实时荧光定量分析

请教大家，如何对一生物组织体的荧光光谱进行定量分析呢，通常，我们说的定量分析是对荧光组分的定量分析，那是如何实现的，请教，我的e-mail：lls009663@163.com

请问有谁做过ＤＮＡ与蛋白的荧光定量分析啊？

本人现在在做X荧光定量分析方面的工作,请教X荧光定量分析中的基本参数法如何实现

X射线荧光光谱法进行定量分析的根据是元素的荧光X射线强度Ii与试样中该元素的含量Ci成正比:Ii=Is×Ci式中Is为Ci=100%时，该元素的荧光X射线的强度。根据上式，可以采用标准曲线法、增量法、内标法等进行定量分析。但是这些方法都要使标准样品的组成与试样的组成尽可能相同或相似，否则试样的基体效应是指样品的基本化学组成和物理化学状态的变化对X射线荧光强度所造成的影响。化学组成的变化，会影响样品对一次X射线和X射线荧光的吸收，也会改变荧光增强效应。例如，在测定不锈钢中Fe和Ni等元素时，由于一次X射线的激发会产生Nika荧光X射线，Nika在样品中可能被Fe吸收，使Fe激发产生Feka。测定Ni时，因为Fe的吸收效应使结果偏低，测定Fe时，由于荧光增强效应使结果偏高。

XRF荧光光谱仪能做定量分析吗？

X荧光 可以对大气采样的滤膜做定量分析吗？

能用岛津的荧光检测器做定量分析吗? 听说不准确. 不知道是不是.

X射线荧光光谱仪是如何进行定量分析的？ 例如，我要测定生石灰中CaO的含量，得到的结果是通过测定钙元素的含量m，然后通过分子量计算出来(m/40*56)的吗？

比如:：X荧光定量分析方法、压片法和熔片法的优缺点、压片法的应用

[b]定量分析方法[/b]校准曲线法：与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]法相似：配制一系列含有试样基体的标准溶液，其基体含量与溶液组成和被测尽可能接近；依次喷入火焰；绘制原子荧光强度与浓度关系的曲线；然后在相同条件下测定被测溶液的原子荧光强度，用内插法求出它的浓度。标准加入法：试样中基体影响很大，且无法配制与试样相同的基体组分。

赛默飞世Quant’X 荧光能谱仪无标样定量分析方法怎么建立？

大家好，请问一下大家能介绍一下光谱分析的定量依据吗？我了解的光谱就是发射光谱和吸收光谱，吸收光谱就是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]，发射光谱就是ICP，我觉得原子荧光也算发射吧？不知道原子荧光算那种还是新的名称？ 我的理解是，吸收光谱分析的依据应该是朗伯-比尔定率，因为它就是一个入射光通过一个均匀介质（一定厚度的原子密度），利用吸收的光与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]成正比关系，符合朗伯-比尔定率。 那发射光谱的定量依据是什么？最近在网上看到说的是罗马金-赛伯公式，具体是：光谱定量分析依据试样中欲测元素的谱线强度来确定元素的浓度。元素的谱线强度I与该元素在试样中的浓度c的关系为：I=ACb，这个公式称为罗马金-赛伯公式，是光谱定量分析的基本公式。式中A及b是两个常数。常数A是与试样的蒸发、激发过程和试样组成等有关的一个参数；常数b称为自吸系数，它的数值与谱线的自吸收有关。所以只有控制在一定的条件下，在一定的待测元素含量的范围内，A和b才是常数。取对数得光谱定量分析的基本关系式lgI=blgC+lgA。 不知道我的理解是不是正确？不知道大家有什么想法或补充的，大家讨论讨论吧！！谢谢

不同的慢病毒转染浓度，荧光显微镜荧光场亮度可以作为简单的定量分析数据吗

从原理上讲，原子发射光谱可以进行定性分析、半定量分析和定量分析。过去因为电弧光源和火花光源在性能上存在缺陷，使发射光谱在定性和半定量分析方面应用非常广泛，但其定量分析受到很大限制。ICP光源的出现彻底改变了这种状况，使发射光谱定量分析的应用越来越多，现已基本上成为元素分析的常规手段。但大家在用ICP进行定量分析的同时，还经常去做定性和半定量分析吗？

[size=4][font=宋体] [/font][font=Times New Roman]X[/font][/size][size=4][font=宋体]射线荧光仪定量分析计算过程的基本步骤为：[/font]1.　标准曲线模型的建立；2.　在标准曲线模型设定的各元素测量条件下，测量样品，获得测量谱图；3.　谱处理过程，得到各元素的荧光强度；4.　基体效应校正过程，在标准曲线模型设定的校正方法计算样品中各元素含量； FP法基体效应校正，需要计算光管原级谱分布，可参考附件中的计算程序。下面详细介绍这四个部分。[font=宋体]关键词：XRF，模型，谱处理，基体效应，定量分析[/font][/size]

如题，立F-4500荧光分光光度计是否能对细胞内EGFP进行定量分析？我向Hela细胞中转入了绿色荧光蛋白，想对绿色荧光蛋白的表达量进行定量分析。不知道用荧光分光光度计是否可行？谢谢！[color=red][I]疯子哥提示：由于你发的内容与GC无关，已经将其转到对应的版面，谢谢参与！[/I][/color]

我现在要做红外定量分析.请问,定量分析的标准曲线应如何制备?我已经配置好标准溶液了,但它的量应如何控制?

最近用半定量分析软件，建立方法时，可以设定平衡值，H2O,等等，有些样品测试出来这一项为0，但是有些样品测出来为20%多，咨询过工程师，说这部分包含了非荧光测定物质B C N H O，不是很明白请各位指教一下

请问要用于能量色散x射线荧光分析做定量分析的软件都有什么呢？能不能介绍下呢？麻烦各位啦

[font=宋体][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]常常被用来对[/font][font=Calibri]RNA-seq[/font][font=宋体]或芯片测序得到的有意义的基因表达情况进行准确的定量分析，本文主要从[/font][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]的原理、定量方法等方面进行讲解。[/font][/font][font=宋体] [/font][table][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]区别[/font][/b][/align][/td][td][align=center][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]荧光定量[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][/b][/align][/td][td][align=center][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]常规[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][/b][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]检测时间[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]实时[/font][font=微软雅黑]+终点[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]终点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]检测信号[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]荧光染料或者探针[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]核酸染料[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]准确度[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]定量[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]半定量[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]是否能检测终点产物[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]是否能计算起始浓度[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]否[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]仪器要求[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]荧光定量[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]常规[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪[/font][/font][/align][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]一、[/font][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]定量原理[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]，即实时荧光定量[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]，就是通过对[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增反应每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板的定量分析。因为在[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增的指数时期，模板的[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以可以定量。（[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值：每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 [/font][font=Calibri](cycle)[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值越小，反应扩增到达平台期所需循环数越少，目的基因起始含量越高）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]的荧光标记方法分为以[/font][font=Calibri]SYBR Green I[/font][font=宋体]染料法为主的荧光染料嵌合法，以[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法为主的荧光探针法（[/font][font=Calibri]Cycling Probe[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]Molecular Bracon[/font][font=宋体]等），淬灭染料引物法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]SYBR Green I[/font][font=宋体]染料法[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]是高灵敏度的非特异性双链[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]荧光染料，具有绿色激发波长。它以非特异性方式结合在[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]双螺旋小沟区域。游离的[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]只发出微弱的荧光信号，[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]过程中，当扩增生成[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]时，[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]逐渐与[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]结合，荧光信号被千倍放大，荧光信号的强度与扩增得到的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度成正比。荧光信号被仪器检测并采集得到“扩增曲线”，通过荧光信号的强度反映出体系中[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]但[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]与特异性扩增产物结合时还可以同引物二聚体、非特异性扩增的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]结合，影响结果判断。所以扩增反应结束后，还必须对生成的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]进行分析：即通过升温，[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]双链解开，[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]染料脱落，荧光值逐渐下降，形成温度和荧光强度的曲线即“熔解曲线（[/font][font=Calibri]Melting curve[/font][font=宋体]）”，由此判断体系中是否存在引物二聚体、非特异性扩增。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]染料法操作简单、灵敏度高、成本较低，被广泛地应用于[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]定量、 基因表达量的研究、转基因重组动植物的研究等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针是由[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’端标记有荧光报告基团和[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]’端标记有淬灭基团以及与目标基因特异性结合的寡核苷酸序列组成。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，此时仪器不会检测到荧光信号。在[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增时，模板[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]变性解链，[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针特异性结合到目标基因处，而[/font][font=Calibri]Taq[/font][font=宋体]酶具有[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’[/font][font=Calibri]-3[/font][font=宋体]’核酸外切酶活性，延伸至探针结合处，可将探针水解，使荧光报告基团和淬灭基团分离，从而检测到荧光信号，荧光信号的强度与扩增得到的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度成正比。荧光信号被仪器检测并采集得到“扩增曲线”，通过荧光信号的强度反映出体系中[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法因其特异性高，被广泛地应用于等位基因鉴别、[/font][font=Calibri]SNP[/font][font=宋体]分型、病原体和病毒检测、疾病耐药基因研究、多重定量等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注[font=宋体]义翘神州[/font]qPCR定量分析服务：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/real-time-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-service[/font][/font][font=Calibri] [/font]

请问SCAN定量分析曲线可以用在SIM定量分析中吗？

我需要用jade 5 进行定量分析，看了黄继武老师写的MDI Jade使用手册，受益匪浅，但是在介绍用RIR法进行定量分析时，需要用到一个“x射线衍射物相定量分析”的附加软件，不知道再哪里可以下载到类似的软件，希望版主和各位高人指点！[em06]

小白问题。我们想对外送样。是固体样品。我知道荧光半定量分析可以做氧化钙，但是硫酸钙能做吗？

在定量分析中，定量离子的选择原则有那些？

有使用英国hiden公司的hpr20做定量分析的吗？定量分析如何标定？请教

什么情况下要选择核磁的定量分析技术，目前有核磁定量分析的相关标准吗？

我在进行炉管结垢物的组成分析时，通常使用的是半定量分析，在进行定量时需要输入balance，一般情况下我只能输CH，但实际上我又觉得结垢物不应该是这个东西，有没有人做过裂解炉炉管结垢物，你们是怎么定这个的呢？

[size=4][font=隶书][I]悬赏：[/I][/font][/size][font=黑体][B]钢中第二相定量分析的方法。[/B][/font]譬如：钢中碳化物相的定量、夹杂物的定量等。。。要求：1 说明所采用方法的原理或依据；2 方法实施的具体步骤；3 定量结果的误差分析；4 尽可能详细的描述。

2个无机样品，请帮助做一下定量分析。