尿微量蛋白(尿微量白蛋白/蛋白尿)试验(也称“白蛋白试验”,“尿微量白蛋白”和“蛋白尿”试验)何为尿微量白蛋白(白蛋白)试验?尿微量白蛋白试验是对尿液中的蛋白质进行测定的筛选试验。人体血液中有一种蛋白质称为白蛋白。在正常情况下,几乎无法在尿液中检测到。只有在肾脏受损,尤其是损伤早期,它可以优先于其他肾损伤标志物在尿液中被检测出,因此,尿微量白蛋白在诊断肾脏疾病、早期肾损伤等方面具有重要意义。此项试验有何目的?蛋白质是人体的基本构成“材料”,具备一些重要的功能和作用,可结合营养物质将其运输至各个组织,,并将人体中循环的体液量维持在适当水平。肾脏功能正常时,蛋白质几乎无法通过肾脏进入尿液(仅会排出血液循环产生的废料)。然而,如果人的肾功能受损或衰竭,该肾脏对蛋白质的过滤能力将有所下降,因而一些蛋白质将会透过肾脏而出现在尿液中,称为尿微量蛋白。尿微量白蛋白与蛋白尿有何不同?白蛋白是一种大量存在于血液中的典型蛋白质。因其分子个头小,当肾脏功能出现问题时,白蛋白是能够率先通过肾脏进入尿液的几种蛋白质之一。尿液中出现少量白蛋白的情况称为尿微量白蛋白。若肾脏功能受损严重,尿液中的白蛋白数量呈现出增长趋势,这种症状被改称为蛋白尿。尿微量白蛋白/蛋白尿有何症状?病症早期,并无明显症状或征兆显现。随着肾功能衰竭的加重,大量蛋白质出现在尿液中,手脚、腹部和面部可能出现肿胀。如果蛋白尿的情况加重,可能会造成永久性肾功能损伤,有些病人可能需要做透析或肾移植。不论上述症状是否存在,尿蛋白测定是确定有多少蛋白质进入尿液的唯一办法。蛋白尿还可能引发心血管疾病。血管受损除了会引发肾脏疾病外,还可能会造成窒息和心力衰竭。患蛋白尿(症)的高危人群有哪些?患有糖尿病、高血压、心血管疾病和其他类型肾脏疾病等慢性病的病人易出现蛋白尿。老年人、肥胖人群以及有肾脏疾病家族史的人群。其
尿干化学法分析仪和传统显微镜镜检是基于两种不同原理的检验手段,因此检测结果可能存在一定程度的差异。临床中两种诊断血尿方法常配合使用以达到检测效率与质量的统一,总结起来,对检测结果的影响因素主要有以下几方面。 3.1 假阳性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阳性,但镜检却呈阴性 。其原因包括:(1)尿液分析仪潜血实验可与完整红细胞阳性反应,也能够与血红细胞释放的血红蛋白(hemoglobin,Hb)进行反应,这与显微镜只能够观察到完整的红细胞存在差异。健康人群尿Hb水平极低,定为阴性;(2)肌红蛋白(myoglobin,Mb)分子中包含Hb基团,当骨骼肌、心肌严重受损,血MB浓度升高,经肾排泄,导致尿液MB水平升高,潜血反应因此呈阳性,而显微镜检查却呈阴性;(3)部分患者尿中存在对热不稳定的酶,也可导致试剂块发生颜色变化,发生潜血反应;氧化性物质的污染也是造成潜血反应假阳性因素;高温或标本存放时间过长导致潜血反应阳性率增高 ;(4)尿试纸条超过保质期,或没有妥善保存、操作不当、仪器故障等均可能造成假阳性。 3.2 假阴性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阴性,但镜检却呈阳性。其原因包括:(I)食物、药物影响:某些饮食、药物可引起尿液成份的改变如当尿液中存在大量的维生素时,维生素具有的强还原性使其竞争性结合反应产生的氧,导致尿试纸条无法出现潜血反应即出现假阴性反应;(2)高蛋白、高比重尿样削弱了试剂块潜血反应的敏感度,使能够发生反应的成分被包裹,反应试剂无法接触到,从而出现假阴性结果。 3.3 离心对检测结果的影响 离心中若速度过快,致使有形成分遭到破坏;但过慢时,沉渣中可能无法找到,以至于漏掉。因此对检验结果出现怀疑时,可实验潜血证实进行验证。总之,随着尿干化学分析仪普及,工作效率得到了极大提升,也使检测红细胞敏感度提高,但显微镜镜检也是无法替代的。对于疑似阳性反应的病例,应采用尿沉渣镜检进行复测,以求结论准确,提高检测可靠性。
4.1尿液分析仪1.尿液分析仪的分类(1)按工作方式分类 可分为湿式尿液分析仪和干式尿液分析仪。其中干式尿液分析仪主要用于自动评定干试纸法的测定结果,因其结构简单、使用方便,目前临床普遍应用。(2)按测试项目分类 可分为8项尿液分析仪、9项尿液分析仪、10项尿液分析仪、11项尿液分析仪和12项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C和浊度。(3)按自动化程度分类 可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。 2.尿液分析仪工作原理(1)尿液分析仪的试剂带①试剂带的结构 单项试剂带以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥,作为试剂层,再在其表面覆盖一层纤维素膜作为反射层。一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。尿液浸入试剂带后,与试剂发生反应,可产生颜色变化。多联试剂带是将多种项目试剂块集成在一个试剂带上,使用多联试剂带,浸入一次尿液可同时测定多个项目。②试剂带的反应原理 pH测定:采用pH指示剂原理,常用甲基红和溴麝香草酚蓝组成的复合型指示剂,呈色范围从pH4.5~pH9颜色由橘黄色、绿色变为蓝色,由此反映尿液的pH值。 尿蛋白质测定:利用pH指示剂蛋白质误差的原理。 尿葡萄糖测定:当前有两种完全不同的检测尿糖的方法,一种是基于葡萄糖氧化酶法原理,能特异地检出尿中的葡萄糖;另一种是基于铜还原法的原理,能检测葡萄糖和其他还原性物质。 尿酮体测定:采用亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。 尿隐血测定:利用游离血红蛋白、溶解红细胞或肌红蛋白中的血红素具有过氧化物酶样作用,能催化过氧化氢释放出新生态氧,使色原氧化而显色,其颜色深浅与血红蛋白含量有关。 尿胆红素测定:采用重氮反应法原理。 尿胆原测定:采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理。 尿亚硝酸盐测定:尿亚硝酸盐试验的化学基础是利用某些细菌能将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐的特性。 尿白细胞测定:利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有机酸,吲哚酚可进一步氧化成靛蓝的原理;或吲哚酚和重氮盐反应成重氮色素而显色,颜色深浅与粒细胞量的多少有关。 尿比密测定:基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度溶液中pKa变化来测量比密。 尿维生素C测定:采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维生素C进行反应,形成钼蓝,颜色由蓝色变成紫色,颜色深浅与尿中维生素C含量有关。③试剂带的应用 不同型号的尿液分析仪一般使用自己配套的专用试剂带。试剂块要比测试项目多一个空白块,有些仪器还多一个位置参考块。各试剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出测试误差,提高测量准确度而设置的。固定块是为了消除在测试过程中为免每次测定试剂块的位置不同产生测试误差设置的,每次测定前,检测头都会移到参考位置进行自检,必要时,自动调整发光二极管的亮度和灵敏度,以提高检测的信噪比。3.尿液分析仪的检测原理 把试剂带浸入尿液中后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越小;反之,反射率越大。因为颜色的深浅与光的反射率成比例关系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系,所以只要测得光的反射率即可以求得尿液中各种成分的浓度。 尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。一种波长为测定波长,它是被测试剂块的敏感特征波长;另一种为参比波长,是被测试剂块不敏感的波长,用于消除背景光和其它杂散光的影响。各种试剂块都有相应的测定波长,其中亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆素原的测定波长为550nm,pH、葡萄糖、蛋白质、维生素C、潜血的测定波长为620nm。各试剂块所选用的参考波长为720nm。 试纸块颜色的深浅除了随各被测成份的不同而变外,还与尿液本身的颜色有关。空白试纸块随着尿液的颜色而变化。试纸块的反射率R试纸由式13-1计算:R试纸= ×100% 空白块的反射率R空白由式13-2计算::R空白= ×100% 总的反射率R为试纸块的反射率与空白块的反射率之比:R= = ×100% 采用双波长测定法,抵消了尿液本身颜色引起的误差,可提高测量精度。4.仪器的结构与功能 尿液分析仪一般由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。其结构见图13-2。http://www.care100.com/yqxjpkc/images/131.jpg图13-2 尿液分析仪结构示意图
尿液质量控制的一般情况在常规试验中,虽然尿液分析仪的使用一般不受人为因素的影响,但尿液分析准确与否却受许多因素的影响。这些影响因素可以出现在分析前、中、后三个环节。分析前的质量控制(简称质控)主要包括样品的标签、收集样吕使用的容器和样品收集的时间、尿标本新鲜程度等。一般均应在取样后2小时内完成检测,否则可影响模块上所有检查项目结果的准确性。分析后的质控主要包括参考值范围的认可,判定试验结果是否受药物的干扰和病理物质的影响,报告单结果的书写和报告单回报时间等方面。分格中的质控主要包括化妆品和试带条的准确度、试带条的效期、仪器的校正、仪器操作正确程度和尿液标本中影响因素及处理等方面。
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AKATA制备型液相色谱蛋白分析仪纯化蛋白步骤很简单的,比较适合初学者。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=113913]AKATA制备型液相色谱蛋白分析仪纯化蛋白步骤[/url]
糖尿病是一种慢性病,随着经济生活水平的提高和社会老龄化的加剧,近年来患者人数在全球包括中国逐年递增,目前已严重威胁到国民的健康。对糖尿病的监测也越来越受到国家和人们的重视。作为全球公认的糖尿病检测"金标准",糖化血红蛋白(HbA1c)能够稳定可靠地反映出受检人在检测前90天到120天内的平均血糖水平,不受抽检时间、空腹与否或胰岛素等因素的干扰,经过国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)的技术验证和推广使用,使得糖化血红蛋白检测已成为诊断糖尿病的一种趋势。我们国家也参考国际公认的HPLC-LC-MS/MS方法,已经基本建立了自己的糖化血红蛋白检测一级参考体系。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/10/201510221629_570638_1587_3.jpg糖尿病检测方法以及主流仪器分析使用最先进的流体技术和产品,为您打造最优秀的HbA1c分析仪项目难度以及如何解决各类流路问题糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪市场情况以及前景分析立即报名参与讲座:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1689
前言:医院化验室一般配备台式尿液分析仪(普遍使用光积分球)。近几年,随着床边检验(POCT)的普及,在光学传感器创新器件颜色传感器芯片出现后,有便携式设计的尿液分析仪面世,为走入家庭运用创造了条件。下面通过拆解恩普生尿液分析仪Ui pro,帮助大家认识新型传感器,了解掌上尿液分析仪结构原理,正确使用及维护维修。[b]一、仪器外观[/b]这是主机、充电器(数据线)、试纸(11AI),可以检测尿液11项指标(LEU、NIT、UBG、PRO、PH、BLD、SG、KET、BIL、GLU、VC)。采用五键电容触摸屏进行控制操作,有配套的APP:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337011604_6963_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]仪器前端,有USB充电及通讯口、试纸条输送口:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337015030_5255_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]仪器后端,有试纸条运动敞口:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337019425_5847_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]仪器背面,有标签、电路复位孔。这个仪器内置锂电池,当外接电源时,电压5V、功率2W,很省电:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337022535_744_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b]二、检测原理[/b] 尿液试纸条上分布有11个涂有不同试剂的色块。浸过尿液的试纸条,上面的试纸色块由于化学反应而发生颜色变化。颜色深浅与尿液中的各种成分有关,某种成分浓度越高颜色越深。颜色的深浅与光的反射率成比例,只要测得试纸色块对照射光的反射率,即可计算出尿液中各成分的浓度。 仪器开机,待自检后,在试纸条托架上,放上浸过尿液的试纸条,内部步进电机在MCU程序驱动下,将试纸条托架逐步送进仪器,内部的照射光依次照射试纸条上的试纸色块,光传感器对试纸色块的反射光进行检测,然后传送MCU进行分析处理,结果由LCD显示。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337026651_3769_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b]三、拆解过程[/b]1、取下仪器背面四颗胶塞,内部有固定螺丝,用十字改刀旋下[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337031326_4621_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]2、内部结构及原理内部元件分布标示如下:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337036076_9823_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337041307_5360_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]根据观察,绘出仪器电路原理框图如下:[img=,690,394]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337045403_3901_1807987_3.png!w690x394.jpg[/img]可见,这款掌上尿液分析仪已经取消台式机光积分球结构,故体积可以大大缩小。3、主要电子元件及功能内置电池,采用锂离子电池3.7V、1380mAH[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101337006819_1444_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]U6是锂电池管理芯片,丝印CDV 471 AF3Z:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346132257_8400_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]主板上U1是MCU,被抹去了型号,隐约可见是ST(意法半导体)公司的单片机。X2是圆柱体晶振。在小电路板上,U3是ST公司的单片机STM32F 101C8T6,Y2是陶瓷滤波器(8M),无线模块在其背面:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346139067_5565_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]X1是16MHz晶振:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346145298_5355_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]U4是仪器步进电机驱动器,采用llegro(耀创科技)公司低电压双路全桥式电动机驱动器A3906:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346150738_2760_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]掀开主电路板,下面是显示电路板及触摸屏控制板:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346156407_9051_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]显示板上,U1是合泰公司的LCD驱动芯片HT1622:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346162587_2405_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]用十字改刀卸下检测头电路板4颗固定螺丝:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346168997_9866_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346173448_487_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]取下检测头,能看清托架位置检测采用霍尔元件,型号是04E。图中红色箭头是对试纸条的照射光(白光LED)与反射光(进入光传感器)示意:[img=,690,518]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101354017846_6751_1807987_3.jpg!w690x518.jpg[/img]将检测头电路板支架移开,传感器看得更清楚:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101346126298_9607_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]这枚光传感器采用了美国TAOS公司的TCS颜色传感器。正是由于这枚传感器的运用,才使得尿液分析仪得以小型化。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101350198138_2234_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]该传感器是美国TAOS公司的可编程颜色/频率转换器,型号TCS3200D。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101350203737_296_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b]TCS3200D传感器相关知识:[/b] TCS3200D是一款全彩颜色感应芯片。能在一定的范围内检测和测量几乎所有的可见光。它适合于色度计测量应用领域。比如彩色打印、医疗诊断、计算机彩色监视器校准以及油漆、纺织品、化妆品和印刷材料的过程控制。TCS3200D采用8脚SOIC表面贴片式封装,在单一芯片上集成有8×8=64个光电二极管阵列。其中16个光电二极管有红色滤镜,16个光电二极管有绿色滤镜,16个光电二极管有蓝色滤镜,16个光电二极管没有滤镜,可以透过全部光信息。工作时,可以通过两个可编程引脚来动态选择所需要的滤镜。还可以通过两个可编程引脚来选择100%、20%或2%地输出比列因子,或关闭电源模式,以适应不同测量范围。 TCS3200D内部,将光电二极管阵列与电流频率转换器集成在一个COMS芯片上,输出数字量信号。这样,可以直接与MCU或其它逻辑电路连接,不再需要另外的A/D转换电路、调理电路,电路变得十分简单。下图是TCS3200参数、引脚及逻辑控制图表:[img=,690,256]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101350209257_8172_1807987_3.jpg!w690x256.jpg[/img]绘出检测头结构示意图如下:[img=,690,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101350214888_3411_1807987_3.jpg!w690x426.jpg[/img][b]检测头工作原理:[/b]试纸条托架在步进电机驱动下,将试纸条送到检测孔下方,浸过尿液的试纸色块在白光LED照射下,其反射光被颜色传感器接收并输出数字量到MCU进行处理,得出结果并显示出来。[color=#4BACC6] [/color]拆下试纸条托架移动的驱动电机看看,卸下两颗固定螺丝:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101350219817_3755_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]拆下这个微型步进电机,但通体没有型号标识:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101400300197_6439_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]试纸条托架:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101350192537_1192_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b]四、使用注意事项[/b]除了按照使用说明书的要求,规范操作。还应注意以下几点:1、测试时,仪器应平放,不要晃动。避免试纸条位置滑动,影响检测失败。[color=#4A4A4A]2[/color][color=#4A4A4A]、[/color]测试时,要避免外界强光的干扰,不要照射试纸条托架内部。3、不要放置在高温或太阳直射地方,防止损坏内部锂电池。4、清洁仪器托架时,避免水溶液进入仪器内部,损坏电路元件。[b]结束语:[/b]颜色传感器的问世及应用,给部分光学仪器带来了电路结构的巨大变化,电路简化、体积缩小、检测结果更加精准。特别是一些临床医学检验仪器,小型化、成本降低,更容易进入家庭。为人们预防疾病、保健康养发挥了积极作用。
各位老师, 现在有一台微量氮分析仪,是分析氩气中氮含量的,想请教一下有什么规范进行校准呢?
尿液分析是我们科涉及的一个常规样本,每年均有一些样品需要检测。以前最常用AAS来分析,ICP-MS来了以后我们尝试用它来分析,但是因为尿液盐分含量比较高,而ICP-MS对盐分要求在0.2%以下,故我们是经常稀释很多倍在上机检测,但是有些元素含量很小,稀释后,在我们的实验室环境下ICP-MS也无能为力,所以我们开始利用安捷伦7700x带的高盐进样装置(HMI)来对尿液进行分析。 有人会问我为什么要分析尿液呢?现在我就来回答这个问题。因为生产生活中避免不了要接触一些重金属,而有些重金属是通过尿液来排除的,因此检测尿液中某些重金属的含量可以间接反映出体内吸收了多少重金属。但是检测尿液中的重金属也并非适合每一个人,因为单纯的日常生活并不会接触太多的重金属,只有那些长期从事重金属接触行业较多的工人才容易出血尿中重金属浓度偏高,比如,长期在铅蓄电池长上班的工人容易出现尿中铅超标,长期从事电焊作业的工人容易出现尿中锰、铬浓度超标。而且伴随铅、铬、锰超标的同时更容易出现体内其他有益的微量元素流失进而导致其缺乏,所以监测这些工人的尿液中的铅、锰、铬就显得意义重大。 前不久,接了一批电焊作业工人的尿样,有15个,下面我就以这15个尿样中铅、锰等元素的检测过程跟大家分享一下。欢迎讨论和发表意见。先看样品吧,样品用尿管收集的,为防止尿管本底待测元素的污染,在收集尿液前将尿管浸泡在30%的硝酸中过夜。于第二天将尿管洗净并用去离子水冲洗干净,至于烘箱中,80度烘干。收集来的尿样如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311291345_479964_1615758_3.jpg
[align=center][b][color=#33383D]奶牛疾病之泌尿系统检查——尿液检查[/color][/b][/align][align=center]作者:宋娜娜[/align][color=#33383D]正常奶牛的尿液性质较为稳定,病牛尿液的性质往往发生一定变化。检查尿液的物理性状(尿量、颜色、透明度、粘稠度、气味、比重等),化学性质(酸碱性质、蛋白质、蛋白胨,葡萄糖、血液及血红蛋白、胆色素、尿兰母)及尿沉渣(红细胞、白纲胞、脓细胞、上皮细胞、管型及无机物等),对诊断肾脏疾病具有十分重要意义。[/color][color=#33383D]1[/color][color=#33383D]尿液的采集法[/color][color=#33383D]检查前采尿,最好用导尿法导尿,或趁奶牛排尿时直接接取,或将手伸入直肠内按压膀胱促其排尿。导尿时,奶牛须站立保定,用2%来苏儿洗净外阴部,将消毒过的右手伸入阴道,用中指挑起尿道外口。左手持消毒过的导尿背沿手指下插入尿道。如插入尿道忙囊时,要抽出导尿管重新插入,严禁粗暴,防止尿道损伤。[/color][color=#33383D]尿中蛋白质检查正常尿液含极微量蛋白质,用一般方法不能检出,如在尿中检出蛋白质称为蛋白尿,见于肾炎,膀胱炎和尿道炎等。检查方法常用的有以下两种。[/color][color=#33383D]血尿是指尿液中含有红细胞。奶牛排尿过程中,常用三杯法判定血尿来源。尿初有血,而后无血,表示尿道出血,尿初无血,仅最后排出血尿,表示膀胱出血,排尿自始至终都含有血液。表示肾脏出血。血尿常见于肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、尿结石、某些传染病(如钩端螺旋体病、炭疽等)、中毒病及肾、膀胱、尿道损伤。[/color][color=#33383D]血红蛋白尿及肌红蛋白尿尿液呈淡红色、红色、深红色乃至黑红色,无红细胞,尿中含有血红蛋白,称血红蛋白尿,见于产后血红蛋白尿病、牛焦虫病等。尿中含有肌红蛋白,称肌红蛋白尿,多见于犊牛自肌病等。[/color][b][color=#33383D] [/color][color=#33383D]三、尿中酮体的检查可用改良骆氏法[/color][/b][color=#33383D] 1[/color][color=#33383D]、骆氏试剂[/color][color=#33383D]硫酸铵100克,无水碳酸钠50克,亚硝基铁氰化钠8克,共研成粉末储于褐色瓶内备用。[/color][color=#33383D] 2[/color][color=#33383D]、检查方法[/color][color=#33383D]在一干燥小试管内加入骆氏试剂l~2厘米高。然后小心地将被检尿重积于试剂之上,放置数分钟后,如有酮体存在。则呈现红色,如酮体量多,呈现紫色。多应用于牛醋酮血病的检查。[/color][color=#33383D]3[/color][color=#33383D]、检查尿沉渣种类[/color][color=#33383D]尿沉渣显微镜检查尿沉渣可分为两类,一类为无机沉渣,包括各种无机盐类的结晶,另一类为有饥沉渣,包括红细胞、白细胞、上皮细胞、管型和微生物等。有机沉渣的检查,对诊断肾脏和尿道疾病有重要意义。[/color][color=#33383D] [/color][color=#33383D]制作尿沉渣标本前,要采取新鲜尿液5~10毫升,用离心机按每分钟l000~1500转,离心5~10分钟,倾去上清液。播匀沉淀物,用吸管吸取一滴置载玻片上,加上盖玻片,即可镜检。如无离心机,可将尿液静置2~8小时,使之自然沉淀。[/color][b][color=#33383D]四、镜检时[/color][/b][color=#33383D]镜检时,应缩小光圈,在较暗的视野先用低倍接物镜全而观察标本,找出需要检查的区域后,再换高倍接物镜,仔细辨认细胞成分和管型等。检查结果,对细胞成分可按每个高倍视野内最低至最高数值报告,对管型和无机盐类,按偶见、少量或多量等记载。[/color][b][color=#33383D]五、红细胞[/color][/b][color=#33383D]红细胞,健康奶牛尿中无红细胞。如上面说到,尿中出现多量红细胞时,则表示肾脏、输尿管、膀胱或尿道有出血[/color][color=#33383D]奶牛排尿时直接接取,或将手伸入直肠内按压膀胱促其排尿。导尿时,奶牛须站立保定,用2%来苏儿洗净外阴部,将消毒过的右手伸入阴道,用中指挑起尿道外口。左手持消毒过的导尿背沿手指下插入尿道。如插入尿道忙囊时,要抽出导尿管重新插入,严禁粗暴,防止尿道损伤。[/color][b][color=#33383D]六、脓细胞[/color][/b][color=#33383D]在肾脏和尿道有炎症时,白细胞积聚成堆,其结构模糊,在细胞中有残存颗粒,即称为脓细胞,但应与自细胞区别。[/color][b][color=#33383D]七、上皮细胞[/color][/b][color=#33383D]是泌尿系统发生病变时脱落下来的上皮组织。当肾脏病变时,特别是肾小管病变时,可见到肾上皮细胞,比白细胞约大1/3,多呈多角形、圆形、椭圆形或圆锥形。肾盂、输尿管发生疾患时,可见到肾盂上皮细胞,其形状呈梭形或犁形,有较大的核,比脓细胞大2~4倍。膀胱炎时,可见到膀胱上皮细胞,细胞大而扁平,核小而圆,有时呈长尾状。[/color][b][color=#33383D]八、管型[/color][/b][color=#33383D]也称尿圆柱。正常尿液中没有管型,肾脏发生病变时,肾小球滤出的蛋白质在肾小管中变性凝固,形成透明管状物,故称管型。管型是直的或稍弯曲的圆柱状物,两端多钝圆,或呈折断样。长短和宽窄很不一致。根据管型的来源及构造不同,可分下列几种。[/color][b][color=#33383D]九、上皮细胞管型[/color][/b][color=#33383D]是细尿管中脱落的上皮细胞与蚤自质粘集而成,见于急性肾炎。[/color][b][color=#33383D]10[/color][color=#33383D]、玻璃样管型(即透明管型)[/color][/b][color=#33383D]玻璃样管型(即透明管型)是肾小管中蛋白质凝固而成。结构均匀,无色半透明,多见于慢性肾病。 [/color][b][color=#33383D]十、血细胞性管型[/color][/b][color=#33383D]肾小管中的血细胞互相粘集而成。红细跑管型是在透明或颗粒管型内含有多量红细胞,见于肾脏出血性炎症。白细胞或脓细胞管型为白细胞或脓细胞所构成,地予化脓性肾炎、肾盂肾炎、急性肾炎。[/color][b][color=#33383D]十一、颗粒性管型[/color][/b][color=#33383D]是由肾上皮细胞的分解产物互相粘集而形成,较粗短,内含有颗粒,见于慢性肾炎或肾脏变性。[/color][b][color=#33383D]十二、蜡样管型[/color][/b][color=#33383D]一般较粗,有蜡样光泽,末端往往折断呈正方形。边缘常有缺口,近似玻璃样管型,但色较灰暗。尿中出现蜡样管型,表明肾小管有严重变性和坏死,表示预后不良,见于重症慢性肾炎。[/color][color=#33383D] [/color][color=#33383D]尿中无机沉渣检查在尿沉渣中有很多无机盐类结晶和非结品形物,各种结晶有其特有形状,但在奶牛疾病诊断上意义不大。[/color]
请各位高手发表一下看法:我用凯式微量定氮仪测蛋白,同一瓶消化液,容量瓶内的消化液已经应该均匀了,我都摇晃6次的,但在同一个时间段里测两个数据,结果不平行,请问是为什么啊?这种现象已经出现了100多次了,以前没这种情况的。最近一直为这个问题烦恼啊
随着常规分子生物学研究的深入,越来越多的生物实验室日常需要测量的核酸、蛋白样品量也在不断地加大。传统的分光光度计虽然已经非常普及,但由于需要在测量后清洗比色杯,实际上消耗了不少宝贵的研究时间。同时,由于核酸样品的体积较小,即使使用昂贵的微量石英比色杯(容积数十ul左右),也往往需要对原始样品进行稀释,从而带来可能的操作偏差。对于一些稀有的样品来说,稀释即意味着测量后无法回收,同样也会对后续研究带来更高成本。因此,无需比色杯,仅需数ul即可测定样品浓度的超微量分光光度计现在受到很多实验室的关注和欢迎。NanoVue是GE Healthcare公司于2008年最新推出超微量分光光度计。GE Healthcare公司的分光光度计品牌Ultrospec和GeneQuant在市场上已经有了十多年的历史,在用户中有着很好的信誉和口碑。NanoVue在该系列仪器的基础上延续了出众的检测性能,同时大大改进了检测的光路设计,通过专利的检测技术使检测样品的体积最小仅需0.5ul, 190-1100nm的宽范围连续波长设计较市场上同类仪器宽了一倍左右,使得能够轻松检测核酸、蛋白样品和Cydye荧光染料标记物的浓度。仪器内置了RNA、DNA 和寡核苷酸浓度和纯度测定方法;寡核苷酸转换因子,分子量,理论Tm计算功能;包括一般紫外、Bradford、 Biuret、BCA、Lowry的蛋白定量法;以及波长扫描,动力学,标准曲线,多波长测定等扩展功能。除了强大的检测性能外,NanoVue还在许多操作性能上进行了精心的设计,能够给用户带来众多全新的体验,主要包括以下方面:1 唯一不需电脑就能在仪器面板上直接检测的超微量分光光度计。仪器配置了一块大面积高分辨率的背光液晶屏和操作面板。相对于点样后转去电脑控制,再回去仪器清洁的过程,NanoVue不仅节省了购买电脑的支出,同时点样,按键测量,擦拭一气呵成。可以通过整合的打印机直接打印分析数据。当然,如果需要在电脑上保存分析数据,NanoVue同样支持USB或蓝牙连接电脑,将珍贵的实验数据永久记录下来。2 通过特别设计的疏水点样表面,能够很容易回收稀有的样品,并且有效避免多个测量间的样品交叉污染,提高测量的准确性。NanoVue的点样表面具有专利设计,表面坚固而且光滑。不管是样品回收还是测量完直接擦去都非常简易,不会有任何样品粘附残留在点样面上。而且点样面耐用性也非常出众,保守估计可以至少测量20000个样品以上。3 最快的检测速度。NanoVue通过独特的光路设计,使得所有样品的检测都能够在5秒钟之内完成,把微量分光光度计的测量时间提升到了一个新的高度。而且NanoVue具备即开即用功能,避免了许多分光光度计开机需要预热的麻烦,真正做到省时省力。由此可见,NanoVue不仅性能出众,其易用性和灵活性也是目前超微量分光光度计中出类拔萃的。通过试用NanoVue的体验,使用者可以完全感受到,原来,核酸蛋白的测定可以这么简单,这么快速!目前,NanoVue已经正式在中国推出,欲了解更多的信息,请直接联系GE公司。
盐酸芬戈莫德在大鼠体内代谢的尿液及胆汁样品分析芬戈莫德最初是由冬虫夏草(子囊菌亚门赤僵菌)培养液中提取的抗生素成分经化学修饰后合成的免疫抑制剂。药物及实验动物:盐酸芬戈莫德为本所研制,实验用大鼠为Wistar雄性大鼠,6-8周龄,体重范围约200-250g/只,本所实验中心提供;大鼠代谢笼为苏州动物实验仪器厂产品。色谱条件色谱柱:Acquity BEH C18 (100mm×2.1mm,1.7μm)流动相:A:水(0.05%TFA)B:乙腈(0.05%TFA)质谱条件结果分析:通过比较大鼠灌胃盐酸芬戈莫德溶液后收集的尿液样品、空白尿液样品及分到的代谢产物的高分辨质谱和多级质谱数据,在给药后的尿液中共鉴定出了8个代谢产物(如下图)所有代谢产物的高分辨质谱数据的准确度均小于1PPm。通过比较大鼠灌胃盐酸芬戈莫德溶液后收集的胆汁样品、空白胆汁样品及分到的代谢产物的高分辨质谱和多级质谱数据,在给药后的胆汁中共推测出了4个代谢产物(如下图)。所有代谢产物的高分辨质谱数据的准确度均小于1PPm。结果与讨论:经过对于给药后大鼠尿液及胆汁样品分析,初步推测盐酸芬戈莫德在大鼠体内的代谢产物有8种。
大家讨论一下:血浆样品处理方法的前处理方法哪个好,比如液液萃取,还是沉淀蛋白法好?有听说血浆样品用沉淀蛋白法比较好,胆汁尿液之类的样品用液液萃取法比较多,大家有什么经验分享一下吧
[center]微量氧气分析的理想选择 T10便携式/台式微量氧分析仪[/center]美国EXT公司的T10便携式微量氧分析仪采用最新技术的微量氧气分析技术,独特的一体化样品处理、调节、检测的气路设计,使您能够快速准确的得到您想要的氧气含量数据,有效控制您的产品品质!适合应用的气体领域氢气、氮气、氩气、氦气中微量氧气分析空分制氮、化工流程微量氧气热处理炉和电子行业中微量氧气分析各种工业气体、高纯气体及干燥压缩空气中的氧气含量分析独特优点传感器完全免维护传感器反应快速,寿命超长更换传感器非常方便校正简单,快速内置充电电池和外部220V电源供应,适合各种场合使用牢固的结构,结实耐用仪器提手,适合携带
牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息: 功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。 乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。 优点与特点: 准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。 快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。 适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。 在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。 综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]
[font=宋体] 一台优利特[/font]Uritest-200A[font=宋体]尿液分析仪,使了[/font]10[font=宋体]多年,真是耐用。但还是经不住岁月的磨练,液晶屏幕上出现数条缺线故障,检测功能是正常的。拆机检修一下。[/font][font=宋体][b]一、机器情况[/b][/font][font=宋体]优利特[/font]Uritest-200A[font=宋体]尿液分析仪,采用干化学法,是一款经典的尿液分析仪。外观见下图:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010039232007_2338_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]仪器后部,有电源插座、打印机接口、计算机数据接口:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010039457503_4833_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]仪器使用[/font]URIT 11A[font=宋体]尿液试纸,可以检测人尿中的白细胞、蛋白质、酮体、隐血等[/font]11[font=宋体]项指标:[/font][img=,690,614]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010040073659_2804_1807987_3.jpg!w690x614.jpg[/img][font=宋体]故障现象,液晶屏幕有数条缺线故障,上部比较集中,影响观看,担心故障进一步恶化,检修一下。[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010040274231_1077_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体][b]二、拆机[/b][/font][font=宋体]卸下仪器后部[/font]2[font=宋体]颗固定螺丝:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010040570531_1340_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]再卸下仪器底部箭头所指[/font]2[font=宋体]颗固定螺丝,其它螺丝不要去动:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010041227667_1611_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]轻松分开仪器,内部很干净整洁。仪器上盖内部固定显示电路板,外观没有污染等异常现象:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010041516806_3528_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]仪器型号太老,显示电路板上元件用得比较多,机器做工足。仔细看,固定螺丝上都点有红漆,没有维修过:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010042167925_9467_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]取下显示电路板,看见液晶屏是用黑漆铁框架固定的,打扫一下灰尘后装回去:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010043394589_1359_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体][b]三、故障原因分析及处理[/b][/font][font=宋体]液晶显示屏用黑漆铁框架固定在显示电路板上,但坑爹的是,见下图红箭头处,黑漆铁框架[/font]10[font=宋体]个脚桩穿过[/font]PCB[font=宋体]板后,扭一下固定,只要拆一、二次就会断掉。这种结构是不让维修啊![/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010044173142_1865_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]由于仪器有[/font]10[font=宋体]多年历史了,考虑到液晶屏导电橡胶条老化,很可能拆开后就很难复原,就不拆下液晶屏。用手指逐步按压一下电路板两边,用尖嘴钳将黑漆铁框架[/font]10[font=宋体]个脚桩原地左右扭一下(幅度不能大,防止扭断),使得液晶屏与电路板接触加强一下:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010044472103_3866_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010046519148_8729_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]装还原,开机,故障现象减轻,还有三条缺线,问题不大,用用再说。见下图:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010048225239_7123_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体][b]小结:[/b]本故障是仪器使用时间长,液晶显示屏与显示电路板接触不良引起,只要清理一下液晶显示屏导电橡胶条与电路板金手指的接触点,一般都能解决。但本仪器液晶显示屏不是用螺丝固定在电路板上,而是铁皮桩脚扭一下固定,稍不注意,不好复原。在缺线故障不太严重情况下,只是用力加强一下液晶屏与电路板接触。如果故障严重,也只能拆下黑漆铁框架进行处理,千万注意对铁皮桩脚不要用力过度使其折断。[/font]
大家好,我现在想用高效液相色谱和质谱联用测定有关尿样中的代谢产物,考虑到尿液中的蛋白是最大的干扰,请教一下各位高手如何去除其中的蛋白啊。谢谢大家![em61]
便携式氩中微量氮分析仪采购咨询!有此意愿很久了,看看有谁家有。
最近看到加拿大CA公司的微量氮分析仪,觉得很好,不知道它采用的光源是ICP的还是交流高压的,请高手指教。鄙人十分感谢!
今天遇到一台SYSTECH 911微量氧分析仪这样的现象:通高纯氮半小时示值零点零三,通10ppm标准气四小时示值十七,且变化缓慢,电池寿命80%,才用半年,请大家帮忙分析分析,谢谢
请教各位,我们在用半微量蒸馏装置做蛋白空白时需要半个多小时硼酸才变绿,这样对蛋白的结果有影响吗?而且我们做的结果要比别的公司做的结果偏低,也不知道是什么原因,请各位赐教一下,在此先谢了
我公司有台上海英盛的EN-500微量氧分析仪,好像默认是测以氮为背景气的当中微量氧的分析,请问,可不可以用来测氩中氧的分析
各位老师,求助尿液的生物分析有什么需要注意的。液液萃取,回收率只有1%,如何能提高回收率呢。目前主要存在几个问题:1.基质效应,基质干扰太严重 2.回收率太低。求助
褚福亮,王福生, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室 北京市 100039项目负责人 王福生, 100039 ,北京市丰台路26号, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室. fswang@public.bta.net.cn电话:010-66933332 传真:010-63831870收稿日期 2002-08-15 接受日期 2002-09-03摘要新近广泛应用蛋白质芯片(ProteinChipâ Array)系统成功鉴定出了一些重要疾病(如肿瘤和危害性较大的传染病)新的、特异性的生物标记(biomarkers),后者不仅在生物医学的基础方面具有重要的科学价值,而且在临床疾病的诊断、治疗和预防发挥重要的指导作用,显示了良好的发展前景.本文就表面增强的激光解析电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.此外,我们就蛋白质谱分析技术在病毒性肝炎、肝硬化和肝癌等一系列肝病方面的应用策略和前景进行了分析.褚福亮,王福生. 蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用.世界华人消化杂志 2002 10(12):1431-14350 引言人类基因组计划已经进入后基因组时代-即功能基因组时代[1],作为基因功能的直接体现者-蛋白质,及其之间的相互作用越来越引起基础和临床科学家们的关注[2-6] .因为要彻底了解生命的本质,只把基因测出来还是不够的,还必须要了解其在生物生长、发育、衰老和整个生命过程中的功能、不同蛋白质之间的相互作用以及他们与疾病发生、发展和转化的规律[7-14] .正因为如此,有关上述问题的蛋白质组学研究成了今天生命科学最重要的焦点之一[15] .为了阐明蛋白质在上述生命现象中的作用和相关机制,人们设计了许多新的方法技术,如:二维电泳、质谱分析、微距阵列、酵母双杂交和噬菌体展示等,这些方法在一些特定的情况下,虽然显示出了他们各自不同的优点,但是同样也存在着较大的局限性,难以开展大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质等方面的分析,因而设计更全面、同时研究多种蛋白质相互作用的技术,在功能基因组和蛋白组学的研究中建立一个更有效的技术平台,成为本领域中优先关注的问题[16] .近来,美国Ciphergen(赛弗吉)公司研制的ProteinChipâ Array的仪器,并建立了一种新的蛋白质飞行质谱-表面增强的激光解析离子化-飞行时间-质谱(surface-enhanced laser desorption/inionation-time of flight-mass spectra, SELDI-TOF-MS),已取得可喜的进展,筛选出了许多与疾病相关的新型生物标志,不仅为临床疾病的诊断和治疗等提供了新的选择,而且在基础科学、新药研制和疾病预防等方面具有广泛的应用前景[16-18] .本文就SELDI-TOF-MS相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.1 ProteinChipâ Array系统和SELDI-TOF-MS的特点1.1 蛋白质芯片系统的组成和原理 蛋白质芯片系统由三部分组成:蛋白质芯片、芯片阅读器和芯片软件.供研究用芯片上有6-10芯池,不同的芯片表面上的化学物质不同,芯片表面分为两大类:一类为化学类表面,包括经典的色谱分析表面,如:结合普通蛋白质的正相表面,用于反相捕获的疏水表面,阴阳离子交换表面和捕获金属结合蛋白的静态金属亲合捕获表面;另一类称为生物类,特定的蛋白质共价结合于预先活化的表面阵列,可以用来研究传统的抗体一抗原反应,DNA和蛋白质作用,受体、配体作用和其他的一些分子之间的相互作用[19] . 根据检测目的不同,可以选用不同的芯片,或者自己设计芯片.将样本和对照点到芯池上以后,经过一段时间的结合反应,用缓冲液或水洗去一些不结合的非特异分子,再加上能量吸收分子(energy absorbing molelule,EAM)溶液,使样本固定在芯片表面.当溶液干燥后,一个含有分析物和大量能量吸收分子“晶体”就形成了.能量吸收分子对于电离来说非常重要.经过以上步骤,就可经把芯片放到芯片阅读器中进行质谱分析. 在阅读器的固定激光束下,芯片上、下移动,使样本上每一个特定点都被“读”到.激光束的每一次闪光释放的能量都聚集在该区一个非常小的点上(focused laser beam,聚焦激光束).这样,每个区都含有丰富的,可寻址(addressable)的位置.蛋白质芯片处理软件精确控制激光寻读过程.当样本受到激发,就开始电离和解除吸附.不同质量的带电离子在电场中飞行的时间长短不同,计算检测到的不同时间,就可以得出质量电荷比,把他输入电脑,形成图像[19].Ball et al [20]采用一种称为人工神经网络(artifical neural network,ANN)的算法处理出现的成千上万的峰,鉴定出三个分子量为13 454、13 457和14 278的生物标记分子,使疾病预测率达到97.1 %.1.2 ProteinChipâ Array芯片和SELDI-TOF-MS的特点 新型蛋白芯片与以往的蛋白芯片不同之处:SELDI-TOF-MS,他是在MALDI(matrix-assisted laser desorption/inionation)[21,22]基础上,改进后实行表面增强的飞行质谱.SELDI-TOF-MS优于MALDI-TOF表现为他不会破坏蛋白质,或使样本与可溶的基质共结晶来产生质谱信号.对SELDI-TOF来说,可以直接将血清、尿液、组织抽取物等不需处理直接点样检测[40] 由于一部分非特异结合的分析物被洗去,因而出现的质峰非常一致,有利于后期分析[23,24] . 与二维电泳相比:二维电泳分析蛋白质的分子量在30 KDa以上时电泳图谱较清楚,对在组织抽提物中占很大比例的低丰度的蛋白质不能被检出;其次,二维电泳胶上的蛋白质斑点很大一部分包含一种以上的蛋白质;而且,二维电泳耗时长,工作量大,对象染色转移等技术要求高,不能完全实现自动化.而SELDI-TOF在200 Da-500 KDa区间都可以给出很好的质谱,对一个样本的分析在几十分钟内就可以完成[19],处理的信息量远远大于二维电泳;对于低丰度物质,即使浓度仅attomole(10-18)的分子,只要与表面探针结合,就可以检测到,这也是二维电泳所不具备的[24,25] . 对于微距阵蛋白芯片来说,需要一种不破坏折叠的蛋白质构象的固定技术,再与另外的蛋白质反应,经检测莹光来观察蛋白质之间的作用[26] .而基于SELDI-TOF-MS的ProteinChip分析蛋白质不需溶解、不需染色、廉价、针对性强. 因而蛋白质芯片仪具有以下优势:(1)可直接使用粗样本,如:血清、尿液、细胞抽提物等[27] .(2)使大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质成为可能;(3)他不仅可发现一种蛋白质或生物标记分子,而且还可以发现不同的多种方式的组合蛋白质谱,可能与某种疾病有关[28] (4)推动基因组学发展,验证基因组学方面的变化,基于蛋白质特点发现新的基因.可以推测疾病状态下,基因启动何以与正常状态下不同,受到那些因素的影响,从而跟踪基因的变化[2,14,15] . 其存在的问题:对于不同的样本,根据检测的目标采取或者设计几种芯片,理论上可以把所有的相同性质蛋白质捕获,但是实际上仍有少量的分子没与表面探针结合.使用SELDI-TOF-MS,仅能给出蛋白质的分子量,不能给出C端、N端的序列,也没法知道蛋白质的构型,因此需要将蛋白质充分纯化后,用蛋白酶消化芯片上的蛋白质,分析肽段,再用生物信息学方法鉴定蛋白质序列[18,24] .另外,在国内,该芯片费用较高,分析质谱需要大量后续工作支持.
分析方法测某些元素并列为标准。国产电化学仪器生产厂更多,但水平高低仪器性能的差别影响人们对分析方法的评价,以至于有人认为电化学仪器测量的误差大不稳定,其实这是一种偏见。早在上世纪六十年代,我国开发成功极谱仪,在地质冶金及基础实验室广泛使用,由于价格适应国情、重复性好、灵敏度适应要求,获得了广泛的应用和认可。随着环保意识的增加,人们对使用汞电极有看法,但实际上汞作为电极是在封闭的系统内运行,就如血压计并不与人与大气接触。极谱分析在一些行业领域里仍具有不可取代的位置,至今还在使用并列为多项国标和行业、地方标准,这才真正代表了电化学分析仪器的水平。 电化学分析技术可用于微量分析也可以用于痕量分析,在人体生物材料中,锌、铁等为微量元素,铅等物质为痕量元素。测微量元素可使用极谱法,测铅、镉等元素也可以使用极谱法(样品量多时)或溶出法(样品量少时)。溶出法又分电位溶出和伏安溶出,两种方法各有特长。极谱法测微量元素如铁、钙、铜等有特长,测铅、镉等痕量元素用溶出法较适合。因此一个电化学微量元素分析仪应具备多种分析方法,根据各种元素的特点,用最佳的方法进行检测,才能保证效果。 国产仪器使用极谱法时,只能用线性扫描极谱法即单扫极谱法,这是因为受滴汞周期的限制,必须快速扫描,一般在两秒钟结束,加上滴汞电极产生所需的时间,一般用时7秒,超出这个时间汞滴将自行滴落,检测将被迫中断,这不是先进而是一种无奈,被无法控制的滴汞周期所左右,这种电极毫无技术含量,一根玻璃毛细管绑上一段塑料管,上端再绑一个汞池,用时高高挂上去,靠汞的重力形成滴汞电极,不用时拿下来降低重力停止滴汞。如果不放下来就不停的滴汞,消耗很快。上世纪二十年代捷克化学家诺贝尔化学奖得主海洛夫斯基发明极谱仪时就采用这种滴汞电极,至今已80余年发达国家已淘汰。由于毛细管极细(内径只有20-30um,比头发至少细一半),极易堵塞,经常需更换毛细管,这对非专业的仪器使用者是一件非常头痛的事情。有的厂家将这种劣势描绘成只需数秒做一次分析,这是一种非常有意思的宣传方式,就像屡战屡败被说成屡败屡战一样。如果和使用一种称为静汞电极的进行分析就完全没有这些问题,工作过程想快就快,想慢就慢,而且慢扫描分析重现性好、分辨率高,比快速扫描更好,只是这种技术只有我公司产品才配备,这种电极可控制且不堵塞、消耗少、灵敏度高、重复性好。与常规滴汞电极比较,这种电极具有极大的技术优势。过去只有进口高档仪器才配备,我公司的仪器普遍装备了这种电极。 国内生产此类仪器的生产商山东较多,有多家厂商的技术源自一处,现在仍然继续着当年许建民开拓的业务并在其中受益。与昔日不同之处都使用了PC机来操控仪器,也是与时俱进,但原创技术仍是过去一套、没有新的创新点,PC机的使用反而暴露出重复性不好,变异系数大技术有硬伤等问题,但由于创新和解决问题的能力有限,只能模仿而无力创新,明明看到问题却无力解决。而我们的技术在不断的发展和创新,成为别人效仿的对象,例如当我公司推出静汞电极后,也有不止一家企业效仿,但不成功。当推出使用液晶显示器一体化仪器后,又有人跟风,有的技术由于专利保护,只能看而不能仿制,随着时间的推移,我们不断有新技术推出,在这个领域技术差距将越来越大,在这个领域我们是创新者是领先者。
自20世纪90年代中期以来,欧美等奶业发达国家将牛奶中尿素氮(MUN)含量的检测作为牛群改良计划(DHI)中必备的检测项目。最近几年来,随着中国奶牛集约化水平不断提高,以奶牛生产性能测定(DHI)和牛场管理软件为代表的先进的管理手段应用而生。应用DHI对整个牛群的产奶量、胎次、乳脂、乳蛋白、尿素氮、酮病、体细胞等进行测试,并导入相应的软件中进行分析,为牛场提供数字化的DHI报告,为牛场的饲养管理提供有效帮助。虽然DHI报告中乳尿素氮(MUN)作为重要的检测指标,但从全国来看,参测DHI的牧场不到20%,大多数牧场仍然没有尿素氮的数据。所以,开发一种方便快捷的尿素氮测定仪显得尤为迫切。那么牛奶中的尿素氮又是怎么产生的呢?奶牛日粮营养一般由蛋白和能量构成,日粮蛋白分为瘤胃降解蛋白(RDP)和瘤胃非降解蛋白(RUP)。瘤胃降解蛋白经瘤胃细菌水解为肽和氨基酸。氨基酸进一步降解为有机酸、二氧化碳和氨,氨能被瘤胃细菌利用合成蛋白质[sup][/sup]。如果瘤胃中RDP含量过高,生成氨过量或释放的速度太快,瘤胃细菌则无法及时有效地利用所有生成的氨。而氨是有毒的,过量的氨通过瘤胃壁进入血液,随着血液循环到达肝脏形成尿素,尿素是无毒的,通过尿液排出或再通过唾液循环至瘤胃。在这个过程中,尿素很容易扩散至体组织及体液当中,包括血液和奶。血液中的尿素氮(BUN)很容易释放到奶中,所以MUN与BUN的浓度高度相关,可以通过测定MUN来评估BUN。另外,在这一过程中,需要有足够的碳水化合物奶提供足够的能量,才能有效的合成瘤胃微生物蛋白。瘤胃中如果氨浓度过高,会导致瘤胃PH升高,增加瘤胃对氨的吸收率。结果,肝脏转化更多的氨为尿素,同时BUN和MUN水平也会相应升高。BUN不仅受粗蛋白摄入量影响,而且还受蛋白降解率影响。影响BUN的因素同样也影响MUN,如干物质采食量、能量摄入量、饮水量、肝脏及肾脏功能和奶产量。BUN在采食后变化较大,一般在采食后4-6H最高,在饲喂前BUN水平最低,而MUN相对稳定。通常在挤奶结束时,校正的奶样其MUN浓度非常接近BUN浓度。由于奶样较容易获得,因此通常以测定MUN来估计BUN。另外一条途径是瘤胃非降解蛋白(RUP)过量,其分解产生大量的氨基酸,而过量的氨基酸会转化为尿素。一部分尿素随着唾液循环回到瘤胃,另一部分通过尿液排出体外。这个过程中也有一部分自由扩散到奶中。因此,MUN既来源于瘤胃降解蛋白,也有一小部分可能来源于瘤胃非降解蛋白,通过测定MUN可以监控牛群瘤胃氮代谢的效率。MUN既然作为DHI检测中一项必检指标那么检测MUN的意义何在呢?我会从以下几个方面阐述一下检测牛奶中尿素氮含量对牛群的意义和影响。[b](1)乳尿素氮(MUN)可反映奶牛的营养状况[/b]营养因素是影响乳尿素氮(MUN)的主要因素。研究表明,乳尿素氮(MUN)与奶牛日粮蛋白质呈正相关,与能量水平呈负相关,当日粮粗蛋白(CP)水平的差异小于1.0%时,可对乳尿素氮(MUN)产生显著影响。[b](2)预测尿液中氮(UN)排泄水平[/b]当奶牛日粮中氮摄入量(NI)高于需要时,过量的氮不能被奶牛吸收而要被排出体外,成为奶牛行业中对环境最大的氮污染源。由此可知,确定奶牛的氮的排泄量的采取措施治理奶牛场污染的前提条件。奶牛氮的排出主要有三个途径,一是尿液中氮(UN),二是粪便中氮(FN),三是乳中的氮(MN),其中尿液中的氮(UN)对环境的影响最大,采用全尿液的方法估测尿液中氮(UN)排泄量,费时费力,难以得到广泛应用。所以,通过测定乳尿素氮(MUN)来预测尿液中氮的排泄水平,有着非常重要的现实意义。日粮中粗蛋白(CP)含量是决定尿液中氮(UN)的主要因素。Burgos研究表明,奶牛日粮中蛋白含量从15%提高到21%,尿液中氮(UN)含量直线上升。Castillo等研究表明,氮摄入量(NI)超过400g/d时,摄入量增加51%,尿液中氮(UN)排泄量增加273%,400g/d是氮摄入量(NI)的一个临界点,在这个点的前后,氮的排除有着显著的差异。氮摄入量(NI)低于400g/d时,奶牛体内过多的氮主要通过粪便排出。而当氮摄入量(NI)大于400g/d时,尿液排泄成为主要的排泄途径。英国奶牛营养体系中,氮摄入量(NI)为400g/d是整个泌乳期平均产奶量20-25kg/d的奶牛蛋白质的最佳需要量,此时蛋白质的利用效果也最高。[b][b](3)用于监控奶牛繁殖性能[/b][/b]国内外文献研究表明,乳尿素氮(MUN)和繁殖率之间存在着显著的负相关性。Guo等对713个奶牛场10271头奶牛的数据进行分析,发现了乳尿素氮(MUN)与一次受胎率呈负相关,乳尿素氮(MUN)升高10mg/dL,受胎率降低2%-4%[sup][/sup]。Arunvipas等从加拿大375个奶牛场的繁殖数据分析得出,乳尿素氮(MUN)从10mg/dL升高到20mg/dL时,一次配种受胎率降低了13.9%。Butler等研究表明,高产奶牛血浆尿素氮(PUN)高于19mg/dL或乳尿素氮(MUN)高于17mg/dL,可导致繁殖率降低。也有研究表明,人工受精当天血清尿素氮(SUN)的浓度超过20mg/dL,受胎率就会降低。Carlsson等认为乳尿素氮(MUN)值低于7mg/dL或者高于17.6mg/dL才会有副作用。也有学者并未发现较高的乳尿素氮(MUN)或血清尿素氮(SUN)与低繁殖率之间的关系。这可能与检测的仪器不同,方法不同所产生的误差有一定的关系。下面是用电化学方法检测的乳尿素氮数值:[align=center][img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709291123_01_2862195_3.jpg[/img][/align][align=left]Canfield等研究表明,体内过高的尿素氮对精子、卵子和胚胎有毒害作用,可导致繁殖率降低。Bulter等研究表明,乳尿素氮(MUN)影响受胎率的机理可能是,体内过多的尿素氮将使子宫内环境的PH值降低,减少前列腺素的产生,影响子宫内液体的尿素,以及微量元素镁、钾、磷和锌的浓度,使促黄体素和卵巢受体结合,进一步导致孕酮浓度和繁殖力的下降。[/align][align=left][/align][align=left]众多流行病学调查结果表明,奶牛日粮中蛋白质水平在奶牛繁殖性能方面有着重要作用,增加奶牛日粮可降解蛋白质水平,可提高血液及乳尿素氮(MUN)水平,而尿素氮浓度超过一定水平后就会对奶牛受胎产生不利影响。近几年来,很多研究揭示了这种流行病学背后的病理生理学原因,主要因为高产奶牛肝脏代谢负荷大,脱氨基反应消耗了大量的能量,加重了能量负平衡。蛋白分解代谢的直接副产物可能导致卵母细胞和胚胎中毒。改变了子宫液的离子组成,妨碍排卵后子宫PH值的自然增加。影响子宫内膜组织分泌前列腺素。影响精子活力。以上原因可能导致奶牛受胎率降低。[/align][align=left][/align][align=left]怎样可以快速检测牛奶中尿素氮呢?目前世界上对于尿素氮的检测大多都是采用仪器分析完成的,通用的方法有采用红外线和湿化学两种仪器方法。尿素是牛奶中含量很小但非常重要的指标,每100升的典型牛奶中有3600克的脂肪、3200克的蛋白却仅有12克的尿素,如此小的含量使得对它的准确检测比对脂肪或蛋白的准确检测要困难得多。[/align][align=left]另外尿素氮检测有许多需要注意的地方。由于MUN浓度与瘤胃中氨浓度密切相关,而MUN浓度在早晨和晚间会有较大差异。这也取决于各个牧场的饲喂体系。如果我们发现早晚MUN的差异较大,则建议增加饲喂次数,利用DHI测试体系还可以观察到不同挤奶次数间MUN的差异。就奶牛日粮的蛋白质-能量平衡而言,目前还有许多牧场的饲养管理尚有值得改进的地方。总之,牛奶尿素氮是牧场经营管理的一项重要指标,只有通过对它进行检测、分析和应用,才能利用它来提高牛场的经营效益、增加收入。[/align]