研究型相差显微镜

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研究型相差显微镜相关的厂商

  • 400-860-5168转3750
    企业概况英国工业显微镜有限公司是一家专业从事开发和生产人机工学的体视显微镜和非接触式测量系统的制造厂商。自1958年创立以来,英国Vision已成为世界上最具有创新活力的显微镜制造厂商,其分支机构遍及欧亚及北美。 世界各地的工程人员和科学家广泛地使用着我们的产品系统来从事他们在工业领域以及生物工程的日常的放大、检测和测量应用。迄今为止,已在全球各地安装 超过30万套设备系统。 英国Vision主要的生产基地设立在英国伦顿南部的沃京。商业运行及生产装配部门也设立在附近的厂房。英国Vision的北美生产分部设立在美国康州丹堡丽市,并在美国东岸和西岸的独立机构进行直销和分销网络运作。 本公司分别在日本、中国、法国、德国、意大利、以及比利时-荷兰-卢森堡经济联盟等国家建立了多个分支机构,此外加上由120多个拥有库存并经过专业技术培训的分销代理商所组成的服务网络,在所有其它发达国家里为企业提供解决问题的应用方案。同时我们根据发展,不断地扩大新代理的加盟机会。 出口和分销渠道英国Vision的产品出口占总产值的80%%以上,所以我们认识健全分销渠道的重要性。在1991 年,英国Vision荣获出口成就的英女皇奖。公司获得的其他荣誉还包括:1997年度科技创新的威尔士亲王奖和 1974 年度技术成就的英女皇奖。**的光学技术 英国Vision所拥有的世界**光学技术改变了在传统双目显微镜上安装目镜的必要。这些技术来源于采用英国Vision的高能光学(Dynascope)装置、扩大光瞳和宽阔成像光学系统、以及先进的人-机工学所带来的舒适使用、光学的清晰度、和减轻眼部疲劳。这一系列的功能改善了客户的生产效益和产品质量。Vision 的 Mantis 体视观察器在各行业得以广泛采用的实例可说明无目镜光学技术的优势效益。 在1994 年推出的第一代Mantis体视观察器主要是填补台式放大镜与显微镜之间的空白。 从此Mantis 就成了所有体视观察器的首选,超过13 万套的Mantis设备已在全球安装使用。 英国Vision的新一代Mantis系列产品于2005年开始在各行业里使用,它秉承原型产品的实用价值,并融合人机工学以进一步优化Mantis的设计。 产品研发近年来,大量的研发投入已成为取得 成功的关键,它确保了新产品和现有产品的持续的发展,以不断满足科学界和制造领域的需求。英国Vision不断地以研发新产品和新技术在光学革新和技术前沿引领全球。
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  • 400-878-6829
    帕克(Park)公司的创始人是世界上第一台原子力显微镜发明组的一员,1986年研制了世界首台商用原子力显微镜,一直致力于原子力显微镜技术的开发与应用,帕克(Park)在原子力显微镜的发展过程中一直占有重要的一席之地。本公司作为纳米显微镜和计量技术领域的领导革新者,一直致力于新兴技术的开发。我们的总部遍及中国大陆,宝岛台湾,韩国,美国,日本,新加坡和德国等地,我们为研究领域和工业界提供世界上最精确,最高效的原子力显微镜。我们的团队正在坚持不懈的努力,力求满足全球科学家和工程师们的需求。随着全球显微镜市场的迅速增长,我们将持续创新,不断开发新的系统和功能,确保我们的产品始终得到最有效最快捷的使用!Park产品主要有以下特点: 1.非接触工作模式:全球唯一一家真实实现非接触式测量模式的原子力显微镜厂家,非接触模式使原子力针尖磨损大大降低,延长了探针寿命,提高了测量图像的重复性; 2.高端平板扫描器:所有产品型号均采用的高端平板扫描器,远远优于传统的管式扫描器 3.全球最高的测量精度:Z轴精度可达0.02nm; 4.智能扫描Smartscan:仪器操作极其简单,可实现自动扫描,对操作者无特殊要求,并且有中文操作界面; 5.简单的换针方式:换针非常方便,采用磁拖直接吸上即可,不需调整激光光斑; 6.Park拥有全球最广泛的工作模式:可用于光学,电学,热学,力学,磁学,电化学等方面的研究与测试。
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  • 原FEI公司,2016年被赛默飞世尔科技收购,成为赛默飞材料与结构分析(MSD) 电镜事业部,是显微镜和微量分析解决方案的创新者和供应商。 我们提供扫描电子显微镜SEM,透射电子显微镜TEM和双束-扫描电子显微镜DualBeam?FIB-SEM,结合先进的软件套件,运用最广泛的样本类型,通过将高分辨率成像与物理、元素、化学和电学分析相结合,使客户的问题变成有效可用的数据。更多信息可在公司官网上找到:http://thermofisher.com/EM 或扫描二维码,关注我们的微信公众号
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研究型相差显微镜相关的仪器

  • 倒置相差显微镜NIB410 400-860-5168转5067
    临床级倒置相差显微镜NIB4101、3WLED透射照明机型(内置复眼透镜)、LED荧光反射机型; 2、无限远平场消色差物镜:相衬物镜(适用相衬机型)、荧光物镜(适用荧光机型)、霍夫 曼专用物镜; 3、通用相衬滑板:10X、20X、40X物镜共用同一相衬环,更换倍率时不必调节相衬滑板; 4、3工位转盘式荧光装置,与LED荧光光源联动设计; 5、长工作距离聚光镜(NA=0.30 WD=75mm); 6、通用托板:适用于Terasaki板、载玻片、Φ35-65培养皿等多种托架。可实现观察方式:明场、相衬、霍夫曼调制相衬、 浮雕反差、荧光放大倍数:40X、100X、200X、400X; 相衬装置:4x / 10x、20x、40x可调心型相衬滑板;通用托架:可放置通用Terasaki板、载玻片、Φ35-65培养皿; 透射照明:3W S-LED临界照明;临床级倒置相差显微镜NIB410常规参数:1、主要功能:可以用于明场、相衬等多种观察方式; 2、光学系统:NIS60无限远平场消色差光学系统; 3、观察头:一体式铰链式双目观察镜筒,45度倾斜,瞳距48-75mm;可选购1×、0.5× C型接口摄像端口,目镜/端口 100/0∶0/100; 4、目镜:大视野目镜10X,Ф22视场,高眼点,-5~+5视度可调; 5、物镜:平场消色差相衬物镜,在多种照明模式下都能得到高性噪比、高分辨率以及高反差的成像效果 4X NA=0.1 WD=30 10X NA=0.25 WD=10.2 20X NA=0.4 WD=12 40X NA=0.6 WD=2.2 6、转换器:五孔物镜转换器; 7、载物台:平板载物台:170(X)×250(Y)mm,带载物台插入圆板,可选加长托板; 8、机械移动尺,行程:128(X)×80(Y),兼容五种微型实验板,多孔板夹和载物台夹,带通用托板:适用于Terasaki板、载玻片、Φ35-65培养皿等多种托架; 9、调焦方式:粗微动同轴调焦,右手具有粗动松紧调整功能;微动0.002mm/格,0.2mm/圈;粗动37.7mm/圈,物镜转盘上下行程:上7mm下1.5mm,去限位最高 可至18.5mm; 10、聚光镜:长距聚光镜,数值孔径0.3,工作距离75mm,去掉聚光镜可实现工作距离187mm; 11、相衬系统:聚光镜处配置10×、20×、40×通用相衬滑板,4×相衬(可选); 12、照明系统:3W S-LED照明,亮度可调;广州市明慧科技有限公司是一家致力于光学显微镜集研发、生产、销售于一体的企业,凭借公司技术人员对光学系统的专业知识,为客户提供专业的显微镜解决方案,提供高质量、高性价比的光学显微镜、光学成像和光学实验设备。公司主营明慧、耐可视、奥林巴斯品牌等显微镜,产品类型有:生物显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、体视显微镜、显微镜相机、荧光模块及显微镜配件等显微成像产品。产品品类丰富,均为行业内的高新技术产品专注生物与工业显微镜的研发、生产和市场营销。我们的客户范围覆盖各高校、研究所、医疗单位,工厂企业等不同领域,与多家高校建立了稳定的产学研合作关系,将传统、单纯的光学设计与更加智能的现代技术相融合,为中国的广大科学仪器用户提供各种光学仪器和技术解决方案,显微观察效果表现相当,在行业内形成良好的口碑,在显微镜领域给用户提供更贴心、更丰富、更智能的产品。
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  • 一体化倒置相差显微镜KOSTER IMC 800TiKOSTER IMC 800Ti型专门为实验室细胞房设计的一款直接连接显示屏的倒置相差显微镜,采用优良的无限远光学系统,提供卓越的光学性能。流线型的设计理念,紧凑稳定的高刚性主体,充分体现了显微操作的防振要求,同时采用一体化设计,可以节省实验室空间,操作简便,尤其适合常规实验室细胞房检测和拍摄细胞需要。超长工作距离聚光系统可对高培养皿或圆筒状烧瓶进行无沾染培养细胞观察,照明系统充分考虑散热性与安全性,人机工程学设计理念,使操作更方便舒适安全,空间更广阔。相衬装置可附加在光路中,以实现相衬显微观察。本仪器可对细胞组织,透明液态组织进行显微观察,也可对培养皿中的培养组织进行动态显微观察,可应用于科研院所、高等院校、医疗卫生、检验检疫、农牧乳业等部门细胞房常规使用。 IMC-800T生物倒置显微镜高性能长工作距离物镜高质量的明场相差细胞观察功能KMC 200HC高速科研级相机IPS 11.6英寸高清LCD显示屏KOSTER Image Suite 1.0专业应用软件可扩展高精度一体化的活细胞培养装置 高质量的相差物镜及相差环设计,便于活细胞观察及图像记录; KOSTER高分辨率数码摄像头KMC-200HC通过200万像素、1/2.8英寸、高速的KMC 200H CMOS数码成像系统,拍摄速度可以达到60幅/秒,尤其适合活细胞动态观察 KMC 200H数码成像系统含用整合的操作控制界面及离线分析软件,具有TIFF等多重图像格式存储,便于数据整理。KOSTER Image Suite 1.0应用软件是匹配KOSTER系列显微镜及摄像头的显微图像软件,采用模块化设计,包括图像预览、采集、分析、处理、共享、时间序列拍摄、多重图像叠加、形态学参数测量等功能,带给用户最新的图像处理体验。图像软件功能包括:图像采集、图像处理、定时拍摄、形态学参数测量、数据导出等,同时支持TIFF,JPG,BMP等多种图像输出格式,兼容Image J, FIJI等第三方图像处理软件,方便图像数据编辑整理。 技术规格主要参数总放大倍数40X~400X(标准配置)机械筒长∝物镜共轭距离∝目 镜平视场大视野目镜WF 10X视场:Ф22mm目镜接口Ф30mm齐焦距离10mm对中望远镜目镜筒45°倾斜,双目瞳距调节范围:48~75mm,眼点高度从台面起高为400mm。明场物镜放大倍率数值孔径工作距离(mm)盖玻片厚度(mm)备注10X0.254.271.220X0.408.01.240X0.603.51.2相衬物镜10X0.254.271.2标“PHP2”转换器五孔转换器调焦机构粗微动同轴, 微动格值:2μ, 粗动松紧可调,带锁紧和限位装置,有效调焦行程11mm聚光镜长工作距离聚光镜,工作距离70mm,带插板式相衬装置 载物台移动范围(横向X纵向):112mmX79mm, 移动尺可拆卸培养皿托板86mm(宽)X129.5mm(长),可适配圆形培养皿Ф87.5mm34mm(宽)X77.5mm(长),可适配圆形培养皿Ф68.5mm57mm(宽)X82mm(长)相衬系统 相位相衬拉板式相衬聚光镜,相衬环中心可调照明系统9W LED,亮度可调滤色片磨砂玻璃,蓝滤色片调校工具内六角扳手(M4、M5) 暨南大学客户装机
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  • NE600系列显微镜专为生物实验室及显微镜教学等各类显微观察需求设计。具有优秀的光学品质,视场范围大,物镜性能优,成像清晰、可靠。人体工程学设计,提供更好的舒适度和使用体验,可以实现明场、暗场、相衬、荧光等各种观察方式。智能化设计贯穿始终,显微镜教学更加灵活,教学效果更好。维护成本低,绿色环保。NE600相差显微镜观察支原体相差显微镜常用于观察未染色的活体细胞,相差显微镜常用于观察未染色的活体细胞,如支原体等。其原理是将光程差产生的相位差转变为振幅差,从而观察到细胞的微细结构。NE600系列显微镜技术规格:型号NE610NE620光学系统无限远光学系统目镜金属10x(22)观察头无限远,铰链式双目观察镜筒,30度倾斜,瞳距47-78mm无限远,铰链式三目目观察镜筒,30度倾斜,瞳距47-78mm,分光比5:5无限远,铰链式三目目观察镜筒,30度倾斜,瞳距47-78mm,分光比100:0/0:100有线数码头,内置500万无线数码头,内置500万物镜4X(N.A=0.10,W.D≥30mm);10X(N.A=0.25,W.D≥10.2mm);40X(N.A=0.65,W.D≥1.5mm);100X(N.A=1.25,W.D≥0.20mm)转换器内向式五孔转换器--内向式五孔转换器(编码式)同步带平台同步带平台尺寸230*150,移动范围78*54(双切片)--平台尺寸230*150,移动范围78*54(双切片),硬质氧化平台板-玻璃台板-蓝宝石台板聚光镜插入式阿贝聚光镜 NA1.25明场-相衬插板(10x-40x通用)明场-暗场插板调焦系统粗微动同轴,粗动37.7mm/圈,微动0.2mm/圈,0.002mm/格,升降范围30mm照明1W LED--3W SLED(液晶屏显示倍率、定时休眠、亮度指示及锁定等)荧光附件2波段,明场(B、G),3W LED ,电源适配器供电-2波段,明场(U、V),3W LED ,电源适配器供电--2波段,明场(B、G),3W LED ,显微镜主机供电-2波段,明场(U、V),3W LED ,显微镜主机供电其他附件1x摄像附件0.54x摄像附件简易偏光附件T6-CCD摄像头APP软件滤色片绿色
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研究型相差显微镜相关的资讯

  • 苏州市独墅湖医院预算1100万元购买生物相差显微镜等多台仪器
    4月6日,苏州市独墅湖医院关于生殖中心实验室设备的公开招标,购买生物相差显微镜、三气培养箱等多台仪器,总预算1100万元。 项目编号:SZWK2021-Y-G-002-001-A号  项目名称:生殖中心实验室设备  采购需求:  (1)采购清单:序号设备名称数量是否接受进口产品投标1IVF工作站(双人)1是2IVF工作站(单人)1是3ICSI工作站(纺锤体观察配置)1是4ICSI工作站(激光破膜配置)1是5桌面多腔室三气培养箱4是6台式培养箱2是7三气培养箱2是8二氧化碳培养箱(50L)2是9二氧化碳培养箱(170L)2是10二氧化碳浓度检测仪2是11时差培养箱1是12生物相差显微镜2是13实验室空气净化系统2是14生殖中心管理系统1否15实验室安全管理系统1否  (2)采购标的的具体内容及服务主要标准、要求:  本项目采购生殖科设备一批,所有设备免费质保期要求≥3年,终身维修。保修期内根据客户需要提供免费保养服务,软件终身免费升级 质保期自设备经验收合格之日起计算,终身负责维修,保证零配件的供给,并满足客户对于配套服务的需求。  开标时间:2021年4月27日14:00(北京时间)
  • 光学显微镜技术和应用简介
    自然界中一些最基本的过程发生在微观尺度上,远远超出了我们肉眼所能看到的极限,这推动了技术的发展,使我们能够超越这个极限。早在公元4世纪,人们发现了光学透镜的基本概念,并在13世纪,人们已经在使用玻璃镜片,以提高他们的视力和放大植物和昆虫等对象以便更好地了解他们。随着时间的推移,这些简单的放大镜发展成为先进的光学系统,被称为光学显微镜,使我们能够看到和理解超越我们感知极限的微观世界。今天,光学显微镜是许多科学和技术领域的核心技术,包括生命科学、生物学、材料科学、纳米技术、工业检测、法医学等等。在这篇文章中,我们将首先探讨光学显微镜的基本工作原理。在此基础上,我们将讨论当今常用的一些更高级的光学显微镜形式,并比较它们在不同应用中的优缺点。    什么是光学显微镜?  光学显微镜用于通过提供它们如何与可见光相互作用(例如,它们的吸收、反射和散射)的放大图像来使小结构样品可见。这有助于了解样品的外观和组成,但也使我们能够看到微观世界的过程,例如物质如何跨细胞膜扩散。  显微镜的部件以及光学显微镜的工作原理  从根本上说,显微镜包括两个子系统:一个用于照亮样品的照明系统和一个成像系统,该系统产生与样品相互作用的光的放大图像,然后可以通过眼睛或使用相机系统进行观察。  早期的显微镜使用包含阳光的照明系统,阳光通过镜子收集并反射到样品上。今天,大多数显微镜使用人造光源,如灯泡、发光二极管(LED)或激光器来制造更可靠和可控的照明系统,可以根据给定的应用进行定制。在这些系统中,通常使用聚光透镜收集来自光源的光,然后在聚焦到样品上之前对其进行整形和光学过滤。塑造光线对于实现高分辨率和对比度至关重要,通常包括控制被照亮的样品区域和光线照射到它的角度。照明光的光学过滤,使用修改其光谱和偏振的光学过滤器,可用于突出样品的某些特征。图1:复合显微镜的基本构造:来自光源的光使用镜子和聚光镜聚焦到样品(物体)上。来自样品的光被物镜收集,形成中间图像,该图像由目镜再次成像并传递到眼睛,眼睛看到样品的放大图像。  成像系统收集与样品相互作用的照明光,并产生可以查看的放大图像(如上图1)。这是使用两组主要的光学元件来实现的:首先,物镜从样品中收集尽可能多的光,其次,目镜将收集的光中传递到观察者的眼睛或相机系统。成像系统还可包括诸如选择来自样品的光的某些部分的孔和滤光器之类的元件,例如仅看到已从样品散射的光,或仅看到特定颜色或波长的光。与照明系统的情况一样,这种类型的过滤对于挑出某些感兴趣的特征非常有用,这些特征在对来自样本的所有光进行成像时会保持隐藏。  总的来说,照明和成像系统在光学显微镜的性能方面起着关键作用。为了在您的应用中充分利用光学显微镜,必须充分了解基本光学显微镜的工作原理以及当今存在的变化。  简单复合显微镜  单个镜头可以用作放大镜,当它靠近镜头时,它会增加物体的外观尺寸。透过放大镜看物体,我们看到物体的放大和虚像。这种效果用于简单的显微镜,它由单个镜头组成,该镜头对夹在框架中并从下方照明的样品进行成像,如下图2所示。这种类型的显微镜通常可以实现2-6倍的放大倍率,这足以研究相对较大的样本。然而,实现更高的放大倍率和更好的图像质量需要使用更多的光学元件,这导致了复合显微镜的发展(如下图3)。图2:通过创建靠近它的物体的放大虚拟图像,将单个镜头用作放大镜。图3:左:简单显微镜。右:复合显微镜。  在复合显微镜中,从底部照射样品以观察透射光,或从顶部照射样品以观察反射光。来自样品的光由一个由两个主要透镜组组成的光学系统收集:物镜和目镜,它们各自的功率倍增,以实现比简单显微镜更高的放大倍率。物镜收集来自样品的光,通常放大倍数为40-100倍。一些复合显微镜在称为“换镜转盘(nose piece)”的旋转转台上配备多个物镜,允许用户在不同的放大倍数之间进行选择。来自物镜的图像被目镜拾取,它再次放大图像并将其传递给用户的眼睛,典型的目镜放大率为10倍。  可以用标准光学显微镜观察到的最小特征尺寸由所使用的光学波长(λ)和显微镜物镜的分辨率决定,由其孔径数值(NA)定义,最大值为NA =1空中目标。定义可区分的最小特征尺寸(r)的分辨率极限由瑞利准则给出:  r=0.61×(λ/NA)  例如,使用波长为550nm的绿光和典型NA为0.7的物镜,标准光学显微镜可以分辨低至0.61×(550nm)/0.7≈480nm的特征,这足以观察细胞(通常为10µm大小),但不足以观察较小生物的细节,例如病毒(通常为250-400nm)。要对更小的特征成像,可以使用具有更高NA和更短波长的更先进和更昂贵的物镜,但这可能不适用于所有应用。  在标准复合显微镜(如下图4a)中,样品(通常在载玻片上)被固定在一个可以手动或电子移动以获得更高精度的载物台上,照明系统位于显微镜的下部,而成像系统高于样本。然而,显微镜主体通常也可以适应特定用途。例如,立体显微镜(如下图4b)的特点是两个目镜相互成一个小角度,让用户可以看到一个略有立体感的图像。在许多生物学应用中,使用倒置显微镜设计(如下图4c),其中照明系统和成像光学器件都在样品台下方,以便于将细胞培养容器等放置在样品台上。最后,比较显微镜(如下图4d)常用于法医。图4:复合显微镜。a)标准直立显微镜指示(1)目镜,(2)物镜转台、左轮手枪或旋转鼻镜(用于固定多个物镜),(3)物镜、调焦旋钮(用于移动载物台)(4)粗调,(5)微调,(6)载物台(固定样品),(7)光源(灯或镜子),(8)光阑和聚光镜,(9)机械载物台。b)立体显微镜。c)倒置显微镜。  光学显微镜的类型  下面,我们将介绍一些当今可用的不同类型的光学显微镜技术,讨论它们的主要操作原理以及每种技术的优缺点。  亮视野显微镜  亮视野显微镜(Brightfield microscopy,BFM)是最简单的光学显微镜形式,从上方或下方照射样品,收集透射或反射的光以形成可以查看的图像。图像中的对比度和颜色是因为吸收和反射在样品区域内变化而形成的。BFM是第一种开发的光学显微镜,它使用相对简单的光学装置,使早期科学家能够研究传输中的微生物和细胞。今天,它对于相同的目的仍然非常有用,并且还广泛用于研究其他部分透明的样品,例如透射模式下的薄材料(如下图5),或反射模式下的微电子和其他小结构。图5:亮视野显微镜。左图:透射模式-在显微镜下看到的石墨(深灰色)和石墨烯(最浅灰色)薄片。在这里,图像上看到的亮度差异与石墨层的厚度成正比。右图:反射模式-SiO2表面上的石墨烯和石墨薄片,小的表面污染物也是可见的。  暗视野显微镜  暗视野显微镜是一种仅收集被样品散射的光的技术。这是通过添加阻挡照明光直接成像的孔来实现的,这样只能看到被样品散射的照明光。通过这种方式,暗场显微镜突出显示散射光的小结构(如下图6),并且对于揭示BFM中不可见的特征非常有用,而无需以任何方式修改样品。然而,由于在最终图像中看到的唯一光是被散射的光,因此暗场图像可能非常暗并且需要高照明功率,这可能会损坏样品。  图6:亮视野和暗视野成像。a)亮视野照明下的聚合物微结构。b)与a)中结构相同的暗视野图像,突出显示边缘散射和表面污染。c)与a)和b)相似的结构,被直径为100-300nm的纳米晶体覆盖。仅观察到纳米晶体散射的光,而背景光被强烈抑制。  相差显微镜  相差显微技术(Brightfield microscopy,PCM)是一种可视化由样品光路长度变化引起的光学相位变化的技术.这可以对在BFM中产生很少或没有对比度的透明样品进行成像,例如细胞(如下图7)。由于肉眼不易观察到光学相移,因此相差显微镜需要额外的光学组件,将样品引起的相移转换为最终图像中可见的亮度变化。这需要使用孔径和滤光片来操纵照明系统和成像系统。这些形状和选择性地相移来自样品的光(携带感兴趣的相位信息)和照明光,以便它们建设性地干涉眼睛或检测器以创建可见图像。图7:人类胚胎干细胞群落的相差显微图像。  微分干涉显微镜  与PCM类似,微分干涉显微镜(differential interference contrast microscopy,DICM)通过将由于样品光路长度变化引起的光学相位转换为可见对比度,从而使透明样品(例如活的未染色细胞)可视化。然而,与PCM相比,DICM可以实现更高分辨率的图像,并且减少了由PCM所需的光学器件引入的清晰度和图像伪影。在DICM ,照明光束被线性偏振器偏振,其偏振旋转,使其分裂成两个偏振光束,它们具有垂直偏振和小(通常低于1µm)间隔。穿过样品后,两束光束重新组合,从而相互干扰。这将创建一个对比度与图像成正比的图像差在两个偏振光束之间的光相位,因此命名为“差”干涉显微镜。DICM产生的图像出现与采样光束之间的位移方向相关的三维图像,这导致样品边缘具有亮区或暗区,具体取决于两者之间的光学相位差的符号(如下图8)。图8:微分干涉对比显微镜。左:DICM的原理图。右图:通过DICM成像的活体成年秀丽隐杆线虫(C.elegans)。  偏光显微镜  在偏振光显微镜中,样品用偏振光照射,光的检测也对偏振敏感。为了实现这一点,偏振器用于控制照明光偏振并将成像系统检测到的偏振限制为仅一种特定的偏振。通常,照明和检测偏振设置为垂直,以便强烈抑制不与样品相互作用的不需要的背景照明光。这种配置需要一个双折射样品,它引入了照明光偏振角的旋转,以便它可以被成像系统检测到,例如,观察晶体的双折射以及它们的厚度和折射率的变化(如下图9)。图9:偏光显微镜。橄榄石堆积物的显微照片,由具有不同双折射的晶体堆积而成。整个样品的厚度和折射率的变化会导致不同的颜色。  荧光显微镜  荧光显微镜用于对发出荧光的样品进行成像,也就是说,当用较短波长的光照射时,它们会发出长波长的光。示例包括固有荧光或已用荧光标记物标记的生物样品,以及单分子和其他纳米级荧光团。该技术采用了滤光片的组合,可阻挡短波长照明光,但让较长波长的样品荧光通过,因此最终图像仅显示样品的荧光部分(如下图10)。这允许从由许多其他非荧光颗粒组成的样品中挑出和可视化荧光颗粒或已被染料染色的感兴趣细胞的分布。同时,荧光显微镜还可以通过标记小于此限制的粒子来克服传统光学显微镜的分辨率限制。例如,可以用荧光标记标记病毒以显示其位置在生物样品的情况下,可以表达荧光蛋白,例如绿色荧光蛋白。结合各种新颖形式的样品照明,荧光显微镜的这一优势实现了“超分辨率”显微镜技术,打破了传统光学显微镜的分辨率限制。荧光显微镜的主要限制之一是光漂白,其中标记物或颗粒停止发出荧光,因为吸收照明光的过程最终会改变它们的结构,使它们不再发光。图10:荧光显微镜。左:工作原理-照明光由短通激发滤光片过滤,并由二向色镜反射到样品。来自样品的荧光通过二向色镜,并被发射滤光片额外过滤以去除图像中残留的激发光。右图:有机晶体中分子的荧光图像(晶体轮廓显示为黄色虚线)。由于来自其他分子和晶体材料的荧光,背景并不完全黑暗。  免疫荧光显微镜  免疫荧光显微镜是主要用于在微生物的细胞内的生物分子可视化的位置荧光显微镜的具体变化。在这里,用荧光标记物标记或固有荧光的抗体与感兴趣的生物分子结合,揭示它们的位置。(如下图11)图11:免疫荧光显微镜。肌动蛋白丝(紫色)、微管(黄色)和细胞核(绿色)的免疫荧光标记的两个间期细胞。  共聚焦显微镜  共聚焦显微镜是一种显微镜技术,它可以逐点成像来自样品的散射或荧光。不是一次对整个样品进行照明和成像,而是在样品区域上扫描源自点状光源的照明点,敏感检测器仅检测来自该点的光,从而产生2D图像。这种方法允许以高分辨率对弱信号样本进行成像,因为来自采样点之外的不需要的背景信号被有效抑制。在这里,所使用的波长和物镜在所有三个维度上都限制了成像光斑的大小。这允许通过将物镜移动到距样品不同的距离,在样品内的不同深度处制作2D图像。然后可以组合这些2D图像“切片”以创建样本的3D图像,这是所讨论的其他宽视场显微镜技术无法实现的,并且还允许以3D方式测量样品尺寸。这些优势的代价是无法一次性拍摄图像,而是必须逐点构建图像,这可能非常耗时并阻碍样本的实时成像(如下图12)。图12:单分子荧光的共聚焦荧光图像。小点对应于单个分子的荧光,而较大的点对应于分子簇。此处的荧光背景比简单的荧光显微镜图像弱得多,如亮点之间的暗区所见。  双光子显微镜  双光子显微镜(Two-photonmicroscopy,TPM)是荧光显微镜的一种变体,它使用双光子吸收来激发荧光,而不是单光子激发。在这里,通过吸收两个光子的组合来激发荧光,其能量大约是单个光子激发所需能量的一半。例如,在该方案中,通常由单个蓝色光子激发的荧光团可以被两个近红外光子激发。在TPM中,图像是逐点建立的,就像在共聚焦显微镜中一样,也就是说,双光子激发点在样品上扫描,样品荧光由灵敏的检测器检测。与传统荧光显微镜相比,激发和荧光能量的巨大差异导致了多重优势:首先,它允许使用更长的激发波长,在样品内散射较少,因此穿透更深,以允许在其表面下方对样品进行成像并创建3D样品图像。同时,由于激发能量低得多,光漂白大大减少,这对易碎样品很有用。激发点周围的荧光背景也大大减少,因为有效的双光子吸收仅发生在激发光束的焦点处,因此可以观察到来自样品小部分的荧光(如下图13)。  TPM的一个缺点是双光子吸收的概率远低于单光子吸收,因此需要高强度照明,如脉冲激光,才能达到实用的荧光信号强度。图13:双光子显微镜。花粉的薄光学切片,显示荧光主要来自外层。  光片显微镜  光片显微技术是荧光显微术的一种形式,其中样品被垂直于观察方向的薄“片”光照射,从而仅对样品的薄切片(通常为几微米)进行成像。通过在样品在光片中旋转的同时拍摄一系列图像,可以形成3D图像。这要求样品大部分是透明的,这就是为什么这种技术通常用于形成小型透明生物结构的3D图像,例如细胞、胚胎和生物体。(如下图14)图14:光片显微镜。左:工作原理。右:通过荧光成像用光片显微镜拍摄的小鼠大脑的荧光图像。  全内反射荧光显微镜  全内反射荧光(Totalinternal reflection fluorescence microscopy ,TIRF)是一种荧光显微技术,可通过极薄(约100nm厚)的样品切片制作2D荧光图像。这是通过照明光的渐逝场激发样品的荧光来实现的,当它在两种不同折射率(n)的材料之间的边界处经历全内反射时就会发生这种情况。消逝场具有与照明光相同的波长,但与界面紧密结合。在TIRF显微镜中,激发光通常在载玻片(n=1.52)和样品分散的水介质(n=1.35)之间的界面处发生全内反射。渐逝场的强度随距离呈指数下降来自界面,这样在最终图像中只能观察到靠近界面的荧光团。这也导致来自切片外区域的荧光背景的强烈抑制,这允许拾取微弱的荧光信号,例如在定位单个分子时。这使得TIRF非常适用于观察参与细胞间相互作用的荧光蛋白(如下图15)的微弱信号,但也需要将样品分散在水性介质中,这可能会限制可以测量的样品类型。图15:TIRF图像显示培养的视网膜色素上皮细胞中的蛋白质荧光。每个像素对应67nm。  膨胀显微镜  膨胀显微镜背后的基本概念是增加通常需要高分辨率显微镜的样品尺寸,以便可以使用标准显微镜技术(尤其是荧光显微镜)对其进行成像。这适用于保存的标本,例如生物分子、细胞、细菌和组织切片,可以使用下图16中所示的化学过程在所有维度(各向同性)均匀扩展多达50倍。扩展样本可以隔离感兴趣的个别特征通常是隐藏的,可以使它们透明,从而可以对它们的内部进行成像。图16:膨胀显微镜的样品制备。细胞首先被染色,然后连接到聚合物凝胶基质上。然后细胞结构本身被溶解(消化),使染色的部分随着凝胶各向同性地膨胀,从而使染色的结构更详细地成像。  光学显微镜中的卷积  除了使光学系统适应特定用例之外,现代光学显微镜还利用了数字图像处理,例如图像去卷积。该技术通过补偿光学系统本身固有的模糊,可以提高空间分辨率以及光学显微镜拍摄图像的定位精度。这种模糊可以在校准步骤中测量,然后可以用于对图像进行去卷积,从而减少模糊。通过将高性能光学元件与先进的图像处理相结合,数字显微镜可以突破分辨率的极限,以更深入地观察微观世界。(如下图17)图17:图像解卷积。左:原始荧光图像。右:解卷积后的图像,显示细节增加。  光学显微镜与电子显微镜  光学显微术通常使用可见光谱中的光波长,由于瑞利准则,其空间分辨率固有地限制为所用波长的大约一半(最多约为200nm)。然而,即使使用具有高NA和高级图像处理的物镜,也无法克服这一基本限制。相反,观察较小的结构需要使用较短波长的电磁辐射。这是电子显微镜的基本原理,其中使用电子而不是可见光照亮样品。电子具有比可见光短得多的相关波长,因此可以实现高达10000000倍的放大倍数,甚至可以分辨单个原子。(如下图18)  图18:同心聚合物结构中纳米晶体放大15000倍的扫描电子显微镜图像,即使是细微的细节,例如基材的孔隙,也能分辨出来。  总结与结论  光学显微镜是一种强大的工具,可用于检查各种应用中的小样本。通过调整用于特定用例的照明和成像技术,可以获得高分辨率图像,从而深入了解样品中的微观结构和过程。文中,我们讨论了各种光学显微镜技术的特点、优势和劣势,这些技术在光线照射和收集方式上有所不同。显微镜种类优点技术限制典型应用亮视野显微镜结构相对简单,光学元件很少低对比度、完全透明的物体不能直接成像,可能需要染色对彩色或染色样品和部分透明材料进行成像暗视野显微镜显示小结构和表面粗糙度,允许对未染色样品进行成像所需的高照明功率会损坏样品,只能看到散射图像特征细胞内颗粒成像,表面检测相差显微镜实现透明样品的成像复杂的光学设置,需要的高照明功率会损坏样品,通常图像较暗跟踪细胞运动,成像幼虫微分干涉对比显微镜比PCM更高的分辨率复杂的光学设置,需要的高照明功率会损坏样品,通常图像较暗活的、未染色的细胞和纳米颗粒的高分辨率成像偏光显微镜来自样品非双折射区域的强背景抑制,允许测量样品厚度和双折射需要双折射样品成像胶原蛋白,揭示晶体中的晶界荧光显微镜允许挑出样品中的单个荧光团和特定的感兴趣区域,可以克服分辨率限制需要荧光样品和灵敏的检测器,光漂白会减弱信号成像细胞成分、单分子、蛋白质免疫荧光显微镜使用抗体靶向可视化特定的生物分子大量样品制备,需要荧光样品,光漂白识别和跟踪细胞和蛋白质共聚焦显微镜低背景信号,可以创建3D图像成像速度慢,需要复杂的光学系统3D细胞成像,荧光信号较弱的成像样品,表面分析双光子显微镜样品穿透深度、背景信号低、光漂白少成像速度慢,需要复杂的光学系统和大功率照明神经科学,深层组织成像光片显微镜图像仅样品的极薄切片,可通过旋转样品创建3D图像成像速度慢,需要复杂的光学系统细胞和生物体的3D成像全内反射荧光显微镜强大的背景抑制,极精细的垂直切片成像仅限于样品的薄区域,需要复杂的光学系统,样品需要在水介质中单分子成像,成像分子运输膨胀显微镜提高标准荧光显微镜的有效分辨率需要对样品进行化学处理,不适用于活体样品生物样品的高分辨率成像  参考:  1. Rochow TG, Tucker PA. A Brief History of Microscopy. In: Introduction to Microscopy by Means of Light, Electrons, X Rays, or Acoustics. Springer US 1994:1-21. doi:10.1007/978-1-4899-1513-9_1  2. Smith WJ. Modern Optical Engineering: The Design of Optical Systems. McGraw-Hill 1990. ISBN: 0070591741  3. Shribak M, Inoué S. Orientation-independent differential interference contrast microscopy. Collected Works of Shinya Inoue: Microscopes, Living Cells, and Dynamic Molecules. 2008 (Dic):953-962. doi:10.1142/9789812790866_0074  4. Gao G, Jiang YW, Sun W, Wu FG. Fluorescent quantum dots for microbial imaging. Chinese Chem Lett. 2018 29(10):1475-1485. doi:10.1016/j.cclet.2018.07.004  5. Chalfie M, Tu Y, Euskirchen G, Ward W, Prasher D. Green fluorescent protein as a marker for gene expression. Science. 1994 263(5148):802-805. doi:10.1126/science.8303295  6. Baranov M V., Olea RA, van den Bogaart G. Chasing Uptake: Super-Resolution Microscopy in Endocytosis and Phagocytosis. Trends Cell Biol. 2019 29(9):727-739. doi:10.1016/j.tcb.2019.05.006  7. Miller DM, Shakes DC. Chapter 16 Immunofluorescence Microscopy. In: Current Protocols Essential Laboratory Techniques. Vol 10. 1995:365-394. doi:10.1016/S0091-679X(08)61396-5
  • 兰州大学505.54万元采购荧光显微镜,立体显微镜
    详细信息 兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目公开招标公告 甘肃省-兰州市-城关区 状态:公告 更新时间: 2022-12-25 兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目公开招标公告 兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目公开招标公告 2022年11月25日 23:50 来源:中国政府采购网 项目概况兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目 招标项目的潜在投标人应在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)和兰州大学采购管理办公室主页 (http://zbb.lzu.edu.cn)获取招标文件,并于2022年12月16日 09点00分(北京时间)前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号:LZU-2022-391-HW-GK 项目名称:兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目 预算金额:505.5400000 万元(人民币) 最高限价(如有):505.5400000 万元(人民币) 采购需求: 相关内容详见招标文件第三章 采购项目需求。 标段名称及标段编号 预算金额(万元) 标的名称 计量单位 数量 是否进口 第一标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-01) 144 显微数码互动教室 套 3 否 第二标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-02) 96 显微数码互动系统 套 1 是 第三标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-03) 86.94 数码带屏一体显微镜 台 23 是 相差显微镜 台 1 成像倒置显微镜 台 2 第四标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-04) 39.6 倒置荧光显微镜 台 2 否 普通显微镜 台 20 体视显微镜 台 20 第五标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-05) 99 实时全景深显微镜 台 1 是 第六标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-06) 40 基因编辑与显微注射平台 套 1 是 合同履行期限:第一标段:合同生效后90个日历日内供货。第二标段:合同生效后90个日历日内供货。第三标段:合同生效后90个日历日内供货。第四标段:合同生效后5个日历日内供货。第五标段:合同生效后90个日历日内供货。第六标段:合同生效后180个日历日内供货。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 无 3.本项目的特定资格要求:第一、四标段:无第二、三、五、六标段:对提供进口产品的投标人须提供投标产品生产厂家针对本项目的专项授权函原件或区域总代理针对本项目的转授权函原件(提供转授权函的,还须提供生产厂家对区域总代理的授权函复印件且该复印件须加盖区域总代理公章)。 三、获取招标文件 时间:2022年11月28日 至 2022年12月02日,每天上午00:00至12:00,下午12:00至23:59。(北京时间,法定节假日除外) 地点:中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)和兰州大学采购管理办公室主页 (http://zbb.lzu.edu.cn) 方式:本项目采用电子招投标,所有供应商必须办理数字证书后方可登记和投标。 符合本公告要求的供应商,须按以下流程在兰州大学采购管理办公室电子招投标系统(供应商)(http://company.lzu.edu.cn/CG-GS/gongSiLogin.initDenglu.action)上注册并完成在线登记: 1. 确认企业公章证书(KEY)办理完成并与公司注册账号绑定,确认证书驱动安装完成,并使用证书方式登陆电子招投标系统(供应商)。 2.核对注册信息准确性和证照扫描件真实性,根据公告及系统要求完善供应商基本信息;公告中要求供应商具备的资格条件,相关证照必须扫描上传至“资质”栏目内。 3. 选择要投标的项目点击在线登记,按要求完整、准确填写登记信息,核对无误后保存并提交。 4. 登记信息使用数字证书签名并提交审核,此过程可能需要输入证书PIN码,注意不是供应商注册的密码。 5. 供应商登记后应及时登陆兰州大学采购管理办公室供应商库查看审核情况,根据审核要求补充、完善相关信息,审核通过即为登记成功。同时可以通过“下载采购文件”模块自行免费下载采购文件。 注:如有问题,请联系技术支持,电话:13811001607 售价:¥0.0 元,本公告包含的招标文件售价总和。 售价:¥0.0 元,本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间:2022年12月16日 09点00分(北京时间) 开标时间:2022年12月16日 09点00分(北京时间) 地点:兰州西部投资咨询有限公司开标室(兰州市城关区南关什字世纪广场B座26楼)。 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、投标文件递交方式:此项目是远程开标(不见面开标),投标文件通过兰州大学投标程序客户端上传到电子招投标平台。供应商应按招标文件规定的投标截止时间登录 “ 兰州大学采购管理办公室电子招投标系统(供应商)”参加远程开标(不见面开标),并应自开标时间截止前 30 分钟签到,签到完成在开标时间开始起半小时内自行完成开标解密,否则投标无效。详见操作说明(见附件)。 2、未尽事宜详见第二章投标须知前附表。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:兰州大学 地址:兰州市天水南路222号 联系方式:刘老师、曹老师 0931-8912932 zbk@lzu.edu.cn 2.采购代理机构信息 名 称:兰州西部投资咨询有限公司 地 址:兰州市城关区南关什字世纪广场B座26楼 联系方式:李伟山 17793580008 3014570993@qq.com 3.项目联系方式 项目联系人:彭老师 电 话: 13919826012 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容:荧光显微镜,立体显微镜 开标时间:2022-12-16 09:00 预算金额:505.54万元 采购单位:兰州大学 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:兰州西部投资咨询有限公司 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目公开招标公告 甘肃省-兰州市-城关区 状态:公告 更新时间: 2022-12-25 兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目公开招标公告 兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目公开招标公告 2022年11月25日 23:50 来源:中国政府采购网 项目概况兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目 招标项目的潜在投标人应在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)和兰州大学采购管理办公室主页 (http://zbb.lzu.edu.cn)获取招标文件,并于2022年12月16日 09点00分(北京时间)前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号:LZU-2022-391-HW-GK 项目名称:兰州大学显微镜及互动教学系统等仪器设备采购项目 预算金额:505.5400000 万元(人民币) 最高限价(如有):505.5400000 万元(人民币) 采购需求: 相关内容详见招标文件第三章 采购项目需求。 标段名称及标段编号 预算金额(万元) 标的名称 计量单位 数量 是否进口 第一标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-01) 144 显微数码互动教室 套 3 否 第二标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-02) 96 显微数码互动系统 套 1 是 第三标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-03) 86.94 数码带屏一体显微镜 台 23 是 相差显微镜 台 1 成像倒置显微镜 台 2 第四标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-04) 39.6 倒置荧光显微镜 台 2 否 普通显微镜 台 20 体视显微镜 台 20 第五标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-05) 99 实时全景深显微镜 台 1 是 第六标段(标段编号:LZU-2022-391-HW-GK-06) 40 基因编辑与显微注射平台 套 1 是 合同履行期限:第一标段:合同生效后90个日历日内供货。第二标段:合同生效后90个日历日内供货。第三标段:合同生效后90个日历日内供货。第四标段:合同生效后5个日历日内供货。第五标段:合同生效后90个日历日内供货。第六标段:合同生效后180个日历日内供货。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 无 3.本项目的特定资格要求:第一、四标段:无第二、三、五、六标段:对提供进口产品的投标人须提供投标产品生产厂家针对本项目的专项授权函原件或区域总代理针对本项目的转授权函原件(提供转授权函的,还须提供生产厂家对区域总代理的授权函复印件且该复印件须加盖区域总代理公章)。 三、获取招标文件 时间:2022年11月28日 至 2022年12月02日,每天上午00:00至12:00,下午12:00至23:59。(北京时间,法定节假日除外) 地点:中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)和兰州大学采购管理办公室主页 (http://zbb.lzu.edu.cn) 方式:本项目采用电子招投标,所有供应商必须办理数字证书后方可登记和投标。 符合本公告要求的供应商,须按以下流程在兰州大学采购管理办公室电子招投标系统(供应商)(http://company.lzu.edu.cn/CG-GS/gongSiLogin.initDenglu.action)上注册并完成在线登记: 1. 确认企业公章证书(KEY)办理完成并与公司注册账号绑定,确认证书驱动安装完成,并使用证书方式登陆电子招投标系统(供应商)。 2.核对注册信息准确性和证照扫描件真实性,根据公告及系统要求完善供应商基本信息;公告中要求供应商具备的资格条件,相关证照必须扫描上传至“资质”栏目内。 3. 选择要投标的项目点击在线登记,按要求完整、准确填写登记信息,核对无误后保存并提交。 4. 登记信息使用数字证书签名并提交审核,此过程可能需要输入证书PIN码,注意不是供应商注册的密码。 5. 供应商登记后应及时登陆兰州大学采购管理办公室供应商库查看审核情况,根据审核要求补充、完善相关信息,审核通过即为登记成功。同时可以通过“下载采购文件”模块自行免费下载采购文件。 注:如有问题,请联系技术支持,电话:13811001607 售价:¥0.0 元,本公告包含的招标文件售价总和。 售价:¥0.0 元,本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间:2022年12月16日 09点00分(北京时间) 开标时间:2022年12月16日 09点00分(北京时间) 地点:兰州西部投资咨询有限公司开标室(兰州市城关区南关什字世纪广场B座26楼)。 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、投标文件递交方式:此项目是远程开标(不见面开标),投标文件通过兰州大学投标程序客户端上传到电子招投标平台。供应商应按招标文件规定的投标截止时间登录 “ 兰州大学采购管理办公室电子招投标系统(供应商)”参加远程开标(不见面开标),并应自开标时间截止前 30 分钟签到,签到完成在开标时间开始起半小时内自行完成开标解密,否则投标无效。详见操作说明(见附件)。 2、未尽事宜详见第二章投标须知前附表。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:兰州大学 地址:兰州市天水南路222号 联系方式:刘老师、曹老师 0931-8912932 zbk@lzu.edu.cn 2.采购代理机构信息 名 称:兰州西部投资咨询有限公司 地 址:兰州市城关区南关什字世纪广场B座26楼 联系方式:李伟山 17793580008 3014570993@qq.com 3.项目联系方式 项目联系人:彭老师 电 话: 13919826012

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  • 【资料】相差显微镜原理、显微镜安装调试与使用

    【资料】相差显微镜原理、显微镜安装调试与使用

    相差显微镜  •1940年荷兰学者F.Zernik巧妙地应用光的衍射和干涉原理提高标本细节的折光率的差异,创造了相差显微镜(phase contrast microscope)。从此非常简便而有效地观察体外培养细胞的生长过程,记录细胞分裂周期中的染色体的移动。近年来细胞学家和生物学家所拍摄的生活细胞生长、分裂过程的非常出色的记录影片,都是利用相差显微镜的优秀性能完成的。因此相差显微镜、倒置相差显微镜已成为细胞学、细菌学、寄生虫学、免疫学和海洋生物学的实验室必备仪器。  •相差显微镜是用于观察组织培养中活细胞形态结构的。活细胞无色透明,一般显微镜下不易分辨细胞轮廓及其结构。  •相差显微镜的特点是将活细胞不同厚度及细胞内各种结构对光产生的不同折射作用,转换为光密度差异(明暗差),使镜下结构反差明显,影像清楚。  相差显微镜的优点http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161815_278026_2961690_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161816_278027_2961690_3.jpg  相差显微镜成像光路http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161817_278028_2961690_3.jpg  相差显微镜的部件  •相差显微镜的关键性部件为位相板(phase plate)、环状光阑(anular diaphragm)和中心调节望远目镜(centring telescope)。  环状光阑  •环状光阑是在玻璃片上喷涂金属薄膜借以挡光,只留下环形透光窄缝的光阑。它能使来自反光镜的直射光只能从环状部分通过,形成一个空心圆筒状的光柱,经聚光器并照射到标本以后,就产生两部分光,一部分是直射光,另一部分是经过标本后产生的衍射光,这两部分光经物镜内相板的作用而改变了光的相位和振幅。  •在相差聚光器下面装有一个转盘,盘上镶有宽狭不同的环状光阑,在不同光阑边上刻有10×、 20×,40×等字样,这表示当用不同放大倍数的物镜时,必须配合相应的环状光阑。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161819_278029_2961690_3.jpg  相板  •相板安装在物镜的后焦平面上,带有相板的物镜称为相差物镜(蔡司厂用红色“PH”表示)。  •相板上有一灰色的环状圈,称为共轭面。面上涂有吸光物质,直射光从这部分通过,并吸收了约80%的直射光,以降低它的透光度。在共轭面的内,外侧部分称为补偿面,面上涂有减速速物质,使衍射光的相们发生改变,因此这两者相结合就能分别改变直射光和衍射光的振幅和相位。  相板分类  •A型位相板 凡是共轭面即环形相板上涂有吸收层的相板均为A型。A型相板又分为二型:  •(1)A十型位相板:这是在共扼面上既涂吸收层又涂有电解质的相板。这种相板能吸收其共轭面的60一90%直射光,而透过其20一40%。市场出售的位相板型号分类时,都以数字表示其透射率和推迟位相的数据(图10-12,表10—1)。  •(2)A一型位相板是共扼面上涂有吸收层。同时在补偿面上涂有电解质。  •B型位相板凡是在补偿面上涂有吸收层而在共轭面上有电解质的位相板,均属此类。  •(1)B十型位相板是在补偿面上涂有吸收层共轭面上有电解质的相板。  •(2)B一型位相板是在补偿面上涂有吸收层加电解质的相板。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281441_279896_2961690_3.jpg  对焦望远目镜  对焦望远目镜(centring telescope)又叫合轴望远镜或校正望远目镜。这是一种场透镜和接目透镜之间的距离可变的目镜。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281443_279897_2961690_3.jpg  相差显微镜的成像原理  •从波动光学的角度可把物体细节即生物标本的细节,看成是成像光束的障碍物。它可以改变相干光束的振幅、位相和光强分布。  •从变换光学的频谱转换角度,可把物体细节看成是不同空间信息的集合物。它可改变光信息的空间频谱。  •在显微镜下标本细节的光密物质、光疏物质和无结构的介质的折射率不同,因此相干光束通过光密物质(t)时,必然产生衍射,使光程延长,推迟位相(图10—21P)。这时衍射光(P)和直射光(S)之间的位相出现d/λ差异。但是标本的吸收程度近似,所以振幅未变即光强末变。这种直射光和衍射光到达像平面重叠成像时,其合成波的振幅与通过无结构介质的直射光的振幅几乎近似,即其光强相似。这就是未染标本在普通显微镜下反差很小的基本原因(图10—22)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281447_279898_2961690_3.jpg  暗相差  •在被检物的折射率大于介质的情况下,透过共轭面的直射光被吸收80%后亮度变暗,衍射光在通过被检物后其相位己推迟1/4波长,再在位相板的补偿面的电解质又推迟了1/4波长。由于这两束光的相位不同(差1/2波长),其合成波的振幅为两者之差,所以光线就更加暗。  •与此同时,通过无结构介质的衍射光的光程只被补偿面的电介质推迟l/4波长。这就造成通过光密物质的光强远比通过无结构介质(背景)的光强减衰得多。相差显微镜下标本细节的反差加大丁。光密结构比背景暗得多了。这种反差叫暗反差也叫正反差。  明相差  •如果相板的共轭面上涂的是减速物质,推迟直射光1/4波长,而补偿面涂的是吸光物质,结果就是直射光与衍射光的相位相同(衍射光通过物体时相位推迟了1/4波长),其合成波的振幅为两者之和,结果物体是明亮的而背景是暗的,这称为明相差或负相差。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281450_279899_2961690_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281450_279900_2961690_3.jpg  相差显微镜实验方法和步骤  •安放相差装置取下原有聚光器和物镜,分别安上相差聚光器和相差物镜,并将转盘转到“0”标记的位置。用10×相差物镜调光。  •调节光源。  •合轴调节取下原有目镜,换上合轴调整望远镜。上下移动望远镜筒,至能看清物镜中的相板环为止。  •放回目镜取下合轴调整望远镜,放回目镜即可进行观察。更换不同放大倍数的相差物镜时,每次都要按上述方法重新调节。

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