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各位战友,你们在使用凝胶柱的时候是否配了保护柱呢?大家都说说吧。
就我所知的内容进行简单的介绍:目前我所了解的凝胶色谱柱主要都是进口的柱子,对国内的凝胶柱情况不是很了解。进口柱有:TSK, Agilent, Waters, PL 等。[b]色谱柱类型[/b]:我主要对油性 的色谱柱了解多一些。色谱柱覆盖范围(分子量)从100到107。(不同厂家可能会有不同。)标准样品一般为PS.[b]填料[/b]:凝胶柱的填料应该都是些低膨胀系数,高孔体积,高机械稳定性的刚性PS/DVB填料,了解不多欢迎大家补充。凝胶色谱柱信息一般包括:凝胶柱类型,孔径(pore size),分子量范围, 柱子规格和编号。柱[b]类型[/b]又有混合柱与精细柱之分。[b]混合柱[/b]一根柱可以覆盖所有的分子量范围(也有人称之为通柱),[b]精细柱[/b]一般需要几根色谱柱串联,且分子量范围要相互重叠。因此色谱柱的配置会有不同的组合。色谱柱的串联方式一般按照pore size 的不同从大到小连接。保护柱是位于分析柱之前,其填料规格等与分析柱相同,当样品中含有对色谱柱有害的物质时可以起到保护分析柱的作用。另一种为柱前保护,是一种过滤头。[b]使用注意事项[/b]:色谱柱在使用过程中主要应该注意的是:1、每根色谱柱都有一定的压力范围(说明书有说明),一般要在合适的压力下进行分析使用。2、色谱柱在制作过程中是在一定的压力下按一定的方向添装 的,因此要求在使用时要按照规定的方向进行连接。如果不小心装反了也不用着急,一般没有超压使用应该影响不是很大。但如果一直使用了很长时间如半年或1-2年,建议你就一直这样使用下去。3、分析样品和流动相一定要过滤干净,不要让对柱有害的物质通过色谱柱。4、增加一根保护柱或柱前保护对分析柱是有好处的。5、色谱柱能不能反冲,在第2中提到了一点,一般咨询厂家时都会告诉你不能反冲,主要是担心反冲会使柱中的填料松散,那样整根柱子就报废了。这一点应该很好理解,就是在一定压力一定方向将填料填充压紧,如果反向冲操作不当很容易就会使原来压紧的填料松散开,这是无法弥补的损坏。但在具体使用中,就我所知可以在压力低一些,也就是流量小一些的条件下进行反冲,只要没有影响到柱内的填料,将堵塞的物质冲出可以有效降低系统压力,改善柱效。[b]应用[/b]:凝胶色谱柱主要进行大分子样品分子量与分子量分布的检测,如果样品分子量差异较大,应该也可以进行分离。这类样品可以作为宽标的标准样品进行标准曲线的建立。另外,凝胶色谱柱检测的样品有油性的高分子物质,如树脂类等,还有水溶性的高分子物质如糖类等。对于不同厂家的色谱柱要说好坏之分,我认为和以上很多内容都有关系,样品是否干净,流动相是否干净,人员有没有误操作,有没有保护柱,每天工作量大小等很多影响因素。总体来说应该差不多。
是这样,我们有一根菲罗门的凝胶柱,型号是PolySep-GFC-P3000的,一直用0.05%的叠氮钠保存,之前询问过应用工程师要多久换一次保护液,她说几个月吧,这个回答挺模糊的,我一直是每3个月换一次,现在发现有点麻烦,主要是去别人那里借叠氮钠麻烦,约仪器也麻烦,所以恳请熟悉凝胶柱的老师指教一般要多久换一次比较合适呢?谢谢!