稀释移液器

浅析实验实移液器的检测与校准　　在使用移液器之前，为了数据的准确性，必须对其气密性和量程的准确性进行检测，具体操作如下：　　(一)气密性检测　　移液器吸满液体后，手持垂直放置15s，检查吸嘴的尖头有无液滴，如有，则说明漏气。　　(二)准确性检测　　1)量程小于1ul，建议使用分光光度法检测。将移液器调至目标体积，然后移取染料溶液，加入一定体积的蒸馏水中，测定溶液的稀释度(334nm或340nm)，重复几次，计算移液器的精确度。　　2)量程大于l／ul，可以用称重法检测。通过对水的称重，转换成体积(体积＝质量／密度)，鉴别移液器的准确性。由于水的密度是随着温度变化而变化，且称量天平本身精确度不符合检测要求，检测又大多在一个开放式空间内操作，偏差在所难免。因而，此种称量法只能现场粗略地判断移液器的准确性，进一步的校准必须在专业的实验室操作进行。　　注意：称重法实验室必备条件是高度灵敏的分析天平(定期校准)、双蒸水和称量容器。水、移液器和吸嘴必须具有相同的温度(20℃时水的密度为0.09982)。

移液器的精确度一般使用纯水及天平称量的方法来检验。因此我们推荐使用正向移液技术移取水性溶液，如缓冲液，稀释酸或碱。当吸取不同液体时，由于由于不同液体的物性有所不同，因此可能会影响移液器的量程，从而造成不精确的表现。比如 一些生物溶液，粘度较高的化学溶剂，胶水等粘度较高液体的移液，可能会在移液器尖端或试管中产生气泡或泡沫，这将使移液量产生偏差。并且有可能对移液器造成不好的反应，从而对移液器有所损坏。在这种情况下，我们推荐使用反向移液技术移取高粘度或者容易产生泡沫的液体。反向移液技术能够减少喷溅，泡沫和气泡形成。这种方法尤其应用在小剂量的溶液方面，能够更突出的表现出来。http://www.lab55.cn/UpLoad/201112/2011122253328325.jpg 下面先介绍一下正向移液和反向移液技术的操作。http://www.bio-equip.com/imgatl/201181213141.gif1.将移液器的按钮压至第一停点。深度可根据所要吸取的液体容量来控制，这主要根据平时使用情况而定。2.将移液器吸头浸入液面下1cm处，缓慢释放移液器按钮使其滑回原位，从而移取相当容量的溶液。将吸头从液体中移出，接触容器边缘除去多余的液体。3.排液时，吸头紧贴容器壁先轻按按钮至第一停点，略作停顿后，将按钮按至第二停点（这个操作会将吸头内的液体彻底排尽），将吸头从容器中沿容器壁移出。4.松开按钮至准备位置。http://www.bio-equip.com/imgatl/201181213573.gif1.将按钮压至第二停点。2.将吸头浸入液面1cm处，缓慢释放按钮使其滑回原位。这将时液体充满吸头。将吸头从液体中取出，接触容器边缘去掉多余液体。3.放液到接收容器时平稳地轻按按钮至第一停点。保持在这个位置。一些液体会残留在吸头中不能被放出。4.残留在吸头内的液体能够被吹回原溶剂中或者同吸头一起丢弃。5.松开按钮到准备位置。 移液的精确程度跟操作人员所使用的移液器有一定的关系，移液器在操作的过程中的可操控程度也是影响移液精准的很大因素 而移液器操作的可控程度是与移液器空腔内的摩擦力有关的，这也是为什么我们有的移液器会很涩，有的移液器按钮按下去会很轻便的区别，摩擦力大的移液器在操作过程中会造出按下去的力加大，如果使用的时间长或者频率很快的话会对拇指造成很大的反向力，从而有得职业病的风险。而移液器的长短则会决定使用者的使用便利问题，过长的移液器再配合吸管以后，取液必定会很不方便，需要使用者伸长胳膊或移动较大距离，当然也不是越短的移液器就越好，移液器身长越短他体内空腔就越短，这样就会造成移液的过程中由于动力不足而取液不够不精准等问题，因此移液器的长短能否符合人体工学，是一个很重要的参数，也是决定一个移液器好坏的因素。大家有什么好的移液器来介绍介绍撒

现在我把移液器的比较突出的知识和问题给他家说一下 移液器的相关知识1 移液器的放蒸发阱防蒸发阱，其实就是一种防蒸发装置，其原理就是在移液器校准的真正空间里，保持一定的湿度，从而减小由移液器内排出液体的蒸发带来的对测量结果的影响。对于这种防蒸发装置，很多实验室多自己制作，当然也有实验去购买现成的。因此，对于防蒸发阱的日常维护，很简单，可以用自来水冲洗、或者用无尘布擦拭、或者粘取液体，比如蒸馏水、酒精的进行擦拭即可，但具体应根据你所使用的防蒸发阱的材质来决定，以免对其表面造成损伤，影响美观！ 每次清洗后的防蒸发阱擦拭干净后，放置在天平上，注入液体后，去皮，就是使天平归零，既可以开始测试！ 对于防蒸发阱的建议： 如上面所说，防蒸发阱是通过提高移液器校准空间内的空气相对湿度，来降低由移液器排出液体的蒸发，通常，用于微升级的移液器校准，对于大容量的移液器，如果环境不是十分干燥，其蒸发带来的影响十分有限，无需使用防蒸发阱。另，现在市场上的防蒸发阱，并没有附带湿度监测装置，也即是我们无法清楚知道防蒸发阱内空气的相对湿度到底是多少？根据国际上的要求，移液器校准环境的湿度应保持在50%Rph以上，但没有规定上限，而国内的移液器检定规程，对这一块并没有要求。但无论如何，防蒸发阱内的湿度到底是多少呢？因此，建议，如果对校准结果要求严格的话，应对防蒸发阱内的湿度进行连续的监控，至少应定期监控，以确保其内部的湿度符合要求。 此外，因移液器校准，对温度也有要求，这个温度，不是环境温度，而是移液器校准空间的温度，如果使用了防蒸发阱，则就是防蒸发阱内的温度，因此，必须对防蒸发阱内的温度进行监控，以确保其符合要求。 另，笔者还有一个疑问，如果防蒸发阱内的湿度过高，比如达到80%Rph以上，是否会对实验结果产生影响呢？因为温度过高，可能会对移液器排出的试剂产生稀释现象，但目前，无论是国内还是国际上，都没有这个要求，因此，就目前的实际情况看，对于防蒸发阱的清洗、维护可参考上述，对必须对其内部进行温湿度监控。2 移液器的校准为了得到较为准确、可信的校准结果，在进行移液器校准前，应注意以下几个细节问题！1 移液器校准前，应确认使用与其相配套的原装管嘴；2 开始校准前，应将应将移液器调节到最大量程，然后，在不吸入液体的情况下，压下、弹起容量调节扭数次（10次左右），以确保移液器活塞与腔体之间表面接触均匀；3 移液器及校准用标准物质，必须按照相关规程提前放入校准环境，以期移液器、标准物质和环境保持相同温度；4 移液器校准工作台，尤其是天平附近，不要有热源存在，如电脑排风口、白炽灯等；5 链接上管嘴后，应对管嘴进行浸润3-5次，以保证管嘴内壁表面与标准物质充分接触、浸润；6 取液时，应缓慢、匀速（尽量做到）弹起取液按钮，以保证液体平稳进入管嘴，避免吸入过多和液体溅入腔体；7 应快速将取液后的管嘴移入目标容器，以防止转移过程中，液体挥发；8 牌液时，可适当加快速度，以利用惯性，将液体尽可能完全排入目标容器