离子交换色谱检测

怎么把三聚氰胺分子上的铵离子游离出来？谢谢，想用离子色谱阳离子交换柱检测铵离子。那个型号的柱子可以检测铵根，效果比较好？大家帮帮忙，谢谢

离子交换色谱法检测食品添加剂富马酸中马来酸建立离子交换色谱法检测食品添加剂富马酸中杂质马来酸。方法：样品用流动相溶解定容后，采用LC–SCX离子交换色谱柱（25cm×4.6mm，5μm） 分离，以0.005mol？L-1硫酸水溶液–乙腈（60∶40）为流动相，流速0.3mL？min-1，检测波长208nm。结果：样品中富马酸与马来 酸分离度达到3.1，在0.1～5.0mg？L-1范围内，马来酸峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0.9999），最低检出限达到0.05g？kg- 1，重现性良好。结论：该法简便、快速、灵敏、准确，可用于食品添加剂富马酸中马来酸的检测。

离子交换色谱法中，适用于WAX(弱阴离子交换柱)检测的物质？蛋白质，多肽，核酸，氨基酸 为什么？

弱弱的问下，离子交换色谱的仪器是有特定的离子交换色谱仪呢？ 还是一般的HPLC接个特定的离子交换柱（以及所需检测器）就可以了呢？？多谢！！

分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K，最好用HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸(ClO4-)或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。　　很多离子可用多种检测方式。例如测定过渡金属时，可用单柱法直接用电导或脉冲安培检测器，也可用柱后衍生反应，使金属离子与PAR或其它显色剂作用，再用UV/VIS检测。一般的规律是：对无紫外或可见吸收以及强离解的酸和碱，最好用电导检测器；具有电化学活性和弱离解的离子，最好用安培检测器；对离子本身或通过柱后反应后生成的络合物在紫外可见有吸收或能产生荧光的离子和化合物，最好用UV/VIS或荧光检测器。若对所要解决的问题有几种方案可选择，分析方案的确定主要由基体的类型、选择性、过程的复杂程度以及是否经济来决定。表1和2总结了对各种类型离子可选用的分离方式和检测方式。　　离子色谱柱填料的发展推动了离子色谱应用的快速发展，对多种离子分析方法的开发提供了多种可能性。特别应提出的是在pH0-14的水溶液和100%有机溶剂(反相高效液相色谱用有机溶剂)中稳定的亲水性高效高容量柱填料的商品化，使得离子交换分离的应用范围更加扩大。常见的在水溶液中以离子形态存在的离子，包括无机和有机离子，以弱酸的盐(Na2CO3/NaHCO3，KOH、NaOH)或强酸(H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl)为流动相，阴离子交换或阳离子交换分离，电导检测，已是成熟的方法，有成熟的色谱条件可参照。对近中性的水可溶的有机“大”分子(相对常见的小分子而言)，若待测化合物为弱酸，则由于弱酸在强碱性溶液中会以阴离子形态存在，因此选用较强的碱为流动相，阴离子交换分离；若待测化合物为弱碱，则由于在强酸性溶液中会以阳离子形态存在，选用较强的酸作流动相，阳离子交换分离；若待测离子的疏水性较强，由于与固定相之间的吸附作用而使保留时间较长或峰拖尾，则可在流动相中加入适量有机溶剂，减弱吸附，缩短保留时间、改善峰形和选择性。对该类化合物的分离也可选用离子对色谱分离，但流动相中一般含有较复杂的离子对试剂。此外，对弱保留离子可选用高容量柱和弱淋洗液以增强保留，对强保留离子则反之。离子色谱中常用的两种主要检测器:电化学检测器(包括电导和安培)和光学检测器。在水溶液中以离子形态存在的离子，即较强的酸或碱，应选用电导检测。具有对紫外或可见光有吸收基团或经柱后衍生反应后(IC中较少用柱前衍生)生成有吸光基团的化合物，选用光学检测器。具有在外加电压下可发生氧化或还原反应基团的化合物，可选用直流安培或脉冲安培检测。对一些复杂样品，为了一次进样得到较多的信息，可将两种或三种检测器串联使用。（中国分析仪器网）

分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K+，最好用HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4-）或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。很多离子可用多种检测方式。例如测定过渡金属时，可用单柱法直接用电导或脉冲安培检测器，也可用柱后衍生反应，使金属离子与PAR或其它显色剂作用，再用UV/VIS检测。一般的规律是：对无紫外或可见吸收以及强离解的酸和碱，最好用电导检测器；具有电化学活性和弱离解的离子，最好用安培检测器；对离子本身或通过柱后反应后生成的络合物在紫外可见有吸收或能产生荧光的离子和化合物，最好用UV/VIS或荧光检测器。若对所要解决的问题有几种方案可选择，分析方案的确定主要由基体的类型、选择性、过程的复杂程度以及是否经济来决定。表1和2总结了对各种类型离子可选用的分离方式和检测方式。 离子色谱柱填料的发展推动了离子色谱应用的快速发展，对多种离子分析方法的开发提供了多种可能性。特别应提出的是在pH 0-14的水溶液和100%有机溶剂（反相高效液相色谱用有机溶剂）中稳定的亲水性高效高容量柱填料的商品化，使得离子交换分离的应用范围更加扩大。常见的在水溶液中以离子形态存在的离子，包括无机和有机离子，以弱酸的盐（Na2CO3/NaHCO3， KOH、NaOH）或强酸（H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl）为流动相，阴离子交换或阳离子交换分离，电导检测，已是成熟的方法，有成熟的色谱条件可参照。对近中性的水可溶的有机“大”分子（相对常见的小分子而言），若待测化合物为弱酸，则由于弱酸在强碱性溶液中会以阴离子形态存在，因此选用较强的碱为流动相，阴离子交换分离；若待测化合物为弱碱，则由于在强酸性溶液中会以阳离子形态存在，选用较强的酸作流动相，阳离子交换分离；若待测离子的疏水性较强，由于与固定相之间的吸附作用而使保留时间较长或峰拖尾，则可在流动相中加入适量有机溶剂，减弱吸附，缩短保留时间、改善峰形和选择性。对该类化合物的分离也可选用离子对色谱分离，但流动相中一般含有较复杂的离子对试剂。 此外，对弱保留离子可选用高容量柱和弱淋洗液以增强保留，对强保留离子则反之。表1，2列出了离子色谱中常用的两种主要检测器:电化学检测器（包括电导和安培）和光学检测器。在水溶液中以离子形态存在的离子，即较强的酸或碱，应选用电导检测。具有对紫外或可见光有吸收基团或经柱后衍生反应后（IC中较少用柱前衍生）生成有吸光基团的化合物，选用光学检测器。具有在外加电压下可发生氧化或还原反应基团的化合物，可选用直流安培或脉冲安培检测。对一些复杂样品，为了一次进样得到较多的信息，可将两种或三种检测器串联使用。

一直有一个疑问困扰很久了，希望在此能够找到答案，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中，常规阴离子使用阴离子交换色谱柱+电导检测器测定，糖类用阴离子交换色谱柱+安培检测器测定，那么这两种阴[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱有什么不同呢？从官方资料来看，基质都是聚合物基质，功能基也都是季铵基，pH耐受也基本都是0-14，那为什么还要分成两种不同的色谱柱呢？能不能用常规的阴离子柱，使用糖类检测的色谱条件进行检测？

由于这几天都在做用SCX色谱柱进行样品检测，有个问题想要和大家讨论一下，在使用离子交换色谱法中，怎么优化色谱条件？离子交换色谱柱法：是以离子交换剂为固定相如：强阳离子交换柱（SCX），强阴离子交换柱（SAX），以缓冲溶液为流动相，借助于试样中电离组分对离子交换剂亲和力不用以达到分离离子型或可离子化的化合物的目的。我就抛砖引玉了：1、改变缓冲盐的浓度，一般增加缓冲盐的浓度可以缩短保留时间；2、改变pH值，一般在碱性条件下强阳离子交换柱（SCX）色谱法中，保留时间会缩短；3、……大家来说说自己的观点吧

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分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K+，最好用HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4-）或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。很多离子可用多种检测方式。例如测定过渡金属时，可用单柱法直接用电导或脉冲安培检测器，也可用柱后衍生反应，使金属离子与PAR或其它显色剂作用，再用UV/VIS检测。一般的规律是：对无紫外或可见吸收以及强离解的酸和碱，最好用电导检测器；具有电化学活性和弱离解的离子，最好用安培检测器；对离子本身或通过柱后反应后生成的络合物在紫外可见有吸收或能产生荧光的离子和化合物，最好用UV/VIS或荧光检测器。若对所要解决的问题有几种方案可选择，分析方案的确定主要由基体的类型、选择性、过程的复杂程度以及是否经济来决定。 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱填料的发展推动了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]应用的快速发展，对多种离子分析方法的开发提供了多种可能性。特别应提出的是在pH 0-14的水溶液和100%有机溶剂（反相高效液相色谱用有机溶剂）中稳定的亲水性高效高容量柱填料的商品化，使得离子交换分离的应用范围更加扩大。常见的在水溶液中以离子形态存在的离子，包括无机和有机离子，以弱酸的盐（Na2CO3/NaHCO3， KOH、NaOH）或强酸（H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl）为流动相，阴离子交换或阳离子交换分离，电导检测，已是成熟的方法，有成熟的色谱条件可参照。对近中性的水可溶的有机“大”分子（相对常见的小分子而言），若待测化合物为弱酸，则由于弱酸在强碱性溶液中会以阴离子形态存在，因此选用较强的碱为流动相，阴离子交换分离；若待测化合物为弱碱，则由于在强酸性溶液中会以阳离子形态存在，选用较强的酸作流动相，阳离子交换分离；若待测离子的疏水性较强，由于与固定相之间的吸附作用而使保留时间较长或峰拖尾，则可在流动相中加入适量有机溶剂，减弱吸附，缩短保留时间、改善峰形和选择性。对该类化合物的分离也可选用离子对色谱分离，但流动相中一般含有较复杂的离子对试剂。此外，对弱保留离子可选用高容量柱和弱淋洗液以增强保留，对强保留离子则反之。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中常用的两种主要检测器:电化学检测器（包括电导和安培）和光学检测器。在水溶液中以离子形态存在的离子，即较强的酸或碱，应选用电导检测。具有对紫外或可见光有吸收基团或经柱后衍生反应后（IC中较少用柱前衍生）生成有吸光基团的化合物，选用光学检测器。具有在外加电压下可发生氧化或还原反应基团的化合物，可选用直流安培或脉冲安培检测。对一些复杂样品，为了一次进样得到较多的信息，可将两种或三种检测器串联使用。

[size=3]分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K+，最好用 HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸(ClO4-)或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。　　很多离子可用多种检测方式。例如测定过渡金属时，可用单柱法直接用电导或脉冲安培检测器，也可用柱后衍生反应，使金属离子与 PAR或其它显色剂作用，再用UV/VIS检测。一般的规律是：对无紫外或可见吸收以及强离解的酸和碱，最好用电导检测器 具有电化学活性和弱离解的离子，最好用安培检测器 对离子本身或通过柱后反应后生成的络合物在紫外可见有吸收或能产生荧光的离子和化合物，最好用UV/VIS或荧光检测器。若对所要解决的问题有几种方案可选择，分析方案的确定主要由基体的类型、选择性、过程的复杂程度以及是否经济来决定。表1和2总结了对各种类型离子可选用的分离方式和检测方式。　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱填料的发展推动了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]应用的快速发展，对多种离子分析方法的开发提供了多种可能性。特别应提出的是在pH 0-14的水溶液和100%有机溶剂(反相高效液相色谱用有机溶剂)中稳定的亲水性高效高容量柱填料的商品化，使得离子交换分离的应用范围更加扩大。常见的在水溶液中以离子形态存在的离子，包括无机和有机离子，以弱酸的盐(Na2CO3/NaHCO3， KOH、NaOH)或强酸(H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl)为流动相，阴离子交换或阳离子交换分离，电导检测，已是成熟的方法，有成熟的色谱条件可参照。对近中性的水可溶的有机“大”分子(相对常见的小分子而言)，若待测化合物为弱酸，则由于弱酸在强碱性溶液中会以阴离子形态存在，因此选用较强的碱为流动相，阴离子交换分离 若待测化合物为弱碱，则由于在强酸性溶液中会以阳离子形态存在，选用较强的酸作流动相，阳离子交换分离 若待测离子的疏水性较强，由于与固定相之间的吸附作用而使保留时间较长或峰拖尾，则可在流动相中加入适量有机溶剂，减弱吸附，缩短保留时间、改善峰形和选择性。对该类化合物的分离也可选用离子对色谱分离，但流动相中一般含有较复杂的离子对试剂。此外，对弱保留离子可选用高容量柱和弱淋洗液以增强保留，对强保留离子则反之。在水溶液中以离子形态存在的离子，即较强的酸或碱，应选用电导检测。具有对紫外或可见光有吸收基团或经柱后衍生反应后(IC中较少用柱前衍生)生成有吸光基团的化合物，选用光学检测器。具有在外加电压下可发生氧化或还原反应基团的化合物，可选用直流安培或脉冲安培检测。对一些复杂样品，为了一次进样得到较多的信息，可将两种或三种检测器串联使用。[/size]

[b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分离方式和检测方式的选择[/b]分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K+，最好用HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4-）或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。 很多离子可用多种检测方式。例如测定过渡金属时，可用单柱法直接用电导或脉冲安培检测器，也可用柱后衍生反应，使金属离子与PAR或其它显色剂作用，再用UV/VIS检测。一般的规律是：对无紫外或可见吸收以及强离解的酸和碱，最好用电导检测器；具有电化学活性和弱离解的离子，最好用安培检测器；对离子本身或通过柱后反应后生成的络合物在紫外可见有吸收或能产生荧光的离子和化合物，最好用UV/VIS或荧光检测器。若对所要解决的问题有几种方案可选择，分析方案的确定主要由基体的类型、选择性、过程的复杂程度以及是否经济来决定。表1和2总结了对各种类型离子可选用的分离方式和检测方式。 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱填料的发展推动了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]应用的快速发展，对多种离子分析方法的开发提供了多种可能性。特别应提出的是在pH 0-14的水溶液和100%有机溶剂（反相高效液相色谱用有机溶剂）中稳定的亲水性高效高容量柱填料的商品化，使得离子交换分离的应用范围更加扩大。常见的在水溶液中以离子形态存在的离子，包括无机和有机离子，以弱酸的盐（Na2CO3/NaHCO3， KOH、NaOH）或强酸（H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl）为流动相，阴离子交换或阳离子交换分离，电导检测，已是成熟的方法，有成熟的色谱条件可参照。对近中性的水可溶的有机“大”分子（相对常见的小分子而言），若待测化合物为弱酸，则由于弱酸在强碱性溶液中会以阴离子形态存在，因此选用较强的碱为流动相，阴离子交换分离；若待测化合物为弱碱，则由于在强酸性溶液中会以阳离子形态存在，选用较强的酸作流动相，阳离子交换分离；若待测离子的疏水性较强，由于与固定相之间的吸附作用而使保留时间较长或峰拖尾，则可在流动相中加入适量有机溶剂，减弱吸附，缩短保留时间、改善峰形和选择性。对该类化合物的分离也可选用离子对色谱分离，但流动相中一般含有较复杂的离子对试剂。此外，对弱保留离子可选用高容量柱和弱淋洗液以增强保留，对强保留离子则反之。在水溶液中以离子形态存在的离子，即较强的酸或碱，应选用电导检测。具有对紫外或可见光有吸收基团或经柱后衍生反应后（IC中较少用柱前衍生）生成有吸光基团的化合物，选用光学检测器。具有在外加电压下可发生氧化或还原反应基团的化合物，可选用直流安培或脉冲安培检测。对一些复杂样品，为了一次进样得到较多的信息，可将两种或三种检测器串联使用。资料来源：www.zyzwtp.com

今天我们聊一款常用于异构体分析的色谱柱-离子交换色谱柱，如果大家在实际使用过程中有遇到，可以参考。在高效液相色谱（HPLC）中，离子交换色谱柱（IEC）是一种基于离子交换原理的色谱技术，用于分离和纯化带电分子（离子）。这种色谱柱的固定相是离子交换剂，它可以是天然的或合成的高分子聚合物，其表面含有可以进行可逆离子交换的离子交换基团。 01.离子交换色谱柱的组成 1）色谱柱管： 色谱柱管通常是由不锈钢制成管状结构，用于容纳填料。 2）填料： a. 阳离子交换柱填料：固定相含有带负电荷的离子交换基团（如磺酸基-SO3-），能够吸引并交换溶液中的阳离子（如Na+、NH4+、K+等）。 b. 阴离子交换柱填料：固定相含有带正电荷的离子交换基团（如季铵盐-N+(CH3)3），能够吸引并交换溶液中的阴离子（如Cl-、SO42-、PO43-等）。 02.离子交换色谱柱的分离机制 1）样品加载：待分离的离子样品被加载到色谱柱上。 2）交换作用：样品中的离子根据其与固定相离子交换基团的亲和力被保留在柱上。 3）洗脱：通过改变流动相的组成（如离子强度、pH值）或使用梯度洗脱，逐渐减少离子与固定相之间的相互作用，使离子逐个或一群一群地从柱上洗脱。 4）检测与收集：洗脱的离子通过检测器进行检测，并根据需要收集。整个过程与离子色谱法的洗脱过程基本一致，可以参见高效[color=#3333ff]液相色谱|离子交换色谱法的小知识。 03.离子交换色谱柱使用的注意事项 1）使用前： a. 检查色谱柱包装和标签：确保色谱柱没有物理损伤，确认色谱柱的规格和填料类型符合实验需求。 b. 阅读说明书：仔细阅读色谱柱的使用说明书，了解色谱柱的pH稳定性范围、最大操作压力等参数。 c. 系统冲洗：需用适当的溶剂冲洗色谱柱，如甲醇或乙腈，以去除保存液和可能的杂质。 d. 色谱柱平衡：柱子需要用流动相平衡，至少20倍柱体积，直到基线稳定。 2）使用中： a. 流动相选择：确保流动相与色谱柱的兼容性，避免使用会损坏色谱柱固定相的溶剂；控制流动相的pH值，通常在2-8之间，以防止固定相水解或分解；流动相应新鲜配制，并使用0.45μm或更小孔径的滤膜过滤以去除颗粒物。 b. 样品溶解性：样品应溶解在流动相或极性相近的溶剂中；如果样品较杂，应过滤，以去除可能堵塞色谱柱的颗粒物；避免样品中存在强氧化剂或还原剂，这些物质可能会损坏色谱柱。 c. 色谱柱的平衡：在开始新的分析之前，应让色谱柱用流动相充分平衡，以确保重现性；如果更换流动相，应适当冲洗色谱柱以去除旧流动相。 d. 色谱柱的温度：避免色谱柱暴露在极端温度下，通常使用温度应低于60℃；温度的突然变化可能会导致色谱柱性能下降。 e. 色谱柱的压力：避免超过色谱柱的最大使用压力，通常不超过15MPa。3）使用后： a. 柱子清洗：分析完成后，使用使用适当的溶剂清洗色谱柱，以去除积累的污染物。对于强保留污染物，可能需要使用更强的溶剂或方法进行再生。 b. 柱子保存：长时间不使用时，应将色谱柱储存在推荐的溶剂中，通常是甲醇、乙腈或水。储存时确保色谱柱的两端密封，避免溶剂蒸发或污染物进入。 c. 记录使用情况：记录色谱柱的使用情况，包括分析的样品、使用条件和色谱柱表现，以便于追踪柱效和寿命。 04.离子色谱柱使用的局限性 1）方法限制性：离子色谱主要用于分析带电的离子，对于非离子物质的分离和检测则需要将其转化为带电的离子后才能进行分析，这增加了实验的复杂性和时间成本。 2）样品前处理要求高：对于某些低浓度的离子物质，需要进行样品前处理以提高灵敏度，如预浓缩、前处理和盐排除等步骤，这些步骤增加了实验的时间和操作难度。 3）有害废物的产生：离子色谱中使用的柱和溶液可能含有对环境有害的物质，如柱中的有机溶剂和一些离子交换剂，可能在使用过程中产生有害废物。 4）对离子交换柱的要求高：离子色谱中使用的离子交换柱需要具有较高的选择性和稳定性，才能有效地分离和检测离子。然而，柱的选择和使用也面临一定的限制，例如有些离子难以从柱中洗脱，导致柱的寿命减短。 5）成本问题：离子色谱设备相对较昂贵，而且色谱柱的成本较高。此外，一些离子色谱方法还需要使用昂贵的标准品进行定量分析，增加了实验的成本。 6）柱效限制：离子色谱柱的柱效通常低于高效液相色谱柱。 https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/10/202410091604011261_5045_3203140_3.png!w490x14.jpg 总结一下：离子交换色谱柱（IEC）是高效液相色谱（HPLC）中的一种重要工具，专门用于分析和纯化蛋白质、多肽、核酸以及其他带电分子，包括异构体的分析。这种色谱柱的固定相是带有离子交换基团的树脂，能够与样品中的离子发生交换作用。使用时，需要注意色谱柱的兼容性、pH稳定性、最大操作压力等，使用前后都需要适当地冲洗和平衡，以保持柱的性能。不过，IEC也有局限性，比如它主要用于离子分析，对非离子物质就不太适用，而且可能需要复杂的样品前处理，成本也相对较高。所以，虽然IEC在分离离子方面很有用，但使用时还得考虑到这些因素。

根据国标《GBT 5750.9-2006 生活饮用水标准检验方法 农药指标》测水中的草甘膦，用柱后衍生法，标准上写的用阳离子或阴离子交换色谱柱，打算使用阳离子交换柱做，但不知道具体应该选择什么样的阳离子交换柱做，选柱有什么标准或要求，有做过这个的吗，指点一下吧，多谢！

分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K+，最好用HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4-）或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。 很多离子可用多种检测方式。例如测定过渡金属时，可用单柱法直接用电导或脉冲安培检测器，也可用柱后衍生反应，使金属离子与PAR或其它显色剂作用，再用UV/VIS检测。一般的规律是：对无紫外或可见吸收以及强离解的酸和碱，最好用电导检测器；具有电化学活性和弱离解的离子，最好用安培检测器；对离子本身或通过柱后反应后生成的络合物在紫外可见有吸收或能产生荧光的离子和化合物，最好用UV/VIS或荧光检测器。若对所要解决的问题有几种方案可选择，分析方案的确定主要由基体的类型、选择性、过程的复杂程度以及是否经济来决定。表1和2总结了对各种类型离子可选用的分离方式和检测方式。 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱填料的发展推动了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]应用的快速发展，对多种离子分析方法的开发提供了多种可能性。特别应提出的是在pH 0-14的水溶液和100%有机溶剂（反相高效液相色谱用有机溶剂）中稳定的亲水性高效高容量柱填料的商品化，使得离子交换分离的应用范围更加扩大。常见的在水溶液中以离子形态存在的离子，包括无机和有机离子，以弱酸的盐（Na2CO3/NaHCO3， KOH、NaOH）或强酸（H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl）为流动相，阴离子交换或阳离子交换分离，电导检测，已是成熟的方法，有成熟的色谱条件可参照。对近中性的水可溶的有机“大”分子（相对常见的小分子而言），若待测化合物为弱酸，则由于弱酸在强碱性溶液中会以阴离子形态存在，因此选用较强的碱为流动相，阴离子交换分离；若待测化合物为弱碱，则由于在强酸性溶液中会以阳离子形态存在，选用较强的酸作流动相，阳离子交换分离；若待测离子的疏水性较强，由于与固定相之间的吸附作用而使保留时间较长或峰拖尾，则可在流动相中加入适量有机溶剂，减弱吸附，缩短保留时间、改善峰形和选择性。对该类化合物的分离也可选用离子对色谱分离，但流动相中一般含有较复杂的离子对试剂。此外，对弱保留离子可选用高容量柱和弱淋洗液以增强保留，对强保留离子则反之。在水溶液中以离子形态存在的离子，即较强的酸或碱，应选用电导检测。具有对紫外或可见光有吸收基团或经柱后衍生反应后（IC中较少用柱前衍生）生成有吸光基团的化合物，选用光学检测器。具有在外加电压下可发生氧化或还原反应基团的化合物，可选用直流安培或脉冲安培检测。对一些复杂样品，为了一次进样得到较多的信息，可将两种或三种检测器串联使用。

离子交换色谱法分离食品有机酸的操作要点及故障排除 咱们聊聊离子交换色谱法分离食品中有机酸的那些事儿。这方法虽然高效，但操作起来还是有点小技巧的。下面咱们就来详细说说操作步骤和需要注意的地方，还有遇到问题咋解决。 1. 样品处理 首先，得把样品处理好。把食品样品用合适的溶剂提取，比如用80%的乙醇，这样能把有机酸提取完全，还能避免蛋白质啥的溶出来，影响后续操作。提取完别忘了过滤，一般用0.45微米的滤膜，这样就能得到干净的样品溶液了。 2. 色谱柱的选择与平衡 选好合适的离子交换柱很重要，根据你要分析的有机酸类型，选阴离子柱还是阳离子柱。柱子选好后，要用合适的缓冲液平衡，比如用20mmol/L的磷酸盐缓冲液，让柱子处于稳定状态，这样才能保证分离效果。 3. 进样与洗脱 把处理好的样品溶液注入色谱柱，然后选择合适的洗脱液和洗脱程序。一般来说，可以用含有氯化钠的梯度洗脱，这样能把不同的有机酸依次洗脱出来。洗脱过程中，要控制好流速和洗脱液的pH值，这俩因素对分离效果影响很大。 4. 检测与数据分析 有机酸洗脱出来以后，用检测器检测，比如紫外检测器或电导检测器。收集检测数据，通过分析峰面积或峰高，结合标准曲线，就能算出样品中有机酸的含量了。 故障排除 峰形不好：可能是柱子污染了，需要清洗柱子，或者检查流动相是否配制正确。 回收率低：可能是样品提取不完全，可以尝试改变提取条件，或者增加提取次数。 基线不稳：可能是检测器没有稳定好，需要让检测器充分预热，或者检查流动相是否有杂质。 好啦，今天的分享就到这里。离子交换色谱法虽然看着复杂，但只要掌握好这些操作要点和故障排除方法，就能轻松搞定食品中有机酸的分离。

请问各位，有谁是用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]检测水质中阴离子的？标准中提到的预处理柱： 聚苯乙烯-二乙烯基苯为基质的RP柱或硅胶为基质键合C18柱（去除疏水性化合物） ； H型强酸性阳离子交换柱或Na型强酸性阳离子交换柱（去除重金属和过渡金属离子） ，你们都是从哪个厂家买的？能提供一下牌子和厂家吗？

普通液相色谱仪，如岛津LC-20A添加电导检测器，使用离子交换柱能够检测无机盐吗？求高手解惑！

大家好，我最近在做多肽类的物质，使用强阳离子交换色谱柱，其中建立 了一个检测方法，此方法使用将近2年从来没有出现任何问题，但是这段时间开始，检测结果不重现，有没有出现这种结果的同仁呀

离子交换色谱法（Ion Exchange Chromatography，简称IEC）是一种基于离子交换原理的分离技术，广泛应用于生物大分子如蛋白质、核酸以及小分子如氨基酸和离子的分离纯化过程。其核心原理是利用固定相离子交换剂上的电荷基团与流动相中的离子进行可逆的离子交换，实现样品中不同组分的分离 。在离子交换色谱中，固定相通常是带有电荷的树脂或纤维素，这些基质通过化学反应引入了电荷基团，形成阳离子或阴离子交换剂。阳离子交换剂带有负电荷，用于吸附带正电的离子；而阴离子交换剂带有正电荷，用于吸附带负电的离子 。离子交换剂可以分为强离子交换剂和弱离子交换剂，它们的电荷基团具有不同的解离常数，影响着离子的交换能力 。流动相是IEC中的另一个关键要素，它通常为含盐的缓冲水溶液，可以通过改变其离子强度、pH值或组成来调节样品组分的保留行为。例如，增加流动相的离子强度可以增强与样品离子争夺离子交换官能团的能力，减弱样品组分与离子交换树脂的亲和性，从而实现洗脱 。 01.离子交换色谱分离的原理是什么？ 答：离子交换色谱的分离原理是利用带有相反电荷的离子交换剂作为固定相，与样品中的离子通过电荷相互作用发生可逆的离子交换，通过改变流动相的离子强度或pH值调节样品组分与离子交换剂之间的结合力，实现不同电荷特性的样品组分在色谱柱中的选择性分离。 02.离子交换色谱分离的过程是什么？ 答：1）平衡（Equilibration）： 在色谱分析开始之前，色谱柱需要在特定的缓冲溶液中达到平衡状态，以确保色谱柱上的离子交换剂具有一致的电荷状态。 平衡通常使用与流动相相同或相似的缓冲液进行，直到色谱图基线稳定，表明色谱柱已达到所需状态。 如： 阳离子交换剂带有负电荷（如磺酸基团 -SO3^-），吸附带正电的离子。 阴离子交换剂带有正电荷（如季胺基团 -NH3^+），吸附带负电的离子。 2）样品加载与冲洗（Sample Loading and Washing）： 样品在平衡后的色谱柱上进行加载，这一步骤需要小心操作，以避免对色谱柱造成物理损伤或过度加载样品。 加载样品后，可能需要使用流动相进行冲洗，以去除未与离子交换剂结合的样品组分，减少对色谱柱的污染。流动相是携带样品通过色谱柱的溶液，通常为含盐的缓冲水溶液。 流动相中的离子可以与固定相上的离子交换剂发生可逆的离子交换反应。 [color=#595959]3）洗脱（Elution）： 当样品溶液进入色谱柱时，样品中的离子根据其电荷性质与固定相上的离子交换剂发生相互作用。 样品中的不同组分根据其与离子交换剂的相互作用强度被逐步洗脱。洗脱可以通过等度洗脱（使用单一浓度的缓冲液）或梯度洗脱（逐渐改变缓冲液的浓度或组成）来实现。 洗脱过程中，通过调整流动相的pH值、离子强度或组成，可以控制样品中各组分的洗脱顺序和分离效率。 4）再生（Regeneration）： 分离完成后，需要对色谱柱进行再生，以去除可能残留在柱上的样品组分，恢复色谱柱的性能。 再生通常使用高浓度的盐溶液或强酸/强碱溶液进行，以去除色谱柱上的所有残留离子，然后使用平衡缓冲液重新平衡色谱柱。 原理动画：https://www.bilibili.com/video/BV1Qw411Z7Re/?vd_source=55086ed2640f93c14350844eeb8bd5f5 03.常见的离子交换色谱柱有哪些？ 答：强阳离子色谱柱、弱阳离子色谱柱、强阴离子色谱柱和弱阴离子色谱柱 1）强阳离子色谱柱（Strong Cation Exchange, S-CAX）： 使用强酸性离子交换剂，如磺酸基团。 在较宽的pH范围内（通常pH 2-12）保持带负电荷状态。 适用于分离带正电荷的样品，如碱性蛋白质。 2）弱阳离子色谱柱（Weak Cation Exchange, W-CAX）：使用弱酸性离子交换剂，如羧酸基团。电荷状态受pH影响较大，通常在pH 4-7之间带负电荷。适用于分离在特定pH下带正电荷的样品，如蛋白质的电荷异构体。 3）强阴离子色谱柱（Strong Anion Exchange, S-AEX）：使用强碱性离子交换剂，如季胺基团。在较宽的pH范围内（通常pH 1-14）保持带正电荷状态。适用于分离带负电荷的样品，如酸性多糖或某些蛋白质。 4）弱阴离子色谱柱（Weak Anion Exchange, W-AEX）：使用弱碱性离子交换剂，如胺基或酚基官能团。电荷状态受pH影响较大，通常在pH 6-9之间带正电荷。 适用于分离在特定pH下带负电荷的样品，如某些核苷酸和有机酸。 04.那常见的离子交换色谱柱洗脱顺序有什么规律？ 答：1）强阳离子色谱柱（Strong Cation Exchange, S-CAX）： 使用强阳离子交换剂，如磺酸基团，能够在较宽的pH范围内保持带负电状态。在这种色谱柱中，通常首先洗脱的是带正电荷较多的碱性物质，随后是带正电荷较少的中性或酸性物质。具体顺序取决于样品的等电点（pI）和流动相的pH值。 2）弱阳离子色谱柱（Weak Cation Exchange, W-CAX）： 使用弱阳离子交换剂，如羧基官能团，其电荷状态受pH影响较大。在pH值高于其pKa时，交换剂带负电荷，能够保留带正电荷的样品。洗脱顺序通常是由电荷数量和pH值决定的，可能与强阳离子色谱柱有所不同，因为弱阳离子交换剂在pH值低于其pKa时会逐渐失去电荷。 3）强阴离子色谱柱（Strong Anion Exchange, S-AEX）： 使用强阴离子交换剂，如季胺官能团，通常在广泛的pH范围内保持带正电状态。在这种色谱柱中，带负电荷较多的酸性物质会先被洗脱，随后是带负电荷较少的中性或碱性物质。 4）弱阴离子色谱柱（Weak Anion Exchange, W-AEX）：使用弱阴离子交换剂，例如叔胺基官能团，其电荷状态受pH影响较大。在pH值低于其pKa时，交换剂带正电荷，能够保留带负电荷的样品。洗脱顺序通常是由电荷数量和pH值决定的，与强阴离子色谱柱相比，洗脱行为可能因pH的变化而有显著不同。

在离子交换色谱中,待测阳离子电荷越小、其水合离子的半径越大，则越先出峰？对吗？请大家说说自己的看法.当然也可是指教其他的影响出峰的因素.谢谢[em61]

摘 要：电导检测器在离子色谱中占有主导地位，其构造直接影响它的一些性能和应用。笔者对两种不同构造的电导检测器在某些弱酸阴离子、碱金属和碱土金属阳离子、过渡金属阳离子以及某些两性物质的检测方面进行比较，并简单的探讨了构造与应用之间的关系。关键词：离子色谱；电导检测器；构造；应用；噪声离子色谱常用的检测器有电导检测器、紫外检测器和安培检测器，其中电导检测器因通用性好、灵敏度高、价格相对低廉等优点占据主导地位。虞雄华在2008年曾经就国产离子色谱的现状进行过综述并对国产离子色谱与进口离子色谱的性能进行比较，认为在电导检测器的性能指标方面，国产的五电极电导检测器与进口仪器的双电极脉冲电导检测器相当。笔者认为，在抑制电导检测方面，国产的五电极电导检测器（碳酸盐淋洗液）与进口的双电极脉冲电导检测器（氢氧根淋洗液）性能相当；但在某些非抑制电导检测方面，国产的五电极电导检测器与进口仪器的双电极脉冲电导检测器在高背景电导情况下出现一些差异，具体表现在某些弱酸阴离子、碱金属和碱土金属阳离子、过渡金属阳离子以及某些两性离子的检测，下面将逐一进行介绍。（一） 弱酸阴离子对于pKa7的阴离子来说（如CO32-、SiO32-、S2-、酚类等），抑制电导检测亦会将待测离子转化为相应的弱酸，其在电导检测器中响应值较弱或几乎不响应。为提高弱酸阴离子的响应值，一种方法是用强酸的阴离子为淋洗液，间接抑制电导检测；另外一种方法是用氢氧根淋洗液，非抑制间接电导检测。这两种方法均具有高的背景电导，此时进口的双电极脉冲电导检测器将出现很大的噪声，待测离子的线性范围仅为101；而国产的五电极电导检测器具有背景电导调零功能，可适当选择放大倍数，避免了高背景电导带来的噪声同时提高了待测离子的响应值和线性范围（102）。（二） 碱金属和碱土金属阳离子根据H+、OH-和碱金属、碱土金属的极限摩尔电导值计算，碱金属和碱土金属使用抑制电导检测和非抑制电导检测在灵敏度方面基本一致，而且进口的双电极脉冲电导器（淋洗液抑制产物为水）和国产的五电极电导检测器（非抑制电导检测，适当调节放大倍数）均可获得较低的噪声。但在实际情况中，样品中除了含有碱金属、碱土金属，还可能含有过渡金属阳离子，此类阳离子经过抑制后会形成氢氧化物沉淀，长期使用可能堵塞抑制器。国产的五电极电导检测器检测碱金属和碱土金属很少有采用抑制电导检测的报导，既避免了堵塞抑制器的风险，又降低了用户的使用成本。此外，NH4OH在较高浓度时部分以分子形式存在，使用抑制电导检测NH4+将呈现非线性；使用非抑制电导检测则线性关系良好。（三） 过渡金属阳离子某些过渡金属和重金属阳离子，如Zn2+、Cd2+、Pb2+、Cu2+、Ni2+、Co2+、Mn2+、Cr3+等带有较多的电荷数，对阳离子交换树脂亲和力较强。因此分离这类阳离子通常选用配位羧酸（如酒石酸、柠檬酸、草酸和吡啶-2，6-二羧酸等）为淋洗液，在阳离子交换平衡之外建立一个配位-解离的二级平衡。进口的双电极脉冲电导器在高背景电导条件下噪声比较大，因此该公司开发的方法是柱后衍生-紫外可见光检测，该方法选择性与灵敏度俱佳但紫外检测器比电导检测器价格昂贵。（四） 两性离子 两性离子如氨基酸、甜菜碱等在电导检测时只能使用非抑制电导检测方式。进口仪器厂家开发的检测氨基酸方法为氢氧根梯度淋洗，积分脉冲安培方式检测；国家标准方法中甜菜碱的检测使用阳离子交换色谱非抑制电导检测，因此国产的五电极电导检测器非常适合而进口的双电极脉冲电导检测器在这一方面就笔者所知，尚未有已面世的文献报道。（五） 结语国产的五电极电导检测器与进口的双电极脉冲电导检测器在抑制电导检测方面性能相当。但由于二者构造不同，在高背景电导情况下表现出一些不同。参考文献虞雄华,费栋.国产离子色谱仪的现状.第十二届全国离子色谱学术报告会,(2008):20-21.福建,厦门牟世芬,刘克纳,丁晓静.离子色谱方法及应用.第二版.化学工业出版社,第六章:离子色谱常用的检测器:134朱岩.离子色谱原理及其应用.浙江大学出版社,第二篇:离子色谱的应用;第五章:离子色谱在环境监测中的应用:134 James S. Fritz, DouglasT. Gjerde. Ion Chromatography Forth,Completely Revised and Enlarged Edition. Section 6: Anion Chromatography: 152 James S. Fritz, DouglasT. Gjerde. Ion Chromatography Forth,Completely Revised and Enlarged Edition. Section 7: Cation Chromatography: 187牟世芬,刘克纳,丁晓静.离子色谱方法及应用.第二版.[f

[font=宋体][font=宋体]离子交换层析[/font][font=Calibri](IEX)[/font][font=宋体]是一种主要基于蛋白净电荷的色谱分离方法，通常用于追踪脱酰胺和琥珀酰亚胺的形成。[/font][font=Calibri]IEX[/font][font=宋体]有两种类型：阳离子交换和阴离子交换层析法。当缓冲液[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值高于此[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]时，蛋白带负电（阴离子）；当[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值低于此[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]时，蛋白带正电（阳离子）。下面主要介绍离子交换色谱操作中应注意的一些具体问题。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]色谱柱[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱应根据分离样品的数量选择合适的色谱柱，用于离子交换的色谱柱一般又厚又短，不宜过长。直径和柱长的比例通常在[/font][font=Calibri]1:10[/font][font=宋体]到[/font][font=Calibri]1:50[/font][font=宋体]之间，色谱柱应垂直安装。安装立柱时，立柱应平整，不得有气泡。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]平衡缓冲器[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱的基本反应过程是离子交换剂与待分离物质和缓冲液中离子的交换，因此离子交换色谱中平衡缓冲液和洗脱缓冲液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]的选择对分离效果有很大影响。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]平衡缓冲液是指离子交换柱加载后和样品加载后用于平衡离子交换柱的缓冲液。选择平衡缓冲液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]首先确保待分离的单个物质（如蛋白质）的稳定性。其次，要使每种待分离物质与离子交换剂有适当的组合，并尽量使样品与待分离杂质与离子交换器的组合有更大的差异。通常，待分离的样品与离子交换器具有更稳定的组合。并尽量使杂质不与离子交换剂结合或结合不稳定。在某些情况下（如污水处理），杂质可以与离子交换器牢固结合，样品与离子交换器结合不稳定，也可以达到分离的目的。另外，要注意平衡缓冲液不能与离子交换剂离子有很强的结合力，否则会大大降低交换容量，影响分离效果。选择合适的平衡缓冲液可以直接去除大量杂质。并使以下洗脱具有良好的效果。如果平衡缓冲液不合适，可能会给后续洗脱带来困难，无法获得良好的分离效果。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]样品交付[/font][/font][font=宋体][font=宋体]负载离子交换色谱时，应注意样品液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值，负载量不宜过大，一般以[/font][font=Calibri]1-5%[/font][font=宋体]的柱床体积为宜，这样样品才能吸附在色谱柱的上层，分离效果更好。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]洗脱缓冲液[/font][/font][font=宋体][font=宋体]梯度洗脱通常用于离子交换色谱，通常有两种方法来改变离子强度和改变[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]。改变离子强度通常是通过在洗脱过程中逐渐增加离子强度来实现的，从而洗脱掉与离子交换剂结合的各种组分；对于[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]变化的洗脱，阳离子交换剂通常为从低到高的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]洗脱，阴离子交换剂通常是从高到低的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]洗脱。由于[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]可能对蛋白质稳定性有很大影响，因此通常使用具有不同离子强度的梯度洗脱。梯度洗脱装置介绍较早，可以有线性梯度、凹梯度、凸梯度和分级梯度洗脱方法。通常，线性梯度洗脱具有更好的分离效果，因此通常使用线性梯度洗脱。[/font][/font][font=宋体]洗脱液的选择也是为了确保所有待分离的组分在整个洗脱液梯度范围内是稳定的。第二种是使结合到离子交换器的所有分离的组分能够在洗脱液梯度范围内洗脱。此外，梯度范围可以尽可能小以提高分辨率。[/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]洗脱速度[/font][/font][font=宋体]洗脱液的流速也影响离子交换色谱的分离效果，洗脱速率通常保持恒定。一般来说，慢洗脱速度要好于快分辨率，但洗脱速度太慢会造成分离时间长、样品扩散、光谱峰宽、分辨率降低等副作用，因此根据实际情况选择合适的洗脱速度。如果洗脱峰相对集中在某个区域，则应减小梯度范围或降低洗脱速度以提高分辨率。如果分辨率良好，但洗脱峰太宽，则可以适当地提高洗脱速度。[/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]样品的浓缩和脱盐[/font][/font][font=宋体]通过离子交换色谱法获得的样品通常具有较高的盐浓度、较大的体积和较低的样品浓度。因此，通过离子交换色谱法获得的样品应进行浓缩和脱盐。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]离子交换色谱法的应用[/b][/font][font=宋体]离子交换色谱法有着广泛的应用，主要在以下几个方面。[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]水处理[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱法是一种简单有效的去除水中杂质和离子的方法。聚苯乙烯树脂广泛应用于高纯水的制备、硬水软化和污水处理。纯水可以通过蒸馏制备，但它消耗大量能量，而且制备量小、速度慢、纯度不高。通过离子交换色谱法可以快速、大量地制备高纯水。通常，水依次通过[/font][font=Calibri]H+[/font][font=宋体]型强阳离子交换器，以去除吸附在阳离子交换器上的各种阳离子和杂质；然后，通过[/font][font=Calibri]OH[/font][font=宋体]型强阴离子交换剂，去除阴离子交换剂吸附的各种阴离子和杂质，得到纯水。经过弱阳离子和阴离子交换剂的进一步纯化，可以获得高纯度的纯水。离子交换器在使用一段时间后可以通过再生处理进行再利用。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]小分子的分离和纯化[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱法还广泛应用于无机离子、有机酸、核苷酸、氨基酸、抗生素等小分子的分离纯化。例如，分析氨基酸，使用强酸性阳离子聚苯乙烯树脂，将氨基酸混合物置于[/font][font=Calibri]pH2~3[/font][font=宋体]柱上。此时，氨基酸在树脂上结合，然后逐渐提高洗脱液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]，从而使各种氨基酸以不同的速率洗脱，并可以分离和鉴定。提供所有自动氨基酸分析仪。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]生物大分子的分离纯化[/font][/font][font=宋体]离子交换色谱法是根据物质带电性质的不同，分离纯化蛋白质等生物大分子的重要手段。由于生物样品中蛋白质的复杂性，仅用一次离子交换色谱法通常很难达到高纯度，并且经常与其他分离方法结合使用。离子交换色谱法分离样品应充分利用根据带电性质进行分离的特点，只要选择合适的条件，离子交换色谱可以获得满意的分离结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-iec][b]离子交换层析蛋白纯化[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-iec[/font][/font]

以离子交换剂（如聚苯乙烯基质离子交换树脂）作固定相，基于流动相中溶质（样品）离子和固定相表面离子交换基团之间的离子交换作用而达到溶质保留和分离的离子色谱法。分离机理除电场相互作用（离子交换）外，还常常包括非离子性吸附等次要保留作用。其固定相主要是聚苯乙烯和多孔硅胶作基质的离子交换剂。离子交换色谱法最适合无机离子的分离，是无机阴离子的最理想的分析方法。

最近在做GB5009.11-2014,液相新手，请问阴离子交换色谱柱是不是就是阴离子色谱柱，感觉网上查了说法不一样，查书发现，确实有阴离子交换色谱法跟阴离子色谱法。所以现在有点晕圈，还有阴离子色谱法叫做淋洗液的东西是不是就是流动相啊？应该是吧？那怎么网上和书很多都叫淋洗液呢?

影响离子交换色谱的因素有很多，温度是最容易被忽视的一个因素，那么温度对离子交换色谱的影响都有哪些？温度是否可以无限调整？本视频将向大家讲解。

离子交换色谱法教程Sober和Peterson于1956年首次将离子交换基团结合到纤维素上，制成了离子交换纤维素，成功地应用于蛋白质的分离。从此使生物大分子的分级分离方法取得了迅速的发展。离子交换基团不但可结合到纤维上，还可结合到交联葡聚糖（S-ephadex）和琼脂糖凝胶（Sepharose）上。近年来离子交换色谱技术已经广泛应用于蛋白质、酶、核酸、肽、寡核苷酸、病毒、噬菌体和多糖的分离和纯化。它们的优点是:⑴具有开放性支持骨架，大分子可以自由进入和迅速扩散，故吸附容量大。⑵具有亲水性，对大分子的吸附不大牢固，用温和条件使可以洗脱，不致引起蛋白质变性或酶的失活。⑶多孔性，表面积大、交换容量大，回收率高，可用于分离和制备。一、基本理论　　离子交换剂通常是一种不溶性高分子化合物，如树脂，纤维素，葡聚糖，醇脂糖等，它的分子中含有可解离的基团，这些基因在水溶液中能与溶液中的其它阳离子或阴离子起交换作用。虽然交换反应都是平衡反应，但在层析柱上进行时，由于连续添加新的交换溶液，平衡不断按正方向进行，直至完全。因此可以把离子交换剂上的原子离子全部洗脱下来，同理，当一定量的溶液通过交换柱时，由于溶液中的离子不断被交换而波度逐减少，因此也可以全部被交换并吸附在树脂上。如果有两种以上的成分被交换吸着在离子交换剂上，用洗脱液洗脱时，在被洗脱的能力则决定于各自洗反应的平衡常数。蛋白质的离子交换过程有两个阶段──吸附和解吸附。吸附在离子交换剂上的蛋白质可以通过改变pH使吸附的蛋白质失去电荷而达到解离但更多的是通过增加离子强度，使加入的离子与蛋白质竞争离子交换剂上的电荷位置，使吸附的蛋白质与离子交换剂解开。不同蛋白质与离子交换剂之间形成电键数目不同，即亲和力大小有差异，因此只要选择适当的洗脱条件便可将混合物中的组分逐个洗脱下来，达到分离纯化的目的。二、离子交换的分类及常见种类（一）分类离子交换剂分为两大类，即阳离子交换剂和阴离子交换剂。各类交换剂根据其解离性大小，还可分为强、弱两种，即 强酸剂　阳离子交换剂 　弱酸剂　强硷型　阴离子交换剂　弱硷型。1.阳离子交换剂　　阳离子交换剂中的可解离基因是磺酸（-SO3H）、磷酸（-PO3H2）、羧酸（COOH）和酚羟基（-OH）等酸性基。某些交换剂在交换时反应如下：强酸性：R-SO3-H+＋Na+ R-SO3- Na+H+弱酸性：R-COOH＋Na+ R-COONa＋H+国产树脂中强酸1×7（上海树脂＃732）和国外产品Dowex 50、Zerolit 225等都于强酸型离子交换剂。2.阴离子交换剂　　阴离子交换剂中的可解离基因是伯胺、（-NH2）、仲胺（-NHCH3）、叔胺[N-（CH3）2]和季胺[-N（CH3）2]等硷性基团。某些交换反应如下：强硷性：R-N+（CH3）2 HOH-＋Cl R-N+（CH3）2 Cl＋OH-弱硷性：R-N+（CH3）2 HOH-＋Cl R-N+（CH3）2 HCl＋OH-强硷性＃201号国产树脂和国外Dowex1、Dowex2、ZerolitFF等都属于强硷型阴离子交换剂。（二）种类1.纤维素离子交换剂：阳离子交换剂有羟甲基纤维素（CM-纤维素），阴离子交换剂有氯代三乙胺纤维纱（DESE-纤维素）。2.交联葡聚糖离子交换剂：是将交换基因连接到交联葡聚糖上制成的一类交换剂，因而既具有离子交换作用，又具有分子筛效应，是一类广泛应用的色谱分离物质。常用的Sephadex离子交换剂也有阴离子和阳离子交换剂两类。阴离子交换剂有DEAE-Sephadex A-25，A-50和QAE- Sephadex A25，A50； 阳离子交换剂有CM-Sephaetx C-50，C-50和Sephadex C-25，C-50。阴离子交换剂用英文字头A，阳离子交换剂的英文字头是C。英文字后面的数字表示Sephadex型号。3.琼脂糖离子离交换剂：是将DESE-或CM-基团附着在Sepharose CL-6B上形成，DEAE-Sephades（阴离子）和CM-Sepharose（阳离子），具有硬度大，性质稳定，凝胶后的流速好，分离能力强等优点。三、实验操作（一）交换剂的处理，再生与转型　　新出厂的树脂是干树脂，要用水浸透使之充分吸水膨胀。因其含有政绩一些杂质，所要要用水、酸、硷洗涤。一般手续如下：新出厂干树脂用水浸泡2小时后减抽压去气泡，倾去水，再用大量无离子水洗至澄清，去水后加4倍量2N HCl搅抖4小时，除去酸液，水洗到中性，再加4倍量2N NaOH搅抖4小时，除硷液，水洗到中性备用。将树脂带上所希望的某种离子的操作称为转型。如希望阳树脂带Na+，则用4倍量NaOH搅拌浸泡2小时以上；如希望树脂带H+，可用HCl处理。阴树脂转型也同样，若希望带Cl-则用HCl，希望带OH-则用NaOH。用过的树脂使其恢复原状的方法称为再生。并非每次再一都用酸、硷液洗涤，往往只要转型处理就行了。（二）柱上操作⑴交换剂装柱最简单的交换层析柱可用硷式滴定管代替。处理过的树脂放入烧杯，加少量水边搅拌边倒入保持垂直的层析管中，使树脂缓慢沉降。交换剂在柱内必须分布均匀。⑵上样向层析柱内倾入样品液⑶洗脱与收集　　不同样品选用的洗脱液不同。原则是用一种比吸着物质更活泼的离子，把吸着物交换出来。由于被吸着的物质往往不是我们所要求的单一物质，因此除了正确选择洗脱液外还采控制流速和分布收集的方法来获得所需的单一物质。来源：中国色谱网[em61]