固相萃取做有机氯农药的回收率 空白是指进样为纯水吗?为什么空白里也能检测到我的目标物质,是超纯水里可能也含有吗?求前辈指导!谢谢
[color=#DC143C]亚临界水萃取是一种较新的不使用或少使用有机溶剂的绿色萃取技术,愈来愈受到环境工作者重视。我下面我发一下相关资料,希望大家就相关内容及在农残检测及前处理中的应用,以及一些想法踊跃跟帖进行讨论![/color] 亚临界水萃取技术与传统的样品预处理方法和一些新的样品预处理技术(如微波辅助萃取)相比,SCWE可以不使用有机溶剂,对环境造成的污染较小,是一种绿色的样品预处理技术。SCWE在萃取能力、回收率、精密度等方面具有相当的可靠性。方法具有较高的选择性分离预富集某些有机污染物(如多环芳烃等)的特点。 除传统的液-液萃取、索氏提取之外,目前广泛采用的样品预处理技术还有超声波萃取(Ultrasonication extraction,USE) 、微波辅助萃取(Mirowave-assisted extraction,MAE)、加压液相萃取(Pressurized liquid extraction,PLE)、加速溶剂萃取(Accelerated solvent extraction,ASE)、超临界流体萃取(Supercritical fluid extraction,SFE)和固相微萃取(Solid-phase microextraction,SPME)等。 但是事实上亚临界水萃取在刚被发现的时候并不被受到重视,理由大抵是操作条件苛刻、仪器要求高等因素所致。而近年来这些问题都有良好的解决方法,再加上绿色化学这一概念的普遍化,人们才开始注意起这项萃取技术。 亚临界水也称为高温水、超加热水、高压热水或热液态水,是指在一定压力下,将水加热到100 ℃以上临界温度以下的高温,水体仍然保持在液体状态。通过对亚临界水温度和压力的控制可以改变水的极性、表面张力和粘度。此时,亚临界水对有机物的溶解能力会大大增加。Toshio Yamaguchi研究了亚临界、超临界流体的结构,指出这两种流体物理、化学特性的改变,主要与流体微观结构的氢键、离子水合、离子缔合、簇状结构的变化有关,随着温度的增加,亚临界水的氢键被打开或减弱了。从环境样品(如水体、底泥、土壤)和植物、食物等复杂基体中提取某些化合物组分时,可以采用亚临界水作为萃取溶剂,萃取所用的水要求是高纯水(HPLC级),萃取前用氮气驱除水中溶解氧,以避免有机物在亚临界水中被氧化。不同物质的介电常数不同,适当改变亚临界水的温度和压力,可以改变其萃取能力,并可应用于某些有机物的选择性萃取,使水的极性接近于样品中的待测组分,从而能被亚临界水萃取。 与该项技术相近的是临界二氧化碳萃取,该技术在一定程度上比亚临界水萃取更具有应用价值,应为萃取液为二氧化碳,它可以在常温常压下变为气体从而离开体系。因此,该项技术目前也是一个热门的课题。这些技术广泛应用于空气监测,土壤检测,以及食品等方面。
做了大概半年的固相微萃取,其间经历种种问题,想过放弃,但是,眼看问题慢慢的在解决,情况在慢慢的变好,但是,还是有些问题,让人不知道从何入手解决,就是空白干扰的问题:萃取头为自制,气相色谱为安捷伦的7890空白干扰的问题,无非是以下几个原因1.水的问题,楼主用的是实验室里国产纯水机做的超纯水(可能质量上比不上MIQ的),也就是去离子水,顾名思义,所谓去离子水,就是去了离子,但是,水中的有机物恐怕除的不是那么干净,如果做萃取的时候,加入的去离子水中的有机物,按说也会被富集到萃取头上,难道真的要把去离子水先用碱性的高锰酸钾处理吗??2.隔垫干扰,楼主用的丁基橡胶的隔垫,感觉有时候把进样针插入隔垫,然后再到进样口解析都会有龟峰出来3,。进样垫的问题,进样垫是不是也会引起鬼峰呢,每次插进去 时候都会有些碎屑的。4.瓶子如何洗??如何洗得干净,无残留呢5.加入的氯化钠是不是需要先在300度烘下,把吸附的有机物先烘走呢
求ETHOS E微波萃取仪的操作规程?求MILLIPORE Q超纯水的操作规程?请各位大虾帮帮忙啊?仪器还没到,但是要写操作规程啊?
我公司正在调试二甲基亚砜脱水精馏塔,现需一些关于这方面的资料。请有这方面经验的达人给予指导。帮忙介绍一下你们的工艺参数的设置以及时如何操作。我在google上收到如下的文献。请高手帮忙找一下关于二甲基亚砜精馏的文献(如下所示),不胜感谢。《应用间歇真空精馏技术回收高纯度二甲基亚砜的研究》
做的危害物检测。我的目标物色谱图分离不开。而且后面跟着一个很大的杂质峰,杂质峰很大。我发现样品含盐越多,杂质峰越大,我的目标物峰越分不开。我的前处理是酸水解,1ml氮吹,用纯水复溶,过mcx萃取小柱,mcx萃取小柱采用甲醇和水活化,水和甲醇淋洗,5%氨化甲醇洗脱。请问是否是里面的盐杂质被固相萃取洗脱了呢?我看别的文献有的采用0.1mol/l盐酸活化和淋洗,而不是采用纯水。请问盐对mcx固相萃取有影响吗
做了大概半年的固相微萃取,其间经历种种问题,想过放弃,但是,眼看问题慢慢的在解决,情况在慢慢的变好,但是,还是有些问题,让人不知道从何入手解决,就是空白干扰的问题:萃取头为自制,气相色谱为安捷伦的7890空白干扰的问题,无非是以下几个原因1.水的问题,楼主用的是实验室里国产纯水机做的超纯水(可能质量上比不上MIQ的),也就是去离子水,顾名思义,所谓去离子水,就是去了离子,但是,水中的有机物恐怕除的不是那么干净,如果做萃取的时候,加入的去离子水中的有机物,按说也会被富集到萃取头上,难道真的要把去离子水先用碱性的高锰酸钾处理吗??2.隔垫干扰,楼主用的丁基橡胶的隔垫,感觉有时候把进样针插入隔垫,然后再到进样口解析都会有龟峰出来3,。进样垫的问题,进样垫是不是也会引起鬼峰呢,每次插进去 时候都会有些碎屑的。4.瓶子如何洗??如何洗得干净,无残留呢5.加入的氯化钠是不是需要先在300度烘下,把吸附的有机物先烘走呢
[align=center]固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗残留量及条件优化[/align][align=left]1、前言 克伦特罗(Clenbuterol)既不是兽药,也不属于添加剂,而是一种激素类物质,俗称“瘦肉精”,该物质能促进动物体内脂肪分解代谢,增加蛋白质合成,提高瘦肉率,然而人体食用高残留量的内脏组织或者累计摄入量超过一定值时便可能引发食物中毒事件。1997 年我国明令禁止在畜牧行业生产、销售和使用克伦特罗,但是非法使用克伦特罗的事件仍时有发生。 目前,现行有效的标准中测定克伦特罗的方法有酶联免疫法、胶体金免疫层析法、液相色谱法和质谱法,针对不同的样品基质和实验室条件可以选择合适的测定方法。国家标准GB/T 22944-2008中采用液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中克伦特罗的残留量,但是实验室没有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url],关于高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗的文献也不多,于是尝试建立固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗的方法并对测试条件进行优化。2、实验方法2.1 仪器和试剂 Waters e2695液相色谱仪(主要包括2998光电二极管矩阵检测器,柱温箱,自动进样器,自动脱气四元梯度泵等);微型漩涡混合仪;12位固相萃取真空装置;12位干浴氮吹仪; Millpore超纯水系统。 甲醇中盐酸克伦特罗标准溶液(250μg/mL,坛墨质检);甲醇、乙酸乙酯和乙酸为色谱纯;乙酸钠、乙酸铵、磷酸二氢钠、氨水和磷酸为分析纯;实验用水为Millpore超纯水系统制得,18MΩ• cm,25 ℃。2.2色谱条件 色谱柱:CNW Athena C18-WP(250mm×4.6mm ,5μm) 流动相:甲醇:磷酸二氢钠(0.02mol/L)=40:60 流速:1.0mL/min 进样体积:20μL 柱温:30℃ 检测波长:210nm3 结果与讨论3.1 检测波长的确定 采用Waters 2998二级管阵列检测器的3D扫描功能,在波长190~400nm范围内对高浓度的克伦特罗标准工作溶液进行测定,并在克伦特罗出峰位置提取光谱图,见下图,从图中可以看出,克伦特罗的最大吸收波长在210nm附近,因此选择210nm作为检测波长,此时克伦特罗的响应值最大。[/align][align=center][img=,690,345]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301354_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.2 流动相的选择3.2.1甲醇-水为流动相3.2.1.1 流动相pH值对测定结果的影响 首先参考GB/T 5009.192-2003第二法中的色谱条件,以甲醇-水为流动相进行测试,然而结果并不理想,克伦特罗标准溶液在此流动相下并未出峰,几番尝试后决定更换流动相。看到几个采用质谱测定的标准方法均在流动相中加入了酸,于是仍然以甲醇-水为流动相,往水中加入不同体积的磷酸溶液,考察pH值对克伦特罗测定结果的影响(甲醇:水=30:70),测定结果见下图。[/align][align=center][img=,583,845]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301356_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 从上述测定结果中可以发现,未调pH时色谱图中并没有明显的色谱峰,流动相中加入磷酸后克伦特罗在8min左右出峰;随着磷酸加入量的增加,其出峰时间提前并且峰高与峰面积也随着增加;当进一步提高流动相中磷酸含量时,克伦特罗的出峰时间逐渐延长,但是峰面积保持不变。这可能是由于克伦特罗呈弱酸性,在水溶液中以离子形态存在,降低了在C18色谱柱上的保留行为,而磷酸的加入能够抑制克伦特罗的电离,使其以分子的形态存在,增加克伦特罗在C18色谱柱上的保留,并改善峰形。当pH=3.5时,克伦特罗呈部分解离的状态,因此虽然能够出峰,但是峰面积偏小,而当pH=3.0时,克伦特罗则全部以分子形态存在,峰面积保持不变。随着磷酸加入量的增加,克伦特罗的出峰时间延长,峰展宽变大,峰高变小,方法的灵敏度也随着降低。3.2.1.2 流动相比例对测定结果的影响 流动相中有机相比例对高效液相色谱的分离行为有很大影响,调节流动相比例可以改善待测组分的峰形、出峰时间以及与杂质组分的分离度,因此实验中考察了有机相比例对克伦特罗测定结果的影响(pH=2.8),测定结果见下图。从图中可以看出,提高流动相中甲醇含量对克伦特罗的出峰时间有很大的影响,当流动相中甲醇含量为20%时,克伦特罗的出峰时间为17min左右,而当流动相中甲醇含量为45%时,克伦特罗的出峰时间提前到3min左右,而且与溶剂峰重叠,不利于定性和定量分析。[/align][align=center][img=,578,826]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301359_02_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.2.1.3 方法重复性测试 根据上述测试结果,初步决定采用甲醇:水(pH=2.8)=30:70的流动相条件进行测试,然而在测试过程中发现,此流动相条件下克伦特罗的保留时间不稳定,随着进样次数的增加,保留时间不断前移,6针进样后克伦特罗保留时间的相对标准偏差(RSD)值为1.3%。产生保留时间漂移的原因可能有两种(1)色谱柱的性能下降,流动相中加了磷酸,色谱柱平衡所需的时间比较长(这是一根服役了很久的色谱柱);(2)此流动相条件的缓冲能力弱,在线混合以及样品的加入导致流动相的pH值发生变化,从而保留时间不稳定。于是修改流动相条件,pH值保持不变,将流动相中甲醇的比例由30%提高至40%,重新考察方法的重复性,实验结果见下图。实验表明,甲醇:水(pH=2.8)=40:60时方法具有较好的重复性,连续6针进样,克伦特罗保留时间的RSD值为0.1%。[/align][align=center][img=,589,419]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301401_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.2.2甲醇-磷酸盐为流动相 通过上述实验,初步确立了以甲醇-水为流动相测定克伦特罗的高效液相色谱条件,并对部分实验参数进行了优化,然而上述实验结果均是针对克伦特罗标准工作溶液进行的测定,样品成分单一,没有杂质干扰,因此不用考虑杂质与克伦特罗之间的分离度。色谱条件为甲醇:水(pH=2.8)=40:60时虽然解决了方法重复性的问题,但是从色谱图中可以看到,此时克伦特罗的出峰时间较早,仅需3.5min左右就能出峰,而且出峰时间早于溶剂峰,在实际样品分析中很容易受到杂质峰的影响,此方法是否适合测定蜂蜜中的克伦特罗残留量还需进一步验证。 在对蜂蜜样品测定验证之前,先尝试寻找是否有更合适的流动相。以甲醇-水为流动相进行测试时,磷酸的加入对克伦特罗的出峰影响较大,于是尝试改用甲醇-磷酸盐为流动相进行下一步测试。从流动相pH值、流动相比例和方法重复性3个方面对方法进行考察,磷酸盐选用0.02mol/L的磷酸二氢钠,通过磷酸调节流动相的pH值,实验结果见下图。实验表明,以甲醇-磷酸二氢钠(0.02mol/L)为流动相时,有机相比例对克伦特罗出峰时间也有很大的影响,pH值的影响较小,因此后续的实验中直接采用甲醇-磷酸二氢钠(0.02mol/L)为流动相,未对流动相的pH值进行调节。当甲醇:磷酸二氢钠(0.02mol/L)=40:60时,连续6针进样,克伦特罗保留时间的RSD值为0.1%,测试方法具有较好的重复性,同时,克伦特罗的出峰时间远离溶剂峰,可以减小样品中杂质组分对待测物质测定的干扰。[/align][align=center][img=,597,550]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301403_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.2.3甲醇-乙酸盐为流动相 在查阅文献的过程中发现,也有老师采用乙酸盐缓冲溶液对克伦特罗进行测定,于是决定试一下效果。同样,从流动相pH值、流动相比例和方法重复性3个方面对方法进行考察,乙酸盐选用0.02mol/L的乙酸铵,通过乙酸调节流动相的pH值,实验结果见下图。实验表明,采用甲醇-乙酸铵(0.02mol/L)为流动相时,有机相比例对克伦特罗出峰时间有很大的影响,pH值的影响较小,方法的重复性较好,但是此时基线噪音较大,峰高变小,影响方法的检出限。[/align][align=center][img=,581,588]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301405_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 通过上述实验,分别以甲醇-水、甲醇-磷酸盐和甲醇-乙酸盐为流动相,建立了高效液相色谱法测定克伦特罗的方法,并对部分实验条件进行了优化,在实验中发现了各自方法的优缺点,哪种方法更适合蜂蜜中克伦特罗的测定,还需用蜂蜜样品进行验证。3.3 样品前处理 蜂蜜中通常不含有克伦特罗,即使有,其残留值也很小,而且蜂蜜为半固态粘稠样品,无法直接进样测定,因此需要对蜂蜜样品进行前处理。前处理过程主要包含提取、富集、净化和浓缩4个步骤,此次实验蜂蜜中克伦特罗的提取方法参考GB/T 22944-2008:称取约2g蜂蜜样品于50mL离心管中,加入20mL乙酸钠缓冲溶液(0.2mol/L,pH=5.0),漩涡混匀,蜂蜜完全溶解后备用。 样品中克伦特罗残留量富集、净化的方法有很多种,本次实验分别参照标准GB/T5009.192-2003、SN/T1924-2007、SN/T1924-2011以及GB/T22944-2008,采用CNWBONDWCX(500mg,6mL)、CNWBOND SCX(500mg,6mL)、CNW Poly-Sery MCX(60mg,3mL)和CNW Poly-SeryHLB(500mg,6mL)固相萃取柱对蜂蜜中的克伦特罗残留量进行富集、净化,其中SN/T1924-2007标准已作废,但是标准中所涉及的富集净化方法也曾出现在上海安谱实验科技股份有限公司(以下简称上海安谱)的技术应用文章中,因此对此方法也做了尝试。同时,采用Oasis MCX(60mg,3mL)和OasisHLB(200mg,6mL)固相萃取柱对蜂蜜中的克伦特罗残留量进行富集、净化,简单比较了不同品牌固相萃取柱在净化效果、回收率等性能方面的差异。[/align][align=center][img=,578,358]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301407_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 固相萃取柱所用的填料不同,活化和净化方法也有所区别,具体实验方法如下: (1)WCX固相萃取柱 依次用5mL乙醇和5mL水活化固相萃取柱,将上述蜂蜜提取液全部转移至活化后的固相萃取柱中,分别用5mL水和5mL 乙醇淋洗固相萃取柱,弃去淋洗液,真空抽干2min,最后用10mL氨水-乙醇溶液(体积比2:98)进行洗脱,收集洗脱液。洗脱液在50℃下氮气吹干,准确加入1mL水溶解残渣,过0.22μm滤膜后,进样测定。 (2)SCX固相萃取柱 依次用5mL甲醇、5mL水和5mL0.03mol/L盐酸溶液活化固相萃取柱,将上述蜂蜜提取液全部转移至活化后的固相萃取柱中,分别用5mL水和5mL甲醇淋洗固相萃取柱,弃去淋洗液,真空抽干2min,最后用10mL氨水-甲醇溶液(体积比5:95)进行洗脱,收集洗脱液。洗脱液在50℃下氮气吹干,准确加入1mL水溶解残渣,过0.22μm滤膜后,进样测定。 (3)MCX固相萃取柱 依次用3mL甲醇、3mL水和3mL 0.1mol/L盐酸溶液活化固相萃取柱,将上述蜂蜜提取液全部转移至活化后的固相萃取柱中,分别用3mL 0.1mol/L盐酸溶液、3mL水和3mL50%甲醇淋洗固相萃取柱,弃去淋洗液,真空抽干2min,最后用5mL氨水-甲醇-乙酸乙酯溶液(体积比5:45:50)进行洗脱,收集洗脱液。洗脱液在50℃下氮气吹干,准确加入1mL水溶解残渣,过0.22μm滤膜后,进样测定。 (4)HLB固相萃取柱 依次用5mL甲醇和5mL水活化固相萃取柱,将上述蜂蜜提取液全部转移至活化后的固相萃取柱中,分别用5mL水和5mL甲醇淋洗固相萃取柱,弃去淋洗液,真空抽干2min,最后用10mL氨水-甲醇溶液(体积比5:95)进行洗脱,收集洗脱液。洗脱液在50℃下氮气吹干,准确加入1mL流动相溶解残渣,过0.22μm滤膜后,进样测定。[/align][align=center][img=,578,190]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301408_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.4 蜂蜜样品的测定3.4.1甲醇-水为流动相 以甲醇-水(pH=2.8)为流动相,测定固相萃取柱净化后的蜂蜜及蜂蜜加标样品,考察该色谱条件对蜂蜜中克伦特罗残留量测定的影响。 当甲醇:水(pH=2.8)=40:60时,测定结果见下图。从图中可以看出,蜂蜜样品提取后直接进样测定色谱图中,在克伦特罗保留时间处有一个很大的杂质峰,虽然该杂质峰经HLB固相萃取柱净化后消失,但是实际检测时该杂质峰对克伦特罗仍然存在隐患,如果净化不干净,就可能出现假阳性的结果,同时,在该流动相条件下,样品在2~6min内有许多杂质峰,影响克伦特罗与杂质组分之间的分离度。对比HLB与MCX固相萃取柱净化后测定的色谱图,在此色谱条件下,HLB的净化效果要优于MCX固相萃取柱,蜂蜜样品经HLB固相萃取柱净化后杂质峰明显减少,MCX固相萃取柱净化后仍有杂质组分会对克伦特罗的测定产生干扰。[/align][align=center][img=,581,863]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301411_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 改变流动相比例,测定蜂蜜加标样品经MCX固相萃取柱净化后的样品,改善克伦特罗与杂质间的分离度,实验结果见下图。从图中可以看出,当甲醇:水(pH2.8)=30:70时克伦特罗与杂质组分的分离度较差,不能实现基线分离;当甲醇:水(pH2.8)=20:80时,克伦特罗与杂质组分虽然能实现基线分离,而且附近没有杂峰干扰,但是此时克伦特罗的峰高变小,灵敏度变低,不利于低浓度克伦特罗残留量的检查。[/align][align=center][img=,584,295]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301413_02_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.4.2甲醇-乙酸铵为流动相 以甲醇-乙酸铵(0.02mol/L)为流动相,测定MCX固相萃取柱净化后的蜂蜜加标样品,考察该色谱条件对蜂蜜中克伦特罗残留量测定的影响,实验结果见下图。从图中可以看出,当流动相为甲醇:乙酸铵(0.02mol/L)=60:40时,克伦特罗的测定受到杂质组分的影响很大,克伦特罗出峰时基线较高,而且与杂质组分不能基线分离;当流动相为甲醇:乙酸铵(0.02mol/L)=40:60时,样品中克伦特罗的灵敏度明显降低。[/align][align=center][img=,586,354]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301414_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.4.3甲醇-磷酸二氢钠为流动相 以甲醇-磷酸二氢钠(0.02mol/L)为流动相,当甲醇:磷酸二氢钠(0.02mol/L)=40:60时,测定固相萃取柱净化后的蜂蜜及蜂蜜加标样品,考察该色谱条件对蜂蜜中克伦特罗残留量测定的影响,实验结果见下图。从图中可以看出,当甲醇:磷酸二氢钠(0.02mol/L)=40:60时,克伦特罗与样品中的杂质实现基线分离,其保留时间附近的干扰组分较少,灵敏度能够满足残留量检测的要求。同时,在此色谱条件下,蜂蜜加标样品只需经过简单的提取便能直接测定,给高残留值蜂蜜样品的测定提供了便捷的方法(直接提取进样时的加标量远高于采用固相萃取柱净化时的加标量)。结合上述实验,最终本实验选择采用甲醇-磷酸二氢钠(0.02mol/L)为流动相对蜂蜜中克伦特罗残留量进行测定。[/align][align=center][img=,578,594]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301416_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=center][img=,580,634]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301417_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 找到合适的流动相后,在该色谱条件下对固相萃取柱的净化效果进行考察。从上图可以看出,乙酸钠缓冲溶液提取后直接进样的色谱图中虽然也能检出克伦特罗,但是其加标量较大(约为固相萃取柱方法的20倍,该实验主要是为了考察杂质对待测物质的干扰),实际样品中克伦特罗的残留值远小于此次的加标量,因此实际样品测定时需要采用固相萃取柱对克伦特罗残留量进行富集、净化和浓缩。对比不同填料固相萃取柱对蜂蜜加标样品净化后测定的色谱图可以发现,以甲醇-磷酸二氢钠(0.02mol/L)为流动相时,CNWBOND SCX固相萃取柱净化后杂质组分的响应值依然很大,SN/T 1924-2007中采用了C18和SCX固相萃取柱串联的方法进行净化,而本实验仅采用了SCX固相萃取柱进行净化,这可能是导致杂质去除不完全的原因之一;采用其他几种固相萃取柱净化后,色谱图中杂质峰的响应值明显降低,其中采用WCX固相萃取柱净化后的色谱图中杂质少,基线比较平整。对比相同填料不同品牌固相萃取柱净化后的色谱图可以发现,两种品牌的固相萃取柱对杂质去除能力难分伯仲。3.5 标准曲线的绘制 准确吸取1.0mL盐酸克伦特罗标准溶液于25mL容量瓶中,用水稀释成浓度为10.0μg/mL的标准储备溶液。吸取适量体积克伦特罗标准储备溶液,用水稀释配成相应浓度的标准工作溶液,并按上述选定的色谱条件进行测定。以样品峰面积Y(mV)对质量浓度X(μg/mL)作图,得到线性回归方程Y=146893X+311,相关系数R2=0.9991,结果表明:克伦特罗含量在0.10~1.00μg/mL之间时,该方法呈现良好的线性关系。标准曲线见下图。[/align][align=center][img=,581,408]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301418_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]3.6 回收率的测定 称取约2g蜂蜜样品,共12份,往每份样品中加入0.50mL浓度为1.0μg/mL的克伦特罗标准工作溶液,样品经乙酸钠缓冲溶液提取后,分别采用上述6种固相萃取柱对样品进行净化,每种固相萃取柱做2平行,并以甲醇-磷酸二氢钠(0.02mol/L)为流动相进行测定,考察固相萃取柱的回收率,实验结果见下表。测定结果表明,6种固相萃取柱均具有较好的回收率,回收率大于85%,其中MCX和HLB固相萃取柱的回收率明显高于其他两种填料的固相萃取柱;实验中所使用的相同填料不同品牌的固相萃取柱回收率结果相近。[/align][align=center][img=,690,126]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301420_02_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]4、小结 (1)本实验建立了固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗的方法,分别以甲醇-水、甲醇-乙酸盐和甲醇-磷酸盐为流动相,考察了流动相对测定结果的影响。实验结果表明,以甲醇-水为流动相时,流动相对pH值的缓冲能力较弱,克伦特罗的保留时间发生漂移;以甲醇-乙酸盐为流动相时,基线噪音较大,方法灵敏度低;以甲醇-磷酸盐为流动相,方法重复性好,灵敏度较高。 (2)实验中参考不同的标准方法对蜂蜜样品进行前处理,考察了前处理方法对样品净化和回收率影响,同时比较了固相萃取柱性能和品牌对蜂蜜中克伦特罗残留量测定的影响。实验结果表明,固相萃取柱性能对蜂蜜中克伦特罗残留量的测定结果有很大的影响,4种不同填料的固相萃取柱中,MCX和HLB固相萃取柱的回收率较高,WCX和SCX固相萃取柱的回收率略低。 (3)实验中考察了WCX和SCX固相萃取柱的回收率较低的原因:WCX固相萃取柱在乙醇淋洗的过程中会有部分克伦特罗被淋洗下来,从而回收率降低;采用SCX固相萃取柱净化时,洗脱液的碱性需要足够强,否则洗脱不完全,但是提高洗脱液的碱性后,杂质也会一同被洗脱下来。 (4)通过此次实验可以发现,流动相条件和固相萃取柱的选择对样品测定具有很大的影响,不同的流动相其洗脱能力不一样,截止波长也会有差别,实验中以甲醇-乙酸铵为流动相时基线噪音明显大于其中两种流动相;同样是MCX净化后的样品,以甲醇-磷酸盐为流动相时测定得到的样品色谱图中杂质要少于其他两种流动相。 (5)液相色谱虽然对克伦特罗具有较高的响应,但是与质谱相比,质谱具有更高的响应,因此对于残留量很低的样品,还是需要用质谱进行验证,液相方法可以作为前期的筛查手段,[/align]
FHZHJSZISO0015 水质有机氮有机磷化合物的测定液/液萃取-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法F-HZ-HJ-SZ-ISO-015水质—有机氮有机磷化合物的测定—液/液萃取-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法1 适用范围本法适用于饮用水、地下水、地表水、废水中悬浮颗粒物含量小于0.05g/L 时有机氮、有机磷化合物的测定。有机氮、磷化合物包括莠去津、氰乙酰肼、metazachlor、乙基对硫磷、甲基对硫磷、喷达曼萨林、丙唑嗪、另丁津、西玛津、特丁津、氟乐灵、烯菌酮等。2 原理概要水样中的有机氮、磷化合物用二氯甲烷进行液/液萃取,浓缩后,萃取出的样品通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]色谱、利用氮、磷检测器分析。3 主要仪器和试剂3.1 仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url],分液漏斗,高速搅拌器,磁力搅拌棒,蒸馏装置,微升注射器,杂色玻璃器皿。3.2 主要试剂所用试剂,包括水的纯度都要达到对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中空白峰无明显干扰的程度。水要用纯化后的水,二氯甲烷萃取剂,溶解用溶剂(如丙酮或乙酸乙酯),无水硫酸钠。中和用溶液:1mol/L 氢氧化钠溶液,1mol/L 盐酸溶液。氮、磷化合物标准溶液。4 过程简述4.1 采样参照ISO 5667-1 和ISO 5667-2。用清洁的玻璃瓶采集水样,用棕色玻璃瓶保存,测试样品的pH 值,在采样后立即加入适量的中和用酸碱溶液调节pH 值至6~9。4.2 样品制备振摇采样瓶,倒出多余的水样,加入二氯甲烷,振摇10 分钟,转移到分液漏斗中萃取,重复萃取两次,收集萃取物,使之干燥。使用蒸馏装置将干燥过的萃取物浓缩。4.3 测试用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行测试,需用纯水做空白实验。5 准确度及精密度液/液萃取-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法用于废水中氮磷化合物的测定时,回收率为83%~100%。6 来源国际标准化组织,ISO 10695:2000(E)
[color=#444444]做水中甲苯的测定二硫化碳萃取[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法时遇到如下问题:[/color][color=#444444]取3、6、9、12、15 ul 的甲苯于纯水中定容,然后用移液管取100 mL 于分液漏斗中,加入优级纯盐酸(0/2滴/10滴/20滴 的l量都尝试过),之后加入5 mL的CS2,充分震荡3分钟,静置分层,倒掉水相,取CS2相的液体于2mL进样瓶,进样1.0 uL 于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url],背景20左右,甲苯的色谱峰高普遍很低,只有零点几或几的信号强度,其中9 uL 的标样的信号约为2。而如果直接取0.9 uL 的甲苯于5 mL 的CS2中直接测,甲苯的峰高有100+,相差近百倍!请问谁知道这是什么原因吗?怎么解决这个问题?谢谢![/color]
FHZHJSZISO0016 水质有机氮有机磷化合物的测定液/固萃取-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法F-HZ-HJ-SZ-ISO-016水质—有机氮、有机磷化合物的测定—液/固萃取-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法1 适用范围本法适用于地下水、地表水、饮用水中含量大于0.05µ g/L 的有机氮、有机磷化合物的测定。有机氮、磷化合物包括莠去津、氰乙酰肼、metazachlor、乙基对硫磷、甲基对硫磷、喷达曼萨林、丙唑嗪、另丁津、西玛津、特丁津、氟乐灵、烯菌酮等。2 原理概要水样中的化合物富集在反相RP-C18 材料上或其它吸附剂上,用溶剂洗脱,然后经过气相色谱用氮磷检测器测定。3 主要仪器和试剂3.1 仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url](同FHZHJSZISO015),玻璃或聚丙烯的萃取柱(内装RP-C18 或其它吸附剂),真空泵或压力装配,微升注射器,玻璃纤维滤纸,杂色玻璃器皿(同FHZHJSZISO015)。3.2 主要试剂所用试剂,包括水的纯度都要达到对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中空白峰无明显干扰的程度。水要用纯化后的水,RP-C18 或其它吸附剂,调节剂(如甲醇、丙酮),洗脱剂(如甲醇、丙酮),中和用溶液,氮、磷化合物标准溶液,惰性气体。4 过程简述4.1 采样参照ISO 5667-1 和ISO 5667-2。用清洁的玻璃瓶采集水样,用棕色玻璃瓶保存,测试样品的pH 值,在采样后立即加入适量的中和溶液调节pH 值至6~9。4.2 样品制备4.2.1 活化用溶剂洗萃取柱或玻璃柱中RP-C18 材料,溶剂体积为其体积的5 倍。再用其体积5 倍的水来洗,用湿的担体来富集。4.2.2 富集测定水的体积,使水样以小于1000mL/h 的流速流过担体。富集之后用惰性气体干燥圆筒,用溶剂洗脱RP-C18,将洗脱液和溶剂放入小的刻度瓶中,用溶剂加到刻度。4.3 测试用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行测试,需用纯水做空白实验。5 准确度及精密度多个实验室的液/固萃取-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法用于饮用水和原水的测试数据,重现性标准偏差0.0157~0.1368µ g/L,重现性变异系数20.6%~46.3%,重复性标准偏差0.0044~0.0264µ g/L,重复性变异系数7.2%~12.6%。6 来源国际标准化组织,ISO 10695:2000(E)
请教一个问题,一般C18液相色谱柱不能用纯水冲洗,因为会纯水冲洗会导致键合相塌陷。那么C18固相萃取柱为什么可以用纯水洗脱?C18固相萃取柱和C18液相色谱柱的填料不是相同的吗?
我们实验做的是水环境(农药废水、医药废水、化工废水)当中的苯系物、丙烯腈、硝基苯类化合物和氯苯类化合物,不萃取水样,直接过滤(0.45um滤膜)后进色谱柱有什么影响?会污染存管,色谱柱,杂质增多,还有什么影响?各位大侠用的是什么品牌的固相萃取装置?萃取效果如何?能否推荐一下?本人菜鸟一枚,急需指导。
煤气化废水萃取脱酚能够实施的关键在于先选择合适的萃取剂,从而再确定合理的废水脱酚工艺流程、有机物回收和萃取剂再生方法以及合适的萃取设备等。本章先对煤气化废水进行水质分析,以确定废水中污染物的种类、总酚浓度和挥发酚浓度等。根据煤气化废水水质的特点,针对性的选择几种脱酚效果较好的溶剂作为萃取剂,通过综合考虑它们的萃取脱酚的效果、溶剂回收能耗和溶剂的经济性等方面,选定一种合适溶剂作为煤气化废水的脱酚萃取剂。在确定了煤气化废水的脱酚萃取剂之后,本章将对萃取温度、pH值和萃取相比等影响萃取脱酚效果的因素进行研究,以确定最佳的萃取脱酚条件。最后本章研究了煤气化废水三级错流萃取脱酚的效果,为煤气化废水萃取脱酚工艺流程的设计提供参考。 实验试剂及仪器 实验试剂 本论文研究所用的化学药品和分析试剂如表2-1所示。实验时所用的水均为蒸馏水。表1 实验化学药品和分析试剂Table 1The experimental chemical and analytical reagents 试剂和药品名称 生产商或供应商 规格、纯度 注释 甲基叔丁基醚 国药集团化学试剂有限公司 化学纯 实验所用化学药品未经进一步提纯处理,其质量纯度用气相色谱归一化法确认。 苯酚 广州化学试剂厂 分析纯 对苯二酚 天津市科密欧化学试剂有限公司 分析纯 溴酸钾 汕头市光华化学厂 分析纯 碘酸钾 天津市元立化工有限公司 基准试剂 硫代硫酸钠 广州化学试剂厂 分析纯 溴化钾 广州化学试剂厂 分析纯 可溶性淀粉 宜兴市第二化学试剂厂 生化试剂 重铬酸钾 汕头市光华试剂厂 基准试剂 硫酸亚铁铵 广州化学试剂厂 分析纯 1,10-菲啰啉 广州化学试剂厂 分析纯 硫酸银 天津市科密欧化学试剂有限公司 分析纯 硫酸 广州市东红化工厂 98%分析纯 氢氧化钠 广州化学试剂厂 分析纯 实验仪器 本论文研究所用的实验仪器设备在表2-2中列出表2主要实验仪器Table 2The experimental apparatus and instruments 仪器设备名称 型号、规格 生产商或代理商 带恒温夹套的平衡釜 100 mI 自制 分析天平 FA2104N 上海精密科学仪器有限公司 pH酸度计 pHS-25 上海精密科学仪器有限公司 [
[color=#444444]想请教一个问题,在书上看到C18填料的液相色谱柱一般不能用纯水洗脱,说是因为硅胶上键合的C18键疏水,用纯水洗会造成色谱柱填料坍塌。[/color][color=#444444]但是在用C18填料的固相萃取柱时,却可以用纯水洗脱,如果C18液相色谱柱和C18固相萃取柱两者的填料是一样的,那么为什么C18固相萃取柱可以用纯水洗脱?[/color]
液相微萃取——高效液相色谱法 测定水稻中的吡虫啉 孙玉珍,罗明标,李建强,郭国龙,徐晶晶 (东华理工大学应用化学系,江西抚州344000)摘要:研究了基于中空纤维的动态三相液相微萃取(LPME),并首次将其应用到稻谷、稻叶、 田水和土壤中吡虫啉农药残留的快速分离富集。实验采用磷酸二氢钾作接受液,以高效液相色谱 (HPLC)为检测手段,系统地优化了LPME技术的有机溶剂、搅拌速率和萃取时间等条件。最佳 色谱条件为:SB-Phenyl C18(250 mm×4.6 mm,5μm)液相色谱柱,以甲醇–水–三乙胺 (80∶20∶1,v/v)为流动相,流速0.8 mL/min,270 nm波长下检测。得到方法的线性范围0.001~ 10μg/mL,最低检出限为1 ng/mL,加标回收率92.50%~110%,富集倍数19.2倍。结果表明该 方法是一种简单、快速、准确、环境友好的农药残留检测方法。关键词:吡虫啉;农药残留;中空纤维;前处理;液相微萃取中图分类号:TQ 450.2+63文献标识码:A文章编号:1671-5284(2008)06-0043-04吡虫啉(Imidacloprid)又名脒蚜胺,化学名称 1-(6-氯-3-吡啶基甲基)-N-硝基亚咪唑烷-2-基胺,系 具内吸、触杀、胃毒作用的硝基亚甲基类内吸杀虫 剂,是烟酸乙酰胆碱酯酶受体的作用体,干扰害虫 运动神经系统,使化学信号传递失灵,无交互抗性 问题,用于防治刺吸式口器害虫如蚜虫、飞虱、蓟 马、粉虱等 [1] 。吡虫啉的推荐用药量(有效成分)为 60~120 g/hm 2 ,易溶于乙腈和二氯甲烷中,化学结 构较稳定 [2] 。该农药会对人类和哺乳动物产生慢性 毒理效应 [3] 。本文采用三相液相微萃取技术,将水稻中吡虫啉的萃取、浓缩、净化简化于一步,极大 地缩短了吡虫啉测定的前处理步骤,并结合高效液 相色谱法检测了稻谷、稻叶、水和土壤中吡虫啉的 含量,方法简便、快速,净化效果很好。1实验部分1.1仪器设备Shimadzu LC–20AT岛津高效液相色谱仪,配 Shimadzu SPD–20A UV–VIS检测器和N2000色 谱工作站,SB–Phenyl C18(250 mm×4.6 mm,5μm) 安捷伦科技公司,Accurel Q 3/2聚丙烯中空纤维 (Membrana,Wuppertal,Germany;壁厚200μm, 孔径0.2μm,内径600μm)。抽滤器(津腾GM–0.33),配真空泵;紫外可 见分光光度计(UV–260);超声波清洗器(KQ 3200);电子分析天平(BS124S);离心机。1.2试剂三乙胺,分析纯,由上海国药集团化学试剂有 限公司生产;磷酸,分析纯;水,重蒸馏水;甲醇, 色谱纯,天津大茂化学试剂厂;0.05 mol/L氢氧化 钾溶液。吡虫啉标准溶液:准确称取吡虫啉标准品 0.050 0 g(纯度≥99%,德国拜耳公司),用甲醇 溶解定容至100 mL,得到吡虫啉0.50 g/L的标准 储备液。
生姜中涕灭威及其代谢物检测固相萃取方法一、实验目的本研究利用固相萃取法作为生姜样品的前处理方法,LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。二、实验目标物三种涕灭威及其代谢物标准品:涕灭威(CSA:116-06-03),涕灭威砜(CSA:1646-88-4),涕灭威亚砜(CSA:1646-87-3)。三、应用范围本方法适用于生姜、大米、花生等样品中涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜LC-MS/MS检测及确证。四、参考标准进出口行业标准《SN/T 2441-2010 进出口食品中涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》。五、实验材料Biocomma® NH2 固相萃取柱 3mL/500mg。六、实验方法1、样品提取称取5.0g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中,加入20mL乙腈,均质2min,振荡提取20min,上清液过无水硫酸钠收集到分液漏斗中,残渣再加入20mL乙腈,重复上述操作一次,合并2次滤液,加入20mL用乙腈饱和的正己烷,振荡10min,静置分层,弃去正己烷层,乙腈层于40℃下旋转蒸发浓缩至干,用2mL甲醇-二氯甲烷(1:99,体积比)溶解,待净化。2、SPE柱净化(1)活化:加入5mL甲醇-二氯甲烷(1:99,体积比)活化,弃去流出液。(2)上样:加入待净化液,流速控制在1 mL/min内,收集流出液。(3)洗脱:用5mL甲醇-二氯甲烷(1:99,体积比)洗脱,接收流出液,并重复一次,合并步骤(2)、(3)流出液。(4)浓缩定容:40 ℃缓慢氮气流条件下吹至近干(约0.5 mL)后挥干,用1.0mL乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90,体积比)定容容至1 mL,过0.45μm微孔滤膜,上LC-MS/MS,待测定。3、LC-MS/MS条件色谱柱:Venusil ASB C18(2.1×150mm,5μm,100Å)质谱仪:API 4000A:乙腈溶液;B:0.05%甲酸的水溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160926_555754_3310_3.jpg进样量:5μL柱温:30℃流速:0.3 mL/min离子源:电喷雾(ESI),正离子模式检测方式:多反应监测(MRM)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160927_555755_3310_3.jpg七、实验结果1、生姜基质10μg/kg加标回收结果:三个平行测试样的平均回收率均大于80%,平行样间相对标准偏差均小于5%,符合标准要求。(见表4)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160928_555756_3310_3.jpg2、空白样品中添加涕灭威及其代谢物色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160929_555757_3310_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160929_555759_3310_3.jpg本研究是逗点生物利用固相萃取法作为生姜样品的前处理方法,以进出口行业标准《SN/T 2441-2010 进出口食品中涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》制定,适用于生姜、大米、花生等样品中涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜LC-MS/MS检测及确证。欢迎广大色谱分析者参考。
最近做一个样品,国家标准方法,标准品是用二甲基亚砜溶解,样品反而是用甲醇溶解,为什么标准和样品的溶剂会不一样呢?你觉得这样溶剂不一致,处理会影响数据的准确性吗?二甲基亚砜溶解的样品进色谱柱有影响吗?
刚刚看到的一些SPE理论知识,在此分享给大家,希望对大家的工作有所帮助。固相萃取技术属于色谱技术的一种。化合物要么保留要么流过,吸附剂种类选择众多,选择性与 HPLC 类似,但与HPLC 不能等同。为什么使用固相萃取(Solid Phase Extraction)技术:1 高回收率、高净化效果2 快速简便3 减少昂贵、易碎的特殊玻璃装置的使用4 减少有机溶剂的大量消耗样品浓缩,提高分析灵敏度5 避免污染物对色谱柱的伤害,延长使用寿命两种不同方法萃取鸦片样品的效果比较:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151559_451452_2468127_3.jpg固相萃取的基本模式活化→上样→淋洗→洗脱http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151559_451453_2468127_3.jpg活化:也就是对填料进行溶剂化,使官能团充分展开,为吸附目标化合物提供最佳状态。在低真空≤-3 in. Hg下向SPE柱中加入有机溶剂,每100 mg填料加入1.5 mL甲醇或乙腈。然后加去离子水去除多余溶剂(干扰疏水作用),每100 mg填料加入1 mL水。如果填料意外干掉,需重新进行(甲醇或乙腈)溶剂化和(水)冲洗。当使用离子柱时,在(水)冲洗后,加入1mL的缓冲液,以确保填料的pH处于填料-分析物作用的最佳条件下。上样:流速是确保样品在通过填料时充分接触的关键,对于离子交换过程尤为重要,因为离子交换动力学过程比反相或正相机理要慢。建议上样的流速约为1-2 mL/min。淋洗:建议使用在允许范围内最强和最大体积的淋洗液,却不会导致分离物质的漂移或洗脱。淋洗后需对柱子进行抽干,以避免淋洗液干扰洗脱的效果。最简单的方法是在最大的真空度下抽干柱子5min。洗脱:在洗脱中,最好是用尽可能少的溶剂将提取物完全地洗脱下来。洗脱溶剂的强度应该是在能完全地破坏分析物的所有结合作用的前提下最弱的。固相萃取的不同萃取机理反相萃取Non-Polar Extractionshttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151600_451454_2468127_3.jpg 正相萃取Polar Extractionshttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151600_451455_2468127_3.jpg离子交换Ion Exchange Mechanismshttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151602_451456_2468127_3.jpg混合模式萃取Mixed Mode/Copolymeric Extractions http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151603_451457_2468127_3.jpg国标中有些方法根本不可行,很多时候还是需要我们优化。但固相萃取的整个过程还是蛮复杂的,往往开展一个实验下来,需要耗费很多时间。掌握好了基础理论知识,可以帮助我们更快地优化方法,从而节省时间。各位亲,我们以后多多交流下SPE的经验吧。我们单位的SPE柱一年的需求量很大,先后使用过一些品牌如Waters,Agilent,Supleco,Sepax-UCT,艾杰尔。Waters,Agilent在国标中有应用,特别是Waters Oasis HLB,MCX在国家标准中应用的很广泛,所以直接参考国家标准就可以使用,但就是价格偏高。Agilent和Supelco的小柱我们实验室用过C18小柱,效果也很不错,价格相对Waters便宜点。Sepax-UCT小柱是去年经朋友推荐开始使用的,据说创始人是SPE发明人之一,价格相比其他几家便宜。艾杰尔是国产的品牌,价格便宜没的说,就是批次重现性不太好。不知各位亲现在使用的是哪家的小柱?可以分享下。
一种水溶液中含有如下几种成分:二甲基亚砜(DMSO),甘油(丙三醇),丙二醇和乙二醇请问用液相色谱能定量分析出这种水溶液中个组分的含量吗?从来没用过液相色谱,不知道从何入手,谢谢!
采用液液萃取的方法测三卤甲烷,做出了标准品的曲线,然后用去离子水做了一个加标的,测了发现加标的峰面积比标准品的峰面积大很多,是不是很不正常?这怎么计算回收率?而且萃取不是会有损失,怎么峰面积还变大了?前处理步骤,就是20ml水样加入比色管中,然后加100ppb的标准品,加4ml的甲基叔丁基醚萃取,再加入8g的无水硫酸钠。也做了个空白,发现空白没有这些出峰,峰面积大小可以忽略不计。加标和测标准品的方法是一样的。请高手解答一下
赵榕 薛颖 吴国华 赵海燕 罗仁才 以含有体积分数为20%的0.95mol/L柠檬酸水溶液的二甲基亚砜作为维生素D的破壁溶液,利用Chroma-bond XTR固相萃取柱(14 500mg,70mL)对样品进行提取和净化,建立了测定钙强化食品中维生素D的固相萃取-高效液相色谱方法。方法的线性范围为0.1~100.0μg/mL,线性相关系数为0.999。方法的定性检出限为0.01μg/g,定量检出限为0.03μg/g。低(0.1μg/g)、中(0.5μg/g)、高(1.0μg/g)三个浓度水平的加标回收率分别为106.2%,99.5%和100.1%,相对标准偏差小于10%。【作者单位】:北京市疾病预防控制中心 北京100013【关键词】:高效液相色谱法 固相萃取 维生素D 钙强化食品【分类号】:TS207.3【DOI】:CNKI:SUN:SPZZ.0.2008-01-022【正文快照】: 维生素D(VD)是甾醇衍生物,在自然界中以多种形式存在,如VD2,VD3,VD4,VD5,VD6,VD7等,其中以VD2和VD3最为重要,人们平时所说的VD主要指VD2和VD3。目前市场上复合型的钙强化食品很多。随着科学技术的进步,添加到钙强化食品中的VD已不再是普通型的原料,多数是经过包被的VD。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=107357]固相萃取-高效液相色谱法测定钙强化食品中的维生素D[/url]
[font=&]用固相萃取C18小柱萃取尿液中多环芳烃,使用了超纯水、甲醇活化,甲醇和超纯水的混合液平衡,加入5mL尿液,之后用正己烷洗脱,但是加正己烷后液体不往下滴落,收集不到萃取液。请问这是什么原因?是因为尿液需要先过滤吗?如果需要过滤请问需要什么样的滤膜呀?谢谢前辈的解答![/font]
二甲基亚砜色谱级的哪家的比较好
冰红茶饮料香气成分的固相萃取GCMS分析 前 言 夏日热日炎炎,喝一瓶凉爽的冰红茶,爽口解渴。一般饮料多用液液萃取法来提取香气成分,但需要使用大量溶剂,并需要浓缩,手续繁琐。也有使用固相微萃取法,但不好准确定量。本文采用固相萃取-气相色谱质谱法(SPE-GCMS)分析鉴定冰红茶饮料的香气成分,此法操作简单方便, 使用极少量的有机溶剂,提取浓缩净化一体。并利用Amdis质谱解卷积软件识别拆分共流出色谱峰,得到更纯净的质谱图,更利于下一步质谱检索的工作;并结合保留指数校正使质谱检索结果更为准确。并使用动态范围宽的FID内标法定量。共检出定量了冰红茶里面148个香气组分。 1试验部分1.1 仪器与装置美国安捷伦6890N/5975C气相色谱-质谱联用仪,带有德国Gerstel的MPS2多功能自动进样系统,整合FID检测器,同时带德国Gerstel毛细管柱分流装置。固相萃取仪SPE (J.T.Baker)默克密理博超纯水机 1.2 样品和标样、试剂冰红茶饮料样品,市场样,来自某超市。所有香气化合物标准品均来自Sigma-Aldrich等主要试剂公司,少数为实验室内部精制标样。C6-C30正构烷混合标准物来自安谱公司。SPE小柱:BondElut PPL(苯乙烯-聚乙烯基苯聚合物,从安谱公司购买),3ml/200mg甲醇,特丁基甲醚(色谱纯,安谱公司)超纯水(本实验室默克密理博超纯水机制备) 1.3 GC/MS条件1.3.1 色谱条件: 色谱柱:安捷伦HP-Innowax(60m×0. 25 mm ( i.d.)×0.25μm)毛细管柱;升温程序: 60℃,以5 ℃/min升至250℃,保持18 min;载气(He,纯度99.999%以上)流速1.7 mL/min;进样口温度250℃,分流进样,分流比10:1; 进样量:1μl。检测器:FID, 氢气:30ml/min, 空气:350ml/min, 尾吹:N2,30ml/min, 温度:270℃。1.3.2质谱条件: 电子轰击(EI)离子源;电子能量70eV;传输线温度280℃;离子源温度230℃;四级杆温度150℃。SCAN扫描范围:29-400。 1.4样品处理及分析方法 固相萃取法:准确称取约200g冰红茶饮料样品,加入适当量内标物。活化SPE小柱:用3ml甲醇,3ml水洗;加入上述样品,流速1ml/min; 用3ml水冲洗小柱;干燥后,用特丁基甲醚1ml洗脱。进样1微升洗脱液,进行GC-MS/FID分析。 液液萃取法(用于对比):准确称取约200g冰红茶饮料样品,加入适当量内标物,加入20g固体氯化钠,用乙醚戊烷(1:1)30ml X 4提取,无水Na2SO4干燥后用微柱浓缩器浓缩到1ml。进样1微升进行GC-MS/FID分析。 在分析样品前,和样品分析完全相同的条件下,用0.05%的C6-C30的正构烷标样注射到GCMS,获得正构烷的保留时间,用于计算保留指数。分析样品后,用软件计算样品各个组分的保留指数,并和标样的保留指数对比来,结合质谱来定性。 事先也用同样方法测定标样的保留指数备用。
各位大哥大姐: 听说好多柱子都不能用纯水走,还是有一些可以走的,各位高手你们能够告知一下哪些色谱柱可以用纯水走呀?我想归纳一下,谢谢大家了。
固相萃取-超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法-串联质谱法测定蜂蜜中甲硝唑[color=black] [/color][font=宋体][color=black]甲硝唑(MNZ)属于硝基咪唑类广谱抗生素,广泛用于预防和治疗组织滴虫病、球虫病等疾病,甲硝唑因疗效明显,价格低廉,被蜂农广泛使用,造成了甲硝唑药物在蜂蜜中残留[/color][/font][font=宋体][sup][size=13px][1,2][/size][/sup][/font][font=宋体][color=black],研究发现甲硝唑对人体具有潜在的致癌和致畸作用[/color][/font][font=宋体][sup][size=13px][3,4][/size][/sup][/font][font=宋体][color=black]。1998年欧盟禁止甲硝唑使用于食品动物,2002年美国食品与药物监督管理局禁止在进口动物源性食品中使用甲硝唑[/color][/font][font=宋体][sup][size=13px][5,6][/size][/sup][/font][font=宋体][color=black]。我国农业部和国家药品监督管理局2002年规定甲硝唑及其盐、酯及制剂不准以促进动物生长为目的在所有食品动物饲养过程中使用,且不得在动物源食品中检出[/color][/font][font=宋体][sup][size=13px][7,8][/size][/sup][/font][font=宋体][color=black]。目前甲硝唑的测定方法主要有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法、高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-质谱法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法[/color][/font][font=宋体][sup][size=13px][9][/size][/sup][/font][font=宋体][color=black]。其中,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法-串联质谱法因选择性强、灵敏度高、检出限低而成为测定甲硝唑的优势方法[/color][/font][font=宋体][sup][size=13px][10][/size][/sup][/font][font=宋体][color=black]。本文将蜂蜜用乙酸乙酯萃取,提取液浓缩后经 [/color][/font][color=black]MCS [/color][font=宋体][color=black]固相萃取柱快速富集净化样品的前处理方法,减少前处理的操作步骤,同时降低基质干扰,利用超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法—串联质谱法测定蜂蜜中甲硝唑的方法,内标法定量,提高了检测效率,适合大批量样品检测。 [/color][/font][color=black]1.材料与方法[/color][size=16px][color=black] [/color][/size][color=black]1.1 仪器与试剂[/color][color=black]Waters Xevo TQ-S三重四极杆质谱仪(美国Waters),配有电喷雾离子源(ESI) Heidolph Multi Reax全能型振荡器(德国海道夫) 氮吹仪(美国Organomation);高速低温离心机(湘仪) 乙腈、甲醇(色谱纯,德国Merck);甲酸(色谱纯,上海麦克林);乙酸乙酯(色谱纯,美国Fisher);氨水(分析纯,天津科密欧);盐酸(优级纯,北京化工厂);MCS固相萃取小柱(天津,艾杰尔):500ml/6ml;甲硝唑标准品、D4-甲硝唑(纯度均大于99.0%)。实验用水为超纯水(电阻率为18.2mΩ.厘米)。[/color][color=black]1.2 样品前处理[/color][color=black]1.2.1 样品提取 称取蜂蜜5g(精确到 0.01 g)于50ml离心管中,加入100μlD4-甲硝唑内标应用液(20.0ng/ml),加水10ml,混合溶解,再加入10mL乙酸乙酯,涡旋1min,震荡提取 10min,1000rpm 离心 2min,吸取上层乙酸乙酯相 5mL 于10mL 试管,50℃氮气吹干后,加入 0.1mL 甲醇溶解,再加入 1.9mL 40mmol/L盐酸溶液,超声溶解 1min,转入 2mL 离心管,12000rpm 离心 2min,上清液待净化。[/color][color=black]1.2.2 样品净化 依次用 5mL 甲醇、5mL 水、5mL 40mmol/L 的盐酸溶液活化平衡MCS 固相萃取柱,然后转移上述上清液至 MCS 柱内,待样品过柱后,用 5mL水淋洗除杂,真空抽干柱内液体后加入 5mL 乙酸乙酯洗脱,再用 5mL 甲醇淋洗除杂,真空抽干后用 5mL 5%氨化甲醇洗脱,收集于 10mL 具塞试管内,得甲硝唑洗脱液;洗脱液在 50℃下用氮气吹干,分别先加入 0.1mL 甲醇超声溶解残留物,再加入0.9mL 10%甲醇/水溶液混匀,过 0.22μm 滤膜后待 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS 分析。[/color][color=black]1.3 仪器条件[/color][color=black]1.3.1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]条件 色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相A为0.05% 氨水溶液,B为乙腈,流速为 0.3 mL/min,柱温:40 ℃,进样量 5.0 μl。[/color][color=black]1.3.2 质谱条件 电喷雾离子源:ESI;质谱多重反应监测方式:MRM;正离子模式(ESI+);毛细管电压:0.5 kV;离子源温度150 ℃;脱溶剂气温度400 ℃;脱溶剂气流量800 L/h。其它质谱参数见表1。[/color][align=center][color=black]表1 [/color]甲硝唑的质谱参数与保留时间[/align][table][tr][td][align=center]化合物名称[/align][/td][td][align=center]母离子[/align][/td][td][align=center]子离子[/align][/td][td][align=center]碰撞能量(eV)[/align][/td][td][align=center]锥孔电压(V)[/align][/td][td][align=center]保留时间(min)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]甲硝唑[/align][/td][td][align=center]172.2[/align][/td][td][align=center]128.1*[/align][align=center]82.1[/align][/td][td][align=center]18[/align][align=center]20[/align][/td][td][align=center]54[/align][/td][td][align=center]1.40[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]D4-甲硝唑[/align][/td][td][align=center]176.2[/align][/td][td][align=center]128.1*[/align][align=center]49.0[/align][/td][td][align=center]22[/align][align=center]22[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]1.39[/align][/td][/tr][/table]注:*为定量离子[color=black]结果与讨论[/color][color=black] 前处理方法优化 针对蜂蜜样品和目标物的性质,比较了3种不同的前处理方式,包括:(1)采用水直接溶解蜂蜜,再将蜂蜜水溶液进行固相萃取净化;(2)加水溶解蜂蜜后,加入乙酸乙酯萃取目标物,取乙酸乙酯层并将溶剂吹干后加入超纯水溶解残渣,再进行固相萃取净化;(3)采用pH=8.8的磷酸缓冲液溶解蜂蜜,再将样品溶液进行固相萃取净化.通过加标回收实验比较回收率表明,本实验采用方法(2)的回收率明显高于其他2种方式,故对蜂蜜试样采用方法(2)前处理方式。[/color][color=black] 基质效应的影响 基质和干扰组分的存在影响待测物的离子化效率,从而影响定量结果的准确性,常表现为基质增强或基质抑制效应[/color][sup][size=13px][11][/size][/sup][color=black]。分别采用空白蜂蜜,按照实验方法提取与净化后的定容液和初始流动相作为标准溶液的稀释溶剂,通过测定标准溶液的峰面积的比值考察基质效应的强弱。结果表明:两者的峰面积比值为0.757,即蜂蜜基质对甲硝唑的测定具有一定的抑制效应,本实验选择同位素内标法定量,从而有效地降低样品的基质效应的对测定结果的影响。[/color][color=black]2.3 质谱条件的优化 将甲硝唑标准工作液注入质谱,启用质谱智能方法开发程序,优化碰撞能量,碰撞池电压等参数,进一步优化其他质谱参数使灵敏度和离子化效率达到最优时保存为质谱方法。离子对、碰撞能量、锥孔电压、电离方式见表1。[/color][color=black]2.4 方法的线性关系和检出限 以甲硝唑与相应同位素内标的色谱峰面积比(y)为纵坐标,以甲硝唑的质量浓度(x)为横坐标,绘制工作曲线,线性回归方程为Y=1.004X+0.1243,相关系数r:0.9996,线性关系良好。以信噪比S/N=3时对应的浓度为方法检出限为0.05[/color]μg/kg[color=black],S/N=10时对应的浓度为方法定量限为0.15[/color]μg/kg。标准工作曲线见图1。[align=center][color=black]图1 甲硝唑工作曲线[/color][/align][color=black]2.5 方法的精密度和回收率 [/color]以5g空白蜂蜜样品作为本底,分别加入高、中、低3种不同浓度标准应用液,得到浓度为1[color=black]μg/kg[/color]、5μg/kg、20μg/kg的加标样品,充分混匀后按样品处理方法进行处理,平行测定6次,计算其加标回收率和相对标准偏差(RSD),加标回收率分别为87%~96.3%,RSD在2.23~6.17%之间,结果表明,此方法具有良好的准确性和精密度。[color=black]2.6 样品检测[/color][font=calibri][size=13px] [/size][/font][color=black]采用本方法对市售30份不同蜂蜜样品进行检测,其中1份检出甲硝唑残留,含量是0.27 [/color]μg/kg,检出率为3.3%。3 结论本研究建立了超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法—串联质谱法测定蜂蜜中甲硝唑的含量的方法,样品前处理采用乙酸乙酯提取,固相萃取柱富集和净化,净化效果好,提取效率高。不同蜂蜜样品基质效应使甲硝唑在质谱中存在不同程度的基质抑制效应,实际测定中蜂蜜的种类繁多,若使用外标法定量应尽量使用与待测样品基质相同的样品作基质匹配工作曲线,基质不同需要配置不同的曲线系列,大大增加了工作量。本研究采用同位素内标法定量,降低了样品的基质效应的影响,只需配置一套工作曲线,提高了工作效率。本方法快速、准确、灵敏,能够满足日常蜂蜜样品中甲硝唑残留的大批量检测。参考文献[1]梁明.超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法对蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留的测定分析[J].中国高新科技,2019(17):72-73.[2]张晓艺,张秀尧,蔡欣欣,李瑞芬.超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]联用三重四极杆质谱法同时测定蜂蜜中氯霉素、甲硝唑和林可霉素[J].预防医学,2019,31(02):212-216.[3]周贻兵,吴坤,李磊,林野,刘利亚.超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定蜂蜜中甲硝唑[J].理化检验(化学分册),2017,53(08):946-949.[4]丁燕玲,陈彤,黄婷,钟名琴,吴雯娟,罗燕.超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定鸡肉中甲硝唑、二甲硝唑及其代谢物的方法研究[J].广东化工,2018,45(13):245-248+252.[5]王春民,张秋萍,吴春霞.超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法检测蜂蜜中的甲硝唑含量[J].食品安全质量检测学报,2016,7(05):1813-1817.[6]章剑,李昌安,李建伟,董骏,张克才.固相萃取-超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法同时测定蜂蜜样品中氯霉素和甲硝唑[J].安徽预防医学杂志,2018,24(01):16-20.[7]刘伟,张楠,李兵,范赛,屠瑞莹,吴国华,薛颖,赵榕.固相萃取-超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-同位素稀释串联质谱法测定蜂蜜中的甲硝唑和氯霉素[J].分析科学学报,2017,33(01):145-148.[8]肖国军,蔡超海,王生,覃玲.固相萃取高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联质谱法同时测定蜂蜜中甲硝唑、氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留[J].中国卫生检验杂志,2018,28(01):22-25.[9]高何刚,杜赛,王瑞,陈理.超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留[J].预防医学,2017,29(09):969-972.[10]高何刚.超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]一串联质谱法测定蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留[J].广东化工,2017,44(15):255-256.[11]图雅,崔建平,赵宏.同位素内标-超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定蜂蜜中氯霉素及甲硝唑[J].中国食品卫生杂志,2017,29(04):450-453.
想要分析一种改性塑料中的添加剂(在产品里的添加量不超过0.6%),但我的基质塑料非常难溶解,所以想找一种溶剂将里面的助剂萃取出来,再将不溶于该溶剂的其他基质成分过滤;一、看到一些类似的文献,他所用到的萃取溶剂为常用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]的溶剂如甲醇、异丙醇、乙腈等,[color=#ff0000]但我拿这些溶剂去溶解纯的这种添加剂,根本不能溶解呀[/color],所以很疑惑为什么还能作为萃取剂。而且流动相基本用的也是甲醇或者乙腈。二、还有的用甲苯作为标准物和样品的提取液,但使用甲醇和水梯度洗脱,问题是甲苯是不溶于水,这样不会污染色谱柱吗?三、有没有做过类似测试的老师推荐一款色谱柱,用于分析各类抗氧剂。[img=,623,392]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305230947102219_9879_3929349_3.png!w623x392.jpg[/img]
[color=#231815]双水相萃取技术在分离、纯化中的应用[/color][color=#231815][color=#333333]双水相技术是一种新型的液-液萃取技术,由于其条件温和、易操作等特点,目前已广泛应用于物质的分离、纯化。本文综述了双水相形成原理、工艺流程和特点、体系类别、影响双水相分配的因素及其在分离纯化中的应用,并针对其未来发展趋势进行了展望。[/color][/color]
RTSPE固相萃取SPE C18固相萃取小柱 6ml 500mg1.活化6ml色谱甲醇过柱,滴速为宜。2.平衡6ml去离子水过柱,滴速为宜,当水液面要比填料上表面高1mm左右,再上样。3.上样取上图第四步离心后的上清液过C18小柱,滴速为宜。过柱前上清液要利用1%乙酸调节pH至2.5-3.0之间。4.淋洗5%甲醇溶液,6ml淋洗过柱,去除杂质。抽干5.洗脱用2-4倍柱床体积的95%色谱甲醇洗脱。这是我初步想的方法,用来进行ABA前处理,之后准备在进行一系列操作进行HPLC检测。但是有几个问题1.活化用的甲醇浓度一般是多少?2.关于提取剂,我查了文献有的说可以利用80%甲醇进行浸提。有的说利用改进的Bieleski混合液(甲醇:甲酸:水=15:1:4,v/v/v),这个Bieleski里面用的甲醇和甲酸是百分之多少的?3.再就是淋洗这一步,我测定的植物激素是利用反相萃取方法,淋洗为了把干扰物质洗去,应该用多少的甲醇呢?我的ABA溶解在80%的甲醇中。4.最后洗脱,用的甲醇浓度多少呢?希望来人解答万谢!!很急的