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石蜡包埋热台

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  • 秀一下 烤片机&包埋机

    秀一下 烤片机&包埋机

    先来一个——包埋机  生物组织自动包埋机   包埋机采用分体化设计,整机由包埋部分和冷冻部分组合而成,加热快速、控温准确、工作可靠.其独立的制冷台面,全对称设计,还适合左右不同的用手习惯,更体现了慧达公司"以人为本"的设计理念.   性能特点:   主要性能指标   ●温度采用PID模糊自动控制技术,温控准确,稳定可靠。   ●蜡缸密封性能好,不漏蜡,噪音小,具有双重过热保护,   安全可靠。   ●二级石蜡沉淀、过滤,以防异物阻塞或污染标本。   ●备有低压照明灯,可在足够的亮度下调整小块组织的包埋位置。   ●手动、脚动控制任意选择。   ●防断电全自动程序控制,可预设自动开机时间,实现提前熔蜡。   ●独有的不锈钢台面板,耐铲刮、易清洁。   ●工作台残蜡自动回收。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203041958_352345_2019107_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203041958_352347_2019107_3.jpg

  • 【原创】包埋盒五大使用方法及使用注意事项

    包埋盒五大使用方法1.取材时将组织块放于写有该组织编号的一次性包埋盒中,上盖(不锈钢)脱水盒盖,放入脱水篮中进入脱水机或手工脱水。 2.将包埋底模存于烤箱的下层(或单独的一层)。 3.包埋时将脱好的组织连同脱水篮也放在内有包埋盒底模的同一烤箱内。打开脱水盒盖,将脱水盒盖放在一边,根据组织块大小选取包埋底模,用镊子在酒精灯上加热,夹取组织块放于底模内,上覆装组织脱水的写有该组织块编号的一次性包埋盒,倾倒石蜡少许,以不溢出为宜,少置片刻。 4.把冰箱冷冻室内的冰盒取出,将包埋好的蜡块,放于冰盒冷冻片刻约5min10min,冬季时间短,夏季时间长些,将蜡块从底模中取出,收集其余蜡块,将包埋盒两边的多余蜡除去,即可切片。 5.包埋盒底模及脱水盒盖分类整理好重新放入烤箱备用,本科把脱水盒盖装在脱水篮中,在下一次用之前用热水将蜡冲去即可再用。 通过这种方法不仅利于蜡块的保存,也节约了石蜡。

  • 【分享】石蜡切片技术实验

    【分享】石蜡切片技术实验

    一、取材与固定1 准备工作:工具、药品、计划等2 动物的麻醉:氯仿麻醉3 解剖取材4 材料分割:保持样品的完整性与代表性,考虑切片方向,实心组织大小5*5*2mm,空心细长组织10mm长。5 固定:布温氏固定液固定24h。6 漂洗:70%乙醇换洗3次,每次20~60min。7 保存:70%乙醇0~4 ℃ 。二、脱水、渗透与包埋1 脱水:85%乙醇→95%乙醇→100%乙醇→100%乙醇,每步30min~60min2透明:1/2乙醇+1/2二甲苯→二甲苯→二甲苯,每步30min~60min3 渗透: 1/2二甲苯+ ½ 石蜡→石蜡→石蜡,每步20min~60min,温度62℃4 包埋:将材料放入盛有石蜡的纸盒中,摆好位置(要考虑下一步的修快与切片方向),在水中冷却5~10min.三、切片1 修块 用单面刀片在玻璃板上修快使达到以下要求:(1)一个蜡块含一个材料,蜡块呈正方形或长方形,材料位于蜡块正中央。(2)材料边缘与蜡块边缘平行,各面要平直,材料边缘与蜡块边缘的距离约3mm。2 固着 将修好块的蜡块用烧热的解剖刀固着在样品台上。3 切片 按以下顺序进行(1)将样品台固定在切片机样品臂上,使切面竖直;(2)调切片厚度5~10um;(3)将切片刀用纱布蘸少许二甲苯擦净后装到切片机上,调刀角15~20,将刀固定好;(4)调刀距 使样品与刀口尽可能靠近;(5)切片顺时针摇动切片机速度40-60r/min;(6)将切好的蜡带光面向下用毛笔放到台纸上[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912141513_189942_1769204_3.jpg[/img] 贴片(1)清洗载波片;(2)加粘片剂,要求薄、匀;(3)放切片,光面向下;(4)加水于切片下面;(5)展片将载波片放于50℃的温台上至切片完全展平;(6)烤干吸掉多余水,继续放于温台上至水完全干燥;5 贴标签 临时标签,用铅笔写明组号、姓名。

  • 微胶囊包埋技术的行业应用

    微胶囊包埋技术是近些年发展起来的一项新技术,广泛用于纺织、香料、化妆品、印染、食品等工业部门。其原理就是将固体、液体或气体物料包埋在以微米计的微型胶囊中,在一定的条件下控制被包埋的物料预期释放出来。通过这种包埋和释放过程,一方面可以在未释放前保护物料,还可以通过释放方式、时间、速度和量的控制使物料发挥充分功能。 由于微胶囊化技术的独特性能优势,目前已广泛运用于各行各业,食品领域,其常用于包埋食品工业中的活性成分,能有效稳定包合物物化性质,减少氧化、钝化光敏性及热敏性,降低挥发性。化工领域,微胶囊化技术可用于降低客体分子的刺激性、减缓其释放速率,如降低洗衣粉的刺激性,延长空气清新剂香味持续时间等,与我们的生活息息相关。[b][color=red]为大家带来以下详细的微胶囊包埋技术的行业应用文章。敬请关注:[/color][/b](一)微胶囊包埋技术及其在食品中的应用(二)微胶囊包埋技术在保健品中的应用(三)微胶囊包埋技术在食品包装中的应用(四)微胶囊包埋技术在益生菌中的应用(五)微胶囊包埋技术在油脂中的应用(六)微胶囊包埋机在调味品中的应用(七)微胶囊包埋技术在产品研发及生产中的应用(八)微胶囊包埋技术在食品中的应用(九)微胶囊包埋技术在药品生产过程中的应用 ……

  • 【讨论】关于超薄切片的包埋剂选择问题

    向大家请教几个问题,本人刚接触超薄切片,要把一种常温下是脆性固体的材料包埋做超薄切片,现在关于包埋剂的选择有些困难,因为做包埋块有几个问题:1)材料本身很脆,常温下是块状固体,直接切肯定会碎掉,必须要包埋,但是担心粉末状态下与树脂包埋剂混合会混合得不均匀;2)如果液相状态下混合,材料本身需要加热到290~300℃才会液化,这么高温的液体与包埋剂混合,不知道哪种包埋剂会承受;3)也在网上查了一些,像M-Bond 610胶,G1胶貌似都可以,但是关于这两种包埋剂的一些性能和具体适用介绍很少或是不太详细,我本人刚接触这些东西,实在是菜鸟,想请教一下这方面比较熟悉的朋友们,大家能不能给我指点一下,先谢谢了!

  • 硅胶包埋板

    请问用于做植物材料透射电镜的树脂包埋块所用的硅胶包埋板哪里有卖?

  • 【资料】电镜常用包埋剂及配方

    常用包埋剂及配方目前在电镜技术上使用的包埋剂种类颇多,但普遍使用的是环氧树脂,在免疫和细胞化学技术中还会使用到丙烯酸树脂。 环氧树脂(epoxy resin) 环氧树脂是一类具有末端环氧基的甘油多聚酯。它的分子中有两种反应基团,即环氧基团(epoxide group)和氢氧基团(hydroxyl group)。其末端基团易与含有活性氢原子的化合物如胺类(如DMP-30,DMAE,乙二胺等,又称催化剂或加速剂)反应,使单体首尾相连接形成长链聚合物。此外,在单体中的氢氧基团能与有机酸酐(如MNA,DDSA,九烷基琥珀酸酐,NSA等,又称硬化剂或固化剂)结合,使单体分子形成横桥。所以,环氧树脂以单体渗入细胞组织,而这种单体在一定的温度条件下,在硬化剂和加速剂作用下,就形成一个非常耐溶剂和耐化学腐蚀的交链稳定的三维空间聚合体。为了改善聚合体(包埋块)的切割性能,还会在环氧树脂包埋配方中加入增塑剂,以调节包埋块的韧性。 环氧树脂包埋剂对细胞微细结构有较好的保存性能,聚合后体积缩小较少,而且在真空中能经受较长时间的轰击。但它的操作不太方便,反差较弱。 环氧树脂的型号较多,常用Epon812,Spurr树脂(ERL-4206)等,现介绍最常用的两种环氧树脂 Epon812包埋剂 Epon812是一种进口树脂,它是一种长链的脂肪族环氧化合物,是目前国际上普遍采用的一种优良包埋剂,粘度为150-210cP。该包埋剂的配制方法甚多,但一般都按1961年Luft提出的配方进行。其配方如下: A液:Epon812 62ml DDSA 100ml B液:Epon812 100ml MNA 89ml上述配方若改变A液和B液的比例则可调节聚合块硬度,A液多则软,B液多则硬。通常冬天使用$A:B=2:8$;夏天使用$A:B=1:9$,可视组织的硬度和气候不同选择其比例。配制时可先分别配制A液和B液,然后将A液和B液按一定比例混合后,再加入$1\%-2\%$的加速剂,边加边搅拌,使其充分混合。为了方便操作,也有人将Epon812,DDSA,MNA三种成分按一定比例直接混合使用。Epon812的聚合温度为:37℃过夜,60℃24-36小时。 根据南方地区的气候条件,可用下列配方:Epon812 51ml DDSA 12ml MNA 37ml DMP-30 1.8-2ml聚合条件&室温过夜,60℃8-12hDDSA是十二烷基琥珀酸酐(Dodecenylsuccinic anhydride)的简称。它是一种可得到软性包埋块的长链脂肪族分子。 MNA是甲基内次甲基二甲酸酐(Methyl Nadic anhydride)的简称,又称六甲酸酐,它有两个链环,能获得较硬的包埋块。 DMP-30是2,4,6-三(二甲基氨基甲基)苯酚(2,4,6-Tris(dimethylaminomethyl)phenol)的简称。它能加速固化过程。 Spurr树脂(ERL-4206包埋剂) 这是1969年由Spurr推荐使用的包埋剂,所以也称Spurr树脂。它含有两个环氧基,是一种低粘度的环氧树脂。由于具有粘度低的特点,所以近年来一些实验室已开始使用它。其配方可按下表中各种成分的比例,即可获得不同性能的包埋块。其配方如下: Spurr树脂包埋剂配方 成分(g)标准硬度 硬 软 快速聚合配方 缓慢聚合配方 VCD 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 DER-736 6.0 4.0 7.0 6.0 6.0 NSA 26.0 26.0 26.0 26.0 26.0 DMAE 0.4 0.4 0.4 1.0 0.2 聚合时间70℃(h) 8 8 8 3 16 混合时间(天) 3-4 3-4 3-4 2 7 VCD是二氧化乙烯环己烯(vinylcyclohexene dioxide)的简称。它的分子小,粘度低,聚合块硬度大。 DER-736是diglycidyl ether of a polypropylene glycol的简称。它属于脂肪族,分子小,有低粘度性质,可调节包埋块的硬度。 NSA是nonenylsuccinic anhydride的简称。它是一种特殊的硬化剂,应避免暴露在潮湿的大气中,以防环氧或酐链的水解作用。 DMAE是dimethylaminoethanol的简称。它是催化剂,增加催化剂的比例,可以缩短聚合的时间。 Spurr树脂最终硬度可用DER-736的量来调节。配制时,先把前三种成分混合后,最后才加入DMAE,但从开始到混合完成,达到淡黄色状态需3-7天。此包埋剂在$70\,^{\circ}\mathrm{C}$,一般8小时即可完全聚合,用陈旧的包埋剂时,则聚合时间会减少。因Spurr树脂嗜氧,聚合时不要加盖。包埋剂最好是用新鲜配制,但为了方便,可预先配制好保存在低温和防潮的环境中。Spurr树脂与Epon812树脂相比粘度低,操作方便,但毒性比Epon812树脂大,所以操作时要更加小心,此外,Spurr树脂各成分间的分子量大小差异较大,在组织中的渗透速度不一,容易个别成分造成渗透不均,而导致局部聚合不完全,染色效果不佳。 丙烯酸树脂(acrylic resin) 丙烯酸树脂无色透明的,由丙烯酸衍生物聚合而成。丙烯酸单体粘度低,可以在低温下渗透及聚合,因而能满足免疫和细胞化学技术低温操作的要求。其聚合方式有两种,热聚合和紫外线照射聚合。但它对脂类等成分的抽提比环氧树脂严重,为此它也需要在较低的温度下使用才可能减少抽提作用。此外,聚合前后丙烯酸树脂的体积变化较环氧树脂大(体积大约收缩$10-20\%$),并且它在电子束的照射下稳定性比环氧树脂低,放热的聚合过程可引起组织细胞结构的损伤,致敏性也比环氧树脂强,使用时要小心防护。一般来说,除了免疫和细胞化学技术外,超微结构的研究并不推荐使用它。在电镜中使用较多的丙烯酸树脂有伦敦白胶(LR White)和Lowicryl系 列的树脂。 伦敦白胶(LR White) 伦敦白胶含有7种不同的丙烯酸单体和2种增塑剂,引发剂是BPO(dibenzoyl peroxide),加速剂为N,N-dimethyl paratoluidine,但具体的配方和成分没有报道。它的粘度低,渗透能力强,可用于较大的组织块或致密的组织,由于它有一定的亲水性,方便水性染料进入,染色效果佳,使用非常方便,通常买回来的是已经混合好的试剂,它的有效期仅为12个月。伦敦白胶可以微溶于水,因而可以采用部分脱水方案,但不能使用丙酮作为脱水剂。氧气会抑制聚合反应的进行,因而聚合时要在模块中注满包埋剂并盖紧盖子。为了方便运输和储存,也有未加BPO的伦敦白胶(uncatalysed LR White)出售,这种试剂需要加入催化剂(9.9g催化剂/500gLR White)充分搅拌并室温放置24小时以上才能使用。Lowicryl系列包埋剂 Lowicryl系列包埋剂是专为低温包埋设计的包埋剂。它有两种类型:一种是极性树脂,K4M和K11M;另一种是非极性树脂,HM20和HM23。极性树脂亲水,使样品保存在一个水性的环境中从而较少蛋白质变性,且染色的效果较好。而非极性树脂的切割性能比较好。两种树脂通常都在隔绝氧气的情况下低温紫外线照射聚合。Lowicryl系列包埋剂全部以试剂盒的形式出售,有详细的说明书提供参考。

  • 包埋峰如何定量呢?

    在定量过程中,常常遇到大峰包住小峰的情况,即包埋峰,那么如何使用GC-MS来定量包埋峰呢?欢迎大家给点建议

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    大家新年快乐!有个问题想问问。用SPURR树脂包埋植物材料的时候,发现包埋块靠下一小薄层有些脆,但上层就很好.是吸水的原因么?包埋过程中需要除湿机除湿吗?需要带口罩防水气吗?

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    双歧菌种被淀粉包埋,将菌种按照4789.34溶解后,用显微镜查看样液中有成团的现象,就是淀粉粘连在一起导致菌种没有完全分散,怎样破解淀粉包埋的这种情况呢。之前使用α-淀粉酶将样液进行酶解1h,效果不是很显著

  • 石蜡切片与冷冻切片的区别

    1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳定的抗原,能经受住石蜡切片的的考验,一般来讲也可以用冰冻切片来做,总得来讲,对于既可以用冰冻切片也可以用石蜡切片检测的抗原,用石蜡切片检 测的染色效果要比冰冻切片好一些。2、从研究目的来看。石蜡切片对组织细胞的定位很准确,而长期冻存组织的冰冻切片可能因冰晶的形成破坏组织细胞形态的结构,并造成抗原的弥散,从而定位不准确。3、从抗原的保真性来看。冰冻切片对抗原的保真很好,而石蜡切片在组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等过程中可能会对抗原的性质造成影响。4、从操作步骤的繁琐程度看。染色过程冰冻切片简单,而石蜡切片要求脱蜡入水、抗原修复等过程,比较繁琐。5、总之,石蜡切片对标本的长期保存较合适,且组织细胞形态结构保持好;而冰冻切片适合对新鲜组织的制片,然后立即固定、染色效果较好,且免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰

  • 求助:请教包埋技术

    请教各位高手,怎么去除包埋过程中的气泡问题?我用的是618环氧树脂,固化剂是乙二胺!说明书上说加《8%的固化剂,但是固化后有很多气泡,不知为何!请各位大侠指点一二,小弟不胜感激!!

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  • 【原创】【第三届原创大赛】植物官石蜡切片及显微摄影学习经历

    【原创】【第三届原创大赛】植物官石蜡切片及显微摄影学习经历

    植物的一切生命活动,都是以细胞作为基本结构和功能单位进行的。因此,对植物的组织、器官的研究就显得非常重要。石蜡切片法是动物、植物和病理组织切片制作上最重要、最常用的一种方法。由此方法制作的切片在显微镜下观察清晰,能显示其细致结构,反映其真实性,而且可以长期保存。除某些材料确实经不住石蜡法中各种药剂的处理或加温而不能应用外,一般的材料都可以采用石蜡切片法来制成装片在显微镜下观看或长期保存。本法的优点是可以极薄的切片,并可制作大批或是连续的切片。而且以石蜡包埋的组织块还可以长期保存。番红-固绿染色法可以区分开结构中的木质化和纤维化部分。  显微摄影是一项重要的显微技术,在生物科学的研究中,从再现显微镜中物体影像的各种方法中比较,显微摄影是最好的方法。基建的结果除文字的描述外,显微照相能客观而生动的记录下生物体的细微结构或形态,它常与生物绘图技术配合,起到相辅相成的作用。本实验采用盆中冲洗的方法。整个冲洗过程需在暗室中进行。若为涂塑像纸则直接晾干,普通像纸要进行上光。  1 材料  1.1 材料  某植株(完整植株,长有新鲜叶片)、乐凯全色黑白胶卷(ASA100)、涂塑相纸、普通像纸  1.2 试剂  1.2.1 浓度为35%、70%、85%、95%、100%的酒精  1.2.2 二甲苯、二甲苯酒精等量混合液  1.2.3 包埋剂:纯石蜡配制  1.2.4 染色剂:浓度为2% 番红水溶液(用水配制)、0.1% 固绿(由95%酒精配制而成)  1.2.5 固定液FAA(福尔马林 、冰醋酸、70%酒精以1:1:6比例配制)  1.2.6 封固剂:加拿大树胶  1.2.7 D-72显影液: 50℃温水 750ml,米吐尔 3.1g,无水亚硫酸钠 45g,无水碳酸钠67.5g,对苯二酚 12g,溴化钾 1.9g,然后加冷水至1000ml。  1.2.8 定影液F-1和F-5。  F-5定影液:50℃温水600ml,结晶硫代硫酸钠240g,无水亚硫酸钠15g,28% 乙酸 48ml,硼酸 7.5g硫酸铝钾 15g,然后加冷水至1000ml。  1.2.9 停影液: 水  1.3 工具及仪器  双面刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、染色缸、镊子、旋转切片机、金属温台、毛笔、OlympusBH2型显微照相系统、放大仪、印相仪、上光仪等。  2 石蜡装片的制作  2.1 取材  从植株上取新鲜、健康、有代表性的叶片,用锋利的刀片切取幼茎、叶柄、叶片,并用水清洗干净。将幼茎与叶柄切成约5毫米长的小段,将叶片从主脉处切取5mm× 8mm的长方形,并保证切主脉两侧的叶片相等且主脉与短边平行,底部能立于包埋盒内。  2.2 固定  将已经配制好的FAA固定液倒入一个小试剂瓶中,再把已经切好的材料浸入其中,在瓶上贴好标签,待用。  2.3 浸洗  用50%酒精或70% 酒精浸洗一、二次就可以进行脱水。  2.4 脱水  包埋前的第一个重要步骤为脱水。本实验以酒精为脱水剂,采用逐渐提高酒精浓度来减少材料中水分的含量。可以以此梯度进行操作,70% 酒精、85%酒精 、95%酒精、无水酒精I、无水酒精II,在每级酒精中浸2~24小时,使脱水充分。  2.5 透明  酒精不能作为石蜡的溶剂,因此必须经过透明剂透明。二甲苯可以溶解石蜡,有利石蜡透入,同时还有脱去酒精的功效。但二甲苯易使组织收缩变脆,故浸留时间不宜过长。同时若脱水不干净,就会引起不良后果。为了避免组织收缩,在纯酒精或丙酮脱水以后,并不直接移入二甲笨中,其间必须经过几个梯度,逐渐置换,在每一级中停留的时间为1—2小时,二甲苯易挥发,在切片透明之后,从染色缸中取出封藏,手段要敏捷,不宜久置。在纯酒精中脱水后需要经过的几种溶液配比如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011151102_259410_1856701_3.jpg  2.6 浸蜡  石蜡能溶于透明剂二甲苯中。把已透明的材料投入熔化的石蜡中,即可取代透明剂,而使组织中的一切空隙为石蜡透入而填满,即为浸蜡。为了使石蜡更好地浸透到组织中去,浸蜡一般需要经过四个不同配比的溶液,在前三杯溶液中停留半小时左右,在温箱中或在包埋箱中进行。然后取出在经第四种溶液。保温箱的温度要适宜,太高,会使材料收缩,太低,石蜡会冻结而不能透入组织。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011151102_259411_1856701_3.jpg  2.7 包埋  包埋是将浸过蜡的组织块包埋于石蜡中以利于切片。将已熔化的石蜡倒入做好的包埋盒内,然后用酒精灯加热的镊子将材料从石蜡液中取出,迅速放入纸盒里的石蜡中。放置的方向要按照切片的方向而定,最好把切面向下,并且放正。若石蜡中有气泡,也可用热针刺入石蜡中,将气泡烫去。材料块放置妥当后,以左右手分持纸盒两耳,半浸于冷水中,并用口吹气使蜡表面凝结,蜡凝后,除去纸盒即成蜡块。  包埋过程中应注意的事,包埋蜡的温度不宜过高,否则会将组织烫坏。  2.8 切片  首先要修块,将已凝固的蜡块取出,用刀片把它切至何时大小,修整平滑。然后将蜡块底部稍融化贴在一小木块上,再用融化的蜡粘在蜡块的四周使蜡块牢固帖在木块上。将带石蜡的木块装在旋转式切片机上,将切片刀装在夹刀部位上,调整切片刀的角度,进行切片。将切下的条状蜡带,用毛笔取下放于一张纸上,挑取较好的一小条蜡带做切片。  2.9 粘片和展片  以手指涂一薄层Mayer甘油蛋白于干净载玻片上,再用滴管滴一滴蒸馏水于载玻片上,然后用镊子挑取一段切片蜡带置于载玻片的水面上(注意:要以石蜡切片背面比较光滑的一面放在水上,才易展平)。然后将载玻片放在金属温台上加热,使切片蜡带自由展平。注意,载玻片上的水要多放一点,加热温度不要过高,否则石蜡会熔化,组织脱落。自然风干。  2.10 番红-固绿染色  2.10.1 溶蜡  将切片放入二甲苯溶液中,5~10分钟,彻底除去切片上的石蜡。如果室温过低,需延长脱蜡的时间,脱蜡要彻底,否则染色困难。  2.10.3 复水  将切片经纯酒精和二甲苯的1:1的溶液,100%、95%、70%、35%酒精溶液各3分钟。逐步过渡,防止材料收缩。  2.10.4 蒸馏水浸洗  因为染色液番红是用蒸馏水配置的,应将切片放入蒸馏水中3分钟,以便彻底复水,然后进行染色。  2.10.5 初染  将切片放入2%的番红水溶液中染色10~20分钟,使红色染透,否则材料容易褪色。如果番红染色过度,应返回到酒精中进行轻微脱色,再进行以下操作。  2.10.6 流水冲洗  用流水冲去多余染液,以冲洗去切片上的番红余色。而且对一些不易被固绿着色的幼嫩组织材料,其切片经水冲洗后吸水膨胀,染色剂易于渗入组织进行染色。  2.10.7 镜检  将载玻片放在显微镜的载物台上,进行镜检,染色效果良好,则可进入下一步操作。  2.10.8 脱水  将切片依次经过35%,70%的酒精各30秒。因为固绿是用95%酒精配置的,因此应脱去水分再进行固绿染色。  2.10.9 复染  用0.1%固绿染色5~10秒,时间不宜过长,否则绿色太深,将切片变为蓝绿色或深绿色,失去的双重染色的意义。  2.10.10 镜检  将切片放入95%的酒精过一下后,进行镜检。所染材料的木质化部分呈红色,纤维素部分呈绿色。  2.10.11 浸洗  用100%的酒精溶液浸洗3分钟,以洗去切片上固绿的余色,同时也使切片过度到纯酒精中。该步时间不宜过长,由于固绿在纯酒精中易褪色。  2.10.12 透明  将切片放入纯酒精和二甲苯的1:1的混合溶液中浸3分钟,使切片从酒精中逐步过渡到纯的二甲苯溶液中。然后将切片放入纯的二甲苯溶液中,浸5分钟,使切片完全过渡到二甲苯溶液中。至材料完全透明后应立即进行封片(为防止二甲苯使组织收缩)。  对于脱水不彻底的材料投入到二甲苯溶液中时会出现乳白色雾状,这表明该材料无法进行透明,应该退回到无水酒精和95%的酒精进行重新脱水。  2.11 封片  把切片从二甲苯溶液中取出,用纸擦去载玻片上的多余液体。滴一滴加拿大树胶于组织上,用镊子夹取一片盖玻片,与载玻片成一倾斜的角度,使盖玻片的一个边缘与加拿大树胶完全接触,然后轻轻地覆盖下,防止产生气泡。树胶的量要适中,使盖玻片与载玻片之间没有空隙。  3 显微照相  3.1 安装好显微照相系统  将小型显微照相连接器连接到OlympusBH2型显微镜上。  3.2装胶片  打开相机后盖,装入35毫米胶片,盖好后盖。注意把胶片头部放入收片轴的片槽里时,不要使它超出片槽的另一端。  3.3 设置自动曝光器  根据胶片感光度(ASA)选择控制器上感光度标记,按下感光片类型标记按钮(35)。将胶片倒易律失效特性的修正数设置在中间档。  3.4 试拍  通过自动

  • 石蜡切片制作过程有哪些步骤

    石蜡切片操作步骤:1、取材2、固定3、脱水:30%--50%---70%(每步60分钟)---85%---95%--100%---100%(每步30钟)。4、透明:转入1/2二甲苯+1/2无水酒精混合液20ml透明1h,纯二甲苯20ml透明1h,再用纯二甲苯20ml透明40min,并回收各液。5、浸蜡:(1)将材料分别放入25%、50%、75%的石蜡-二甲苯溶液中,每级30分钟。该过程在高于石蜡熔点3℃的温箱中进行;(2)将材料放入溶解的纯蜡中,时间为30分钟,该过程再重复两次。在高于石蜡熔点3℃的温箱中进行。6、包埋(1)将溶解好的石蜡在加入预先折好的纸船中,石蜡溶解后应过滤后使用,以免含杂质影响切片;(2)材料放入纸船,并摆好在蜡中的位置,如果包埋的组织块较多,应进行编号;(3)将纸船放置在冷水上加速冷却过程。7、切片(1)修整:用刀片修成方形或长方形蜡块;(2)以少许热蜡液,将蜡块底部粘附于小木块上,以少许石蜡融化在蜡块边缘,加强粘附的强度;(3)木块粘附于切片机上,调整切片机,使蜡块切面与切片刀刃平行;(4)切成连续的蜡带,切片刀的锐利度、蜡块的硬度都会影响切片质量,可用热水或冷水适当改变石蜡的硬度,也可在冰箱中放置一段时间;(5)分割蜡带,分开的蜡片放在45℃温水上,使蜡片展开。8、粘片与烤片(1)可用粘片剂防止蜡片滑脱,但粘附剂通常容易被染色而使切片背景有颜色,影响观察,实验表明,载玻片洗的足够干净,一般不会滑片;(2)用载玻片捞取展开后的蜡片,调整蜡片的位置使位于载玻片中央,自然干燥。9、脱蜡与醇化(1)将切片放入纯二甲苯溶液中10分钟,使石蜡完全溶解,共2次;(2)溶去石蜡的切片依次放入75%、50%、25%二甲苯-乙醇溶液中,每级10分钟;(3)再将切片依次放入100%、95%、90%、80%、70%、60%、50%的乙醇溶液中进行醇化,每级10分钟。10、染色(1)将切片放入番红染液中30分钟,番红染色后,将切片依次放入50%、60%、70%、80%的乙醇溶液中分级洗脱,每级10分钟;(2)洗脱后的切片放入固绿染液中染色1分钟;11、脱水、透明与封片(1)染色后的切片依次放入90%、90%、95%、100%乙醇溶液中分级洗脱,每级10分钟;(2)洗脱后的切片依次放入25%、50%、75%、100%、100%二甲苯溶液中透明,每级10分钟,出现浑浊表示脱水不彻底,需重来;(3)滴1-2滴中性树胶,将洁净的盖玻片倾斜放下,封片,镜检,选择好的贴上标签,性切片制作完成。

  • TiAl球磨粉末包埋能不能用金刚石刀切

    各位老师,你们好。我用高能球磨法制备了TiAlNb粉末,粒度在10微以下,现在拍一下透射电镜,然后测试方说要包埋切一下才行,我想请教一下金刚石刀能不能切啊,因为他们没有做过这种粉末,他们也不知道,各位老师请解答一下,谢谢了感谢各位老师

  • 【求助】(已应助)微胶囊包埋技术在速溶苹果粉的研制中的应用

    【序号】: 1002-0306(2004)05-0099-02【作者】: 庄桂东, 朱玉强, 何熹, 马文全, 迟玉森, 【题名】:微胶囊包埋技术在速溶苹果粉的研制中的应用 【期刊】: 食品工业科技【年、卷、期】:2004年 第05期【全文链接】:无急需该资料,因为是新手没有钱,否则就悬赏了。多谢大侠们了!

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