黄曲霉毒素总量免疫亲和柱
一、产品用途:本产品可选择性吸附样品提取液中的黄曲霉毒素,从而对样品液中的黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)起到非常针对性的纯化作用,过柱纯化后的样品液纯度被提高,可用于不同分析方法的测定。二、产品概述:黄曲霉毒素(Aflatoxin)是黄曲霉、寄生曲霉等真菌产生的次级代谢产物,被世界卫生组织癌症研究机构划分为1类致癌物,同时又是一种毒性极强的剧毒物质。广泛存在于各种食物中,如玉米、花生、大米和小麦等谷物及其副产品。饲料中的黄曲霉毒素B1经过动物代谢后产生的黄曲霉毒素M1仍然具有很强的毒性和致癌性,广泛存在于牛奶、血液、组织等食品中。黄曲霉毒素作为肝癌的三大诱因之一,也是胃癌,肠癌等疾病的主要原因,对人类的健康构成很大威胁。世界各国对食品和饲料中的黄曲霉毒素都有严格的限量标准。三、反应原理: 本产品测定的基础是抗原抗体反应。黄曲霉毒素抗体固定于柱内凝胶上,样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释,然后缓慢通过黄曲霉毒素免疫亲和柱,在柱内黄曲霉毒素与抗体特异性结合,之后洗涤免疫亲和柱,除去未结合的其他物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素,注入到分析仪器中进行检测。四、产品包装组成:每盒中包含25支黄曲霉毒素总量免疫亲和柱及1套相应说明书。五、IAC性能:1、性能参数柱容量 ≥200ng 黄曲霉毒素(回收率) 90% ±5%2、交叉反应率黄曲霉毒素B1100%黄曲霉毒素G1101%黄曲霉毒素B286%黄曲霉毒素G283%六、注意事项:1、黄曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。2、使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液最好用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。3、不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。4、免疫亲和柱不使用时要2-8℃保存,不可冻存。5、使用前,免疫亲和柱需回至室温(22-25℃)。6、取样量:根据实际情况可以适当增减,但不可太少,同时提取液体积要按比例随之改变。7、pH:上柱液pH要在6~8之间,若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节pH。 七、需要的材料但盒中不提供:设备器皿耗材试剂HPLC泵流操作架高速均质器高速粉碎机 量筒(50/200mL)漏斗收集瓶容量瓶(100mL/1L)微量移液器:单道定量滤纸玻璃微纤维滤纸离心管(50mL)色谱级甲醇蒸馏水AFT标准品八、试剂配制:1、提取液:甲醇-水(7:3) 移取700mL甲醇,加蒸馏水300mL混合。九、样品处理:真菌毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程,所以要保证样品收集和取样的代表性。(一)花生、大米、玉米、小麦及其制品,植物油脂和饲料1、称取25g粉碎的样品(植物油脂直接取样)移至均质器中,再称取5g氯化钠加入均质器中;2、加125mL甲醇-水(7:3)溶液高速均质2min; 3、4000r/min离心5min或用滤纸过滤;4、取10mL滤液并加入30mL蒸馏水稀释;5、用玻璃微纤维滤纸过滤,取过滤后液体待用;(二)酱油1、称取50g样品与2.5g氯化钠加入均质器中;2、加100mL甲醇-水(7:3)溶液高速均质2min;3、4000r/min离心5min或用滤纸过滤;4、取10mL滤液并加入40mL蒸馏水稀释;5、用玻璃微纤维滤纸过滤, 取过滤后液体待用;(三)食醋 1、称取5g样品于25mL容量瓶中,加1.0g氯化钠,用pH7.0磷酸盐缓冲溶液稀释定容至25.0mL;2、4000r/min离心5min或用滤纸过滤;3、取10mL滤液并加入10mL蒸馏水稀释; 4、用玻璃微纤维滤纸过滤, 取过滤后液体待用;注意:pH7.0磷酸盐缓冲溶液:称取8g氯化钠,1.2g磷酸氢二钠,0.2g磷酸二氢钾,0.2g氯化钾,用990mL蒸馏水溶解,然后用浓盐酸调节pH值至7.0,最后用蒸馏水稀释定容至1000mL。十、操作程序:符合GB/T 18979-2003国标方法1、连接:将免疫亲和柱后盖取下,用剪刀剪开,重新盖上,连接于泵流操作架的30mL注射器下;2、上样:准确移取10mL样品提取液转移至注射器内,打开下端堵头; 3、富集:将空气压力泵与注射器连接,调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱,建议重力过柱;4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗,弃去全部流出液,并使2-3mL空气通过柱体; 5、洗脱: 为保证洗脱充分,建议以2.0mL色谱级甲醇分两步进行洗脱,重力洗脱即可。首先,将免疫亲和柱内液体排干,下端盖上堵头,加1.0mL甲醇于柱管内孵育60秒以上(孵育即甲醇在柱子中浸泡),重力过柱,当溶剂通过柱子后;再加入1.0mL甲醇重复上述洗脱步骤,最后轻微加压排净洗脱液,合并洗脱液供检测用。 十一、操作流程图示产品信息:产品名称:PriboFast® 黄曲霉素总量免疫亲和柱产品货号:PriboFast® IAC-011-3产品描述:黄曲霉毒素单克隆抗体包装单位:25支/盒储存条件:2~8℃,切勿冷冻保质期:18个月本公司可提供的真菌毒素检测产品 类型产品名称ELISA酶联免疫试剂盒黄曲霉毒素总量(AFT)黄曲霉毒素B1(AFB1) 黄曲霉毒素M1(AFM1)呕吐毒素(DON)玉米赤霉烯酮(ZON)伏马毒素(FUM)T-2毒素(T-2) 免疫亲和柱黄曲霉毒素总量(AFT)黄曲霉毒素B1(AFB1)黄曲霉毒素M1(AFM1)呕吐毒素(DON)玉米赤霉烯酮(ZON)伏马毒素(FUM)T-2毒素(T-2)赭曲霉毒素(OTA)真菌毒素六合一免疫亲和柱可定制多毒素复合免疫亲和柱多功能净化柱MFC220(Don+Niv)MFC221(FUMB1+B2+B3)MFC226(Aft+Zon)MFC227(Aft+T-2)MFC228(Aft+Pat)MFC229(Och A+B)胶体金快速检测卡黄曲霉毒素B1(AFB1)黄曲霉毒素M1(AFM1)呕吐毒素(DON)玉米赤霉烯酮(ZON)三聚氰胺 注:本公司提供毒素固体液体标准品及质控样品