荧光蛋白成像分析仪

绿色荧光蛋白GFP的应用绿色荧光蛋白GFP的应用主要集中在利用其荧光性质的基础上作为一种标记物。1 绿色荧光蛋白GFP在分子生物学上的应用1.1 绿色荧光蛋白GFP作为报告基因 报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的DNA，如传统的荧光素酶（LUX）基因和β-葡萄糖苷酶（GUS）基因。绿色荧光蛋白GFP作为基因报告可用来检测转基因效率，把绿色荧光蛋白GFP基因连接到目的基因的启动子之后，通过测定GFP的荧光强度就可以对该基因的表达水平进行检测。目前，此方法无论在农杆菌介导或基因枪介导的植物遗传转化中还是在活细胞、转基因胚胎和动物中都已得到非常广泛的应用，特别是在活细胞基因表达的时空成像方面。 1.2 绿色荧光蛋白GFP作为融合标签绿色荧光蛋白GFP最成功的一类应用就是把绿色荧光蛋白GFP作为标签融合到主体蛋白中来检测蛋白质分子的定位、迁移、构象变化以及分子间的相互作用，或者靶向标记某些细胞器。在多数情况下，绿色荧光蛋白GFP基因在N-或C-末端与异源基因用常规的分子生物学手段就可以接合构成编码融合蛋白的嵌合基因，其表达产物既保持了外源蛋白的生物活性，又表现出与天然GFP相似的荧光特性。GFP的这种特性为蛋白质提供了一种荧光标记，不仅可以检测蛋白质分子的定位、迁移，还可以研究蛋白质分子的相互作用以及蛋白质构象变化，并依靠荧光共振能量转移即FRET来进行检测。

来自德国卡尔斯鲁厄理工学院等处的研究人员发现了一种新的，来自珊瑚虫的荧光蛋白，这种荧光蛋白可以用于高分辨率显微镜下观察活细胞。这一研究成果公布在《自然—方法学》（Nature Methods）杂志上。 领导这一研究的是著名的蛋白质相互作用分析专家：Gerd Ulrich Nienhaus，这位科学家著有《Methods in Molecular Biology: Protein-Ligand Interactions》，详细分析了蛋白与配基相互作用研究中的方法分析。 荧光蛋白是由很多能产生五彩斑斓的海洋动物产生的，包括绿色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，红色荧光蛋白，橙色荧光蛋白等，这些荧光蛋白有些来自水母，有些来自珊瑚，近年来分子生物学家门从中提取出了很多种荧光蛋白及它们的基因，并用基因工程建立了一系列具有不同发光特性的荧光蛋白。

绿色荧光蛋白(GFP)是一种在紫外光照射下发出绿色荧光的蛋白质。此应用说明 用CPL-300和J-1500分别获得了gfp的cpl和cd光谱。

绿色荧光蛋白（GFP）是一种在暴露于紫外线时发出绿色荧光的蛋白质，并且已被证明具有手性性质。本申请说明说明了分别用CPL-300和J-1500获得的GFP的CPL和CD光谱。关键词：J-1500，圆二色性，CPL-300，圆偏振发光，蛋白质结构，荧光，生物化学

所有光合生物都必须要应对过量光照来避免光合氧化胁迫。对于植物和绿藻来说，高光的最快响应机制就是非光化学淬灭（NPQ）。这一过程允许将过量能量以热量形式安全地耗散掉。PsbS蛋白是这一过程中的重要传感器。为了确定PsbS蛋白在莱茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii的NPQ和光保护中的作用，艾克斯－马赛大学Tibiletti T等培养了可以表达藻类或拟南芥psbS基因的叶绿体转基因株。通过FluorCam开放式叶绿素荧光成像系统进行的NPQ成像分析最终表明，两种PsbS蛋白都可以增强莱茵衣藻野生型和npq4突变株的NPQ，但没有观察到明确的光保护活性。

FluorCam多光谱荧光成像系统是目前唯一有能力实现了一台仪器上同时完成叶绿素荧光、多光谱荧光、NDVI归一化植被指数以及GFP、YFP、BFP、RFP、CFP、DAPI等荧光蛋白与荧光染料的成像分析功能，加装热成像模块后还可以进行热成像分析。这些功能使得FluorCam多光谱荧光成像系统就成为了一套功能非常全面的植物病害表型研究系统。

开发适用于临床样本测定的外泌体单颗粒分析新方法，是目前该外泌体单颗粒研究领域的热点之一。张教授团队开发出一种新的外泌体单颗粒多蛋白数字化分析方法（digital profiling of proteins on individual exosomes，DPPIE），成功实现了对癌症患者血浆样本中外泌体单颗粒表面蛋白CD63/EpCAM/MUC1的原位荧光信号放大检测。

对于药物研发早期先导化合物寻找和确认，配有发光蛋白检测应用的FLIPRTETR是简便且可信赖的高通量筛选系统。发光蛋白检测部件包含了增强型CCD (ICCD) 相机和悬浮细胞系统。ICCD相机的增益可调节功能使得高通量FLIPRTETRA系统既可以适应基于染料的明亮的荧光实验，也可以记录信号强度较弱的化学发光蛋白实验。本篇应用文章描述了贴壁CHO Mito-Photina./H3发光蛋白细胞在高通量FLIPRTETRA系统中的实验结果和表现。

生物荧光现象蕴含丰富的生命信息，如叶绿素荧光可以反映植物的光合作用生理状态、植物次级代谢产物荧光可以反映生物活性成分含量分布及其环境胁迫响应（又称胁迫诱导植物荧光）、绿色荧光蛋白（GFP）及荧光素酶用于基因标记等等。易科泰生态技术公司推出的FluorTron®多功能高光谱成像分析系统，可同时进行高光谱成像分析和生物自发光成像分析，为生物样品高光谱成像分析、荧光成像分析及光谱分析提供非接触、非损伤、高通量、数字化、可视化研究检测解决方案。

花生蛋白被公认为是继大豆蛋白之后，又一优质的食用蛋白资源。低温花生粕是花生冷榨提油后的副产物，蛋白含量达48%以上。与传统热榨工艺不同，冷榨工艺制备的花生饼粕中蛋白质变性程度小，产品后续应用空间更大。尤其是经过适度改性后的花生蛋白，其溶解性、持水性、乳化性及乳化稳定性等功能特性表现良好，具有非常优良的食品加工特性[。食品应用体系中，加强花生蛋白在饮料中的应用研究，一方面可以发挥花生蛋白独特风味、抗营养因子含量低等特点。另一方面可以增加饮料体系的蛋白质含量提高饮料附加值。但传统的花生蛋白饮料大多采用花生仁直接打浆、调配添加剂等工艺制成，生产成本较高，且饮品中脂肪含量高影响产品的营养价值和口感。顺应发展的需要与迫切性，已经出现一些以花生蛋白为原料，制备富含蛋白质的饮料的相关研究。但是数量和研究深度有限，且存在制备的花生蛋白加工特性不理想、饮料体系稳定性有待提高等问题。利用LUMiSizer稳定性分析仪，以压榨低温粕为原料制备的花生分离蛋白在饮料体系中应用的可行性。

让我们来看看又有哪些国内外研究团队在PR系列蛋白稳定性分析仪的助力下成功发表文献，这些新的文献或许可为您近期或之后的检测提供新的实验思路或技巧哦！

美国兰博天津应用研发中心使用氨基酸分析仪，利用牛乳和大豆蛋白质的氨基酸组成含量差异对牛乳中掺入的大豆蛋白进行定性定量检测，弥补了现有方法耗时长检测不灵敏的不足。

有许多技术可用于分析亚可见颗粒 - 颗粒表征是许多工艺的关键组成部分。 在注射制剂中，流动成像粒子分析可以帮助您优化蛋白质聚集体的检测。阅读流动成像显微镜终极指南，您将了解到：?分析颗粒的方法，以及每种方法的优势和缺点。?FIM如何工作，并允许您查看样本中可能缺少的内容。?该技术如何帮助改善生物制剂中蛋白质，硅胶液滴和其他颗粒的表征。

EMT即上皮间质转化，在此过程中，上皮细胞的极性丧失，迁移和运动能力增强，同时上皮表型丢失而逐渐获得间质表型。伴随表型变化，许多基因的表达发生了改变，上皮表型相关蛋白，如角蛋白、E-钙粘蛋白、紧密连接蛋白-1、闭锁小带蛋白等含量下降，间质表型相关蛋白，如波形蛋白、N-钙粘蛋白、α -平滑肌肌动蛋白、纤维连接蛋白等含量上升，同时一系列转录因子的表达也发生了变化。蛋白表达量的变化多通过Western Blot和免疫荧光及免疫组化的方式来检测，其中Western Blot可以使用组织和细胞实现蛋白的定性和半定量，免疫荧光可以使用细胞爬片检测细胞中蛋白的定位以及定性分析，免疫组化可以使用组织切片检测细胞中蛋白的定位以及定性分析，针对不同的样品类型，可以采用不同方式来检测EMT导致的蛋白表达变化。

总有机碳（TOC）分析广泛用于测量水的纯净度。水中的有机碳越多，污染物的含量就越高。生产企业必须满足行业法规所要求的成品中的水或生产用水的纯净度。越来越多的食品和饮料企业采用TOC 分析来确认生产设备在更换不同批次产品时的清洁度，以确保设备上没有上一个批次残留的过敏原。虽然TOC 分析并非专门用于检测过敏原，但它可以测量总碳含量。也就是说，TOC 结果可以为企业提供有关生产设备在清洁之后可能仍然存在的污染物的准确信息，其中包括谷蛋白（gluten）等过敏原的信息。Sievers M 系列分析仪可以同步测量TOC 和电导率，两者的测量结果都能准确反映污染情况。

关于皮肤的发光，最被人们熟知的是由于使用某些含有荧光剂的化妆品而造成的荧光，其实我们的真皮层中的一些物质，本身就可以发出荧光。为什么正常皮肤会发出荧光呢？这是因为胶原蛋白的存在，胶原蛋白是皮肤组织中的结构性蛋白，其数量和健康关系到外表皱纹的生成与皮肤的老化现象，由于胶原蛋白具有自体荧光，根据胶原蛋白的种类或交联状态的不同，真皮层荧光光谱或强度会发生变化[1]，因此可以根据皮肤的荧光光谱来检验胶原蛋白含量及结构，此检测法更具实时性与非侵入性，目前，市面上一些胶原蛋白产品也用这种方法来判断产品对于改变皮肤状态的功效。

差示扫描荧光法（DSF），也被称为thermal shift assay（TSA），是表征蛋白热稳定性的常用方法之一，广泛应用于蛋白配体互作表征，突变体、缓冲液、去垢剂筛选等领域。DSF可以通过荧光染料或蛋白内源荧光信号监测升温过程中蛋白构象的变化计算其熔解温度Tm（折叠蛋白与去折叠蛋白相等时的温度）。

UVP推出的iBox Explorer2 显微活体成像系统整合了显微镜和高灵敏度的制冷CCD，使得研究者在大体、活体和显微状态下对样品进行从宏观到微观的探究，并可深入皮下和体腔内进行更详细的研究。iBox Explorer2可以轻易检测活体中绿色荧光蛋白（GFP）/红色荧光蛋白（RFP）和其他荧光标记物。在肿瘤（血管形成、微环境、生长、外溢）研究、组织追踪（造血、淋巴）、细胞转移（宏观/微观）等中具广泛的应用价值。

本应用说明描述了盐酸胍（GuHCl）对α-乳凝蛋白变性的荧光各向异性测量的变化关键词：J-1500、圆二色性、CDF-426、荧光、各向异性、α-乳白蛋白、GuHCl、二级结构、变性、生物化学

荧光探针通过特定波段（700-800nm）的荧光染料标记，并与生物体内肿瘤特异性的目标蛋白靶向结合、表达，以组织蛋白和蛋白酶作为近红外荧光成像靶点，通过近红外成像系统获得肿瘤标记物图像，实现对肿瘤的示踪、定性甚至定量诊断。

随着越来越多的消费者要求或选用不含谷蛋白的饮食，那些既生产含谷蛋白产品又生产不含谷蛋白产品的食品和饮料企业开始面临各种前所未见的挑战。如果企业没有专用的生产车间来加工不含过敏原的食品或饮料，那就必须在完成一批产品后彻底清除生产设备上的产品残留物，以确保上一批产品不会污染下一批产品。行业法规要求企业在清洁生产设备之后进行过敏原测试，以确认设备上没有法规禁止的产品残留物。这种测试要求先收集样品，然后由受过专门训练的技术人员亲手进行测试，耗时耗力。越来越多的食品和饮料企业采用TOC分析来确认生产设备在更换不同批次产品时的清洁度，以确保设备上没有上一个批次残留的过敏原。虽然TOC分析并非专门用于检测过敏原，但它可以测量总碳含量。也就是说，TOC结果可以为企业提供有关生产设备在清洁之后可能仍然存在的污染物的准确信息，其中包括谷蛋白（gluten）等过敏原的信息。TOC测试法帮助生产企业量化生产线上可能存在的污染物的总体含量，也可以用来检测食品和饮料生产设备上可能残留的谷蛋白等污染物。

在生物药的蛋白类制剂研究领域中，颗粒污染物或者外来颗粒的引入造成的制剂安全问题普遍受到重视，然而，由于此类制剂的一些特殊性质，如何区分此类制剂中外来颗粒成为一项难题。蛋白类制剂颗粒粒度检测推荐使用胤煌科技YH-FIPS系列流式成像粒度仪产品。可以用流体成像的方式，加上人工智能颗粒分类，来区分颗粒的大小、浓度、数量等。该设备同时满足USP1787和USP1788药典要求，为药品研发带来质量保证。

多金属氧酸盐(polyoxometallates,POMs)由于结构的多样性以及其在分子尺寸、表面电荷分布、氧化还原电位、极性、酸性、溶解性及热稳定性等方面高度可调的分子特性，在材料，磁学，催化，尤其是医药科学等领域都有着广泛而重要的应用。肿瘤一直是威胁人类健康的一大顽疾。研究表明，组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylaseinhibitors，HDACi)可以通过改变组蛋白或转录因子的乙酰化状态诱导肿瘤细胞生长、分化或凋亡，具有明显的抗肿瘤活性。本论文首次将多酸类药物用于HDACi的筛选，从近400种POMs化合物中筛选出了五类13种与已知HDACi具有相同作用效果的多金属氧酸盐化合物。这五类POMs化合物分别是：1.夹心型钨锗酸盐化合物PA-304 PA-312 PA-313 PA-315 PA-317；2.三有机锡取代的钨锗酸盐化合物PA-320；3.过渡金属连接二钛取代的Keggin型钨磷酸盐形成的化合物PA-324 PA-331 PA-332PA-330；4.临床有机药物与Anderson型多阴离子形成的超分子化合物PA-301 PA-303；5.含Ti的三聚杂多钨锗酸盐化合物PA-334。实验中以PA-320为代表化合物，对其抗肿瘤活性做了初步的验证。绿色荧光蛋白质粒报告基因的荧光照片显示PA-320可以诱导绿色荧光蛋白发光增强，且发光的强度要强于已知临床组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA的作用效果。直观的说明PA-320可以刺激p21基因表达增加。逆转录PCR(RT-PCR)和DNA电泳的结果证实，不同浓度的PA-320处理的细胞，其细胞中p21基因的表达量与用临床组蛋白去乙酰化酶抑制剂BUA处理细胞后的作用效果相同。说明PA-320有和临床HDACi相同的作用功效，可以刺激p21基因的表达增加。据文献报道HDAC1对p21WAF1/CIP1基因的抑制作用最为显著。PA-320对瞬时转染的HDAC1-7的实验结果证实，在转染了HDAC1的同时加入一定浓度PA-320刺激后，p21WAF1/CIP1基因启动子报告基因的活性明显增强，HDAC1的活性明显受到抑制。瞬时转染HDAC实验证明多金属氧酸盐化合物PA-320可以很好的抑制HDAC的活性。MTT实验结果证实PA-320对Hela细胞，LNCaP细胞，293T细胞，SW620细胞四种癌细胞均有抑制作用。实验测得对四种癌细胞的IC50值分别为38.8679μg/ml，45.1477μg/ml，44.4783μg/ml和9.2771μg/ml。说明PA-320可以在相对较低的浓度下(100μg/ml)，PA-320的抑制浓度也是比较低的。说明PA-320对肿瘤细胞有很好的抑制效果。

近年来，近红外成像在生物研究领域越来越热。近红外光（Near Infrared，NIR）是介于可见光（ⅥS）和中红外光（MIR）之间的电磁波，习惯上将近红外区划分为近红外短波（780-1100nm）和近红外长波（1100-2526nm）两个区域。UVP的BioSpectrum系统和BioLite多谱光源结合进行近红外（NIR）成像具有快速、高效和简单的特点。同时可选择多种激发和发射滤光片，使研究者可以检测和定量几乎任何的荧光染料（从可见光到近红外）。本文主要探讨如何使用BioSpectrum系统和BioLite多谱光源进行在蛋白印迹多重近红外成像。

铜转运蛋白1（CTR1）是一种参与铜和顺铂摄取的转运蛋白。细胞CTR1迁移及其再分配的可视化在铜/顺铂暴露/转运中非常重要。然而，据我们所知，这是一项极具挑战性的任务。在此，通过将共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）和激光剥蚀电感耦合等离子体质谱（LA-ICPMS）与抗CTR1抗体缀合的荧光/元素双功能标签相结合，开发了CTR1的双模式成像策略。标签由罗丹明B和锆金属有机框架（Zr-MOF）组成，用于CLSM荧光成像和LA-ICPMS元件成像。这种双模式成像策略促进了CTR1迁移的可视化，同时提供了通过摄取二价铜或顺铂在HepG2细胞中的CTR1重新分布的信息。目前的双模式成像策略为阐明涉及CTR1的生物学过程提供了深入的信息。

本文详细向您介绍如何使用日立荧光分光光度计F-7100分析检测皮肤中的胶原蛋白含量。通过测量不同生物样品（包括：三文鱼皮，男性皮肤和女性皮肤），利用三维立体的激发发射光谱，可以清晰辨别出各生物样品种类，并检测其中的胶原蛋白含量。F-7100拥有全球最快扫描、驱动速度和最高灵敏度，三维光谱分析更加方便、快捷，提供追踪监控化学反应过程。超高信噪比的优异功能，可以检测出低至1*10-12mol/L的荧光素，同时，更有利于痕量样品的测量。实验中，搭配主机使用的光纤附件使得样品种类与形状更具灵活性，将光源能量导出并无损伤直接检测肌肤变成可能。

本应用简报证实，使用配备新型 HILIC 色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪，可对人免疫球蛋白 G 的 N-连接糖链进行灵敏、重现的分析。对人 IgG N-连接糖链文库分析的保留时间和峰面积精度进行测定。此外，对于具有低检测限和低定量限的五种糖链标准品（M5、A2G2、A2G2S1、FA2G2S1 和 A2G2S2）混合物，在 0.016-1 pmol 的范围内具有良好的线性。配备 Agilent AdvanceBio 2.7 μm 糖谱分析色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪是一款出色的系统，可实现灵敏且重现的2-AB 衍生人免疫球蛋白 G 释放 N-连接糖链分析。

MALDI Guided SpatialOMx，即基于质谱成像定位的空间多组学分析，完美的将MALDI成像技术和传统LC-MS/MS组学流程结合在了一起，它的特点是利用了MALDI成像技术能在分子原位对生物分子进行定位的特点，在生物组织的内部锁定目标微区（ROI，Region of Interests），在对该目标微区实施激光微切割（LCM，laser capture microdissection）后，进行LC-MS/MS组学分析，从而实现了深度的蛋白组信息挖掘。

蛋白质的稳定性取决于配体的相互作用、缓冲液条件或构象变化，传统上是通过麻烦费时的圆二色光谱（CD）来研究的。 其实有一种更为简单的检测方法，即基于温度诱导蛋白变性的热漂移分析，通过检测荧光染料SYPRO® Orange的信号强度变化来进行。

98%。QPix400 系列的荧光成像模块可以显著减少下游的工作量，因为通过对荧光蛋白表达的定量，实现了有目的性筛选，确保只挑感兴趣的克隆。QPix 已成为市场上微生物克隆筛选系统的领导者，它可以提供多组荧光滤光片，兼容大多数的荧光克隆载体。基于荧光的重组克隆筛选方法使重组基因表达的筛选更加容易，提供了一个更加准确的筛选方法。