无菌大容量移液器

题记：移液器，作为众多实验过程中的基础工具，已经越来越被重视。可以说，现在的实验室对移液器的要求，已经不再停留在“能用来转移试剂”的简单要求上，而早已上升到“能够准确，按照预期的要求来转移试剂”的更为严格的要求上。因此与实验室工作相关的人员，很有必要了解一些移液器的基础知识。本文主要参考移液器国际标准“活塞式容积测定仪器（ISO 8655-2:2002）”对移液器的分类及测量误差的允许标准进行阐述，以期给移液器使用人员一点帮助。　　　 　　什么是“标称容量” 　　 在了解这一定义前，应先大概了解移液器的分类，移液器按其量程是否可以变化，可分为量程固定式和量程可调式两种。而无论是固定还是可调，其生产厂家都必须在移液器的显著位置对移液器的有效量程进行标注。注意，这里是“有效”量程，所谓有效量程既是移液器的生产商所宣称的量程。因为现在市场上销售的多种移液器，其容量实际可调节的范围，往往都超出其生产商宣称的范围。如10μl-100μl的移液器，其有效量程是10μl-100μl，但实际上，其最小值可调节到7μl左右，最大值可调节到110μl左右，但这个范围7μl-110μl并不是厂家所宣称的量程，也不是该移液器的有效量程。 　　 因此，对于量程可调式移液器，其标称容量，是指在给定的有效量程范围内最大的容量。例如，量程1ml-10ml可调式移液器，其标称容量是10ml。同理，对于量程固定式移液器，其标称容量则即是该移液器的固定量程。如量程1ml的固定移液器，其标称容量即是1ml。移液器的标称容量，是一个非常重要的定义，在很多的针对测量结果的分析与计算中，都要使用到这个定义，下面的讨论，将会向你证明其重要性。 　　 　　移液器的分类 　　 上面提到，如果按容量是否可以变化，则可将移液器分为固定式和可变式，依据国际标准“活塞式容积测定仪器（ISO 8655-2:2002）”定义，无论容量是否可以变化，以上分类又可被分为A型和D型。A型移液器被称为排气式移液器，D型移液器被称为容积式移液器。排气式移液器是指移液器活塞与吸入液体上表面之间有空气柱，在操作中，被移取的液体与活塞体之间因为空气柱的存在，将无法直接接触；容积式移液器是指移液器活塞与吸入液体上表面之间没有空气柱，在操作中，被移取的液体与活塞体之间因为没有空气柱的村子，将可以直接接触。对于D型移液器，即容积式移液器，又被分为D1型以及D2型两种类型。D1型是指活塞、管嘴可重复使用的；D2型是指活塞、管嘴不可重复使用的。 　　　　测量误差标准的确定 　　 移液器国际标准“活塞式容积测定仪器（ISO 8655-2:2002）”对各型号的，各主要标称容量的最大允许误差都进行了规定，详见以下表1和表2： 　　 在操作中，通常以选定的移液器的标称容量为依据，通过与上表1或表2 的比对，找出一组与该移液器标称容量最为接近的容量点，则该点的误差标准，即是该只移液器的测量误差标准。例如，量程2μl -10μl的排气式移液器，根据前文所述，该移液器属于A型，标称容量为10μl,则查表1可知，在10μl处，最大系统误差是±0.12μl，最大随机误差是±0.08μl，则表示，该移液器其有效量程范围内的各测量点的测量误差标准是±0.12μl（系统性）和±0.08μl（随机性）。 　　 实际上常会遇到这样的情况，即移液器的标称容量，在表1或表2中无法找到与其相匹配的容量点，也就是说其标称容量是介于表1或表2中任一给定的两个容量点之间的值，那么它的测量结果的误差标准是以任一两个容量之间较大容量为标准的。再来看这个列子，如量程30μl -300μl的排气式移液器，其标称容量是300μl，查表1发现，并没有这个容量点。但表1给出了200μl、500μl容量点的误差标准，因300μl位于200μl和500μl之间，且500μl大于200μl，因此以表1中500μl这个点的误差标准作为该移液器的误差标准。　　 根据标称容量的定义，如果是量程固定式移液器，则其测量结果的误差标准，是以其固定量程在表1或表2中所对应的某个点的误差为标准的。 　　 以上是移液器国际标准“活塞式容积测定仪器（ISO 8655-2：2002）”对移液器的测量结果误差的判断方法，但目前在国内，更多的用户，包括一些官方机构选择的是国家标准“移液器检定规程（JJG 646-2006）”，尽管两标准并不完全一样，但移液器测量结果误差标准的判定方法是一样的。但这里必须指出，该检定规程，仅仅是对排气式移液器适用，包括量程固定和可变的移液器。

常听到客户，包括移液器销售人员在讨论一个话题，就是移液器在储存时，其容量调节钮到底应该放在什么位置才是最合适的？因为，现在有两种声音，一种是放在最大位置，就是将容量调节至最大，另一种则是放在最小位置，就是将容量调节至最新，那么究竟哪一种是正确的呢？要回答上面问题，必须先弄清楚，为什么会出现这样两种想法？ 移液器的容量调节按钮，起着2种作用，一是承担这容量调节作用，另一种则是承担着取液、分液作用，如果移液器的容量调节钮，仅仅只承担容量调节的作用，那么，可以说无论将容量调节至哪个位置，对于长期储存来说，都不会给移液器造成什么影响。但因为移液器的容量调节钮同时还承担着取液、分液的作用，也正因为此，才会产生长期储存时，容量应调节至什么位置的问题。 移液器的取液是通过真空原理来实现的，因此，在取液时（对于非电动）需要按下容量调节钮，在分液时需要松开容量调节钮，而容量调节钮是通过预期连接的弹簧来实现自动弹起功能的，因此，在长期储存时，将容量调节至最大容量或最小容量，其主要原因就是涉及到与该容量调节钮相联系的弹簧是出于紧缩还是张弛状态。从理论上将，如果弹簧长期出于紧张状态，则对弹簧会产生一定的影响，如弹簧再次伸展时，无法达到原有的长度或张力不够，因此，如果长期储存时，从理论上说，应该将容量调节至某个位置，使得与调节钮想联系的弹簧处于张弛状态。 但以上仅是从理论上来分析的，具体如处于张弛状态和紧张状态长期存放的弹簧，到底有多少差别，目前还没有试验证明！

移液器，作为实验室最常用的液体转移工具，至今已有60多年历史。它被广泛用于生物、化学以及医药等实验室，本文即将与你一同分享一些有关移液器的历史。移液器的历史 在50年代早期，实验室所面临的一个主要问题便是：如何有意识地、方便地去移动一定量的液体。这个问题，直到第一支移液器被发明后，才被解决。世界上第一支移液器，由德国科学家“Henrich Schnitger"于1958年发明，被称之为”马尔堡移液器 Marburg Pipette“,后由德国爱本医疗器械供应公司生产。世界上第一支可调节量程移液器由”Warren Gilson"于1978年发明，这项新的发明，让移液器的精确度、使用舒适性以及功能性都有所提升。第一支可高温、高压消毒移液器，由制造商“Capp Denmark"于1984年制造。现在移液器市场上，几乎80%以上的都是可高温、高压消毒移液器。移液器的分类 不同品牌货制造商生产的移液器之间相差较大，但移液器大致可分为以下几类，首先依据移液过程中，动力的供给，可分为手动移液器与电动移液器两大类；其次，根据容量是否可以调节，可分为固定容量移液器与可调节容量移液器两大类；再次，根据移液器的移液能力，可分为小容量与大容量两类，一般将200ul及以下归类为小容量移液器，最后，根据连接管嘴的数量，可分为单通道与多通道两类。