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测量蛋白尿液比量仪

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  • 尿微量蛋白(尿微量白蛋白/蛋白尿)试验

    尿微量蛋白(尿微量白蛋白/蛋白尿)试验(也称“白蛋白试验”,“尿微量白蛋白”和“蛋白尿”试验)何为尿微量白蛋白(白蛋白)试验?尿微量白蛋白试验是对尿液中的蛋白质进行测定的筛选试验。人体血液中有一种蛋白质称为白蛋白。在正常情况下,几乎无法在尿液中检测到。只有在肾脏受损,尤其是损伤早期,它可以优先于其他肾损伤标志物在尿液中被检测出,因此,尿微量白蛋白在诊断肾脏疾病、早期肾损伤等方面具有重要意义。此项试验有何目的?蛋白质是人体的基本构成“材料”,具备一些重要的功能和作用,可结合营养物质将其运输至各个组织,,并将人体中循环的体液量维持在适当水平。肾脏功能正常时,蛋白质几乎无法通过肾脏进入尿液(仅会排出血液循环产生的废料)。然而,如果人的肾功能受损或衰竭,该肾脏对蛋白质的过滤能力将有所下降,因而一些蛋白质将会透过肾脏而出现在尿液中,称为尿微量蛋白。尿微量白蛋白与蛋白尿有何不同?白蛋白是一种大量存在于血液中的典型蛋白质。因其分子个头小,当肾脏功能出现问题时,白蛋白是能够率先通过肾脏进入尿液的几种蛋白质之一。尿液中出现少量白蛋白的情况称为尿微量白蛋白。若肾脏功能受损严重,尿液中的白蛋白数量呈现出增长趋势,这种症状被改称为蛋白尿。尿微量白蛋白/蛋白尿有何症状?病症早期,并无明显症状或征兆显现。随着肾功能衰竭的加重,大量蛋白质出现在尿液中,手脚、腹部和面部可能出现肿胀。如果蛋白尿的情况加重,可能会造成永久性肾功能损伤,有些病人可能需要做透析或肾移植。不论上述症状是否存在,尿蛋白测定是确定有多少蛋白质进入尿液的唯一办法。蛋白尿还可能引发心血管疾病。血管受损除了会引发肾脏疾病外,还可能会造成窒息和心力衰竭。患蛋白尿(症)的高危人群有哪些?患有糖尿病、高血压、心血管疾病和其他类型肾脏疾病等慢性病的病人易出现蛋白尿。老年人、肥胖人群以及有肾脏疾病家族史的人群。其

  • 【原创大赛】奶牛疾病之泌尿系统检查——尿液检查

    [align=center][b][color=#33383D]奶牛疾病之泌尿系统检查——尿液检查[/color][/b][/align][align=center]作者:宋娜娜[/align][color=#33383D]正常奶牛的尿液性质较为稳定,病牛尿液的性质往往发生一定变化。检查尿液的物理性状(尿量、颜色、透明度、粘稠度、气味、比重等),化学性质(酸碱性质、蛋白质、蛋白胨,葡萄糖、血液及血红蛋白、胆色素、尿兰母)及尿沉渣(红细胞、白纲胞、脓细胞、上皮细胞、管型及无机物等),对诊断肾脏疾病具有十分重要意义。[/color][color=#33383D]1[/color][color=#33383D]尿液的采集法[/color][color=#33383D]检查前采尿,最好用导尿法导尿,或趁奶牛排尿时直接接取,或将手伸入直肠内按压膀胱促其排尿。导尿时,奶牛须站立保定,用2%来苏儿洗净外阴部,将消毒过的右手伸入阴道,用中指挑起尿道外口。左手持消毒过的导尿背沿手指下插入尿道。如插入尿道忙囊时,要抽出导尿管重新插入,严禁粗暴,防止尿道损伤。[/color][color=#33383D]尿中蛋白质检查正常尿液含极微量蛋白质,用一般方法不能检出,如在尿中检出蛋白质称为蛋白尿,见于肾炎,膀胱炎和尿道炎等。检查方法常用的有以下两种。[/color][color=#33383D]血尿是指尿液中含有红细胞。奶牛排尿过程中,常用三杯法判定血尿来源。尿初有血,而后无血,表示尿道出血,尿初无血,仅最后排出血尿,表示膀胱出血,排尿自始至终都含有血液。表示肾脏出血。血尿常见于肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、尿结石、某些传染病(如钩端螺旋体病、炭疽等)、中毒病及肾、膀胱、尿道损伤。[/color][color=#33383D]血红蛋白尿及肌红蛋白尿尿液呈淡红色、红色、深红色乃至黑红色,无红细胞,尿中含有血红蛋白,称血红蛋白尿,见于产后血红蛋白尿病、牛焦虫病等。尿中含有肌红蛋白,称肌红蛋白尿,多见于犊牛自肌病等。[/color][b][color=#33383D] [/color][color=#33383D]三、尿中酮体的检查可用改良骆氏法[/color][/b][color=#33383D] 1[/color][color=#33383D]、骆氏试剂[/color][color=#33383D]硫酸铵100克,无水碳酸钠50克,亚硝基铁氰化钠8克,共研成粉末储于褐色瓶内备用。[/color][color=#33383D] 2[/color][color=#33383D]、检查方法[/color][color=#33383D]在一干燥小试管内加入骆氏试剂l~2厘米高。然后小心地将被检尿重积于试剂之上,放置数分钟后,如有酮体存在。则呈现红色,如酮体量多,呈现紫色。多应用于牛醋酮血病的检查。[/color][color=#33383D]3[/color][color=#33383D]、检查尿沉渣种类[/color][color=#33383D]尿沉渣显微镜检查尿沉渣可分为两类,一类为无机沉渣,包括各种无机盐类的结晶,另一类为有饥沉渣,包括红细胞、白细胞、上皮细胞、管型和微生物等。有机沉渣的检查,对诊断肾脏和尿道疾病有重要意义。[/color][color=#33383D] [/color][color=#33383D]制作尿沉渣标本前,要采取新鲜尿液5~10毫升,用离心机按每分钟l000~1500转,离心5~10分钟,倾去上清液。播匀沉淀物,用吸管吸取一滴置载玻片上,加上盖玻片,即可镜检。如无离心机,可将尿液静置2~8小时,使之自然沉淀。[/color][b][color=#33383D]四、镜检时[/color][/b][color=#33383D]镜检时,应缩小光圈,在较暗的视野先用低倍接物镜全而观察标本,找出需要检查的区域后,再换高倍接物镜,仔细辨认细胞成分和管型等。检查结果,对细胞成分可按每个高倍视野内最低至最高数值报告,对管型和无机盐类,按偶见、少量或多量等记载。[/color][b][color=#33383D]五、红细胞[/color][/b][color=#33383D]红细胞,健康奶牛尿中无红细胞。如上面说到,尿中出现多量红细胞时,则表示肾脏、输尿管、膀胱或尿道有出血[/color][color=#33383D]奶牛排尿时直接接取,或将手伸入直肠内按压膀胱促其排尿。导尿时,奶牛须站立保定,用2%来苏儿洗净外阴部,将消毒过的右手伸入阴道,用中指挑起尿道外口。左手持消毒过的导尿背沿手指下插入尿道。如插入尿道忙囊时,要抽出导尿管重新插入,严禁粗暴,防止尿道损伤。[/color][b][color=#33383D]六、脓细胞[/color][/b][color=#33383D]在肾脏和尿道有炎症时,白细胞积聚成堆,其结构模糊,在细胞中有残存颗粒,即称为脓细胞,但应与自细胞区别。[/color][b][color=#33383D]七、上皮细胞[/color][/b][color=#33383D]是泌尿系统发生病变时脱落下来的上皮组织。当肾脏病变时,特别是肾小管病变时,可见到肾上皮细胞,比白细胞约大1/3,多呈多角形、圆形、椭圆形或圆锥形。肾盂、输尿管发生疾患时,可见到肾盂上皮细胞,其形状呈梭形或犁形,有较大的核,比脓细胞大2~4倍。膀胱炎时,可见到膀胱上皮细胞,细胞大而扁平,核小而圆,有时呈长尾状。[/color][b][color=#33383D]八、管型[/color][/b][color=#33383D]也称尿圆柱。正常尿液中没有管型,肾脏发生病变时,肾小球滤出的蛋白质在肾小管中变性凝固,形成透明管状物,故称管型。管型是直的或稍弯曲的圆柱状物,两端多钝圆,或呈折断样。长短和宽窄很不一致。根据管型的来源及构造不同,可分下列几种。[/color][b][color=#33383D]九、上皮细胞管型[/color][/b][color=#33383D]是细尿管中脱落的上皮细胞与蚤自质粘集而成,见于急性肾炎。[/color][b][color=#33383D]10[/color][color=#33383D]、玻璃样管型(即透明管型)[/color][/b][color=#33383D]玻璃样管型(即透明管型)是肾小管中蛋白质凝固而成。结构均匀,无色半透明,多见于慢性肾病。 [/color][b][color=#33383D]十、血细胞性管型[/color][/b][color=#33383D]肾小管中的血细胞互相粘集而成。红细跑管型是在透明或颗粒管型内含有多量红细胞,见于肾脏出血性炎症。白细胞或脓细胞管型为白细胞或脓细胞所构成,地予化脓性肾炎、肾盂肾炎、急性肾炎。[/color][b][color=#33383D]十一、颗粒性管型[/color][/b][color=#33383D]是由肾上皮细胞的分解产物互相粘集而形成,较粗短,内含有颗粒,见于慢性肾炎或肾脏变性。[/color][b][color=#33383D]十二、蜡样管型[/color][/b][color=#33383D]一般较粗,有蜡样光泽,末端往往折断呈正方形。边缘常有缺口,近似玻璃样管型,但色较灰暗。尿中出现蜡样管型,表明肾小管有严重变性和坏死,表示预后不良,见于重症慢性肾炎。[/color][color=#33383D] [/color][color=#33383D]尿中无机沉渣检查在尿沉渣中有很多无机盐类结晶和非结品形物,各种结晶有其特有形状,但在奶牛疾病诊断上意义不大。[/color]

  • 尿液分析技术及仪器

    4.1尿液分析仪1.尿液分析仪的分类(1)按工作方式分类 可分为湿式尿液分析仪和干式尿液分析仪。其中干式尿液分析仪主要用于自动评定干试纸法的测定结果,因其结构简单、使用方便,目前临床普遍应用。(2)按测试项目分类 可分为8项尿液分析仪、9项尿液分析仪、10项尿液分析仪、11项尿液分析仪和12项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C和浊度。(3)按自动化程度分类 可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。 2.尿液分析仪工作原理(1)尿液分析仪的试剂带①试剂带的结构 单项试剂带以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥,作为试剂层,再在其表面覆盖一层纤维素膜作为反射层。一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。尿液浸入试剂带后,与试剂发生反应,可产生颜色变化。多联试剂带是将多种项目试剂块集成在一个试剂带上,使用多联试剂带,浸入一次尿液可同时测定多个项目。②试剂带的反应原理 pH测定:采用pH指示剂原理,常用甲基红和溴麝香草酚蓝组成的复合型指示剂,呈色范围从pH4.5~pH9颜色由橘黄色、绿色变为蓝色,由此反映尿液的pH值。 尿蛋白质测定:利用pH指示剂蛋白质误差的原理。 尿葡萄糖测定:当前有两种完全不同的检测尿糖的方法,一种是基于葡萄糖氧化酶法原理,能特异地检出尿中的葡萄糖;另一种是基于铜还原法的原理,能检测葡萄糖和其他还原性物质。 尿酮体测定:采用亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。 尿隐血测定:利用游离血红蛋白、溶解红细胞或肌红蛋白中的血红素具有过氧化物酶样作用,能催化过氧化氢释放出新生态氧,使色原氧化而显色,其颜色深浅与血红蛋白含量有关。 尿胆红素测定:采用重氮反应法原理。 尿胆原测定:采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理。 尿亚硝酸盐测定:尿亚硝酸盐试验的化学基础是利用某些细菌能将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐的特性。 尿白细胞测定:利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有机酸,吲哚酚可进一步氧化成靛蓝的原理;或吲哚酚和重氮盐反应成重氮色素而显色,颜色深浅与粒细胞量的多少有关。 尿比密测定:基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度溶液中pKa变化来测量比密。 尿维生素C测定:采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维生素C进行反应,形成钼蓝,颜色由蓝色变成紫色,颜色深浅与尿中维生素C含量有关。③试剂带的应用 不同型号的尿液分析仪一般使用自己配套的专用试剂带。试剂块要比测试项目多一个空白块,有些仪器还多一个位置参考块。各试剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出测试误差,提高测量准确度而设置的。固定块是为了消除在测试过程中为免每次测定试剂块的位置不同产生测试误差设置的,每次测定前,检测头都会移到参考位置进行自检,必要时,自动调整发光二极管的亮度和灵敏度,以提高检测的信噪比。3.尿液分析仪的检测原理 把试剂带浸入尿液中后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越小;反之,反射率越大。因为颜色的深浅与光的反射率成比例关系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系,所以只要测得光的反射率即可以求得尿液中各种成分的浓度。 尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。一种波长为测定波长,它是被测试剂块的敏感特征波长;另一种为参比波长,是被测试剂块不敏感的波长,用于消除背景光和其它杂散光的影响。各种试剂块都有相应的测定波长,其中亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆素原的测定波长为550nm,pH、葡萄糖、蛋白质、维生素C、潜血的测定波长为620nm。各试剂块所选用的参考波长为720nm。 试纸块颜色的深浅除了随各被测成份的不同而变外,还与尿液本身的颜色有关。空白试纸块随着尿液的颜色而变化。试纸块的反射率R试纸由式13-1计算:R试纸= ×100% 空白块的反射率R空白由式13-2计算::R空白= ×100% 总的反射率R为试纸块的反射率与空白块的反射率之比:R= = ×100% 采用双波长测定法,抵消了尿液本身颜色引起的误差,可提高测量精度。4.仪器的结构与功能 尿液分析仪一般由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。其结构见图13-2。http://www.care100.com/yqxjpkc/images/131.jpg图13-2 尿液分析仪结构示意图

  • [求助]尿样去蛋白的前处理方法

    大家好,我现在想用高效液相色谱和质谱联用测定有关尿样中的代谢产物,考虑到尿液中的蛋白是最大的干扰,请教一下各位高手如何去除其中的蛋白啊。谢谢大家![em61]

  • 【讨论】血浆样品及胆汁、尿液前处理方法

    大家讨论一下:血浆样品处理方法的前处理方法哪个好,比如液液萃取,还是沉淀蛋白法好?有听说血浆样品用沉淀蛋白法比较好,胆汁尿液之类的样品用液液萃取法比较多,大家有什么经验分享一下吧

  • 尿液分析仪和手工镜检尿液中红细胞的结果分析

    尿干化学法分析仪和传统显微镜镜检是基于两种不同原理的检验手段,因此检测结果可能存在一定程度的差异。临床中两种诊断血尿方法常配合使用以达到检测效率与质量的统一,总结起来,对检测结果的影响因素主要有以下几方面。  3.1 假阳性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阳性,但镜检却呈阴性 。其原因包括:(1)尿液分析仪潜血实验可与完整红细胞阳性反应,也能够与血红细胞释放的血红蛋白(hemoglobin,Hb)进行反应,这与显微镜只能够观察到完整的红细胞存在差异。健康人群尿Hb水平极低,定为阴性;(2)肌红蛋白(myoglobin,Mb)分子中包含Hb基团,当骨骼肌、心肌严重受损,血MB浓度升高,经肾排泄,导致尿液MB水平升高,潜血反应因此呈阳性,而显微镜检查却呈阴性;(3)部分患者尿中存在对热不稳定的酶,也可导致试剂块发生颜色变化,发生潜血反应;氧化性物质的污染也是造成潜血反应假阳性因素;高温或标本存放时间过长导致潜血反应阳性率增高 ;(4)尿试纸条超过保质期,或没有妥善保存、操作不当、仪器故障等均可能造成假阳性。  3.2 假阴性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阴性,但镜检却呈阳性。其原因包括:(I)食物、药物影响:某些饮食、药物可引起尿液成份的改变如当尿液中存在大量的维生素时,维生素具有的强还原性使其竞争性结合反应产生的氧,导致尿试纸条无法出现潜血反应即出现假阴性反应;(2)高蛋白、高比重尿样削弱了试剂块潜血反应的敏感度,使能够发生反应的成分被包裹,反应试剂无法接触到,从而出现假阴性结果。  3.3 离心对检测结果的影响 离心中若速度过快,致使有形成分遭到破坏;但过慢时,沉渣中可能无法找到,以至于漏掉。因此对检验结果出现怀疑时,可实验潜血证实进行验证。总之,随着尿干化学分析仪普及,工作效率得到了极大提升,也使检测红细胞敏感度提高,但显微镜镜检也是无法替代的。对于疑似阳性反应的病例,应采用尿沉渣镜检进行复测,以求结论准确,提高检测可靠性。

  • 蛋白质检测仪测量指标有哪些

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]  蛋白质检测仪测量指标有哪些,蛋白质检测仪的测量指标可以因不同型号、品牌和用途的仪器而有所差异。然而,一般来说,蛋白质检测仪的测量指标可以归纳为以下几个方面:  一、基本测量参数  检出下限:这是仪器能够检测到的最低蛋白质含量,通常以百分比或具体浓度值表示。例如,某些蛋白质快速检测仪器的检出下限为0.5%。  检测范围:仪器能够测量的蛋白质含量的范围,这通常是一个区间值。例如,某些仪器的检测范围为(0~50)%。  吸光度值范围:在光度法中,吸光度是衡量物质对光吸收程度的物理量,蛋白质检测仪通常会给出其吸光度值的测量范围,如0.000-4.000A。  重复性:这是衡量仪器测量结果稳定性的一个重要指标,通常以百分比或具体数值表示。例如,某仪器的重复性为±0.1%(A)。  重复性误差:与重复性相关,但更具体地描述了多次测量同一样品时结果之间的差异,如吸光度(A)≤0.003。  稳定性:指仪器在长时间运行或不同时间点测量时,结果的一致性。例如,光电漂移(A)±0.002(3分钟)可以反映仪器的稳定性。  二、特定功能指标  多通道检测:一些先进的蛋白质检测仪支持多通道检测,可以同时处理多个样品,提高检测效率。  样品类型:仪器能够检测的样品类型,如食物、饮品、血清、血浆、尿液等。  分子量范围:对于能够检测蛋白质分子量的仪器,其分子量范围是一个重要的指标,如2-440kDa。  样品处理量:一次运行能够处理的样品数量,如某些全自动蛋白质定量检测仪一次可以处理25个样本/每轮。  检测速度:完成一次检测所需的时间,这也是衡量仪器效率的一个重要指标。  三、高级功能指标  智能化程度:包括仪器的自我保护功能、数据储存方式(如支持U盘储存)、以及是否具备自动校准、自动清洗等高级功能。  检测精度和误差:除了上述的重复性和重复性误差外,还包括仪器的整体检测精度和误差控制水平。  软件支持:是否配备有用户友好的软件界面,用于数据分析和报告生成。  兼容性:仪器是否兼容不同类型的试剂盒和样品处理方法。  需要注意的是,以上指标并非所有蛋白质检测仪都具备,具体指标会根据仪器的设计、用途和性能而有所不同。在选择蛋白质检测仪时,应根据实际需求和使用场景综合考虑各项指标。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/07/202407030956049224_5772_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

  • 胰蛋白酶原 标准操作规程(SOP)

    名称:胰蛋白酶原 标准操作规程(SOP)关键词:胰蛋白酶原目的:用于急性胰腺炎检查。**科胰蛋白酶原 标准操作规程(SOP)实验室名称 项 目 编 号 制定日期急 诊 室 胰蛋白酶原 JZ022 20040620手工法。标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出,并根据下述人员批准签字:专业主管,科主任。采用免疫层析法,包括两种人胰蛋白酶原-2抗体。一种结合在蓝色的乳胶粒子上,另一种被固定在膜上,捕捉与抗原抗体复分 物并与之结合,显示阳性结果。由上海基因生物技术公司技术公司提供。 新鲜尿液。1、让贮存罐与尿液达到室温。从贮存罐中取出所需数目的试纸条,紧闭贮存罐。不要接触浸渍区,在试纸条上做好标记;2、将浸渍区浸入尿液,保持到液体进入反应区,液面不要超过黄色区域,从标本溶液中取出试纸条,水平放置。五分钟后读结果,若反应区出现:两条蓝线 一条为阴性;无蓝线时为检测失效。正常人应为阴性。1、正常人为阴性。2、急性胰腺炎时尿液中的胰蛋白酶原-2抗原明显升高,可早期诊断。1、不要让试纸条留在标本中,吸收的量过大或过小检测将不准确。2、不要超过黄色浸渍区。试纸条上面部分不能弄湿。3、不要使用已变湿的试纸条。4、如果使用前反应区有蓝色,请不要使用。5、如果没有出现质控线表示结果无效。 操作人员 部门主管 质量负责人姓 名日 期

  • 用API5000做尿液标养,目标物出峰为什么提前了

    之前用甲醇当溶剂做的标样出峰时间是1.57min,然后用尿液来做标样,手动用MCX固萃以后出峰时间提前到0.55min,然后用10%甲醇,甲醇交替冲洗柱子一下午,现在重新检测甲醇溶剂标样出峰时间回到了1.53min。想问问老师们,这种情况是因为尿液没被萃取干净,萃取液中有无机盐导致的吗?之前我在社区看到固萃可以去盐去蛋白去脂,单这几天尝试固萃的效果都很差,混标液里只有三四个的洗脱有梯度,而且计算回收率只有百分之三十几。

  • PanGIA生物技术公司融合AI与尿液活检技术,助力癌症早期检测

    随着对癌症相关研究的深入,化学治疗、靶向治疗、免疫治疗等治疗手段不断推陈出新,癌症治疗水平得到了长足的进步。而癌症患者的精准治疗离不开分子生物学及诊断技术的发展,液态活检作为新兴的检测技术在肺癌临床中的应用日趋成熟。而尿液检测是临床最常见的检测项目之一,不仅可以反映肾脏、肝脏、泌尿系统、内分泌系统等疾病状况,也可间接反映全身代谢性及循环等系统的功能。在生物医学研究中,蛋白质组学被广泛应用于生物标志物(Biomarkers)的发现和鉴定。随着技术的发展,尿液蛋白质组学分析成为备受关注的生物标志物发现研究领域之一。一方面,尿液中含有由肾脏滤过的血浆蛋白质以及由泌尿系统分泌的蛋白质,通过分析尿液中的蛋白质组成,可以了解人体健康状况和疾病状态的变化。另一方面,更重要的是,与变化较为稳定的血液蛋白组相比,尿液蛋白组能够更早期、更敏感地反映身体内由于疾病而产生的变化。再加上尿液作为一种无创可得的样本,使得尿液成为疾病诊断,尤其是早期检测的生物标志物的理想样本之一。[color=#0070c0][b]因此,尿液也被誉为寻找生物标志物的“金矿”,挖掘这个潜在金矿可能会极大地加快精准医疗的发展。[/b][/color][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/73ad66a9-8eec-4eff-be45-3c455d562e13.jpg[/img][/align][align=center]图源:PanGIA[/align]总部位于美国的生物技术公司PanGIA即将完成一个为期三年的关于前列腺癌液体活检的临床研究。同时,PanGIA公司计划启动额外的临床研究,目标是实现各种癌症类型的早期检测,所有这些研究都将由PanGIA液体活检平台提供支持。[b][color=#0070c0]PanGIA液体活检平台是什么?[/color][/b]PanGIA 是一种基于尿液的非侵入性机器学习驱动的生物分子特征液体活检平台,目前该领域还存在很大的空白。这项创新技术[b][color=#0070c0]融合了人工智能(AI)和基于尿液的液体活检技术[/color][/b],旨在[color=#0070c0][b]对癌症进行早期诊断、监测和管[/b][/color]理,从而有可能挽救无数生命。通过在全球范围内提高癌症诊断的可用性和可扩展性,[b][color=#0070c0]PanGIA液体活检平台有望改变癌症检测和治疗方式。[/color][/b]这项研究最初在2020年获得IRB(伦理审查委员会)批准并开始,招募了在美国各地进行前列腺活检的泌尿科医生。虽然研究结果尚未公布,但结果的高灵敏度和特异性催生了PanGIA生物技术公司计划进行进一步研究。[align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/487d7def-9056-4234-9d31-3f39293871af.jpg[/img][/align]该公司现在正在准备在另外10种癌症类型上开展后续研究。这些包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、膀胱癌、结肠直肠癌、胃癌、胰腺癌、肝癌和脑癌。该公司目前正在全美范围寻找医学专业人员建立临床研究点,并将在ClinicalTrials.gov网站上列出研究结果。这项扩大的研究预计将在2024年年中启动。PanGIA公司的方法结合了分子生物学、计算生物学和机器学习的细微差别。这种结合有助于检测与疾病相关的模式,重点是对一系列疾病的非侵入性检测,这种方法的主要重点是各种癌症的早期第一阶段检测。【1】 BNN Breaking [url]https://bnnbreaking.com/breaking-news/health/pangia-biotech-to-extend-cancer-detection-studies-with-proprietary-liquid-biopsy-platform/[/url][来源:仪器信息网译] 未经授权不得转载[align=right][/align]

  • 【原创大赛】奶牛尿检的意义

    [align=center]奶牛尿检的意义[/align][align=center]宋娜娜[/align]尿常规是肾内科诊前常规检查,尤其是对有尿频、尿急、尿痛、排尿困难、浮肿、血尿等症状的患畜,对于诊断是否为泌尿系统感染至关重要。血液流经肾小球时,血液中的尿酸、尿素、水、无机盐和葡萄糖等物质通过肾小球的滤过作用,过滤到肾小囊中,形成原尿。当尿液流经肾小管时,原尿中对牛体有用的全部葡萄糖、大部分水和部分无机盐,被肾小管重新吸收,回到肾小管周围毛细血管的血液里。原尿经过肾小管的重吸收作用,剩下的水和无机盐、尿素和尿酸等就形成了尿液。肾小管形成的尿液经肾乳头到达肾髓质,肾髓质连输尿管到达膀胱,最后经尿道排出体外。尿液检查不仅可以直接了解泌尿系统的生理功能和病理变化,也可间接反映全身多器官和系统的功能。1 牛的尿常规检验参数及其参考范围 [table=655][tr][td] [align=center]参数[/align] [/td][td] [align=center]参考范围[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]白细胞[/align] [/td][td] [align=center]≤5个/HP[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]亚硝酸盐[/align] [/td][td] [align=center]—[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]尿胆原[/align] [/td][td] [align=center]弱阳性[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]蛋白[/align] [/td][td] [align=center]—[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]PH 值[/align] [/td][td] [align=center]4.5-8.0[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]潜血[/align] [/td][td] [align=center]—[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]比重[/align] [/td][td] [align=center]1.015-1.050[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]酮体[/align] [/td][td] [align=center]—[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]胆红素[/align] [/td][td] [align=center]—[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]葡萄糖[/align] [/td][td] [align=center]—[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]维生素C[/align] [/td][td] [align=center]—[/align] [/td][/tr][/table]2 检测参数评价2.1 白细胞尿中出现大量白细胞,见于肾及尿路的炎症,如急性肾炎、肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、尿道结核等。2.2亚硝酸盐尿亚硝酸盐阳性见于由大肠杆菌引起的肾盂肾炎,由肠杆菌科等细菌引起的尿路感染、膀胱炎等。2.3尿胆原健康动物的尿中含有少量的尿胆原,若显著增多则多见于溶血性疾病及肝实质性疾病,当动物患有阻塞性黄疸时,尿胆原消失,呈阴性。2.4蛋白正常情况下,动物排出的尿液中蛋白质含量很少,一般方法不能检测出来。病理情况下,肾脏过滤功能障碍,大量蛋白质进入尿中,称为蛋白尿。蛋白尿常见于肾脏的器质性病变,如肾炎、肾盂肾炎、间质型肾炎;某些药物引起的以肾病为特征的肾脏损伤,如重金属、有机溶剂抗生素中毒及采食霉变饲料;许多发热性疾病过程中,也可发生轻微或暂时的蛋白尿。2.5 PH值尿PH值受很多因素影响,很大程度上取决于饮食种类、服用的药物及疾病类型。病理性的尿液PH减低,鉴于某些发热性疾病、痛风、长期饥饿和酸中毒(如奶牛酮病、瘤胃酸中毒)。病理性的尿液PH增高鉴于尿道阻塞和膀胱炎是尿液在膀胱内积滞,也见于代谢性碱中毒及摄入乳酸钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠等盐类物质。2.6潜血血尿见于泌尿器官炎症、肿瘤、寄生虫病及某些中毒性疾病。血红蛋白尿常见于可引起溶血的各种疾病,如钩端螺旋体病、血液寄生虫病、细菌感染及新生仔畜溶血病。2.7比重尿液比重与尿液中可溶性物质的数量、质量及尿量密切相关。临床异常表现低渗尿和高渗尿。低渗尿常见于水中毒、肾上腺皮质功能亢进、高钙血症、低钾血症、子宫积脓肾功能衰竭、肾炎等。高渗尿见于糖尿病、渗透性利尿药、心功能衰竭、脱水、出血、休克等。2.8酮体健康动物尿中含有微量酮体,一般无法检出。尿中检出酮体,常见于集体碳水化合物和脂肪代谢障碍,如奶牛酮病、奶羊妊娠毒血症、仔猪低血糖、犬猫糖尿病。2.9胆红素尿胆红素阳性见于胆石症、胆道肿瘤、胆道蛔虫、胰头癌等引起的梗阻性黄疸和肝癌、肝硬化、急慢性肝炎、肝细胞坏死等导致的肝细胞性黄疸。2.10葡萄糖尿糖阳性见于糖尿病、甲状腺机能亢进、垂体前叶功能亢进、嗜细胞瘤、胰腺炎、胰腺癌、严重肾功能不全等。此外,颅脑外伤、脑血管意外、急性心肌梗塞等,也可出现应激性糖尿;过多食入高糖食物后,也可产生一过性血糖升高,是尿糖阳性。2.11维生素C尿检里维生素 C是一个辅助项目,用于检测尿检中其他指标的可靠性。当维生素C阳性的时候,可能会影响一些指标出现假阴性或者假阳性。3 注意事项尿常规的检测结果受很多因素影响,因此在实际操作过程中,要尽量避免人为因素带来的误差,严格按照要求进行操作。在使用中应注意以下问题:3.1采集样本要使用一次性的清洁器具,操作过程要避免手指及实验工作台残留的液体污染试纸带。3.2检测时尿标本必须新鲜,放置过久,细菌分解尿液成分(大多数细菌产生氨,使尿液呈碱性)可导致pH改变。3.3如待检尿液采集后不能立即进行测试,应该尽量低温保存。冬天室温4小时内必须进行检测,夏天则2小时内必须进行检测。3.4检测试纸条启封后要注意妥善保存,注意防潮、防光照、防碱性气体,以免导致试纸条变质失效。

  • 【求助】(已应助)求助几篇双缩脲测定蛋白的论文,非常感谢

    1 双缩脲法和凯氏定氮法测定饲料中蛋白质含量的比较研究 张厚锋 张淑萍 中国饲料 2008-04-05 期刊 2 双缩脲法与凯氏法测定饲料蛋白质的比较实验 张厚锋 张淑 饲料与畜牧 2008-03-15 期刊 3 一种蛋白质含量测定方法的改进研究 周东凯 富雪菲 吴刚 马学良 杨翔华 崔金久 赵海峰 刘志刚 饲料工业 2005-09-20 期刊 4 三氯乙酸沉淀法结合双缩脲比色法测定水蛭提取液中总蛋白含量 余兰 于香安 中国药物与临床 2004-09-30 期刊 5 双缩脲光度法快速测定乳品中的蛋白质 杨柳桦 孙成均 现代预防医学 2005-08-30 期刊 6 考马斯亮蓝G-250法快速测定牛乳中的蛋白质 南亚 李宏高 饮料工业 2007-12-28 期刊 7 蛋白质定量分析的进展 陈鸿琪 理化检验.化学分册 2000-07-28 期刊 8 双缩脲比色法测定面粉、肉类食品中的蛋白质 潘能斌 浙江预防医学 2001-03-01 期刊 5 9 测定含乳固体饮料蛋白质含量的双缩脲比色法 闫铁炜 内蒙古质量技术监督 2002-01-30 期刊 10 双缩脲比色法快速测定含乳固体饮料中蛋白质含量的探讨 高素虹 广东卫生防疫 1999-09-30 期刊 2 11 分光光度法测定人血清中微量蛋白质的研究 张威 杨胜科 西安科技学院学报 2004-06-30 期刊 1

  • 基因酶标仪测量蛋白浓度步骤

    基因酶标仪测量蛋白浓度步骤

    基因酶标仪测量蛋白浓度步骤[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306301224011043_6157_5389809_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306301224016374_6651_5389809_3.png[/img]

  • MD酶标仪测量蛋白浓度

    MD酶标仪测量蛋白浓度

    MD酶标仪测量蛋白浓度[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306301406440342_3956_5389809_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306301406445138_9474_5389809_3.png[/img]

  • 牛奶中尿素氮检测的意义

    牛奶中尿素氮检测的意义

    自20世纪90年代中期以来,欧美等奶业发达国家将牛奶中尿素氮(MUN)含量的检测作为牛群改良计划(DHI)中必备的检测项目。最近几年来,随着中国奶牛集约化水平不断提高,以奶牛生产性能测定(DHI)和牛场管理软件为代表的先进的管理手段应用而生。应用DHI对整个牛群的产奶量、胎次、乳脂、乳蛋白、尿素氮、酮病、体细胞等进行测试,并导入相应的软件中进行分析,为牛场提供数字化的DHI报告,为牛场的饲养管理提供有效帮助。虽然DHI报告中乳尿素氮(MUN)作为重要的检测指标,但从全国来看,参测DHI的牧场不到20%,大多数牧场仍然没有尿素氮的数据。所以,开发一种方便快捷的尿素氮测定仪显得尤为迫切。那么牛奶中的尿素氮又是怎么产生的呢?奶牛日粮营养一般由蛋白和能量构成,日粮蛋白分为瘤胃降解蛋白(RDP)和瘤胃非降解蛋白(RUP)。瘤胃降解蛋白经瘤胃细菌水解为肽和氨基酸。氨基酸进一步降解为有机酸、二氧化碳和氨,氨能被瘤胃细菌利用合成蛋白质[sup][/sup]。如果瘤胃中RDP含量过高,生成氨过量或释放的速度太快,瘤胃细菌则无法及时有效地利用所有生成的氨。而氨是有毒的,过量的氨通过瘤胃壁进入血液,随着血液循环到达肝脏形成尿素,尿素是无毒的,通过尿液排出或再通过唾液循环至瘤胃。在这个过程中,尿素很容易扩散至体组织及体液当中,包括血液和奶。血液中的尿素氮(BUN)很容易释放到奶中,所以MUN与BUN的浓度高度相关,可以通过测定MUN来评估BUN。另外,在这一过程中,需要有足够的碳水化合物奶提供足够的能量,才能有效的合成瘤胃微生物蛋白。瘤胃中如果氨浓度过高,会导致瘤胃PH升高,增加瘤胃对氨的吸收率。结果,肝脏转化更多的氨为尿素,同时BUN和MUN水平也会相应升高。BUN不仅受粗蛋白摄入量影响,而且还受蛋白降解率影响。影响BUN的因素同样也影响MUN,如干物质采食量、能量摄入量、饮水量、肝脏及肾脏功能和奶产量。BUN在采食后变化较大,一般在采食后4-6H最高,在饲喂前BUN水平最低,而MUN相对稳定。通常在挤奶结束时,校正的奶样其MUN浓度非常接近BUN浓度。由于奶样较容易获得,因此通常以测定MUN来估计BUN。另外一条途径是瘤胃非降解蛋白(RUP)过量,其分解产生大量的氨基酸,而过量的氨基酸会转化为尿素。一部分尿素随着唾液循环回到瘤胃,另一部分通过尿液排出体外。这个过程中也有一部分自由扩散到奶中。因此,MUN既来源于瘤胃降解蛋白,也有一小部分可能来源于瘤胃非降解蛋白,通过测定MUN可以监控牛群瘤胃氮代谢的效率。MUN既然作为DHI检测中一项必检指标那么检测MUN的意义何在呢?我会从以下几个方面阐述一下检测牛奶中尿素氮含量对牛群的意义和影响。[b](1)乳尿素氮(MUN)可反映奶牛的营养状况[/b]营养因素是影响乳尿素氮(MUN)的主要因素。研究表明,乳尿素氮(MUN)与奶牛日粮蛋白质呈正相关,与能量水平呈负相关,当日粮粗蛋白(CP)水平的差异小于1.0%时,可对乳尿素氮(MUN)产生显著影响。[b](2)预测尿液中氮(UN)排泄水平[/b]当奶牛日粮中氮摄入量(NI)高于需要时,过量的氮不能被奶牛吸收而要被排出体外,成为奶牛行业中对环境最大的氮污染源。由此可知,确定奶牛的氮的排泄量的采取措施治理奶牛场污染的前提条件。奶牛氮的排出主要有三个途径,一是尿液中氮(UN),二是粪便中氮(FN),三是乳中的氮(MN),其中尿液中的氮(UN)对环境的影响最大,采用全尿液的方法估测尿液中氮(UN)排泄量,费时费力,难以得到广泛应用。所以,通过测定乳尿素氮(MUN)来预测尿液中氮的排泄水平,有着非常重要的现实意义。日粮中粗蛋白(CP)含量是决定尿液中氮(UN)的主要因素。Burgos研究表明,奶牛日粮中蛋白含量从15%提高到21%,尿液中氮(UN)含量直线上升。Castillo等研究表明,氮摄入量(NI)超过400g/d时,摄入量增加51%,尿液中氮(UN)排泄量增加273%,400g/d是氮摄入量(NI)的一个临界点,在这个点的前后,氮的排除有着显著的差异。氮摄入量(NI)低于400g/d时,奶牛体内过多的氮主要通过粪便排出。而当氮摄入量(NI)大于400g/d时,尿液排泄成为主要的排泄途径。英国奶牛营养体系中,氮摄入量(NI)为400g/d是整个泌乳期平均产奶量20-25kg/d的奶牛蛋白质的最佳需要量,此时蛋白质的利用效果也最高。[b][b](3)用于监控奶牛繁殖性能[/b][/b]国内外文献研究表明,乳尿素氮(MUN)和繁殖率之间存在着显著的负相关性。Guo等对713个奶牛场10271头奶牛的数据进行分析,发现了乳尿素氮(MUN)与一次受胎率呈负相关,乳尿素氮(MUN)升高10mg/dL,受胎率降低2%-4%[sup][/sup]。Arunvipas等从加拿大375个奶牛场的繁殖数据分析得出,乳尿素氮(MUN)从10mg/dL升高到20mg/dL时,一次配种受胎率降低了13.9%。Butler等研究表明,高产奶牛血浆尿素氮(PUN)高于19mg/dL或乳尿素氮(MUN)高于17mg/dL,可导致繁殖率降低。也有研究表明,人工受精当天血清尿素氮(SUN)的浓度超过20mg/dL,受胎率就会降低。Carlsson等认为乳尿素氮(MUN)值低于7mg/dL或者高于17.6mg/dL才会有副作用。也有学者并未发现较高的乳尿素氮(MUN)或血清尿素氮(SUN)与低繁殖率之间的关系。这可能与检测的仪器不同,方法不同所产生的误差有一定的关系。下面是用电化学方法检测的乳尿素氮数值:[align=center][img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709291123_01_2862195_3.jpg[/img][/align][align=left]Canfield等研究表明,体内过高的尿素氮对精子、卵子和胚胎有毒害作用,可导致繁殖率降低。Bulter等研究表明,乳尿素氮(MUN)影响受胎率的机理可能是,体内过多的尿素氮将使子宫内环境的PH值降低,减少前列腺素的产生,影响子宫内液体的尿素,以及微量元素镁、钾、磷和锌的浓度,使促黄体素和卵巢受体结合,进一步导致孕酮浓度和繁殖力的下降。[/align][align=left][/align][align=left]众多流行病学调查结果表明,奶牛日粮中蛋白质水平在奶牛繁殖性能方面有着重要作用,增加奶牛日粮可降解蛋白质水平,可提高血液及乳尿素氮(MUN)水平,而尿素氮浓度超过一定水平后就会对奶牛受胎产生不利影响。近几年来,很多研究揭示了这种流行病学背后的病理生理学原因,主要因为高产奶牛肝脏代谢负荷大,脱氨基反应消耗了大量的能量,加重了能量负平衡。蛋白分解代谢的直接副产物可能导致卵母细胞和胚胎中毒。改变了子宫液的离子组成,妨碍排卵后子宫PH值的自然增加。影响子宫内膜组织分泌前列腺素。影响精子活力。以上原因可能导致奶牛受胎率降低。[/align][align=left][/align][align=left]怎样可以快速检测牛奶中尿素氮呢?目前世界上对于尿素氮的检测大多都是采用仪器分析完成的,通用的方法有采用红外线和湿化学两种仪器方法。尿素是牛奶中含量很小但非常重要的指标,每100升的典型牛奶中有3600克的脂肪、3200克的蛋白却仅有12克的尿素,如此小的含量使得对它的准确检测比对脂肪或蛋白的准确检测要困难得多。[/align][align=left]另外尿素氮检测有许多需要注意的地方。由于MUN浓度与瘤胃中氨浓度密切相关,而MUN浓度在早晨和晚间会有较大差异。这也取决于各个牧场的饲喂体系。如果我们发现早晚MUN的差异较大,则建议增加饲喂次数,利用DHI测试体系还可以观察到不同挤奶次数间MUN的差异。就奶牛日粮的蛋白质-能量平衡而言,目前还有许多牧场的饲养管理尚有值得改进的地方。总之,牛奶尿素氮是牧场经营管理的一项重要指标,只有通过对它进行检测、分析和应用,才能利用它来提高牛场的经营效益、增加收入。[/align]

  • 药物绑定靶蛋白的效果首次可直接测量

    新技术有助于开发更好的药物2013年07月06日 来源: 中国科技网 作者: 陈丹 科技日报讯 据物理学家组织网7月5日(北京时间)报道,瑞典卡罗林斯卡医学院的研究人员开发出一种方法,首次能够直接测量药物抵达其位于细胞中的目标蛋白的效果。《科学》杂志上描述的这项新技术,对于开发新的、改良型的原料药将是一个重大贡献。 大多数药物都是通过与一种或多种蛋白质结合并影响其功能来发挥效力的,但药物开发也因此面临两个常见问题:认定正确的目标蛋白,并设计能够有效地找出和绑定它们的药物分子。此前没有任何一种手段可用于直接测量药物分子定位和绑定其靶蛋白的效率,这使得药物开发过程的很多阶段都存在一定程度的不确定性。在某些情况下,候选药物在人体临床试验中没有达到预期效果,经证实正是由于药物分子没有与正确的蛋白质结合造成的。 而卡罗林斯卡医学院研究人员利用靶蛋白与药物分子结合时通常会变得稳定的观念,开发出了这个被称为CETSA(细胞热转移分析)的新技术。他们认为,这项技术可作为药物开发过程中一个重要的控制阶段,也可作为对其他方法的一个补充。“我们已经证明,该方法适用于多种靶蛋白,使我们能够直接测量药物分子是否抵达了其位于细胞或动物模型中的目标。”该医学院医学生物化学与生物物理学系首席研究员帕尔·诺德隆德说,“我们相信,CETSA技术最终将帮助提高许多药物的效率,并有助于开发更好的药物分子和更有效的治疗方案。” 研究人员还对可能导致细胞耐药性的工序进行了仔细检查,并表示,这一技术能够确定现有药物是否适合个别患者,因此其具有应用于个性化治疗的潜在价值。 “我们认为,该方法可以为癌症治疗提供一个重要的诊断工具,比如,从原则上来说,CETSA技术让我们能够确定哪种药物针对肿瘤中的蛋白质最有效,临床医生也可以在早期治疗阶段确定肿瘤是否已经具备了某种抵抗力、哪种治疗方案对病人更合适。”诺德隆德的同事丹尼尔·马丁内兹·莫利纳说,他带领的团队正在开展一个旨在将CETSA技术用于病患研究的项目。(记者陈丹) 总编辑圈点 体温可以测量,骨密度可以测量,就连药物绑定靶蛋白的效果也可以直接测量,让人不得不慨叹医学技术发展的速度之快。文中提到的细胞热转移分析技术,就好比狙击手的瞄准镜,能帮助狙击手调整位置以便更准确地击中目标。这样一来,不仅可以更好地提高药效,还尽可能地减少副作用,其实际应用价值非同一般。那种“杀敌一千,自损八百”的诊疗方法或将成为过去,那些原本被认为的绝症或将“绝”处逢生。 《科技日报》(2013-07-06 一版)

  • 【转帖】“蛋白精”的骗局

    许多人喝牛奶是为了补钙,不过你如果留心一下国内鲜牛奶包装上的标注,一般没有列出钙的含量,标明的营养成分含量只有两种:脂肪和蛋白质。鲜牛奶有全脂、低脂、脱脂之分,其脂肪含量各不相同,而且在脂肪被视为健康杀手的今天,一般人不会在乎脂肪含量是否达标。蛋白质才是牛奶中的主要营养成分,鲜牛奶包装上都会注着蛋白质含量为100毫升≥2.9克,以表明符合鲜牛奶的国家标准(100毫升≥2.95克)。 生鲜牛奶的蛋白质含量一般在3%以上,所以一般都能达到国家标准,除非往原奶中兑水。要提防有人拿水卖出奶价钱,就有必要在收购生鲜牛奶时检测蛋白质的含量。根据蛋白质的化学性质,有几种检测方法,各有优缺点。食品工业上普遍采用的、被定为国家标准的是凯氏定氮法。这是19世纪后期丹麦人约翰凯达尔发明的方法,原理很简单:蛋白质含有氮元素,用强酸处理样品,让蛋白质中的氮元素释放出来,测定氮的含量,就可以算出蛋白质的含量。牛奶蛋白质的含氮率约16%,根据国家标准,把测出的氮含量乘以6.38,就是蛋白质含量。 所以凯氏定氮法实际上测的不是蛋白质含量,而是通过测氮含量来推算蛋白质含量,显然,如果样品中还有其他化合物含有氮,这个方法就不准确了。在通常情况下,这不是个问题,因为食物中的主要成分只有蛋白质含有氮,其他主要成分(碳水化合物、脂肪)都不含氮,因此凯氏定氮法是一种很准确的测定蛋白质含量的方法。但是如果有人往样品中偷加含氮的其他物质,就可以骗过凯氏定氮法获得虚假的蛋白质高含量,用兑水牛奶冒充原奶。 常用的一种冒充蛋白质的含氮物质是尿素。不过尿素的含氮量不是很高(46.6%),溶解在水中会发出刺鼻的氨味,容易被觉察,而且用一种简单的检测方法(格里斯试剂法)就可以查出牛奶中是否加了尿素。所以后来造假者就改用三聚氰胺了。三聚氰胺含氮量高达66.6%(含氮量越高意味着能冒充越多的蛋白质),白色无味,没有简单的检测方法(要采用“高效液相色谱”这种高科技去检测),是理想的蛋白质冒充物。三聚氰胺是一种重要的化工原料,广泛用于生产合成树脂、塑料、涂料等,目前的价格大约是1吨12000元。在生产三聚氰胺过程中,会出现废渣,废渣中还含有70%的三聚氰胺。造假者用来冒充蛋白质的就是三聚氰胺渣,国内有不少“生物技术公司”在网上推销“蛋白精”,其实就是三聚氰胺渣。在饲料、奶制品中添加“蛋白精”冒充蛋白质,已成了公开的秘密,它的流行让这种本来免费的化工废料的价格攀升到了1吨300~400元。 三聚氰胺是怎么加到牛奶中的呢?有两种可能途径。一种是奶站加到原奶中。这样做有一定的局限,因为三聚氰胺微溶于水,常温下溶解度为3.1克/升。也就是说,100毫升水可以溶解0.31克三聚氰胺,含氮0.2克,相当于1.27克蛋白质,由此可以算出,要达到100毫升≥2.95克蛋白质的要求,100毫升牛奶最多只能兑75毫升水(并加入0.54克三聚氰胺)。另一种途径是在奶粉制造过程中加入三聚氰胺,这就不受溶解度限制了,想加多少都可以。 三聚氰胺在国内之所以被当成了“蛋白精”来用,可能是因为觉得它毒性很低,吃不死人。大鼠口服三聚氰胺,半致死量(毒理学常用指标,指能导致一半的实验对象死亡)大约为每千克体重3克,和食盐相当。大剂量喂食大鼠、兔、狗也未观察到明显的中毒现象。三聚氰胺进入体内后似乎不能被代谢,而是从尿液中原样排出,但是,动物实验也表明,长期喂食三聚氰胺能出现以三聚氰胺为主要成分的肾结石、膀胱结石,并诱发膀胱癌。2007年,从中国出口到美国的宠物食品导致许多宠物肾衰竭死亡,调查表明可能是因为宠物食品中混入了三聚氰胺导致的。那么三聚氰胺是否也会对人有同样的毒性?我们无法拿人体做试验,而即使患肾结石的人曾经服用过偷加了三聚氰胺的食物,也很难确定三聚氰胺就是罪魁祸首,除非患者的食物来源很单一,例如只吃配方奶粉的婴儿——没想到还真有人敢拿婴儿来做试验证明了它能吃死人! 有人认为既然蛋白质检测法的缺陷导致了致命的造假,还不如干脆取消蛋白质检测,默许牛奶兑水得了。其实凯氏定氮法的缺陷并不难弥补,只要多一道步骤即可:先用三氯乙酸处理样品。三氯乙酸能让蛋白质形成沉淀,过滤后,分别测定沉淀和滤液中的氮含量,就可以知道蛋白质的真正含量和冒充蛋白质的氮含量。这是生物化学的常识,也早成为检测牛奶氮含量的国际标准(ISO 8968)。“蛋白精”骗局在国内出现已有一些年头,“三鹿奶粉”事件不过是把这一“行业秘密”摆在了公众面前。只有改进国家标准,堵住漏洞,才能挽回人们对国产乳业的信心。2008.9.14(《中国青年报》2008.9.17)转自方舟子博客

  • 【原创大赛】盐酸芬戈莫德在大鼠体内代谢的尿液及胆汁样品分析

    【原创大赛】盐酸芬戈莫德在大鼠体内代谢的尿液及胆汁样品分析

    盐酸芬戈莫德在大鼠体内代谢的尿液及胆汁样品分析芬戈莫德最初是由冬虫夏草(子囊菌亚门赤僵菌)培养液中提取的抗生素成分经化学修饰后合成的免疫抑制剂。药物及实验动物:盐酸芬戈莫德为本所研制,实验用大鼠为Wistar雄性大鼠,6-8周龄,体重范围约200-250g/只,本所实验中心提供;大鼠代谢笼为苏州动物实验仪器厂产品。色谱条件色谱柱:Acquity BEH C18 (100mm×2.1mm,1.7μm)流动相:A:水(0.05%TFA)B:乙腈(0.05%TFA)质谱条件结果分析:通过比较大鼠灌胃盐酸芬戈莫德溶液后收集的尿液样品、空白尿液样品及分到的代谢产物的高分辨质谱和多级质谱数据,在给药后的尿液中共鉴定出了8个代谢产物(如下图)所有代谢产物的高分辨质谱数据的准确度均小于1PPm。通过比较大鼠灌胃盐酸芬戈莫德溶液后收集的胆汁样品、空白胆汁样品及分到的代谢产物的高分辨质谱和多级质谱数据,在给药后的胆汁中共推测出了4个代谢产物(如下图)。所有代谢产物的高分辨质谱数据的准确度均小于1PPm。结果与讨论:经过对于给药后大鼠尿液及胆汁样品分析,初步推测盐酸芬戈莫德在大鼠体内的代谢产物有8种。

  • 【原创】粗蛋白测量方法

    什么是粗蛋白, 粗蛋白跟蛋白质又有什么区别,如何测量饲料中粗蛋白的含量,粗蛋白的含量高是不是一定代表着蛋白质的含量高。我想,当你看到这个题目时,肯定会联想到这一连串的问题中的其中几个。那么接下来,我就来详细介绍下粗蛋白的概念、粗蛋白测量和其他关于饲料中粗蛋白含量的问题。粗蛋白概念:粗蛋白不仅包括蛋白质这一物质,它涵盖的范围更广,包括含氮的全部物质。粗蛋白含量:下面我介绍几种常见物质的粗蛋白含量,仅供大家参考。薏苡仁 粗蛋白含量:13%-14%棉粕 粗蛋白含量:可达40%以上农大白早糯玉米 粗蛋白含量:3.41%蠡玉168 粗蛋白含量:9.63%台湾大青枣 粗蛋白含量:0.86%上文介绍了几种农产品或水果的粗蛋白含量情况,如果需要更多的资料,大家可自己查阅。粗蛋白测定:方法一:最简便也是最快键的方法,就是用蛋白质测定仪(参见www.top17.net/product/993.html)来测量。本标准参照采用ISO 5983—1979 《动物饲料──氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。 1 主题内容与适用范围  本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。  本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。2 引用标准  GB 601 化学试剂 滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备3 原理  凯氏法测定试样中的含氮量,即在催化剂作用下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出氮含量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。4 试剂4.1 硫酸(GB 625):化学纯,含量为98%,无氮。4.2 混合催化剂:0.4g硫酸铜,5个结晶水(GB 665),6g硫酸钾(HG 3—920)或硫酸钠(HG 3—908),均为化学纯,磨碎混匀。4.3 氢氧化钠(GB 629):化学纯,40%水溶液(m/V)。4.4 硼酸(GB 628):化学纯,2%水溶液(m/V)。4.5 混合指示剂:甲基红(HG 3—958)0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿(HG 3—1220)0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存期为三个月。4.6 盐酸标准溶液:邻苯二甲酸氢钾法标定,按GB 601制备。4.6.1 盐酸标准溶液:c(HCl)=0.1mol/L。8.3mL盐酸(GB 622,分析纯),注入 1 000mL蒸馏水中。4.6.2 盐酸标准溶液:c(HCl)=0.02mol/L。1.67mL盐酸(GB 622,分析纯),注入1 000mL蒸馏水中。4.7 蔗糖(HG 3—1001):分析纯。4.8 硫酸铵(GB 1396):分析纯,干燥。4.9 硼酸吸收液:1%硼酸水溶液1 000mL,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL,0.1%甲基红乙醇溶液7mL,4%氢氧化钠水溶液0.5mL,混合,置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。5 仪器设备5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。5.2 分样筛:孔径0.45mm(40目)。5.3 分析天平:感量0.0001g。5.4 消煮炉或电炉。5.5 滴定管:酸式,10、25mL。5.6 凯氏烧瓶:250mL。5.7 凯氏蒸馏装置:常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。5.8 锥形瓶:150、250mL。5.9 容量瓶:100mL。5.10 消煮管:250mL。5.11 定氮仪:以凯氏原理制造的各类型半自动,全自动蛋白质测定仪。6 试样的选取和制备  选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g,粉碎后全部通过40目筛,装于密封容器中,防止试样成分的变化。7 分析步骤7.1 仲裁法7.1.1 试样的消煮  称取试样0.5~1g(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,放入凯氏烧瓶(5.6)中,加入6.4g混合催化剂(4.2),与试样混合均匀,再加入12mL硫酸(4.1)和2粒玻璃珠,将 凯氏烧瓶(5.6)置于电炉(5.4)上加热,开始小火,待样品焦化,泡沫消失后,再加强火力 (360~410℃)直至呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,至少2h。7.1.2 氨的蒸馏(蒸馏步骤的检验见附录A)7.1.2.1 常量蒸馏法  将试样消煮液(7.1.1)冷却,加入60~100mL蒸馏水,摇匀,冷却。将蒸馏装置(5.7)的冷凝管末端浸入装有25mL硼酸(4.4)吸收液和2滴混合指示剂(4.5)的锥形瓶内。然后小心地向凯氏烧瓶(5.6)中加入50mL氢氧化钠溶液(4.3),轻轻摇动凯氏烧瓶(5.6),使溶液混匀后再加热蒸馏,直至流出液体积为100mL。降下锥形瓶,使冷凝管末端离开液面,继续蒸馏1~2min,并用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均需流入锥形瓶内,然后停止蒸馏。7.1.2.2 半微量蒸馏法  将试样消煮液(7.1.1)冷却,加入20mL蒸馏水,转入100mL容量瓶中,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,做为试样分解液。将半微量蒸馏装置(5.7)的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸(4.4)吸收液和2滴混合指示剂(4.5)的锥形瓶(5.8)内。蒸汽发生器 (5.7)的水中应加入甲基红指示剂数滴,硫酸数滴,在蒸馏过程中保持此液为橙红色,否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10~20mL注入蒸馏装置(5.7)的反应室中,用少量蒸馏水冲洗进样入口,塞好入口玻璃塞,再加10mL氢氧化钠溶液(4.3),小心提起玻璃塞使之流入反应室,将玻璃塞塞好,且在入口处加水密封,防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶(5.8)使冷凝管末端离开吸收液面,再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均流入锥形瓶内,然后停止蒸馏。  注:7.1.2.1和7.1.2.2蒸馏法测定结果相近,可任选一种。7.1.2.3 蒸馏步骤的检验  精确称取0.2g硫酸铵(4.8),代替试样,按7.1.2或7.2.2步骤进行操作,测得硫酸铵含氮量为21.19±0.2%,否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。 7.1.3 滴定  用7.1.2.1或7.1.2.2法蒸馏后的吸收液立即用0.1mol/L(4.6.1)或0.02mol/L(4.6.2)盐酸标准溶液滴定,溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。7.2 推荐法7.2.1 试样的消煮  称取0.5~1g试样(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,放入消化管中,加2片消化片(仪器自备)或6.4g混合催化剂(4.2),12mL硫酸(4.1),于420 ℃下在消煮炉上消化1h。取出放凉后加入30mL蒸馏水。7.2.2 氨的蒸馏  采用全自动定氮仪(5.11)时,按仪器本身常量程序进行测定。  采用半自动定氮仪(5.11)时,将带消化液的管子插在蒸馏装置上,以25mL硼酸(4.4)为吸收液,加入2滴混合指示剂(4.5),蒸馏装置(5.7)的冷凝管末端要浸入装有吸收液的锥形瓶内,然后向消煮管中加入50mL氢氧化钠溶液(4.3)进行蒸馏。蒸馏时间以吸收液体积达到100mL时为宜。降下锥形瓶,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均需流入锥形瓶内。7.2.3 滴定  用0.1mol/L的标准盐酸溶液(4.6.1)滴定吸收液,溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。8 空白测定  称取蔗糖0.5g,代替试样,按第7章进行空白测定,消耗0.1mol/L盐酸标准溶液(4.6.1)的体积不得超过0.2mL。消耗0.02mol/L盐酸标准溶液(4.6.2)体积不得超过0.3mL。9 分析结果的表述9.1 计算见下式:粗蛋白质(%)=(V2-V1)• c×0.0140×6.25/(m×V'/V) ×100 式中:V2── 滴定试样时所需标准酸溶液体积,mL; V1── 滴定空白时所需标准酸溶液体积,mL; c── 盐酸标准溶液浓度,mol/L; m── 试样质量,g; V── 试样分解液总体积,mL; V── 试样分解液蒸馏用体积,mL; 0.0140── 与1.00mL盐酸标准溶液〔c(HCl)=1.000mol/L〕相当的、以克表示的氮的质量。 6.25── 氮换算成蛋白质的平均系数。 9.2 重复性  每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果。  当粗蛋白质含量在25%以上时,允许相对偏差为1%。  当粗蛋白含量在10%~25%之间时,允许相对偏差为2%。  当粗蛋白质含量在10%以下时,允许相对偏差为3%。

  • 尿液分析仪在临床应用中的质量控制简要概述

    尿液质量控制的一般情况在常规试验中,虽然尿液分析仪的使用一般不受人为因素的影响,但尿液分析准确与否却受许多因素的影响。这些影响因素可以出现在分析前、中、后三个环节。分析前的质量控制(简称质控)主要包括样品的标签、收集样吕使用的容器和样品收集的时间、尿标本新鲜程度等。一般均应在取样后2小时内完成检测,否则可影响模块上所有检查项目结果的准确性。分析后的质控主要包括参考值范围的认可,判定试验结果是否受药物的干扰和病理物质的影响,报告单结果的书写和报告单回报时间等方面。分格中的质控主要包括化妆品和试带条的准确度、试带条的效期、仪器的校正、仪器操作正确程度和尿液标本中影响因素及处理等方面。

  • [推荐]蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用zz

    褚福亮,王福生, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室 北京市 100039项目负责人 王福生, 100039 ,北京市丰台路26号, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室. fswang@public.bta.net.cn电话:010-66933332 传真:010-63831870收稿日期 2002-08-15 接受日期 2002-09-03摘要新近广泛应用蛋白质芯片(ProteinChipâ Array)系统成功鉴定出了一些重要疾病(如肿瘤和危害性较大的传染病)新的、特异性的生物标记(biomarkers),后者不仅在生物医学的基础方面具有重要的科学价值,而且在临床疾病的诊断、治疗和预防发挥重要的指导作用,显示了良好的发展前景.本文就表面增强的激光解析电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.此外,我们就蛋白质谱分析技术在病毒性肝炎、肝硬化和肝癌等一系列肝病方面的应用策略和前景进行了分析.褚福亮,王福生. 蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用.世界华人消化杂志 2002 10(12):1431-14350 引言人类基因组计划已经进入后基因组时代-即功能基因组时代[1],作为基因功能的直接体现者-蛋白质,及其之间的相互作用越来越引起基础和临床科学家们的关注[2-6] .因为要彻底了解生命的本质,只把基因测出来还是不够的,还必须要了解其在生物生长、发育、衰老和整个生命过程中的功能、不同蛋白质之间的相互作用以及他们与疾病发生、发展和转化的规律[7-14] .正因为如此,有关上述问题的蛋白质组学研究成了今天生命科学最重要的焦点之一[15] .为了阐明蛋白质在上述生命现象中的作用和相关机制,人们设计了许多新的方法技术,如:二维电泳、质谱分析、微距阵列、酵母双杂交和噬菌体展示等,这些方法在一些特定的情况下,虽然显示出了他们各自不同的优点,但是同样也存在着较大的局限性,难以开展大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质等方面的分析,因而设计更全面、同时研究多种蛋白质相互作用的技术,在功能基因组和蛋白组学的研究中建立一个更有效的技术平台,成为本领域中优先关注的问题[16] .近来,美国Ciphergen(赛弗吉)公司研制的ProteinChipâ Array的仪器,并建立了一种新的蛋白质飞行质谱-表面增强的激光解析离子化-飞行时间-质谱(surface-enhanced laser desorption/inionation-time of flight-mass spectra, SELDI-TOF-MS),已取得可喜的进展,筛选出了许多与疾病相关的新型生物标志,不仅为临床疾病的诊断和治疗等提供了新的选择,而且在基础科学、新药研制和疾病预防等方面具有广泛的应用前景[16-18] .本文就SELDI-TOF-MS相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.1 ProteinChipâ Array系统和SELDI-TOF-MS的特点1.1 蛋白质芯片系统的组成和原理 蛋白质芯片系统由三部分组成:蛋白质芯片、芯片阅读器和芯片软件.供研究用芯片上有6-10芯池,不同的芯片表面上的化学物质不同,芯片表面分为两大类:一类为化学类表面,包括经典的色谱分析表面,如:结合普通蛋白质的正相表面,用于反相捕获的疏水表面,阴阳离子交换表面和捕获金属结合蛋白的静态金属亲合捕获表面;另一类称为生物类,特定的蛋白质共价结合于预先活化的表面阵列,可以用来研究传统的抗体一抗原反应,DNA和蛋白质作用,受体、配体作用和其他的一些分子之间的相互作用[19] . 根据检测目的不同,可以选用不同的芯片,或者自己设计芯片.将样本和对照点到芯池上以后,经过一段时间的结合反应,用缓冲液或水洗去一些不结合的非特异分子,再加上能量吸收分子(energy absorbing molelule,EAM)溶液,使样本固定在芯片表面.当溶液干燥后,一个含有分析物和大量能量吸收分子“晶体”就形成了.能量吸收分子对于电离来说非常重要.经过以上步骤,就可经把芯片放到芯片阅读器中进行质谱分析. 在阅读器的固定激光束下,芯片上、下移动,使样本上每一个特定点都被“读”到.激光束的每一次闪光释放的能量都聚集在该区一个非常小的点上(focused laser beam,聚焦激光束).这样,每个区都含有丰富的,可寻址(addressable)的位置.蛋白质芯片处理软件精确控制激光寻读过程.当样本受到激发,就开始电离和解除吸附.不同质量的带电离子在电场中飞行的时间长短不同,计算检测到的不同时间,就可以得出质量电荷比,把他输入电脑,形成图像[19].Ball et al [20]采用一种称为人工神经网络(artifical neural network,ANN)的算法处理出现的成千上万的峰,鉴定出三个分子量为13 454、13 457和14 278的生物标记分子,使疾病预测率达到97.1 %.1.2 ProteinChipâ Array芯片和SELDI-TOF-MS的特点 新型蛋白芯片与以往的蛋白芯片不同之处:SELDI-TOF-MS,他是在MALDI(matrix-assisted laser desorption/inionation)[21,22]基础上,改进后实行表面增强的飞行质谱.SELDI-TOF-MS优于MALDI-TOF表现为他不会破坏蛋白质,或使样本与可溶的基质共结晶来产生质谱信号.对SELDI-TOF来说,可以直接将血清、尿液、组织抽取物等不需处理直接点样检测[40] 由于一部分非特异结合的分析物被洗去,因而出现的质峰非常一致,有利于后期分析[23,24] . 与二维电泳相比:二维电泳分析蛋白质的分子量在30 KDa以上时电泳图谱较清楚,对在组织抽提物中占很大比例的低丰度的蛋白质不能被检出;其次,二维电泳胶上的蛋白质斑点很大一部分包含一种以上的蛋白质;而且,二维电泳耗时长,工作量大,对象染色转移等技术要求高,不能完全实现自动化.而SELDI-TOF在200 Da-500 KDa区间都可以给出很好的质谱,对一个样本的分析在几十分钟内就可以完成[19],处理的信息量远远大于二维电泳;对于低丰度物质,即使浓度仅attomole(10-18)的分子,只要与表面探针结合,就可以检测到,这也是二维电泳所不具备的[24,25] . 对于微距阵蛋白芯片来说,需要一种不破坏折叠的蛋白质构象的固定技术,再与另外的蛋白质反应,经检测莹光来观察蛋白质之间的作用[26] .而基于SELDI-TOF-MS的ProteinChip分析蛋白质不需溶解、不需染色、廉价、针对性强. 因而蛋白质芯片仪具有以下优势:(1)可直接使用粗样本,如:血清、尿液、细胞抽提物等[27] .(2)使大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质成为可能;(3)他不仅可发现一种蛋白质或生物标记分子,而且还可以发现不同的多种方式的组合蛋白质谱,可能与某种疾病有关[28] (4)推动基因组学发展,验证基因组学方面的变化,基于蛋白质特点发现新的基因.可以推测疾病状态下,基因启动何以与正常状态下不同,受到那些因素的影响,从而跟踪基因的变化[2,14,15] . 其存在的问题:对于不同的样本,根据检测的目标采取或者设计几种芯片,理论上可以把所有的相同性质蛋白质捕获,但是实际上仍有少量的分子没与表面探针结合.使用SELDI-TOF-MS,仅能给出蛋白质的分子量,不能给出C端、N端的序列,也没法知道蛋白质的构型,因此需要将蛋白质充分纯化后,用蛋白酶消化芯片上的蛋白质,分析肽段,再用生物信息学方法鉴定蛋白质序列[18,24] .另外,在国内,该芯片费用较高,分析质谱需要大量后续工作支持.

  • 尿液三氯生配制基质标线

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]小白,做尿液中三氯生检测,想用尿液加标然后按照前处理方法处理后做基质标曲 尿液需要选择低于检出限的尿液样本吗,还是选很多尿混合后加标

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