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色谱峰数量

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色谱峰数量相关的论坛

  • 液相色谱峰的纵坐标数量级不同

    标准品跑出来的图很漂亮,纵坐标都是0.0几,但是我配的供试品出来的峰很扁,纵坐标大一个数量级,峰面积也不小了,就是峰很不容易看出来,请问这是怎么回事呀?[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/12/202012010941081910_5585_5082352_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/12/202012010941081724_3874_5082352_3.png[/img]

  • 【实战宝典】测定多环芳烃时出峰数量、顺序与标准不同的原因有哪些?

    [b][font=宋体]问题描述:按照[/font]HJ 786-2014[font=宋体]测定土壤和沉积物中多环芳烃,色谱条件:岛津[/font]LC-20AT[font=宋体]四元低压液相系统,二极管阵列检测器([/font]SPD-M20A[font=宋体])和荧光检测器([/font]RF-20A[font=宋体]),流动相为乙腈水溶液,流速为[/font]1mL/min[font=宋体]。结果出峰数量少两个并且与标准中多环芳烃的出峰顺序不同,这是为什么?[/font][font=宋体]解答:[/font][/b][font=宋体]([/font]1[font=宋体])现有流动相洗脱条件无法使所有目标物完全分离,可设置不同的梯度洗脱程序,观察单峰是否有分离成两个峰的迹象,并且验证峰纯度,如条件允许,也可使用质谱或购买单标进行定性。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])借助单标或者质谱验证,确认是否混标中本身就缺少某种组分,或是某种组分已经分解或是损失。如确认是标准品本身的原因,应重新购置合格的标准品。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])尽量采用推荐的色谱柱,液相色谱法测试[/font]16[font=宋体]种多环芳烃有专门的色谱柱,可以使用的安捷伦公司和岛津公司的[/font]PAH[font=宋体]专用柱,规格是[/font]4.6mm×250mm[font=宋体],[/font]5μm[font=宋体]。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])分离效果与仪器的延迟体积也有一定关系,比如岛津的[/font]LC-20AT[font=宋体]带四元比例阀加混合器,延迟体积可以大到[/font]3mL[font=宋体]左右,安捷伦的[/font]1260[font=宋体]带四元比例阀延迟体积一般是[/font]900μL[font=宋体]左右;因此同样的梯度、同样的色谱柱分离也不一定完全一样,也会出现某些峰不能完全分离的情况。[/font][font=宋体]([/font]5[font=宋体])出峰顺序与柱子、流动相、柱温等很多因素有关。如果条件不能做到,无法与标准中出峰顺序完全一致,应对色谱峰进行定性确认。如能定性,即便有个别峰顺序不对,结果也是可以接受的,这并不会影响定量分析。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

  • 什么原因会导致色谱峰拖尾?

    前沿陡峭,后沿较前沿平缓的不对称峰,称为拖尾峰。气相色谱中,常见的吸附色谱法(利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差别而使之分离的色谱法称为吸附色谱法),如果吸附等温线为非线性,当进样试样量超过一定数量时就会出现拖尾峰;分配色谱法(利用固定液对不同组分分配性能的差别而使之分离的色谱法称为分配色谱法),如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰现象。什么原因会导致色谱峰拖尾?

  • 【求助】色谱条件不同如何确定色谱峰与混标中各物质的对应关系

    我这几天正在测定蛋黄中FAME,买了sigma的Supelco37FAME混合标准品,[B][size=4]标品图谱的色谱条件为[/size]:[/B]色谱柱:SP-2560,100m*0.25mmID,0.20um柱箱温度:140摄氏度(5min)以4摄氏度/min升至240摄氏度载气:氦气,20cm/sec检测器:FID260进样口:1ul,260摄氏度,100:1[B]我的实验的色谱条件:[/B]色谱柱:安捷伦DB-23,30m*0.25*0.25um柱箱温度:80度3min,以10度/min的速度升至170度,维持10min,再以5度/min的速度升至220度,维持3min载气:氮气0.5ml/min检测器:FID250进样口:1ul,240,20:1由于条件不同,出峰时间与标准品不同,但峰数量远大于37种,近五十种。不知道如何确定各峰与混标中各物质的对应关系,C4-C16确定还相对比较容易,后面就很难了,无论是峰高还是面积与标准品图谱相差很大,是不是我的色谱条件不合适,需要改进?还是有其他的方法?再有标品中浓度是不是和色谱峰面积对应,浓度大峰面积就大?请各位帮忙!

  • 【实战宝典】什么原因会引起色谱峰拖尾?

    [font=宋体]发帖人:[/font]doxw0323[font=宋体]链接:[/font][url=https://bbs.instrument.com.cn/topic/961852][color=windowtext]https://bbs.instrument.com.cn/topic/961852[/color][/url][b][font=宋体]问题描述:[/font][/b][font=宋体]前沿陡峭、后沿较前沿平缓的不对称峰,称为拖尾峰。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中,常见的吸附色谱法[/font]([font=宋体]利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差别,而使之分离的色谱法称为吸附色谱法[/font])[font=宋体],如果吸附等温线为非线性,当进样试样量超过一定数量时就会出现拖尾峰;分配色谱法[/font]([font=宋体]利用固定液对不同组分分配性能的差别,而使之分离的色谱法称为分配色谱法[/font])[font=宋体],如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰现象。什么原因会导致色谱峰拖尾[/font]?

  • 同一样品用两根不同类型色谱柱测的出峰差异

    同一样品用两根不同类型色谱柱测试,一个峰多,一个峰少,是不是两组数据包含的样品信息是相同的,只是由于分离效果差异,导致峰的掩盖重叠而峰的数量减少?或者还有别的原因,谢谢!

  • 求助matlab findpeaks函数 iBase iSaddle 色谱峰 半峰宽 峰高

    本人matlab的一个新手,想用matlab做一个二维色谱峰数量检测程序来分析自己的数据,奈何自己的matlab操作和编码知识实在太落后了,有部分代码处理和操作实在看不明白,在findpeaks函数上看了将近1个多月了,但是还是只看完了1/2,越到后面越难看懂,求哪位在这方面曾经有过研究或正在研究的亲一起交流交流,走过路过的亲们也不要错过啊,findpeaks在各种谱图中应用极为广泛,大家一起把它弄懂了可以有很多好处的啊。对于给在下帮助较多的亲们,在二维色谱峰检测程序编写完成后,源无偿提供源代码共享,在此先谢过亲们了。

  • 液相色谱峰拖尾不要怕,我有好办法!

    液相色谱峰拖尾不要怕,我有好办法!

    [align=center][img=,600,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909111715231978_835_932_3.jpg!w690x460.jpg[/img][/align][b][/b]可以采取些什么措施来避免峰形拖尾?首先找到峰拖尾的原因:[list=1][*]色谱柱本身被污染,或者塌陷;[*]仪器柱外死体积太大。柱体积越小,柱效越高的色谱柱受柱外死体积影响越大;[*]目标物本身的化学性质导致,一般碱性或极性的目标物和填料上的非特异性吸附位点互相作用。[/list]过载或柱外展宽导致的:[list=1][*]观察色谱图,可以得到很多信息,观察峰高,如果是UV检测器,峰高在1000mAμ的数量级以上,那么可能是过载造成的峰形拖尾,通常情况下,120A左右孔径的多孔填料,上样量在100μg时就会出现过载导致的峰形不好,这时可能峰高不是很高,可以进样1/10量来判断,重复进样一次;[*]根据高低浓度的谱图,观察多个化合物的峰形是否大致不变,或者有相同情况的改变,由于峰宽的增加能抵消柱外死体积引起的峰形异常(有可能是前延峰有可能是拖尾峰),那出峰时间越长的峰,峰形越好,那么可能是柱外死体积导致的,柱外死体积考虑两种情况:[*][b]额外的主展宽效应[/b]连接管路,进样器、检测器流通池的扩散展宽会导致在色谱图上先出的峰异常,把细内径的色谱柱用在一台常规的分析仪器上,或者最近重新连接过系统,就有可能是这种情况。如果是后一种情况,检查所有的管路长度,内径,是否符合该类型仪器。链接端是否完好(不同色谱柱仪器制造商会使用不同深度的接口,在使用金属件链接时尤其要注意),对于接口影响有一个偏离标准,仅仅15μl偏差在5μm的色谱柱上流经3ml提及的流动相就能明显影响到色谱峰形;工作站采集常数(通常工作站上可以设置采集频率)[*]工作站的采集频率会影响到峰形,出峰较早的峰形更差,一般工作站设置的采集数是在1秒,出峰很快,峰形很尖锐,需要增加采集频率以避免色谱峰“失真”。[/list]色谱图中所有的峰形都出现十分明显且相同程度的拖尾,那可能是以下原因导致的:[list=1][*]柱床损坏;按照厂商出厂检测的方法进行色谱柱检测,如果仍然是相同的峰形,可以采取一些合适的溶剂冲洗(参考色谱柱异常冲洗流程),冲洗后按照出厂检测方法仍然没有改善,那就是色谱柱柱床本身变化,那就没有办法修复。如果冲洗后出厂检测符合出厂标准,那可以再检测之前的项目,有可能出现之前的项目峰形仍然不能改善的情况,说明该填料受到强保留物质的改性对该项目有影响,可以用于别的项目(强烈要求不能用于新项目的方法开发)。[*]所有的样品组成都有相同的化学性质;有一些峰正常,有一些特定的结构式的峰形异常,那就是特定的化学性质导致的,最常见的就是碱性物质与填料表面的硅羟基发生了强的相互作用,而导致拖尾;还有就是具有螯合官能团的目标物与硅胶表面的金属离子发生螯合作用引起拖尾。[/list][b]怎么消除这些拖尾?[/b]针对第一种情况,方法不能改变建议选择一款专门为碱性化合物而设计的反相填料;方法能调整,建议增加一定比例的三乙胺,辛胺,四丁基盐等,降低流动相的pH值到3以下。

  • 色谱峰的前沿与拖尾问题

    1.产生前沿和拖尾的原因一般有哪些? 产生前沿和拖尾的原因一般有哪些? 产生前沿和拖尾的原因一般有哪些 拖尾:1 干扰峰,优化条件分离 2 色谱柱塌陷,更换色谱柱 3 流动相 pH 不合适,调节 pH 值 4 管路没有接好,存 在较大的死体积,可以重新接一下 前沿:1 溶剂选择不合适,选择合适的溶剂 2 样品过载,降低进样量 3 柱温太低,升高柱温 4 色谱柱损坏,更换色 谱柱 5 干扰峰,优化色谱条件分离 可能的问题:1.柱子问题 2.流动相不恰当 3.定容样品的溶剂不合适 产生峰前沿的原因:柱过载,柱头塌陷,溶剂选择不对 产生峰拖尾的原因:存在杂质未分开,柱污染,柱子选择不对。 拖尾峰与柱子有关,可能是过载,稀释样品再做,或换新柱做吧 一般产生托尾峰往往是有机性相近杂质没有分开,可以优化分析方法,或更换柱子试一试;也可能由于柱子使用时间 太久柱效下降出现塌陷等原因;再有也会根样品本身性质有关,基团需要流动相中添加能与之结合优化峰形的化学物 质,要根据具体情况而定。柱子可能污染了吧,溶剂也可能有,或柱效下降。 图谱前沿和拖尾的原因主要是流动相选择不合适,可以相应调整流动相的极性,或者适当加入酸来调整,可以得到较 好的改善。一般来讲,酸碱在流动相中对于前沿和拖尾影响较大。 柱前沿是可能因为柱超载,拖尾是可能因为样品被污染,选择合适的流动相,调节好 PH 能够改善这以情况。 液相拖尾峰出现原因及解决办法:1.柱头有空隙。解决办法:使用填料或玻璃珠填充柱顶部。2.柱上样品超载。解决办 法:使用更高负载量的固定相。增加色谱柱内径、减少样品量。3.单峰- 存在干扰性组分。解决办法:净化样品;预 分离。4.存在未扫的死体积。解决办法:减少接头的数量、确保进样器密封垫紧密、确保接头正确固定。5.碱性化合物 - 硅醇相互作用。解决办法:换成聚合物固定相。6.碱性基质- 硅醇相互作用。解决办法:使用更强的流动相或添加竞 争碱(例如,三甲胺) 。7.硅胶基- 柱降解。解决办法:使用特种色谱柱;聚合物柱或空间位阻。8.溶剂相极性不匹配。 较早流出的峰或靠近溶剂前沿的峰更容易出现拖尾,解决办法:改变样品溶剂。另外,为减少拖尾,可以选择设计优 良的封端色谱柱,且使用象三乙胺(TEA,较少需要)等添加剂,或使用“极性”键合相

  • 【原创大赛】如何应对色谱质谱峰 “消失”

    [align=center][font=宋体]如何应对色谱质谱峰 “消失”[/font][/align][align=left][font=宋体]平时逛仪器社区,经常遇到版友咨询“我的色谱峰怎么忽然消失了”、“仪器灵敏度不够吗”、“我只是换了台仪器,同样的方法为什么一点色谱峰都没有了”、“难道是离子对会自己变吗”等等等等。下面也会有很多热心的版主提出自己的经验并附上详细的检查方法,那么我认为遇到这种情况还是要理清思路,比较色谱峰消失前后,自己做过什么操作,是仪器的问题还是自己的操作失误。毕竟每个实验室环境不同,配置也差异很大,那么今天我来分享一下自己在遇到“色谱峰消失”时是如何冷静处理的。[/font][/align][align=left][font=宋体]首先离子对的数量多了,出现错误的离子对很正常,AB需要自己输入离子对,这样失误的几率大大增加,而Thermo质谱的操作就比较人性化,它有在Tune复制,并到Trace Finder建立方法中粘贴的功能,因此我们在遇到色谱峰“消失”时,首先需要检查是否自己的质谱参数被人修改?色谱条件用差了?流动相跑空了?流动相中的盐析出了?这类问题还是挺多的,需要耐心检查。尤其接的是别人的实验任务时,如果出现此类错误,而目标物的真实分子量被自己上网查出并检查是这个原因导致的色谱峰“消失”,是很让人崩溃的。[/font][/align][align=left][font=宋体]再一个就是关注仪器之间的差别,有的实验室仪器多,操作人员也多,经常出现更换仪器做一个项目的事情,这时会出现分子量偏差的问题,但不至于出现色谱峰“消失”,我目前遇见过一次色谱峰“消失”,竟是因为更换的质谱仪负离子模式没有被准确校正,从而导致我的一对负离子目标物“消失”,而我却为了这个问题各种猜测甚至怀疑自己,当被告知仪器的负离子模式在工程师手上很难校正后也是极度崩溃的。[/font][/align][align=left][font=宋体]第三种情况是浓度的错用会出现色谱峰“消失”,明明微克级别的检测,如果错用纳克,那么再浓缩的样品前处理方法也很难检测到,因为我就犯过类似错误。[/font][/align][align=left][font=宋体]最后附上版主的回复,可参考学习。[/font][/align][align=left][font=宋体]“质谱比UV灵敏度高,TIC又没什么选择性,所以基线很高,淹没了你的目标物。考虑吧样品液处理一下,能够用什么方法让你的目标物浓度高一些,其他的东西少一些。[/font][/align][align=left][font=宋体]另外,有的化合物对UV的响应(一定波长下)比质谱的响应好,所以不是所有化合物都特别适合拿质谱来做,虽然它具有很多优点(此处略去N个字)”;[/font][/align][align=left][font=宋体]“是不是源参数设置不合理,化合物高温条件下稳定吗?灵敏度下降还有可能是离子抑制”;[/font][/align][align=left][font=宋体]“说一下可能性吧,第一还是看柱压,出现两次不同的结果,很大原因是柱压的然变化。[/font][/align][align=left][font=宋体]第二,有可能开始进样的时候,洗脱剂只进了一种,虽然从工作站上看不出来,所以最好的方法是平衡基线的时候,用每种展开剂的100%都冲一下”。[/font][/align][align=left][font=宋体]最后感谢仪器信息网提供原创大赛让大家共同交流学习![/font][/align][align=left][font=宋体] [/font][/align][align=left][font=宋体] [/font][/align]

  • 16种有机磷农药混标出峰数量不够,也无法区分 求助

    16种有机磷农药混标出峰数量不够,也无法区分 求助

    购买了16种有机磷农药混标 但是进机子后出来的峰不够数量,因为是买的混标 也没有单标可以一个个区分具体的峰是哪一个 想求助下 缺少的峰是时间没到没出来还是和其他的重叠了 如何解决 下面是16种名单和做出来的图谱机子:岛津gc2010 柱子:dp1701麻烦大家了,请多指点。以前在学校学的跟实际自己工作操作区别还是挺大的 很多不懂。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904191556312933_9995_3739662_3.png[/img][img=,690,589]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904191556318633_8238_3739662_3.png[/img]

  • 液相色谱峰拖尾不要怕,我有好办法!

    [b]可以采取些什么措施来避免峰形拖尾?首先找到峰拖尾的原因:[/b][list=1][*]色谱柱本身被污染,或者塌陷;[*]仪器柱外死体积太大。柱体积越小,柱效越高的色谱柱受柱外死体积影响越大;[*]目标物本身的化学性质导致,一般碱性或极性的目标物和填料上的非特异性吸附位点互相作用。[/list]过载或柱外展宽导致的:[list=1][*]观察色谱图,可以得到很多信息,观察峰高,如果是UV检测器,峰高在1000mAμ的数量级以上,那么可能是过载造成的峰形拖尾,通常情况下,120A左右孔径的多孔填料,上样量在100μg时就会出现过载导致的峰形不好,这时可能峰高不是很高,可以进样1/10量来判断,重复进样一次;[*]根据高低浓度的谱图,观察多个化合物的峰形是否大致不变,或者有相同情况的改变,由于峰宽的增加能抵消柱外死体积引起的峰形异常(有可能是前延峰有可能是拖尾峰),那出峰时间越长的峰,峰形越好,那么可能是柱外死体积导致的,柱外死体积考虑两种情况:[/list][list=1][*]额外的主展宽效应连接管路,进样器、检测器流通池的扩散展宽会导致在色谱图上先出的峰异常,把细内径的色谱柱用在一台常规的分析仪器上,或者最近重新连接过系统,就有可能是这种情况。如果是后一种情况,检查所有的管路长度,内径,是否符合该类型仪器。链接端是否完好(不同色谱柱仪器制造商会使用不同深度的接口,在使用金属件链接时尤其要注意),对于接口影响有一个偏离标准,仅仅15μl偏差在5μm的色谱柱上流经3ml提及的流动相就能明显影响到色谱峰形;[*]工作站采集常数(通常工作站上可以设置采集频率)工作站的采集频率会影响到峰形,出峰较早的峰形更差,一般工作站设置的采集数是在1秒,出峰很快,峰形很尖锐,需要增加采集频率以避免色谱峰“失真”。[/list][b]色谱图中所有的峰形都出现十分明显且相同程度的拖尾,那可能是以下原因导致的:[/b][list=1][*]柱床损坏;按照厂商出厂检测的方法进行色谱柱检测,如果仍然是相同的峰形,可以采取一些合适的溶剂冲洗(参考色谱柱异常冲洗流程),冲洗后按照出厂检测方法仍然没有改善,那就是色谱柱柱床本身变化,那就没有办法修复。如果冲洗后出厂检测符合出厂标准,那可以再检测之前的项目,有可能出现之前的项目峰形仍然不能改善的情况,说明该填料受到强保留物质的改性对该项目有影响,可以用于别的项目(强烈要求不能用于新项目的方法开发)。[*]所有的样品组成都有相同的化学性质;有一些峰正常,有一些特定的结构式的峰形异常,那就是特定的化学性质导致的,最常见的就是碱性物质与填料表面的硅羟基发生了强的相互作用,而导致拖尾;还有就是具有螯合官能团的目标物与硅胶表面的金属离子发生螯合作用引起拖尾。[/list][b]怎么消除这些拖尾?[/b][color=#333333]针对第一种情况,方法不能改变建议选择一款专门为碱性化合物而设计的反相填料;方法能调整,建议增加一定比例的三乙胺,辛胺,四丁基盐等,降低流动相的pH值到3以下。[/color]

  • 【极限体验】平衡嗷嗷麻烦,色谱峰咣咣性感(四)(12月份)

    【极限体验】平衡嗷嗷麻烦,色谱峰咣咣性感(四)(12月份)

    【发贴背景】实验嗷嗷顺利,新化合物咣咣出(一)http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111203/3687561/实验嗷嗷凄惨,化合物咣咣不纯(二)http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111204/3689304/实验嗷嗷忐忑,化合物咣咣争气(三)http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111205/3691424/【实验目的】——我尽量说得让看贴的人明白我的意思,尽量。 对于做植物提取分离的人来说,随着实验的进行,化合物数量会越来越多。化合物数量一多,分到相同化合物的可能性也会越来越大; 同一化合物是不需要一直分离的,分到几十毫克的量就够了;同一化合物也不需要反复进行NMR测试一类(测试之前,你不知道是同一个化合物的,呵呵)。因此,避免重复,就成了一个关键问题。本贴的主要内容是:考察同一化合物在同一色谱柱、不同流动相条件下保留时间的不同,为以后其它化合物的比对提供一定的理论依据。 比如,化合物A,色谱柱X,在30%甲醇/水条件下,保留时间为10min;化合物B,色谱柱X,在20%甲醇/水条件下,保留时间为15min,它们到底是不是同一个化合物(化合物A和化合物B的TLC行为及紫外吸收相同)?此贴能为此种情况提供一个参考。【仪器试剂】水:重蒸水 甲醇:色谱纯,天津大茂 液相:Waters 高效液相,Waters 996 DAD检测器,Waters Model 600 controller液相色谱【液相色谱条件】 色谱柱:Ultimate XB-C18柱(5μm, 4.6x250mm)流动相:20%、30%、40%甲醇/水标准品:geniposide流速:1.0ml/min进样量:2微升检测波长:全波长扫描【实验结果】平衡是非常非常麻烦的,我最烦平衡了;色谱峰倒是蛮“性感”的,相当地苗条了;首先是40%甲醇/水,保留时间6.194minhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112052249_335762_2424913_3.jpg然后采用的是30%甲醇/水,保留时间12.18min,跟40%呈现2倍关系http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112052250_335763_2424913_3.jpg最后采用20%甲醇/水,保留时间38.18min,跟30%呈现约3倍的关系http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112052251_335765_2424913_3.jpg其它如50%出峰太早,10%出峰太晚,谱图就不上了,对我的比对工作没有任何参考价值。【小结与讨论】1. 特别声明:对于化合物比对工作而言,以上数据只做参考,不能作为准确数据;2. 如果某化合物1,在30%甲醇/水条件下,保留时间为5min,那它在20%甲醇/水条件下,保留时间会在一定会是15min吗?这种计算方法是不可行的。3. 那此贴的意义在哪?意义在于,如果某化合物2在20%甲醇/水条件下为15min左右的时候,我会考虑,它跟某化合物1,有可能是同一化合物,会将它们进行比对。如果某化合物2在20%甲醇/水条件下为20min,那我会考虑,它们不是同一化合物。4. 此法不提倡(我相信也没人会细看这贴子,细看了也不会用,想用也没地方用),它为我的实验提供了很多帮助。但值得注意的是,我也曾在此法上栽过跟头。5. 只是一种最为初级的化合物比对方法,对我而言,我以前用,现在用,将来还得用(没办法,化合物数量多了,真的很麻烦,经常分重);对你而言,一带而过的好。6. 我希望看贴的人没看懂,看懂也不感兴趣,感兴趣也不要问,因为,更多的是经验成分。

  • 液相色谱峰拖尾分析

    w 液相色谱峰拖尾分析从色谱柱分离机理角度 造成拖尾的原因多数是因为要分离的化合物是碱性的。 硅胶表面的硅羟基 pKa 值是2-3, 也就是当流动相的 pH 值大于这个值,硅羟基就会解离,这时这个氧带的外层电子对碱的吸 附是特别强的,很多人知道硅羟基对碱性物质吸附,解决办法:应选择封尾的柱子,但是即 使封尾,不管工艺怎么好,都不会是100%能封住。那么就争取从 pH 值角度考虑,减小流 动相 pH,或者说加三乙胺,三乙胺容易被这个解离的硅羟基吸附,其实作用相当于对色谱 柱封尾。 从流动相的角度 用甲醇做碱性物质要相对比乙腈好,因为甲醇含有-OH,多少能抑制硅羟基解离,加缓冲盐 的目的也是抑制硅羟基解离。 所以说种种方法都是抑制硅羟基解离或竞争吸附, 尽量减少解 离的硅羟基对碱性物质的吸附。 前沿峰图 非常有可能是色谱柱的硅胶溶解造成的。 前沿峰还有可能是由溶解性效应引起, 就是溶解样 品的溶液对样品的溶解性远大于流动相。 现在市场上有种色谱柱经过表面处理之后残留的硅 羟基 pKa 值能达到5.5-6我不说哪家生产的,用这种柱子做你的流动相 pH 控制在5.5以下拖 尾的效果非常好, 另外建议做碱性化合物时选择色谱柱尽量选择比表面积小, 含碳量低些的 色谱柱,效果会好。 A、 峰拖尾 、 1、筛板阻塞(a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱) 2、色谱柱塌陷(填充色谱柱) 3、干扰峰(a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱) 4、流动相 PH 选择错误 (调整 PH 值。对于碱性化合物,低 PH 值更有利于得到对称峰) 5、样品与填料表面的溶化点发生反应(a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、换柱子) B、 峰前延 、 1、柱温低(升高柱温) 2、样品溶剂选择不恰当 (使用流动相作为样品溶剂) 3、样品过载 (降低样品含量) 4、色谱柱损坏 (见 A1、A2) C、 峰分叉 、 1、保护柱或分析柱污染图 (取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻 塞, 拆下来清洗。 如果问题仍然存在, 可能是柱子被强保留物质污染, 运用适当的再生措施。 如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。) 2、样品溶剂不溶于流动相 (改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。) D、 峰变形 、 1、样品过载 (减少样品载量) E、 早出的峰变形 、 1、样品溶剂选择不恰当 (a、减少进样体积 b、运用低极性样品溶剂) F、 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰 、 1、柱外效应(a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路) b、使用小体积的流通池) G、 K’增加时,脱尾更严重 增加时, 、 增加时 1、二级保留效应,反相模式(a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入 盐或缓冲剂(或离子化样品)d、更换一支柱子) 2、二级保留效应,正相模式(a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入 水(或多官能团化合物)d、试用另一种方法) 3、二级保留效应,离子对 (加入三乙胺(或碱性样品)) H、 酸性或碱性化合物的峰拖尾 、 1、缓冲不合适 (a、使用浓度50-100mM 的缓冲液 b、使用 Pka 等于流动相 PH 值的缓冲液) I、 额外的峰 、 1、样品中有其他组份 (正常) 2、前一次进样的洗脱峰 (a、增加运行时间或梯度斜率 b、提高流速) 3、空位或鬼峰 (a、检查流动相是否纯净 b、使用流动相作为样品溶剂 c、减少进样体积) J、 保留时间波动 、 1、温控不当 (调好柱温) 2、流动相组分变化 (防止变化(蒸发、反应等)) 3、色谱柱没有平衡 (在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱) K、 保留时间不断变化 、 1、流速变化 (重新设定流速) 2、泵中有气泡 (从泵中除去气泡) 3、流动相选择不恰当 (a、更换合适的流动相 b、选择合适的混合流动相) L、 基线漂移 、 1、柱温波动,即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测 器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。 (控制好柱子和流动相的温度,在检测 器之前使用热交换器图) 2、 流动相不均匀,流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。 (使用 HPLC 级的溶 剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。) 3、流通池被污染或有气体 (用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1M 的 硝酸。(不要用盐酸)) 4、检测器出口阻塞,高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线 (取出阻塞物或更换管子。参 考检测器手册更换流通池窗) 5、流动相配比不当或流速变化 (更改配比或流速,定期检查流动相组成及流速) 6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 (用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在 分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗) 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 (检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及 HPLC 级的溶剂) 8、 样品中有强保留的物质(高 K’值)以馒头峰样被洗脱出, 从而表现出一个逐步升高的基线。 (使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子) 9、使用循环溶剂,但检测器未调整(重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时,使用 新的流动相) 10、检测器没有设定在最大吸收波长处。(将波长调整至最大吸收波长处)柱头有空隙。解决 办法:使用填料或玻璃珠填充柱顶部 柱上样品超载。解决办法:使用更高负载量的固定相。增加色谱柱内径、减少样品量、 单峰- 存在干扰性组分。解决办法:净化样品;预分离 存在未扫的死体积。解决办法:减少接头的数量、确保进样器密封垫紧密、确保接头正 确固定 碱性化合物- 硅醇相互作用。解决办法:换成聚合物固定相 碱性基质- 硅醇相互作用。 解决办法: 使用更强的流动相或添加竞争碱 (例如, 三甲胺) 硅胶基- 柱降解。解决办法:使用特种色谱柱;聚合物柱或空间位阻 硅胶基- 柱降解。解决办法:使用特种色谱柱;聚合物柱或空间位阻+

  • 从峰谜解读活动看色谱峰问题,汇总色谱峰的常见问题

    在色谱分析中,检测器因对色谱柱流出的物质产生不同的响应而产生色谱峰,在色谱图中,根据色谱峰来进行定性和定量的分析,所以色谱峰是色谱分析的关键要素,而由于仪器设备和操作及试剂等的原因,色谱峰会出现很多问题;如峰的拖尾、前延、分叉、变形等,峰拖尾最主要的问题。而从3月份的活动帖子来看,大家讨论的问题也基本上是这些,可以先来看看参与活动的帖子1、吃元宵猜灯谜——猜一猜峰前伸的原因2、【峰谜解读】水做谜语让你猜——看图解读畅谈之三:流动相与水3、【峰谜解读】+重叠峰4、【峰谜解读】+分叉峰(你可能想不到的原因)5、【峰谜解读】遇到难题了,是不是色谱坏了(有图)6、【峰谜解读】基线走成这样,也是醉了7、【峰谜解读】GC7820A TCD检测器出现规则的脉冲峰8、【峰谜解读】+这样的色谱图,您见过吗?9、【峰谜解读】基线不平,原因可能有那些10、【峰谜解读】这样的色谱峰有点想不通11、【峰谜解读】GC-2014出现高温区基线紊乱从这些帖子也可以看出,峰前伸、重叠峰、交叉峰、不出峰、峰基线不好等等,依然是大家探讨的问题。可见,这些问题是比较常见的。然后,这些问题的形成,不同的色谱仪器也会有不一样,而且同一个问题的出现,跟我们的色谱条件也有很大关系。以下列出一些色谱版区相关的帖子,供大家参考1、【资料】进样后色谱峰异常的原因http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20070611/872407/2、高效液相色谱常见问题分析与对策http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20091126/2231326/3、液相色谱版资料汇总之五——HPLC使用、维护、故障分析与处理http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100221/2406689/4、气相色谱常见问题解答http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060304/354091/http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20061101/611697/图谱来找茬(第十季)-不规则基线 · 【讨论】图谱来找茬(第九季)-宽峰/馒头峰 · 【讨论】图谱来找茬(第八季)-肩峰/叉峰解析 · 图谱来找茬(第七季)-拖尾/前沿峰解析 · 【讨论】图谱来找茬(第六季)-鬼峰解析 · 【资料】图谱来找茬(第五季)---柱效我来测【板油解析详解】· 【讨论】图谱来找茬(第四季)----钝峰解析 · 【谱图】大家图谱来找茬(第三季)-倒峰解析 · 【谱图】图谱来找茬【第二季】· 【讨论】图谱来找茬【第一季】

  • 重新安装原来的色谱柱,同一样个样品的离子丰度为什么变大?

    Agilent 7890A-5975C 因为实验室有别的任务,本来已经调好的色谱柱被换下来。最近任务完成换成原来的柱子,但是同一个样子的离子丰度值比原来大很多,原来8或9*10^6,现在10^7,样品易挥发,但是密闭状态保存。请问大家这是什么原因呢?响应10^7是不是有点大?用这么大的数量级来定量,是不是不会很准确?谢谢大家。

  • 气相色谱不分峰

    各位大佬,今天上午我用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析样品,由于机器出现后开门定位失败的故障色谱一直响警报,因此我当时就把色谱关了,过了一个多小时才重新开的色谱,但是在开色谱之后再分析样品,原本苯并噻吩与萘的峰是分开的,现在没有分峰了,想问一下这是怎么回事。我用的色谱是福立9790

  • 色谱峰形状

    我的色谱图峰形状呈现后拖尾,而且骑着侧峰,请教诸位会是什么问题?原来峰形很好很对称的,标准品出现的问题,我觉得是色谱柱的问题,需要清洗或者衍生,诸位给点意见啊?

  • 【讨论】两色谱峰的分离度对两色谱峰面积之和的影响

    由【求助】测有关物质色谱条件的专属性试验问题 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101025/2882558/想到的1、两杂质色谱峰达到基线分离时的峰面积之和与两色谱峰部分重合时的峰面积之和,在使用自身对照法时它们所占的比例是一样的吗?2、用于校正归一法时,我觉得两峰应该完全分离,你觉得的呢?

  • 色谱峰重叠

    我是一名[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]新手,现在根据国标在重新做苯系物 的标线,但是色谱峰出峰时间都提前了很多,原来8.5分钟出完,现在5分钟就出完,而且少了一个,是有两个峰重叠了,降低了柱温,没有效果,请各位老师指点一下,用的是KB-WAX的柱子

  • 气相色谱色谱峰便宜,该怎么积分

    气象色谱已经有了色谱分析方法,分析时直接调用分析方法即可得到结果。可是,现在色谱峰出峰延迟了1分钟,打印时电脑就不认识这个峰了,也没有计算峰面积,怎么办。

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