实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体,也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
[font=宋体]在生物学和医学领域,抗原与抗体之间的结合反应是极为重要且复杂的过程。这种反应不仅关乎免疫系统的正常运作,而且在诊断、治疗等多个领域具有广泛的应用。本文将详细探讨抗原抗体结合反应的原理及其背后的生物学意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一、抗原与抗体的基本概念[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原,通常是指能够刺激机体产生特异性免疫应答的物质。它们可能是外来的微生物、毒素,也可能是机体自身的异常成分。抗体,则是免疫系统在受到抗原刺激后产生的特异性免疫球蛋白,能够与抗原发生特异性结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、抗原抗体结合的结构基础[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体之间的结合,依赖于它们分子间的结构互补性和亲和性。这种互补性主要源于抗原的表位和抗体的结合部位之间的匹配。抗原的表位,即其表面能够与抗体结合的区域,通常是特定的化学基团或空间构象。而抗体的结合部位,即其能够与抗原结合的区域,由重链和轻链上的可变区组成,形成了特定的空间结构,能够与抗原表位进行精确的结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、抗原抗体结合的动力学过程[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应通常可以分为两个阶段。第一阶段是抗原与抗体发生特异性结合的阶段,此阶段反应速度极快,仅需几秒钟即可完成。这是因为抗原抗体之间的结合是高度特异性的,一旦找到合适的配对,它们会迅速结合形成抗原抗体复合物。第二阶段是可见反应阶段,此时抗原抗体复合物在环境因素的影响下,进一步交联和聚集,表现为凝集、沉淀、溶解等肉眼可见的反应。这一阶段的反应速度较慢,往往需要数分钟至数小时。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、抗原抗体结合反应的意义[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应在生物学和医学领域具有广泛的应用。在免疫学中,它是机体免疫系统识别和清除外来抗原的基础。在医学诊断中,利用抗原抗体反应可以进行疾病的快速、准确诊断。例如,利用单克隆抗体技术可以检测乙型肝炎等病毒。此外,抗原抗体反应还被广泛应用于治疗领域,如利用载药单克隆抗体进行肿瘤的靶向治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]五、总结[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应是生物学和医学领域的重要反应之一,其原理涉及到分子间的结构互补性和亲和性、反应动力学等多个方面。对这一反应的研究不仅有助于我们深入理解免疫系统的运作机制,也为疾病的诊断和治疗提供了新的方法和手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]
影响抗原[url=https://www.tw-reagent.com/category.php?id=34]抗体[/url]反应的因素有两方面,一是反应物自身的因素;二是反应环境条件。 (一)反应物自身的因素 1.抗体:不同来源的抗体,反应性各有差异,抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应,为提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成,单克隆抗体不适用于沉淀反应。 2.抗原:抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应,单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。 (二)反应环境条件 1.电解质:抗原与抗体发生特异性结合后,虽由亲水胶体变为疏水胶体,若溶液中无电解质参加,仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。 2.酸碱度:抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6~9进行,有补体参与的反应pH为7.2~7.4,pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应。 3.温度:在一定范围内,温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速。一般为15℃~40℃,常用的抗原抗体反应温度为37℃,温度如高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏。此外,适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触,加速反应。
[font=宋体]抗体和抗原是生物学中重要的概念,它们在免疫学、医学和生物学等领域都有广泛的应用。抗体和抗原具有一些显著的区别,这些区别主要体现在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面。本文将对这些差异进行详细的阐述。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]首先,让我们了解一下抗体的化学结构。抗体是一种免疫球蛋白,具有两条相同的抗原结合簇。抗原决定簇是抗体与抗原结合的关键部位,它们在空间结构上呈现出一定的形状和大小,能够与抗原的特定部位精确结合。然而,抗原通常具有多个抗原决定簇,这使得抗原能够与多种抗体结合,从而在免疫反应中发挥重要作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]接下来,让我们了解一下抗原的产生方式。抗原是能够诱发免疫应答的分子,通常是由病原微生物产生的一种外源物质。例如,细菌的细胞壁、病毒的包膜蛋白等都可以作为抗原。与此相反,抗体是由淋巴细胞产生的,特别是浆细胞。在接受抗原的刺激后,浆细胞会分化为能够产生抗体的浆细胞,从而在体内产生大量的抗体,以应对抗原的侵袭。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]此外,抗体和抗原在溶解性上也存在显著差异。抗原的溶解性通常受到[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]和电解质浓度的 影响,而抗体的溶解性则与抗原无关。这一差异在生物学和医学领域具有重要的意义。例如,在疫苗研发中,科学家需要了解抗原的溶解性,以确保疫苗的有效性。而在抗体治疗中,医生需要了解抗体的溶解性,以确保抗体能够有效地发挥作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]另外,抗体和抗原的特异性也存在明显的差异。抗原的特异性取决于抗原决定簇的立体构型和间距,这意味着不同的抗原决定簇可以激发不同的免疫应答。与此相反,抗体的特异性取决于抗体的独特型。独特型是指抗体的抗原结合部位的空间结构,它决定了抗体与抗原的特异性结合。因此,不同的抗体可以与不同的抗原结合,这使得抗体在免疫应答中具有多种不同的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]最后,抗体和抗原在效应功能上也存在显著的差异。抗原主要是刺激免疫系统产生抗体,从而在体内产生免疫应答。然而,抗体在与抗原结合后,能够激活补体系统,促进吞噬细胞对病原微生物的吞噬,从而发挥效应功能。此外,抗体还可以通过调理作用促进吞噬细胞的吞噬,以及通过[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]作用(抗体依赖的细胞毒性作用)诱导细胞对靶细胞的杀伤作用。这些效应功能使得抗体在免疫防御和免疫治疗中具有广泛的应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述,抗体和抗原在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面存在显著的区别。这些区别决定了抗体和抗原在免疫应答中的不同作用和应用。在生物学、医学和免疫学等领域中,了解抗体和抗原的区别对于理解免疫应答的机制、疫苗研发、抗体治疗等方面都具有重要的意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着抗体制备技术的发展,现在已有多种方法可用于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production][b]抗体制备[/b][/url]。可使用体外杂交瘤细胞制备单克隆抗体。一般在兔体内[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-production][b]制备多克隆抗体[/b][/url]。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发,义翘神州已成为行业领先的抗体制备公司。我们可提供克级数量的定制抗体生产,交货迅速,价格优惠。从基因序列到纯化抗体([/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克),只需几周时间,成品产品即可送到您家门口。详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]
[font='calibri'][size=13px]什么是中和抗体?如何检测[/size][/font][font='calibri'][size=13px]假病毒[/size][/font][font='calibri'][size=13px]中和抗体?[/size][/font]什么是中和抗体?中和抗体是一类与病毒结合并使病毒失去传染性的抗体。当病毒侵入人体时,浆细胞会产生病毒特异性抗体,但只有少数是中和抗体。中和机制如下:(1)改变病毒表面的构象;(2)与吸附相关的病毒表位结合,阻断其与宿主细胞受体的相互作用;(3)与病毒形成免疫复合物,易于被巨噬细胞清除;(4)当病毒表面抗原与中和抗体结合时会激活补体,从而导致病毒裂解。S蛋白(spike protein)是SARS-CoV-2病毒的主要包膜蛋白,由S1和S2亚基组成的三聚体跨膜糖蛋白,负责识别宿主细胞受体即血管紧张素转换酶2(ACE2)并介导膜融合。S1亚基上的受体结合域(RBD)直接参与宿主受体识别并介导病毒入侵。S蛋白上的受体结合结构域(RBD),被认为是病毒感染宿主细胞的关键位点和大多数中和抗体的靶标。中和抗体可阻止S1或RBD与ACE2结合,从而防止病毒侵入宿主细胞并最终阻止病毒感染(图1)。因此,S1或RBD的突变可能会导致SARS-CoV-2有较强的传染性。如何检测假病毒中和抗体?中和抗体检测试验包括病毒中和试验、假病毒中和试验和替代病毒中和试验。病毒中和试验中和抗体检测的金标准是病毒中和试验,主要包括空斑减少中和试验和微量中和试验。两种方法都使用定量的活病毒与不同稀释度的等量血清混合,并接种预先准备好的单层细胞。最后,根据空斑形成单位或细胞病变效应来评估中和抗体的效价。由于涉及到活病毒的操作,这些检测只能在生物安全三级实验室进行,极大地限制了空斑减少中和试验和微量中和试验的使用。假病毒中和试验目前,越来越多的实验室使用假病毒中和试验进行中和抗体检测。SARS-CoV-2假病毒以非致病性病毒(如复制缺陷型HIV-1)为载体,将载体病毒的包膜蛋白替换为SARS-CoV-2的S蛋白,并引入检测信号分子,例如GFP和荧光素酶。假病毒利用S蛋白的RBD结构域与ACE2结合,模拟病毒入侵的过程。中和抗体可有效抑制SARS-CoV-2假病毒感染宿主细胞(图2),并通过信号检测评估中和抗体效价。由于假病毒为一次性感染病毒,不具备自我复制能力,无生物安全危险,所以这种方法可以在生物安全二级实验室进行。替代病毒中和试验替代病毒中和试验是基于竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理,利用重组RBD蛋白与重组ACE2蛋白的结合作用来模拟病毒-细胞相互作用。样品中的中和抗体可有效阻断RBD蛋白与ACE2蛋白的结合。与病毒和假病毒中和试验相比,替代病毒中和试验更安全、更容易执行且耗时更少。中和检测服务信息由北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)为您提供,如您想了解更多关于SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒中和检测服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。具体详情可点击:https://cn.sinobiological.com/services/pseudovirus-neutralization-assay-service
[font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]高可能是有过感染史或者现症感染,还需综合其他数据分析。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒是一种很常见的疱疹病毒,多见于不明原因发烧患者,[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原可刺激人体产生两种抗体,一种是[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体],还有一种是[/font][font=Calibri]IGM[/font][font=宋体]。一般如果只是[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]指标上升,[/font][font=Calibri]IGM[/font][font=宋体]保持在正常范围内,则表示患者有过[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒感染病史,现已康复 ;如[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IMG[/font][font=宋体]都处于升高范围,则表示患者近期感染[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒,可能还会伴随有发热、淋巴结肿大、皮疹等症状表现。下面对几个常见概念进行科普:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]阳性[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]阳性并不是[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒检测专有的检测,如单纯疱疹病毒、风疹病毒等多种疾病,都需要进行[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]的检测。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]当病原体等感染机体后,免疫系统会产生[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]等不同的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体:[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫应答中首先分泌的具有保护性的抗体;一般在机体收到感染时快速产生,经过一段时间[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体量逐渐减少而消失;[/font][/font][font=宋体][font=宋体]所以检测[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体阳性,在临床上是提示为目前体内存在感染的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体:[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]当[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体出现后,随后会出现[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体;但[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体在机体内持续的时间会比较长;[/font][/font][font=宋体][font=宋体]所以检测[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体检测阳性,在临床上是提示患者存在既往感染等的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒[/font][font=Calibri](EBV)[/font][font=宋体]是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]又称人类疱疹病毒[/font][font=Calibri]4(HHV-4)[/font][font=宋体];主要通过唾液等传染,是传染性单核细胞增多症的病原体;因[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]一旦入侵机体,可能会对[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞进行诱导,使其转化为恶性肿瘤细胞,所以[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]感染与鼻咽癌、胃癌、淋巴瘤等疾病的发生、发展有密切关系。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]编码多种结构抗原,如病毒衣壳抗原([/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体])、早期抗原([/font][font=Calibri]EA[/font][font=宋体])、膜抗原([/font][font=Calibri]MA[/font][font=宋体])、核抗原([/font][font=Calibri]NA[/font][font=宋体])等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在机体感染[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]后针对不同的抗原会产生相应的抗体,如抗[/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]、抗[/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]、抗 [/font][font=Calibri]EBNA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过对这些[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]特异性抗体进行检测,可以明确目前机体的情况,如对帮助判断是否是原发性[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]感染、或是既往感染等的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri](igG)[/font][font=宋体]、抗[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]核抗原[/font][font=Calibri](EBVNA[/font][font=宋体]一[/font][font=Calibri]igG)[/font][font=宋体]呈阳性,即提示存在既往有[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒感染,但要明确目前的身体的情况,需要配合[/font][font=Calibri],igM[/font][font=宋体]等其他的结果分析,以明确后续的方向。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前利用[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url],义翘神州可向全球客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]细胞抗体制备服务[/b][/url],整个过程涉及单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分离、测序、克隆和单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体筛选等步骤。详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
因实验原因,需要买一对抗原/抗体,什么抗原/抗体都可以,效价要高一些,抗体要纯一些,谁那里有在下面电子邮件发个信息吧happybsky@163.com
内容很全很细,有工作与抗原抗体相关的同仁们都可以看看
现在不管 国外 还是国内,在生物原料方面,成品的抗原抗体以及定制的抗原抗体等都发展得越来越好。抗体抗原种类可谓是五花八门,琳琅满目,而且非技术人员选择采购也很麻烦。这里列举少数最热门的一部分
[font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody][b]抗独特型抗体[/b][/url]是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇([/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体])组成,每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区,也可存在于轻链可变区,或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体在治疗性抗体药物开发过程中有着非常广泛的应用。由于抗独特型抗体与抗药抗体([/font][font=Calibri]Anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体])之间的相似性,抗独特型抗体在免疫原性([/font][font=Calibri]Immunogenicity[/font][font=宋体])分析中可作为阳性对照用于抗药物抗体总量的测定。另外,在抗体药的药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])和药效学([/font][font=Calibri]PD[/font][font=宋体])分析中,抗独特型抗体可用于检测血液中抗体药物的含量(游离型、结合型和总量)。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])描述并表征了药物在人或动物体内的四个不同阶段:吸收、分布、代谢和排泄(也称为[/font][font=Calibri]ADME[/font][font=宋体])。在药物开发中,[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析提供了药物与身体相互作用以及疗效强度和疗效持续时间的基本信息。在开发生物仿制药时,需要通过比较[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析来评价与原研药在生物活性的潜在差异。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据结合模式和性质的不同,抗独特型抗体可分为三种类型:抗原阻断型、抗原非阻断型和药物靶标复合物型。基于这些特点,可以建立不同形式的[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]检测,以测量血清中的抗体药物含量,包括游离型、结合型或总量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体可用于定量检测动物或人血清中的抗体药物水平,是[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]研究的关键检测试剂。抗体药物定量分析有多种分析方法,其中[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]为最常用的形式。在抗独特型抗体捕获[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中,将抗独特型抗体包被在平板上,再将含有抗体药物的样本加入系统中,然后用特异性结合药物的标记抗独特型抗体定量抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②免疫原性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]抗药抗体([/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体])检测[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性评价主要采用抗药抗体([/font][font=Calibri]anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体])分析的方法进行,这是治疗性蛋白药物(如单克隆抗体、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]和融合蛋白)开发过程中的关键步骤。在这些情况下,通常采用多层次递进式进行(图[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体])。该方法首先采用高灵敏的筛选试验鉴别阳性抗体样本,使用验证性试验尽量减少假阳性结果,然后使用表征试验评估抗体的中和能力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在整个过程中,抗独特型抗体是必要的试剂。检测[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的检测方法有多种,包括[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、放射免疫沉淀法([/font][font=Calibri]RIPA[/font][font=宋体])、表面等离子体共振([/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体])和电化学发光检测([/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体])。其中,桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]是最常用方法,可用于检测所有[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]同种型([/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等)。在典型的桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中,将抗体药物预包被在平板上,并将标记的抗体药物与患者样本一起孵育,以检测是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体](图[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体])。抗独特型抗体将用作阳性对照或参比标准品,用于样本中[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的定性分析。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备[/b][/url][b]套餐[/b][/font][font=宋体][font=宋体]为支持药物开发,义翘神州为客户提供了从抗原制备、抗独特型抗体开发到检测方法建立和试剂盒开发的全方位、一站式的定制抗独特型抗体生产服务。我们拥有丰富的开发经验,包括不同抗体类型如全长[/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]F(ab')2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]bsAb[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白等。定制的抗独特型抗体可用于建立药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])[/font][font=Calibri]/ADA[/font][font=宋体]检测方法,以测定样本中的特异性抗体药物或[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]水平。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]服务:[/font][font=宋体]①抗独特型兔多抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容:[/font][font=宋体]? 纯化抗体[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期:[/font][font=Calibri]2-3[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗独特型鼠单抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容[/font][font=宋体][font=宋体]? 阳性克隆,[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]管细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 纯化抗体,[/font][font=Calibri]10 mg/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]抗体对(可选)[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期:[/font][font=Calibri]4~6[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody[/font][/font]
电化学家用监测仪器正当时,第四代电极型血糖仪解析 自从1971年世界上第一台血糖仪问世以来,经过多次重大改良,血糖仪已经发展到第五代:第一代水洗式血糖仪;第二代擦血式血糖仪;第三代比色法(光电型)血糖仪;第四代电化学法(电极型)血糖仪;第五代微采血量,多部位采血血糖仪;而离子电渗析技术无创型血糖仪已经面世、近红外光技术的无创血糖仪也将呼之欲出。 现在,血糖仪不仅在外观作了重大人性化改进,更在精准性上做足了文章,使血糖监测数据能有效地指导临床。当今的血糖仪已从原来冷冰冰的一个医疗仪器变得类似手机一样轻便,成为广大糖尿病病友生活的好伴侣。检测需血量也从原来的20μl减至1μl左右,反应时间从早期的2分钟减至5秒左右,大大减轻了病友的痛苦,也提高了监测的效率。 第四代电极型血糖仪是目前使用的主流血糖仪。它采用电化学原理,测试血糖试纸反应区内的生化酶与血液中葡萄糖产生的微电流,再转化成葡萄糖浓度读数。该类型血糖仪电极接口内藏,可以避免污染,误差范围在正负0.2mmol/L,精度高,正常使用的情况下,不需要校准,寿命长。这种检测方法不受环境强光影响,无需经常清洁,采血样本一般在机外,避免交叉感染的可能,但易受血中一些代谢性酸化还原物质和残留药物的干扰。 市售电极型血糖仪基本原理相同。下面以国产X牌血糖仪为例,作一解析: 一、外观血糖仪、取血笔、取血针、试纸条,装在收纳软包内:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310081432_469777_1807987_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310090928_469973_1807987_3.jpg 血糖仪主要技术指标:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310081433_469778_1807987_3.jpg 血糖仪各部位名称:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310081433_469779_1807987_3.jpg翻开后盖,电源采用一枚CR2032锂电池,据厂家称,可测1000次,很省电:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310081433_469780_1807987_3.jpg 二、检测电路原理电极型血糖仪检测原理: 在检测试纸的电极表面的试剂中固化有葡萄糖氧化酶(GOD),当血液滴到电极上时,血液中的葡萄糖会在葡萄糖氧化酶(GOD)的作用下发生氧化还原反应。氧化还原反应所产生的电子被导电介质转移给电极,在一定电压(一般为0.4-0.5伏特左右)的作用下,流过电极的电流(微安级)将发生变化,通过检测电流变化与葡萄糖浓度的关系达到检测血糖浓度的目的。葡萄糖氧化酶(GOD)对葡萄糖有高度物异性,不能氧化其它糖类,故可测定血液中葡萄糖真实值。GOD氧化血液中β葡萄糖产生葡萄糖内酯和H2O2,同时释放出电子,具体的反应方程式如下:葡萄糖+FAD–葡萄糖氧化酶→葡萄糖酸内酯+FADH2–葡萄糖氧化酶 ⑴FADH2–葡萄糖氧化酶+02→FAD–葡萄糖氧化酶+H2O2(过氧化氢) ⑵H202(过氧化氢)→2H++O2+2e- ⑶电极型血糖仪电路结构框图: 不同品牌电极型血糖仪,其电路结构都差不多,电路结构框图如下,指尖毛细管血被吸入试纸酶电极(酶生物传感器)产生微电流,该电流经I/V转换集成电路转换为电压信号,再通过放大滤波、输入主控MCU进行A/D转换、计算,结果由液晶板显示。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310081433_469781_1807987_3.jpg三、电路结构取下
免疫是机体识别自我物质和排除异己物质的复杂的生物学反应,是动物长期进化中所形成的一种生理功能。其作用包括防御传染、自身稳定和免疫监视3种方式。----防御传染--当病原微生物侵入时,机体即迅速动员全身防御力量,将该侵入者消灭、清除,从而免除感染。此种由机体对病原微生物侵入所表现的不同程度的低抗力,称为抗传染免疫。人们对于抗传染免疫本质的认识,是从19世纪末开始的,半个世纪以来,人们对传染病的特异预防、治疗和诊断进行了广泛深入的研究,为防治和消灭人畜传染病做出了巨大的贡献。----自身稳定--这一功能在于维持体细胞的均一性,其方式是不断清除衰老的和受损伤的细胞。如此功能失常,可能出现自身免疫性疾病。----免疫监视 -正常机体具有识别及清除经常出现的突变细胞功能。这些突变细胞可以自发产生,也可以由病毒感染或理化因素诱变产生。如免疫监视功能失调,这些突变细胞就有可能无限地增生而形成肿瘤。----研究免疫和免疫反应在理论和实践上都有重大意义。免疫学过去主要研究抗传染免疫,因此,一直作为医学微生物的一部分。现在看来,免疫学己远远超越了任何微生物学的范围而成为一个有多个分支的独立学科,包括临床免疫学、免疫生物学、免疫化学、分子免疫学、免疫血液学、免疫生理学、免疫病理学、免疫药理学和免疫遗传学等。本章则着重介绍临床免疫学的基础知识和血清学诊断技术。----免疫分子主要指抗原及抗体,是现代分子免疫学的主要研究对象,近年来有关研究进展很快。自从上世纪末Emil Von Behring发现抗体以来,历经K.Landsteiner(1917)对抗原特性的研究,N.Jerne和M.Burnet(50年代)对抗体形成克隆选择学说的提高,R.R.Porter和G.M.Edelmam(60年代)对抗体分子及其酶解片段分子结构的研究,G.Kohlev和C.Milstein(1975)创造了获得单克隆抗体的淋巴细胞杂交瘤技术,以及近期利根川进(1980)提出的抗体结构多样化的基因结构理论等的重大发展阶段,使得免疫分子的研究已成为现代免疫学甚至现代生命科学中发展最快,影响最大的领域之一。 ----异体大分子蛋白质或其它物质,进入或存在于动物体,能刺激机体增生丙球蛋白或致敏细胞。前者称抗原,所增生的丙球蛋白称为抗体。抗原与抗体能在动物体内或动物体外( 试管内)发生特异性反应。
有用CE做抗原和抗体分离分析的吗?大家可以交流讨论我的QQ是441874556
目前来说,最常用的[url=https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/antibodies.html]抗体检测[/url]方法应该是ELISA,既可以检测抗体的存在又可以对其定量。此方法用到的仪器主要有离心机,自动洗板机和酶标仪;用到的主要试剂有PBS溶液,吐温20,BSA,一抗,二抗和显色液。其他的抗体检测方法还有免疫扩散和免疫电泳,但是大多是定性或者半定量,而好处是操作简单,所需试剂少。
[em14] 证明抗原与抗体特异性结合的常用方法是什么?
[font=宋体]在免疫学的世界中,抗原的选择是至关重要的。近年来,许多研究者提出了各种不同的抗原类型以供选择,其中最引人注目的两种是蛋白抗原和多肽抗原。这两种抗原各有其独特的优势和特点,那么,如何在这两者之间做出选择呢?本文将为您详细解析两者的差异以及应用场景,帮助您在免疫学研究中做出最佳的选择。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]①为什么选择蛋白抗原免疫?[/font][/b][font=宋体]您需要一种适用于多种应用的抗体[/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低,易于表达和纯化,且无毒[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用于以下应用:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IP/ChIP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]……[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②为什么选择多肽抗原免疫?[/b][/font][font=宋体][font=宋体]您的预期抗体应用仅包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]或翻译后修饰检测。[/font][/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性,很难或不可能表达和纯化。[/font][font=宋体]适用于以下应用:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PTM Detection[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。[/font] [font=宋体]当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。[/font] [font=宋体]它们也是检测靶蛋白翻译后修饰([/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体])位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。 虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点,但是当产生[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]抗体时,有限数量的表位使得发现仅针对[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]位点的反应性抗体更易。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]多肽抗原的局限性:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力,但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体,而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如,抗多肽抗体可以应用于[/font][font=Calibri]Western blots[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]。然而,线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位,以确保阳性结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services][b]蛋白抗原和多肽抗原制备服务[/b][/url],有需求可以直接咨询,详情请看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services[/font][/font]
目前我们公司已经开发出兽药残留方面的小分子抗原抗体,但是远远不能满足市场需求,请问各位同行大侠,哪里能买到相关的抗原抗体。
印度首都第五轮抗体检测超一半人阳性。
[font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇([/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体])组成,每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区,也可存在于轻链可变区,或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体三种类型:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原非中和型[/font][font=宋体]不具有抗体结合区特异性,治疗性抗体仍可与其目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体可用于检测抗体药物总量。[/font][font=宋体]②抗原中和型[/font][font=宋体]具有抗体结合区特异性,与其目标抗原相互竞争,因此,此类型可用于检测游离型抗体药物。[/font][font=宋体]③药物靶标复合物型[/font][font=宋体][font=宋体]仅特异性地识别抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]靶标复合物,不与未结合的抗体或未结合的目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体仅能检测结合型抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体]①免疫原性分析[/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性分析对于生物药物开发具有重要的意义。几乎所有的生物制药产品(如蛋白、抗体、多肽偶联药物或寡核苷酸等)都会诱导机体内免疫应答,从而导致抗药抗体([/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体])的产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体属于高度特异性[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]。多克隆抗体能较大限度地模拟血样中的真实情况,还具有制备周期较短和成本低的优势。因此,大多数情况下,在分析患者样本中是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]时,抗独特型多克隆抗体通常用作阳性对照。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体也是药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析的关键工具试剂之一。 在临床前研究和临床研究中,[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析可用于评估抗体药物的用药剂量和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型单克隆抗体特异性强,可作为[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析的检测试剂,用于检测人或动物血清中的抗体药物含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备服务[/b][/url],同时拥有综合性的抗独特型抗体开发平台,涵盖兔多抗、杂交瘤、噬菌体、流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和[/font][font=Calibri]Beacon[/font][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术,为客户提供更多选择。详情可以关注抗独特型抗体制备服务[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service[/font][/font]
一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种分析试验验证,如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。2 样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,至少两方面因素需要考虑(1)..待测样本蛋白的结构域:抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS 流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。(2)样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本,另一方面,某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来3 样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。4 一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。5 二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。6 双重染色抗体的选择用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一,二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
[b][font=宋体]一、引言[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是生物学和医学领域中常用的可视化技术,其中荧光标记抗体凭借其独特的应用优势,在许多研究方向中发挥了重要作用。本文将详细介绍荧光标记抗体的原理、应用及最新进展。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、荧光标记抗体的原理[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是一种利用荧光物质对目标进行标记,通过特定波长的光激发后发出荧光,从而实现可视化检测的方法。荧光标记抗体则是将荧光物质与特异性抗体结合,形成荧光标记抗体,用于对目标抗原进行特异性结合和荧光标记。常见的荧光物质有荧光素、量子点、上转换纳米颗粒等。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]三、荧光标记抗体的应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫分析:荧光标记抗体在免疫分析中具有广泛的应用,如酶联免疫吸附试验([/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体])、流式细胞术、免疫荧光染色等。通过荧光标记抗体与抗原的特异性结合,可以实现对目标抗原的高灵敏度、高特异性检测。例如,利用荧光标记抗体检测肿瘤标志物,有助于肿瘤的早期诊断和治疗监测。[/font][/font][font=宋体]细胞成像:荧光标记抗体在细胞成像中具有重要作用,可以用于观察细胞内特定抗原的表达情况,了解细胞的功能和行为。例如,利用荧光标记抗体对细胞膜抗原进行标记,可以观察细胞迁移、侵袭等行为。[/font][font=宋体]组织切片染色:荧光标记抗体也可用于组织切片染色,对病理组织中的特定抗原进行标记,有助于病理诊断和组织学研究。例如,利用荧光标记抗体对肿瘤组织进行染色,有助于肿瘤类型的鉴别和恶性程度的评估。[/font][font=宋体]药物筛选:荧光标记抗体在药物筛选中具有重要应用,可以用于药物作用靶点的检测和药物作用机制的研究。例如,利用荧光标记抗体对药物作用靶点进行标记,可以观察药物对靶点的影响,评估药物的疗效和安全性。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、展望[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随着荧光标记技术的不断发展,荧光标记抗体在灵敏度、特异性和可视化效果等方面得到了显著提升。同时,新型荧光物质的开发和制备也为荧光标记抗体的应用提供了更多选择。未来,随着荧光标记技术的进一步优化和多色荧光标记技术的发展,荧光标记抗体将在更多领域发挥重要作用,为生物学、医学和其他相关领域的研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光检测服务[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。它们也是检测靶蛋白翻译后修饰([/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体])位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。[/font][/font][font=宋体][b]为什么选择蛋白抗原免疫?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]您需要一种适用于多种应用的抗体[/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低,易于表达和纯化,且无毒[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用于:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IP/ChIP[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Sandwich ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IF/Flow cytomety[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Functional Assay[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IHC[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Direct Bind ELISA[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白抗原成功率高,此外多克隆抗体服务保证免疫原蛋白检测[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]阳性,且快至[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]周交付。更重要的是,我们可以从您的目标序列开始,服务包含蛋白抗原生产。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]为什么选择多肽抗原免疫?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]您的预期抗体应用仅包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]或翻译后修饰检测。[/font][/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性,很难或不可能表达和纯化。[/font][font=宋体]适用于以下应用:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]PTM Detection[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。[/font] [font=宋体]当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。[/font] [font=宋体]它们也是检测靶蛋白翻译后修饰([/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体])位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。 虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点,但是当产生[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]抗体时,有限数量的表位使得发现仅针对[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]位点的反应性抗体更易。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]多肽抗原的局限性:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力,但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体,而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如,抗多肽抗体可以应用于[/font][font=Calibri]Western blots[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]。然而,线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位,以确保阳性结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services][b]蛋白抗原和多肽抗原制备服务[/b][/url],详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services[/font][/font]
GB/T 18089-2008 蓝舌病病毒分离、鉴定及血清中和抗体检测技术
[font=宋体]抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体,是免疫电镜样品制备的一种方法,用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上,通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗原的定位分析,在某些情况下,也可以对混杂有大量其他分子的样本中的抗原进行定量检测。由于抗体与其相应抗原具有很高的亲和力,因此带有易识别标记物的抗体可以定位分析抗原,并且是一种理想的快速价廉的定量测定方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]荧光素标记[/b][/font][font=宋体]荧光色素是最常用于标记抗体的标记物之一。荧光素经恰当的激发可发光,从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]酶标记[/b][/font][font=宋体]酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高,但较难应用于定量分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]生物素标记[/b][/font][font=宋体]生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州开发了丰富的[url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记蛋白[/b][/url]产品,拥有[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]定点标记和化学标记两种类型的生物素标记蛋白,覆盖细胞治疗、抗体药、疫苗等热门靶点。产品具有高批间一致性、高活性等优势,适用于[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Biopanning[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR / BLI[/font][font=宋体]等实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发,义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]
为获得某蛋白(A)的特异性抗体,你用该蛋白免疫家兔,你将如何监控针对蛋白(A)抗原产生抗体的动态过程?(简述所选择方法的原理及步骤)期待您的解答,非常感谢。
[font=宋体][font=宋体]目前,用细胞工程制备人单抗在技术上和伦理上都存在一些难题,治疗性抗体的开发就集中在具有治疗前景的鼠源单抗上。但是鼠源单抗对人体具有异源性反应,可诱发人抗鼠抗体效应[/font][font=Calibri](Humananti-mouseantibodies,HAMA[/font][font=宋体]反应[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],使得单抗的治疗效果明显滞后。随着基因重组技术的发展和人们对抗体结构认识的深入,研究者们尝试对鼠源性抗体进行改造,致力于在保留与抗原结合的高亲和力的基础上,减少异源性抗体的免疫原性,推动抗体人源化研发的进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]人源化抗体主要指以用基因克隆及[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术对鼠源单克隆抗体改造,重新表达产生的抗体。其大部分氨基酸序列被人源序列取代,基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性,又降低了其异源性,有利应用于人体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据人源化程度不同,单抗又可分为[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody][b]嵌合抗体[/b][/url][/font][font=Calibri](60%-70%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDR(complementarity-determiningregion)[/font][font=宋体]移植抗体[/font][font=Calibri](90%-95%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体:[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体[/font][font=Calibri](chimericantibody)[/font][font=宋体]:第一代人源化抗体。其是在基因水平上将鼠源单克隆抗体的[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区和人抗体的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](variableregion,[/font][font=宋体]可变区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]连接,在合适的宿主细胞内表达可得到人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体。嵌合抗体用于人体所产生的[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应比鼠源单抗明显减弱[/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]另外,人源[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](constantregion[/font][font=宋体],恒定区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]可更有效地介导人体一些免疫反应,如[/font][font=Calibri]CDC(complement-dependentcytotoxicity,CDC,[/font][font=宋体]依赖补体的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ADCC(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity,[/font][font=宋体]抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]嵌合抗体虽然可以部分解决异种蛋白的排斥问题,但由于其还含有鼠源[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区,依然有可能会诱发[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应,干扰抗体疗效,诱发超敏反应,在临床上其应用会受到一定限制。因此人们进一步研究鼠源可变区的改造,研发出了[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植的人源化抗体,即第二代人源化抗体也是现在普遍所说的人源化抗体[/font][font=Calibri](humanizedantibody)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体是研究者们在嵌合抗体的基础上进一步用人源框架区[/font][font=Calibri](Frameworkregion,FR)[/font][font=宋体]替代鼠源框架区[/font][font=Calibri](FR)[/font][font=宋体],仅保留了[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个鼠源性[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体],其他全部为人源结构,人源性可达[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]以上。但对于特定的抗原分子,[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]并不能随意替换。多方面研究均证实,具有支持作用的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]不仅为[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的构象提供了环境,有时还参与抗体结合。因此简单的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植往往明显降低抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体结合的亲和力,甚至是丧失抗原抗体结合的能力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]针对这种状况,目前主要有四种策略:[/font][font=宋体][font=宋体]①同源替换,使用与鼠源对应部分具有较大同源性的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]进行替换[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]②表面重塑,对鼠源[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]表面氨基酸残基进行重塑,以使其类似于人抗体[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的轮廓或者[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]型式[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]③补偿变化,改编关键位置氨基酸残基,以补偿完全的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]④定位保守,人源化单抗以[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]保守序列为模板进行人源化,但保留鼠源单抗可变区的关键氨基酸残基。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、全人源抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]为了彻底消除异源性抗体的不良影响,[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]年代以后,人们将噬菌体展示技术应用到抗体的表达和克隆上,产生了噬菌体抗体库技术。由此,抗体工程技术进入到了一个新的发展阶段,全人源化抗体的生产和应用也逐渐走向成熟。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]全人源化抗体是指将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术,将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中,使动物表达人类抗体,达到抗体全人源化的目的。目前已建立多种方法生产完全人源性抗体,主要有噬菌体展示技术、转基因小鼠技术、核糖体展示技术和[/font][font=Calibri]RNA-[/font][font=宋体]多肽技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]人源化抗体的应用[/b][/font][font=宋体]目前,人源化抗体在肿瘤,器官移植排斥反应,病毒感染,血液性疾病,自身免疫性疾病等方面的治疗和临床诊断中显示出越来越大的应用前景。[/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、在肿瘤治疗中的应用[/font][/font][font=宋体]近年来,兴起的分子靶向治疗,是根本意义上的肿瘤特异性治疗手段,是以肿瘤抗原特异性结合的单抗为载体,连接放射性核素,化疗药物等对肿瘤有杀伤作用的负载而成的抗体导向疗法。其靶向性好,毒性小等特点,非常适合肿瘤的内放射治疗。采用该技术用于临床的人源性抗体有治疗转移性乳腺癌的赫赛汀,用于治疗结直肠癌的西妥昔单抗等。[/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、自身免疫性疾病治疗[/font][/font][font=宋体]自身免疫疾病多于自身抗体异常增多有关。很多临床研究发现,一些具有免疫疾病的病毒感染患者,体内病毒水平常伴随某些免疫分子水平的升高而升高,因此很多免疫分子的人源化抗体在此类病毒的治疗中显示出很好的效果。[/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、病毒感染中的应用[/font][/font][font=宋体]病毒感染几乎无特效药,现有的核苷酸类抗病毒药物效果并不理想,且毒副作用大,单抗治疗因其针对性强,和相对比较安全,已越来越多研究者将其应用于抗病毒的治疗中。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url],详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service[/font][/font]
[font=宋体]什么是抗体开发?抗体开发包含了抗体生成和表征的全过程。首先,将目的抗原注射入实验动物体内,使其免疫系统生成大量抗体。[/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发[/b][/url]的方法各有不同。例如,多克隆抗体可直接从血清中纯化,而单克隆抗体则需要先培养杂交瘤或先构建噬菌体展示抗体库。[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州作为行业领先的抗体研发公司,提供从抗原合成、研发和生产的一站式[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务。通过我们的抗体制备平台,我们随时准备帮助您应对研究中遇到的严峻挑战。[/font][/font][b][font=宋体]义翘神州提供抗体定制开发服务:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]快速单克隆抗体开发、[url=https://cn.sinobiological.com/services/fast-antibody-service][b]快速多克隆抗体开发[/b][/url]、磷酸化抗体定制服务、[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体服务[/b][/url][/font][b][font=宋体]抗体开发技术平台:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的定制抗体开发服务,包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发,以及针对特定应用的抗体开发,例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来,从抗原设计到抗体纯化和鉴定,我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势,为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制,开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质,可线上购买,作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术,极大程度提高抗体质量和成功率。因此,义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台,该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品,还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品,并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体,作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发,义翘神州已建立四种抗体生产平台,可用于快速高通量抗体生产和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体([/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克),只需几周时间,即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术,极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里,我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率,生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台,包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])检测平台、流式([/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体])检测平台、免疫荧光([/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体])检测平台以及免疫沉淀([/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体])检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]详情可以关注义翘神州抗体开发页面。[/font][font=宋体][font=宋体]文章来源:抗体开发[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font][font=Calibri] [/font]
[font=宋体]抗体标记是一种生物技术,通过将标记物(如酶、荧光素、生物素等)共价连接到抗体上,使其与待检测物(如特定抗原)特异性反应,形成多元复合物。随后,借助相关仪器,可以直接观察试验结果或进行自动化测定,从而对抗原、抗体反应进行定性和定位研究,或进行定性和定量测定。下面为大家介绍几种高质量的标记抗体:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]①荧光色素标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]这种标记方法是将荧光素与相应的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]结合,将荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]与标本中相应的抗原形成荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原复合物,用荧光显微镜观察。在显微镜若存在荧光则意味着存在抗原抗体复合物,因此可根据已知的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]推断出另一种未知抗原[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗体[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②[/b][url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记抗体[/b][/url][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高!这种方法可使抗体或其它蛋白质的[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基与酰化的生物素共价结合,生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③放射性碘标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质的碘标记方法有很多种,比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体是指将[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料与特定抗体结合而成的复合物,这种技术常用于生物医学研究中的荧光标记。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料是从红藻属藻类中提取得到的一种特殊色素,具有较高的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体主要应用在流式细胞术和免疫组化等实验中。在流式细胞术中,[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞表面标记物的表达情况,如[/font][font=Calibri]CD4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD8[/font][font=宋体]等,可以实现对免疫细胞亚群的研究。在免疫组化和免疫组织化学等实验中,[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞内标记物的表达,如细胞因子、转录因子等,可以深入研究细胞内信号传导通路及相关的生物学功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体是一种荧光标记的二抗,通常是在单抗上进行标记,具有很强的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体可以与细胞或细胞组分中的特定抗原结合,用于细胞表面标记、蛋白质定量分析、细胞周期和细胞凋亡研究等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体是将[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体](异硫氰酸荧光素)与特异性抗体经适当方法连接而成的复合物。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是一种荧光染料,能够与各种抗体蛋白结合,并产生强烈的荧光信号。这种标记技术常用于生物医学研究中的荧光标记,特别是在免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州除了为客户提供抗体开发,还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。更多关于抗体标记及抗体标记方法详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]
用途: 本试剂盒采用ELISA法可定性、定量检测HIV-1p24抗原,适用于血清、血浆及HIV培养上清标本,仅限于HIV辅助诊断和实验室研究。测定原理:本试剂盒采用双抗体夹心法测定HIV-1p24抗原,即将抗HIV-1p24的单克隆抗体包被于微孔板,待测样本加入已包被的反应孔内孵育,若标本中含有HIV-1p24抗原,则该抗原与孔内的抗体形成抗原抗体复合物,加入酶标抗HIV-1p24单抗,孵育后,酶标抗体与抗原抗体复合物上的抗原结合,再与底物反应显色。最后用硫酸终止反应,用酶标仪测定OD值,确定反应的阴阳性。试剂盒组成:1、微孔反应板 8孔×12 3、阴性对照 6ml 5、酶结合物 13 ml 7、显色剂 7ml 9、终止液 6ml2、裂解液 3.5ml 4、阳性对照 1ml 6、20倍浓缩洗涤液 50ml 8、底物液 7ml 测定步骤:1、配液:将50 ml浓缩洗涤液(20倍)用蒸馏水稀释至1000 ml。2、定量HIV-1p24系列稀释:阳性对照(PC)含有320pg/ml的重组HIV-1p24抗原,用阴性对照(NC)倍比系列稀释五个浓度的阳性对照(稀释方法见下表),如果定量测定的样品为细胞培养上清液,则需用未感染的细胞培养上清液进行系列稀释抗原,每个稀释浓度做两个复孔。表1http://www.gene-bio.com/images/cp/HIV-1p24.jpg3、编号:将样品对应孔按序编号,每板应设阴性对照3孔、阳性对照两孔、空白 1孔,如果测定样品为细胞培养上清液 ,则需用未感染的细胞培养上清液做阴性对照3孔。4、每个反应孔中加入25μl裂解液。5、将100μl待测样品或对照品加入到有裂解液的反应孔中,振荡30-60秒混匀,置37℃孵育1小时。6、洗板5次,拍干后每孔加入酶结合物125μl/孔(空白孔不加),置37℃孵育45分钟。7、洗板5次,拍干后每孔加入底物(底物液:显色液=1:1混合)125μl/孔。置37℃孵育15—30分钟。8、加入终止液50μl/孔。9、用酶标仪读数,波长450nm(建议使用双波长酶标仪,参考波长630nm)。结果判定:1、阴性对照的正常范围:正常情况下,阴性对照OD值应≤0.150。2、阳性对照的正常范围:正常情况下定性测定(160pg/ml) 阳性对照OD值≥1.000;定量测定80 pg/ml阳性对照OD值≥0.6503、临界值计算:测定样品为血清或血浆时临界值=阴性对照平均值+0.071;测定样品为细胞培养上清液则临界值=细胞培养上清液阴性对照平均值+0.0714、阳性定性判定:测试标本的OD值小于临界值则为阴性;测试标本的OD值大于或等于临界值则为阳性。5、阳性定量判定:参照如下图表的方法,绘出标准曲线并进行定量判定。http://www.gene-bio.com/images/cp/HIV-1p24_1.jpg表2http://www.gene-bio.com/images/cp/HIV-1p24_2.jpgNC1=0.033 NC2=0.032 NC3=0.034 NCx=0.033Cut off=0.033+0.071=0.103注意事项:1、从冷藏环境取出的试剂盒内全部成份及待测标本应在室温平衡30分钟后方可使用,余者应及时密封保存于冰箱中,已备后用(一般不超过3天)。2、洗涤液若出现结晶,可置37℃使之溶解后方可使用。3、结果判定必须以酶标仪读数为准,建议使用双波长450nm/630nm检测,并在反应终止后20分钟内完成。4、本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室 。5、检测必须符合HIV实验室管理规范和生物安全守则的规定,严格防止交叉污染。操作时须带手套、穿工作服,严格健全和执行消毒隔离制度。所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染务处理,终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。6、加液时必须用加液器,并经常校对加液器的准确性。7、洗涤时 各孔均需加满洗液,防止孔口内有游离酶存在。使用洗板机洗涤应设定30-60秒的浸泡时间。8、操作应严格按说明书进行,不同批次试剂不得混用,封板膜为一次性用品,不能重复使用。储存条件:2-8℃避光保存。 有效期:12个月。
[font=宋体][b]什么是纳米抗体?[/b][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody][b]纳米抗体[/b][/url]([/font][font=Calibri]nanobody, Nb[/font][font=宋体])是一种人工设计的抗体分子,又称为单域抗体([/font][font=Calibri]single-domain antibodies, sdAbs[/font][font=宋体])、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体或[/font][font=Calibri]camelid[/font][font=宋体]抗体,是发现于羊驼、单峰驼等驼科以及鲨鱼、鳐鱼等软骨鱼中的一种天然缺失轻链的重链抗体([/font][font=Calibri]heavy-chain antibodies, HCAbs)[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]1993[/font][font=宋体]年,比利时的科学家在骆驼的血清中发现了一种天然轻链缺失的重链抗体,分子量约[/font][font=Calibri]95 kDa[/font][font=宋体],其中包括两个恒定区([/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体])、一个铰链区和一个重链可变区([/font][font=Calibri]variable heavy chain domain, VHH[/font][font=宋体]),接着克隆得到只包含一个重链可变区的单域抗体,即[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体。[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体的晶体结构为[/font][font=Calibri]4 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]2.5 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]3 nm[/font][font=宋体]的椭圆形,分子量大小仅普通抗体的[/font][font=Calibri]1/10[/font][font=宋体],约[/font][font=Calibri]12-14 kDa[/font][font=宋体],是最小的完整抗原结合片段,因此又被称为纳米抗体。纳米抗体可用于肿瘤等疾病的治疗、疾病的检测、疫苗的研发等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体特性:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]高耐热性和稳定性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]将不同的纳米抗体在[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]℃放置[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周,结果其抗原结合活性均在[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]以上,表明纳米抗体在室温下保存相当稳定,这使其比常规抗体更易于储藏和运输。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]比较了鼠单抗和纳米抗体在高达[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃高温长时间处理的抗原结合活性,发现纳米抗体都保持了较高的活性仍能重新获得抗原结合能力,而所有常规抗体在[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃处理后都丧失了活性,发生了不可逆的聚合。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在恶劣条件,如在高热、离液剂、存在蛋白酶和极度[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值变性的条件下(如胃液和内脏中),正常抗体会失效或分解,而纳米抗体仍具有高度的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]高抗原结合性:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体独特的结构决定了其高抗原结合特性:纳米抗体较长的[/font][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体],可形成一稳定的暴露的凸环结构(凸环中具有稳定结构的二硫键),能够深入抗原内部以更好的结合抗原从而提高了其抗原特异性和亲和力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]而传统抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段及单链抗体[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]的抗原结合表面常形成凹形拓扑结构[/font][font=Calibri], [/font][font=宋体]通常只能识别位于抗原表面的位点,因此纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]单域具有更加广泛的抗原结合力,甚至当靶蛋白紧密包裹隐藏了普通抗体识别的位点时[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]纳米抗体也可以对其进行表位识别。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]较强的组织穿透力:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]纳米抗体具有强而快的组织穿透能力,可以进入致密的组织如实体瘤发挥作用;并且多余未结合的纳米抗体能够很快的被清除,这相对于单克隆抗体组织穿透力差,不易被清除的不足,更有利于疾病的诊断。另外,纳米抗体能够有效的穿透血脑屏障,这样的特性为脑部给药提供了新方法,有望成为治疗老年痴呆症的新药。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]高水溶性、高表达性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]正常抗体[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]结构域单独表达时通常形成包涵体,或者暴露的疏水域相互黏附;而纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]由于其[/font][font=Calibri]FR2[/font][font=宋体]中的疏水残基被亲水残基所取代,使得纳米抗体的水溶性增加,聚合性减少;而且即使以包涵体形式表达,也很容易复性,这样可以大大提高作为药物的利用率。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]因纳米抗体分子量小、结构简单,由单一的基因编码,所以它很容易在微生物中合成,能在噬菌体、酵母等微生物中大量的表达,而且其相对价格低廉、可进行大规模生产,易于普及和应用。有报道,可通过酵母反应器酿造将纳米抗体的产量提高,每公升可达[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]克的产量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体的应用优势[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①用于生物医药研发(基因工程药物研发、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]药物研发);[/font][/font][font=宋体]②用于临床体外诊断(胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法);[/font][font=宋体]③用于肿瘤研究、免疫学研究等基础研究;申请具有自主知识产权的发明专利及科研奖项;[/font][font=宋体]④拓展研究思路、发表国际知名学术刊物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体是一种非常有前景的下一代治疗性抗体技术,受到越来越多的研究机构和制药公司的关注。为支持纳米抗体药物的早期发现,义翘神州利用噬菌体抗体库技术自主研发了纳米抗体开发平台,已成功开发了多个纳米抗体候选分子。另外,我们的高通量纳米抗体表达平台,已成功表达和生产了多种纳米抗体形式,包括单价、多价或多特异性[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体],满足客户的各种定制需求。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody[/font][/font][font=Calibri] [/font]