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荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。 荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。 荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计,自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧 光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计,配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。
各种型号的超微量分光光度计基本结构都相同,由如下五种部分组成:1)光源(钨灯、卤钨灯,氢弧灯,氘灯、氙灯或激光光源);2)单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅);3)样品吸收池;4)检测系统(光电池、光电管、光电倍增管);5)信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表、示波器、微处理机显像管)。
随着各行业技术发展,除了使用光谱学原理同类的仪器([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原吸[/color][/url],荧光等),传统的分光光度计也在不断进步。2004年倪一,黄梅珍等比较全面地综述了当时分光光度计的发展状况,但根据近几年的情况,除了全息闪耀光栅、PDA/CCD、发光二极管(LED) 光源、组合式氘灯和钨灯、双单色器分光、光纤、模块化设计和制造、以及高级软件,我认为有些技术也将对分光光度计的发展产生不可忽视的推动,提出来供仪器开发人员参考。1. 光学振镜。这是一种高速扫描的器件,在激光打标设备上早已成熟应用。它机构简单体积小(根本不需要一大堆什么正弦机构之类),定位精度高(定位角偏差约2秒),扫描速度极快(ms级),成本也并不高。据有关资料介绍,核聚变中高速多波段紫外光谱检测已有使用。光学振镜是一种很成熟的光路扫描器件,现在一些双光束分光光度计中有应用,主要用于光路切换,速度极快。工作时步进动作看上去象在高速振动,大概因此叫振镜吧。最成熟的应用是激光扫描,象舞台激光图案显示等演出场合。主贴下面的图片就是它的外形和驱动电路。本帖下面的图是它用于激光打标的原理图。光学振镜[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/01/200901231633_130272_1633752_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191651_625531_1633752_3.jpg[/img]2. 闪光型氙灯。氙灯发光效率高,强度大,而且光谱范围宽,包括紫外、可见和近红外,一个灯可全面覆盖。使用期长,闪光次数可在数十万次到一百万次,一般可使用到仪器同期报废为止,免去通常换灯泡的麻烦。闪光型氙灯光源,就是高稳定性的闪光灯,和照相机上的类似,使用寿命特长。我们有一台该类光源的分光型测色仪(透射、反射都能测),十年多,用了近10万次测试。现在用标准样校验,基本如故。仪器的电路板倒坏过一次,但光源依旧很好。3. 光纤探头。我已在另外几个帖子中提到的几种光线探头,可很方便地在各种场合使用。除此以外,现在已有人在开发真正微型的光纤探头,可直接插入活体细胞中,检测药物浓度的变化情况。这对药物在生物体内的分布及富集过程研究有重要的意义。