吸光值分光光度计

之前看板油写过，分光光度计可能被带紫外检测器的液相色谱替代，由此我想到了，很多人可能把分光光度计的测试停留在对溶液吸光值的测定方面。 其实分光光度计还有很多其他方面的强大功能，只是平时用的比较少而已。

今天的UV-2000分光光度计吸光值，不管怎么拉动卡位，不管什么波长，吸光值都是固定在3.010不变，请问各位大神，这是什么原因 ？怎样能解决这问题。。

722S紫外可见分光光度计测量吸光值的工作原理是怎样的？不同颜色对应多大的波长有什么规范吗？

一：吸光光度法基于物质对不同波长的光波具有选择性吸收的能力而建立起来的分析方法。（一） 光线：光线的波长： 200nm-400nm 紫外线*400-750nm可见光*750nm 红外线光具有波粒二相性，波长不同，其能量不同。（二） 物质的吸收光谱及颜色：1． 物质的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]和原子发射光谱：原子的最外层电子可以选择性吸收特征波长的电磁波成为激发态而产生的光谱称为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]。激发态原子恢复到基态，则释放出特征波长的光子，形成原子发射光谱。不同的溶液其光谱不同，即不同溶液对不同波长的光其吸收能力不同，对某一特定波长的光存在吸收峰。2． 可见光由赤橙黄绿青兰紫等能量不同的光线组成，当可见光穿过某一溶液时，由于特定波长的光被吸收而使溶液呈现相应的颜色。（如CuSO4由于吸收了可见光中的黄光(600nm)而成蓝色）不同颜色的溶液对不同波长的光其吸收能力不同。（三） 光吸收的基本定律（Lambert-Beer 定律）：一束平行单色光（Io）通过有色的透明溶液时，一部分的光可以透过溶液（It），另一部分被溶液吸收（Ia）,还有一部分被器皿表面反射（Ir）,则：Io=It+Ia+Ir 。那么，该溶液透光率为: T = It / Io 。1． Lambert 定律：设有一束平行单色光,通过液层厚度为b 的均匀透明溶液,则溶液对光的吸收能力:A=Ig(Io/It)=Ig(1/T)=k2bk2 为吸光系数，为常数。与入射光波长、溶液性质、浓度和温度有关；A 为吸光度（又称光密度O.D 或消光度E），当入射光波长、吸光溶液的浓度和温度一定时，A 与b 成正比。2． Beer 定律：设有一束平行单色光,通过浓度为c 的均匀透明溶液,则溶液对光的吸收能力:A=Ig(Io/It)=Ig(1/T)=k4ck2 为常数。由Beer 定律可知：当入射光波长、吸光溶液的厚度和温度一定时，A 与c 成正比。3． Lambert-Beer 定律：综合1.2.得： A=Kbc ,即：当入射光波长、吸光溶液的性质和温度一定时，A 与b、c 成正比。（四） 吸光光度法的基本原理：1、 不同物质，由于其分子结构和原子组成不同，故对光的吸收光谱不同（如：CuSO4），在测定不同颜色的物质浓度时要用最大吸收的波长的入射光，这样测量的灵敏度最高。2、 同一种物质，若浓度不同，则对同一波长的入射光的吸收能力（吸光度）也不同，且成正比关系。3、 应此，利用特定波长的单色光（通常用最大吸收波长的入射光）照射不同浓度的某一溶液时，所得的吸光度大小应与溶液浓度呈线性关系，故可利用该线性关系通过计算或查标准曲线来求得未知溶液的浓度。（五） 吸光光度法特点：1． 灵敏度高：mg%级、甚至ug%级。2． 准确度高：误差2-5%3． 操作简便、快速，仪器设备不复杂，价格低廉，故应用广泛。二 ：分光光度计的使用：（一） 分光光度计的基本原理：利用吸光光度法的原理，采用棱镜或光栅等分光器获得纯度较高的单色光来测量未知溶液的浓度的方法。（二） 常用分光光度计：可见光、紫外、红外分光光度计，荧光分光光度计，火焰分光光度计等。（三） 722 型分光光度计的结构（略）（四） 722 型分光光度计的使用及注意事项1、 插上插头，接通电源，打开暗箱盖，预热20min。* 注意：分光光度计在接通电源而不用时，必须打开暗箱盖，以免光电管老化。2、 将准备好的试剂倒入比色杯中，用吸水纸擦去比色杯外侧水珠，并依次放入比色杯架中。* 注意：手拿比色杯毛面，试剂倒入杯中满2/3 即可，不得将比色杯放在仪器上。3、 调节所需波长，灵敏度调至“1”，选择旋钮至“T”。4、 调“0”：打开暗箱盖，用调“0”旋钮调节。5、 调“100%”：盖上暗箱盖，用调“100%”旋钮调节，让光线通过“空白管”。6、 重复调“0”和调“100%”数次。* 注意：若调不到“0”和“100%”，可将灵敏度调至“2”或更高，不得用力强行旋转旋钮，以免损坏。7、 将选择选扭由“T”调至“A”，此时读数应由“100”至“0”，若不为“0”，可用“消光零”旋钮调节。8、 拉动拉杆，分别读取“A 标”和“A 样”。9、 取出比色杯，弃去溶液，洗净晾干，备用。（五） 计算1．利用标准管计算测定物含量：A 样=K 样b 样c 样A 标=K 标b 标c 标因为入射光的波长，溶液性质和温度以及比色杯的厚度都一样，即：K 样=K 标 b 样=b 标所以：A 样/ A 标= c 样/ c 标得：c 样= c 标×A 样/ A 标2． 利用标准曲线进行计算：3． 偏离Lambert-Beer 定律的原因1） 由于非但色光引起的偏离。2） 由于溶液本身原因引起的偏离：① 由于介质不均匀引起的偏离② 由于溶液中化学反应引起的偏离三：实验：CuSO4 浓度的测定C 标= 比色波长=650nm比色结果： A 标= A 样=计算：C 样=C 标*A 样/A 标

不同型号的紫外分光光度计用滤光片检定均合格！但是检测样品溶液时不同型号的仪器的吸光度值相差很大。为什么？[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005251138235092_9158_3442532_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005251138235922_5289_3442532_3.png[/img]

示差吸光光度法用什么样的分光光度计？可以直接用现有的普通分光光度计吗？还是需要对普通分光光度计进行改造？市场上有专门的示差分光光度计卖吗？

今天对淀粉样进行400-900nm光谱扫描，所得结果和文献上基本一致，但在波长为530左右时吸光度骤然下降，一直持续到423nm之后又升高。换了多个样品都是一样的趋势，让后自己在可见光分光度计上重复测了这一段波长的吸光度发现紫外可见光分光光度计比可见光光度计在这一波段的吸光值低了0.035左右。个人觉得是紫外可见分光光度计没调试好，或者是仪器有问题，但不知道该如何处理。。。。。

求助各位大哥大姐！　　工业级氟化锂中的金属离子怎样用原子吸光分光光度计（型号-北京瑞利wfx-110）分析，以及怎样前处理，金属离子包括（Ｆe、Ｃu、Ｎa、Ｋ、Ｃa、铝、Ｍg、Ｚn、Ｎi）

请问，只有有色物质才能用分光光度计测吸光度吗？

这次计量扩项，专家老师提出有部分原始记录分光光度的吸光度超过0.700，说是不是最佳响应范围。我想问下这个0.700以内的吸光度是分光光度计的最佳响应范围缘自何处？大家一起来讨论一下

在绘制吸收谱图时，比如紫外可见分光光度计，从光源到色散原件，再到比色皿，到检测器，检测器接受到的不是从紫外到可见光所有范围内的连续的光线么，我怎么知道我现在绘制的是哪个波长处的谱图呢，吸收光谱中波长和吸光度不是一一对应的么，这是怎么绘制出来的啊？再如色散型的红外光度计中波数的扫描具体是怎么完成的呢，光栅色散后的不是连续的光谱么，怎么知道现在绘制的是哪个波数的吸光度呢？

所用仪器：普析TAS-990貌似遇到了与火焰吸收分光光度计相同的问题，进浓度不同的标准样品，吸光度几乎不发生变化，进样时那个亮点也很不明显（石墨管换新的也是），不知道是不是光路或者哪里出了问题，请高手为我这个小白解答疑惑，谢谢！

双光束分光光度计的吸光度怎么算

分光光度计吸光度与什么有关

我的722E分光光度计为什么大部分波长下吸光度不能调零，只有480-560的波长下，吸光度才可以调零。是什么原因呢，求助！

茶饮料需要用紫外－可见分光光度计测定不同波长下的吸光值，目的为何呀？最近一直在做，很想了解一下，还望各位大侠指教。多谢啦！

分光光度计的用途之一是鉴定物质。用来测量待测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器，称为可见分光光度计；紫外可见分光光度计用来测量待测物质对可见光或紫外光(200～760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度，也可以测定细菌细胞密度。分光光度计的用途之二待测物质是标准物及标准图谱对照进行分析。分光光度计的用途之三是比较最大吸收波长吸收系数的一致性。分光光度计的用途之四是物质的纯度检验。分光光度计的用途之五是推测化合物的分子结构及构成。分光光度计的用途之六是判定络合物的组成及稳定常数的测定。

两台分光光度计，一台为7230G，一台是尤尼科的UV2100，同一个样品，7230测得的吸光度为0.481，而UV2100为0.516，哪位大虾知道什么原因吗？谢谢指教！

使用紫外分光光度计检测含量和溶出度前，都需要扫个最大吸收波长再测定吸光度吗？外标法和吸收系数法都要扫吗？有没有相关文件规定？

同一个样品，在不同的分光光度计上，按照正确的使用方法进行测量，吸光度一般不一致。除了测量重复性的问题外，就仪器而言，影响吸光度不准确的有哪些因素呢？ 波长的准确度不一致可能是一个原因，其他的还有什么？

分光光度计吸光度校正是用酸性重铬酸钾还是用碱性重铬酸钾？实验室好像都是用酸性的，但是环境监测人员基础知识技能培训教材习题中答案是用碱性的，两者有什么区别吗？[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006151615180161_8366_3889303_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006151615174767_1277_3889303_3.png[/img]

Display”鼠标显示为交叉线，用鼠标将交叉线放到曲线上某点即可显示该点的波长和吸光度值。　　13、点击“Label”可以在谱图上添加标签，可在其中输入文本以标记谱图。点击“Legend”出现各数据保存图，若在前面框里勾选该光谱数据，则在左面重叠图上显示其曲线。　　14、若从右键快捷菜单中选择“Customize(自定义)”，可以自定义曲线显示颜色还可定义坐标轴的数值。　　15、得出曲线后可以对谱图进行一系列的处理。　　(1)点击“DataPrint(显示数据)”图标可以将谱图曲线直接显示为数值。　　(2)点击“Manipulate(运算)”图标，可以进行加减乘除、差谱、扣除空白、倒数光谱、对数光谱等处理。　　(3)点击“PeakPoint(显示峰值)”按钮显示“波峰”和“波谷”的数值。　　(4)点击“PointPick”图标，输入要显示的波长值，立即显示出所输入波长处的吸光度值。　　(5)点击“PeakArea”，设定峰阈值，即显示大于此阈值的峰区域。　　(6)点击“Sewingbox(裁缝)”图标，可以进行谱图的裁剪和缝合。　　16、曲线扫描完成后数据实际直接保存在内存中，并没有保存到硬盘上，此时若关闭窗口，电脑会提示“Some Spectrum data has not been saved!Do you still want to exit and lostunsaved change?(还有光谱数据尚未保存，你是要离开而不保存数据吗?)”选择“No”返回主界面保存所有数据。两篇相关资料，感觉不错：《分光光度计标准操作规程(SOP)》 《紫外/可见分光光度计系统的使用方法》　　六、注意事项　　1、光度计灯源寿命有限，若长时间不测量，应通过UVProbe软件断开连接(点击“Disconnect”)，然后关闭光度计电源。　　2、使用分光光度计时要保证样品室绝对干净，小心放入样品，放入比色皿前一定要先用滤纸和擦镜纸将比色皿外表面擦干净，不要污染样品池和光度计外表面。　　3、仪器自检和扫描的过程中，不要打开样品室盖。　　4、软件不会自动保存数据，所有的数据要保存都必须点击“Save”或者“SaveAs”进行另存。否则数据会丢失。　　5、认真填写贵重仪器使用记录。　　七、思考题　　1.干扰测定结果的因素有哪些?　　2.为了更好的维护和保养仪器，我们在使用的过程中应该注意哪些方面?

原子吸收分光光度计怎么才能使空白吸光度一直为正值

GB/T 6682-2008规定，要达到一级水的要求，其中水的吸光度（254nm，1cm光程）要求小于等于0.001。现在我刚买了一台上海仪电分析的型号752N的紫外可见分光光度计，但它的读数最小只能是0.001，按我的想法，要满足要求，仪器应该可以直接读出譬如0.0009这样的值才是可以的吧！那我买的仪器应该是不能用于测一级水了吧！我的问题是：1、一般测出来的值，是多少？2、网上查了很多紫外可见分光光度计的吸光度测量范围，都是写-0.300A~3.999A，请问这种仪器能用于测量么？ 是否有的紫外可见分光光度计的吸光度测量范围会是-0.3000A~3.9999A的呢？3、我想买一台仪器用于测量，什么仪器能满足要求？请知道的朋友介绍一下！拜托了！感激不尽！

大家觉得有时候分光光度计有很多不足之处吧，比方说有一些物质的吸光度是很相似的，可能在测定结果上存在不足啊。。。

请教大虾一个问题，我今天用紫外光分光光度计测吸光度得出了好几组负值，不知道正常不正常？出现问题的原因我怎么也找到!!

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。