细胞活力计

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应，也可测定细胞相对数和相对活力。

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验，而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。

CloneSelect单细胞分离系统（CloneSelect Single Cell Printer）采用类似喷墨打印的技术，柔和地产生包裹细胞的液滴无接触地直接分配到微孔板中（图1）。同时，该系统借助智能图像分析，确认细胞数目，分析细胞的形态（大小和圆度）及荧光强度，联动的真空装置将不符合要求的液滴（如空液滴或者含多个细胞的液滴）直接吸走，而符合要求的细胞液滴则分配至微孔板，从而实现对单个细胞的分选和接种。单细胞分离系统是一种可比移液器操作的柔和的单细胞分离技术，而流式分选由于高的液体剪切力和电压的影响，会降低敏感细胞和部分受损细胞（如电转后的细胞）的成克隆率，因此单细胞分离系统更适用于基因工程细胞的克隆，维持细胞活力，并提供直接的单克隆性图像证据。

下载《实时活细胞分析开启免疫细胞杀伤实验新格局》，了解更多免疫细胞杀伤的实时动态分析策略。Incucyte® 位于细胞培养箱内，可以长时程自动采集相差和荧光图片，实时观察并全自动分析肿瘤细胞杀伤和免疫细胞与肿瘤细胞之间的相互作用，配合Cell-By-Cell软件模块可以自动地完成图片的定量分析，直接测定肿瘤细胞的死亡及活力。

细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。

在当代生物学与医学的研究中，对单个细胞的分离一直有着很高的需求。然而传统手段往往需要将大量细胞悬浮后进行分选接种。这类方法不仅费时费力，而且细胞活力也会受到影响。本篇报道中Guillaume 使用FluidFM BOT 建立了一种非常简易、快速的新手段。

流式细胞术作为当代最先进的细胞定量分析技术之一，其工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数。默克密理博旗下Guava微毛细管细胞分析平台系列，可在短时间内迅速完成上百个样本的检测；在精确完成细胞活力计数的同时，还可实现细胞凋亡检测、分期；抗体工程细胞株的高效筛选；单抗生物学活性如EC50、ED50指标测定等功能。在高通量检测的基础上，维护成本几乎为零，大大提高了企业的生产效率，降低了生产风险。为高端现代化企业研发、生产、质控提供了全套解决方案！

本研究旨在评价骨髓间充质干细胞在低氧光感受器和实验性视网膜脱离中的保护作用和机制。对缺氧的小鼠感光细胞661w 细胞和与骨髓间充质干细胞共培养的细胞的形态、活力、凋亡和自噬进行了分析。在视网膜脱离模型中，植入骨髓间充质干细胞，观察视网膜形态、外核层(ONL)厚度、视紫红质表达以及视网膜细胞凋亡和自噬。缺氧诱导661w 细胞凋亡明显增加，自噬水平升高，并在缺氧后8 小时达到峰值。与骨髓间充质干细胞共培养后，缺氧状态下的661w 细胞形态较好，凋亡较少。自噬被抑制后，在缺氧条件下凋亡的661w 细胞增加，细胞活力降低。骨髓间充质干细胞处理的视网膜移植后，细胞凋亡显著减少，视网膜自噬被激活。早期自噬增加可促进661w 细胞在低氧胁迫下的存活。与骨髓间充质干细胞共培养可以保护661w 细胞免受缺氧损伤，这可能是由于自噬激活。在视网膜脱离模型中，骨髓间充质干细胞移植可以显著降低光感受器细胞的死亡并保持视网膜结构。骨髓间充质干细胞减少视网膜细胞凋亡和在移植后不久启动自噬的能力可能有助于视网膜脱离后视网膜细胞在低氧和营养限制环境下的生存。

细胞表型是涉及基因和蛋白表达的多个细胞过程的集合体，这些过程导致细胞特定的形态和功能。细胞表型检测主要类型有：细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭、活力、信号通路及屏障功能等。

Omni新一代活细胞自动化实时成像系统，能够帮助研究者在培养箱内获得前所未有清晰度的延时影像，去更好地了解细胞动态生长过程。通过自动高质量地捕获样本在明场/荧光下的图像，它能够在培养箱环境中连续地对多孔板中的活细胞进行成像。这将赋予您了解细胞动态生理、追踪其活力以及功能的全新技能。并且灵活性很高，可以快速扫描所有类型的细胞培养皿、培养瓶、微孔板等，同时能通过功能强大而直观的软件迅速提供可靠的分析结果。

干细胞研究的进展对于对抗疾病，尤其是癌症治疗具有重要意义。胚胎干细胞的复苏过程需要特别小心，以确保细胞活力和维持其未分化状态。二氧化碳培养箱的应用是确保细胞在从冷冻状态恢复到生长状态时能够在一个稳定且适宜的环境中进行。

Molecular Devices公司最新推出的SpectraMax.MiniMax.300，其标配有一个白色透射光通道和两个荧光检测通道。其专利的免染料标记的细胞检测技术，可通过其白色透射光通道对微孔板内没有标记的细胞进行精确计数，帮助分析细胞增殖、分化和化合物对细胞的毒性影响等情况。其标配的两个荧光通道大大提高了此仪器的检测范围，包括检测细胞增殖、转染效率、细胞活力/细胞凋亡、细胞分化或者细胞周期。

菌种是微生物培养的前提条件。优良的菌种，是微生物高效培养的前提。无论是摇床培养还是发酵培养，优良的菌种对培养的效果都有至关重要的意义。微生物在生长过程会经历迟缓期 、对数生长期、稳定期和衰亡期。微生物在培养和传代过程中会发生变异，次生产物，细胞活力变化等。

种子活力是种子发芽和出苗率、幼苗生长的潜势、植株抗逆能力和生产潜力的总和，是种子品质的重要指标。种子活力与后期出苗率、产量、抗逆性等息息相关，同时种子活力检测也是种质资源研究与保护的重点环节。微波是一种电磁波，能引起水、蛋白质、核苷酸等分子转动。2.45GHz是工业、科学、医学无线电频带，几乎所有的WiFi和无线消费电子产品都使用该微波频率。种子在保存、萌发等阶段不可避免地会接触到微波。研究表明，一定强度的微波辐照可提高种子萌发特性，增强其耐盐碱性，但超出一定范围的微波处理，则会降低种子发芽势与发芽率，破坏种子的细胞结构等。

介绍：CyBi-SELMA（CyBio品牌，德国耶拿公司）半自动移液工作站以其体积小、操作界面友好、兼容96或384孔板的特点，在低通量液体处理操作中非常适用。由于便于放入组织培养生物安全柜中，此设备非常适合在基于细胞的研究实验中应用，例如培养基更换、化合物浓度梯度筛选。iPSC制备的心肌细胞（iCell Cardiomyocytes）被《科学家》网站评选为2010年度生命科学领域的十大创新产品。位于美国威斯康星州麦迪逊市的Cellular Dynamics International (CDI)公司的研究人员将人类纤维细胞诱导生成多功能干细胞(iPSC)后，进一步对iPSC细胞进行重编程获得了人类心肌细胞产品iCell Cardiomyocytes，该细胞显示了活的心脏典型的电生理特征。这是目前第一个商业化的人类干细胞分化细胞系。iCell Cardiomyocytes为研究人员提供了最方便的细胞类型进行相关的特异性研究。此产品的主要目的是用于药物发现。药物毒性是药物研发中的一个严重问题，是药物退出市场的第二大原因。如何使药物更安全，甚至保全生命，是药物研发领域的很大机遇。 Chris Kendrick-Parker还介绍说，CDI公司每天都会制造、销售出数十亿的心肌细胞产品，在全球顶尖的20家制药公司中已经有一半的公司都成为了CDI公司的客户。这类人心肌细胞具有广泛用途，包括用于药物活性成分的心脏毒性研究。这种检测中的移液操作包括梯度稀释、化合物添加、细胞液添加，都是乏味、耗时，并且受到不同操作者在技术水平、准确度、重现性差异的影响。本实验采用Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell ViabilityAssay(CellTiter-Glo® 发光法细胞活力检测试剂盒)。是通过对ATP 进行定量测定来检测培养物中活细胞数目的一种均质检测方法。ATP是活细胞新陈代谢的一个指标。CellTiter-Glo® 检测试剂盒为多孔板而设计，是进行自动化高通量筛选(HTS)、细胞增殖和毒性分析的理想选择。均质检测步骤就是将单一试剂(CellTiter-Glo® 试剂) 直接加入含有血清的培养细胞中，无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。在384 孔板上，加入试剂并混合后，10分钟内，该系统可检测到的每个孔内的细胞数最低为15 个。CyBi-SELMA用于一系列化合物的心脏毒性研究实验。对于SELMA自动化设备相比人工移液的操作友好性、快速、数据一致性进行评估。

Cellarium（A Live-Cell Microarray for High-Throughput Observation of Metabolic Biosignatures） 技术是以NIH NHGRI（National Human Genome Research Institute）CEGS（Center of Excellence in Genomic Sciences）Microscale Life Sciences Center开发的技术衍生出来的，隶属于上述NIH LINCS项目的一部分。这种技术通过单细胞代谢分析，致力于开发单细胞水平的药物特性的代谢图谱。The LINCS Tech U01 可以支持新一代高通量系统的发展并将数据储存到LINCS数据库中。利用ImageXpress? Micro 高内涵分析系统可实现快速的高分辨率图像采集，以得到单细胞水平上反应细胞各种生物特征的数据分析和处理。在美国NIH LINCS项目中，利用高内涵成像分析技术平台可获得单个细胞水平的各种生物学特征，如固定细胞中蛋白的免疫检测、活细胞凋亡图像分析、蛋白激酶生化分析以及细胞活力相关的生理参数，为研究者和临床诊断医生探测单细胞个体分析和如何用药提供了一个独特的工具。特点：?得到单细胞水平上反映细胞生理功能的各种细胞内特征的海量数据。?采用免洗一步染料标记法，操作简单、实时检测、 结果准确。?使用高通量/高内涵检测的方法，获得海量数据，进行大数据比对分析，建立网络集成式细胞内特征的公共数据库，为人类对疾病的了解、新药研发及个性化治疗提供有力的数据支撑和手段。

T细胞受体(TCR)和免疫球蛋白一样，是由多个基因片段的基因重组产生的。这种重组产生了大量的T细胞，每一个都针对一种独特的多肽抗原 (peptide antigen)。T细胞对病毒、细菌、肿瘤细胞以及来自正常组织的多肽（在自身免疫性疾病中）有反应。每个多肽的特异性只在循环T细胞的一小部分中被发现，这使得抗原特异性反应的研究变得困难。MACSQuant® 流式细胞分析仪预富集后分析流程将目的稀有细胞以抗体磁珠标记，再对其他分析标记物进行不同多色荧光标记(Sample treatment)，直接上样流式细胞仪(Load sample)。先使用预富集模块功能，在内建的磁力柱上富集目的稀有细胞 (MACS enrichment)，随后进行细胞分析(Flow analysis)，不因过多操作流程而损失细胞，同时获得更多分析数据。

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA试剂盒人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)抗原、生物素化的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)检测试剂盒人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)抗原、生物素化的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人红细胞刺激因子(ESF)检测试剂盒人红细胞刺激因子(ESF)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人红细胞刺激因子(ESF)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人红细胞刺激因子(ESF)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人红细胞刺激因子(ESF)抗原、生物素化的人红细胞刺激因子(ESF)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人红细胞刺激因子(ESF)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

干细胞移植对于白血病等多种疾病的治疗具有重要意义，而准确的干细胞绝对计数对于干细胞移植的成败又十分重要。流式细胞仪结合荧光单抗计数为干细胞绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法。细胞表型是细胞基本生物学性质之一。在细胞生物学的研究中，细胞表型反应出细胞群均质程度、细胞生物学功能、细胞分化程度、细胞衰老程度，是细胞产品的最为重要的质量标准。流式细胞术是检测细胞表型的通用技术。

IPHASE/汇智和源全新升级T淋巴细胞增殖试剂盒，为T淋巴细胞（CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞）体外刺激增殖提供简单、高效、便于操作的方法。从单细胞悬液中免疫分选出的高纯度淋巴细胞亚群在体外经信号分子特异性刺激，即可模拟体内淋巴细胞增殖过程，获得数量足够多的淋巴细胞，供细胞免疫研究领域后期使用。

在细胞功能研究实验及细胞镜检方面，ibidi是全球领先的相关产品供应商。ibidi在细胞显微成像领域做出了重大突破，开创了世界最前沿的细胞镜检解决方案。2013年3月，ibidi因此被授予久负盛名的"德国经济创新奖"。公司产品囊括范围较广，即可实现传统细胞培养，也可完成复杂的细胞实验（包括血管生成、细胞趋化、伤口愈合及细胞灌流等实验）。

人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)抗原、生物素化的人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)检测试剂盒人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)抗原、生物素化的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

细胞趋化性（Chemotaxis，亦被称为化学趋向性）是趋向性的一种，指细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。趋化性对细胞的发展和其他正常功能一样不可或缺。

在悬浮细胞的培养过程中，根据整体细胞生长分裂的状况可以将整个细胞培养周期分为四个时期：潜伏期、对数生长期、稳定期、衰亡期。进入对数生长期的时候是细胞分裂最旺盛的时候，细胞活性也是最高，随着分裂次数的增加，细胞代谢产物增加，细胞密度增大，到了对数生长期后期有一小部分细胞会出现凋亡的迹象。

Namocell可以提供极少量细胞的快速单细胞分离处理，即使只有100个细胞的起始量，单细胞分离的得率都高达80%以上。

近几年来，3D（three dimensional）细胞培养系统开始成为生物学研究新的研究方法。使用3D系统培养系统能更好的模拟生物体内的真实生理环境，而2D（传统的贴壁培养）细胞培养系统不能有效的模拟细胞在生物体内的生理环境。3D细胞技术有很多种方法，使用多细胞形成的细胞团是其中主要的研究应用之一。细胞团是微小的细胞聚集簇，可以用来研究3D情况下向外生长的情况（细胞出芽）。

人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)抗原、生物素化的人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度