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物质光度计

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物质光度计相关的论坛

  • 区分紫外可见光度计与可见光度计的方法

    [b][b][color=#008000]设计原理[/color][color=#008000]:[/color][/b][/b]紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池,紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度,将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种:按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计;按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计;按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。[align=left]可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是采用新型单片机技术,开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试,分析物质的相关特性);还有可以进行DNA蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等。[/align] [b][color=#008000]波长范围[/color][/b]可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右,紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样,紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。[b][color=#008000]光源不同[/color][/b]可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。[b][b][color=#008000]光学器件不同[/color][/b][/b]由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件。同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。 [b][color=#008000]接收器不同[/color][/b]由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。

  • 【求助】请问怎么可以确定某种物质能否用紫外分光光度计测定?

    请问怎么可以确定某种物质能否用紫外分光光度计测定?我做的方向不要求有那么低的检测限,所以主要用紫外分光光度计做实验,但是在做这种物质之前,我怎么知道它可以用紫外测?例如壬基酚先谢谢了![color=#DC143C][size=4]斑竹zhouyuhu回答:[/size][/color]先配一个一定浓度的标准溶液,进行210-360之间的波长扫描,确定最大吸收,注意控制所配标准溶液的吸光度在0.5正负0.3左右最好,还要注意溶解你标准物质的溶剂,这一点也很重要,请参考一下别的帖子有介绍,最好直接在国家标准物质中心买现成的.然后在用光度模块绘制标准曲线,注意标准曲线的线性范围和相关系数等.一般相关系数大于3个9就可以,然后进行样品测定不知道楼住测什么组分,用什么仪器.其实这个不是最难的,最难的是如何设计样品前处理,因为在紫外区,干扰比较大,如何很有效的把目标组分提取出来,才是问题的关键,楼住的样品是什么?

  • 分光光度计的用途

    分光光度计的用途之一是鉴定物质。用来测量待测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计;紫外可见分光光度计用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,也可以测定细菌细胞密度。分光光度计的用途之二待测物质是标准物及标准图谱对照进行分析。分光光度计的用途之三是比较最大吸收波长吸收系数的一致性。分光光度计的用途之四是物质的纯度检验。分光光度计的用途之五是推测化合物的分子结构及构成。分光光度计的用途之六是判定络合物的组成及稳定常数的测定。

  • 光度计知识浅谈

    光度计是每个化学分析实验室必备的常用仪器设备之一,在各种定量和定性分析中得到了广泛的应用。    分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。 而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:   A=-log(I/I。)=-lgT=kLc   式中 :A 为吸收度;   I。为入射的单色光强度;   I 为透射的单色光强度;   T 为物质的透射比;   k 为吸收系数;   L 为被分析物质的光程   c 为物质的浓度    物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。    分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

  • 【资料】分光光度计简要介绍

    分光光度定义  分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。关系式  单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:   A=-log(I/I。)=-lgT=kLc   式中 :A 为吸收度;   I。为入射的单色光强度;   I 为透射的单色光强度;   T 为物质的透射比;   k 为吸收系数;   L 为被分析物质的光程   c 为物质的浓度   物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。 结构  分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

  • 可见分光光度计工作原理及与紫外分光光度计的区别

    [font=微软雅黑]可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是采用新型单片机技术,开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试,分析物质的相关特性);还有可以进行DNA蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等。[/font][font=微软雅黑][/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]波长范围[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右,紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样,紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。[/font][font=微软雅黑][/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]光源不同[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。[/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]光学器件不同[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件。同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。[/font][font=微软雅黑][/font][b][b][font=微软雅黑][color=#008000]接收器不同[/color][/font][/b][/b][font=微软雅黑]由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。[/font]

  • [求助]检定紫外可见分光光度计所用的标准物质

    从JJG 682-90双光束紫外可见分光光度计中,检定所使用的标准物质有:波长:4%氧化钬溶液、氧化钬滤光片或汞灯透射比:重铬酸钾溶液、石英吸收池、中性灰玻璃滤光片杂散光:碘化钠溶液分辩率:笨问题:这些标准物质是否需要校准?有没有相关的检定规程?在哪里可以做此类校准呢?

  • 【求助】荧光光度计的应用

    原子荧光分光光度计用于检测砷、汞等含量,那么,分子荧光光度计可检测什么具体的物质?比如:化妆品中的.....,或食品中的......

  • 分光光度计使用的外部环境要求

    分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。 所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:分光光度计属于精密仪器,应当妥善保管和精心维护,这样才能保证分光光度计长期使用、长期的稳定可靠、测量精度高。 在一定环境下维护分光光度计,具体如下: 1、环境温度在条件容许的情况下,尽量保持在15-30摄氏度之间,这样能保持电器件稳定工作,不易老化,使分光光度计不易损坏,灯源的使用寿命得到延长。若条件不容许,在高温的情况下,缩短开机时间,高效使用分光光度计,使电器件不要长期保持在高温下。在低温下,使预热时间比常温下的预热时间要长,这样能保证在仪器稳定的情况下进行测试。 2、环境湿度在条件容许的情况下,尽量保持在60%以下,这样能保证光度计内部的光学件和电器件不易受潮、腐蚀、和上霉。若条件不容许,在高湿度和低湿度的情况尽量保持通风。 3、环境在条件容许的情况下尽量保持洁净,打扫环境时动作不宜太大,不要扬起灰尘,打扫之前用防尘罩盖上分光光度计,不要让灰尘进入分光光度计内部。(选自网络)

  • 紫外可见分光光度计

    可见分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。 通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外可见分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。紫外可见分光光度计测的是分子在紫外光区的吸收强度,紫外可见分光光度计可用于大部分有色物质的定量监测,通常需要使用各种各样的显色剂。紫外可见分光光度计的常用参数: 紫外可见分光光度计的吸光度范围:-0.301-1.999A紫外可见分光光度计的波长范围:200-1000nm 浓度显示范围:0-1999波长准确度:±2nm 杂散光:≤0.5%T@220nm、360nm波长重复性:1nm 稳定性:±0.003A/小时光谱带宽:4nm 配有RS232通讯接口透射比准确度:±0.5%T 打印机:支持透射比重复性:0.2%T 应用软件:支持透射比范围:0.0-125%T

  • 分光光度计误差来源

    分光光度计是利用物质对光的选择性吸收的特性,以较纯的单色光作为入射光,测定物质对光的吸收,从而对物质进行定性或定量分析的仪器。在使用过程中常常会出现测量误差,这些误差又是如何产生的呢?一、仪器本身性能带来的误差1、复色光对比耳定律的偏离比耳定律成立的前提条件是入射光是单色光,但是精度再高的仪器,即使是双单色器的分光光度计,也只能获得近乎单色的光,无法获得纯单色光,它仍然含有狭窄光通带,具有复色光的性质。而复色光会导致比耳定律的正或负偏离。固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm,可调狭缝的可以做到0.1nm;可见分光光度计带宽6nm、snm,甚至十几纳米。光谱带宽应该是越小越好,但是随着光谱分辨率的提高,仪器的灵敏度降低,所以选择仪器时要综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时,可近似认为符合比耳定律。2、杂散光的影响杂散光是指进入检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分,它是光谱测量中误差的主要来源。产生原因有:分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处,由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低,杂散光的影响更为显著。杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差,实际工作中,在定量分析时,一般在吸收峰或其附近处测量样品吸光度,如果在分析波长处含有杂散光,这时样品的透光率较小,而杂散光大部分透过,使测量吸光度低于真实吸光度。3、仪器噪声对测t的影响仪器噪声也是仪器的一个重要指标,它表征仪器做稀溶液的能力。是叠加在待测量的分析信号中的不需要的信号,扫描100%T和0%T线,可观察到分光光度计的绝对噪声水平,如果仪器噪声较大,会掩盖较小的测量信号,一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。4、波长和吸光度准确度样品的每一个值都是在一定的波长下测得的,如果波长误差很大,测出的值肯定不准。吸光度准确度也是用户对仪器的直接要求,更应引起足够的重视。国家计量检定规程规定双光束紫外可见分光光度计透射比准确度为A级士0.6%, B级土1.0%。二、测量条件的选择1 参比溶液和溶剂的选择分光光度计的测量实际上是以通过参比池的光强度作为入射光强度来测定试样的吸光度,先调节仪器使透过参比池溶液的吸光度为零,然后让同一束光通过样品,使得吸光度比较真实地反映待测物质的浓度,所以参比溶液的选择非常重要。如果仅有待测物质与显色剂的反应产物有吸收,可用纯溶剂或蒸馏水作参比溶液。如果显色剂有颜色,并在测定波长下有吸收,则用显色剂溶液作参比溶液,所加人显色剂及其它试剂的量,与试样中的加入量应一致。如果样品中其它组分本身的颜色对测定有干扰,而所用显色剂没颜色,则用不加显色剂的样品溶液作参比液。正确选择合适的溶剂,对提高分析的准确度起重要作用。为减小溶剂中杂质的影响,应选择高纯度的溶剂;溶剂应不与待测物质发生化学反应;待测物在溶剂中要有一定的溶解度;在测定的波长范围内,溶剂本身没有吸收,注意常用溶剂的最短可用波长;当用挥发性大的溶剂时,测量过程中吸收池应加盖。2 测试波长的选择当用分光光度计对溶液进行测定时,首先需要选择合适的测量波长。选择的依据是该被测溶液的吸收曲线。在一般情况下,我们总是选择最大吸收波长作为测量波长,这样可以提高灵敏度。而在有些情况下最大吸收峰很尖锐、吸收过大或附近有干扰存在,就不能选最大吸收波长,而必须在保证有一定灵敏度的情况下,选择吸收曲线中的其它波长进行测定(曲线较平坦处对应的波长),以消除干扰。绘制吸收曲线是正确选择波长的有效手段和方法。

  • 分光光度计1

    分光光度计 一、概述 分光光度计是利用物质对光的选择吸收现象,进行物质的定性和定量分析的光电式分析仪器,也是一种光谱仪器。根据电磁辐射原理,不同的物质具有不同的选择吸收,也即具有不同的吸收光谱。通过对吸收光谱的分析可方便的判断物质的内部结构和化学组成。随着工业生产和科学技术的不断发展,以及人们对物质认识的不断深化,,迫切要求发展新的先进的分析技术和仪器,分光光度计就是在这种历史条件下问世和发展的。 分光光度计是分光仪器和光度计的一种组合。按工作光谱原理的不同,分光光度计可分为研究物质分子吸收光谱的分光光度计、研究物质中[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度计、研究物质分子荧光发射的荧光分光光度计和研究物质原子荧光发射的原子荧光分光光度汁、研究分子喇曼散射光谱的喇曼光谱仪等。由于分光光度法具有分析精度高、测量范围广、分析速度快、样品用量少等优点,分光光度计已成为探索自然、改造自然、发展科学技术和生产的强有力的工具,是现代化分析实验室必备的常规仪器之一。二、分光光度计的基本组成 分光光度计主要构成部分有光源部分、光度计部分、单色器和接受记录部分。分光光度计的主要组成部分可以用图1表示:光源 单色仪 样品池 接受放大系统 显示记录系统 图1 分光光度计框图下面分别叙述这几个部分的光学系统的特性。1光源系统分光光度计的光源系统由光源和照明系统组成。1.1光源 分光光度计中对光源有一定要求,理想的辐射光源应具备以下一些特性: (1)在所使用的被长范围内提供连续辐射,即光源应发射连 (2)辐射能量随波长的变化尽可能小,且有足够的强度。 (3)使用寿命较长。 (4)要有良好的稳定性,特别是对单光束仪器。 在190一360nm波长范围紫外波段,常用的光源是氢弧灯和氘弧灯,氘灯的紫外光发射强度比氢灯强。在360一2500nm波长范围可见和进红外波段,常用白炽钨灯作为光源。图2为氢灯、钨灯的光谱能量分布图。在2—50µ m波长的中远红外波段内,常用的光源是能斯脱和硅碳棒,其光谱能量分布如图3所示。另外,对于要求较低的仪器,灼热的金属丝(如镍铬丝)可以作为红外光源;而在远红外区高压汞灯也是一种常用的光源。 图2 光源能量分布 图3 红外辐射光源A-氢灯,B一钨灯,C一不同温度T的黑体辐射 A-能斯脱,B-硅碳棒1.2照明系统 光源系统的照明系统一般有两中:单光束照明系统和双光束照明系统。光源系统中的反射镜的作用是把光源发出的光线集中在单色器的入缝上,使整个狭缝照明均匀并充满单色器的孔径。在照明系统为单光束的仪器,只要求光源反射镜引入一个高通量的光束即可,对光源的成像质量要求不高。图4为一种单光束照明系统光路图。在双光束照明系统的分光光度计中,光源系统并不直接照明单色仪的狭缝,如图5所示。光度系统处于单色器和光源之间,而在光度系统中,有一个梳形减光楔,光源必须首先成像在减光楔上。减光楔通过光度系统要求清晰地成像在单色器的入缝上。 图4单光束照明系统 图5双光束照明系统2单色器系统单色器是分光光度计的核心部分,仪器的主要光学特性和工作特性基本上由单色器决定。它的作用是将光源发出的白光色散成各种波长的单色光,从出射狭缝中导出,照于样品上。分光光度计中的单色器是一个完整的色散系统,除了色散元件——棱镜或光栅外,还有入射和出射狭缝以及一组反射镜。根据工作光谱范围、色散率、分辨串等性能指标的要求,可分别选用棱镜或光栅分光的单色器,双联单色器,也可采用滤色片分光的单色器等。2.1虑光片滤光片是最简单、最廉价的单色装置。由于它的单色性不好,使测定精度大大受到限制。它的特性可以用最大透光波长(或称中心波长)和谱带半宽度(有效带宽)来表征。最大透光波长是指在此波长光源的辐射最强。有效带宽是指最大透光度值的一半处的谱带宽度。在分光光度计中,滤光片一般用来消除单色器的杂散光。滤光片可分为五种:中性滤光片,截止滤光片,通带滤光片,干涉滤光片以及校正滤光片(标准滤光片)。2.2单色器从波长范围宽广的光源辐射中分出波长单一的单色光的光学装置称为单色器。单色器是由入射狭绕、准直元件、色散元件(常用核能或光栅)、和出射狭绕组成。棱镜可以作为从紫外到中红外区的合适的色散元件。在紫外范围,常用的材料是硅、矾土和人造蓝宝石。矾土和人造蓝宝石能用于200到4000nm,但昂贵,所以常用熔融石英作棱镜材料。在可见范围,硅的色散次于光学玻璃,所以可见分光光度计常用廉价的光学玻璃作棱镜材科。玻璃和石英棱镜担色器的色散特性模式图见图6。为了便于比较,将显示线性色散的光栅单色器的色散特性也列在一起.图6 三种材料单色器的色散特性棱镜单色器的光谱纯度主要决定于棱镜的色散特性和光学设计。通常使用两种形式的棱镜单色器——本生(Bunsen)单色器和利特罗(Littrow)单色器。光栅是一种十分重要、应用范围很广的色散元件,可以用于紫外、可见、近红外范围的色散。光栅分透射光栅和反射光栅。透射光栅是在一块玻璃上或其它透明材料上刻一系列平行的和紧紧相靠的凹槽。生产这样的母光栅需要精密的装置,比较昂贵。复制光栅比较便宜,虽在性能上次于母光栅,但能满足应用。反射光栅是在复制光栅的表面上喷涂铝的薄膜制成的。也可在抛光的玻璃表面或金属表面镀铝,然后在铝表面上刻大量的平行线制成的。光栅的刻线越多,分辨率越高,每单位长度的刻线越多,它的色散就越大。闪耀波长是闪耀光栅的另一个重要的参数,在闪耀波长,光栅有最大能量输出。光栅的主要缺点是有次级光谱干扰分析,且杂散光的影响比棱镜更大,故常配虑光片以去除杂散光。棱镜的主要缺点是色散波长的非线性分布。光栅单色器有几种排列方式,通常用的一种是埃伯特(Ebert)式(图7),是埃伯特1889年发明的。它用一个球面镜准直和聚焦,并对称地放置两个狭缝,波长选择是通过旋转光栅实现的。后来采尼(Czerny)和特纳(Turner)对其进行了改进,用两个小的球面镜来代替大而昂贵的埃伯特球面镜(如图8),使得结构紧凑,后为现代仪器所常采用。图7 埃伯特衍射光栅单色器 图8采尼和特纳衍射光栅单色器入射和出射狭缝狭缝是单色器的重要组成部分之一,关系到分辨率的优劣。它是由具有很锐刀口的两片金属片精密加工制成的。刀口相互之间是严格平行的,并且是在相同的平面上。狭缝宽度有两种表示方法,一是用狭缝的两刀口之间的实际宽度表示,单位是毫米(mm);另一是用从单色器出来的有效带宽表示,单位是纳米(nm),通常用后者表示。3光度系统 紫外可见和近红外分光光度计的光度系统分为单光束和双光束两种。3.1单光束的光度系统单光束的光度系统简单,如图9所示。此系统在采用比较法测量样品的光谱透过率或反射率时,通常有两种方式:图9 单光束的光度系统方式1:在整个工作波段测定完标准后,再测样品,得出的结果进行比较。此方式的缺点:波长的重复性不高,这是由于两次测量标被及样品的时间间隔长,光源的不稳定,波长的重复性、接收系统的不稳定等因素造成的。方式2:在待测的每一波长处标准和样品依次快速地替换,分别进行测量,进行比较。此方式的优点是严格保持标准和样品完全相同的照明及测试条件,但却使样品和标准不断地处于运动状态,因此采用较小。现代的自动分光光度计多采用双光束法来实现比较测量。3.2双光束的光度系统双光束光度系统的显著的特点和最基本要求是保持光路对称。即两光路中的反射次数和相应的反射角、透射次数和相应透射面的曲率以及射入接收器的角度和照射面积等,尽量要求做到对称,并且光路应尽量缩短,光学零件也应尽量减少。图10所示是在紫外——可见和近红外分光光度计中常用的双光束光度系统。图10 紫外—可见和近红外分光光度计中常用的双光束光度系统红外分光光度计中光学系统的基本要求与紫外一可见分光光度计相同。但在光学平衡法测定中,应用减光器Wl改变参考光束的强度来实现零点平衡。为了校正仪器的100%透过率,在样品光路中设有减光器W2。图11为红外分光光度计的光度系统图。图11 对称式红外分光光度计光度系统

  • 可见分光光度计和紫外可见分光光度的区别

    可见分光光度计和紫外可见分光光度计为同一类型的仪器,都是属于分光光度计,但是其功能又存在区别。用来测量待测物质对可见光的吸光度,并进行定量分析的称为可见分光光度计;用来测量待测物质可见光或紫外光的吸收度,并进行定量分析的称为紫外可见分光光度计。     可见分光光度计和紫外可见分光光度的区别,具体包括以下几个方面:     1.光学器件:     由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,因此,可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用适应光学部件。     2.接收器:     由于紫外可见分光光度计多了紫外波,因此,在接收器上,多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格比可见分光光度计的接收器昂贵。     3.光源:     可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯和氘灯俩个电源,这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。

  • 可见分光光度计和紫外可见分光光度的区别

    ? ? ??可见分光光度计和紫外可见分光光度计为同一类型的仪器,都是属于分光光度计,但是其功能又存在区别。用来测量待测物质对可见光的吸光度,并进行定量分析的称为可见分光光度计;用来测量待测物质可见光或紫外光的吸收度,并进行定量分析的称为紫外可见分光光度计。  ?  可见分光光度计和紫外可见分光光度的区别,具体包括以下几个方面:  ?  1.光学器件:  ?  由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,因此,可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用适应光学部件。  ?  2.接收器:  ?  由于紫外可见分光光度计多了紫外波,因此,在接收器上,多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格比可见分光光度计的接收器昂贵。  ?  3.光源:  ?  可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯和氘灯俩个电源,这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。

  • 分光光度计和酶标仪

    分光光度计和酶标仪区别分光光度计:利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品,比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或(或原子吸收分光光度计)。酶标仪:实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪,紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下几个方面:(1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。(2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。(3)光路的长度:由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。[font=宋体

  • 【分享】UV分光光度计的应用原理

    UV分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。UV分光光度计是一种是利用物质对光的选择吸收现象,进行物质的定性和定量分析的光电式分析仪器,也是一种光谱仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。那么UV分光光度计的应用原理又是怎样呢,其实UV分光光度计的应用原理非常简单。UV分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

  • 【原创】分子荧光光度计的应用怎么没有紫外-可见分光光度计的那么广泛?

    分子荧光光度计的应用怎么没有紫外-可见分光光度计的那么广泛?最近在做维生素C,才更多的关注分子荧光光度计。为啥分子荧光光度计的应用没有紫外分光光度计那么广泛。从我个人理解,测定的组分要能产生荧光或衍生后能产生荧光才能测定,而这样的物质相对于紫外或可见分光来说少很多,所以其应用范围受限制。我个人理解,希望大家积极参与讨论。

  • 【讨论】分光光度计与直读光谱仪测量元素的区别

    一般的产品样本或有关书上都是说,分光光度计几乎可以测量周期表上的所以元素,真是这样的嘛?不能测什么元素?在什么情况下不能用直读光谱仪,而只能用分光光度计?我知道,测量的物质分光光度计为液体,直读光谱仪为固体。一般情况下,大中型的实验室,两种仪器都配备的。

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