单波长棱镜

请教：在高效液相的检测器中，有双波长、双通道与单波长、单通道等不同的类型，双波长与双通道是不是同一个概念？单波长与单通道是不是同一概念？双与单比较有什么优势？谢谢！

请教一下，为什么国标测总氮要用220,275双波长测试，正常单波长不就可以测了吗？

总氮测定是两个波长，在220和275两个波长测定时，是先把一个波长测完再测另一个波长呢？还是可以一个样品同时把两个波长测完？

在用酶联免疫法测定抗原或抗体时，不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式，并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择，对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解，并且实际工作中也出现了使用单波长检测导致抗HCV部分弱阳性的漏检。因此，本人就酶标仪在选择单、双波长使用方面谈谈个人的体会，供同道参考。一 材料和方法1.材料 由上海科华公司提供的乙肝表面抗原测定试剂盒；eppendorf 20-20ul的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]。2.仪器 上海科华公司的ST-360酶标仪和BIO-RAD 550酶标仪。3.方法 底物液配制：底物液A、B各5ml混合，加入微量酶标记物，再加入5ml终止液，呈微黄色，混匀待用；利用上海科华公司提供的乙肝表面抗原试剂盒的酶标板，用94孔中准确加入150ul配制好的上述底物液，另2孔中加入150ul已终止的空白底物液作空白。在BIO-RAD 550酶标仪上分别进行450nm单波长和450nm及655nm（无630nm）的双波长检测，在ST-360上分别进行450nm单波长和450nm及630nm的双波长检测吸光度各两次。二　结果　　1.分别对所得结果进行统计，发现单、双波长测定结果有较大的差异，双波长测定结果的CV值远小于单波长测定，结果见表1。2.对ST-360两次重复测定结果进行分析，结果基本一致，见表2。表1酶标板吸光度在两台酶标仪上的测定统计结果酶标仪 BIO-RAD550 ST-360 波长 450nm 450nm+655nm 450nm 450nm+630nm 最小值 0.125 0.126 0.130 0.131 最大值 0.154 0.139 0.153 0.141 均值 0.1356 0.1329 0.1399 0.1361 标准差 0.00671 0.00267 0.00467 0.00247 CV（%） 4.94 2.01 3.34 1.82 最大值/最小值 1.232 1.103 1.177 1.076 表2 ST-360酶标仪两次吸光度测定统计结果波长 450mnm 450nm+630nm 1 2 1 2 最小值 0.130 0.129 0.131 0.131 最大值 0.153 0.152 0.141 0.141 均值 0.1399 0.1391 0.1361 0.13711 标准差 0.00467 0.00495 0.00247 0.00229 CV（%） 3.34 3.56 1.82 1.67 三　讨论　　1.酶标仪与分光光度计、自动生化分析仪等的吸光度测定有所不同，一般分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路，但测定原理相同，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。2.酶标仪在用单波长测定吸光度时，除受到测定干扰（样本的浊度、干扰色等）和电路干扰（包括噪音、漂移、电压等）等因素外，受液体表面张力的影响也很大。在检测过程中，由于液体表面张力的作用，液体的表面不是一个平面，而是形成一个凹面，从侧面看似凹透镜，这样不可避免会影响光路的正常通过。由于凹液面的影响，光线在通过液体时，除正常被液体吸收一部分外，尚有部分被折射和反射（如光线通过凹透镜那样），影响吸光度的检测。而酶标仪使用的又是通过光导纤维传播的点光源，如果每次能在同一部位检测，吸光度的重复性将得到保证，但由于机械运动等造成的误差，不可能保证每孔都在相同部位被检测，因此造成了孔与孔之间有一定的差异。结果见表1，整块板单波长检测的CV在3%以上，吸光度最高值和最低值的相对误差达17%以上。3.在双波长测定中，减少了测定干扰和电路干扰，因此测定结果明显好转，结果见表1，整块板样本的CV在2%以下。ST-360在进行稳定性观察中，如表2所示，两次检测结果基本一致，这表明ST-360的稳定性较好。同时，从表1也可以看到，科华公司生产的ST-360与BIO-RAD 550的检测结果一致，两者的检测性能基本相同。4.由于液体表面张力的不同，导致单波长测定时的误差较大。并且用不同的洗涤剂会影响到最后加入底物和终止液后的液面情况，用加入表面活性剂的洗涤液清洗后，形成的液面更凹，对单波长检测的影响更大，并且与表面活性剂的浓度成正比。而且中性蒸馏水洗涤后，单、双波长检测的结果基本一致。5.在酶联免疫法测定抗原抗体中，由于所使用的底物不论是邻苯二胺（OPD）-H2O2，还是四甲基联苯胺（TMB）-H2O2，显色终止后，在630nm和655nm处的吸光度值都只有吸收峰处（492nm/450nm）吸光度值的1%以下，因此，利用双波长检测，不会影响检测灵敏度。建立在进行酶联免疫检测时，酶标仪比色应该首选双波长。这样可以提高临界值处标本的分析正确度，减少实验误差。

如果手头上没有标准滤光片比如镨铷滤光片，鈥玻璃，等等标准物质，你要是想马上判断下波长是不是基本准确，你会用什么方法呢？现在的单色器，一般有棱镜的和光栅的，那么是不是有不同的土方呢？

前天在一用户处检定一台721，波长和透射比准确度都合格，唯独杂散光高达25%。用棉签和无水酒精清洗棱镜和准直镜，并用镜片纸擦拭后，杂散光不到1%。记得有一位写过很多分光光度计修理文章的老师，介绍的最好的清洁剂并不是无水酒精，好象是50%乙醚和50%无水酒精吗？请版友指教！谢谢！

想问问各位大佬，在紫外分光测量中，有用单光束三波长的方法来测量吗？三种波长分别是测量波长，参考波长和混合介质的平均波长。请问这种测量方法有什么好处？能提供这种测量方法的基本原理吗？

低波长的光学背景低，高波长的光学背景高，你觉得对吗？

[color=#444444]HPLC液相色谱，要同时定量测定四种成分，但是其中有三种成分（儿茶素，原儿茶酸，没食子酸）的检测波长相接近大概在280左右，另一种成分（熊果酸）的检测波长大概在220左右，流动相为乙腈和水，单波长不能实现，想用双波长，请问大神们可以用双波长吗？双波长得出的结果图是两个，分析数据的时候怎么分析呀？？[/color]

请各位大虾们讨论讨论DAD检测器狭缝的作用，全波长190~900纳米通过流通池后进入狭缝，因为狭缝宽度远小于波长，会发生单狭缝衍射现象，衍射后波长的光是如何运行的？是发射到光栅上，由光栅上分光？还是发射的反光镜上，有衍射光谱反射到二极管上？为什么低宽度狭缝会提高分辨率？

[em07] 各位老师，您好！我用毛细管电泳测蛋白质的组成，紫外检测波长文献中有214nm，254nm等，这些波长如何确定，请指教。

那位指点一下，为何测总氮时要同时测两个波长？

采用紫外光度法测水质总氮，做曲线时发现，线性挺好，但每次做的都有较大差别。经分析，认为是做实验时。波长从220nm到275nm，每次都要调一遍，但由于紫外是短波，220nm和275nm总是不能和上次做实验的完全一样，我每次调的时候都很认真了，但是同事个高，总看着我的波长调的不到位，这还真不好解决呢，总不能一人做个曲线吧？

[em61] [em61] 请问丹参水提液的澄清度和色度的波长是多少？？

一台精科的721，我用镨铷滤光片调了529nm处的波长。然后计量局的来了， 检定300多nm处波长差-6nm，600多nm处+13nm。就是短波处，波长偏小，长波处波长偏长，529nm处波长没问题。不知道大家有什么调节方法吗？

在总氮的测定中，紫外分光光度计读数时，波长275nm处突然读出来的数是负值是怎么回事（测到一半才会的），这样测定结果可信度高不高？

单晶硅的透过波长是多少？我想把单晶硅打磨得很薄，这样的硅片的透过波长是多少？谢谢！

请问锌灯的波长范围是多少，是否有中心波长，锌灯的波谱在那里可以查到？敬请各位专家指点，谢谢！！

本人新手 测水样和做标准曲线的时候 在波长275处可以测得数据，可是在波长220处的测不到数据，显示达到极致。这是什么原因啊 怎么才能解决

仪器是Varian 的715，由于长时间未用，正在做波长校准现有以下问题，1、波长校准时无法通过，弹出‘无法检测到谱线’，是何原因2、用于波长校正的15种元素如果缺一种是否能通过3、用于波长校正的方法是否能自己修改，如可删除其中一种或多种元素4、用单标配15种元素校准液时大家是否遇到Mo的介质是H2SO4，从而会与Ba反应的问题，如何解决本人是刚刚接触ICP的菜鸟，一切都要从头学，老板还催的紧，总问我进度如何，感觉亚历山大，希望各位兄弟姐妹们不吝赐教。

近红外波长瓦斯浓度检测技术 检测在煤炭、化工、石油和其它工业，尤其在矿物质的开采中极为重要。瓦斯气体是一种可燃、可爆性气体，其爆炸上限为１５Vol％，下限为5Vol％。 其引发的事故在矿山开采历史上造成了极大的危害。很久以来各国科学工作者对瓦斯浓度的测量作了不懈的努力。现已研制出的干式、湿式气敏元件、热电阻瓦斯传感器、半导体气敏元件等都在瓦斯浓度检测中起到了良好的作用，大大降低了瓦斯事故发生率。 近几年来，光导纤维传感技术在世界上逐渐兴起。光纤传感器具有一些常规传感器无可比拟的优点，如灵敏度高，响应速度快，动态范围大，防电磁干扰，超高绝缘，无源性，防燃防爆，适于远距离遥测，体积小,可灵活柔性挠曲等，很适于在恶劣和危险环境中应用，因而得到广泛重视。光纤瓦斯传感器的研究起步较晚，直到上世纪八十年代才有人报导了光纤瓦斯检测的实验。现在瓦斯检测的方法主要有两种，一是利用瓦斯气体的光谱吸收检测浓度；二是利用瓦斯浓度和折射率的关系用干涉法测折射率。 单波长吸收比较型 吸收法的基本原理均是基于光谱吸收，不同的物质具有不同特征吸收谱线。单波长吸收比较型属吸收光谱型传感器，根据Lambert定律：I=I0e-μcL 其中I，I0为吸收后和吸收前射线强度 μ为吸收系数 L为介质厚度 c为介质的浓度 从上式可以看出，根据透射和人射光强之比，可以得知气体的浓度。单波长吸收比较型的原理图见图１。 选择合适波长的光源。脉冲发生器使激光器发出脉冲光，或采用快速斩波器将连续光转变成脉冲光（斩波频率为数KHz），经透镜耦合进入光纤，并传输到远处放置的待测气体吸收盒，由气体吸收盒输出的光经接收光纤传回。干涉滤光片选取瓦斯吸收率最强的谱线，由检测器接收，经锁相放大器后送入计算机处理，根据强度的变化测量瓦斯浓度。 窄带谱线吸收型 瓦斯传感系统中，检测器所检测的光，其谱线宽度一般为0.02μm-0.1μm，而瓦斯气体的吸收谱线远窄于0.02μm。瓦斯在波长1.6μm-1.7μm的吸收谱线如下图所示。 由于检测谱线宽度远大于吸收谱线，即光谱中被吸收的成份很小，不利于高灵敏度检测。如果选择瓦斯吸收峰的窄带波长，则可获得大的检测对比度。但是选择单一波长则会由于模式噪声造成严重的干涉噪声，为了避免这个问题可以采用梳状滤波器来选择多个瓦斯峰位谱线，以降低光源的相干性，降低模式噪声。

向大家请教2个问题 1 我在做液相检测的时候 开始出的第一个峰比较正常 后面几个峰出现了负峰的情况。用的是310纳米的检测波长 流动相是 已腈：1/1000 的磷水溶液。 我想问一下一般出现这样的情况是什么问题造成的 （我换234纳米做检测波长就不会出现这样的问题） 2 还有就是检测波长与参比波长到底有什么区别 ，一般我们对于一个物质设置的波长比如上面的 310或者234纳米 到底是检测波长还是参比波长？ 原来也问过相似的问题只是回复的不是很清楚希望有经验的朋友能够帮助一下 说的详细点

来自奥地利、美国和瑞士的科学家组成的国际科研团队，研制出了首个中红外波长范围超级反射镜，有望用于测量微量温室气体或用于切割和焊接的工业激光器等领域。研究论文发表于最新一期《自然通讯》杂志。在可见光波长范围内，现有金属反射镜的反射率为99%。在近红外范围，专用反射镜涂层的反射率高达99.9997%；但迄今最好的中红外反射镜的反射率为99.99%，光子丢失率是近红外超反射镜的33倍。人们一直希望将超反射镜技术扩展到中红外领域，以促进很多领域取得重大进展，如测量与气候变化有关的微量气体、分析生物燃料，以及提升广泛应用于工业和医疗领域的切割激光器和激光手术刀的性能等。此次，研究团队研制出的中红外超反射镜的反射率高达99.99923%。为制造出中红外超级反射镜，研究团队结合传统薄膜涂层技术与新型半导体材料和方法，开发出一种新涂层工艺。为此，他们先研制出直径为25毫米的硅基板，然后让高反射半导体晶体结构在10厘米的砷化镓晶片上生长，接着将其分成更小的圆形反射镜，再将这些反射镜安装到硅基板上，得到了超级反射镜并证明了其性能。[b]研究人员指出，这款新型超反射镜的一个直接应用是显著提高中红外气体分析光学设备的灵敏度，可准确计量微量环境标志物，如一氧化碳等。[/b][来源：科技日报]

瓦斯气体浓度的检测在煤炭、化工、石油和其它工业，尤其在矿物质的开采中极为重要。瓦斯气体是一种可燃、可爆性气体，其爆炸上限为１５Vol％，下限为 5Vol％。 其引发的事故在矿山开采历史上造成了极大的危害。很久以来各国科学工作者对瓦斯浓度的测量作了不懈的努力。现已研制出的干式、湿式气敏元件、热电阻瓦斯传 感器、半导体气敏元件等都在瓦斯浓度检测中起到了良好的作用，大大降低了瓦斯事故发生率。 近几年来，光导纤维传感技术在世界上逐渐兴起。光纤传感器具有一些常规传感器无可比拟的优点，如灵敏度高，响应速度快，动态范围大，防电磁干扰，超高绝 缘，无源性，防燃防爆，适于远距离遥测，体积小,可灵活柔性挠曲等，很适于在恶劣和危险环境中应用，因而得到广泛重视。光纤瓦斯传感器的研究起步较晚，直 到上世纪八十年代才有人报导了光纤瓦斯检测的实验。现在瓦斯检测的方法主要有两种，一是利用瓦斯气体的光谱吸收检测浓度；二是利用瓦斯浓度和折射率的关系 用干涉法测折射率。 单波长吸收比较型 吸收法的基本原理均是基于光谱吸收，不同的物质具有不同特征吸收谱线。单波长吸收比较型属吸收光谱型传感器，根据Lambert定律：I=I0e-μcL 其中I，I0为吸收后和吸收前射线强度 μ为吸收系数 L为介质厚度 c为介质的浓度 从上式可以看出，根据透射和人射光强之比，可以得知气体的浓度。单波长吸收比较型的原理图见图１。 选择合适波长的光源。脉冲发生器使激光器发出脉冲光，或采用快速斩波器将连续光转变成脉冲光（斩波频率为数KHz），经透镜耦合进入光纤，并传输到远处放 置的待测气体吸收盒，由气体吸收盒输出的光经接收光纤传回。干涉滤光片选取瓦斯吸收率最强的谱线，由检测器接收，经锁相放大器后送入计算机处理，根据强度 的变化测量瓦斯浓度。 窄带谱线吸收型 瓦斯传感系统中，检测器所检测的光，其谱线宽度一般为0.02μm-0.1μm，而瓦斯气体的吸收谱线远窄于0.02μm。瓦斯在波长1.6μm-1.7μm的吸收谱线如下图所示。 由于检测谱线宽度远大于吸收谱线，即光谱中被吸收的成份很小，不利于高灵敏度检测。如果选择瓦斯吸收峰的窄带波长，则可获得大的检测对比度。但是选择单一 波长则会由于模式噪声造成严重的干涉噪声，为了避免这个问题可以采用梳状滤波器来选择多个瓦斯峰位谱线，以降低光源的相干性，降低模式噪声。

做总氮的空白220nm的波长在0.030以下，但是275nm的波长一直在0.010左右，220/275的比值大于20%了。实验用水用的是娃哈哈和屈成氏，过硫酸钾是默克的，氢氧化钠含氮量也是小于0.0005%的，全部都是新开的。实验玻璃器皿也用单独的1+9盐酸缸泡过了，石英皿也是新的，但是275的波长一直不行。消解完的空白也拿去其它公司测过，也是275nm波长过大。求助，求助。

为什么不同的厂家的波长不一样？一位版友说他们铝167.120单我查看我们瓦里安得是167.019两个波长为什么不同？谁帮忙解释一下！

我所在岗位所使用的是单波长色散荧光总硫分析仪，相信大家在网上随便一搜就能找到厂家，在这里我就不提及了！我在XRF板块也潜伏一阵子了，学到很多东西，但是针对自己的仪器还不知道怎么定位！在板块中也几乎罕见，我的仪器应该属于XRF，但是没有各位说的光谱图谱一类的参数。也有X光管，也有晶体但是并不存在角度问题。难道只是晶体单一吗？只是简单装样测试，直接出结果的，也不存在什么校正，只是使用到一定时间重新标定一下就可以了，所以涉及到的知识层面比较浅薄。请大家给我的仪器在板块中做个定位。谢谢！

[size=3][font=宋体]双波长：从光源发出的光经过两个单色器得到两束不同波长（[/font][font=宋体]λ1[/font][font=宋体]和λ2[/font][font=宋体]）的单色光，并借助切光器使[/font][font=宋体]λ1[/font][/size][font=宋体][size=3]和λ2交替通过同一洗手池，测定二波长下吸光度差值δA，求得待测组分含量的方法。[/size][/font][font=宋体][size=3]多波长紫外分光光度法[/size][/font][font=宋体][size=3]多波长分光光度法解决了单波长分光光度法中浊度背景干扰和共存物质的光谱干扰的问题。多波长分光光度法适用于浑浊样品，高浓度样品以及多组分混合物的定量分析。[/size][/font][size=3][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=宋体]特点：以样品溶液本身做参比，用两束单色光[/font][font=宋体]λ[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]和[/font][font=宋体]λ2[/font][font=宋体]交替入射到同一样品溶液中，测得的是差吸光度值δA=Aλ1-Aλ2[/font][/size][size=3][font=宋体]δA=Aλ2-Aλ1=[/font][font=宋体]（ελ2-ελ1）cL[/font][/size][font=宋体][size=3]因此用于定量分析，适用于单，多组分测定。[/size][/font][size=3][font=宋体] [/font][font=宋体]单组分测定一般选择待测组分的λmax为测定波长λ2，等吸收点波长或待测组分吸收曲线下端的某一波长作为参比波长λ1，然后测定差吸光度值（δA=Aλ2-Aλ1），求样品溶液中待测组分的含量或浓度。[/font][/size][size=3][font=宋体] [/font][font=宋体]如果样品溶液中有共存干扰吸收物质，则通过采用等吸收点法和系数倍率法等。[/font][/size]