束自动记录构型，例如英国SP700型、日本MPS5000型和国产的710、730、740型等都是这一类产品。随着电子计算机技术的迅速发展，尤其是微处理机迅速商品化，七十年代中期起就不断出现了微处理机控制的分光光度计，例如日本日立的340型紫外一可见一近红外的记录式分光光度计；英国Pye Unicam的AURA自动反应分析器；美国珀金—埃尔默的554和555型紫外一可见光双光束分光光度计；和Beckman公司1980年出产的DU—8型(单光束)紫外一可见光计算机控制的分光光度计，日立科学仪器公司的l10型，Bausch&Lomb公司的Spectronic 2000型都属于这一类。可以说，微处理机控制的分光光度计正方兴末艾，它不仅促使分光光度计进一步自动化，而且可大大改善仪器的性能，例如使分光光度计具有获得多级导数的能力，具有光谱累积和平均的特性从而大大提高信噪比的能力。 双波长分光光度计迅速发展 自1968年日立公司制出第一台商品化的356型双波长分光光度计以来，先后有日立156型(在356型的基础上简化，数字显示，手动扫描)；1972年有Aminco DW—2型，1974年有岛津UV—300型；1975年有日立556型；1979年我国有北京第二光学仪器厂的WFZ 800S型； 1980年初有日立557型等型号仪器先后问世。其中UV—300型有光谱数据处理机附件，557型采用微型计算机控制。 快速扫描分光光度计陆续问世 利用光分析可以跟踪化学反应过程，可是要了解一个化学反应过程至少得有几条吸收光谱才行。一般分光光度计从紫外到可见光区扫描一条吸收光谱最快也得2—3分钟，不难看出，一般分光光度计只适于历程为20一30分钟以上的反应，要研究速度较快的反应就得设计出快速扫描分光光度计。目前属于这类型的商品有日立RSP—2型快速扫描分光光度计，它在紫外一可见光区的扫描速度为0．15秒钟。1980年Update Instrument展出SFRSS型的快速扫描分光光度计也属这种类型。 光声光谱又复活 虽然采用积分球反射附件的分光光度计能够部分地解决固体样品的分析，然而它的灵敏度差，再现性不好，结果往往不能令人满意，而光声光谱法却能满意地解决固体样品的分折。光声光谱现象虽然早在1880年为Bell所发现，可是这种技术直到七十年代才复活，目前颇受人们重视，商品化仪器亦陆续出现，例如1978年Gilford R—1500型光声光谱仪以及1979年Princton应用研究所产品6001型光声光谱仪。

分光光度计属于精密仪器，应当妥善保管和精心维护，这样才能保证分光光度计长期使用、长期的稳定可靠、测量精度高。 1、环境温度在条件容许的情况下，尽量保持在15-30摄氏度之间，这样能保持电器件稳定工作，不易老化，使分光光度计不易损坏，灯源的使用寿命得到延长。若条件不容许，在高温的情况下，缩短开机时间，高效使用分光光度计，使电器件不要长期保持在高温下。在低温下，使预热时间比常温下的预热时间要长，这样能保证在仪器稳定的情况下进行测试。2、环境湿度在条件容许的情况下，尽量保持在60%以下，这样能保证光度计内部的光学件和电器件不易受潮、腐蚀、和上霉。若条件不容许，在高湿度和低湿度的情况尽量保持通风。3、环境在条件容许的情况下尽量保持洁净，打扫环境时动作不宜太大，不要扬起灰尘，打扫之前用防尘罩盖上分光光度计，不要让灰尘进入分光光度计内部。

我是做生活饮用水检测的，最近我公司刚买来一台７５５型紫外可见分光光度计，原来有一台７２２型光栅分光光度计，请问各位高手，７５５型分光光度计包含７２２型的用途吗？也就是有说有７５５一台分光光度计就可以，７２２可淘汰了．谢谢！

可见分光光度计和紫外可见分光光度计为同一类型的仪器，都是属于分光光度计，但是其功能又存在区别。用来测量待测物质对可见光的吸光度，并进行定量分析的称为可见分光光度计；用来测量待测物质可见光或紫外光的吸收度，并进行定量分析的称为紫外可见分光光度计。　　 　　可见分光光度计和紫外可见分光光度的区别，具体包括以下几个方面：　　 　　1.光学器件：　　 　　由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，因此，可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用适应光学部件。　　 　　2.接收器：　　 　　由于紫外可见分光光度计多了紫外波，因此，在接收器上，多了对紫外波的灵敏响应功能，这类接收器的价格比可见分光光度计的接收器昂贵。　　 　　3.光源：　　 　　可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯和氘灯俩个电源，这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。

? ? ??可见分光光度计和紫外可见分光光度计为同一类型的仪器，都是属于分光光度计，但是其功能又存在区别。用来测量待测物质对可见光的吸光度，并进行定量分析的称为可见分光光度计；用来测量待测物质可见光或紫外光的吸收度，并进行定量分析的称为紫外可见分光光度计。　　?　　可见分光光度计和紫外可见分光光度的区别，具体包括以下几个方面：　　?　　1.光学器件：　　?　　由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，因此，可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用适应光学部件。　　?　　2.接收器：　　?　　由于紫外可见分光光度计多了紫外波，因此，在接收器上，多了对紫外波的灵敏响应功能，这类接收器的价格比可见分光光度计的接收器昂贵。　　?　　3.光源：　　?　　可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯和氘灯俩个电源，这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。

求助各位老大： 我们实验室使用的上海精科生产的723型分光光度计，最近，开机仪器自检时总是显示找不到零级光，不知什么原因，此故障如何排除？请各位老大指教。谢谢！

我有一台7520型紫外分光光度计，但使用说明书丢失了。那位大哥能给我发一个啊。我的邮箱是hallmashl0415@163.com

荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm，发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。 荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。 荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计，自动记录式荧光分光光度计，计算机控制式荧 　　光分光光度计三个阶段；荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计，配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。

中空纤维超滤膜测试中涉及到紫外分光光度计与光电分光光度计,这两种分光光度计差异在哪? 是不是紫外是用的紫外光源,那么光电又是什么光源呢?哪种更实用些?谢了!

1、荧光分光光度计有两个单色器，而一般紫外可见分光光度计只有一个单色器。2、荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的，而紫外可见分光光度计是成一条直线的。3、荧光分光光度计是以氙灯做为光源，而紫外可见分光光度计是以氘灯作为紫外区光源，钨灯或卤钨灯作为可见光区的光源。4、荧光分光光度计的比色皿是四壁均为光学面，而紫外可见分光光度计仅为两面为光学面。

红外分光光度计：测定波长范围为大于760 nm的红外光区 　　可见光分光光度计：测定波长范围为400~760 nm的可见光区　　紫外分光光度计：测定波长范围为200～400 nm的紫外光区

一：吸光光度法基于物质对不同波长的光波具有选择性吸收的能力而建立起来的分析方法。（一） 光线：光线的波长： 200nm-400nm 紫外线*400-750nm可见光*750nm 红外线光具有波粒二相性，波长不同，其能量不同。（二） 物质的吸收光谱及颜色：1． 物质的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]和原子发射光谱：原子的最外层电子可以选择性吸收特征波长的电磁波成为激发态而产生的光谱称为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]。激发态原子恢复到基态，则释放出特征波长的光子，形成原子发射光谱。不同的溶液其光谱不同，即不同溶液对不同波长的光其吸收能力不同，对某一特定波长的光存在吸收峰。2． 可见光由赤橙黄绿青兰紫等能量不同的光线组成，当可见光穿过某一溶液时，由于特定波长的光被吸收而使溶液呈现相应的颜色。（如CuSO4由于吸收了可见光中的黄光(600nm)而成蓝色）不同颜色的溶液对不同波长的光其吸收能力不同。（三） 光吸收的基本定律（Lambert-Beer 定律）：一束平行单色光（Io）通过有色的透明溶液时，一部分的光可以透过溶液（It），另一部分被溶液吸收（Ia）,还有一部分被器皿表面反射（Ir）,则：Io=It+Ia+Ir 。那么，该溶液透光率为: T = It / Io 。1． Lambert 定律：设有一束平行单色光,通过液层厚度为b 的均匀透明溶液,则溶液对光的吸收能力:A=Ig(Io/It)=Ig(1/T)=k2bk2 为吸光系数，为常数。与入射光波长、溶液性质、浓度和温度有关；A 为吸光度（又称光密度O.D 或消光度E），当入射光波长、吸光溶液的浓度和温度一定时，A 与b 成正比。2． Beer 定律：设有一束平行单色光,通过浓度为c 的均匀透明溶液,则溶液对光的吸收能力:A=Ig(Io/It)=Ig(1/T)=k4ck2 为常数。由Beer 定律可知：当入射光波长、吸光溶液的厚度和温度一定时，A 与c 成正比。3． Lambert-Beer 定律：综合1.2.得： A=Kbc ,即：当入射光波长、吸光溶液的性质和温度一定时，A 与b、c 成正比。（四） 吸光光度法的基本原理：1、 不同物质，由于其分子结构和原子组成不同，故对光的吸收光谱不同（如：CuSO4），在测定不同颜色的物质浓度时要用最大吸收的波长的入射光，这样测量的灵敏度最高。2、 同一种物质，若浓度不同，则对同一波长的入射光的吸收能力（吸光度）也不同，且成正比关系。3、 应此，利用特定波长的单色光（通常用最大吸收波长的入射光）照射不同浓度的某一溶液时，所得的吸光度大小应与溶液浓度呈线性关系，故可利用该线性关系通过计算或查标准曲线来求得未知溶液的浓度。（五） 吸光光度法特点：1． 灵敏度高：mg%级、甚至ug%级。2． 准确度高：误差2-5%3． 操作简便、快速，仪器设备不复杂，价格低廉，故应用广泛。二 ：分光光度计的使用：（一） 分光光度计的基本原理：利用吸光光度法的原理，采用棱镜或光栅等分光器获得纯度较高的单色光来测量未知溶液的浓度的方法。（二） 常用分光光度计：可见光、紫外、红外分光光度计，荧光分光光度计，火焰分光光度计等。（三） 722 型分光光度计的结构（略）（四） 722 型分光光度计的使用及注意事项1、 插上插头，接通电源，打开暗箱盖，预热20min。* 注意：分光光度计在接通电源而不用时，必须打开暗箱盖，以免光电管老化。2、 将准备好的试剂倒入比色杯中，用吸水纸擦去比色杯外侧水珠，并依次放入比色杯架中。* 注意：手拿比色杯毛面，试剂倒入杯中满2/3 即可，不得将比色杯放在仪器上。3、 调节所需波长，灵敏度调至“1”，选择旋钮至“T”。4、 调“0”：打开暗箱盖，用调“0”旋钮调节。5、 调“100%”：盖上暗箱盖，用调“100%”旋钮调节，让光线通过“空白管”。6、 重复调“0”和调“100%”数次。* 注意：若调不到“0”和“100%”，可将灵敏度调至“2”或更高，不得用力强行旋转旋钮，以免损坏。7、 将选择选扭由“T”调至“A”，此时读数应由“100”至“0”，若不为“0”，可用“消光零”旋钮调节。8、 拉动拉杆，分别读取“A 标”和“A 样”。9、 取出比色杯，弃去溶液，洗净晾干，备用。（五） 计算1．利用标准管计算测定物含量：A 样=K 样b 样c 样A 标=K 标b 标c 标因为入射光的波长，溶液性质和温度以及比色杯的厚度都一样，即：K 样=K 标 b 样=b 标所以：A 样/ A 标= c 样/ c 标得：c 样= c 标×A 样/ A 标2． 利用标准曲线进行计算：3． 偏离Lambert-Beer 定律的原因1） 由于非但色光引起的偏离。2） 由于溶液本身原因引起的偏离：① 由于介质不均匀引起的偏离② 由于溶液中化学反应引起的偏离三：实验：CuSO4 浓度的测定C 标= 比色波长=650nm比色结果： A 标= A 样=计算：C 样=C 标*A 样/A 标

超微量分光光度计是一种用于测量样品在特定波长下吸光度的仪器，通常用于生物化学分析、核酸和蛋白质浓度测定等。以下是超微量分光光度计的简易操作步骤： 超微量分光光度计的操作步骤 准备工作 确保仪器处于开机状态，预热时间通常为15-30分钟。 检查光源是否正常工作，确保没有故障指示灯亮起。 校准仪器 使用空白溶液（通常是缓冲液或水）进行零点校准。 将空白样品放置在测量平台上，按下“校准”或“零点”按钮，完成校准。 准备样品 准备待测样品，通常使用微量样品（如1-2μL）。 确保样品均匀且无气泡，以免影响测量结果。 样品测量 将样品滴加到测量池中，确保填充均匀。 合上测量池的盖子，避免外界光线干扰。 按下“测量”按钮，读取吸光度值。 记录数据 记录测量结果，包括吸光度和对应的波长。 根据需要，可以进行多次测量以确保数据的可靠性。 清洁仪器 测量完成后，及时用适当的溶剂清洁测量池，避免交叉污染。 关闭仪器并妥善存放。 注意事项 在操作过程中，确保双手干燥，避免样品污染。 使用的样品和溶剂应与仪器材料兼容，防止腐蚀或损坏。 定期对仪器进行维护和校准，以保持测量精度。 通过以上步骤，你可以顺利地使用超微量分光光度计进行样品分析。

752型分光光度计为紫外光栅分光光度计，测定波长200nm～800nm。 1.结构原理 752型分光光度计由光源室、单色器、样品室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等 部件组成，仪器的工作原理如图1所示。 仪器内部光路系统如图2所示。 从钨灯或氢灯发出的连续辐射经滤色片选择聚光镜聚光后投向单色器进狭缝，此狭缝正好位 于聚光镜及单色器内准直镜的焦平面上，因此进入单色器的复合光通过平面反射镜反射及准 直镜变成平行光射向色散光栅。光栅将入射的复合光通过衍射作用形成按照一定顺序均匀排 列的连续单色光谱，此时单色光谱重新返回到准直镜，然后通过聚光原理成像在出射狭缝上 。出射狭缝选出指定带宽的单色光通过聚光镜落在试样室被测样品中心，样品吸收后透射的 光经光门射向光电管阴极面。根据光电效应原理，会产生一股微弱的光电流。此光电流经电 流放大器放大，送到数字显示器，测出透光率或吸光度，或通过对数放大器实现对数转换， 显示出被测样品的浓度C值。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=91635]752型分光光度计结构原理及使用方法.doc[/url]

一、仪器的自动化程度大大提高　　 世界上第一台紫外可见分光光度计仪器，是由美国的Beckman公司于1945年推出，随着科学技术的发展，紫外可见分光光度计仪器得到了飞速发展。自动化程度大大提高。特别是计算机及其计算机软件更是日新月异。许多高档紫外可见分光光度计，如美国的Cary6000、Lambda900、国产的TU—1901等紫外可见分光光度计，一开机仪器就进行全方位的自检。如果自检时发现何处有故障，则会在显示屏上，一目了然地告诉使用者。使用者也能通过计算机查寻排除故障。　　 有些仪器带有数据处理软件包，可自动进行数据处理并大大增加了使用者所需要的信息量。有些仪器备有自诊断软件，使用者可以通过计算机方便地解决使用中出现的各种故障。　　 二、重视适用附件的开发　　 紫外可见分光光度计附件的发展已成为紫外可见分光光度计发展的主要内容之一，如P—E公司的Lambda系列、Varian公司的Cary系列、岛津公司的UV—2550系列，北京普析通用公司的TU—19系列等紫外可见分光光度计，都带有15种以上的附件，如积分球、蠕动泵进样、长样品池架、试管架、镜面反射附件、微量样品池架、帕尔贴恒温附件、短光程样品池架、长样品池架、恒温池架、超微量样品池架、固体样品池架、浸人式光纤探测装置、反射式光纤探测装置、品种繁多的微量池等，这些附件大大方便了用户。　　 三、仪器向小型化(或微型化)、数字化、便携式的方向发展　　 由于环境、野外、海洋深水现场分析测试等的需要，开发小型化、便携式仪器是一个趋势。目前，国际上已有好多制造商正在研究开发适合于各种不同使用对象的小型紫外可见分光光度计。其中比较典型的代表有：美国的海洋公司(OceanOptics)前几年推出了PC2000型卡式光度计可插入PC机内工作。2001午又推出了USB接口的USB2000微型光度计，只有200g，采用2048位元的CCD检测器，最快积分时间只有o．003s。最近又推出HR2000型高分辨率光纤光度计，将最高分辨率提高到了o．035nm。但美国的海洋公司卡式光度计等只适用于可见光区域使用。

[font=微软雅黑]可见分光光度计（又名可见光度计、分光光度计）是可见光分光光度法是采用新型单片机技术，开发出能够进行定量测量（标准曲线测量，可对物质进行浓度直读）；OD值直接测量（吸光度、透过率和能量等直读）；动力学测试（测出物质浓度随时间变化OD值的变化）；光谱扫描（可以对某一种物质进行全波段扫描，分析物质的特征波长，判断实验过程的误差）；多波长测试（可以对物质同时进行多个波长的测试，分析物质的相关特性）；还有可以进行DNA蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等。[/font][font=微软雅黑][/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]波长范围[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右，紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样，紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。[/font][font=微软雅黑][/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]光源不同[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源，同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样，紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。[/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]光学器件不同[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用石英光学部件。同时由于这个原因，在比色皿的选择上也就有不同了，可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿，而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。[/font][font=微软雅黑][/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]接收器不同[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]由于紫外可见分光光度计多了紫外波，所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能，这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。[/font]