高通量组织破碎仪

破碎大量样品、低温破碎大量样品、破碎坚硬或韧性较强的样品时，人工手动研磨就成了实验猿的噩梦。当然，也有很多实验猿已经尝试过市面一些研磨机/超声波粉碎机，发现自己那顽固的样品依然无法被完全破碎/破碎过程损坏了目标成分而十分心塞。 分享个高通量高效破碎动植物组织和微生物的方法，别逗，当然不是靠徒手研磨能做到的，必须入手个神器——tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多样品组织研磨机。对于动植物组织和微生物，包括一些难以破碎的组织样品，都可以使用这个研磨机对其进行完全粉碎。 特别地，一些尤其坚硬/韧性比较强的样品，或要求维持低温条件进行破碎提取的样品，需要结合液氮进行研磨，如：皮肤、硬骨骼、软骨、血管、结缔组织、种子等；使用普通机械研磨方法，很难既保证研磨破碎效果又保证样品一直处于低温状态，尤其是提取RNA、酶等对温度敏感的物质时，低温状态的控制显得尤为关键。入手一台上海净信的多样品组织研磨机，这些都不再是问题了。看招：注：由于样品的具体差异及实验要求的不同，下文数据部分请咨询厂家。第一部分 破碎动物组织1）样品：猪肌肉组织2）仪器：Tissuelyser多样品组织研磨机（品牌：上海净信）；耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3）步骤：a.取***克左右肌肉组织样品，均匀地剪切成少量样品块，分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠和800μLPBS裂解液，分别盖紧管盖后，置入24孔研磨适配器中，再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹，研磨***秒，启动研磨器。d.研磨完全停止后，拿出研磨离心管，旋开管盖，取出研磨好的肌肉组织样品。4）结果：研磨后的效果如图1，猪肌肉组织成很细腻的泥浆状，说明Tissuelyser多样品组织研磨机对猪肉组织的研磨效果良好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150947_546190_3397_3.jpg图1 猪肌肉研磨对比第二部分 破碎植物组织1）样品：水稻叶片2）仪器： Tissuelyser多样品组织研磨机（品牌：上海净信）；耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3）步骤：a.取***克左右叶片组织样品，均匀地剪切成少量样品块，分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠，分别盖紧管盖后，置入24孔研磨适配器中，再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹，研磨***秒，启动研磨器。d.研磨完全停止后，拿出研磨离心管，旋开管盖，取出研磨好的叶片组织样品。4）结果：研磨后的效果如图2，叶片组织成很细腻的泥浆状，说明Tissuelyser多样品组织研磨机对叶片组织的研磨效果良好。顺带附上研磨黄豆（坚硬的植物种子）的研磨对比图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546191_3397_3.jpg图2 水稻叶片研磨对比http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546192_3397_3.jpg图3 黄豆研磨对比第三部分 结合液氮使用tissuelyser研磨机 当样品死活无法破碎完全/样品傲娇要低温环境时，Tissuelyser多样品组织研磨机+液氮=问题轻松解决。以血管和植物叶片为例，具体操作方法如下： 血管： 取0.1克新鲜血管，用剪刀剪成若干小块，然后放入2毫升离心管中，加入1颗6mm研磨钢珠，盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾，然后放入机器处理30秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取缓冲液，可以进行接下来的后续提取，加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。 叶片： 取0.2克植物叶片，清洁叶片表面后放入离心管中，加入1颗直径5mm不锈钢研磨钢珠，盖上管盖。将整个试管和适配器放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾，然后取出放入研磨机器中机器处理30秒钟。取出样品管可见叶片被破碎成绿色粉末，然后加入提取缓冲液，进行接下来的后续提取即可，加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。后记 想入手这个神器，但又对研磨效果有所犹疑的小伙伴，现在上海净信部分研磨机产品可申请试用，是时候下手了。激动人心的还有，近期研磨机好价，试用爽了直接入手一台也是毫不含糊的。

条形酵母是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的。将有1mm的筛子扣入到装有10-20 ml球状酵母的50ml破碎罐的顶部，经过离心破碎变成了2L的条状物。压力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐内，条状可以在-80C°下被保存。 使用上海净信JXFSTPRP全自动样品快速研磨仪对酵母进行研磨，将不锈钢钢珠和样本分别装入研磨钢罐中，然后放入到用聚苯乙烯盒子盛放的液氮中，当预冷冻过程结束后，时间一分钟左右，或者直到原来沸腾的液体氮恢复平静，将破碎罐从液氮中取出，并要将破碎罐沾有的液体全部清理干净，以避免在破碎过程中发生爆炸。研磨钢罐最好用坩埚钳或大镊子夹取出来，而且通常要带经过冷冻的手套，冻伤以免。 研磨钢罐中酵母量不要太多，否则可能会研磨不充分，留有残渣，一般为研磨钢罐的1/3左右为宜，把刚从液氮中取出的钢罐安装在净信JXFSTPRP全自动样本快速研磨仪中，分5次进行研磨，设置频率55hz，20s，每次间隔都把研磨罐放入液氮中冷却。 在每次破碎后都要将破碎罐取下，放入到液氮中进行冷冻，当液氮不在沸腾时，可以将钢罐取出，破碎可以继续进行。 经过100秒的破碎后，我们通过显微镜观察可以发现95%的酵母已经达到破碎效果，用于下一步的实验过程。剩余的酵母可以储存，备用。研磨钢罐和钢珠都可重复利用，破碎罐和破碎球可以用温的乙醇清洗，放到干燥处贮存。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502051131_534361_2983531_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502051131_534362_2983531_3.jpg

TJ2011高通量组织研磨仪对植物叶片的液氮冷冻研磨实验处理材料：植物叶片 （水稻、玉米、小麦、草、蔬菜叶等）1 装物料：将植物叶片截成所需的小段，用镊子夹住，放入1.5/2ml的离心管管底，对离心管进行编号。现以24空离心管适配器为例；2 装研磨珠：每个离心管内装上1个5mm碳化钨（或氧化锆）研磨珠，或3mm碳化钨（或氧化锆）研磨珠5个；3 冷冻保存：将铝合金夹具夹住24孔，固定好，放到专业液氮盒中，加液氮冷冻，3-5分钟，充分冷冻夹具及管内样品。4 溶剂加入：如有需要，在每个离心管中，小心加入裂解液或其他溶剂；4 主机运转：设定转速与时间例如1500转/分钟 3min，点击Start5 研磨过程：在典型研磨时间（2~3min）内，研磨结束。可同时得到2*24=48个通量的样品；6 取下夹具，进行下一步实验。注意事项：在上夹具时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。TJ2011高通量组织研磨仪同时适用动物组织（骨骼、肌肉、内脏、毛发等）的研磨，高通量提取DNA/RNA。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202141110_349211_1812435_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202141110_349212_1812435_3.jpg