T 细胞是免疫应答的重要组成部分,能够识别和清除外来病原体和肿瘤细胞。然而,为了防止产生自身免疫和免疫病理学问题,必须严格控制 T 细胞应答。我们开发了一款用于 Agilent NovoCyte Advanteon 流式细胞仪的 16 色免疫表型分析 panel,可同时分析 T 细胞的分化、活化、衰竭和通过脱颗粒及细胞因子的表达分析其功能。理论上,这种方法可以全面分析 T 细胞在免疫应答中的功能。
免疫亲和柱净化(Copure® 赭曲霉毒素 A 免疫亲和柱,3 mL)上样:取待净化样品 2 mL 过柱,弃掉流出的液体。淋洗和洗脱:加入 20 mL 水淋洗柱子,分两次淋洗,弃掉流出的液体,抽干小柱;加入 2 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱,流速约为 2-3 秒 / 滴。重新溶解:40℃下氮吹至近干,加 1 mL 初始流动相复溶,0.22 µ m 滤膜过滤,供 HPLC 分析。