流式细胞术分析

生命科学的研究已进入了细胞组学的研究，科学家们渴求探究细胞深层次和综合性信息，既提供细胞群体的群体信息，也关注个体细胞的差异，既能看到细胞表型的特点，更能研究细胞的功能，但目前的流式细胞技术已无法满足科学家们的应用需求。Merck Millipore公司2012年推出的FlowSight多维全景流式细胞仪第一次实现了从群体到个体，从表型到功能的综合细胞分析，引领流式细胞技术进入了崭新的时代。 FlowSight是下一代专家级流式细胞仪FlowSight是一款体积小巧，但是功能强大的下一代专家级流式细胞仪。该系统革命性地设计提高了信噪比以及荧光检测的灵敏度。标配12个检测通道，除了传统荧光强度信息，还能获得&ldquo 每个细胞&rdquo 的明场、暗场以及10个荧光图像。FlowSight可以最多配置四根激光管（405, 488, 561, 642 nm），并加配785nm激光器专用于SSC信号检测，同时还可配置96孔板自动上样系统（AutoSampler）。FlowSight具有低于10MESF的超高检测灵敏度，特别对于弱信号的检测，有明显的优势。 FlowSight突破传统流式局限，实现圈门不再靠猜FlowSight与其他传统流式细胞仪不同之处在于它带来了每个细胞的真实图像。对于每个细胞，它能够生成12张图片。所获得的图片能够鉴别来自细胞质、细胞膜和细胞核的荧光。您只需点击散点图中的每个点或直方图中的每个点，即可查看与之对应的细胞图片。因此使用者再也不用靠猜测来判断设门是否准确。在FlowSight中，设门后，使用者可以通过观察所设门内外的细胞图片来确认设门是否准确。 FlowSight拓展了流式细胞技术的应用范围，获得前所未有的深入的细胞信息1. 细胞周期细化分析FlowSight可以将细胞周期分析和有丝分裂细胞分析结合起来。如下图所示，研究人员利用FlowSight对THP-1细胞周期进行分析（如下图左图所示），通过观察每个时期的细胞图片，FlowSight不仅可以分析细胞的G0/G1,S,G2/M期，还可将M期细分为分裂前期，中期，晚期，末期，获得最全面的细胞周期数据。 2. 八色免疫分型免疫分型通常用来鉴别血细胞亚群。FlowSight最多能够同时检测10色荧光，最大程度地满足研究者的实验需求。在这个例子中，研究人员用抗CD45, CD14, CD16, CD19, CD3, CD4和 CD123的抗体以及DAPI染料对细胞进行标记。通过一系列设门分析，他们鉴别了以下细胞类群： (A) CD3+ T细胞, CD4+ 辅助T细胞 (B) CD16+ 粒细胞 (C) CD19+ B 细胞 (D) CD14+ 单核细胞 (E) CD123+ pDC/嗜碱性粒细胞. 3．NFkB核转位研究NF-&kappa &beta 作为一种广泛存在的转录因子，被激活由胞浆转入胞核，从而参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡、肿瘤发生等。可以将细胞核和NF-&kappa &beta 分别用DAPI和FITC染色，FlowSight可观察每个细胞是否发生 NF-&kappa &beta 核转位，并量化分析NFkB核转位程度以及发生核转位细胞的比例。FlowSight革命性地光路设计，实现独特应用FlowSight系统平台也是由液流系统，光学系统和电子系统等三大部分组成。液流系统将样本细胞悬液和系统鞘液注入流动室中，使细胞在鞘液流的约束下聚焦在液流的中心，逐个流过检测窗口。光学系统中光源照射通过检测窗口的细胞，从而产生光信号。光源分为两种，其一用于产生明场细胞图像，另一种是用于产生荧光细胞图像的激光器。光源照射细胞产生的光信号被大数值孔径的物镜收集，然后通过光路系统传递到由二向色镜构成的滤光片堆栈（Dichroic Filter Stack）。光信号在这里被分成不同波段投射到TDI CCD的相应检测通道上，产生一个明场细胞图像，一个暗场细胞图像（Side Scatter，SSC）及至多10个不同荧光通道的细胞图像。FlowSight的光路系统能够自动调整焦距，并实时测定细胞运动速度，而其采用高端航空遥拍CCD进行信号采集，信噪比比PMT提高10-20倍，上述这些手段保证了系统采集到的细胞图像的质量和荧光信号的灵敏度。 综上，FlowSight多维全景流式细胞仪，采用革命性的技术，解决了传统流式细胞仪无法获得细胞个体信息的局限，真正让流式细胞仪睁开了&ldquo 眼睛&rdquo ，不仅可以对大量细胞进行统计学分析，而且还能观察细胞形态，极大地拓展了传统流式细胞仪的应用。虽然FlowSight是在2011年推出的，但是Amnis公司的下一代流式技术已经非常成熟，全球装机已经超过200台，超过300篇文献发表，其中大量Nature、Science和Blood等高水平文章。

InvitrogenTM AttuneTM NxT，快速且不堵的流式细胞仪！突破传统流式50年技术瓶颈，创新的声波聚焦技术助力流式新发现！Invitrogen Attune NxT流式细胞仪是一款全新的台式流式细胞分析仪，采用创新的声波聚焦技术，在保证高精确度的同时可以10倍极速上样；仪器配置灵活，最高可达4激光14色，可满足各种实验方案和实验室预算要求。Attune NxT流式细胞仪具有以下优势：专利声波聚焦技术，实现极速精准上样；专业防堵塞，大细胞、粘细胞轻松上；稀有细胞超灵敏高通量分析，全血样本免洗免裂解；顶级平顶光斑激光器，无需调光路；配置可达4激光16参数，模块化设计，可现场升级；可配备自动化工作站，实现24小时无人值守上样。什么是声波聚焦？Attune NxT流式细胞仪采用超声波 (超过2 MHz) 和流体动力学双重聚焦模式，将样本细胞沿液流的中心轴汇聚成一条直线。声波聚焦基本不受进样速率的影响，这使细胞能够强聚焦于激光检测点，与样本-鞘液的比率无关，所以可以在极高的样本通量下实现高精度分析。此外，Attune NxT利用注射泵进样系统进行上样，无需绝对计数微球即可实现细胞绝对计数——可最大程度地降低成本，缩短样本制备时间。相比之下，采用单纯流体动力学聚焦的流式细胞仪最高进样速度受限，而且提高流速会增大样本核心流的宽度、细胞重合率升高，使得检测信号的CV值变大。稀释样本，但不影响数据质量裂解红细胞 (RBC) 会造成待测细胞的损失和损伤。极高的样本采集速率（高达1,000 μL/分钟）使得Attune NxT流式细胞仪能够提供免洗免裂解的实验方案，最大程度地避免细胞损失，简化样本制备过程。该特性尤其适用于那些浓度较低的样本，诸如海水、脑脊液 (CSF)、干细胞及细胞数量较少的稀释样本，这些样品分析的采集时间通常较长。采用Attune NxT流式细胞仪，即便是稀释样本，亦可快速采集，且不影响数据质量。可以对诸如小鼠血液和骨髓等难以采集的样本、细针抽吸样本或低细胞产量的样本直接进行荧光标记然后稀释上样，无需洗涤或进行红细胞裂解。在高样本采集速率下可轻松实现采集——您可在四分钟内运行至多4 mL样本。这种样本制备过程不会造成样本损失，且可对所有珍贵样本进行全面检测。快速检测稀有细胞少量细胞群体的分析需要多次采集才能获得准确且值得信赖的结果，这导致其采集时间较长。Attune NxT流式细胞仪的样本运行速率比其他流式细胞仪快10倍——高达1,000 μL/分钟，每次运行能采集2 x 107个细胞，可以快速且准确地检测稀有细胞，且不影响数据质量。在各种进样速率下保证同样的精度和灵敏度Attune NxT流式细胞仪可以在您需要时提供更高的灵敏度。即便是在1,000 μL/分钟的高进样速率下，您也可以维持精确的聚焦。声波聚焦提供的精确聚焦使研究人员能够获得更小的CV值，更好地检测弱荧光信号和背景，从而减少差异，改善信号分离效果 。最大程度地减小数据差异细胞周期分析是必须精确检测多个细胞群体之间的荧光强度差异的实例之一。采用Attune NxT流式细胞仪，不论样本进样速率如何变化，都可以最大程度地减小结果的差异。即使采用高流速上样，也可以获得相同的实验结果 。符合您的规格标准的软件Attune NxT软件采用直观且易于使用的界面，能提供强大的数据采集和分析功能。您可以方便地建立、自定义并保存实验供将来研究之用。自动进行补偿，并可根据补偿指南进行设置。分析软件为数据分析效率最大化设计，其对较大的数据组的刷新速度快 (高达2,000万次/样本)，当您作出调整时，能够立即显示于数据曲线上。软件采用独特的工具简化了实验设置，包括利用滤光片配置管理器进行试剂选择。您可以从预置或定制试剂下拉菜单中选择试剂，根据仪器上的优化通道匹配适当的试剂，然后应用于曲线标志。服务与支持Attune NxT流式细胞仪可享受全球技术支持和服务项目。我们致力于提供个性化的服务，自从您向我们的销售代表购买Attune NxT仪器之日起，仪器可终生享受服务。Attune NxT流式细胞仪可享受一年的全面服务计划，包括：? 综合培训 (每台仪器2位用户)? 应用和分析支持? 全球技术服务? 预防性维护应用领域 ? 癌症 ? 免疫学? 侧群细胞分析 ? 人类间充质干细胞 ? 细胞周期分析 ? 细胞增殖 ? 免疫分型 ? 海洋样品分析 ? 微生物学? 植物研究 ? 磷酸化蛋白检测

NovoCyte系列流式细胞仪是安捷伦生物推出的新一代个性化的智能流式细胞分析系统。NovoCyte系列流式细胞仪采用了业界最新技术及模块化设计思路，满足用户多样化需求，配置灵活，升级自如。NovoCyte系列流式细胞仪集智能化与自动化于一身，提供高速、高分辨率、高精度及高灵敏度的检测。配套的中英文版本NovoExpress软件兼具自动化的数据采集及强大的数据分析功能。- 性能卓越——全部关键部件采用行业顶配；最高检测速度35000个细胞/秒- 智能简单——一键开关机无需人工值守；免调电压、快速补偿- 灵活配置——可定制的多个波长、功率可选激光器；可更换的插拔式滤光片；支持手动及多种自动上样方式；灵活的数据分析模块应用领域- 癌症/免疫学- 细胞生物学- 微生物学/水生生物学 - 植物学