色谱进样量

大家使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]时如果用微量进样器进样的话，液体样品进样量是多少？咱们交流一下我们填充柱进样为1微升；毛细柱分流进样0.2或者0.4微升再补充点：不知道各位用的微量进样器是多大量程的，我们用10微升的进样0.2微升总是感觉不太保险

[color=#444444]最近用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]检测总是出现这样的问题，同一样品，进样体积一样，但出峰高度差不少，含量变化也很大，一个含量在70%，一个30%左右，能浮动8%左右，这样根本没法定量啊，即使是粗略的定量。为什么重复性会这么差呢，是色谱的问题，还是色谱条件，或者操作的问题？[/color]

[b]原则：[/b] 对于柱长为50~250 mm，内径为4~5 mm进行的分离，样品中单个化合物的量应该≤50 μg，样品的进样体积也应≤25 μl（当把流动相用作进样的溶剂）。 对于内径比较小的柱子，样品大小应该减少至与柱子直径的平方成正比。如果样品中包含可电离的分子，样品量＞1 μg就会出现柱子超载的现象。 [b]样品进样量对HPLC分离效果影响基于以下原因：[/b] 为了避免由于样品进样量太大，而在分离中出现不想要的变化； 为了增加痕量分析中检测器的敏感度需要使用尽可能大的样品进样量； 为了在制备 HPLC 中最大化回收净化后的产品量。 由于样品的进样体积或进样量太大而造成的分离度和（或）保留时间的变化，分别称为[b]体积超载[/b]和[b]质量超载[/b]。 [b]体积超载：[/b]样品体积对分离效果的影响 假设样品中的分子浓度保持不变，样品体积对峰的尺寸和形状的影响如下图所示，随着样品的进样体积按照进样顺序1~4不断增加，色谱峰开始逐渐加宽，然后形成一个平扁的顶部。 [img=,690,438]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051642597593_5016_3203140_3.jpg!w690x438.jpg[/img] 几种不同的色谱柱构造，它们的最大样品进样体积如下： (150mm x 4.6mm，3μm 颗粒）Vs≤80 μl (100mm x 4.6mm，3μm 颗粒）Vs≤50 μl (30mm x 4.6mm，3μm 颗粒）Vs≤30 μl (30mm x 2.1mm，1.5μm 颗粒）Vs≤4 μl 如果色谱图中较早洗脱出来的峰的分离度并不是关键，那么就可以进样较大体积的样品。 样品可能溶解在某种溶剂的溶液中而不是在流动相里。当样品溶剂比流动相要弱时，可以进样体积较大的样品而不会对峰宽和分离度造成负面影响。相反，进样溶解在比流动相强的溶剂里的样品，往往会使得色谱图中较早洗脱出来的色谱峰发生谱带加宽和（或）扭曲变形。用比流动相强的溶剂来配备样品是一种常见的错误， 如果有可能应该尽量避免。如果不方便更换样品溶剂，那么虽然样品溶解在较强的溶剂里， 但是只要进样体积够小，色谱图就不会受到影响（可以忍受）。 以1:1的比例用较弱的A溶剂（比如水）稀释样品，然后以2 倍的体积进样。这样做能有效地减少样品溶剂带来的问题（尤其是当一个样品溶剂＞50%B) ，而同时也能保持进样的样品量不变。较大的进样体积和较强的样品溶剂可以在梯度洗脱法里使用，因为在梯度洗脱开始的时候样品会和较弱的流动相（较低的％B ）混合。如果有疑问，那么将进样体积减小为原来的一半以及增加为原来的2 倍，并且观察不同的进样体积对分离度的影响，接着再根据相应的情况作进一步调整。 [b]质量超载：[/b]样品重量对分离效果的影响 即便样品的进样体积较小，溶解样品的质量也会有可能导致色谱柱超载，造成样品峰的加宽和变形。这种情况的发生是因为柱子保留样品分子的容量是有限的；也就是说靠近峰带的固定相中样品饱和。下图显示的是一个由于柱子超载而造成的谱带加宽的例子。样品进样量的大小顺序为1a1b1c1d234（最大进样量）。 [img=,690,428]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051646063485_3784_3203140_3.jpg!w690x428.jpg[/img] 只要样品中各个成分的重量不要过多（ 通常对于4.6 mm 内径的柱子进样量50 μg ，内径小的柱子，进样量也相应要减少），每个峰带在柱子内的移动就不会受到样品中其他峰带的影响。因此，样品中单个化合物的重量，往往决定了色谱柱是否会超载，峰形是否会发生改变，而与样品总重量无关。其中一个化合物引起色谱柱的超载，也不会影响到样品中其他色谱峰的分离（只要它们都是基线分离的）。只有当单个化合物的进样量太大，才会发生色谱柱超载的现象并同时出现色谱峰的拖尾（ 比如对于内径为4.6 mm 的柱子进样量＞50 μg)。[img=,600,282]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051649465969_829_3203140_3.jpg!w600x282.jpg[/img] [b]避免进样过多所引起的问题[/b] 以常规的HPLC 分离实验执行样品分析的时候，针对同样的分离程序，最好能保证不同化合物的k、N和Rs值保持不变。这个要求简化了基于保留时间的定量分析和色谱峰的识别。要保持k、N和Rs的值不变，就必须保证样品的进样量足够小，以避免柱子超载，并且分离效果也就不会随着样品进样量大小而变化，通常需要样品量和体积都不超过一定的界限。样品体积一般在HPLC 实验里是保持不变的，主要担忧的是样品中的分析物浓度过高。再次，Wmax的值应该是指样品中各个化合物的重量， 而不是样品的总重量。举例说，如果样品中没有一个成分超过样品总量的10% ，那么与仅仅含有单个成分的样品相比，此样品的最大样品进样量就可以多10 倍。 [b]比预想的样品浓度要高[/b] 如果一个分析物在不同样品中的浓度不同，那么质量超载就可能会由于样品浓度过高而发生，造成分离度丢失，保留时间改变。分析物的浓度或重量对分离结果造成的这种影响，应该在最后的HPLC 程序中都要考虑到（在方法建立之后）；样品的最大进样浓度或者最大进样重量Wmax应该早早确定，这样就能避免因为样品超载引起的问题，包括检测器的超载，引起非线性的检查结果。超过这个浓度的样品就要再次稀释或者重新分析。 [b]痕量分析[/b] 在痕量分析中，最好能把峰高最大化，从而增加信噪比。通常被进样的痕量分析物的量都非常小，因此不会造成色谱柱超载的问题，但是样品中的其他成分却可能会引起色谱柱超载，可能会对分析物的分离效果造成潜在的负面影响。也就是说一个化合物的进样量如果过大，则可能会影响邻近的另一个色谱峰谱带的分离效果。 如果样品中包含过多干扰性的化合物，在展开HPLC分离实验前最好就是能把样品清洁一遍，除去干扰的化合物。在痕量分析中，进样最大可能的样品体积是有利的。当感兴趣的色谱峰和邻近的峰分离非常好并且也有足够的样品可以使用的话，增加样品的进样体积有助于一步增加峰高。如果溶解样品的溶剂远比流动相弱，那么我们就可以使用较大的进样体积，并且色谱峰的大小也能保持与进样体积成正比，而不会出现额外的谱带加宽的问题（这个方法尤其在梯度洗脱的时候会常用到）。这种增加检测器灵敏度的方法是以充足的样品量为前提的。

各位老师，我最近在苯甲醇氧化反应，今天在检测反应液（主要成分是苯甲醇、苯甲醛、苯甲酸、溶剂为乙酸乙酯）的时候，在其他色谱条件相同的条件下，当进样量为0.2ul的时候，苯甲醇的转化率为89%，但当进样量为0.4ul时，苯甲醇的转化率为79%，当进样量降低为0.1ul的时候，苯甲醇的转化率变的更低，将为60%多，而各进样条件下苯甲醛的选择性基本相同，我想问问各位老师为什么进样量不同时，苯甲醇的转化率会相差这么大，我该以哪一个进样量条件下的转化率为准呢？而一般的进样量是多少？是怎么确定的？我的色谱条件为：进样器：150℃、柱温：280℃、检测器：280℃，手动进样，采用面积归依法计算各组分含量。柱子为SE-54，50m×0.32mm×0.50mm，国产色谱，按理说，同样的样品在相同条件下，含量应该会一样的，怎么我在进样量不同时得出了不同的含量呢？我再问一下，SE-54对苯甲醇、苯甲酸、苯甲醛、乙酸乙酯可以分的开吗？麻烦各位老师指导指导我，谢谢了！

液相色谱进样量一般在10微升到20微升之间，这是最常见的进样体积。如果分析对象的灵敏度较低，进样量可以增加到50微升甚至100微升。此外，超高压液相色谱的进样量通常在0.5微升到1微升之间，这是因为超高压液相色谱的柱子与普通液相色谱的柱子不同，进样量少且不好取样。? 进样量的选择需要考虑色谱柱的容量和溶剂效应。进样量一般与色谱柱的容量有关，过多的进样量可能会导致色谱峰的扩散，影响峰面积的准确性。因此，在选择进样量时，需要综合考虑分析物的性质、色谱柱的类型和容量以及实验的具体要求。

各位老师，大家好，最近在做苯甲醇氧化反应，今天用气相色谱分析苯甲醇、苯甲醛、苯甲酸、乙酸乙酯（用作溶剂）的含量时，其他色谱条件未改变、且都相同的情况下，当进样量为0.2ul时，苯甲醇的含量为89%，但当进样量为0.4ul的时候，苯甲醇的转化率为79%，两次进样量的条件下，苯甲醛的选择性基本相同，我想请教一下各位老师，哪个结果较为准确呢，为啥进样量不同，各组分含量变化会如此之大呢？我的色谱条件为：进样器：150℃、柱温：280℃、检测器（FID）：280℃。柱子为毛细管柱SE-54，规格为：50m×0.32mm×0.50um。手动进样，国产色谱，采用面积归依法计算各组分含量的。按理说，同样的样品，含量是定的，怎么进氧量不一样时，结果反而还不一样，请各位老师给我指导指导我该怎么做，造成这种问题的原因是什么？是仪器的问题，还是我方法的问题，我该怎么做才能消除这种问题呢？谢谢了

气象色谱在分析样品时，进样量与“色谱柱的容量”有关吗

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]如何选择进样时间和进样量？

[size=18px]在fid检测器里，信号值控制在多少比较合适。我现在进样0.8微升，溶质稀释4倍，而溶剂峰峰高约6万，担心进样量过大没有增大进样量，比较难以进行微量分析。[/size][size=18px]是否有句话说[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]填充柱可接受的单个组分的量是1μg，那这个组分是否包括溶剂呢？[/size]

[color=#444444]我最近在苯甲醇氧化反应，今天在检测反应液（主要成分是苯甲醇、苯甲醛、苯甲酸、溶剂为乙酸乙酯）的时候，在其他色谱条件相同的条件下，当进样量为0.2ul的时候，苯甲醇的转化率为89%，但当进样量为0.4ul时，苯甲醇的转化率为79%，当进样量降低为0.1ul的时候，苯甲醇的转化率变的更低，将为60%多，而各进样条件下苯甲醛的选择性基本相同，我想问问各位老师为什么进样量不同时，苯甲醇的转化率会相差这么大，我该以哪一个进样量条件下的转化率为准呢？而一般的进样量是多少？是怎么确定的？我的色谱条件为：柱温：150℃、气化温度：280℃、检测器：280℃，手动进样，采用面积归依法计算各组分含量。柱子为SE-54，50m×0.32mm×0.50mm，国产色谱，[/color][color=#444444]按理说，同样的样品在相同条件下，含量应该会一样的，怎么我在进样量不同时得出了不同的含量呢？我再问一下，SE-54对苯甲醇、苯甲酸、苯甲醛、乙酸乙酯可以分的开吗？麻烦各位老师指导指导我，谢谢了！[/color][color=#444444]我问问各位老师，我该怎么做才能避免这种问题的发生，还有，我问一下造成这种问题的原因是什么，是仪器的问题呢？还是我的操作问题呢？谢谢了[/color]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的进样量一般选多少，液体我一般2微升，气体80微升，对吗，期待高手赐教

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进样量或进样方式不一样会影响某种物质的保留时间吗？

我想用安捷伦的气相色谱分析气相产品，主要是水蒸气和乙烯，丙烯，苯乙烯的混合物，可能还有会其他的低碳烃。水蒸气可以先冷凝下来，不用考虑。分析这些物质，阀动进样一次需要多少样品，如果用气密性的进样针手动进样又需要多少样品？安捷伦提供的定量环和手动进样针的范围非常大，不知道在什么范围内比较合适。因为搭建反应体系很麻烦，我想尽量建一个小反应体系，能把产物定量分析出来就可以。谢谢各位

气相色谱在不超载的情况下，进样量为了防止太多或太少，有没有个大致标准？有人说是满量程的80% 对不？

[color=#444444][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]对进样量浓度有要求吗？我想先用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析下，看看上面的峰是否分离的较好。所以，请问下刚开始进样样品稀释到多少倍较好，一般都是按多少的比例？（我这个样品中有高沸点组分达350度）才能使得图中主要的峰看起来更突出。谢谢[/color]

1、同样分子量的样品,支化度大的分子和线形分子哪个先流出色谱柱? 2、讨论进样量，色谱柱的流速对实验结果有无影响？3、温度，溶剂的优劣对高聚物色谱图的位置有什么影响4、GPC的分离机理与气相谱的分离机理有什么不同

毛细管色谱柱: CP-WAX58(FFAP)50m*0.25mm*0.2µ m的最高进样量是多少?载气流速:1.1ml/min,分流比:1:40

[color=#444444]HPLC用自动进样器进样，设定进样量是5ul，样品共有100ul（在普通色谱瓶里加了微量小玻璃管），但进一次样就少了50ul。不知道是否哪里出问题了还是自动进样器本来就是要多吸取样品的？以前都用1ml的样品量，进样多少没有注意。[/color]

气相色谱仪进样量是多少

单位想采购一些色谱仪检定用的微量进样器，请问那个牌子的微量进样器质量比较好，或者那个厂家的比较好，请熟悉的朋友告知一下，我们平头和尖头都需要的，最好有销售的联系电话，谢谢。

本人做医药农药中间体研发实验自己做的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进样一针获得的产品含量和中控分析中心人员的获得数据不同，进样量一样，但是分析人员的数据总是比我的值高，请问哪位朋友能给解释一下，是不是柱子有问题？

今天我们的色谱仪器进行鉴定，鉴定人员说进样量很大的情况下会把色谱柱弄断，不知这种说法有没有道理？我还是第一次听说，大家有没有听说过呢

进样口与色谱柱具体怎么搭配。可以在电脑操作系统中设置色谱中一个进样口接两个色谱柱吗？

液相色谱一般都有定量环 20ul的居多 但是我们进样有时候进20有时候进10的 进20ul时候、大家一般用20ul定量环时候进多少 有人说 进三倍量 那如果近10ul的是不还要换定量环啊 我一直都是20的 从没有换过 一般也没有按照进3倍量！

当用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]溶剂极性强度大的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主时，如果样品进样量大，如定量管为20ul，此时单一的纯物质会出现双峰，第二峰比第一峰小(每次都不太一样)，且拖尾，保留时间会提前(相对进样量少而言)，将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的，此情况下需要减少进样量。另一个原因是，进样量不一定大，但绝对量很大，色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾(如果出峰很快，也可能是色谱柱问题)。将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大，色谱柱过载造成的。

我们用的是安捷伦1100的高效液相色谱仪，在做一个软膏剂的时候，标准规定的浓度进样10μl，峰形有前延峰，把浓度稀释一半，进样10μl，峰的对称性在1.0左右，如果再把浓度稀释一半，进样20μl的话，峰形又不对称了。大家分析一下是什么原因？液相色谱的进样量与峰形之间的关系怎样？（药品名字是“复方地塞米松乳膏”，内标法测定地塞米松含量，内标物是甲睾酮）

我使用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]是手动进样的，戴爱ICS1500，想请问各位高手，一般进样量是多少啊，进样量对出来的峰有影响吗？仪器重现性很不好，怎么同一个样品，第一次进样检出来浓度很高，第二次进样又检不出了，请问事怎么回事啊？

本人刚接触液相色谱，想要检测某饮料中某一物质的含量采用外标法，该物质的大体含量不清楚，看了几篇参考文献说外标法中浓度范围最好包括样品浓度，这该怎么做呢？难道扩大外标法中的浓度范围吗，这样好像比较麻烦又不见得准确啊？还有就是进样量应该怎么确定啊？