中科院昆明动物所在张亚平院士带领下,该所彭旻晟、贺军栋、樊隆等人开发出针对DNA芯片数据中Y染色体单核苷酸多态性位点的分析策略。相关研究11月27日在线发表于《欧洲人类遗传学》。 随着全基因组关联分析广泛应用于人类遗传学工作之中,相关的DNA芯片(微阵列)也不断得到发展。许多Y染色体单核苷酸多态性位点(Y-SNPs)已被整合在DNA芯片中。然而,这些Y-SNPs数据在全基因组关联分析中都被弃之不顾,没有进行任何评估分析。 为此,研究人员运用开发的分析策略对来自114个缅甸人和3个尼日利亚人共117份男性样本DNA芯片数据中的2041个Y-SNPs进行了评估分析。基于数据过滤后提取出的369个Y-SNPs,研究人员构建了Y染色体单倍型类群树,解析出缅甸人群的父系遗传结构。 该结果得到基因分型实验和Y染色体重测序数据的支持,表明该策略切实可行。研究人员对分析中的数据格式转换、过滤和注释处理后发现,DNA芯片对Y-SNPs的检测灵敏度和准确性依旧有待提高,例如:芯片厂商可依据Y染色体重测序数据重新选择合适的Y-SNPs并设计相关探针。
俗话说,每一个伟大的男人背后,都有一个伟大的女人。每一个精子的背后,也有一个X染色体在起作用。在人体中,Y染色体决定人的性别为男性,因此许多研究人员认为:男性发育过程中负责决定性别的相关基因都位于Y染色体上。但是现在有一个科研团队发现,X染色体(“女性染色体”)也可以在此过程中发挥重要的作用。X染色体包含了决定成为精子形成的大量的基因。这一发现改变了我们对性别形成的固有想法,至少在某种程度上X染色体在进化过程中扮演一个令人意外的角色。哺乳动物有一对性染色体。女性的X染色体有两个拷贝,男性有一个拷贝,与Y染色体形成对。而人体只需要X染色体一个拷贝发挥作用,所以在女性体内,第二个拷贝是被“关闭”的。约50年前,遗传学家Susumu Ohno提出,这样的关闭作用减缓了X染色体的进化进程,所以大多数哺乳动物中的X染色体都非常相似。剑桥大学怀特海德生物医学研究所的遗传学家David Page研究了经过80亿年的进化后,上述说法是否在老鼠和人类之间成立,Page和同事得到的研究结果发表在近日的 Nature Genetics杂志上。虽然这两个物种的基因组已经被解码,但这些DNA序列还存在一些缺陷和错误,特别是X染色体的缺陷和错误首先需要被填充和修复。Page的研究团队使用一个特殊的测序技术确定了缺口处的DNA碱基序列,这里包含很多的重复的DNA区域,而此前用现有的技术通过一次测序很难破译这些重复区域。然后,研究人员比较了小鼠和人类的X染色体基因。这两个物种的X染色体共同拥有800个左右的基因,这些共享基因,通常是是男性和女性相对稳定的基因,并且它们以单拷贝的形式存在。这些基因上发生的突变,能引发X-连锁隐性遗传病,例如血友病和杜氏肌营养不良症。与此同时,研究团队也发现了相较前人研究该染色体与众不同的、令人迷惑的一面。人类有144个X染色体基因是小鼠所没有的,而有197个基因是个小鼠基因是特有的。人类的144个基因中,有107个存在于X染色体重复序列中,这些基因的变化较为迅速。基于这样的证据,Page得出结论,在人类和老鼠祖先产生分离的时候,这些基因分化就出现了。“对于人类X染色体和老鼠X染色体上存在如此大量的非共享基因,我感到非常惊讶,” 密歇根大学的进化遗传学家Jianzhi Zhang说。这一发现表明,X染色体上基因可能随时都在变化。基因改变时,就会影响进化,Page认为X染色体基因效用可能是特别强劲的。例如,一些先前发现的X染色体基因,似乎已经在小鼠的形态发育上发挥了作用。他和他的同事调查了八个人类男性和女性的身体组织来观察X染色体基因如何发挥作用。“在许多情况下,这些非共享的基因在女性体内甚至没有表达,” Page说。相反,它们在决定精子形成的睾丸却表现得非常活跃。“我们认为X染色体过着双重的生活,” 其一,它是稳定的,像前人研究描述的一样;其二,它在不停变化并影响男性特征。Page表示,在其它基因上,重复区域在治疗癌症和其他疾病中已经具有了巨大的生物医学意义,他希望其他研究人员能进一步探索X染色体的重复区域是否同样重要,特别是在男性的繁衍和睾丸癌治疗方面。但目前,我们必须先知道这些基因的功能,了解它们对健康和形态的影响。但有一件事是肯定的,人们将开始关注X染色体的进化。http://www.ibioo.com/data/attachment/portal/201307/23/202226bu6vaasv3g6lwfs0.jpg参考文献http://www.ibioo.com/data/attachment/portal/201307/23/202226i11s7d9xysyswvvy.gifIndependent specialization of the human and mouse X chromosomes for the male germ line作者:Jacob L Mueller et al. We compared the human and mouse X chromosomes to systematically test Ohno's law, which states that the gene content of X chromosomes is conserved across placental mammals1. First, we improved the accuracy of the human X-chromosome reference sequence through single-haplotype sequencing of ampliconic regions. The new sequence closed gaps in the reference sequence, corrected previously misassembled regions and identified new palindromic amplicons. Our subsequent analysis led us to conclude that the evolution of human and mouse X chromosomes was bimodal. In accord with Ohno's law, 94–95% of X-linked single-copy genes are shared by humans and mice; most are expressed in both sexes. Notably, most X-ampliconic genes are exceptions to Ohno's law: only 31% of human and 22% of mouse X-ampliconic genes had orthologs in the other species. X-ampliconic genes are expressed predominantly in testicular germ cells, and many were independently acquired since divergence from the common ancestor of humans and mice, specializing portions of their X chromosomes for sperm production.
人工染色体指人工构建的含有天然染色体基本功能单位的载体系统。包括酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)以及后来的人类人工染色体(HAC)和植物人工染色体(PAC)等多种类型。人工染色体的出现,为基因组图谱制作,基因图位克隆,动物的基因治疗,植物的多基因转化提供了有用的工具。酵母人工染色体(Yeast artificial chromosome, YAC)1983年,Murray和Szostak1]在大肠杆菌质粒pBR322中插入酵母的着丝粒、自主复制序列、选择性标记及四膜虫核糖体RNA基因rDNA(Tr)末端序列,并转化酵母菌,构建成了酵母人工染色体。YAC载体一般能够容纳500 kb,甚至1 Mb大小的染色体片段[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&threadid=&postid=&title=&action=&FTTID=1&hasReadRelease=yes#_ENREF_2]2, [url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&threadid=&postid=&title=&action=&FTTID=1&hasReadRelease=yes#_ENREF_3]3]。目前,在多种高等生物中均构建了高质量的YAC文库。YAC可用于大规模基因组测序和物理图谱构建。例如,美国科学家利用YAC完成了人Y染色体及21q的物理图谱并进行了相应的测序工作[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&threadid=&postid=&title=&action=&FTTID=1&hasReadRelease=yes#_ENREF_4]4]。然而,YAC具有一些缺陷,克隆外源基因易出现嵌合体;部分克隆不稳定,在传代培养中可能会发生缺失或重排;YAC与酵母染色体具有相似的结构,因此难与酵母染色体区分开[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&threadid=&postid=&title=&action=&FTTID=1&hasReadRelease=yes#_ENREF_2]2, [url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&threadid=&postid=&title=&action=&FTTID=1&hasReadRelease=yes#_ENREF_3]3]。细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome, BAC)[/si
目前,我国试管婴儿技术的成功率平均仅为50%多,最大瓶颈就在于产前染色体异常的筛查。记者昨日获悉,今年3月成立的染色体芯片产前诊断联合实验室(CMA),利用针对中国人群定制的染色体芯片,能够检测出在常规染色体检测中显微镜下无法识别的基因缺陷,可筛查出200多种已知的染色体微缺失或微重复引起的疾病。这一技术不仅可通过产前诊断达到优生目的、降低流产率,而且将会使试管婴儿的成功率整体提高两成达70%,尤其是将会使高龄女性做试管婴儿的成功率提高五成。http://www.ibioo.com/data/attachment/portal/201308/25/094237zntmsn8tmz7tzmit.jpg技术:染色体芯片技术可查缺陷基因据广州医科大学附属第三医院广东省产科重大疾病重点实验室主任、广州妇产科研究所副所长孙筱放教授介绍,随着强制婚检的取消,近年来新生儿出生缺陷率明显升高。目前已知的出生时严重出生缺陷婴儿染色体异常的比率只有10%。而国外学者通过高通量、高分辨率的染色体芯片技术研究发现,大量以前无法确定遗传改变的出生缺陷,实际上都是由常规染色体检查显微镜下无法识别的基因组微缺失和微重复引起的。“正是这个原因,我们与香港中文大学成立了染色体芯片产前诊断联合实验室。”她说,“我们现在已经可以检测出200多种已知的染色体微缺失或微重复引起的各种疾病。我们还可以结合DNA测序技术对已知各种单基因疾病进行诊断。这项技术在全国范围内都属于领先的。”故事1:十次试管婴儿都失败来自湖北的阿丹和阿强(均为化名)结婚十年来一直没有怀上孩子,两人为此焦虑不已。近年来,求子心切的他们居然连续做了十次试管婴儿,但都以失败而告终。每次将胚胎植入之后,他们都满怀希望地等待,但无一例外,没有一次能够怀到“瓜熟蒂落”。漫长的求子之路,让他们身心俱疲。尤其是阿丹,经历了十次“煎熬”之后,精神“几近崩溃”,身体也经受了太多的损伤。他们为什么总不成功?他们还有希望吗?他们抱着最后一线希望来到广医三院。专家解读:植入前做检测 妊娠率可达80%“对于做试管婴儿的夫妻来说,压力之大非外人所能想象,尤其是做了几次不成功的夫妻。”广州医科大学附属第三医院生殖医学中心主任刘见桥教授介绍,“在传统的技术中,胚胎植入前遗传学诊断只能检测少数几条染色体是否异常。但事实上,每一条染色体都有可能发现异常,只是以前很多其他的染色体异常没有筛查出来,所以即使不健康的胚胎也会被植入。”刘见桥说,目前,该院与美国休斯敦生殖医学中心合作,率先开展了利用染色体芯片技术对植入前胚胎筛查,可以检测全部染色体组的异常数目。“通过这种筛选的胚胎,妊娠率可提高到80%。”“目前我们可以做到的是,在胚胎植入前就可以对全部染色体组进行检测,然后进行筛查,再把健康的胚胎植入体内。”刘见桥说,无论是什么年龄阶段的女性,最后的成功率都可达70%,这就大大减少对女性身心的伤害,也为患者免去了许多不必要的经济损失,尤其是对于高龄女性而言,成功率更提高了五成。故事2:孕妈担心再生先心娃今年30岁的周洁(化名)怀孕20周了,然而,新生命并未给她带来多少喜悦,相反,更多的是忐忑和纠结。原因就是她曾经生育过一个患有一种先天性心脏畸形而且面部发育也不正常的女儿。第二个孩子会不会也出现畸形呢?这个胎儿究竟是去还是留呢?周洁来到广医三院的生殖医学中心,医生抽了她患病的女儿外周血和腹中胎儿的羊水分别进行染色体芯片检查。结果发现她女儿的3号染色体有一段较长的微重复,正是这一重复区域,导致了她的先天性疾病。而她腹中胎儿的染色体芯片结果并没有跟她女儿相同的变异区域,说明胎儿再患这种先天性心脏畸形的概率较低。目前,她腹中的胎儿的确也发育良好,未见明显畸形。她终于可以放心地把孩子怀下去了。专家解读:可对比染色体差异并作去留判断“在常规的染色体检测中,一般只是显微镜下识别基因缺陷,有很多缺陷是无法识别的。”广医三院妇产科研究所实验部副主任、CMA实验室负责人范勇介绍,而使用该院正在使用的染色体芯片,不仅能够检测和比较患儿和胎儿的染色体差异,更重要的是,通过结果分析,可能对胎儿的去留作出准确的判断,消除了妊娠者及其家属的顾虑。“染色体芯片技术与传统染色体分析技术相比,具有集高通量和高分辨率的优势,目前已被加拿大遗传学会、欧洲遗传学会和美国遗传学会推荐作为遗传学诊断的首选手段。”范勇说,染色体芯片分析还可以进一步地检测患者双亲,以明确某一类的先天性缺陷的致病变异来源。“这对于指导患者再次怀孕具有很重大的临床意义。”范勇说,实验室成立三个月以来,已为230多名孕妇进行了该项技术检查,确诊十余例染色体结构异常胎儿。
Chromosome Pairs in Human CellsOnline at http://cancerquest.emory.edu/index.cfm?page=648The image below shows the chromosomes from a human cell. The depiction of all of the chromosomes in this manner is known as a karyotype. Karyotypes are often performed on fetal tissues during pregnancy to detect chromosomal abnormalities in the unborn child. These chromosomes have been colored by the binding of fluorescent dyes. Notice that there are two copies of each chromosome. The wide range in sizes of the chromosomes is also apparent. The chromosomes are numbered in the inverse order of their size. Chromosome 1 is the largest chromosome and the smallest chromosomes are those numbered 21 and 22. The karyotype shown below is from a male and contains one X and one (much smaller) Y chromosome. The DNA in even the smallest of the chromosomes contains millions of basepairs.[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/01/200701171005_39176_1643735_3.gif[/img]
植物人工染色体技术具有广泛的应用前景,然而,目前植物人工染色体技术尚处于其发展初期,仍然存在很多问题。首先,植物人工染色体的构建仍然依赖于常规的转基因技术,或者是农杆菌介导的遗传转化,或者是基于基因枪的粒子轰击的遗传转化,这就不可避免的存在常规遗传转化所存在的问题:转化目的片段插入的随机性,这是一个影响人工染色体构建乃至将来应用的一个重要问题。例如起始载体pWY86系列都是随机插入到某一染色体的某一位置,如果染色体组既包含常染色体,也包含B染色体或者附加染色体,那么目的片段的插入可能位于常染色体,亦可能位于其它染色体,到目前为止,还没有办法控制其特异的插入到某一特定染色体上。同样的,目的片段插入到染色体上的位置也是随机的,尚无办法控制其插入到染色体的特定位置,这些都为后续应用造成了一定的问题:首先,如果目的片段插入到常染色体上,并在插入位置发生端粒介导的染色体切割,这样会造成常染色体部分片段的缺失,对于二倍体植物,这种缺失常常是不能忍受的,大多会造成植株的严重发育不良,或者败育。即便是对于多倍体植物,某条常染色体片段的缺失也有可能造成生长性状的改变。固然我们可以筛选那些发生了端粒介导的染色体切割形成了小染色体,同时遗传性状又没有明显改变的植株,但这需要很大的工作量,同时,即使没有可见或可检测的性状改变也并不能表明不存在隐形的对受体植株的不良影响。同时,常染色体通常很大,靠一次或者几次端粒介导的染色体切割很难形成理想的人工小染色体,即切割后形成的人工染色体可能依然很大,不能满足后续应用要求。如果受体材料染色体组存在B染色体,对于构建植物人工染色体无疑是一个好消息,尤其是如果这些B染色体可以稳定遗传。B染色体通常长度较短,不编码任何功能基因,对于植株的生长发育无影响。如果我们的目的片段插入了B染色体并且发生了端粒介导的染色体切割,并且如果发生了切割的B染色体可以在后面的减数分裂中不被湮没,可以稳定的遗传给子代,那么对于研究者来说是一个巨大的好消息。因为通常认为B染色体对于植株是可有可无的,那么即使发生了端粒介导的染色体切割形成了植物人工小染色体也不会对受体植株造成影响,同时,由于B染色体本身长度较小,无功能,其自身性质就决定了它是构建植物人工小染色体的优良载体。但是B染色体较常染色体而言,通常数量少,长度短,如果基于常规遗传转化的随机性而言,目的片段插入到B染色体,并发生端粒介导的染色体切割的概率就小。幸运的是,Yu W等将pWY86质粒成功的导入了玉米的B染色体,并成功观察到了端粒介导的染色体切割的发生1],这为未来利用B染色体组构建植物人工染色体的研究带来了福音。然而,并不是所有植物物种都含有B染色体,并且,通常B染色体会随着减数分裂的进行而随机丢失或者增加1],这些无疑都给利用B染色体组构建植物人工染色体带来了麻烦。利用附加染色体构建植物人工染色体是又一个理想的选择。在自然界,很多物种都有附加系的存在,这些附加系多附加一对外源染色体,这些附加的外源染色体通常不会对植株发育造成影响,一些附加系很容易发生丢失,如黑麦的附加系[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&FTTID=1#_ENREF_2]2],然而有一些附加系具有很好的遗传稳定性,那么这些含有可以稳定遗传的附加系材料就可以成为构建人工染色体的优良载体。例如本研究的受体材料甘蓝型油菜就有很多附加系[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&FTTID=1#_ENREF_3]3],其中一些附加系就具有很好的遗传稳定性[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&FTTID=1#_ENREF_4]4]。如果以这些遗传稳定的附加系作为转化受体,在转基因后代中筛选目的片段定位于附加染色体并且发生了端粒介导的染色体切割的转化株系,就可以利用这些株系作为进一步的转化或者杂交受体,进行位点特异性重组,实现多基因的定点整合,并且不影响转基因植株的遗传稳定性和生长发育等性状。[size=10pt][1] Yu, W., Han, F., Gao, Z., Vega, J.M. and Birchler, J.A. (2007). Construction and behavior of engineered minichromosomes in maize. Proceedings of the National Academy of Sciences 104, 8924-8929.[size=10pt][2] 任正隆[size=10pt]. (1991). 黑麦种质导入小麦及在小麦育种的利用方式[size=10pt]. 中国农业科学 24, 18-25.[size=10pt][3] 戚存扣,[size=10pt], 浦惠明,[size=10pt] and 傅寿仲[size=10pt]. (1995). 甘蓝型油菜[size=10pt]-埃塞俄比亚芥二体附加系植株形态及细胞学鉴定[size=10pt]. 作物学报 21, 717-722.[size=10pt][4] 戚存扣,[size=10pt], 高冠军,[size=10pt], 浦惠明,[size=10pt], 傅寿仲,[size=10pt] and 仲裕泉[size=10pt]. (2000). [font=宋
21世纪以来,随着技术的发展,植物人工染色体技术迅速崛起,而目前最常用的两种构建人工染色体的方法就是“组装法”和“截短法”。“组装法”的研究起步较早,但是由于技术的限制,利用“组装法”构建植物人工染色体的进展一直不理想,到目前为止,也只有在玉米细胞中获得成功1]。然而这种人工构建的环状染色体与真核生物中正常存在的线形染色体相差甚远,因为不具有端粒结构,这种环状的人工染色体能否成为稳定的载体系统还有待进一步证实。与之相比,利用“截短法”构建植物人工染色体的的研究起步较晚,直至2006年才有关于利用“截短法”在玉米中构建植物人工染色体的报道[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_2]2]。尽管如此,这种方法还是获得了很大成功,随后,科研人员相继在拟南芥[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_3]3],大麦[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_4]4],水稻[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_5]5]中利用“截短法”构建了植物人工染色体,利用“截短法”构建植物人工染色体的研究获得了蓬勃的发展。然而,无论是“组装法”还是“截短法”都各自有其优缺点,笔者认为,“组装法”如果获得成功转化,并且能像常染色体一样稳定遗传,那么利用这种方法构建植物人工染色体周期短,后续应用方便。然而这一方法目前由于受到着丝粒在不同物种中的高度特异性,着丝粒区域的复杂性和难扩增性,以及遗传转化技术等多方面因素制约,使得其在植物中的研究和应用成功率极低,对于其相关的遗传稳定性也难以预料。“截短法”从目前的研究进展看,其可行性是毋庸置疑的,然而从众多的转基因事件中,筛选出转化受体生长发育等各方面性状不发生改变,同时在非常染色体上形成一对可稳定遗传的小染色体的过程也并非易事。不过笔者相信随着转化技术的进步,检测手段的简化和完善,利用“截短法”构建植物人工染色体用以改良作物必将获得长足进步和最终成功。[size=16px] [size=16px]
[img=,690,520]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801300826338324_3945_1633232_3.jpg!w690x520.jpg[/img][img=,690,511]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801300825152536_5967_1633232_3.jpg!w690x511.jpg[/img][img=,690,520]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801300825503312_9987_1633232_3.jpg!w690x520.jpg[/img]最近闲得无聊,制作了一套洋葱根尖染色体的压片,照了几张比较典型的染色体照片发上来大伙看看。固定液为卡诺,盐酸60度水解15min,改良本分品红染色5min,酒精盐酸分色,压片进行观察并照相,照相机为荣耀7[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif[/img]
想买台显微镜测试石棉,国标GB/T 23263里要求物镜为分散染色体观察用分散物镜,问了几家显微镜厂家都不知道是什么东西?哪位高人可以指点下啊。
据英国《每日邮报》1月7日报道,英国科学家找到了“急性癌症”的形成原因:细胞内的染色体发生“爆炸”破坏了DNA,从而让人有可能在短时间内患上癌症。相关论文发表于《细胞》。传统理论认为癌症是人体经历成千上万次的细胞突变后,慢慢演化的结果。但英国著名的疾病研究机构桑格研究所的新发现推翻了这种看法。这暗示了不管人们怎么努力保持身体健康,也不能保证命运不会拿他们开玩笑。同时还说明了为什么有些人在体检时根本没发现癌症痕迹,但数月后突然就被诊断患上这种疾病了。桑格学院的科学家是通过研究750个肿瘤的遗传缺陷后得出以上结论的。其中大部分的案例都与传统理论相符,染色体的损坏是常年累积的结果。然而,其中至少有1/40的肿瘤不符合“标准模式”,有的染色体似乎是在一夜之间遭到破坏的。参与此项研究的坎贝尔博士称:“测验结果太让我们惊讶了。在一个细胞里面,染色体经过一次或者是多次爆炸成为碎片。如果这个细胞开始笨拙地修补,把碎片杂乱的缝合起来,这样就破坏了原来的DNA结构,为癌症的快速形成提供了条件。”坎贝尔博士表示:“这个细胞应该说‘好吧,我放弃’,而不是像对待昂贵的瓷器一样,把染色体拼接回去。细胞试图修复一个不可修复的东西,最后造出一个灾难性的、能让癌症更快形成的基因组。”这种“急性癌症”在骨癌里面特别常见,大概1/4的患者身上都能看到明显的染色体受损特征模式。科学家目前还不能肯定是什么引起了这种染色体“爆炸”,但有嫌疑的罪魁祸首包括X光和晒伤。坎贝尔博士称:“如果我们能了解根本的病因,或许就可以防止患上这种癌症。”http://www.dailymail.co.uk/health/article-1344740/Why-cancers-develop-instant--cells-explode-wreaking-havoc-DNA.html---科学网
1.求助书一本 书名:中国主要经济植物基因组染色体图谱 作 者: 陈瑞阳出 版 社: 科学出版社
[em0803] [B]又送来几个样品, 说是要做植物细胞里的染色体观察[/B][color=#00008B]又是没接触过的样品,要怎么样制备啊?[/color]是不是要 去除掉细胞壁,用细胞内质的悬液来制备SEM样品啊?[em0813] [color=#DC143C]请教高人[/color][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/04/200804110922_84729_1630556_3.jpg[/img]
植物转基因技术已经成为现代分子生物学研究中的最重要手段。在过去的十几年里,植物转基因技术获得了重大发展,新型和更为有效的转化方法应运而生。尽管如此,农杆菌介导的遗传转化和基因枪法进行的遗传转化仍然是最重要的两种转化方法。农杆菌转化广泛应用于在谷类及双子叶植物。同时,其他转基因技术也迅速发展,如显微注射法、激光微束穿刺法、PEG 法、花粉管通道法、超声波法、阳离子转化法等1][/sup]。常规转基因技术具有很多优点。农杆菌介导的遗传转化成本低,不需要复杂的仪器设备,转化效率高,适用范围广,插入片段大。正因为具有以上优点,农杆菌转化是目前应用最为广泛的转化方法。基因枪法对转化受体要求低,几乎可适用于所有植物物种,方法快速简单;然而基因枪设备要求高,转化成本相对较高,这在一方面限制了基因枪法的使用。同时利用基因枪法获得的转化子通常具有多个转基因拷贝,粒子轰击也常会造成目的片段的断裂失活,转化子出现嵌合体频率高,这些也都在一定程度上限制了基因枪法的使用。其它方法在应用上都存在一定的局限性,或者是操作复杂,或者是适用的物种少。然而不管使用哪种常规方法,都有共同的局限性:1)插入位置的随机性,由于这种随机性的存在,可能导致转化受体发生性状上的改变,如败育,生长不良等等。2)常规的转基因技术多是进行单性状基因的转入,很难将控制多个性状的多个基因同时转入一种作物中,更难将整条复杂代谢途径中的所有基因引入作物中,很难产生新的复杂性状或代谢产物。3)外源基因在转入作物时,往往因整合进内源基因而破坏该内源基因的功能;同时转化的随机性使转入的外源基因受到整合区域上游或下游调控元件的影响,很难进行操控1]。相比之下,植物人工染色体技术具有很多优势:1)植物人工染色体单独成对存在于转化受体,并且稳定遗传给子代,不会影响和破坏其他染色体的结构和功能。2)植物人工染色体采用位点特异重组技术可以将目的基因定点整合到人工染色体的特定位置,不会破坏受体内源基因的功能,也不会受到整合区域上下游的影响。3)植物人工染色体可以承载多个基因,甚至编码复杂代谢网络的众多基因[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487&threadid=&postid=&title=&action=&FTTID=1&hasReadRelease=yes#_ENREF_2]2]。正是这些优势的存在,使得植物人工染色体技术当仁不让的成为第三代植物转基因技术,并具有广泛的应用前景。 [size=10pt][1] Barampuram, S. and Zhang, Z.J. (2011). Recent advances in plant transformation. Methods Mol Biol 701, 1-35.[size=10pt][2] Yu, W., Han, F. and Birchler, J.A. (2007). Engineered minichromosomes in plants. Curr Opin Biotechnol 18, 425-31.
人神经干细胞染色体是否有异常的检测的检测方法微生物检测,还是诺禾测序方法,那种比较好呢?
食品安全国家标准 小鼠精原细胞或精母细胞染色体畸变试验
染色液具有醋酸洋红染色方便的优点,还具有席夫试剂只对核和染色体染色的优点,且染色效果稳定可靠。此液适于动植物各种大小的染色体、体细胞染色体和减数分裂染色体,并具有相当牢固的染色性能,保存性好,室温下两年不变质。
[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/01/201901220814231064_5867_1633232_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/01/201901220813260621_1523_1633232_3.jpg!w690x517.jpg[/img]最近在一位朋友那里看到一张用苏木精染色的染色体压片,材料是大蒜根尖。压片非常漂亮,细胞核、染色体被染成了蓝黑色,其他细胞器基本未着色,对比清晰。向朋友请教染色方法,他也想不起来了。网上有哪位高人做出来过,能告诉我一下染色的方法吗?谢谢。
7月6日,Cell Stem Cell杂志报道,来源于男性和女性的人类诱导多能干细胞,在表观遗传稳定性和癌基因的表达方面均有较大的差异。 虽然人类诱导多能干细胞(hiPSCs)在再生医学中具有巨大潜力,他们的表观遗传变异性表明,有些hiPSCs细胞系可能不适合人类治疗。目前对hiPSCs进行质量评估的基准很有限。 本研究表明,X染色体失活标记可以用来将表观遗传学上独特的hiPSCs和表型上独特的hiPSCs区分开来。XIST(X-inactive specific transcript)是一个X染色体上的胎盘哺乳动物的X染色体失活过程中发挥主要效应的RNA基因。Xist表达的缺失与X-连锁癌基因的表达上调、细胞在体外加速增长,在体内较差的分化密切相关。 在X染色体失活潜力的差异可导致女性hiPSC细胞系在表观遗传学上的差异,而男性hiPSC细胞系一般彼此相似,并且不过度表达癌基因。 生理水平的氧气含量和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂均不能促进女性hiPSC细胞系的培养。 在X染色体失活潜力的差异可导致女性hiPSC细胞系在表观遗传学上的差异,而男性hiPSC细胞系一般彼此相似,并且不过度表达癌基因。推荐关注:磷酸化特异性ELISA试剂盒 反义寡核苷酸类 生理水平的氧气含量和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂均不能促进女性hiPSC细胞系的培养。 据此,研究者得出这样的结论:在培养条件下,女性hiPSCs的表观遗传稳定性比男性的较差;Xist的丢失可能导致质量不理想的干细胞系。
导读:药品安全作为国家食品药品监管局的重点监管项目之一受到广泛关注,而其中的中药安全随着近年来中医药的再度繁荣成为人们的关注焦点。 长期以来,中药材安全一直存在诸多隐患,生产日期造假、非法添加染色剂、农残产标、重金属超标、二氧化硫超标等等不一而足,而近期国家食品药品监管总局在全国范围内对黄柏、延胡索等中药材及中药饮片进行的专项监督抽验中,检出9批次添加了染色剂金胺O的不合格产品。 中药安全隐患多 “是药三分毒”,毒上加毒会怎样?中药里面被检出染色剂非此一例,对相关企业的处罚也未减轻,可为何中药材染色屡禁不止?这些非法添加会对人体造成什么伤害? 金胺O作为化学染色剂,曾发现被用于劣质黄柏、蒲黄、延胡索等中药材、中药饮片的非法染色。金胺O对人体具有一定毒性作用,被列为非食用物质,在中药材、中药饮片和中成药中均不得检出。 除了金胺0,苏丹红也经常被发现用于劣质血竭等药材的非法染色,苏丹红的化学成份中含有一种叫萘的化合物,具有致癌性,对人体的危害极大,国家规定在中药材、中药饮片和中成药中均不得检出。 现在逢年过节,很多人喜欢购买人参、灵芝、冬虫夏草等珍贵的中草药馈赠亲友,可这些卖相很好的中药有时候却可能含致命隐患。硫磺作为防腐剂和抗氧化剂,对中药材的加工储藏有一定的帮助作用,因此药材养护过程中经常会让二氧化硫熏蒸空气以间接作用于药材,然而随着时间推移,很多人为了商业利益,用硫磺对药材进行反复熏蒸来达到增白增色作用,熏蒸时间的延长和次数的增多会使药材中的一些有效成分发生变化,从而影响中药饮片的品质,对人体肝脏、肾脏等器官都有潜在危害。虽然2005年的《中国药典》已经表明不允许在中药材中使用硫磺熏蒸来增白、增艳、防虫,但是这根本无法遏制某些生产商欺上瞒下。 此外,中药材种植过程中滥用农药、抗生素、化肥,致使中药材的农药残留和重金属超标在行业内早已不是什么秘密,中药造假、非法炮制更已被多次曝光。 生病吃药本为痊愈,如果因吃药导致旧病未好再添新症,那真是得不偿失,还有谁人敢用药?其实究其原因,中药出现诸多安全隐患,到头来还是为一个字——利。利字当头,利用染色剂可以使劣质药材呈现好卖相,当然就有不良商家不惮于尝试了,他们会全面给大家阐释什么叫天下熙熙,皆为利来,天下攘攘,皆为利往。 保障中药安全 做好分析检测工作 要做好中药质量安全保障工作,对其分析检测尤为重要,传统的中药检测鉴别方法主要有济源鉴别、显微鉴别、经验鉴别和理化鉴别,然而由于这些方法都存在一定的局限性文无法做到绝对准确鉴别,那么还有何种方法可大展身手? 分光光度法是一个不错的选择,利用紫外可见分光光度计、红外分光光度计、原子吸收分光光度计以及荧光分光光度计对中药材进行检查、鉴别和含量测定成为中药常用的仪器分析方法之一,原子光谱法在测定中药中重金属含量上更具有其他方法无可比拟的优势。 此外,经常利用色谱分析进行中药中是否添加染色剂的检测,高效液相色谱法对中药中的农残检测也是得心应手。 至于鉴定中药材真伪,DNA条形码技术的出现为药用植物分类和鉴定提供了本质依据。只需选用一个或少数几个基因片断即可对绝大部分中药物种进行准确鉴定,可以在短时间内鉴定大量样本,重复性和稳定性高,实验过程标准、操作简单,更易实现物种鉴定自动化,可有效缓解分类鉴定人才缺乏的现状。 总之,保障中药安全,就是一个跟不法商家斗智斗勇的过程,你有金钟罩,我有铁布衫,你有张良计,我有过墙梯,监管人员要抓住违法实证施加会心一击,才能遏制中药市场的不正风气,为保障药品安全增加更多助力。
[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280853256674_3927_1633232_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280853226449_8470_1633232_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,587,441]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280853198544_3280_1633232_3.jpg!w587x441.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280853155025_9133_1633232_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,587,441]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280852323051_6458_1633232_3.jpg!w587x441.jpg[/img][img=,690,604]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280852421508_5435_1633232_3.jpg!w690x604.jpg[/img][img=,690,510]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280852385101_6177_1633232_3.jpg!w690x510.jpg[/img][img=,587,441]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280852323051_6458_1633232_3.jpg!w587x441.jpg[/img][img=,690,472]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280851576289_2590_1633232_3.jpg!w690x472.jpg[/img][img=,690,472]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280851576289_2590_1633232_3.jpg!w690x472.jpg[/img][img=,690,495]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280852199139_1711_1633232_3.jpg!w690x495.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910280853107356_6867_1633232_3.jpg!w690x517.jpg[/img]国庆节在家放假没事干,发现水培的银边吊兰长出了白白的根,于是兴起,取材固定,染色压片,镜检观察,手机拍照,狠狠地玩了一天。发点自己认为还不错的照片大家看看。固定液:卡诺。染色液:改良苯酚品红。
亚甲基蓝 分析纯与生物染色剂 两个种类,除了含量不同外,还有什么区别?做膨润土吸蓝量测试,可以用染色剂代替分析纯吗?意思是用分析纯亚甲基蓝需要2.2280g,可不可以多用一些染色剂,使两者含量相同?
生物体内的染色,例如某个进入生物体的颗粒能染色吗?想看一下这个颗粒进入生物体后会结合在什么部位。所以,想对颗粒进行染色处理,或者标记把,标记的话受限于仪器,最好能在TEM、SEM等显微镜下能用的。。。因为同位素世宗搞不到。。。
导读:今年,随着屠呦呦获得诺贝尔奖让中国中药迅速成为全球关注的焦点。然而,我国中药行业发展还面临很多挑战,中药材的安全性也存在诸多隐患。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511101644_572992_3013923_3.png 近日,在国家食品药品监督管理总局的一次专项抽验中,以生产中成药为主的亚宝药业集团股份有限公司被检测出中药原料延胡索使用了化学染色剂金胺O。 我们普通消费者对中药名肯定不是很了解,对于这化学染色剂金胺O可能也感到陌生。金胺O为黄色均匀粉状物,易溶于热水呈亮黄色,溶于乙醇呈黄色,其水溶液加入浓硫酸稀释后呈淡黄色。主要用于麻、纸、皮革、草编织品、人造丝等的染色,也用于印染棉织品。碱性金胺O可用于油、脂肪、油漆等的着色。 金胺O对皮肤黏膜有轻度刺激,可引起结膜炎、皮炎和上呼吸道刺激症状,长期过量食用,将对人体肾脏、肝脏造成损害甚至致癌。早在2008年被卫生部列为非食用物质,在中药材、中药饮片和中成药中均不得检出。 但其仍然是中药染色剂中的常客。近年来,食药总局曾多次检出药材延胡索、蒲黄等中含金胺O。除食药总局之外,各省市食药监局所检测出的金胺O也不在少数。 那么,为什么要对这些药材进行染色呢?据悉,中药饮片染色主要有三种情况:伪品通过染色掺入正品中,这种情况较为多见,掺入量达50%左右;第二种情况则是正品通过染色以次充好,这种常见于人工培植的山参染色后便于高价卖出;第三种则是劣药通过染色,继续入药。 无论是哪种原因,都对中药饮片、成药的质量以及服用者的身体健康产生严重的影响。中药材的质量安全保障并不是某一个环节的问题,从种植、采摘、贮藏、加工、制剂,每一个环节都非常重要。要确保公众用药的安全,药企必须以产品安全为“红线”,坚持“质量重于生命”的理念,建立从源头、生产到售后的全程质量监控体系,切实负起质量安全的第一责任。 面对中药染色屡禁不止的现状,对中药的检测就显得十分重要。精密仪器的不断发展给中药质量标准提供了先进的方法手段,如用气相色谱法、高效液相色谱法、色谱-光谱-计算机联用技术薄层扫描法、核磁共振波谱法、超临界流体色谱法等先进技术和设备来研究分析中药质量。 在常规分析技术方面,采用导数光谱分析多种成分,也用比色法、薄层层析-紫外分光光度法等分析方法。 目前,我国的药品管理法不涉及原生中药材,对其质量监管处于一种比较尴尬的地位,监管力度不够,单纯依靠企业自检很难解决中药市场目前的问题。 要从源头上解决问题,首先就是从药材种植上做到规模化、产业化;其次,强有力的监督执法权也是规范市场必不可少的。虽然现在食药监局可能存在人员有限、现有的专业人员不足等情况,但随着2015年版《中国药典》的即将实施,及先进科学仪器的助力,我国中药质量和安全性将整体提高,保障公众用药安全有效。
[b][font=inherit][font=黑体]一、项目基本情况[/font][/font][/b] [font=仿宋]项目编号:JSZC-320100-JING-G2024-0049[/font] [font=仿宋]项目名称:南京市公安局案件样本常染色体扩增、检验试剂(含部分进口试剂)采购(2024年度)[/font] [font=仿宋]预算金额:243.000000万元[/font] [font=仿宋]最高限价(如有):242.88万元,超过限价的报价作无效标处理。[/font] [font=仿宋]采购需求:[/font] 案件版常染色体STR扩增试剂盒(核心产品)、阴极缓冲液、阳极缓冲液、毛细管、分子量内标、电泳分离胶、去离子甲酰胺、实时定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]扩增试剂盒等采购,具体详见招标文件。 [font=仿宋]合同履行期限:合同签订后90日内,中标供应商将完成合同任务所需的全部试剂耗材送至采购人指定地点。[/font] [font=仿宋]本项目(是/否)接受联合体投标:否[/font] [b][font=inherit][font=黑体]二、申请人的资格要求:[/font][/font][/b] [font=仿宋](一)满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定:[/font] 1.具有独立承担民事责任的能力(法人或者其他组织提供营业执照或法人证书或组织机构代码证,自然人提供身份证,提供证明材料复印件加盖公章); 2.具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度(提供参加本次政府采购活动前的会计报表,成立不满一年的无需提供,提供证明材料复印件加盖公章); 3.具有履行合同所必需的设备和专业技术能力(根据项目需求提供履行合同所必需的设备和专业技术能力的声明或证明材料复印件加盖公章); 4.有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录(提供参加本次政府采购活动前一年内至少一个月依法缴纳税收和社会保障资金的相关材料,提供证明材料复印件加盖公章); 5.参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录(提供参加本次政府采购活动前3年内在经营活动中没有重大违法记录的书面声明); 6.法律、行政法规规定的其他条件。 [font=仿宋](二)落实政府采购政策需满足的资格要求:[/font] 本项目不专门面向中小微企业采购,执行价格扣除优惠政策,对小微企业报价给予10%的扣除。提供《中小企业声明函》(格式见第六章);监狱和戒毒企业视同小型、微型企业,提供由省级以上监狱管理局、戒毒管理局(含新疆生产建设兵团)出具的属于监狱企业的证明文件;残疾人福利性单位视同小型、微型企业,提供《残疾人福利性单位声明函》(格式见第六章)。 [font=仿宋](三)本项目的特定资格要求:[/font] /。 [b][font=inherit][font=黑体]三、获取招标文件[/font][/font][/b] [font=仿宋]时间:2024年09月02日至2024年09月06日,每天上午09:00-11:30,下午14:00-17:00(北京时间,法定节假日除外)[/font] [font=仿宋]地点:南京市秦淮区建邺路116号二楼(江苏经天纬地建设项目管理有限公司)[/font] [font=仿宋]方式:供应商的法定代表人或其授权的委托代理人持个人有效身份证件原件及复印件、单位介绍信原件(或授权委托书原件)领取招标文件,招标文件售后不退。[/font] [font=仿宋]售价:100.00元[/font] [b][font=inherit][font=黑体]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/font][/font][/b] [font=仿宋]2024-09-24 14:00 (北京时间)[/font] [font=仿宋]地点:南京市秦淮区建邺路116号二楼会议室[/font] [b][font=inherit][font=黑体]五、公告期限[/font][/font][/b] [font=仿宋]自本公告发布之日起5个工作日。[/font] [b][font=inherit][font=黑体]六、其他补充事宜[/font][/font][/b] 6.1本项目接受进口产品。 6.2本项目在“江苏政府采购网”、“南京公共采购信息网”发布公告。 6.3政府采购信用承诺:根据《关于在政府采购活动中推行信用承诺制的通知》宁财购通〔2021〕5号规定,参加南京地区政府采购活动的供应商,应以书面形式向采购人或政府采购代理机构作出信用承诺。供应商应尽早做好承诺工作,点击‘南京公共采购信息网’首页 (https://njgc.jfh.com/)‘南京市政府采购供应商诚信档案’系统链接打开系统页面(http://180.101.238.212:8280/hodeframe2018_cxda/index.action jsessionid=769BA9C8E1729422E7173B991C8EC1E5)登录(未注册的供应商应先点击‘供应商注册点这里’并按 要求完成注册),然后在“信用记录”模块页面点击“信用记录打印”下载本单位《南京市政府采购供应商信用记录表暨信用承诺书》,由法人签字并盖单位公章,随投标文件一并递交。 根据《关于在政府采购活动中推行信用承诺制的通知》宁财购通〔2021〕5号规定,在政府采购资格审查环节,供应商只需提供书面《南京市政府采购供应商信用记录表暨信用承诺书》(自身符合《政府采购法》第二十二条规定、按约定提交相关材料的承诺,以及违背承诺自愿承担相关责任的约定),即可替代以下证明材料: (1)符合国家相关规定的财务状况报告; (2)依法缴纳税收的证明材料; (3)依法缴纳社会保障资金的证明材料; (4)具备履行政府采购合同所必需的设备和专业技术能力的证明材料; (5)参加政府采购活动前三年内在经营活动中没有重大违法记录的证明材料; (6)未被列入失信被执行人、重大税收违法失信主体、政府采购严重违法失信行为记录名单的证明材料。 供应商在中标后,应按采购文件要求,将上述由信用承诺书替代的证明材料提交采购人或采购代理机构核验。经核验无误后,由采购人或采购代理机构发出中标通知书。 供应商涉及以下情形的,不适用信用承诺: (1)供应商被列入严重失信主体名单; (2)被相关监管部门作出行政处罚且尚在处罚有效期内; (3)其他法律、行政法规规定的不适用信用承诺的情形。 供应商对信用承诺内容的真实性、合法性、有效性负责。如作出虚假信用承诺,视同为“提供虚假材料谋取中标、成交”的违法行为。 6.4投标人应当从招标代理机构合法获得招标项目的招标文件。 6.5拒绝下述供应商参加本次采购活动: (1)供应商单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的政府采购活动。 (2)凡为采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商,不得再参加本项目的采购活动。 (3)供应商被“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)、“中国政府采购网"(www.ccgp.gov.cn)列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单。 (4)未提供《南京市政府采购供应商信用记录表暨信用承诺书》。 6.6勘察现场或答疑:采购人不组织踏勘,投标人可自行踏勘。 6.7投标人的投标文件壹式伍份(正本壹份、副本肆份),每份投标文件须清楚标明“正本”、“副本”。所有投标文件均应密封后递交,同时应提供电子版投标文件壹份(一般应为PDF格式、U盘形式(单独封装)、随纸质文件一并提交),开标一览表壹份(单独封装,并标明“开标一览表”字样,随纸质文件一并提交,以便唱标时使用)。当电子版文件和纸质正本文件不一致时,以纸质正本文件为准。 [b][font=inherit][font=黑体]七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。[/font][/font][/b] [font=仿宋]1.采购人信息[/font] 单位名称:南京市公安局刑事侦查局 单位地址:江苏省南京市秦淮区白下路101号 联系人:袁警官 联系电话:025-84427538 [font=仿宋]2.采购代理机构信息(如有)[/font] 单位名称:江苏经天纬地建设项目管理有限公司 单位地址:南京市秦淮区建邺路116号二楼 联系人:陈凯 联系电话:18706290972 [font=仿宋]3.项目联系方式[/font] 项目联系人:陈凯 电话:18706290972
染色方法 微生物染色方法一般分为单染色法和复染色法两种。前者用一种染料使微生物染色,但不能鉴别微生物。复染色法是用两种或两种以上染料,有协助鉴别微生物的作用。故亦称鉴别染色法。常用的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法,此外还有鉴别细胞各部分结构的(如芽胞、鞭毛、细胞核等)特殊染色法。食品微生物检验中常用的是单染色法和革兰氏染色法。1、单染色法 用一种染色剂对涂片进行染色,简便易行,适于进行微生物的形态观察。在一般情况下,细菌菌体多带负电荷,易于和带正电荷的碱性染料结合而被染色。因此,常用碱性染料进行单染色,如美兰、孔雀绿、碱性复红、结晶紫和中性红等。若使用酸性染料,多用刚果红、伊红、藻红和酸性品红等。使用酸性染料时,必须降低染液的PH值,使其呈现强酸性(低于细菌菌体等电点),让菌体带正电荷,才易于被酸性染料染色。 单染色一般要经过涂片、固定、染色、水洗和干燥五个步骤。 染色结果依染料不同而不同: 石碳酸复红染色液:着色快,时间短,菌体呈红色。 美兰染色液:着色慢,时间长,效果清晰,菌体呈兰色。 草酸铵结晶染色液:染色迅速,着色深,菌体呈紫色。2、革兰氏染色法 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。 细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物,它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度底,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据。 另外,阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同PH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应;PH很低时,则可都呈负反应。此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色。所以脱色时间,脱色方法也应严格控制。本文来自检验地带网 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: 1)涂片固定。 2)草酸铵结晶紫染1分钟。 3)自来水冲洗。 4)加碘液覆盖涂面染1分钟。 5)水洗,用吸水纸吸去水分。 6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分。 7)蕃红梁色液(稀)染10秒钟后,自来水冲洗。干燥,镜检。 染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。
染色技术由于微生物细胞含有大量水分(一般在80-90%以上),对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大,与周围背景没有明显的明暗差。所以,除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外,绝大多数情况下都必须经过染色后,才能在显微镜下进行观察。但是,任何一项技术都不是完美无缺的。染色后的微生物标本是死的,在染色过程中微生物的形态与结构均会发生一些变化,不能完全代表其生活细胞的真实情况,染色观察时必须注意。 本节包括四部分: 一、染色的基本原理 二、染料的种类和选择 三、制片和染色的基本程序 四、染色方法
各位大虾们,请问高分子染色后是否会改变晶体的结构呢我做PEG染色时,染色之前可以得到衍射点,染色之后就得不到了,为什么呢
染色就是利用染料在组织切片上给与颜色,使其与组织或细胞内的某种成分发生作用,经过透明后通过光谱吸收和折射,使其各种微细结构能显现不同颜色,这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。染色剂与组织细胞相结合而使组织细胞着色的过程与物理和化学作用两者都有关系。 一.染色的物理现象 1.溶解性: 这种染色最典型的例子就是脂肪染色,苏丹类染色剂为脂溶性染料,它可以被脂质溶解,使脂质着色,就是利用染色剂在脂质中的溶解度大于在酒精等溶剂中的溶解度这一特性。因此,当苏丹类的酒精溶液与组织细胞中的脂质接触时,染色剂就从溶液中“转移”到脂质中去,而使脂质着色。 2.吸附作用: 较大物体有从周围介质吸附小颗粒到自身的特性。有些染色则是染色剂分子通过渗透和毛细管作用而被吸收或沉淀到组织,细胞的小孔中去而着色的。例如活性炭吸附各种分子,甚至胶质和微生物等较大的颗粒一样。 二.染色的化学反应 酸性染料和碱性染料的染色作用常是对立的,而不是一致的。任何染料均可电离,离解出阳离子或阴离子。酸性染料中的酸性部分有染色作用的是阴离子;碱性染料中的碱性部分有染色作用的是阳离子,细胞内同时含有酸性和碱性物质,酸性物质与碱性染料中的阳离子相结合,如细胞核(含有核酸)黏液和软骨基质呈酸性部分被盐基性染料苏木素所染、反之碱性物质与酸性染料的阴离子相结合,如细胞浆及其内部的某些颗粒物质被酸性染料伊红所染。染料的颜色基不是在阳离子,就是在阴离子上,这些离子将因组织反应不同而发生化学结合,如显示含铁血黄素的普鲁士兰反应是最典型的例子。但是,大量染色的化学反应并不象铁反应那样明确,实际情况远为复杂。这是因为蛋白质分子是个分子量自几万至几百万的大分子,每个分子中含有很多阳离子和阴离子基因,在等电点时能形成游离的两性离子,如:[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/02/200902201138_134240_1643419_3.jpg[/img]P为蛋白质,是具有两性的胶体物质。它呈酸性或碱性与环境的PH值有关,如溶液的PH值小于该蛋白质的等电点则此溶液对该种蛋白质即为酸性,蛋白质就带正电,将被酸性染色剂所着色。反之,溶液的PH值大于蛋白质的等电点,则此溶液对该蛋白质来说即为碱性,蛋白质带负电,将被带有阳离子的染色剂所浸染。在日常工作中,长久固定于甲醛的组织切片,往往染色不良,尤其是核的着色欠佳。这是因为固定液甲醛氧化生成甲酸,组织亦随之变为酸性,所以不易被苏木素所着色,补救的办法是,先用流水冲洗组织块,然后用碱性溶液如稀氨酒精等处理使之中和,恢复正常PH值后再进行染色。大多数染色的原理至今仍未搞清楚。有些可能是物理的,有些可能是化学的,有些则可能两种机制都起作用,正因为人们对染色的原理还没有完全掌握,所以目前还不能很好地运用原理来控制它。在相当程度上要凭借工作经验。因此“染色”成为技术性很强的一项工作。在进行每一种染色方法时,必须注意不断地有意识地去积累经验,从成功与失败中去真正掌握该染色技术。
为一种生物染色剂,必须同时满足两个要求:具有鲜艳透明的颜色,而且能与组织细胞相结合。染色剂分子能够显示颜色的基因,称为发色团。主要的发色团有:亚硝基和偶氮基显示的颜色较强,在染色剂中有一个这样的发色团,就可染出颜色。其他的发色团则不是这样,必须有几个发色团,有醌的分子中就有四个发色团,(2个羰基2个烯基)。 大量的合成染料都是由煤焦油蒸馏得到的,它们都是苯的衍生物,所以苯环是合成染料的基础。苯本身是无色的,但其氢原子为某发色团取代后就带有了颜色。含有发色团的苯环化合物,称为色原。 苯+发色团=色原 色原还不能很好地与组织细胞相结合,即使着了色也很容易脱去。因此仅仅具有色原还不能成为染色剂,染色剂分子中还需具备促使染色剂与组织细胞相结合的基因,这样基国在称为助色团。如—NH2 —COOH —OH —SO3H 氨基 羧基 羟基 磺酸基 氨基在溶液中形成阳离子(+),为碱性;其它羟基,羧基和磺酸基皆带阴离子(-)故为酸性。如三硝基甲苯是个色原,它虽有发色团—硝基,但因缺乏助色团,所以没有染色作用,不能称为染料。假如三硝基苯分子中的一个氢原子被羟基置换,则所生成的化合物既具有发色团而又得到了助色团—羟基,这就成了常用的酸性染料苦味酸。 这就可以看出,助色团的作用在于使色原形成盐类,可以在溶液中电离成为带电的离子,这样才能与相应的组织细胞的成份相结合。
各位高手,想用薄层层析来分离真菌发酵上清液中的活性物质,透析实验大概知道活性物质的分子量是500-1000左右,但是不知道这个活性物质的性质,请问在染色时应该如何选择?新手上路,望多指教!