[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中定量环是干嘛用的
色谱定量分析中,为什么要用定量校正因子?在什么情况下可以不用校正因子?
色谱定量中内标法与外标法各有什么优势?
无论是毛细管色谱还是填充柱色谱,只要涉及到定量计算就改期存在着一定的误差,怎样才能把误差减少到最低限度以及正确评价定量误差?因此,讨论[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法的定量分析中减少误差的方法十分必要。下面根据内标法定量谈谈实践体会。 一、 取样的代表性 现在大多数产品是中低度酒,由于酒中组分物化特性的影响,致使酒中许多微量成分将分布于不同层次或界面,因此应从酒库取样到色谱室分析的全过程应考虑取混匀后的酒样,如果不注意取样的方式方法,将会给定量工作造成误差。 二、 定量响应因子的准确性 在实际定量工作中,往往引入相对响应因子进行计算,而定量响应因子的准确与否,直接关系到分析结果的可靠程度。若需求得有效的f值,原则上以组份含量相当为依据:一方面,将待测纯组份与纯标准物配成一定比例的混合试样;另一方面以标准样品、混标,专著文献f值等为实际应用f值,必要时可做部分组份的回收实验加以验证后方可使用。 三、 注射器针外壁的清洁 对毛细管柱头进样来说,在进样的过程中沉积在壁上的物质在高温汽化下瞬间发生转移,从而造成定量分析结果的某些偏差,所以在分析不同种类型酒时应严格注意注射器针外壁的清洁。将注射器针浸入溶剂方可达到有效的清洁,也可定期进行清洗。 四、 进样技术的影响 定量分析的精密度与准确度依赖于进样的重复性和操作技术。针对不同规格毛细管柱及特殊的进样方式(柱上进样、分流/不分流进样),对插针的快慢、位置、深度和操作人员的熟练程度以及刻度读数的准确度都有一定的要求,对于大口径柱止进倦毛细管柱,进入柱子的样品量有很好的重现性。对于中口径、细口径分流/不分流进样毛细管柱,当分析的样品组份浓度范围较宽、沸点范围也宽时易产生分流失真,浓度低和沸点高的组份样品回收率低,精密度也差。总之,任何一种进样方法都不能适应所有类型的样品分析,这需要色谱工作者在实际工作中加以选择优化。 五、 硅胶垫的使用周期 硅胶垫的使用频率一般以进样次数作比较,当硅胶垫使用15至20次以上时,应注意及时更换。如果使用国产仪器配套使用的填充柱,应同时擦净内衬管,否则易造成漏气使基线呈台阶、峰型、出现异常等,影响分析结果的可靠性。 六、 进样量的大小 白酒色谱定量使用的内标法,虽然进样量的大小对计算结果无明显影响,但对现行使用的毛细管柱色谱却影响很大。首先,进样量的大小直接影响着分离与定性;第二,进样量的大小直接影响着出峰保留值的变化,造成部分峰保留时间的错位现象,从而影响定量结果,尤其对工作量大、样品较多更不适宜,对于普通填充柱色谱进样量的大、小影响不是太大,但进样量不当也会造成合峰出现,对于毛细管柱来说,这里所谈的进样量与分流比类同。 七、 标样的定期校正 为确保检测数据的可靠性,应定期进行仪器间的相互校正及标样的校验等,从而进一步了解整个色谱系统的运行情况。 八、 怎样正确评价定量误差 1、 单位的一致性 对于填充柱色谱定量的单位通常以mg/100ml,而毛细管色谱定量的单位以mg/100ml计,所以在做分析比较以及评价误差的同时,应考虑单位的一致性。 2、 含量的一致性 无论是标准样品还是色谱纯标样,求f值(响应因子值)时的样品含量与日常分析中酒样含量同样也存在着是否一致的问题。众所周知:含量搞低有不同的误差范围,含量高组份相对的百分误差偏低,含量低组份相对百分误差较高,所以在含量之间的不协调或含量相差悬殊,易造成分析误差的某些偏见,不能对分析结果的误差进行正确的评价。
色谱分析中,大家一般是用单标定量,还是用混标做曲线定量?
色谱定量分析中 选内标法或外标法 ?
减少[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法在白酒定量分析中误差的方法[b]下载资料网址: http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?sel=admin_name&keywords=zjzxwwl2a[/b]无论是毛细管色谱还是填充柱色谱,只要涉及到定量计算就改期存在着一定的误差,怎样才能把误差减少到最低限度以及正确评价定量误差?因此,讨论[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法的定量分析中减少误差的方法十分必要。下面根据内标法定量谈谈实践体会。 一、 取样的代表性 现在大多数产品是中低度酒,由于酒中组分物化特性的影响,致使酒中许多微量成分将分布于不同层次或界面,因此应从酒库取样到色谱室分析的全过程应考虑取混匀后的酒样,如果不注意取样的方式方法,将会给定量工作造成误差。 二、 定量响应因子的准确性 在实际定量工作中,往往引入相对响应因子进行计算,而定量响应因子的准确与否,直接关系到分析结果的可靠程度。若需求得有效的f值,原则上以组份含量相当为依据:一方面,将待测纯组份与纯标准物配成一定比例的混合试样;另一方面以标准样品、混标,专著文献f值等为实际应用f值,必要时可做部分组份的回收实验加以验证后方可使用。 三、 注射器针外壁的清洁 对毛细管柱头进样来说,在进样的过程中沉积在壁上的物质在高温汽化下瞬间发生转移,从而造成定量分析结果的某些偏差,所以在分析不同种类型酒时应严格注意注射器针外壁的清洁。将注射器针浸入溶剂方可达到有效的清洁,也可定期进行清洗。 四、 进样技术的影响 定量分析的精密度与准确度依赖于进样的重复性和操作技术。针对不同规格毛细管柱及特殊的进样方式(柱上进样、分流/不分流进样),对插针的快慢、位置、深度和操作人员的熟练程度以及刻度读数的准确度都有一定的要求,对于大口径柱止进倦毛细管柱,进入柱子的样品量有很好的重现性。对于中口径、细口径分流/不分流进样毛细管柱,当分析的样品组份浓度范围较宽、沸点范围也宽时易产生分流失真,浓度低和沸点高的组份样品回收率低,精密度也差。总之,任何一种进样方法都不能适应所有类型的样品分析,这需要色谱工作者在实际工作中加以选择优化。
归一化法把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。外标法(标准曲线法、直接比较法)首先用欲测组分的标准样品绘制标准工作曲线。具体作法是:用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与欲测组分相同的色谱条件下,等体积准确量进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准工作曲线,此标准工作曲线应是通过原点的直线。若标准工作曲线不通过原点,说明测定方法存在系统误差。标准工作曲线的斜率即为绝对校正因子。当欲测组分含量变化不大,并已知这一组分的大概含量时,也可以不必绘制标准工作曲线,而用单点校正法,即直接比较法定量。单点校正法实际上是利用原点作为标准工作曲线上的另一个点。因此,当方法存在系统误差时(即标准工作曲线不通过原点),单点校正法的误差较大。因此规定,y=ax+b b的绝对值应不大于100%响应值是y的2%。标准曲线法的优点:绘制好标准工作曲线后测定工作就很简单了,计算时可直接从标准工作曲线上读出含量,这对大量样品分析十分合适。特别是标准工作曲线绘制后可以使用一段时间,在此段时间内可经常用一个标准样品对标准工作曲线进行单点校正,以确定该标准工作曲线是否还可使用。标准曲线法的缺点:每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能,柱温度,流动相流速及组成,进样量,柱效等)很难完全相同,因此容易出现较大误差。另外,标准工作曲线绘制时,一般使用欲测组分的标准样品(或已知准确含量的样品),因此对样品前处理过程中欲测组分的变化无法进行补偿。内标法选择适宜的物质作为欲测组分的参比物,定量加到样品中去,依据欲测组分和参比物在检测器上的响应值(峰面积或峰高)之比和参比物加入的量进行定量分析的方法称为内标法。内标法的关键是选择合适的内标物。内标物应是原样品中不存在的纯物质,该物质的性质应尽可能与欲测组分相近,不与被测样品起化学反应,同时要能完全溶于被测样品中。内标物的峰应尽可能接近欲测组分的峰,或位于几个欲测组分的峰中间,但必须与样品中的所有峰不重叠,即完全分开。内标法的优点:进样量的变化,色谱条件的微小变化对内标法定量结果的影响不大,特别是在样品前处理(如浓缩、萃取,衍生化等)前加入内标物,然后再进行前处理时,可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失。若要获得很高精度的结果时,可以加入数种内标物,以提高定量分析的精度。内标法的缺点:选择合适的内标物比较困难,内标物的称量要准确,操作较麻烦。使用内标法定量时要测量欲测组分和内标物的两个峰的峰面积(或峰高),根据误差叠加原理,内标法定量的误差中,由于峰面积测量引起的误差是标准曲线法定量的2-2是由于进样量的变化和色谱条件变化引起的误差,内标法比标准曲线法要小很多,所以总的来说,内标法定量比标准曲线法定量的准确度和精密度都要好。标准加入法标准加入法实质上是一种特殊的内标法,是在选择不到合适的内标物时,以欲测组分的纯物质为内标物,加入到待测样品中,然后在相同的色谱条件下,测定加入欲测组分纯物质前后欲测组分的峰面积(或峰高),从而计算欲测组分在样品中的含量的方法。标准加入法的优点:不需要另外的标准物质作内标物,只需欲测组分的纯物质,进样量不必十分准确,操作简单。若在样品的前处理之前就加入已知准确量的欲测组分,则可以完全补偿欲测组分在前处理过程中的损失,是色谱分析中较常用的定量分析方法。标准加入法的缺点:要求加入欲测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全相同,以保证两次测定时的校正因子完全相等,否则将引起分析测定的误差。(来源:互联网)
面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法,用哪一种呢?每一种的适用范围是什么呢?其优缺点又是什么?其标准物又有什么要求呢?看完你就都知道了。归一化法把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。外标法(标准曲线法、直接比较法)首先用欲测组分的标准样品绘制标准工作曲线。具体作法是:用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与欲测组分相同的色谱条件下,等体积准确量进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准工作曲线,此标准工作曲线应是通过原点的直线。若标准工作曲线不通过原点,说明测定方法存在系统误差。标准工作曲线的斜率即为绝对校正因子。当欲测组分含量变化不大,并已知这一组分的大概含量时,也可以不必绘制标准工作曲线,而用单点校正法,即直接比较法定量。单点校正法实际上是利用原点作为标准工作曲线上的另一个点。因此,当方法存在系统误差时(即标准工作曲线不通过原点),单点校正法的误差较大。因此规定,y=ax+b 。b的绝对值应不大于100%响应值是y的2%。标准曲线法的优点:绘制好标准工作曲线后测定工作就很简单了,计算时可直接从标准工作曲线上读出含量,这对大量样品分析十分合适。特别是标准工作曲线绘制后可以使用一段时间,在此段时间内可经常用一个标准样品对标准工作曲线进行单点校正,以确定该标准工作曲线是否还可使用。标准曲线法的缺点:每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能,柱温度,流动相流速及组成,进样量,柱效等)很难完全相同,因此容易出现较大误差。另外,标准工作曲线绘制时,一般使用欲测组分的标准样品(或已知准确含量的样品),因此对样品前处理过程中欲测组分的变化无法进行补偿。内标法选择适宜的物质作为欲测组分的参比物,定量加到样品中去,依据欲测组分和参比物在检测器上的响应值(峰面积或峰高)之比和参比物加入的量进行定量分析的方法称为内标法。内标法的关键是选择合适的内标物。内标物应是原样品中不存在的纯物质,该物质的性质应尽可能与欲测组分相近,不与被测样品起化学反应,同时要能完全溶于被测样品中。内标物的峰应尽可能接近欲测组分的峰,或位于几个欲测组分的峰中间,但必须与样品中的所有峰不重叠,即完全分开。一般会选择标准物质的同位素物质作为内标物。内标法的优点:进样量的变化,色谱条件的微小变化对内标法定量结果的影响不大,特别是在样品前处理(如浓缩、萃取,衍生化等)前加入内标物,然后再进行前处理时,可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失。若要获得很高精度的结果时,可以加入数种内标物,以提高定量分析的精度。内标法的缺点:选择合适的内标物比较困难,内标物的称量要准确,操作较麻烦。使用内标法定量时要测量欲测组分和内标物的两个峰的峰面积(或峰高),根据误差叠加原理,内标法定量的误差中,由于峰面积测量引起的误差是标准曲线法定量的2-2,但是由于进样量的变化和色谱条件变化引起的误差,内标法比标准曲线法要小很多,所以总的来说,内标法定量比标准曲线法定量的准确度和精密度都要好。标准加入法标准加入法实质上是一种特殊的内标法,是在选择不到合适的内标物时,以欲测组分的纯物质为内标物,加入到待测样品中,然后在相同的色谱条件下,测定加入欲测组分纯物质前后欲测组分的峰面积(或峰高),从而计算欲测组分在样品中的含量的方法。标准加入法的优点:不需要另外的标准物质作内标物,只需欲测组分的纯物质,进样量不必十分准确,操作简单。若在样品的前处理之前就加入已知准确量的欲测组分,则可以完全补偿欲测组分在前处理过程中的损失,是色谱分析中较常用的定量分析方法。标准加入法的缺点:要求加入欲测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全相同,以保证两次测定时的校正因子完全相等,否则将引起分析测定的误差。
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]定量中的问题大家好! 小弟近日在做用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]定量分析苯和苯酚的含量,出了些问题向大家求教?希望大家能帮小弟走出困境!谢谢了! 我使用的色谱是天美的GC7900 刚买回来的,我第一次用。柱子也是新买的,是AT的,使用前老化过了。 色谱条件是 气化室:250 检测器:240 柱温:115 氢火焰检测器,氢气为氢气发生器,氮气为高纯氮,空气为空压机。它们压力都恒定。 使用的内标是正辛烷,乙腈做溶剂。溶液溶解良好。浓度大约为0.01g/ml进样量为0.06微升。分流比不知道怎么测。[size=1][size=4][color=#DC143C][B]问题是: [/B][/color][/size][/size]取同一溶液三次进样中,内标和被测物的峰面积比相差很大,而且不规律,多数误差在10%以上。在做苯酚和正辛烷的溶液中,有时候苯酚的面积大,有时候正辛烷的面积大,毫无规律可寻。三天我进样有100多次,没有连续三次的误差在10%以内。为了排除人为因素,我找我们实验室进样技术较好的师妹试了几下,结果也一样差。我个人认为单个峰面积的变化可能是进样问题,单内标物和被测物的峰面积比不会变化太大。三天把我搞的很崩溃啊!希望大家出来帮小弟一把!再次感谢了!PS:有什么关于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的资料也希望大家给我一些,我是新手,刚开始做色 谱。我的邮箱是:zhtm.1204@yahoo.com.cn
气相色谱定量分析中内标法和标准曲线法有什么区别?感觉差不多,都得绘制标准曲线,这两个曲线有什么区别?
[align=center][b][size=24px]气相色谱仪四种定量方法 [/size][/b] [/align] 1、面积内标法 取标准被测成分,按依次增加或减少的已知阶段量,各自分别加入各单体所规定的定量内标准物质中,调制标准溶液。分别取此标准液的一定量注入气相色谱仪色谱柱,根据气相色谱仪上色谱图取标准被测成分的峰面积和峰高和内标物质的峰面积和峰高的比例为纵座标,取标准被测成分量和内标物质量之比,或标准被测成分量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法调制试样液。在调制试样液时,预先加入与调制标准液时等量的内标物质。然后按制作标准曲线时的同样条件下得出的色谱,求出被测成分的峰面积或峰高和内标物质的峰积或峰高之比,再按标准曲线求出被测成分的含量。 2、面积外标法 取标准样品成分,在测标准样品之前就算出所取标准样品中含有成分的量,再用气相色谱法测得标准样品的峰面积,然后去标准被测物质,气相色谱法测该物质的峰面积,两者峰面积相比较,最后得出含量值。所用的外标物质,应采用其峰面积的位置与被测成分的峰的位置尽可能接近并与被测成分以外的峰位置完全分离的稳定的物质即标样,一般使用99.5%纯度的气相色谱仪色谱专用化学试剂样品。这也是目前大多数气相色谱仪建议采用的检测方法。 3、绝对标准曲线法 取标准被测成分按依次增加或减少阶段法,各自调制成标准液,注入一定量后,按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵座标,而以标准被测成分的含量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法制备试样液。取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱,求出被测成分的峰面积和峰高,再按标准曲线求出被测成分的含量。 4、峰面积百分率法 以色谱中所得各种成分的峰面积的总和为100,按各成分的峰面积总和之比,求出各成分的组成比率。根据色谱上出现的物质成分的峰面积或峰高进行定量。峰面积可用面积测定仪测定,按半宽度法求得(即以峰1/2处的峰宽×峰高求得)。峰高的测定方法是从峰高的顶点向记录纸横座标准垂线,找出此垂线与峰的两下端联结线的交点,即以此交点至峰顶点的距离长度为峰高。
色谱定量中,内标法和内标百分比法的区别是什么?归一化法和校正面积归一化法的区别又是什么?求详解。
各位大侠:怎样用色谱定量分析氮气中的少量噻吩、苯、正辛烷等啊?用什么样的色谱柱和监测器啊?拜托!
各位大佬,我想知道色质联用仪,用内标法定量的时候,比如我有七种待测物,但我只有其中两种待测物的同位素内标,分别为内标A和内标B,那么其他五种待测物我应该用A还是用B来定量?还是说看具体的色谱峰型,比较哪种内标更合适来定量分析
[size=4]色谱定量分析中有峰面积定量和峰高定量之分,那么我想请教的是我们什么情况下要采用峰面积来定量,什么时候用峰高定量呢,还是可以互用呢?[/size]
内标法与外标法一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。 在使用内标法定量时,有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值? 影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。 由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。 化学方面的因素包括: 1、内标物在样品里混合不好; 2、内标物和样品组分之间发生反应, 3、内标物纯度可变等。 对于一个比较成熟的方法来说,色谱方面的问题发生的可能性更大一些,色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大,对面积比的影响则要小一些,但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度,那么一定有某个重要的色谱问题存在,比如进样量改变太大,样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别,检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变,这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠,而色谱固看来也是正常的话,应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是:面积比可变,而峰高比保持相对恒定, 在制作内标标准曲线时应注意什么? 在用内标法做色话定量分析时,先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析,测量峰面积,做重量比和面积比的关系曲线,此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致,因此,在制作标准曲线时,不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等),还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时,各点并不完全落在直线上,此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差,在使用过程中应定期进行单点校正,若所得值与平均值的偏差小于2,曲线仍可使用,若大于2,则应重作曲线,如果曲线在铰短时期内即产生变动,则不宜使用内标法定量。 二、外标法 用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。此法可分为工作曲线法及外标一点法等。工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。工作曲线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。 外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i组分的量: W=A(W)/(A) 式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。 外标法 external standard method 色谱分析中的一种定量方法,它不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近,以利于定量分析的准确性。 三、定量分析中怎样选择内标法或外标法(来源:药物分析网) 选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。 内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比,来计算被测组分的含量。 选择内标物有4个要求:1.内标物应是该试样中不存在的纯物质;2.它必须完全溶于试样中,并与试样中各组分的色谱峰能完全分离;3.加入内标物的量应接近于被测组分;4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近,或在几个被测组分色谱峰中间。 内标法的优点是测定的结果较为准确,由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序较为麻烦,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。外标法简便,但进样量要求十分准确,要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行,否则造成分析误差,得不到准确的测量结果。 内标与外标都是定量的一种方法而已,至于哪一种方法好与不好不能一概而论,做不同的分析,面对着不同的要求,再加上分析成本分析效率等等问题,我想简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。1、以前做过很多医药、农药中间体的芳香族卤代化合物的常量定量分析,没有自动进样器,用外标法定量,确实重现性与稳定性非常差,结果经常受到搞合成同事的质疑。其实,仔细分析原因不一定就是外标法不适合这种定量分析,首先我们的实验室仪器和手段是否调整到一种稳定而合理的状态了,比如,衬管是否洁净,玻璃棉的位置是否合适恰当(能否使样品尽可能的汽化)、汽化温度是否合适、色谱峰形是否对称(也就是样品与色谱柱健合相是否匹配)、附近有没有其它色谱峰的干扰、选用什么进样方式(如快速进样还是热针进样)等等因素的影响都需要考虑,如果这些因素都考虑了,按照GMP方法验证对于精密度的要求,同一样品进6针以上的RSD和配制6个样品的定量结果RSD都能满足小于1.5%的要求,那么这个方法用外标法就是完全适用的,但是前面的影响因素是一定要都考虑到的,否则谈论这个方法是否适用就有失偏颇了。在做过的许多出口产品的定量分析方法当中有许多是一些医药公司提供的比较完善而验证过的方法,内标与外标都有(他们用的都是自动进样)精密度都能满足RSD小于1.5%的要求,当一个方法能够满足测试要求的时候,无论内标外标,都是可行的,当然有一个分析成本和分析时间的问题,内标的成本和控制溶液、样品溶液的配制当然要比外标要高和麻烦一些了。而有些时候,可能受你实验室现有仪器和附属设备的影响,达不到一定的要求,而还必须进行定量分析,有时外标的结果可能就要差一些,这时,你可能就要考虑用内标法了,可以排除手动进样的误差、分流歧视的影响、包括一些未知因素平行误差的影响,这时内标可能就显示出它的优势来了。 2、上面已经提到当做方法验证的时候,当同一样品配制6个样品溶液用所选用的外标法进行定量的时候,RSD都满足1.5%的要求时,也分为两种情况,小于1%和大于1%小于1.5%。如果RSD的结果小于1%,那这个方法就没有什么可以怀疑的了;如果RSD的结果大于1%而在1.5%略低一些的范围活动时,这个方法的可行性就将受到质疑,毕竟这是方法验证,你就要考虑上面1所提到的影响因素的影响了,如果排除掉以上的影响因素,RSD还是在1.5%附
[font=微软雅黑, sans-serif]石油烃(Totalpetroleum hydrocarbon, TPH)是环境中普遍存在的有机污染物之一,是由碳氢化合物组成的复杂混合体,主要由烃类组成,其中对环境污染构成威胁的主要成分为:烷烃(包括直链烃、支链烃和环烃)、芳烃和多环芳烃等。环境土壤和水质的石油烃污染会导致石油烃的某些成分在生物体中积累,通过食物链进入动物与人体,对哺乳动物及人类产生致癌、致突变的作用。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]分析公众号推出《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]测定石油烃含量中色谱图的积分与定量》相关文章,介绍使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定石油烃含量(C10-40)的定量过程中,如何进行色谱图的积分、背景(空白)扣除及标准曲线的绘制。本文为下篇,介绍[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定石油烃含量(C10-40)定量过程中的背景(空白)扣除与标准曲线绘制。本文所使用工作站软件为安捷伦科技OpenLab CDS ChemStationEdition for[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff] GC [/color][/url]Systems(版本号:C.01.07)。点击以下链接,查看上篇有关谱图积分的详细内容:[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]1 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]概述[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]由于测定石油烃(C10-C40)时柱温较高,色谱柱柱流失严重,因此,绘制校准曲线时,应当用标准样品的色谱图扣除色谱柱柱流失(空白运行/柱补偿)的图谱(样品定量时也应当进行如此操作)。柱流失(空白运行/柱补偿)的测定频次应根据仪器的稳定情况而定,扣除柱流失(空白运行/柱补偿)后的色谱图的基线与进样前的基线保持一致。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]在本文中,背景扣除、空白扣除、柱流失扣除与柱补偿均指上述操作。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/7c/dd/37cdde4c39aebb2da0178b71194aa812.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]下图显示了不适合的空白扣除结果,扣除空白之后,基线出现了明显的下陷:[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/d6/01/3d601eecf5177375bff2936a674fbb7d.png[/img][/align][align=center][/align][font=微软雅黑, sans-serif]2 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]空白扣除在软件中的操作[/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif][color=#ff0000]说明:打开离线工作站之后,请确保在[back=#d9d9d9]方法[/back]菜单中首先调用石油烃的分析方法。随后进行的校正曲线绘制等操作信息都将保存于调用的石油烃的分析方法中。积分内容请参考[url=https://ibook.antpedia.com/x/487195.html][color=#7030a0][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]测定石油烃含量中色谱图的积分与定量(上)[/color][/url]。[/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif]软件中空白扣除的方法非常简单,首先在[color=black][back=#d9d9d9]文件[/back][/color]菜单中调用需要进行空白扣除的数据文件;其次,在[color=black][back=#d9d9d9]文件[/back][/color]菜单中选择[color=black][back=#d9d9d9]扣除空白运行[/back][/color],在弹出的对话框中选择空白运行图谱即可。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/3f/36/73f36fe0832ae92a8cd654563d184fd7.png[/img][/align][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/85/29/6852988ebb733fdf373c442795d4c01a.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]可以明显看出,空白扣除前后,基线的抬升有较大的差别;另外,扣除空白前后,峰面积也有较大的不同。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/ed/2f/eed2f46a29e51429c85b94524d6a38a3.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]需要说明的是,如果扣除空白后色谱图没有积分,可以在[color=black][back=#d9d9d9]积分[/back][/color]菜单中选择[color=black][back=#d9d9d9]积分[/back][/color]即可。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/0f/ae/c0fae1f0114525c145a9e6054228abdc.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif][color=red]扣除空白后色谱图无法进行保存,但是可以直接参与校正(即绘制标准曲线)。[/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]3 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]在软件中绘制校正曲线(标准曲线)[/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif][color=#ff0000]说明:打开离线工作站之后,请确保在[back=#d9d9d9]方法[/back]菜单中首先调用石油烃的分析方法。随后进行的校正曲线绘制等操作信息都将保存于调用的石油烃的分析方法中。积分内容请参考[url=https://ibook.antpedia.com/x/487195.html][color=#7030a0][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]测定石油烃含量中色谱图的积分与定量(上)[/color][/url]。[/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]可以按照以下步骤绘制校正曲线(标准曲线),[color=red]默认打开的为最低浓度点的色谱图[/color]。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.1 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]选中色谱峰[/font][font=微软雅黑, sans-serif][color=#ff0000]标准样品谱图扣除空白之后[/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif],点击[color=black][back=#d9d9d9]设置为选择模式[/back][/color]按钮,在色谱图上点击色谱峰将其选中。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/3c/f8/63cf8953768e78674976536d5e4c6589.png[/img][/align][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/54/25/3542546cbe785fbaa187a1111c101ef0.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]3.2 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]新建校正表并添加第一个浓度点[/font][font=微软雅黑, sans-serif]在[color=black][back=#d9d9d9]校正[/back][/color]菜单中选择[color=black][back=#d9d9d9]新建校正表[/back][/color];在弹出的对话框中输入级别和缺省含量([color=red]此处默认打开的为最低浓度点的色谱图[/color])[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/db/67/1db67b1baee0a2de773b462e51507858.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]点击确定后,离线工作站软件由[color=black][back=#d9d9d9]积分页面[/back][/color]跳转至[color=black][back=#d9d9d9]校正页面[/back][/color],且出现校正表和校正曲线。可以手动在校正表中输入化合物名称。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/9f/39/49f3920adc3c9a95926a42e2e262b6bf.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]3.3 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]在校正表中添加第2、3、4、5个浓度点[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.2.1 按照本文第2部分操作,[/font][font=微软雅黑, sans-serif][color=#ff0000]打开第二个浓度点色谱图并扣除空白[/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif];[/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.2.2[/font][font=微软雅黑, sans-serif]在[color=black][back=#d9d9d9]校正[/back][/color]菜单中选择[color=black][back=#d9d9d9]添加级别[/back][/color];在弹出的对话框中输入级别和含量;[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/ed/49/fed4957be9a43c7024e6b75099cf0685.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]由于工作站会自动根据色谱峰的保留时间自动判定和寻找色谱图的色谱峰,因此此处填入的是第二个浓度点的石油烃的浓度。[/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.2.3 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]按照上述操作,在[color=black][back=#d9d9d9]校正[/back][/color]菜单中依次选择[color=black][back=#d9d9d9]添加级别[/back][/color];在弹出的对话框中分别输入第2、3、4、5个浓度点的信息;即可完成校正表和校正曲线。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/36/a4/936a41552fa386af8fcc2a317d9a0c89.png[/img][/align][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/9c/14/69c14ad92f57f162ed2b9d7aa5fa5254.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]3.4 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]设定报告格式并保存方法[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]在在[color=black][back=#d9d9d9]报告[/back][/color]菜单中依次选择[color=black][back=#d9d9d9]设定报告[/back][/color];在弹出的界面中,在[color=black][back=#d9d9d9]报告设置[/back][/color]中设定报告类型;在[color=black][back=#d9d9d9]定量设置[/back][/color]中设定计算方式为外标法,基于面积进行计算。保存方法即可。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/70/57/3705781d0329aadb37c1d5cce1c07a7d.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]3.5[/font][font=微软雅黑, sans-serif] 计算样品中的石油烃含量[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]按照本文第2部分操作,打开相应色谱图并扣除空白;在在[color=black][back=#d9d9d9]报告[/back][/color]菜单中选择[color=black][back=#d9d9d9]打印报告[/back][/color]即可查看计算结果。[/font]
关于色谱定量方法的问题。大家有没有比较严格的标准来规定色谱测定过程中什么条件下使用外标法,什么条件下使用面积归一法。
[font=宋体]在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法中,可以[/font][font=宋体]用[/font][font=宋体][font=宋体]做定量的参数是[/font]( ),用作定性的参数是( [/font][font=宋体])[/font]
[align=center][b]浅谈常见色谱技术在中药定量分析中的应用进展[/b][/align][align=center][b]西安国联质量检测技术股份有限公司[/b][/align][align=center][b]安平中心:郑俊[/b][/align]现代色谱方法可用于中药分析和质量控制。现阶段常见定量分析的色谱技术有以下几种:1.高效液相色谱(HPLC) 高效液相色谱法(HPLC)是中药质量分析最重要的手段之一,已经在药物的含量测定、组成分析、质量控制等方面[color=#333333]获得了广泛的应用[/color]。梁洪卉等[sup][/sup]建立HPLC-UV定量分析冬虫夏草主要核苷类成分的有效方法,为进一步开展冬虫夏草的品质评价和研究冬虫夏草品质的影响因素奠定了基础;刘武占等[sup][/sup]建立了比现行药典方法更能全面、客观地反映栀子药材质量的同时测定栀子中8个环烯醚萜苷类成分的含量方法;郭冲等[sup][/sup]建立的同时测定人参中16种人参皂苷含量的方法,可用于药材质量控制;李淼等[sup][/sup]测定了金银花中新绿原酸等8种成分的量,为有机酸类及环烯醚萜苷类成分的定量研究提供了方法学参考。 该色谱方法是在药典的所有分析方法中发展最快的,具有灵敏、快捷、色谱柱可反复使用、流动相选择范围宽、分离组分易收集、适用范围广和安全的优点。虽然其仍存在色谱柱易污染、柱容量小等缺点,相信通过药学工作者的不断努力创新,HPLC技术将会更加完善、高效、灵敏。2.超高效液相色谱(UPLC) 新兴的超高效液相色谱(UPLC)技术是Waters公司在2004年率先推出的。固定相采用直径1.7μm的填料,灵敏度较HPLC高,分析时间短,溶剂消耗,流速快,分析通量高,有着良好的分析分离平台。2010年版《中国药典》已经收载使用UPLC测定中药复方制剂成分的含量。朱粉霞等[sup][[/sup][sup]5[/sup][sup]][/sup]用UPLC法对胆木注射液中原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸进行快速测定分析,确定其含量;陈晓虎等[sup][[/sup][sup]6[/sup][sup]][/sup]采用UPLC法测得了栀子金花丸中11种成分(绿原酸、栀子苷、黄芩苷、小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、汉黄芩素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)的含量;罗洁等[sup][[/sup][sup]7[/sup][sup]][/sup]利用10min左右的时间快速鉴别知母的UPLC指纹图谱以及复方丹参滴丸中丹参素的含量测定也采用其法。 但是,UPLC仪器价格较为昂贵,目前尚未在国内外得到广泛的推广和使用,可望在中药质量控制种中得到更多应用。3.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法(GC) [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url](GC)是一种检验中药挥发性成分、半挥发性成分的色谱技术。该法分析精确,操作处理简单,有效的避免了中药材提取时间冗长,取样大含量低,数据处理误差大的不足,常用于贵重药的中成药及微量成分的定量分析。近年来在中药质量检验和控制中得到了广泛的使用。梁倩等[sup][/sup]采用该法研究金银花挥发油GC指纹图谱,对金银花药材的鉴定和GAP实施有重要意义,沈振铎等[sup][/sup]通过色谱指纹图谱鉴别南、北五味子。 然而,鉴定未知成分时,GC法的定性仅是通过保留时间。复杂样品的分析常采用色谱-质谱联用法(GC/MS)。综上所述,色谱技术在中药分析中已有广泛应用,在中药检验中占有非常重要的地位。近十年来,随着色谱研究工作的迅速发展,其分离、检测系统的技术不断更新改进,各种新的色谱方法和联机检测技术日趋成熟,以其高效、高速、高分辨、微量检测及分析自动化的性能和技术优势在中药检验中日益显示出潜在的巨大作用。但中药品种在不断推陈出新,中药的质量还远没有科学量化,还有待于广大的药学工作者在不断实践的基础上,结合现代分析手段,提高中药检验分析水平,为实现中药现代化、国际化,在中药安全、有效的前提下,确保其质量可控。
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]定量分析中内标法和标准曲线法有什么区别?感觉差不多,都得绘制标准曲线,这两个曲线有什么区别?
1、面积内标法 取标准被测成分,按依次增加或减少的已知阶段量,各自分别加入各单体所规定的定量内标准物质中,调制标准溶液。分别取此标准液的一定量注入色谱仪,根据色谱仪上色谱图取标准被测成分的峰面积和峰高和内标物质的峰面积和峰高的比例为纵座标,取标准被测成分量和内标物质量之比,或标准被测成分量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法调制试样液。在调制试样液时,预先加入与调制标准液时等量的内标物质。然后按制作标准曲线时的同样条件,求出被测成分的峰面积或峰高和内标物质的峰积或峰高之比,再按标准曲线求出被测成分的含量。 2、面积外标法 取标准样品成分,在测标准样品之前就算出所取标准样品中含有成分的量,再用 色谱法测得标准样品的峰面积,然后取标准被测物质, 色谱法测该物质的峰面积,两者峰面积相比较,最后得出含量值。所用的外标物质,应采用其峰面积的位置与被测成分的峰的位置尽可能接近并与被测成分以外的峰位置完全分离的稳定的物质即标样。 3、绝对标准曲线法 取标准被测成分 按依次增加或减少阶段法,各自调制成标准液,注入一定量后,按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵座标,而以标准被测成分的含量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法制备试样液。取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱,求出被测成分的峰面积和峰高,再按标准曲线求出被测成分的含量。 4、峰面积百分率法 以色谱中所得各种成分的峰面积的总和为100,按各成分的峰面积总和之比,求出各成分的组成比率。根据色谱上出现的物质成分的峰面积或峰高进行定量。
我想请教各位色友一个问题:假设我采用分流进样做气相色谱,分流比为1:10,那么我最后怎么对样品中的成分定量呢?因为分流式进样,并非所有的样品成分都能进入色谱柱分离并检测到,难道最后进入色谱柱的成分含量跟没有进入的也是按照分流比这个比例吗?
气相色谱中定量分析内标法和外标分别是什么情况用?
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法、标准曲线法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09512.gif以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数,用内标法公式计算即可。其实,从定义上来区分的话,外标法就是用标准品的峰面积或峰高与其对应的浓度做一条标准曲线,测出样品的峰面积或峰高,在标准曲线上查出其对应的浓度,这是最常用的一种定量方法;内标法是对应外标法说的,内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比,来计算被测组分的含量。外标法需要用样品和标准品对比,但是有时我们很难保证样品和标准品进的体积是一样的,毕竟要有误差,这时候就用内标法,就是在外标法的基础上,在样品和标准品里在加入一种物质,通过加入物质的峰面积或峰高的变化,就可以看出我们标准品和样品进样体积的差别,但同时会引进加入物质的秤量误差。所以一般用外标法来定量,如果进样体积很难掌握,就用内标法,可以消除进样体积的误差。标准加入法标准加入法
1、面积内标法 取标准被测成分,按依次增加或减少的已知阶段量,各自分别加入各单体所规定的定量内标准物质中,调制标准溶液。分别取此标准液的一定量注入色谱仪,根据色谱仪上色谱图取标准被测成分的峰面积和峰高和内标物质的峰面积和峰高的比例为纵座标,取标准被测成分量和内标物质量之比,或标准被测成分量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法调制试样液。在调制试样液时,预先加入与调制标准液时等量的内标物质。然后按制作标准曲线时的同样条件,求出被测成分的峰面积或峰高和内标物质的峰积或峰高之比,再按标准曲线求出被测成分的含量。 2、面积外标法 取标准样品成分,在测标准样品之前就算出所取标准样品中含有成分的量,再用 色谱法测得标准样品的峰面积,然后取标准被测物质, 色谱法测该物质的峰面积,两者峰面积相比较,最后得出含量值。所用的外标物质,应采用其峰面积的位置与被测成分的峰的位置尽可能接近并与被测成分以外的峰位置完全分离的稳定的物质即标样。 3、绝对标准曲线法 取标准被测成分 按依次增加或减少阶段法,各自调制成标准液,注入一定量后,按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵座标,而以标准被测成分的含量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法制备试样液。取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱,求出被测成分的峰面积和峰高,再按标准曲线求出被测成分的含量。 4、峰面积百分率法 以色谱中所得各种成分的峰面积的总和为100,按各成分的峰面积总和之比,求出各成分的组成比率。根据色谱上出现的物质成分的峰面积或峰高进行定量。
[color=#444444]请问大家有没有遇到反应生成顺反异构体的问题,在色谱中显示相邻很近的两个峰(可以分开),用内标法该如何进行定量(不知道为具体为哪个顺反异构体且标准物无商售,我的产物为2-甲氧基环己醇)。诸如此类的异构体在色谱中该如何定量分析?[/color]
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法定量分析水产品中的氯霉素(CAP)残留量[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=22826][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法定量分析水产品中的氯霉素(CAP)残留量[/url]
[font=微软雅黑, sans-serif]石油烃(Totalpetroleum hydrocarbon, TPH)是环境中普遍存在的有机污染物之一,是由碳氢化合物组成的复杂混合体,主要由烃类组成,其中对环境污染构成威胁的主要成分为:烷烃(包括直链烃、支链烃和环烃)、芳烃和多环芳烃等。环境土壤和水质的石油烃污染会导致石油烃的某些成分在生物体中积累,通过食物链进入动物与人体,对哺乳动物及人类产生致癌、致突变的作用。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]国内分析监测领域普遍采用红外法测定石油烃,红外光度法具有灵敏度较高、适用范围广、不受油品影响等优点,因此得到全面普及和应用。但是该方法既不能反映石油烃的成分信息,也容易出现假阳性结果,且萃取剂为四氯化碳,四氯化碳属于消耗臭氧层物质(ODS),被蒙特利尔公列为禁用物质,即将被淘汰。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]目前生态环境部发布了多项涉及使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]进行石油烃测定的标准,包括:《HJ 893-2017 水质 挥发性石油烃(C6-C9)的测定 吹扫捕集/[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法》、《HJ 894-2017 水质 可萃取性石油烃(C10-C40)的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法》、《HJ 1020-2019 土壤和沉积物石油烃(C6-C9)的测定 吹扫捕集/[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法》、《HJ 1021-2019 土壤和沉积物 石油烃(C10-C40)的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法发送》等,已经在相关实验室得到了广泛的应用。[size=12px](在公众号内发送关键词石油烃,可获取相关标准文本及标准编制说明)[/size][/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]分析公众号推出《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]测定石油烃含量中色谱图的积分与定量》相关文章,介绍使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定石油烃含量(C10-40)的定量过程中,如何进行色谱图的积分、背景(空白)扣除及标准曲线的绘制。本文为上篇,介绍[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定石油烃含量(C10-40)定量过程中色谱图的积分。本文所使用工作站软件为安捷伦科技OpenLab CDS ChemStationEdition for[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff] GC [/color][/url]Systems(版本号:C.01.07)[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][align=center][font=微软雅黑, sans-serif]保留时间窗与峰面积加和[/font][/align][align=center][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][/align][font=微软雅黑, sans-serif]1 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]概述[/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]在进行石油烃(C10-C40)测定时候,由于石油烃(C10- C40)包含了C10至C40的同分异构体,用一种分析方法对这些复杂混合物全部进行定量很难实现。因此定量选用的操作方法是对一段时间内所有分开和未分开的峰作为一个整体进行峰面积加和[size=12px](该时间段可以认为是可以认为是一个峰,时间段起点作为峰起点,时间段终点作为峰终点)[/size],而不是对每个峰单独积分后再将该段时间内的每个峰进行加和。所选取的进行峰面积加和的时间段称之为保留时间窗。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]2 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]定性和定量操作步骤[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]定性指的是确定保留时间窗,定量指的是绘制标准曲线和计算样品中目标物含量。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/93/b0/893b0fe7578b3aef58a1f600e9ef61b0.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]具体的操作是:取1.0μl浓度为1000μg/ml的正癸烷和正四十烷混合标准溶液,按仪器参考条件进行测定。将正癸烷开始出峰的时间确定为石油烃(C10-C40)的开始时间,将正四十烷出峰结束时间为石油烃(C10-C40)结束时间——通过正构烷烃C10和C40两个物质确定保留时间窗。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]在软件操作上,具体的开始和结束时间点位置的选择原则(即可以进行偏移的时间轴大小),参考峰面积加和的相关说明——即[color=red]起始时间[/color][color=red]可以在刚出峰和色谱峰顶点之间选择;结束时间可以在色谱峰顶点和峰结束时间之间选择[/color]。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/af/bd/5afbd51342a7900bf221de1260c8bb2b.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]确定保留时间窗之后,可以分析标准样品;以浓度[size=12px](C10-C40的总浓度)[/size]为横坐标,以确定的保留时间窗内的峰面积和[size=12px](通过色谱工作站软件功能实现)[/size]为纵坐标,建立工作曲线。[/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]3 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]峰面积加和的软件实现[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.1 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]打开离线工作站,并在方法菜单中调用石油烃的分析方法[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]点击Agilent OpenLAB控制面板上的离线启动,或者单独双击7890(脱机),即可打开[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]离线工作站。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/73/4e/0734ec9fbd280b4a339fe2c40b99b31b.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]打开离线工作站之后,在[back=#d9d9d9]方法[/back]菜单中调用石油烃的分析方法。随后进行的积分等操作信息都将保存于调用的石油烃的分析方法中。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/ac/51/dac515ac6e277ed22b87e9c014e11187.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.2 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]打开相应的数据文件[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/57/30/357300a81ab2660ca7d4fa3c3d8c0b3f.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]打开相应数据文件之后,工作站会自动对色谱图进行判定和积分。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.2 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]打开积分事件表[/font][font=微软雅黑, sans-serif]在[back=#d9d9d9]积分[/back]菜单中点击积分事件,软件会调出积分事件表。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/8f/e1/b8fe187ccaaea796b9594d54a0473b92.png[/img][/align][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/f5/e1/3f5e190bbf3d739d9678429a9d5e2fb0.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]3.3 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]设置[color=red]峰面积加和[/color]积分事件[/font][font=微软雅黑, sans-serif]方法一(建议跳过,直接参考方法二):[/font][font=微软雅黑, sans-serif][/font][font=微软雅黑, sans-serif]将谱图放大至合适的程度;在谱图上方的积分事件选项框中选择峰面积加和,鼠标分别点击需要进行峰面积加和的起点和终点(大致确定位置点击即可)。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/a8/80/ca880f60be3ec16202282759121fcdaf.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]此时左侧积分事件表中会出现相应的事件内容,下图:[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/67/d6/a67d68356c4c4cfbe81aee91615bad50.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif][color=#ff0000]添加峰面积加和事件之后,请点击[back=#d9d9d9]设置为选择模式[/back]按钮退出事件添加状态,以避免鼠标误操作。[/color][/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/82/73/2827349f231df3eee55dba3abf3103b1.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif][color=red]完成上述操作之后,可以放大谱图查看添加的起始时间点和终止时间点是否合适;若不合适,可以在积分事件表中手动修改和调整事件的发生时间。[/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif][color=red] [/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif]调整的原则为:(1)如果“[color=red]峰面积加和打开[/color]”事件发生在峰起点之后、峰顶点之前,则整个峰都将包含在峰面积加和中;如果该事件发生在峰顶点出现之后、但在峰结束之前,则截去部分峰,并立即开始计算峰面积加和。(2)如果“[color=red]峰面积加和关闭[/color]”事件发生在峰开始之后、峰顶点出现之前,则峰面积加和将立即结束,信号上发生这种情况的那一点成为峰谷点;如果“峰面积加和关闭”事件发生在峰顶点之后,则该事件将延迟直至峰结束。[/font][font=微软雅黑, sans-serif][color=#000000][/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif][color=#000000][/color][/font][font=微软雅黑, sans-serif]方法二:[/font][font=微软雅黑, sans-serif]除了上述方法一之外,可以直接在积分事件表内添加峰面积加和事件。[/font][font=微软雅黑, sans-serif] [/font][font=微软雅黑, sans-serif]首先,需要事先确定好进行峰面积加和的起始时间点和终止时间点[/font][font=微软雅黑, sans-serif]。依据上述调整原则,可以将起始点位置设置在5.44min,终止点位置设置在23.85min(确定时间点,着重参考低含量组分出峰时间。同时应当检查是否符合其他含量标准品出峰的时间)。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/85/95/1859578b626c747dd14ed5cb74ffaa19.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]其次,需要了解积分事件表内相关按钮的用途和作用:[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/1c/ed/41ced148c1f9686d77085f94dfe2b5c2.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]最后,通过添加按钮,在积分事件表中插入新行,添加多个积分事件,设置时间点和开关状态。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/3f/26/c3f2692f58e9cdc60835230540e05541.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]3.4 [/font][font=微软雅黑, sans-serif]查看结果并保存方法[/font][font=微软雅黑, sans-serif] 完成积分事件操作之后,可以查看完成了峰面积加和的谱图结果。[/font][align=center][img]https://img.antpedia.com/instrument-library/attachments/wxpic/70/6d/9706dee7f1b90a336902d593d4a32341.png[/img][/align][font=微软雅黑, sans-serif]最后,请注意在文件菜单中保存方法[/font]