定量给料机

药物粉末是一种干燥的、散状固体，由很多细小的颗粒组成，通常根据粗细和颗粒大小进行分类。粉末本身并没有被广泛地用作剂型，但经常被用于其他剂型的制备，如片剂，胶囊剂和吸入剂，并经常添加至其他成分中制成半固体状，如乳剂、软膏和膏状。1 方法介绍 粉末的流动性取决于几个因素，有些与粉末原材料有关，有些与实际生产过程有关，例如粉末从容器（料斗、漏斗、圆筒等）流出的能力或制成片剂时的可压缩性。美国药典章节和欧洲药典2.9.36章节药典推荐了三种测试粉末流动的方法：1 通过孔口流动测试定量粉末流过已知尺寸孔口的能力和时间是一种有效的测试方法。顾名思义，这种技术只适用于自由流动的粉末，不适用于粘性材料。2 静止角法（休止角）静止角，也有的称为休止角，是将粉末颗粒倒在水平表面时产生的圆锥形角度（相对于水平基底）。这与有关材料的密度、表面积、摩擦系数有关。3 剪切池法 测量破坏由散状样品形成的圆盘时的剪切力。包括2个阶段：样品固结和破坏（剪切强度），剪切池方法被广泛应用于制药行业来确定细小颗粒粉末和散状固体的流动特性以及它们在箱子、漏斗、给料机和其他处理设备上的表现。2 测试解决方案 Copley的BEP2型流动性测试仪为您提供了测试粉末流动性的方法，包含药典中引用的3种方法：通过孔口流动，静止角和剪切池，是一台一体而高效的仪器。通过在挡板机制中添加天平/计时器快捷装置来替代秒表，简化质量和时间的测试，可测试如下参数：a.固定重量样品的流动时间b.固定时间流出的样品重量c.固定体积样品的流动时间d.单位时间的样品重量（重量/时间）3 丰富的配件4 订货信息

p 　　2016亚洲粉体工业展览会(上海)将于2016年5月31-6月2号移师上海世博展览馆召开，规模和展商质量都将有较大的提升，期待您的莅临，FTCHINA2016已被业界公认为一个品牌宣传、产品展示、沟通交流和拓展业务的重要平台， 亚洲粉体展始终致力于打造粉体行业从材料加工改性到输送包装的完整产业链平台，不仅运用于化工、制药、采石、食品工业的处理，更广泛应用于颜料染料，铸造，陶瓷，包装，建筑等领域。同期活动精彩纷呈，勿容错过。 /p p 　　同期论坛：主题一：中国粉体技术的现状与发展 /p p 　　主题二：粉体工业装备与工艺的创新 /p p 　　主题三：粉尘的防爆控制 /p p 　　主题四：颗粒测试技术推广 /p p 　　上届亚洲粉体展已于2015年6月10-12号在上海新国际博览中心成功落下帷幕，展览总面积超15,000平方米，超过300家展商，来自全球超过32个国家和地区20,000余人参观了本次展览，89%的观众认为亚洲粉体展有较全面的粉体加工技术展示，跟同类展会相比有较大的优势。并祝愿展会取得更大的成功。 /p p 　　参展范围： /p p 　　& lt 工业生产及设备区& gt ：粉碎机,筛分设备,分类,过滤器,搅拌机,捏合机,造粒机,镀膜机,干燥机,给料机,输送设备,分散设备,集尘机,成型设备,表面处理设备,包装设备,发射设备等. /p p 　　& lt 仪器仪表,测量及实验室设备区& gt ： 测量设备,仪器设备,实验室设备,控制系统,FA设备等. /p p 　　& lt 材料,工程及资讯区& gt 新材料,过滤材料,屏幕,功能性粉末,工程,处理服务,委员会,刊物,计算机系统,助剂等 /p p 　　& lt 资源,环境与能源区& gt 回收系统,回收系统,净化系统,隔离系统,澄清系统等. /p p 　　& lt 纳米材料区& gt 材料,测量和评价,超微细加工技术,环境与能源,工作环境管理(纳米粒子的安全性),暴露预防工作管理等. /p p /p

2020年伊始，新冠疫情的阴霾迟迟不肯散去，它对经济的影响，正逐渐蔓延开来。钢铁行业作为国内最重要的经济支柱产业之一，人员密集，涉及的物流量大，在新冠肺炎的袭击下，更是遭受了巨大的经济损失。不论是平时生产还是疫情阴霾下，钢厂的生产都面临着诸多波动、诸多风险，如何让钢厂日常情况下可以稳定、高质量生产，且在特殊情况下能减少损失，提高企业抗风险能力，是每个企业值得深入研究的课题。以下，编者就应用SpectraFLow在线矿石品位智能分析系统加快钢厂铁前系统的智能化生产建设做一定的讨论。首先，我们要明确这一阶段的生产中面临的主要风险：一是原料的波动。由于市场原因，铁矿石价格弹性较大，各厂家所用原料可能来自于世界各个地区，其成分品位，最优配矿配比和条件也有着差异。生铁成本占钢铁生产成本的70%以上甚至更多，铁前系统的成本控制就是整个钢厂成本控制的关键。如何在保障生产系统稳定的同时降低生产成本也就成为了关键。第二类风险主要来自于人。人力资源同高炉等设备一样，都是钢厂宝贵的资产。在疫情下的非常时期：人员波动，人力资源不能及时到岗，复工率低；复工成本增加以及心里人员压力巨大，是当前钢厂面临的主要问题。同时在平常的正常生产中，人的影响也需要重视。 在这样的背景下，优化烧结配矿是保证优质高产的最重要手段之一。各个厂家各工程师，应用不同的配矿模型、考虑矿粉结构、高炉炉渣、水分、价格、高炉需求等等因素，得出最优的配矿方案。然而实际生产中的原料并不是一成不变的，原料的波动造成了配矿结果达不到预期，因此实时对原料成分特性了如指掌，才能扬长避短做到最优。传统烧结生产中，各企业所用传统方法主要是先取样，经过数小时制样、检测后，得到结果反馈到中控室，再进行相关调控（如下图）。在这个过程中，暴露出传统检测方法中诸多不足：1）严重的滞后性：一个是取样周期的滞后，分析结果得到的是一个取样周期内原料成分平均值，不能及时反应该取样周期内原料成分的变化，甚至掩盖了该取样周期内原料成分的异常变化。工程师根据这样的数据去调节当下的配料生产，是存在很大偏差的；还有一点，是检测结果的滞后，从取样到分析，最快需要两个小时，一般要3至4小时；因此延误了工艺参数的针对性调整。这些是传统测试方法的滞后性造成的问题。2）在取样过程存在抽样误差，取样的量以及频次影响着样品的代表性。传统检测中的抽样方法，代表性差，不能代表整体原料，难以反应全部原料成分。同时取样、制样的过程都是人工来操作的，在这个过程中，受生产管理、操作习惯、责任心、随机性等影响，存在一定偏差，受人为的影响的因素非常大。这些不足，极大地制约着生产的稳定性和烧结矿的质量。因此，改变传统检测方法，应用安全绿色的SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统，提高原料和生产过程中物料成分的稳定性，是提高钢厂应对原料波动风险和人工操作风险的能力，是帮助钢厂降本增效的一个有效途径。SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统以近红外光作为发射源，安全绿色，可实时检测传送带上物料成分：包括总铁、水分、碳含量、碱度等，而且可区分磁铁矿、赤铁矿、菱铁矿等不同类型的铁矿石。它强大的数据库和超快超密集的检测频率，使得实时检测的结果准确、代表性强。同时，它自带控制系统，可根据设定和检测结果，自动调节给料机加料，实现配料过程的的自动化、智能化。极大降低了钢厂铁前系统原料方面及人员波动性风险。可想而知SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统的应用，可在钢厂的降本增效和智能化改造中发挥重要的力量！可以看到，即便在日本成熟的钢厂中，设定碱度值为 2.00 的情况下，实际生产的碱度值 也有着大幅度波动 而所得烧结矿质量(落下强度)也有着很大波动，且质量偏低，普遍低 于 90。

型号推荐：程控定量封口机-一块定量检测水中大肠杆菌数量的仪器2024实时更新，在水质监测的迫切需求下，程控定量封口机以其独特的优势，为水样中细菌微生物的快速、准确检测开辟了新的途径。它不仅能够针对绿脓假单胞菌群、肠球菌、总大肠菌群等多种致病菌进行高效检测，还具备野外携带、应急响应及定量检测的能力，成为水质安全的重要保障。 一、高效精准，细菌微生物无所遁形 程控定量封口机集成了先进的检测技术，能够迅速且准确地识别水样中的各类细菌微生物，包括绿脓假单胞菌群、肠球菌、总大肠菌群、粪大肠杆菌及大肠埃希菌等。其高效的检测速度，使得水质监测工作更加及时有效。 二、便携应急，适应多种监测场景 该封口机设计紧凑，轻便易携，非常适合野外作业和应急响应。无论是在偏远的山区水源地，还是突发的水污染事件现场，都能迅速投入使用，为水质安全提供第一时间的检测保障。 三、定量检测，科学评估水质状况 除了快速检测外，程控定量封口机还具备定量检测的功能。它能够精确测量水样中细菌微生物的数量，为水质评估提供科学的数据支持。这一特性使得水质监测结果更加准确可靠，为水质管理决策提供了有力依据。 四、方法优势无需在无菌室内操作。2.手工操作时间小于 1 分钟。3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。4.24小时即可完成定性定量分析，无需验证试验。 程控定量封口机以其高效精准、便携应急及定量检测的特点，在水质监测领域发挥了重要作用。它不仅提升了水质监测的效率和准确性，还满足了野外和应急响应的需求，为水质安全保障提供了坚实的技术支持。随着技术的不断进步和应用领域的拓展，相信该设备将在未来发挥更加广泛和重要的作用。

半导体&液体循环制冷|Archimed Mini 16 医用荧光定量PCR仪获证2023年2月7日，鲲鹏基因自主研发的Archimed Mini 16 医用荧光定量PCR仪获得国家药品监督管理局批准的第三类医疗器械注册证，注册证编号：国械注准20233220149。快速获取检测结果是现场即时检测的重要应用需求，为满足这类实际需求，Archimed Mini 16特采用创新型Peltier半导体结合液体循环散热技术，在保证均一且精确控温性能的同时，实现超快速变温，最大样本变温速率大于5.4℃/秒。在同等试剂及运行条件下，相比市场通用性（96孔）定量PCR，实验耗时至少缩减30%。这是继Archimed X系列医用荧光定量PCR仪获证后，鲲鹏基因再次在分子诊断设备领域获得的临床诊断相关资质。自此，鲲鹏基因荧光PCR产品线涵盖了从高通量96孔通用型定量PCR（Archimed X4/X6）到快速便携式定量PCR（Archimed Mini 16）的多用途、多场景方案构成。将满足包括三甲医院、区县级医院、基层卫生服务机构、各级CDC以及检验科、门/急诊、临床科室等各类医疗卫生机构的全场景需求。Archimed Mini J 军用荧光定量PCR系统新品发布为了满足复杂多变的战场环境，实现即时检测的需求，鲲鹏基因推出一款符合军规标准的超快速便携式军用荧光定量PCR仪Archimed Mini J，系统采用鲲鹏基因创新型第二代控温技术、搭配操作简易的软件、轻巧便携的军绿色一体式机身及超强的环境适应能力，从容应对各类野外环境，快速准确地完成定量PCR相关应用。技术亮点：快速获取检测结果且具有较强的环境适应力是野外现场即时检测的重要应用需求，为满足这类实际需求，Archimed Mini J 特采用独特的Peltier控温方式，结合创新性VC均热技术及防水风冷设计，在保证均一且精准控温性能的同时，实现超快速变温控制，最大速率达8℃/秒。配备铝制外壳和防水导电胶条封边，提高电磁兼容性的同时实现防振动、防冲击、防淋雨、防霉菌、防盐雾，快速精准完成定量 PCR 相关应用。

视频演示产品型号：INC-8A+ 全自动氮吹吹扫浓缩仪◆ 样品位 ：4位 最多可扩充到32位，一次可实现32位样品的自动浓缩。样品容量：0-50ML ◆ 独有的Level- tracing技术，实现吹气针自动追踪液面高度，最高效地处理样品。◆0.2-10ML定容功能 实现吹干、近干及0.2-10ML内的任意容量的定容。◆ 全自动气路控制 可实现气源的自动打开与关闭，最大限度节约资源。◆ 全封闭气路系统 实验样品在一个封闭系统内，吹出来的气体可通过导管直接导出室外或做进一步除害处理，无须在通风橱内操作，节省实验室可利用空间。◆ 自动抽屉式样品箱 样品自动出仓和进仓，方便取放样品。◆上位机工作站软件 人性化设计，所有的控制轻松解决，简化设置和操作，浓缩时间预判，无人值守。 独有的吹扫流量控制系统，确保吹扫过程吹气量最大效率化，并拒绝样品飞溅 独立样品加热，恒温干浴。 设温精度：1℃ ； 加热功率：单样品功率40W 一次性吹气头，避免交叉污染。标准配置主机系统 上位机工作站软件 从机系统（标准配置4样品位，可扩展到32位）气路自动控制系统 Level- tracing模块 全量程定容模块 干浴加热模块专用抽气系统 创新点：智能定量浓缩仪创新优势： 1.目前市面上唯一一款可以做到0.2-10mL任意容量定容的产品 2.实现吹气针自动追踪液面高度，最高效的样品浓缩 3.一键设置，吹扫流量全自动控制，确保吹扫效率，并防止样品飞溅 4.上位机工作站软件，一键启动，全程无需人工值守 智能定量浓缩仪（全自动定量氮吹仪）INC-8A +

p span style=" font-size: 14px " 新一代测序（NGS）的应用范围越来越广，特别在无创产前检测（NIPT）领域有着越来越成熟的应用。对于NGS 的文库制备，我们经常需要对起始核酸样品进行质量评估，而制备好的文库我们也要进行准确的浓度检测以进行后续的均一化。 /span /p p span style=" font-size: 14px " br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " 通常核酸浓度测定是首先测定样品在260 nm 下的吸光值，然后用特定的换算因子进行浓度计算。但吸收光法灵敏度较低，并且当样本中存在其他种类核酸污染时，无法进行特异性定量。 br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " img title=" image001.png" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/7b644908-e733-4055-b6e7-0f4751ce017a.jpg" / br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " img title=" image001.png" style=" width: 1px height: 1px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/96beda69-8c75-4491-8b3c-7a73440dab42.jpg" / strong span style=" font-size: 12px " 图1：吸收光法dsDNA检测，分别进行浓度和纯度（A260/A280）的测定。 /span /strong br/ & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp br/ 其实，测定核酸浓度还有一种方法，即通过荧光染料进行间接检测。荧光染料能够特异性地和目的核酸结合，灵敏度也比传统的光吸收法高出1000 到10000 倍。 /span /p p br/ span style=" font-size: 14px " /span /p p strong span style=" font-size: 14px " 荧光检测和吸收光检测的比较 /span /strong span style=" font-size: 14px " br/ img title=" 01.JPG" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/388b0980-cbbc-476f-90d1-f9bf2b7c8fc5.jpg" / br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " 常见有Qubit 和PicoGreen 荧光定量试剂盒用于dsDNA 的定量。对于同一样品，分别采用PicoGreen定量试剂盒（配合Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 分光光度计和UVette比色皿）和Qubit dsDNA HS 定量试剂盒（配合Life technologies& nbsp Qubit 2.0 荧光计和专用0.5 mL& nbsp 反应管）进行荧光法核酸定量。PicoGreen 的检测结果与Qubit 仅相差10% 左右，两者都能准确地反映样品的实际浓度。 /span /p p span style=" font-size: 14px " br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " img title=" image002.png" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/382a9d08-3659-4b5b-bf2c-b3b9dda59c03.jpg" / /span /p p span style=" font-size: 14px " 当然，吸收光法也有它的优势。首先，吸收光法可提供A260/A280和A260/A230比率，用来评价核酸样品的纯度。 其次，它的使用成本低，不需要配套试剂盒。并且操作更简便，无需标准曲线，直接进行检测。 br/ & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp br/ 其实，NGS的实际应用中，既需要Qubit类的荧光计进行准确核酸定量，也需要吸收光分光光度计进行快速纯度检测，而集两种功能于一身的 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence荧光款分光光度计是您的理想选择。 /span /p p span style=" font-size: 14px " br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " 另外，在BioSpectrometer fluorescence软件中预设了“PicoGreen short”简短程序，即只有0和500ng/mL两个标准品。该方法的优势是操作简便快速，并节约昂贵的荧光检测试剂。而“PicoGreen short”得到的样品浓度与常规五个标准品进行分析得到的样品浓度非常相近。 br/ br/ img title=" 02.JPG" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/a2043342-8b8f-41cc-bf00-343b377e0af6.jpg" / & nbsp & nbsp br/ strong 在BioSpectrometer fluorescence上不同荧光方法的核酸定量 /strong ，采用Eppendorf Macro Vis Cuvettes比色皿，左图为PicoGreen程序，右图为PicoGreen-short程序。 br/ br/ 其实BioSpectrometer fluorescence与Eppendorf Vis Cuvette常量比色皿、Eppendorf UVette微量比色皿或 Eppendorf & amp #956 Cuvette G1.0 超微量比色皿均可以配合使用。 br/ br/ img title=" 03.JPG" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/1db29386-7757-477a-add4-093138d774a5.jpg" / & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp br/ strong span style=" font-size: 12px " Eppendorf不同规格比色皿，左图- Vis Cuvette常量比色皿，中图-UVette微量比色皿，& nbsp 右图- & amp #956 Cuvette G1.0 超微量比色皿 /span /strong br/ br/ 而采用UVette 或& amp #956 Cuvette G1.0可以显著降低测量体积，100 & amp #956 L或5& amp #956 L足够进行测量。这样可以节约荧光试剂，配合“PicoGreen short”程序（1个样品对应3个反应，而对于PicoGreen程序1个样品对应6个反应）可大大降低试剂成本。 /span /p p br/ span style=" font-size: 14px " /span /p p span style=" font-size: 14px " img title=" image008.png" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/ddcf7f04-548f-4696-9b78-39dc2a742d23.jpg" / & nbsp br/ strong span style=" font-size: 12px " 不同规格比色皿的PicoGreen检测成本比较 /span /strong /span /p p span style=" font-size: 14px " br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " 另外，分别用UVette和& amp #956 Cuvette G1.0在Eppendorf BioSpectrometer fluorescence分光光度计上基于“PicoGreen short”应用程序进行两个样品的荧光法核酸定量。两种比色皿的检测结果相当，重复性好。 /span /p p span style=" font-size: 14px " br/ /span /p p span style=" font-size: 14px " img title=" image009.png" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201607/uepic/d24b0d02-7088-4838-9968-92eff9726126.jpg" / & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp br/ br/ 因此，Eppendorf BioSpectrometer fluorescence配合UVette塑料比色皿或 & amp #956 Cuvette G1.0 超微量比色皿，采用“PicoGreen short”预设应用程序，在保证结果准确的前提下，还能减少荧光试剂的消耗。同时该仪器的吸收光功能还能提供核酸纯度的相关信息，从而对NGS文库进行准确而可靠的质量评估。 /span /p

实时放行（RTR，Real-time Release）是基于准确可靠的过程数据评估，确保过程或成品合格质量的能力。总有机碳（TOC）在制药用水中是关键的质量属性，该方法可作为限度测试或定量测试。两种类型的测试都必须表现出可以准确地反映TOC浓度的能力。美国药典USP “总有机碳”说明了一般的限度测试，成为争议的主题，因为其运用了引起质疑的科学，并且缺少验证数据1。对于选择进行RTR的在线TOC方法，应经过深思熟虑。在USP 之后出版的RTR FDA指南清楚地指出，需要科学验证的水平，非USP 所提供2。本文概述了用于RTR应用的在线TOC方法的几个注意事项。关键点限度测试●USP 的TOC方法是限度测试，不能用于RTR应用的过程控制中。●FDA认为所有RTR过程测量是备选的分析过程，必须对其预期用途进行验证。●对限度测试应用唯一的在线TOC装置，会降低其作为用于连续过程改进的RTR工具的价值。定量测试●cGMP指示的分析数据的关键质量属性是结果的正确性或准确度。●RTR应用中的TOC验证要求超过了USP 的TOC方法。●TOC方法必须作为定量测试方法被验证，用于RTR过程控制工具。限度测试制药限度测试用于“通过/失败”评测（见图1），不适用于过程控制，除非所使用的方法已经验证为定量测试。虽然限度测试在理论上可用于RTR应用，但FDA的PAT指南的精神，清楚地表明优先选择能够在宽运行范围内，准确地进行当前条件下TOC测量的定量方法。500 ppb C图1. USP 的TOC限度测试然而，如果TOC限度测试为RTR所选的测试类型，诸如USP 等法规方法的固有验证，则不适用。这是因为FDA将所有用于RTR的分析方法当成“备选的分析程序”。备选的分析程序必须按照方法验证指南文档3,4中所述的最低要求进行验证，并且证明适合其用途。当在线TOC装置作为限度测试使用时，该装置必须至少验证其检测限和专属性。使用这个术语，“适合”，是针对其预期的用途而言。不要与术语“系统适用性”中的“适用”混淆。FDA以及法院已经裁定，只有“系统适用性”测试数据，对验证不够充分5。将TOC装置作为RTR应用的限度测试使用，由于限制了其对连续质量提高的潜力，显著地降低了投资的价值。将该装置作为定量测试进行验证，使得该工具成为连续过程改善，以及制药限度放行的过程控制数据源。考虑到测量技术，包括Sievers分析仪在内的多个制造厂商，假定TOC传感器使用直接电导率方法。该技术已经证明有与准确度和专属性相关的分析缺陷，在RTR应用中可能存在明显的风险6。对于RTR应用，应考虑直接电导TOC技术的替代方案。定量测试定量测试旨在提供过程中整个运行范围的准确可靠的数据（参见图2）。图2. TOC过程控制的定量测试大多数制药用水系统在500 ppb TOC的药典TOC限度下运行良好。因此，在线TOC分析仪应作为定量测试进行验证，以确保整个水系统浓度范围内数据的可靠性。定量测试的使用，体现了FDA的PAT指南2的关键要领。其认识到可靠的数据是基于风险的方法的关键，进一步科学地理解，生产过程如何影响产品质量，最后形成控制策略，防止或减轻劣质产品出现的风险。分析程序类型药品组份及材料的杂质检测限度检测定量检测准确度*－＋精确度*－＋线性*－＋范围*－＋专属性*＋＋检测限*＋－定量限*－＋-表示此项目在方法验证或确效中，不常用于评估。+表示此项目在方法验证或确效中，通常用于评估。*包含于Sievers分析仪，验证支持包第二册，Validation Support Package Vol. II。表1. 测试程序的确效与验证项目4USP 的TOC方法是限度测试，从来没有准备用于或经验证，为开发连续改进策略提供连续的过程数据。因此，证明在线TOC设备对预期用途的适用性是用户的责任。FDA对定量测试分析方法验证的指南，比限度测试更加严格3。表1说明了可用于测试，诸如TOC等杂质的两种测试类型的最低要求。定量测试验证指南的补充水平强调RTR应用需要可靠的数据。相关引用FDA对制药方法验证的警告书－2008“用于USP制药规范的测试方法，未经检验以确保实际使用条件下的适合性。您没有确保某些USP制药测试方法在实际使用条件下经过检验。特别是，您未能够对USP制药测试方法进行适当的检验。您在答复中提供的数据不包括关于所使用方法的适合性、准确度和检测限的信息。从这些数据不能表明贵公司的测试方法，可以可靠地检测并量化杂质的存在。此外，贵公司没有进行该方法的适合性测试，以确定该方法的检测限。在过程测试中使用该方法的适合性仍未确定。”FDA对USP关于章修订事项的函件－2007“提议的专论不包含任何关于总有机碳（TOC）干扰可能性的警告说明… … ”“应使用诸如蔗糖等易于氧化的有机物，和诸如烟酰胺等难于氧化的化合物，以检验仪器在扩展运行范围内是否合格。”“所提供的TOC在线测试信息不充分。”参考文献2.U.S. Food and Drug Administration，Guidance for Industry PAT – A Framework for Innovative Pharmaceutical Development ,Manufac- turing, and Quality Assurance，2004。

前言吾日三省吾身，定量实验做对照了吗？在荧光定量PCR实验中遇到没有曲线、曲线异常等情况，我们总是会在第一时间去看阳性对照和阴性对照的扩增情况来分析原因。由此可见，实验中做对照的重要性不言而喻。在荧光定量PCR实验中，我们通常会按照如下的流程进行实验：样品采集，运输，样品处理，核酸提取，反转录（RNA 病毒），扩增 ，结果读取。为了提高实验结果的精准度，我们通常会通过设置对照的方式对检测的各个环节进行监控。阴性对照荧光定量PCR的灵敏度较高，对实验室的污染也非常敏感，阴性对照可以用来监控和发现污染的发生。常用的阴性对照包括以下几种：无模板对照（No Template Control, NTC）使用水代替荧光定量 PCR反应中的核酸，其它试剂按比例正常加入，用于监控扩增反应体系中的污染。正常情况下，NTC孔不会有扩增；当NTC出现扩增，则预示体系中有污染。在SYBR Green实验中，引物二聚体的形成也可能导致NTC出现扩增。阴性样本对照（Negative Sample Control）阴性样本对照指不含有目的基因或者靶序列的样本，也可以是样本保存液。和含有目的基因的样本一起进行核酸提取等过程。如果出现扩增，则说明实验过程中存在污染，结合NTC结果进行判断。无逆转录酶对照（No Reverse-Transcriptase Control, No RT）当进行RNA定量实验时，如果引物和探针设计在同一个外显子上，扩增有可能来源于未去除干净的DNA，此时可以设置无逆转录酶对照。无逆转录酶对照中不加逆转录酶。由于没有cDNA，DNA聚合酶无法扩增mRNA，则不应发生扩增。如果检测到扩增，则样本中可能含有未去除干净的DNA。阳性对照阳性对照必然是阳性的结果，用于排除假阴性。如果检测出来了这个样本不是阳性，则说明实验有问题，不可靠。阳性样本对照（Positive Sample Control）阳性内对照虽然可以在一定程度上反应核酸提取效率，但是却很难反馈提取流程中对核酸释放的效率。为了能更好的反映提取效率，可以选择已知阳性的样本或者保存在相似基质中已知浓度的病原体，作为单独的样本进行提取和后续的RT-PCR，通过Ct值评断实验流程。内参基因（Endogenous Control）内参基因可以用于反应样本本身的质量，比如拭子是否刮取到样本、RNA在运输和保存过程中是否有严重的降解等问题。内参基因一般选择在取样组织或细胞中均有足量表达的基因，且其表达量不受环境、实验处理条件和取样时间等因素影响，常用内参基因如表1所示。没有某个内参基因是万能的，内参基因需要根据样本类型和实验处理方式进行评估和选择。实验中通过内参基因的Ct值来判断取样和样本降解情况。在相对定量实验中，内参基因亦可用于对取样量进行均一化。▲ 表1: 已报道的部分物种qPCR内参基因扩增对照（Amplification Control）可使用含有扩增片段的质粒、假病毒或者基因组DNA/cDNA作为扩增阳性对照，监控荧光定量PCR的体系是否正常。当扩增对照没有扩增，或者Ct值大于预期，则说明定量PCR体系存在问题。内部阳性对照（Internal Positive Control, IPC）如果想监控每一份样本的整个实验过程，可以在提取之前在每个样本中加入一段外源DNA或RNA（不含目的片段），并在定量PCR时进行单管多重PCR，同时检测目的基因和这段序列。在每个样本中加入特定拷贝数的IPC，进而从该段序列的Ct值判断对应样品孔中的核酸富集和扩增效率。

标准曲线线性不佳、熔解曲线杂峰多、基因表达数据不知如何分析、多重定量PCR如何设计引物……相信每一个荧光定量PCR的工作者都会遇到这样那样的问题。 为了给大家提供一个技术交流的机会，让有经验的人能和大家分享其成功的经验，让更多的人尽快从定量PCR的实验困惑中走出来，德国耶拿分析仪器股份公司携手上海生工共同举办“荧光定量PCR达人秀”活动，邀请“身经百战”的您秀出您完美的解决方案！ 活动细则： 您只需要将您曾经碰到过的定量PCR实验中最头疼的问题以及最后的解决方案填写后发给我们，就可以参加此次活动。 评选流程： 9月16日至10月16日：文章投递有效期。 10月17日，从收集到的所有文章中评选出20篇优秀文章进入最终PK，于网上公布 10月18至10月30日，20篇文章网络公开投票，截止于10月30日24点，欢迎大家踊跃投票 10月31日公布获奖名单 网络投票及获奖名单公布网站：www.sangon.com/DM/vote01.aspx 奖品设置： 一等奖：1名，参观德国耶拿分析仪器股份公司总部，体验德国异地风情 二等奖：2名，Apple公司iPad平板电脑一台 三等奖：6名，名牌自行车一辆 您是荧光定量PCR达人吗？还在犹豫什么？快来参加吧！ 详情请联系： 德国耶拿分析仪器股份公司 生工生物工程（上海）有限公司 电话：021-54261977 电话：021-37772430 网址：www.analytik-jena.com.cn 网址：www.sangon.com 文章投递请登录以下网址：http://www.sangon.com/vote.aspxhttp://www.ebiotrade.com/custom/analytik-jena/110921/index.htm

实时荧光定量PCR数据中的基本概念：在整个扩增过程中会出现基线期，指数期，线性期和平台期。其中在基线期和指数增长期，扩增产物都是以指数级增长，但是在基线期我们没办法检测；而到了线性期和平台期之后，由于不同基因，或者不同条件下其扩增效率差别很大，因此没有办法计算模板的含量。因此，在指数增长期的CT值就成了计算模板含量的关键值。▲ 图一：线性图谱▲ 图二：对数图谱为什么知道CT值就能够得到最初的目标基因含量呢？如图三，表示一个基因单次扩增曲线。N为扩增产物的分子数，模板的分子数乘以1+扩增效率的n次方，n代表循环次数。也就是说，如果扩增效率为100%，产物的分子数就等于模板数乘以2的n次方。但是在线性增长期和平台期，扩增效率不可能是100%，因此PCR理论方程只在指数期成立，也就是图三绿色框的部分。▲ 图三数据处理：以下三张图分别表示我们在做荧光定量PCR时提到的三个名称：扩增曲线、标准曲线、溶解曲线。1、绝对定量：使用一系列稀释的已知浓度的标准品与未知样本同时进行测定，根据系列浓度标准品的CT值与起始模板量之间的线性比例关系。注意事项：☑ 标准品必须来源可靠，浓度已知。☑ 标准品要和待测样品同时在仪器中扩增。☑ 只能根据标准品覆盖的浓度范围进行待测样本浓度的推测。2、相对定量：是用来确定经过不同处理的样品之间的表达差异或目标在不同时相差的表达差异，也就是倍数差异。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自美国Azure Biosystems公司，以创新服务于生命科学为愿景。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统融合了高品质Peltier温度模块和基于光纤传输的光学检测系统，为您的科学研究提供高精准、高灵敏的可靠结果。Azure Cielo 3/6检测通道，可根据实验需求灵活配置。同时配有10.3触控系统，主机本身可独立运行、连接、远程交互，让您随时随地知悉实验进程和及时获得实验结果。

2021年3月7日，工程师在陕西某检测公司安装热电ICP 6300型电感耦合等离子体发射光谱仪，品牌：热电 型号：6300。当天这台热电ICP 6300 安装调试、培训完毕，顺利通过客户验收，感谢客户的支持与认可！ ICP利用氩等离子体产生的高温使用试样完全分解形成激发态的原子和离子，由于激发态的原子和离子不稳定，外层电子会从激发态向低的能级跃迁，因此发射出特征的谱线。通过光栅等分光后，利用检测器检测特定波长的强度，光的强度与待测元素浓度成正比。 ICP 6300既可采用单一的等离子体炬径向观测，也可以采用双向观测。径向观测适合于像金属或废弃油品这样的复杂样品，而双向观测则更为灵活，同时兼有轴向观测检出限低和径向观测干扰小的特点，特别适合环境样品的分析。 电感耦合等离子体光谱仪ICP 6300 性能谱图如下： 应用领域：热电ICP 6300型电感耦合等离子体发射光谱仪适用于各类植物、土壤、环境、食品、石化、金属材料和地质样品中主量及微量元素的定性、半定量和定量分析。 赛默飞热电 ICP 6300等离子发射光谱仪独有的智能摄谱功能可拓展钢铁、有色、地质等复杂基体用户的使用范围。在原料实时检测、产品质量控制以及日后样品信息再分析有着广阔的应用空间。

导语古语云“阿胶一碗，芝麻一盏，白米红馅蜜饯。粉腮似羞，杏花春雨带笑看。润了青春，保了天年，有了本钱”。阿胶能补血滋阴、润燥止血，自古为滋补上品。阿胶系驴皮经煎煮浓缩成的固体胶。近年来，随着驴皮货源紧缺，市面上存在不法商贩弄虚作假，以次充好，以牛皮、马皮等下脚料冒充驴皮制作假冒伪劣阿胶的行径，严重扰乱了阿胶市场。其他兽畜皮熬胶，也有补血止血的功能，但阿胶伪品的蛋白质成分及其含量和阿胶真品存在明显不同，与驴皮胶使用效果相差甚远。因此，掌握阿胶的真伪鉴别方法至关重要。 为了进一步规范阿胶产业发展，提升阿胶品质保障能力，国家药典委在2019年发布关于“关于阿胶、海龙、海马等国家药品标准修订草案的公示”和“关于阿胶国家药品标准修订草案的公示（第二次）”两项公示稿，分别对阿胶【含量测定】和阿胶【鉴别】项下内容进行了修订。其中阿胶【含量测定】项修订幅度最大，新增了“特征多肽”含量要求： 驴源多肽A1特征离子对：m/z469.25712.30和m/z z469.25783.40，驴源多肽A2特征离子对：m/z618.35 779.40和m/z618.35 850.40，按干燥品计算，“含特征多肽以驴源多肽A1（C41H68N12O13）和驴源多肽A2（C51H82N18O18）的总量计应不得少于0.17%”。 此外，在2012年药典委颁布了《阿胶中牛皮源质量的补充检验方法》。2015版《中国药典》中，明确规定使用液相色谱-串联质谱法用于阿胶、龟甲胶、鹿角胶的鉴别。最近，国家药监局还颁布了《阿胶中猪皮源的补充检验方法》，在阿胶产品中应不得检出猪皮源（新阿胶）成分。 岛津参考以上标准和文献报道，使用胰蛋白酶对阿胶、牛皮胶和猪皮胶等不同来源的明胶类物质进行酶切处理，通过岛津LCMS-8045液相色谱质谱联用仪(图1)对特征多肽进行测定，从而实现阿胶与杂皮胶的鉴别与阿胶的定量。 图 1 岛津 LCMS-8045液相色谱质谱联用仪 主要方法参数 色谱柱：Shim-pack GIST (2.1 mm I.D.×100 mm L., 2.0 μm)MRM参数：见表1 表1 MRM优化参数对照药材分析 采用超高效液相色谱-质谱联用的方法，一次进样，同时分析8种特征多肽，实现阿胶药材的鉴别与定量。分析结果表明，阿胶、驴源多肽A1、驴源多肽A2、黄明胶、鹿角胶、龟甲胶、新阿胶、马皮源多肽信噪比均大于10：1，完全满足检测要求。如下图2（左右滑动查看全部内容）图2 阿胶等8种特征肽定性色谱图 样品测定 对阿胶样品进行测定，黄明胶、鹿角胶、龟甲胶、新阿胶、马皮源通道均未检出；阿胶、驴源多肽A1、驴源多肽A2分离良好，峰形对称，且信噪比均大于10：1。如下图3（左右滑动查看全部内容）图3 阿胶定性定量肽段测量 总结 阿胶作为滋补佳品，消费者平时关注更多的是阿胶的功效。其实，无数“实验猿”为了保证阿胶的真实与有效，默默地完成了大量阿胶药材真伪鉴别与含量测定的工作。有了本文的方法，“实验猿”可以一针进样鉴别多种肽段，节省时间。除此之外，本方法加入了定量肽段，可以实现定性定量同时分析。 “暗服阿胶不肯道，却说生来为君容”。更多关于阿胶的文章，参阅岛津推出《胶类药材定性鉴别解决方案》。

烧结是钢铁生产工艺中的一个重要环节。烧结生产的主要流程为将铁粉矿、各类助熔剂及细焦炭等原料，经由混拌、造粒后，通过布料系统加入烧结机，完成烧结反应。经破碎、冷却、筛选后送往高炉，作为冶炼铁水的主要原料。经烧结而成的，有足够强度和粒度的烧结矿是炼铁的熟料，利用优质的烧结熟料炼铁，对于提高高炉利用系数、降低焦比，提高高炉透气性，节能降耗、保证高炉高效运行均有重要意义。烧结的主要流程图烧结生产过程中，进厂原料的监控，混料配比以及入窑配料的监控十分重要。目前钢厂原料来源逐渐复杂化：由于市场因素，各原料价格存在波动，钢厂不时更换主料来源；其次随着地球资源的不断开采，富矿短缺，各不同品相资源的不断被扩大利用，造成原料品相波动；且即便同一批矿，其品位也存在着差异，这些因素都为烧结配料增加了困难。当前传统取样检测的方法，已经暴露出越来越多的问题，不能很好的满足混料和入窑配料的需求：取样存在抽样误差，不能代表整体原料；测试有频次限制；测试结果滞后实际原料，延误工艺参数的实时调整，造成大量废料以及低质量烧结矿的产生，甚至影响高炉的稳定生产。为了解决烧结生产中的上述问题，SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统应运而生，克服了传统检测缺陷，进行实时在线检测，自动调节控制，是优化生产，节能降耗，实现智能制造的有效途径。SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统调节混料成分的稳定下图为日本JFE钢厂，实际烧结生产中记录的对碱度控制的结果，以及测得的烧结矿落下强度质量的结果：可以看到，即便在日本成熟的钢厂中，设定碱度值为2的情况下，实际生产的碱度值也有着大幅度波动；而所得烧结矿质量（落下强度）也有着很大波动，且质量偏低，普遍低于90。下图是JFE厂家应用SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统之后得到的碱度和落下强度结果：可以看到，经SpectraFlow系统的优化后，原料碱度值的波动幅度骤降，紧紧贴合2.00的目标值！且测试频次十分高，为原料和参数的实时调节提供了条件。而烧结矿落震强度，由原先的鲜有达到90者，变为大部分产品分落下强度都高于90！且有关数据表明，当高炉原料碱度波动值由0.1降至0.075时，高炉增产1.5%，焦比降低0.8%。因此使用SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统，提高了碱度稳定率，降低了高炉的焦比，对钢铁企业来说，能直接给高炉带来增产效益和结焦效益。由此应用全新的SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统，克服传统检测方法的不足。实现智能制造、降本增效的目标，势在必行！ SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统是怎样检测和调节混料成分的呢？将SpectraFlow在线矿石品位智能分析仪安装在如下图中B位置传送皮带上方，分析仪中光源发射光线照射到传送带上的物料上，不同矿物成分的物料会在特定波长和强度吸收部分光线能量；SpectraFlow中光谱仪连续扫描物料表面并分析其近红外波段的光谱及其强度，经分析处理即可得到传送带上物料中包括CaO, Fe, C, SiO2, MgO等的成分。同时SpectraFlow自带的自动控制系统，根据测试结果，以及设定的碱度值或其他参数值，自动调节给料机给料，达到最优的混料成分。下图是在钢厂变更原料来源时，应用SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统前后的混料调节，对生产率、烧结料碳浓度以及运输板速度的影响对比图：使用SFA之后使用SFA之前图中灰色区域为”原料变更期”，以上对比明显得到，在变更材料批次后，使用SFA分析仪，可以迅速恢复生产，绿色节能，提高经济效益。SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统调节窑炉稳定在烧结生产中，来料质量控制是保证混合效果的第一步；混料中配料的精细混合，是保证优质烧结效果的前提。SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统除了可以在A/B位置（如上图）安装，检测和控制来料和混料，还可安装在C/D/E处，针对性的调节混料中水分和燃料等相应成分的配比，保证烧结窑炉的温度稳定。例如将SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统安装在上图D位置，以FeO浓度为主要检测指标。一旦检测到FeO含量增加，SFA立即控制调整运输机移动速度，并且降低焦炭添加量，从而控制了烧结矿的温度在可接受范围内，FeO的浓度也在原料处的SFA帮助下快速调整（如下图），保证了烧结矿稳定高效的生产。若没有在D处的SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统的即时调整，若FeO含量增加，则会导致出口温度超标，冷却器被强制停止，从而温度下降，调节焦炭含量增加，运输车行使速度减慢，甚至造成生产的停滞。如下图：SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统在球团生产中的应用与烧结矿类似，在球团生产中，SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统可实时在线检测球团原料，控制原料的稳定性以及球团生产的稳定性。球团的生产过程主要是将精矿粉、若干添加剂以及燃料等，经过混匀、研磨、干燥、筛分等处理，经过配料皮带配料处理后，在造球机上加水混合造球，生球造好后加到焙烧机内焙烧，冷却后筛分，得到成品矿、垫底料以及返料。如下图，在生产线的A-E不同位置安装SpectraFlow在线矿石品位智能分析仪，可以有针对性的对总铁、碳含量、碱度、水分等进行实时的自动控制，从而保证生产的稳定性和产品质量，减少返料，降低能耗，提高生产率和生产效益。SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统特点总结SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统实时检测分析物料成分,并自动控制调整相关参数，克服了传统检测方法的不足，是实现智能制造、降本增效的有效途径：1、实时在线检测，避免传统测试方法的滞后、无代表性缺点。2、测试准确：采用最先进NIR测试技术，为混料提供数据依据。3、智能化程度高，符合智能制造工厂要求：数据自动传输到中控室，减少实验室现场取样、制样、测试、数据上传过程。实现用机器替代人工目的。4、完全符合绿色工厂要求，保证节能减排的环保要求：减少操作人员参与，对原料中S/P/N等元素监控，同时可以预测烧结中SOx气体的排放。5、智能配料：整个系统完全符合全智能系统，SFA系统实现在线监测同时提供反馈系统，将信息反馈给智能配料系统，通过系统进行补偿，实现配料方案合理性。6、系统安全性：检测系统采用NIR检测源，无任何辐射，符合省、国家环保工程项目等标准要求。7、运营成本低，维护简单：无需任何其他维护，只需定期吹扫光源。SpectraFlow在线矿石品位智能分析系统，安全环保，提高烧结、球团产品率，降低返矿率和燃料比、使产品稳定，最大程度地保证高炉顺畅、高产稳产。

GB/T 36433-2018《纺织品 山羊绒和绵羊毛的混合物DNA定量分析 荧光PCR法》已于2019年1月1日正式开始实施，本标准规定了采用荧光定量PCR测定纺织品中山羊绒、绵羊毛DNA的定量检测方法。本标准适用于纺织品混合物中山羊绒、绵羊毛两组分含量的检测。LUMEX的微芯片实时荧光定量PCR可以为山羊绒和绵羊毛中羊毛含量的检测提供简便、快捷和准确解决方案。相对传统荧光定量PCR，试剂和样品用量更少，仅需要1.2 μL的样品；升降温速度最高可达12? C/s，用时更短；空芯片能够较好得兼容各类常规测剂，也可将试剂冻干在芯片上制成常温保存的冻干芯片，样品仅需分离后加入1.2μL即可。微芯片式荧光定量PCR为用户提供更简便省时的操作，更友好的操作体验，极大得节省了时间成本，消除了人为因素引起的误差。LUMEX微芯片实时荧光定量PCR优势特点：l 便携式荧光定量PCR，可适于现场使用l 高灵敏度实时荧光定性、定量分析l 专利微芯片平台，防止交叉污染l 独特芯片式平台设计，超快加热、冷却速度l 实现快速分析（DNA25分钟，RNA50分钟）l 开放芯片平台，兼容通用试剂耗材l 冻干芯片操作更简便，消除人为误差l 广泛应用于动植物病原体检测、食品转基因鉴别、遗传疾病检测、癌症筛查等羊绒，也被称为山羊绒，是一种从山羊身上提取的豪华纤维，由山羊和其他山羊中提取。虽然羊绒和羊毛是由两种不同的蛋白质组成，却具有相似的天然纤维，但羊绒要比羊毛贵的多。因此在实际的销售链中，为了获取更多的物质利益，羊绒和羊毛经常被混在一起销售。用传统的分析方法对羊绒混纺羊毛进行定量分析仍有一定困难。而微芯片实时荧光定量PCR技术可以有效的解决山羊绒的鉴别和定量问题，该技术已广泛应用于多种领域。LUMEX的技术专家对此方法进行了广泛研究并发表了相关论文，以下内容为Maxim Slyadnev发表论文《 Identification and Quantitation of Cashmere (Pashmina) Fiber and Wool Using Novel Microchip Based Real-Time PCR Technology》的内容节选。来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊中羊绒纤维PCR检测情况一览表来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊中羊毛PCR检测情况一览表来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊中羊绒纤维目标基因的扩增曲线来源于不同性别、不同品种和不同年龄的山羊和绵羊羊毛中目标基因的扩增曲线羊毛羊绒的定量标准曲线对模型样品中羊绒含量的测定微芯片定性定量检测天然纤维中的羊毛羊绒成分结论：基于微芯片的实时荧光定量PCR技术可用于羊毛掺假等纤维混纺织物中羊绒和羊毛含量的定量检测。从不同地区和不同年龄的山羊和绵羊采集的羊绒样品的数据分析证实了该检测技术的有效性和可靠性。该试验在微芯片反应体系中的体积仅为1.2μl，具有成本低、高特异性、高灵敏度、人为误差小、假阴性或假阳性率低等优点。这种方法基于从羊绒和羊毛中提取的线粒体DNA的检测，可以用于大规模的羊毛和羊绒制品的检测，现成的冻干芯片检测可以极大的降低对检测人员的操作要求，这对于在检测行业大范围推广微芯片实时荧光定量PCR是极为有利的。 来源：LUMEX分析仪器

答疑解惑时间：2009年4月3日---4月18日 热烈欢迎yuen72先生再次光临仪器论坛进行讲座! 　　自2008年以来我们已经举办了10期线上讲座,线上讲座用户参与度越来越高。线上讲座的第一期是从气相色谱开始，而我们的第十一期的线上讲座又回到气相色谱版面。本期讲座我们邀请了GC版面的专家yuen72先生就气相色谱定量方法进行了一期专题讲座。本期讲座共分两章，第一章是针对检测器的响应来进行详细阐述，第二章就对色谱定量方法来进行详细的解剖。 　　再次感谢气相色谱版面的专家yuen72先生提供的丰富的讲座，也感谢yuen72先生与大家一起交流心得和经验。yuen72先生，高级工程师，有15年以上石化行业色谱分析经历，拥有安捷伦、岛津等公司多种色谱仪的操作经验，国家一级化工分析竞赛命题专家，从事气相色谱讲授多年，在多本化工分析工教材中主笔色谱部分。 　　欢迎大家就气相色谱定量方法方面的问题前来提问，也欢迎高手前来与yuen72先生交流切磋～ 　　参与本期活动的地址：http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090403/1819316/ 　　相关地址： 　　论坛线上活动导览：http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20081203/1618059/

型号推荐：抗生素荧光定量检测仪-一款定量分析水产品药物残留的仪器2024实时更新，抗生素荧光定量检测仪是一种高精度的分析仪器，主要用于检测和定量食品、药品及其他样品中抗生素的含量。该仪器在食品安全、药品质量控制和临床诊断等领域发挥着重要作用。 一、食品安全检测 在食品安全领域，抗生素荧光定量检测仪能够对肉类、水产等食品中的抗生素残留进行精确检测。这对于保障消费者健康、维护公共卫生安全具有重要意义，产品适用于水产养殖流通企业、农业系统、市场监督管理系统、出入境检验检疫、生鲜超市、农贸市场、农批市场、食堂、科研单位等行业 二、性能指标 1、一体化设计，集成孵育和检测功能同时进行，孵育完成直接检测； 2、全中文7英寸高清液晶显示，触摸屏操作； 3、Android系统，支持在线升级，可WIFI联网； 4、检测原理：荧光定量免疫层析法； 5、6通道设计，可同时进行一种或多种指标的检测，6个独立检测单元，检测效率高，并且互不干扰； 6、具有二维码自动识别系统，可直接识别检测项目、检测流程等信息； 7、仪器自带热敏打印机，检测结果可实时打印； 8、具有检测数据存储（存储数量不少于10000条）、查询、批量数据处理和打印功能； 9、仪器≥2个USB接口，可拷贝结果及原始数据，具有wifi接入模块，可通过无线连接网络实现数据上传； 10、仪器3分钟内达到工作状态（37℃），封闭系统，不受外界环境（光、热）干扰，工作环境温度：0-30℃； 11、相对极差≤10%； 三、水产品质量控制 该仪器用于检测水产品中药物残留含量，通过定量分析抗生素成分，帮助企业控制产品质量，满足法规要求。是一款荧光定量检测食品抗生素的仪器设备，主要检测呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林、磺胺类药物、氟喹诺酮类、氯霉素、四环素、氟苯尼考、喹乙醇等畜禽、水产品药物残留的定量检测；样品前处理简单，整个检测过程7min，可以多样品、多种类同时进行检测，大大提高批量定量检测的效率。 抗生素荧光定量检测仪是一种多功能的检测工具，它在食品安全检测、药品质量控制和临床诊断等多个领域中发挥着重要作用。随着对抗生素使用监管的加强和技术的发展，该检测仪将在相关领域中扮演更加关键的角色。

睿科Auto EVA12系列全自动定量平行浓缩仪可对12个液体样品进行氮吹浓缩，浓缩速度快，自动化程度高，安全高效，是实验室不可缺少的前处理设备。Auto EVA12系列全自动定量平行浓缩仪该款全自动定量平行浓缩仪采用定针斜吹模式，涡旋气流可持续扰动样品表面，降低溶剂表面的蒸汽压，使得液体样品能够在水浴加热下快速蒸发。每个样品管配备光学传感器，可对样品尾管中的液体进行精准定量。可通过仪器自带的触摸屏对其进行实时控制，令繁琐的过程变得简单方便。产品特点01批量处理能力可实现12位样品管的氮吹浓缩，液位传感器可对样品尾管中液体进行精准测定，实现无人值守的定量浓缩02浓缩速度快 平行性好利用水浴均匀加热和涡流氮吹共同作用的方式，加快样品蒸发浓缩，具有传热均匀、浓缩速度快、平行性好的优点03良好的观察视窗三面透明可视窗设计，可在实验过程中实时观察液面波动情况。温和均匀的水浴为样品蒸发提供充足热量，进而实现快速高效氮吹浓缩04氮气流量可快速实时调整氮气流量可进行快速调整，且实时调整。亦可设置梯度气流对不断减少的样品量进行氮吹浓缩05创新的润洗功能对于氮吹浓缩过程中，常常需要实验人员对样品瓶进行中途或者终点润洗，便于提升样品的回收率。考虑到客户的需求，EVA12系列全自动定量平行浓缩仪上集成润洗模块，为客户提供优异的自动润洗解决方案。自动润洗模式优于实验室常规手动润洗，对比无润洗模式，可提升10-15%的回收率06其他优势之处_高校科研院所等

FT-PCR非洲猪瘟荧光定量pcr仪品牌{实时荧光定量PCR仪}非洲猪瘟检测仪怎么用FT-PCR非洲猪瘟荧光定量pcr仪品牌{实时荧光定量PCR仪}非洲猪瘟检测仪怎么用：非洲猪瘟病毒检测是非洲猪瘟防控工作的重要举措，意义重大。为进一步提高非洲猪瘟病毒检测结果准确性，规范非洲猪瘟病毒诊断制品生产、经营和使用行为，2021年1月1日起，各有关部门和单位在动物检疫或疫病监测、诊断中，对生猪及其产品开展非洲猪瘟病毒检测，应当使用已取得农业农村部核发的产品批准文号的非洲猪瘟病毒诊断制品，确保检测结果准确。风途非洲猪瘟PCR检测仪(实时荧光定量PCR仪支持变温检测)用于运行病毒检测实验，并对实验数据进行分析 仪器既可在实验室内操作，又可用于野外科学实验，配合相应试剂，对取自待检测样本的分析物或其他分析物中的目标核酸进行快速、准确的定性检测。　　风途非洲猪瘟检测仪配套非洲猪瘟病毒荧光pcr检测试剂盒、非洲猪瘟病毒荧光pcr核酸检测试剂盒均已经获得农业农村部产品批准，可以满足非洲猪瘟核酸现场快速检测需求。可定量快速畜牧类疾病诊断如非洲猪瘟、禽流感、猪瘟、猪蓝耳、伪狂犬等疾病，广泛应用于养殖场、屠宰场、食品加工厂、肉产品深加工企业、农业农村部、畜牧局、检验检疫单位使用。　　实验员需要经过实验室技术和仪器、软件操作的专门培训，具备熟练的相关操作技能。　　二、仪器特点　　1.体积小，重量轻，易于携带。轻松满足外出实验的需求。　　2.内置10寸高清电容屏PDA，触屏操作，简便快捷。　　3.Marlow高品质Peltier制冷片，结合德国高端PT1000温度传感器以及电性电阻加热补偿边缘的温度控制模式，最大升温速度7℃，最大降温速度5℃，大大缩短实验时间。　　4.整板3s快速采光模式，保证实验结果孔位一致性。　　5.简洁直观的软件引导，轻松开启检测实验。　　三、非洲猪瘟PCR检测仪应用领域　　□ 基础科学研究　　□ 病原体检测　　□ 肉制品掺假　　□ 转基因检测　　□ 食品安全检测　　□ 药物开发及合理用药　　□ 基因表达　　□ 水体监测　　四、技术参数　　样品容量：16x0.2ml、支持8联管　　适用耗材：常见透明PCR 耗材，8x0.2ml 排管，0.2ml 单管　　反应体系：5-120ul反应模式体系　　加热/制冷模块：进口半导体热电模块　　温度控制范围：4°C-99℃　　升降温平均速率≥2°C/秒　　温控精度：≤±0.1°C　　温度均匀性：≤± 0.2°C　　温控区域数量：多点（2 点）　　梯度数：0 个　　梯度温度范围：无　　梯度孔数：无　　激发光源：免维护led　　激发光波长范围：400-700nm　　检测部件：进口光电检测器　　检测通道数：标配 1通道（FAM）、高配（选配）（FAM、VIC）　　适用染料和探针：FAM/SYBR Green I, VIC/HEX/CY3（选配）, ROX/Texas Red(选配), Cy5,TAMARA(选配)　　软件功能：荧光定量 PCR 系统软件；　　实时扩增反应曲线功能；　　特定标本实时反应曲线显示；　　数据分析功能；　　阴阳结果自动判定功能；　　图形化显示功能。　　噪音：45 dB　　屏幕尺寸：10 英寸(HD)　　触摸屏：电容式　　外接USB：支持数据导入导出　　热盖：自动压力调节　　外观尺寸：290（W）*308(L)*130(H)　　箱子尺寸：75长*38宽*19高cm　　净重：约3Kg

中科院计算所究团队与董梦秋实验室合作，成功开发了定量蛋白质组学数据解析软件，用计算方法排除干扰信号的影响、提高肽段和蛋白质的定量准确度并对每个定量值进行准确性评价。 　　基于质谱的定量蛋白质组学是现代生物学技术的生长点之一，用于测量复杂生物体系中蛋白质及其翻译后修饰在不同条件下的丰度变化，是研究蛋白质功 能和药物作用机制的重要工具。已有的定量软件往往不能有效排除干扰信号，定量值的计算方法有待完善，而且缺乏准确性评价，致使输出结果&ldquo 鱼龙混杂&rdquo ，引起 的假阳和假阴两方面的困扰都比较严重。 　为了更好地解决问题，开发者研究了几百个可疑定量值的原始质谱图和色谱图数据，找原因、攒经验，充分挖掘肽段的质谱、色谱信号特点以及从肽段定量到蛋白 质定量的方法，灵活应用各种组合和统计算法，建立了一整套非常细致的数据分析流程。为了验证软件的性能，董梦秋实验室的同学通过轻重SILAC或 14N／15N标记哺乳动物细胞或细菌，从10：1到1：10按不同比例混合得到14套标准样品，产生了14套测试数据集。 测试结果表明，定量结果的准确性明显超过定量蛋白质组学领域的两个主流软件Census和MaxQuant，主要表现在输出的非数比值数目（即 不能定量的部分）占总比值数目的0.01&ndash 0.5%，远低于Census的MaxQuant的对应比例2.5&ndash 10.7%和 1.8&ndash 2.7%；Census和MaxQuant输出了许多不准确结果，其定量值的标准差是软件的1.3&ndash 2倍；给出了肽段和蛋白质定量比值的置信区 间，而Census和MaxQuant没有准确性评价。目前，该研究工作得到了科技部、基金委、中科院和北京市政府的资助。

仪器信息网讯 2011年3月23日德国耶拿分析仪器有限公司在中国科学院遗传与发育生物学研究所举办了“高速实时荧光定量PCR体验交流会”。来自高校和科研院所的专家和技术人员50余人参加了这次体验交流会。出席体验交流会的还有德国耶拿公司中国区总经理赵泰先生、生命科学中国区经理诸建先生等。 　　在体验交流会之前，诸建先生首先向大家介绍了德国耶拿公司的历史及发展现状。耶拿公司的原子吸收光谱仪、紫外可见分光光度计、元素分析仪、总有机碳分析仪等产品在中国市场上有着广泛的知名度，并且占据了很大的市场份额，尤其2004年耶拿公司在世界上首次推出连续光源火焰原子吸收光谱仪，只需一个高能量氙灯光源，即可测量元素周期表中67个金属元素，是原子光谱仪划时代的革命性技术。 德国耶拿分析仪器有限公司生命科学中国区经理 诸建先生 　　但大家对德国耶拿公司的生命科学仪器产品的认识并不多，在诸建先生的介绍中大家进一步了解了耶拿公司的生命科学仪器的发展历史以及其技术特点。德国耶拿公司在2000年级开始了生命科学业务，2002年推出了第一款生命科学类仪器。尤其在2009年，德国耶拿公司收购了Cybio和Biometra公司，德国Biometra公司是欧洲最大的一家专业生产分子生物学仪器厂家，所提供的产品中包括高端PCR仪。所以此次体验会主要展示的仪器高速实时荧光定量PCR仪qTOWER的设计中就融合了Biometra公司的一些先进技术。 德国耶拿分析仪器有限公司中国区总经理 赵泰先生 　　据赵泰先生介绍，2010年，德国耶拿公司在中国组建了生命科学团队，开始在中国市场大力向生化仪器领域扩张。此次举办的高速实时荧光定量PCR体验会即是该系列市场拓展活动之一。“百闻不如一见”，将仪器拿到现场展示给用户，让用户亲眼目睹实际样品的测定过程，会引起用户浓厚的兴趣，进一步展示德国耶拿仪器的高品质和独特性能。 　　在体验交流会上，首先由德国耶拿公司的工程师吴潇韫女士详细介绍了高速实时荧光定量PCR仪qTOWER和全自动液体处理工作站FasTrans的性能、构造和特点等。 德国耶拿分析仪器有限公司 吴潇韫女士 　　高速实时荧光定量PCR仪qTOWER可以解决当今定量PCR实验面临的挑战，即缩短定量PCR检测时间、降低定量PCR实验成本、确保定量PCR实验结果的可靠性。 　　对比传统的实时荧光定量PCR，qTOWER的实验速度提高10倍 　　qTOWER采用低缘紧凑型的镀金纯银样品槽，其高效的热传导功能使热能利用率高。通过高效、长寿命的peltier元件控温，能够实现12°C/sec的升温速率和8°C/sec的降温速率。 　　SAC专利技术，使样品管壁能够向皮肤一样和样品槽紧密贴合，使模块的温度与反应管中液体的温度保持一致，热传导效率高达90%以上。综合以上多项技术，最快可在20分钟内完成40个循环的96孔四通道荧光定量PCR反应。 　　qTOWER的能耗大约是其它同类产品的五分之一 　　qTOWER整个PCR反应体系只需5-20ul样品，最低5ul体系即可进行荧光定量PCR检测，可实现微量样品的检测。另外，qTOWER不需要特殊的荧光定量PCR试剂，用户可自由选择常规的各种荧光定量PCR试剂。节约了样品和试剂，尤其节约了较昂贵的荧光定量PCR试剂，qTOWER大大降低了实验成本。 　　由于qTOWER高效的能量利用效率、节省的工作时间、样品体积少等特点，其耗电量最多能够减少95%，所以它每年只消耗100KWh (一年220天计算，每天运行4个程序)。 德国耶拿分析仪器有限公司工程师Matthias先生现场演示仪器的操作并进行相关实验 　　在大家详细了解了qTOWER的技术特点之后，由来自德国的工程师Matthias先生现场演示了qTOWER以及全自动液体处理工作站FasTrans的操作并进行相关实验。 　　通过这一次的高速实时荧光定量PCR体验交流活动，让更多的生命工作者了解德国耶拿的生命科学产品和先进技术，让更多的实验室对德国耶拿公司的qTOWER等先进生命科学仪器产生了兴趣，在应用实时荧光定量PCR技术上又添新选择。 用户对德国耶拿公司的产品非常感兴趣 体验交流会最后举行了抽奖活动 　　德国耶拿公司举行的“高速实时荧光定量PCR体验会”系列活动的首站于2011年3月16日在上海展开，16日-18日期间分别在中科院上海生命科学研究院、复旦大学和上海交通大学成功举办了三场。3月22日，“高速实时荧光定量PCR体验会”来到了北京，在中国农业大学成功举办了北京站的首次活动。23日在中国科学院遗传与发育生物学研究所体验会结束后，将转战天津进行本系列活动的最后一站。德国耶拿公司的“高速实时荧光定量PCR体验会”系列活动吸引了大批生命科学工作者的参与，取得良好的效果。 在中国农业大学成功举办“高速实时荧光定量PCR体验会”的现场

对新型电子和功能材料的重视，以及对更轻重量和更可持续结构材料的需求，大大推动了聚合物、2D材料和陶瓷等材料的研究。然而，从飞机发动机到家用电器的众多工程应用仍然依赖于金属的高强度和耐用性。因此，金属材料的研究一直持续进行中，而且新材料及其新工艺的开发仍是当下材料界的研究热点，包括高品质高强钢、不锈钢、耐热钢及高温合金等材料[1-4]。大多数金属材料工程应用中必须考虑其强度和韧性。纳米级的第二相弥散强化既能够提高材料强度，又能改善材料韧性的方法之一，因此它对开发新的高性能材料非常有帮助，引起研究者的兴趣。目前，已经有文献报道纳米析出相Nanoprecipitates（NPs）可以大大提高材料的力学性能、耐蚀性、高温性能等。金属材料的性能强化机理与第二相的特征参数及分布有着密切的关系，很多材料强度计算模型也是基于第二相尺寸及百分含量进行计算的。如Friedel和Orowan模型，Friedel切过机制模型:其中r为粒子半径，f为析出相体积分数Orowan绕过机制模型:其中d为粒子半径上述模型说明材料的屈服强度与其内部第二相粒子的平均直径密切相关。此外，纳米析出物类型、尺寸和数量等对疲劳、蠕变等力学性能也有较大影响。因此 NPs的定量表征工作尤为重要。特别是基于当前众多材料均是利用NPs改善材料的力学性能、耐蚀性能、耐热性能、韧性等，析出相定量工作具有较为广泛的实际应用意义，简便、高效定量测试方法的开发工作尤为必要。金属材料的表面形貌与材料的服役过程中表面摩擦行为、腐蚀行为等密不可分，因此对表面形貌的定量分析显得极为有意义。同时金属材料里面的纳米析出相的力学性能一直是材料力学表征的难点，主要受限于尺寸问题，使得众多力学测量设备无能为力。而标准AFM的探针曲率半径为10nm左右，牛津AFM的AMFM技术可以完美解决金属纳米析出物的定量力学问题。表面形貌的定量统计目前， 传统的金属材料NPs的研究主要使用XRD，SEM和TEM。其中，XRD可以表征NPs平均尺寸，但仅能给出粒度范围，尺寸定量精度有限，无法同时获得NPs在材料内的分布。SEM可以表征NPs，但统计结果容易受到表面起伏的影响。由于材料表面腐蚀原因造成某些部位凸起也有可能被统计成析出物颗粒。而TEM可以观察NPs，但在定量统计NPs含量存在问题，主要是纳米析出相在金属材料晶粒和晶界上随机分布导致部分NPs以及边界不明显，从而导致后面的统计出现较大偏差。如图1所示，通过SEM和TEM检测贝氏体钢析出相的尺寸存在明显差异。因此本文推荐使用原子力显微镜检测的方法对金属领域中NPs的定量进行快速且精确的表征。图1 贝氏体钢微观形貌(a)SEM结果(b)TEM结果原子力显微镜(AFM)是一种高精度、快速的表征样品表面特征的技术，可以用来定量表征金属中的NPs。它不仅可以测量颗粒的大小，还可以定量测量其力学和电学性能。技术的进步使得Oxford AFM成像比上一代原子力显微镜的速度更快，操作更容易，数据更可靠。此外，AFM的样品制备要求与其它技术相比更方便，实际使用极具有优势。AFM可以通过形貌、相位图以及材料的力学性质图直接分析NPs。图2给出了高温合金经过抛光之后的析出相的AFM形貌图和相位图，图中可以清楚观察到NPs呈弥散分布，类圆形，尺寸主要分布在10-50nm，该结果与TEM观察结果一致，也说明了AFM表征粒子尺寸信息的准确性。图2 高温合金AFM形貌图，相位图和TEM图

p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(192, 0, 0) " strong 定量PCR还是数字PCR? /strong /span /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201902/uepic/1439dbfb-374f-41af-be2c-22288fe9e5c0.jpg" title=" 1.jpg" alt=" 1.jpg" / /p p style=" text-indent: 2em " 随着数字PCR技术应用的展开，越来越多实验室被其绝对定量的方式、结果的高灵敏度、高重复性等特质所吸引。2012年年底，由Frost & amp Sullivan公司在北美市场进行的调研显示，约三分之一的被访者表示会考虑购买数字PCR设备。 br/ /p p 　　那么，是否意味着目前在研究、临床和工业领域内，广泛采用的荧光定量PCR技术将被淘汰?数字PCR很快就要将其彻底取代?越来越多实验室类似问题。结合多年推广定量PCR与近几年投身数字PCR领域的经验心得，谈谈自己的体会，供大家参考。 /p p 　　总体的观点是： strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 虽然绝大多数定量PCR的应用都可以使用数字PCR完成，但在可预期的将来，两者将长期共存 /span /strong 。到底使用定量PCR还是数字PCR，取决于具体应用和对数据的要求。两者不是either/or的关系，而是both/and的关系。两种技术平台各自的特点与现状大致可从下面8个方面说明。 /p p 　　1. 在20多年的使用和发展中，定量PCR作为一种技术平台，已经产出海量的数据，在工业界和分子检测的某些应用上，定量PCR已经成为“金标准”。基础研究方面，则形成了被称为MIQE的“定量PCR标准实验指南”。 /p p 　　2. 在定量PCR的各种应用中，基因表达分析(gene expression analysis)的应用比重约占七成，综合各种因素来看，眼下定量PCR还是进行基因表达研究的理想手段。 /p p 　　3. 上述的“各种因素”具体展开，主要包括：通量、自动化程度、各种检测探针与染料、检测通道、成本和可参考文献与protocol的数目等等。 /p p 　　4. 就目前市场上已有的数字PCR设备来看，定量PCR在检测的线性范围上具有优势，意味着同一个run内可对各种表达丰度的样品进行分析。 /p p 　　5. 目前定量PCR已经能实现高通量样品条件下的自动化操作。 /p p 　　6. 数字PCR在单分子层面上的绝对定量，可以彻底摆脱对标准曲线的依赖而直接给出靶序列的拷贝数，提高了实验结果在批内和批间的稳定性，甚至能用来对标准品进行定标。 /p p 　　7. 基于绝对定量的方式，数字PCR结果的高重复性和高精度可实现微小差异的基因表达分析，如等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、microRNA表达分析等等。所谓“微小差异”的标准一般而言是指表达水平的差异在2倍以内。 /p p 　　8. 同等条件下，数字PCR在灵敏度方面拥有优势，使得该技术已成为肿瘤的液态活检、病原微生物检测、转基因成分测定、宿主残留DNA分析等的热门技术。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201902/uepic/6dc031e4-d27b-48ff-a2c2-98004abe037f.jpg" title=" 11.jpg" alt=" 11.jpg" / /p p 　　最后，我们来听听MIQE的作者之一：比利时Ghent University的Jo Vandesompele教授如何评价定量PCR和数字PCR之间的关系： /p p 　　 i To those who say dPCR will replace the “very reliable” qPCR, he responds: “of course not.” Digital PCR, however, might be right for some applications such as detection of rare mutations or copy-number variants. /i /p p i 　　He believes that qPCR is the “technology of choice” for gene expression-based experiments, particularly measuring gene expression changes of more than twofold, which probably make up the majority of experiments. In those instances, “qPCR can do the job” and at a lower price point that dPCR, he says. But spotting gene expression differences among similar molecules such as splice variants or microRNAs might work better with dPCR. /i /p

采购量暴增，竞争格局剧变，在刚刚过去的2020年，中国荧光定量PCR市场发生前所未有大变化！受国家出台的相关疫情防控政策强力驱动，2020全年，特别是下半年，荧光定量PCR采购需求猛增。经仪器信息网调查研究，2020年全国通过招标采购荧光定量PCR近1.2万台，近5倍于2019年。供需关系发生反转2020年，荧光定量PCR供不应求，市场由原来的买方市场转变为卖方市场。在以往买方市场时，企业竞争更加侧重在品牌力、产品力、服务能力等；而如今处于卖方市场，有货是王道，企业间拼的是产能、渠道。市场涌入大量竞争者，格局发生极大改变供需关系反转释放出的巨大市场机会，加之荧光定量PCR产品发展成熟，技术门槛相对不高，导致市场涌入大量竞争者。根据我们统计，参与市场竞争的企业超过80家。市场格局发生极大改变，各企业销量排名和份额变化显著，国产企业获益最大。此外，各采购单位需求量也发生巨大变化。接下来，市场机会在哪里？各品牌市场份额如何？竞争对手在不同省份、机构里表现如何？各地区采购情况如何？哪些省市、机构采购需求旺盛？采购机构怎样分布？2021年市场机会主要在哪里？… … … … 仪器信息网（www.instrument.com.cn） 基于自身平台优势，对2020年国内公开采购数据进行分析，撰写了《中国荧光定量PCR仪市场研究报告（2021版）》，旨在为相关从业者进行市场分析和业务决策提供参考。本报告包含荧光定量PCR市场相关最新政策追踪、市场概况、采购机构画像、竞争情况、2021市场研判等内容。》》》欲购买完整报告，请联系李先生（17600374905，微信同号）表1 中央财政支持应急物资保障体系建设补助资金分省预算指标图1 2018~2020年荧光定量PCR仪分季度市场变化图2 2020年Q2~Q4分省采购量图3 主要机构Q2~Q4采购量变化图4 2018~2020年各类机构总市场量对比图5 县级医院采购量与机构数量比图6 各品牌进入省份数量图7 2020年荧光定量PCR仪各品牌市场占有率图8 六类机构2020年采购量及Top10品牌在不同机构市场份额图9 2018~2020年Top10品牌非医疗市场份额变化图10 2018~2020年Top10品牌医疗市场份额变化图11 2020年Top10品牌医疗市场占有率图12 2020年Q3主要品牌在各省销量比较图13 2020年Q4主要品牌在各省销量比较

4月13日，记者从济南市工信局了解到，济南企业山东博弘基因科技有限公司自主研发的“医用荧光定量PCR仪”顺利获得国家药品监督管理局（NMPA）颁发的《医疗器械注册证》（注册证号：国械注准20223220464）获批上市，这是山东省内首台获得注册证医用荧光定量PCR仪器。荧光定量PCR系统在新冠病毒检测中发挥着关键作用。根据国家卫健委《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）》，新冠肺炎确诊病例在符合疑似病例标准的基础上，须同时具备包括“实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性”在内的病原学或血清学证据者。据了解，山东博弘基因科技有限公司自主研发的LEIA-X4型医用荧光定量PCR仪可对目标核酸进行快速、准确的定量、定性检测，采用独特的温控技术保证每个孔位的温控高度统一，配备专有散热片技术，可以使仪器升降温速率更快，温控更精确，设备更稳定。

荧光定量PCR(qPCR)是以荧光为基础的定量分析技术，应用非常广泛，可以用于定量RNA丰度(RT-qPCR)，验证芯片或测序的数据，确定病原体的载量，进行基因分型等等。 　　荧光定量PCR仪负责监控反应体系中荧光强度的变化，记录检测荧光达到阈值时的循环数(被称为Ct或Cq值)。从理论上说，每一个qPCR循环会使目标序列翻倍，因此人们可以在Ct值的基础上对样本进行定量。 　　在进行荧光定量PCR时，我们往往会面临众多选择，每一步选择都影响着实验的最终结果。好在市面上的qPCR产品也种类繁多，可以满足我们的各种需求。 　　染料法VS探针法 　　荧光定量PCR主要分为染料法和探针法两种。染料法一般采用DNA染料SYP® Green(或Promega的PYT® Green等)，这种方法不仅使用简单，成本也最低。不过染料法检测的是体系中的所有双链DNA，不具有序列特异性。为此，一些厂商提供ROX作为内部荧光参考标准，用来校正背景。 　　染料法 　　成本低是染料法qPCR的一个主要优势，DNA染料相对比较便宜，而且适用于任何序列。不过染料法无法在同一个样本中检测多个指标，也难以鉴定扩增得到的序列，会受到脱靶效应(如引物二聚体)的影响。在这种情况下，就需要进行熔解曲线分析，判断扩增所得产物是否只有一种。 　　据安捷伦的Surekha Karudapuram介绍，熔解曲线分析能够帮助研究者确定扩增的特异性。她还指出，理论上利用熔解曲线也可以进行多染料的反应，甚至可以粗略定量那些峰值。 　　市面上可供选择的染料法master mix非常多，例如：安捷伦的Pilliant III Ultra-Fast SYP® Green QPCR & QRT-PCR master mixes，Bio-Rad的SsoAdvanced™ SYP® Green Supermix，Life Technologies的SYP® Select Master Mix，Promega的GoTaq® qPCR Master Mix，Qiagen的Type-it CNV SYP Green PCR Kits，罗氏的FastStart SYP Green Master，Sigma-Aldrich的KiCqStart® SYP® Green qPCR ReadyMix™ ，以及Thermo的Luminaris Color HiGreen High ROX qPCR Master Mix等等。 　　TaqMan探针 　　探针法qPCR使用具有序列特异性的荧光寡核苷酸探针。目前最常用的是Life Technologies公司的TaqMan® 探针，该探针5’端连有荧光基团，3’端连有淬灭基团。在反应进行时，探针与正反向引物之间的模板结合，当聚合酶到达探针处时，酶的5’-3’外切活性将荧光基团切下，使其脱离淬灭基团，发出荧光。 　　探针法与染料法的最大区别在于，理论上探针法中的荧光信号只来源于目标序列。此外，人们还可以利用不同探针，在一个体系中同时检测多种指标。 　　市面上的探针法master mixes也是琳琅满目，包括：安捷伦的Pilliant III Ultra-Fast QPCR & QRT-PCR Master Mixes，Bio-Rad的SsoFast Probes Supermix，Life Technologies的TaqMan Fast Advanced Master Mix，Promega的GoTaq Probe qPCR Master Mix，Qiagen的Type-it CNV Probe PCR +qC Kit，罗氏的FastStart TaqMan Probe Master，以及Thermo的DyNAmo ColorFlash Probe qPCR Kit等等。 　　据估计，SYP Green或TaqMan的使用者占qPCR用户总数的80-90%，其他用户采用的也基本上是上述两种方法的变种，例如分子信标和Scorpion® 探针。 　　其他探针 　　分子信标是一个发夹结构的DNA探针，两头分别带有荧光基团和淬灭基团。与TaqMan一样，分子信标的序列也与扩增引物之间的模板互补。在退火阶段，这种探针的发夹结构展开与模板结合，这时荧光基团与淬灭基团分开，发出与模板丰度相对应的荧光信号。Scorpion探针将分子信标与PCR引物结合起来，在扩增阶段引物延伸形成PCR产物，产物中的序列能够与探针互补结合，使探针发夹结构打开，发出荧光。 　　此外，Promega还开发了一种新型的Plexor® qPCR系统。在Plexor系统中，引物含有经修饰的核苷酸(iso-dC)和荧光基团。随着扩增的进行，DNA聚合酶会向DNA链中引入荧光淬灭基团，使体系中的荧光逐渐减弱。其他qPCR方法记录荧光的增强，而Plexor记录的是荧光的衰减，Promega的市场经理Gapiela Saldanha解释道。 　　据Saldanha介绍，Plexor将探针法的序列特异性，与染料法的熔解曲线分析结合起来。“你可以验证目标扩增的特异性，”她说。此外，Plexor检测不同靶序列只需要两种引物，使多重分析的设计更为容易。 　　基因表达分析 　　从SNP分型、拷贝数分析到病原菌检测，qPCR应用范围非常广，不过最常见的是用qPCR进行基因表达分析。基因表达分析往往需要定量样本中的特定RNA，例如mRNA、microRNA、或长非编码转录本。进行这样的分析，首先要将RNA转变为可以扩增的DNA，进行cDNA合成。 　　RT-qPCR试剂盒主要分为一步法和两步法。一步法试剂盒将cDNA合成与qPCR合并为一步，速度更快，也更适用于自动化流程。两步法虽然需要进行两次反应，但反应的效率更高，而且可以允许用户保留cDNA样本，能够在一个RNA样本中检测多个转录本。 　　“两步法(qPCR)更有优势，其cDNA合成和qPCR反应的效率更高，”Saldanha说。安捷伦，Bio-Rad，Life Technologies，Promega，罗氏和Qiagen都提供有相应的RT-qPCR试剂盒。 　　样本的挑战 　　荧光定量PCR结果的好坏往往取决于核酸制备的质量。处理环境样本(如土壤)和植物样本比较困难，因为其中往往含有抑制PCR反应的物质。此外，FFPE样本也较难处理，其中不仅有PCR抑制剂，样本中的核酸可能也遭到了降解。 　　“这种情况对于灵敏度要求较高，因为模板量非常少。”Karudapuram说，“需要提取更纯的核酸，并且使用能扩增少量初始模板的master mix。”我们可以选用进行了相应优化的核酸提取试剂盒，例如Promega的ReliaPrep™ FFPE RNA Miniprep System或者Life Technologies的Plant RNA Reagent等等。 　　选择理想的qPCR扩增引物，也是一个不容忽视的问题。专家认为，对于相同基因的检测，最好采用已经标准化了的引物。目前，不少供应商都为研究者们准备了预先设计好的qPCR文库，例如Sigma-Aldrich公司就制备了人类、小鼠、大鼠和斑马鱼的文库。此外，Qiagen，Life Technologies，和Thermo等公司也提供有类似的工具。 　　qPCR仪与数字PCR 　　从本质上来讲，荧光定量PCR仪就是PCR仪与荧光检测仪的结合，用于记录qPCR反应时产生的数据。市面上的qPCR仪主要有以下几种：安捷伦的Mx3000P qPCR System，Bio-Rad的CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System，Illumina的Eco Real-Time PCR System，Life Technologies的QuantStudio™ 12K Flex System，Qiagen的Rotor-Gene Q，罗氏的LightCycler® systems，以及Thermo的PikoReal Real-Time PCR System等。 　　荧光定量PCR已经是一个相当成熟的技术了，不过当样本间的绝对差异较小时，qPCR检测的效果并不那么理想。例如，qPCR很难区分一个基因两拷贝和三拷贝之间的差异。好在，能够进行绝对定量的数字PCR技术诞生了。 　　数字PCR将样本分为许多份，使每一份包含零或一个拷贝的模板。然后在每一份样本中运行qPCR反应，对呈阳性的孔进行计数，以此确定样本中模板分子的绝对数量。这一技术的精确性非常高，可以区分很小的拷贝数差异。Bio-Rad、Fluidigm、Life Technologies和RainDance是目前几家主要的数字PCR厂商。

大家好，本周为大家分享一篇发表在Analytical Chemistry上的文章，Improved Label-Free Quantification of Intact Proteoforms Using Field Asymmetric Ion Mobility Spectrometry [1]，文章的通讯作者是美国俄克拉荷马大学的Luca Fornelli教授。完整proteoforms的非标记高通量定量方法的应用对象通常为从整个细胞或组织裂解物中提取的0 - 30 kDa质量范围内蛋白质。然而当前，即使通过高效液相色谱或毛细管电泳实现了proteoforms的高分辨率分离，可鉴定和定量的proteoforms的数量也不可避免地受到固有的样品复杂性的限制。近年来，随着质谱技术的发展，自上而下蛋白质组学质谱(top-down proteomics)研究中蛋白质的鉴定数量大大提升，生成了包含数万种proteoforms的数据集，但在proteoforms的量化能力方面并没有得到相应的性能提升。为克服这一问题，本文中作者通过应用场不对称离子迁移谱法(Field asymmetric ion mobility spectrometry, FAIMS)对大肠杆菌中的proteoforms进行了非标记定量。由此产生的改进允许在单次LC-MS实验中采用多个FAIMS补偿电压(Compensation voltages, C.V.)，而不会增加整个数据采集周期。与传统的非标记定量实验相比，FAIMS的应用在不影响定量准确性的情况下，大大增加了鉴定和定量的proteoforms数量。首先，作者优化了质谱stepped-C.V.数据采集方法对Orbitrap Eclipse性能的影响，并从中筛选出了最优条件(−40、−20、0 V组合)。所有最新的基于Orbitrap的质谱仪(包括Exploris platform和Orbitrap Ascend)都可以采用single time-domain transients(即单次微扫描)在top down FTMS实验中生成高质量的质谱图。作者认为这对于在单次LC - MS2运行期间应用多个C.V.值的采集策略特别有益。接下来，作者应用该方法对大肠杆菌中的蛋白质进行了检测，并与传统的LC - MS2 DDA采集方法进行了比较(图1)。如图所示，每个C.V.值下的总离子流图都不同，且这一额外的分离导致在LB(Luria broth)和M9(醋酸钠处理)样品中鉴定到的proteoforms的数量显著提升。　　图1. 样本制备方法和proteoforms鉴定结果总结虽然在LC-FAIMS和LC-only数据集中，大多数鉴定到的proteoforms质量都小于15 kDa，但其中约20%的质量大于18 kDa甚至高达33.3 kDa(图2)。对已鉴定的proteoforms列表的深入分析表明，达到鉴定低丰度proteoforms的关键参数之一是在串联质谱(MS2)中有足够的时间注入离子。　　图2. A. FAIMS和非FAIMS鉴定到的proteoforms的质量分布。B. 鉴定到的proteoforms与注射时间之间的关系。最后，作者采用ProSight PD v 4.2 (Proteineous, Inc)进行了基于MS1的非标定量，结果显示基于FAIMS的数据集在LB样品(蓝色)和M9样品中检测到的差异表达的proteoforms均有所增加(图3)。作者评估了两个数据集之间的差异(使用和不使用FAIMS采集数据)，以验证FAIMS的应用是否会对量化准确性产生不利影响，结果只有1个proteoform显示相互矛盾的丰度趋势。这种差异是由于该蛋白和一个共流出蛋白之间质谱峰几乎完全重叠造成的。它们具有非常接近的单同位素质量，这样高水平的信号干扰可以很容易地干扰基于MS1的量化。启用FAIMS可以使MS1谱图简化，因为两种proteoforms可以富集在两种不同的C.V. 值下。　　图3. 大肠杆菌proteoforms无标记定量结果分析。作者将LC - FAIMS - MS2数据集与通过BUP在类似样品上获得的非标定量结果进行比较，得出两个主要的结论:1. BUP仍然对蛋白质组提供了更深层次的定量表征 2. BUP提供了与单个基因相关的所有产物的整体丰度水平信息 而TDP方法表明，给定的UniProt accession可以由多个差异表达的proteoforms组成，可能具有不同的行为(即在给定条件下，一些被上调，另一些被下调)。这一额外的信息可能具有潜在的生物学意义，但在基于BUP的定量分析中可能会被遗漏。本文描述的基于FAIMS的定量数据采集方法与PEPPI(Passively eluting proteins from polyacrylamide gels as intact species)蛋白分离技术完全兼容，产生0 - 30 kDa的组分，并且可以方便地根据待分析蛋白的平均质量调整质谱参数(C.V.值)，未来在更大的蛋白质定量方面具有广阔的应用前景。　　撰稿：张颖　　编辑：李惠琳　　原文：Kline JT, Belford MW, Huang J, Greer JB, Bergen D, Fellers RT, Greer SM, Horn DM, Zabrouskov V, Huguet R, Boeser CL, Durbin KR, Fornelli L. Improved Label-Free Quantification of Intact Proteoforms Using Field Asymmetric Ion Mobility Spectrometry. Anal Chem. 2023 Jun 13 95(23):9090-9096.　　李惠琳课题组网址www.x-mol.com/groups/li_huilin　　参考文献　　1.Kline JT, Belford MW, Huang J, Greer JB, Bergen D, Fellers RT, Greer SM, Horn DM, Zabrouskov V, Huguet R, Boeser CL, Durbin KR, Fornelli L. Improved Label-Free Quantification of Intact Proteoforms Using Field Asymmetric Ion Mobility Spectrometry. Anal Chem. 2023 Jun 13 95(23):9090-9096.

记者21日从中科院海洋研究所获悉，该所研究员张鑫课题组和孙超岷课题组共同合作，基于共聚焦显微拉曼技术，通过三维定量成像实现了长期、近实时、非破坏性的微生物监测，对微生物生长和代谢情况进行可视化及定量分析，为未来分析微生物原位生物过程提供了新思路。研究成果近日发表于《微生物学谱》上。固体培养基培养的菌落的三维定量成像示意图 课题组供图记者了解到，张鑫课题组在之前的工作中，观测到我国南海冷泉环境中单质硫含量丰富。随后，孙超岷课题组发现了冷泉细菌Erythrobacter flavus 21-3可以高效氧化硫代硫酸钠生成单质硫，张鑫课题组通过拉曼光谱鉴定后发现单质硫结构为环状S8，研究成果发表在生物学领域权威期刊《国际微生物生态学会杂志》。后续两个课题组合作将E. flavus 21-3及其突变株布放到深海冷泉喷口附近进行原位培养，证实该菌株在深海原位环境中也能形成硫单质，相关成果发表在国际生物学期刊《微生物学》，为解释我国南海冷泉喷口广泛分布硫单质的成因提供了重要理论依据。E. flavus 21-3在高氧条件下的三维拉曼成像分析 课题组供图由此可见，微生物是深海硫形成和循环的重要贡献者，其介导的硫代谢的研究对于了解深海硫循环至关重要。然而，由于深海环境极端复杂，采样困难、微生物难于分离培养等因素，以及缺少对硫元素的形成的近实时无损的监测方法，深海微生物的原位探测面临巨大挑战。目前，主要通过经典的生物和化学方法研究硫元素的生成过程，例如X射线吸收近边结构、高效液相色谱、透射电子显微镜、离子色谱法或化学计量法等。但是，这些方法主要通过取样来获知特定时间点的微生物代谢情况，不能在不破坏样品的前提下连续监测其在时间尺度上的代谢过程；并且，其中一些方法样品制备复杂，会破坏细胞的原位真实性；也可能会出现取样不均匀及污染的情况，导致难以实现连续的原位观察。因此，亟需新的方法突破此瓶颈。低氧条件下E. flavus 21-3的三维拉曼成像分析 课题组供图共聚焦显微拉曼三维成像技术拥有低成本、快速、无标签和无破坏性的优势，具有将定性、定量和可视化完美结合的潜力，为我们解决相关问题提供了新的思路。因此，为证明此技术的潜力，研究团队构建了一套固态基底上微生物群落拉曼三维定量原位分析方法，将光学可视化与拉曼定量分析相结合，可在时间和空间两个维度上无损定量表征微生物群落代谢过程。该技术已成功应用到深海冷泉细菌E. flavus 21-3硫代谢过程的原位监测。据介绍，基于拉曼三维成像进行体积计算和比率分析，课题组对不同环境下的菌落生长和代谢进行了量化，发现了生长和代谢方面不为人知的细节，为厘清深海冷泉生物群落中广泛分布的硫单质成因提供了重要技术支持。“据我们所知，这是首次尝试长期监测菌落在固体培养基中生长的原位无损技术。我们能够快速确定代谢产物，推断反应发生的途径，并快速筛选产硫细菌。由于这一成功的应用，不仅证明了该方法在未来对微生物原位过程的可视化及定量分析的潜力，也为研究深海中附着在岩石沉积物等固体表面上的微生物提供了新的思路。”张鑫对《中国科学报》表示。该研究得到了国家自然科学基金、中国科学院A类战略性先导专项、中国科学院海洋大科学研究中心重点部署项目、泰山青年学者计划等项目联合资助。

p 　　 strong 仪器信息网讯 /strong 实时荧光定量PCR技术操作规范性及科学重复性的标准化都有一定难度和可探讨性，同时因其可实时监测，定性定量的特性使其在各个领域有着广泛的应用。基于此，2017年9月26日，仪器信息网举办“实时定量PCR技术”主题网络会议。本次会议邀请6位业内经验丰富的专家围绕该技术及其应用针对不同主题作报告。来自科研院所、仪器企业、检测机构等近600人报名参与本次会议。 /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 报告展播： /strong /span /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/60f02f00-0d96-4610-85a8-f6ace2129beb.jpg" title=" 1.jpg" / & nbsp /p p style=" text-align: center " strong 报告人：厦门大学生命科学学院 李庆阁教授 /strong /p p style=" text-align: center " strong 报告题目：实时PCR的历程 /strong /p p 　　厦门大学生命科学学院李庆阁教授作了题为“实时PCR的历程”的报告。李庆阁作为最早一批从事实时PCR技术研究的科研工作者，几乎结识了所有实时PCR的先驱，同时亲历了实时PCR的发明和转化。李庆阁介绍，自1992年Higuchi发明实时PCR以来，迄今已有四分之一世纪。经历漫长岁月，实时PCR仍然保持着“新技术”的特征：不仅在很多领域它的应用刚刚开始，即便在其应用最多的分子诊断领域，从传统检测到实时PCR检测的升级仍在持续进行中。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/eac79fcb-0dbc-45c2-ad3e-832cd19036b3.jpg" title=" 2.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告人：中科院青岛生物能源与过程研究所 柴国华副研究员 /strong /p p style=" text-align: center " strong 报告题目：荧光定量PCR的那些事儿__实战篇 /strong /p p 　　中科院青岛生物能源与过程研究所柴国华副研究员作了题为“荧光定量PCR的那些事儿__实战篇”的报告。报告中，柴国华着重整个实验流程设计为基础，介绍荧光定量PCR技术原理和实现方式后，从设计引物，选择内参基因，仪器使用程序，数据分析和实验操作的流程中各关键点进行了详解。同时，柴国华鼓励大家“探究未来，快乐科研”。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/a7497eb3-3390-47b9-99b5-fdcee3b8ee24.jpg" title=" 3.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告人：西安交通大学 彭年才教授/苏州纳米学院副院长/天隆科技董事长 /strong /p p style=" text-align: center " strong 报告题目：临床荧光PCR分子诊断技术新发展 /strong /p p 　　西安交通大学彭年才教授作了题为“临床荧光PCR分子诊断技术新发展”的报告。报告从核酸检测的方法手段出发，介绍了分子诊断技术发展概况和面临的问题，阐述荧光PCR技术的发展应用，介绍荧光PCR分子诊断平台及后续发展新趋势。彭年才结合案例，基于应用角度，介绍了临床荧光PCR技术的新发展，指出从方法和平台开发到应用开发形成合力，发挥和改善荧光PCR技术的优势，克服局限性，更好满足分子诊断的多种需求。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/ed492692-c85a-43eb-9d3e-feceebcfee17.jpg" title=" 4.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告人：伯乐生命医学产品(上海)有限公司 吴非经理 /strong /p p style=" text-align: center " strong 报告题目：定量PCR的质控、标准化和未来—从qPCR到ddPCR /strong /p p 　　伯乐生命医学产品(上海)有限公司吴非经理作了题为“定量PCR的质控、标准化和未来—从qPCR到ddPCR”的报告。报告介绍了基因表达分析的实验流程、MIQE标准等内容，他从定量PCR的质控层面、标准化技术作了具体介绍，并作了详细案例分享，旨在为大家正确使用qPCR技术做出指导。同时吴非还介绍了qPCR到ddPCR变化过程及技术发展。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/61d2244b-51e0-4042-bb41-b095ba211812.jpg" title=" 5.png" / /p p style=" text-align: center " strong 报告人：北京出入境检验检疫局 魏海燕研究员 /strong /p p style=" text-align: center " strong 报告题目：实时荧光PCR技术在食源性致病微生物检测中的应用 /strong /p p 　　北京出入境检验检疫局魏海燕研究员作了题为“实时荧光PCR技术在食源性致病微生物检测中的应用”的报告。魏海燕介绍了食源性病毒和致病菌的基因检测及其方法开发、标准制修订的背景。报告围绕新发布实施的国家标准GB 4789.42-2016 《食品微生物学检验 诺如病毒检验》和出入境检验检疫行业标准SN/T 1870-2016 《出口食品中食源性致病菌检测方法 实时荧光PCR法》，解析实时荧光PCR技术在食源性致病微生物快速检测中的具体操作步骤、结果判定和质量控制等技术细节。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/3eea59f2-7e68-4356-9828-120d7ab26c1a.jpg" title=" 6.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告人：华中农业大学 汪念副教授 /strong /p p style=" text-align: center " strong 报告题目：利用荧光定量PCR进行基因拷贝数和SNP检测 /strong /p p 　　华中农业大学汪念副教授作了题为“利用荧光定量PCR进行基因拷贝数和SNP检测”的报告。汪念从基本概念出发，从绝对定量的基本数学原理、如何利用绝对定量检测基因拷贝数、如何利用定量PCR检测SNP的基本原理作了具体介绍。报告还分享了基因拷贝数和SNP检测具体的实验流程和案例分享。 /p p 　　此外，从网友的反应度来看，本次会议丝毫不用担心有交流不充分的情况存在。仪器信息网一直采用最新的网络平台，界面非常人性化，听众在收听收看网络报告的同时，可以充分利用会议界面中的问答板块和聊天板块与报告老师进行有效的沟通。每一位专家报告均有互动，网友提出了很多针对性强、专业度高的问题，不少专家在报告之后都需要回答至少五六个问题，有的甚至更多，而且即便是线下的交流会议主讲人也很难在现场回答这么多的问题，这足以体现大家对网络会议的认可以及参与的积极性。授人以鱼不如授人以渔。应网友的强烈要求，我们与报告老师沟通确认后，会将报告视频上传仪器信息网的网络讲台平台上，供大家反复回播学习。 /p p 　　更多详细报告内容请于近期查看专题中的精彩回放： a href=" http://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/RT-qPCR/" target=" _blank" title=" " strong span style=" color: rgb(255, 0, 0) " “实时定量PCR技术”主题网络会议 /span /strong /a 。 /p p br/ /p

荧光定量Western Blot，绝对不是上样量越多越好。可靠的Western Blot印迹数据通过加载适当量的样品才能获得。加载过多的蛋白会导致信号饱和或用于检测的荧光基团的自猝灭。那么，您如何知道要加载多少裂解液呢？首先使用BCA或Bradford等蛋白测定方法测量裂解液样品的浓度。一旦知道样品的浓度，便可以确保每种样品的加载量相同。于此同时，您仍然需要一种方法来校准凝胶加载量和转印效率的问题。蛋白印迹定量的最佳方法和新共识是将蛋白进行归一化。许多期刊都接受了总蛋白质归一化（TPN），有些期刊（例如《JBC》）甚至要求作者在Western印迹的定量数据时使用TPN或使用验证过的看家蛋白进行归一化。在下面的实验中，加载了0.2-50µg的HeLa裂解物，以检测靶标蛋白STAT3与内参对照GAPDH和总蛋白膜染色的性能。尽管Total-PVDF膜染色线性最高至50μg裂解物，但这显然不是靶标蛋白STAT3加载的理想上样量，因为信号在12.5μg以上不再线性。上样控制GAPDH的归一化提出了一个严重的问题，因为它在裂解物的浓度低于1µg时呈线性，因此其定量用途非常有限。一般而言，我们建议不要加入超过20µg的裂解物，因为这通常会导致蛋白定量方面的问题。为了获得最佳的荧光定量Western印迹，不要忘记应用适当的归一化策略并加载适量的蛋白。Azure Imager多功能分子成像系统☑ 双激光近红外成像：激发强度大、信噪比高、光泄漏少。☑ RGB可见荧光多功能检测：可进行小鼠成像、转基因植物筛选、模式生物斑马鱼成像、培养皿成像等。☑ 同时4通道荧光成像，检测更高效。☑ 高灵敏化学发光和彩色Marker成像。☑ 彩色蛋白胶和核酸胶成像。参考文献：1. Collecting and presenting data. The Journal of Biological Chemistry.website.:http://jbcresources.asbmb.org/collecting-and-presenting-data#blot. Accessed February 4, 2019.2. Fosang AJ and Colbran RJ. Transparency Is the Key to Quality. J Biol Chem. Dec. 11 2015. 290(50). 29692–29694. PMCID: PMC4705984.