微小面光度计

有时所做样品比较多，时间长，高比例有机相的流动相可能在长时间使用过程中就挥发了，那变化后的流动相会引起多大的峰面积变化，比如同一个样品，进样量相同，有机相是挥发了0.5%，那所得样品峰面积是否与未挥发前是一样的？是否会出现仅保留时间微小推迟，峰高变小一些，但峰宽可能变宽一些，而峰面积是不变的，这个猜想不知道在多大的变化范围内是成立的？

我在使用平面光栅摄谱仪时，遇到测微光度计的使用还有不懂得地方，如被测物质黑度与浓度的计算方法，想请了解这方面知识的老师指教。谢谢！

最近一直在讨论这个问题：我个人觉得，对于普通的中低端分光光度计，技术相对已经很成熟了，竞争也比较激烈；但对于专用的分光光度计，能出售一整套的应用方案，再配上相应的试剂，这种行业专用的，小的便携式的分光光度计，其实还是很有市场的。我觉得这也是将来的一块兵家必争之地，对于这块，大家有何感想？是继续在通用的分光光度计市场拼杀呢，还是另辟蹊径，在行业专用这方面做点文章呢？不妨PK一下？

【小魏学长】分子荧光分光光度计的原理、应用大三在读，感谢支持

相同的流动相，微小的溶剂差异对峰面积会产生多大的影响，比如对照品所用溶剂与样品所用溶剂的有机相比例或PH有很小的差异，那能进行定量分析吗？这关系到对照品能否留待下次分析再用。先假设该物质性很稳定。

想购买微小力试验机，哪里有？那些产品性能优异（包括型号）？谢谢！

分光光度计及使用维护中的注意事项 一、分光光度计及其分类 利用分光光度法或技术工作的仪器叫分光光度计,可分为如下几类: 一、 分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响 1)波长准确度 分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。 2)透射比（吸光度）准确度 很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性. 3)杂散光 杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。 二、与分光光度计正确使用和维护有关的几个注意事项 （在使用仪器前，必须仔细阅读其使用说明书） 1）若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。 2）指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。 3）比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。 4）操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。 5）WFZ800-DA、756型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。 6）放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。 7）比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下；分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色杯；220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色杯：700nm处装蒸馏水，将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。 四、分光光度计操作中容易出现的几个典型故障及其排除方法 1）仪器不能调零。可能原因：a）光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。 b）透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。c）仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂。d）电路故障。解决方法：送修理部门，检修电路。 2）仪器不能调“100%”。可能原因：a）光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯（尽管灯还亮）。b）比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。 c）光电转换部分老化。解决方法：更换部件。d）电路故障。解决方法：调修电路。 3)测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因：a）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。b）电路故障（电压、光电接收、放大电路）。解决方法：送修。 4)数显不稳。可能原因：a）预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）。b）光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。c）环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。d）光电管、电路等其它原因。解决方法：送修。 五、提高分光光度计透射比检定及使用精度的几种方法 在分光光度计的使用或检定中,透射比(吸光度)的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标,它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。所以提高此项指标的使用及检定准确度显得尤为重要。下面结合近年来对分光光度计的检定或修理实践,把如何提高透射比的测试及使用精度的几点方法列表叙述如下： 六、小结 综上所述，以下几个问题应引起仪器操作人员注意：1）比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视，因操作不当造成偶然误差，严重影响分析结果。首先，应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜，就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致，还可能使入射光不能全部通过样品池，导致测试比准确度不符合要求。其次，应保证每次测试时，比色皿架推拉到位。若不到位，将影响到测试值的重复性或准确度。最后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命.2）干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致a）数显不稳、无法调“0”点或“100%”点（电路或光电管受潮）。b）反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因，分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3）仪器的工作环境。应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。

[color=#dc143c] 近期有些网友问及如何选购分光光度计，为此谈谈个人的一些不成熟的看法，特别指出的是，由于分光光度计种类繁多，因此不可能一一举例，同时此文内容也不涉及任何一家产品，以免“瓜田李下”，只是作为网友参考之用。[/color]由于分光光度计是一种常用的实验室分析仪器，所以无论是从款式上还是价格上五花八门，一般往往给初购者造成眼花缭乱、令人无所适从的感觉；为此、谈谈我个人的看法。（一）、选择可满足使用者长期分析要求的仪器即可： 尽管分光光度计种类繁多，但不外乎：简易型、中档型和高档型三大类；（1）简易型仪器及其特点：结 构：这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。此类仪器生产以国内厂家居多。测量模式：多为定点（固定波长）吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。适应范围：小型实验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高，。价 格：相对低廉，一般在2万元人民币以下，所以还有一定的市场。（2）中档型仪器及其特点：结 构：此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长按照设定模式自动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中光栅的技术指标尤为重要，最佳的光栅为凹面型，为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。并有一定的测量附件。测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、单光束；单点及扫描均可。适应范围：此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。价 格：3～10万人民币之间，此类型仪器占分光光度计的比例最大。（3）高档型仪器及特点：除了中档仪器的特点外，主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm；波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm；狭缝均为连续可调型，以适应高分辨率的需要，波长扫描速度的档位也增加了，检测器均使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器；数据处理目前基本是电脑来执行；衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式，单点、扫描均可；适应范围：科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。不但可以测液态样品，也可测固态样品。价 格：10万人民币以上。（二）最合适的性/价比：无论选择上述哪一类的产品，只要仪器类型选定下来，就要在同类型仪器的产品范围中依据价格来选购，当然、同类仪器中，谁的价格便宜便买谁的；这里也要注意：有时价格相差一些不一定就要买便宜的，还要全面评估；这需要多了解、多看书、多比较、多向有经验者请教；千万不要仅听信推销人员的一面之词。（三）优良的售后服务：“没有了优良的售后服务，仪器厂家便没有了生命”这是一句箴言，道理在此就不多讲了。通过实践证明，没有良好售后服务保障的仪器厂家所生产的仪器也好不了哪去。

tutm在“再谈分光光度计发展（四）-真正微型的光谱仪”中提到了晶片级的仪器（地址：http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090210/1730061/）那种技术一般叫MEMS(Micro Electromechanical System)系统.MEMS指集微型传感器、执行器以及信号处理和控制电路、接口电路、通信和电源于一体的微型机电系统。下面是我在youtube看到的两个mems系统，说明，并不是说他们是用在分光中的，他们具体干啥的，我也不清楚，给大家看看。注，下面的器件是非常微小的，mems器件一般是微米级别的。视频1 [B] Hand Actuated MEMs Diffraction Grating[/B][center][flash]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2009215123120_01_0_3.swf[/flash][/center][center]视频1 Hand Actuated MEMs Diffraction Grating[/center]视频2 [B] MEMS [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url] Grating Actuator doing a push up[/B][center][flash]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2009215123332_01_0_3.swf[/flash][/center][center]视频2 MEMS [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url] Grating Actuator doing a push up[/center]

分光光度计及使用维护中的注意事项一、 分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响 1)波长准确度 分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。 2)透射比（吸光度）准确度 很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性. 3)杂散光 杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。 二、与分光光度计正确使用和维护有关的几个注意事项 （在使用仪器前，必须仔细阅读其使用说明书） 1）若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。 2）指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。 3）比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。 4）操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。 5）WFZ800-DA、756型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。 6）放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。 7）比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下；分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色杯；220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色杯：700nm处装蒸馏水，将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。 三、分光光度计操作中容易出现的几个典型故障及其排除方法 1）仪器不能调零。可能原因： a）光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。 b）透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。 c）仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂。d）电路故障。解决方法：送修理部门，检修电路。 2）仪器不能调“100%”。可能原因： a）光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯（尽管灯还亮）。 b）比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。 c）光电转换部分老化。解决方法：更换部件。 d）电路故障。解决方法：调修电路。 3)测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因： a）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。 b）电路故障（电压、光电接收、放大电路）。解决方法：送修。 4)数显不稳。可能原因： a）预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）。 b）光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。 c）环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。 d）光电管、电路等其它原因。解决方法：送修。 四、提高分光光度计透射比检定及使用精度的几种方法 在分光光度计的使用或检定中,透射比(吸光度)的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标,它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。所以提高此项指标的使用及检定准确度显得尤为重要。下面结合近年来对分光光度计的检定或修理实践,把如何提高透射比的测试及使用精度的几点方法列表叙述如下： 五、小结 综上所述，以下几个问题应引起仪器操作人员注意：1）比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视，因操作不当造成偶然误差，严重影响分析结果。首先，应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜，就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致，还可能使入射光不能全部通过样品池，导致测试比准确度不符合要求。其次，应保证每次测试时，比色皿架推拉到位。若不到位，将影响到测试值的重复性或准确度。最后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命.2）干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致a）数显不稳、无法调“0”点或“100%”点（电路或光电管受潮）。b）反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因，分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3）仪器的工作环境。应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。

分光光度计是一种常用的实验室分析仪器，款式和价格都是多样化的，因此如何选择一款合适的分光光度计就显得尤为重要了。尽管分光光度计种类繁多，但不外乎：简易型、中档型和高档型三大类，下面简单说一下如何选择分光光度计。 一、简易型仪器及其特点：结构：这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。此类仪器生产以国内厂家居多。测量模式：多为定点(固定波长)吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。适应范围：小型实验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高。二、中档型仪器及其特点： 结构：此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长按照设定模式自动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中光栅的技术指标尤为重要，最佳的光栅为凹面型，为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。并有一定的测量附件。测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、单光束；单点及扫描均可。适应范围：此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。三、高档型仪器及特点：结构：除了中档仪器的特点外，主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm；波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm；狭缝均为连续可调型，以适应高分辨率的需要，波长扫描速度的档位也增加了，检测器均使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器；数据处理目前基本是电脑来执行；衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式，单点、扫描均可。适应范围：科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。不但可以测液态样品，也可测固态样品。（选自网络，侵删）

分光光度法在分析领域中的应用已经有数十年的历史,至今仍是应用最广泛的分析方法之一。随着分光元器件及分光技术、检测器件与检测技术、大规模集成制造技术等的发展,以及单片机、微处理器、计算机和DSP技术的广泛应用,分光光度计的性能指标不断提高,并向自动化、智能化、高速化和小型化等方向发展。 在分光元器件方面,经历了棱镜、机刻光栅和全息光栅的过程,商品化的全息闪耀光栅已迅速取代一般刻划光栅。在仪器控制方面,随着单片机、微处理器的出现以及软硬件技术的结合,从早期的人工控制进步到了自动控制。在显示、记录与绘图方面,早期采用表头(电位计)指示、绘图仪绘图,后来用数字电压表数字显示,如今更多地采用液晶屏幕或计算机屏幕显示。在检测器方面,早期使用光电池、光电管,后来更普遍地使用光电倍增管甚至光电二极管阵列。阵列型检测器和凹面光栅的联合应用,使仪器的测量速度发生了质的飞跃,且性能更加稳定可靠,受到仪器用户的青睐,最具有代表性的当数安捷伦的HP8452/8453。在仪器构型方面,从单光束发展为双光束,现在几乎所有高级分光光度计都是双光束的,有些高精度的仪器采用双单色器,使得仪器在分辨率和杂散光等方面的性能大大提高,如Varian (瓦里安)的Cary1/3/400。随着集成电路技术和光纤技术的发展,联合采用小型凹面全息光栅和阵列探测器以及USB接口等新技术,已经出现了一些携带方便、用途广泛的小型化甚至是掌上型的紫外可见分光光度计,如OceanOptics(海洋光学)的S系列、USB2000及PC2000。而光电子技术和MEMS技术的发展,使得有可能将分光元件和探测器集成在一块基片上,制作微型分光光度计。我国重庆大学在微型多通道光谱仪方面开展了卓有成效的研究工作,承担的国家自然科学基金项目“微型多道光谱分析系统集成化技术研究”已经通过了技术鉴定。随着发光二极管(LED)光源技术及产业的日益成熟,以LED为光源的小型便携又低廉的分光光度计已成为研究开发的热点。除了空间色散的分光方式,也有人对声光调制滤光和傅立叶变换光谱在紫外可见区的应用进行了研究。 仪器的软件功能可以极大地提升仪器的使用性能和价值,现代分光光度计生产厂商都非常重视仪器配套软件的开发。除了仪器控制软件和通用数据分析处理软件外,很多仪器针对不同行业应用开发了专用分析软件,给仪器使用者带来了极大的便利。

一、 分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响 1)波长准确度 分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。 2)透射比（吸光度）准确度 很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性. 3)杂散光 杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。 二、与分光光度计正确使用和维护有关的几个注意事项 （在使用仪器前，必须仔细阅读其使用说明书） 1）若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。 2）指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。 3）比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。 4）操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。 5）WFZ800-DA、756型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。 6）放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。 7）比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下；分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色杯；220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色杯：700nm处装蒸馏水，将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。 三、分光光度计操作中容易出现的几个典型故障及其排除方法 1）仪器不能调零。可能原因： a）光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。 b）透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。 c）仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂。d）电路故障。解决方法：送修理部门，检修电路。 2）仪器不能调“100%”。可能原因： a）光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯（尽管灯还亮）。 b）比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。 c）光电转换部分老化。解决方法：更换部件。 d）电路故障。解决方法：调修电路。 3)测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因： a）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。 b）电路故障（电压、光电接收、放大电路）。解决方法：送修。 4)数显不稳。可能原因： a）预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）。 b）光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。 c）环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。 d）光电管、电路等其它原因。解决方法：送修。 四、提高分光光度计透射比检定及使用精度的几种方法 在分光光度计的使用或检定中,透射比(吸光度)的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标,它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。所以提高此项指标的使用及检定准确度显得尤为重要。下面结合近年来对分光光度计的检定或修理实践,把如何提高透射比的测试及使用精度的几点方法列表叙述如下： 五、小结 综上所述，以下几个问题应引起仪器操作人员注意：1）比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视，因操作不当造成偶然误差，严重影响分析结果。首先，应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜，就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致，还可能使入射光不能全部通过样品池，导致测试比准确度不符合要求。其次，应保证每次测试时，比色皿架推拉到位。若不到位，将影响到测试值的重复性或准确度。最后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命.2）干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致a）数显不稳、无法调“0”点或“100%”点（电路或光电管受潮）。b）反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因，分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3）仪器的工作环境。应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。

紫外分光光度计应用在石油、饲料等方面 摘要 : 环境( 包括空气、水、土壤) 中许多的对人有毒有害物质的检测, 都用到紫外可见分光光度计, 如检测自来水中的木素磺酸、木质素、单宁、表面活性剂、黄腐酸、酚类、苯胺类、硝基酚类化合物等对人体有毒害的物质。有些自来水中, 含有氨氮、亚硝酸盐、总酚、总苯胺、硝基酚类等对人体有毒害的物质, 一般也是用紫外可见分光光度计来检测。石油油品分析 在石油开采、加工过程中, 石油有可能造成污染。在石油工业生产污水中,一般将排水中石油含量规定为10mg/ L。而在地面水中, zui高允许石油含量为0. 1～0. 3mg/ L。一般石油炼油厂中, 石油所含的芳烃组成是相对稳定的, 所测得标准油品的吸收峰, 都在221～225nm 和251～255nm 处。石油的两个特征吸收峰(225nm 和254nm) 是测定炼油厂污水中的含油量时要选用的吸收波长。另外, 轻油组分( 初馏约180℃) 几乎无明显紫外特征吸收, 而中油( 180～250℃) 和重油(250～280℃) , 以及蒽油( 280℃) 等组分在225nm 处吸收较强。它代表了石油成分的主峰, 在254nm 处吸收较弱, 有时显示出某种重质油品的特性。这些分析工作, 都用紫外可见分光光度计来进行。还有, 在炼油过程中, 石油在320nm 附近有一个芳烃杂质, 也是必须要用紫外可见分光光度计来检测的。因此, 紫外可见分光光度计是石油工业中非常重要的质量控制仪器。 环境中有害物质检测 环境( 包括空气、水、土壤) 中许多的对人有毒有害物质的检测, 都用到紫外可见分光光度计, 如检测自来水中的木素磺酸、木质素、单宁、表面活性剂、黄腐酸、酚类、苯胺类、硝基酚类化合物等对人体有毒害的物质。有些自来水中, 含有氨氮、亚硝酸盐、总酚、总苯胺、硝基酚类等对人体有毒害的物质, 一般也是用紫外可见分光光度计来检测。我国与水有关的国家标准中, 规定水中的许多物质都要用紫外可见分光光度计来检测。 饲料工业中的应用 饲料的原料、添加剂、混合饲料等中的维生素A、维生素C、维生素E、维生素K、山梨酸、苯甲酸、棉酸、甲酯、乙酸酯、胡萝卜素、烟酸、总氨基酸等微量元素钾、铁、硒、碘、铜、磷、锰等都经常用紫外可见分光光度计来检测( 但通常用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度计测定微量元素为宜, 用比色法测定目前已比较少了)。还有, 饲料添加剂中的皮蝇磷、磺胺类药物、灰黄霉素、二甲硝咪唑, 以及普鲁卡因等的测定, 基本上都可用紫外可见分光光度计来进行。 农药及其残留物分析 施加的农药进入土壤中, 一部分被农作物吸收( 如可被胡萝卜、花生等吸收)、一部分进入大气、一部分流入水中。农药残留包括农药原体、农药的有毒代谢物、农药的降解物和杂质。人们往往只把农药原体看成农药残留量, 忽略了农药原体的代谢物、降解物和杂质。其实, 代谢物、降解物的毒性与原药一样或更严重。 这些代谢物的毒性都比原体更强。杀虫脒的代谢物的毒性, 比原药大10 倍。许多农药对人体的危害非常大, 对人的肝脏组织和肝功能的损害很大, 会引起血液细胞染色体突变, 有机氯农药能透过胎盘进入胎儿体内, 危害胎儿。有机磷农药、氨基甲酸酯类农药等是神经毒物, 它抑制血液和组织中的乙酰胆碱酯酶的活性, 引起神经功能混乱、出汗、精神错乱、语言失常等病症。 据美国癌症研究中心报道, 人类癌症有90%是由有机物引起的, 其中以农残为主。所以发达国家都很注重对农药及其残留物的检测。例如, 日本近几年对几百种农药制定了近万个zui高残留限量。其中, 对蔬菜有3728 个, 对大米制定了116 种农药的zui高残留限量。人类长期连续少量摄入农药残留物, zui可怕的是引起三致, 即致癌、致畸和致突变。

由于分光光度计是一种常用的实验室分析仪器，所以无论是从款式上还是价格上五花八门，一般往往给初购者造成眼花缭乱、令人无所适从的感觉；为此、谈谈我个人的看法。（一）、选择可满足使用者长期分析要求的仪器即可：尽管分光光度计种类繁多，但不外乎：简易型、中档型和高档型三大类；（1）简易型仪器及其特点：结 构：这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝 为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。此类仪器生产以国内厂家居多。测量模式：多为定点（固定波长）吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。适应范围：小型实验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高，。价 格：相对低廉，一般在2万元人民币以下，所以还有一定的市场。（2）中档型仪器及其特点：结 构：此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长按照设定模式自 动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中 光栅的技术指标尤为重要，最佳的光栅为凹面型，为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身 具有的或外接计算机处理。并有一定的测量附件。测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、单光束；单点及扫描均可。适应范围：此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。价 格：3～10万人民币之间，此类型仪器占分光光度计的比例最大。（3）高档型仪器及特点：除 了中档仪器的特点外，主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm；波长检测范围有的仪 器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm；狭缝均为连续可调型，以适应高分辨率的需要，波长扫描速度的档位也增加了，检测器均使用高灵敏度 的光电倍增管和红外检测器；数据处理目前基本是电脑来执行；衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、 反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式，单点、扫描均可；适应范围：科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。不但可以测液态样品，也可测固态样品。价 格：10万人民币以上。（二）最合适的性/价比：无 论选择上述哪一类的产品，只要仪器类型选定下来，就要在同类型仪器的产品范围中依据价格来选购，当然、同类仪器中，谁的价格便宜便买谁的；这里也要注意： 有时价格相差一些不一定就要买便宜的，还要全面评估；这需要多了解、多看书、多比较、多向有经验者请教；千万不要仅听信推销人员的一面之词。（三）优良的售后服务：“没有了优良的售后服务，仪器厂家便没有了生命”这是一句箴言，道理在此就不多讲了。通过实践证明，没有良好售后服务保障的仪器厂家所生产的仪器也好不了哪去

近期有些网友问及如何选购分光光度计，为此谈谈个人的一些不成熟的看法，特别指出的是，由于分光光度计种类繁多，因此不可能一一举例，同时此文内容也不涉及任何一家产品，以免“瓜田李下”，只是作为网友参考之用。　　由于分光光度计是一种常用的实验室分析仪器，所以无论是从款式上还是价格上五花八门，一般往往给初购者造成眼花缭乱、令人无所适从的感觉；为此、谈谈我个人的看法。[size=4][B][font=黑体]（一）、选择可满足使用者长期分析要求的仪器即可：[/font][/B][/size]　　尽管分光光度计种类繁多，但不外乎：简易型、中档型和高档型三大类；　　[B]（1）简易型仪器及其特点：[/B]　　[B]结 构：[/B]这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。此类仪器生产以国内厂家居多。　　[B]测量模式：[/B]多为定点（固定波长）吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。适应范围：小型实验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高，。　　[B]价 格：[/B]相对低廉，一般在2万元人民币以下，所以还有一定的市场。　　[B]（2）中档型仪器及其特点：[/B]　　[B]结 构：[/B]此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长按照设定模式自动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中光栅的技术指标尤为重要，最佳的光栅为凹面型，为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。并有一定的测量附件。　　[B]测量模式：[/B]透过率、吸光度、浓度直读、单光束；单点及扫描均可。　　[B]适应范围：[/B]此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。　　[B]价 格：[/B]3～10万人民币之间，此类型仪器占分光光度计的比例最大。　　[B]（3）高档型仪器及特点：[/B]　　除了中档仪器的特点外，主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm；波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm；狭缝均为连续可调型，以适应高分辨率的需要，波长扫描速度的档位也增加了，检测器均使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器；数据处理目前基本是电脑来执行；衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。　　[B]测量模式：[/B]透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式，单点、扫描均可；　　[B]适应范围：[/B]科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。不但可以测液态样品，也可测固态样品。　　[B]价 格：[/B]10万人民币以上。[size=4][font=黑体][B]（二）最合适的性/价比：[/B][/font][/size]　　无论选择上述哪一类的产品，只要仪器类型选定下来，就要在同类型仪器的产品范围中依据价格来选购，当然、同类仪器中，谁的价格便宜便买谁的；这里也要注意：有时价格相差一些不一定就要买便宜的，还要全面评估；这需要多了解、多看书、多比较、多向有经验者请教；千万不要仅听信推销人员的一面之词。[size=4][font=黑体][B]（三）优良的售后服务：[/B][/font][/size]　　“没有了优良的售后服务，仪器厂家便没有了生命”这是一句箴言，道理在此就不多讲了。　　通过实践证明，没有良好售后服务保障的仪器厂家所生产的仪器也好不了哪去。[B][color=#DC143C][size=4]本文由本网VIP用户“独孤求败(anping）”发表，在此表示衷心感谢！[/size][/color][/B]

荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm，发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。 荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。 荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计，自动记录式荧光分光光度计，计算机控制式荧 　　光分光光度计三个阶段；荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计，配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。

摘要 : 环境( 包括空气、水、土壤) 中许多的对人有毒有害物质的检测, 都用到紫外可见分光光度计, 如检测自来水中的木素磺酸、木质素、单宁、表面活性剂、黄腐酸、酚类、苯胺类、硝基酚类化合物等对人体有毒害的物质。有些自来水中, 含有氨氮、亚硝酸盐、总酚、总苯胺、硝基酚类等对人体有毒害的物质, 一般也是用紫外可见分光光度计来检测。石油油品分析z 在石油开采、加工过程中, 石油有可能造成污染。在石油工业生产污水中,一般将排水中石油含量规定为10mg/ L。而在地面水中, 最高允许石油含量为0. 1～0. 3mg/ L。一般石油炼油厂中, 石油所含的芳烃组成是相对稳定的, 所测得标准油品的吸收峰, 都在221～225nm 和251～255nm 处。石油的两个特征吸收峰(225nm 和254nm) 是测定炼油厂污水中的含油量时要选用的吸收波长。另外, 轻油组分( 初馏约180℃) 几乎无明显紫外特征吸收, 而中油( 180～250℃) 和重油(250～280℃) , 以及蒽油( 280℃) 等组分在225nm 处吸收较强。它代表了石油成分的主峰, 在254nm 处吸收较弱, 有时显示出某种重质油品的特性。这些分析工作, 都用紫外可见分光光度计来进行。还有, 在炼油过程中, 石油在320nm 附近有一个芳烃杂质, 也是必须要用紫外可见分光光度计来检测的。因此, 紫外可见分光光度计是石油工业中非常重要的质量控制仪器。 环境中有害物质检测 环境( 包括空气、水、土壤) 中许多的对人有毒有害物质的检测, 都用到紫外可见分光光度计, 如检测自来水中的木素磺酸、木质素、单宁、表面活性剂、黄腐酸、酚类、苯胺类、硝基酚类化合物等对人体有毒害的物质。有些自来水中, 含有氨氮、亚硝酸盐、总酚、总苯胺、硝基酚类等对人体有毒害的物质, 一般也是用紫外可见分光光度计来检测。我国与水有关的国家标准中, 规定水中的许多物质都要用紫外可见分光光度计来检测。 饲料工业中的应用 饲料的原料、添加剂、混合饲料等中的维生素A、维生素C、维生素E、维生素K、山梨酸、苯甲酸、棉酸、甲酯、乙酸酯、胡萝卜素、烟酸、总氨基酸等微量元素钾、铁、硒、碘、铜、磷、锰等都经常用紫外可见分光光度计来检测( 但通常用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度计测定微量元素为宜, 用比色法测定目前已比较少了)。还有, 饲料添加剂中的皮蝇磷、磺胺类药物、灰黄霉素、二甲硝咪唑, 以及普鲁卡因等的测定, 基本上都可用紫外可见分光光度计来进行。 农药及其残留物分析 施加的农药进入土壤中, 一部分被农作物吸收( 如可被胡萝卜、花生等吸收)、一部分进入大气、一部分流入水中。农药残留包括农药原体、农药的有毒代谢物、农药的降解物和杂质。人们往往只把农药原体看成农药残留量, 忽略了农药原体的代谢物、降解物和杂质。其实, 代谢物、降解物的毒性与原药一样或更严重。 这些代谢物的毒性都比原体更强。杀虫脒的代谢物的毒性, 比原药大10 倍。许多农药对人体的危害非常大, 对人的肝脏组织和肝功能的损害很大, 会引起血液细胞染色体突变, 有机氯农药能透过胎盘进入胎儿体内, 危害胎儿。有机磷农药、氨基甲酸酯类农药等是神经毒物, 它抑制血液和组织中的乙酰胆碱酯酶的活性, 引起神经功能混乱、出汗、精神错乱、语言失常等病症。 据美国癌症研究中心报道, 人类癌症有90%是由有机物引起的, 其中以农残为主。所以发达国家都很注重对农药及其残留物的检测。例如, 日本近几年对几百种农药制定了近万个最高残留限量。其中, 对蔬菜有3728 个, 对大米制定了116 种农药的最高残留限量。人类长期连续少量摄入农药残留物,最可怕的是引起三致, 即致癌、致畸和致突变。

紫外可见分光光度计作为化学物质定量分析的常用仪器，广泛应用于科研、生产、国防等各个领域。为了保证仪器测量数值的准确可靠，必须依据JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程进行检定。然而在使用和检定过程中，常遇到仪器透射比示值发生偏差或检定结果有所不同，对此，笔者从以下三个方面对产生偏差的原因进行分析。一、从仪器和样品在光路上分析分光光度计的基本原理是，溶液中的物质在光的照射激发下，具有选择性吸收现象，可对物质进行定性和定量的分析。它符合朗伯-比耳定律:式中:T——透射比；I——透射光强度；I0——入射光强度；A——吸光度；K——吸收系数；C——溶液的浓度；L——溶液的光径长度。而朗伯-比耳定律应用的条件是:一是必须使用单色辐射光；二是吸收发生在均匀的介质；三是吸收过程中，吸收物质互相不发生作用。在实际工作中，吸光度与浓度之间的线性关系常常发生偏离，其主要因素有以下几点:1.仪器的非单色光影响在紫外可见分光光度计中，使用连续光源和单色器分光，得到的不可能是真正的“单色光”。为了保证足够的光强，分光光度计的狭缝必须保持一定的宽度。因此，由出射狭缝照射到被测物质上的光，并不是理论上要求的单色光，而是一个有限宽度的谱带，称为光谱带宽。来自出射狭缝的光，其光谱带宽大于吸收光谱谱带时，照射在样品上的光中就有非吸收光。随着光谱带宽的增大，吸收光谱的分辨力下降，而偏离朗伯-比耳定律。非吸收光愈强，对测定灵敏度的影响就愈严重，并且随着被测样品浓度的增加，非吸收光的影响增大。当吸收很小时，非吸收光的影响可以忽略不计。2.仪器的非平行光影响当入射光与吸收池的光学面不垂直时，使通过样品的实际光程大于吸收池的厚度。但这种情况对测量影响很小，一般可忽略不计。而此时未通过样品的光在比色架上或样品室内发生反射、散射现象，也会导致偏离朗伯-比耳定律。3.样品的散射影响由于样品的不均匀也会引起对朗伯-比耳定律的偏离。当被测样品中含有悬浮物或胶粒等散射质点时，入射光通过样品就会有一部分光因散射而损失掉，使透射光强度减小，实测吸收光度增大，导致偏离朗伯-比耳定律。4.样品的荧光影响某些物质吸收光以后，会辐射出波长与入射光波长不同的荧光，荧光的存在将导致朗伯-比耳定律失效。5.样品的化学因素在被测样品溶液中，被测组分发生离解、缔合、光化等作用，或与溶剂相互作用，就会使被测组分的吸收曲线明显改变(如吸收峰的形状、位置、强度以及精细结构都会发生变化)，导致偏离朗伯-比耳定律。6.仪器的机械因素仪器生产时比色皿架的安装有微小偏差(不影响正常使用)。仪器比色皿架与比色架底板安装有微小偏移，使光束不能完全透过比色皿射入检测器，而射在比色皿以外部位，造成有效光能的损失，使入射的单色光强度发生变化，从而显示的透射比值偏离了标准值。还有的是仪器光门闭合不良导致漏光，而使透射比值发生偏离。二、从检定所用的标准器上分析检定分光光度计透射比值所用的标准物质，有用于检定可见光区的中性滤光片，以及用于检定紫外光区的标准中性滤光片或标准溶液。1.标准中性滤光片用于检定可见光区的中性滤光片。每片滤光片的证书都给出了可见光区3个波长(通常为440nm、546nm、635nm)及相应光谱带宽下的透射比，其相对不确定度为0.5%，其透射比名义值为10%、20%、30%等。用于检定紫外光区的标准中性滤光片，每片滤光片的证书都给出了紫外光区4个波长(通常为235nm、257nm、313nm、350nm)及相应光谱带宽下的透射比，其相对不确定度为0.5%。滤光片本身的结构原因:以上光谱中性滤光片都是经过长期稳定性考核可作为标准物质使用的，这里要提的是这种标准滤光片其本身结构杂散光、波长误差、样品不均匀等所带来的影响在检定时是不予考虑的，但在引起透射比示值偏差的不确定度分析中是要考虑的因素。另外，标准滤光在加工质量上，因其边缘是由金属外壳包装固定，当外壳出现细微变形(不影响正常检定)，这种情况下的透射比示值就可能脱离实际测量值。同时，当标准滤光片的表面有灰尘或其他脏物时，也直接影响示值准确性，因此在实际工作中对光谱中性滤光片应注意保持清洁。滤光片的方向性问题:有些滤光片是有方向性的，所以检定时应按标准滤光片上所指示的方向放置于比色架中，否则也可能引起偏差。2.标准溶液紫外分光光度标准溶液包括一个空白及一个吸光度(透射比)的标准溶液，GBW(E)130066为K2Cr2O7的溶液。当用液体标准物质作为标准器进行检定时，必须使用标准石英吸收池，其两透光面的垂直距离为(10.00+0.002)mm，且两透光面的平面性和平行性均需严格控制。使用时可用同一吸收池作空白与标准的测量，以便得到溶液的净透射比。如果使用不同的吸收池作空白与标准的测量时，应严格控制吸收池的配套。最好对配套误差进行修正。标准溶液的温度也会影响透射比示值，标准溶液的证书也给出了不同温度下标准溶液的透射比值。而检测室内环境的温度与标准溶液的温度并不完全一致，这一偏差也影响了透射比示值的测量准确性。三、从仪器的样品室及人员操作上分析透射比准确度是指仪器透射比示值与透射比约定真值间的一致程度。透射比重复性是指对仪器透射比示值进行多次测量所得结果之间的一致性。在对透射比示值检定时，除了要按JJG178-2008的要求进行检定外，还应注意:1.有的仪器未达到一定预热时间，会造成光电系统不稳定，透射比值会发生漂移，所以要按说明书的要求，对仪器进行必要的预热。2.有些国产设备中上限位器的作用是由底架的弹珠决定的，即使上面的位置对好了，还要注意弹珠的定位手感，这一点十分重要。尤其是在30%挡，最容易拉过一点点，透射比的偏差是很大的，检测时要给予充分考虑。3.有的仪器由于长时间使用后会使光门组件损坏，使光门的闭合不良，用手轻压盖板，仪器示值会发生明显变化，这会造成透射比值的重复性偏差，此时需对光门组件进行调整方可使用或检定。4.对于有方向性的标准滤光片，检定应按方向把标准滤光片放置于样品室比色架上。四、结束语通过上述对影响分光光度计透射比值偏差的各类原因分析，我们知道透射比示值是分光光度计的一项重要技术指标。我们在检定、检修或使用分光光度计的过程中，当透射比示值发生偏差或超标时，应考虑上述因素的影响，以免作出误判或错误的检测结论。而在对分光光度计透射比偏差的不确定度来源分析中也应视情况考虑上述因素的影响。(选自网络)

大家好，我这里有一台韩国美卡西斯的微量分光光度计，操作界面卡住了，不能进行任何操作，强制关机后开机还是一样，想请教一下大家有什么处理意见吗？谢谢大家、

721型分光光度计构造、使用与维修 分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。 T = I/Io lg(Io/I)=εcb 式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度，A为消光值(吸光度)，ε为吸收系数，b为溶液的光径长度，c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化的。 721型分光光度计的构造 721型分光光度计允许的测定波长范围在360～800nm，其构造比较简单，测定的灵敏度和精密度较高。因此，应用比较广泛。 721型分光光度计的仪器构造见图5-5。从光源灯发出的连续辐射光线，射到聚光透镜上，会聚后，再经过平面镜转角90°，反射至入射狭缝。由此入射到单色器内，狭缝正好位于球面准直物镜的焦面上，当入射光线经过准直物镜反射后，就以一束平行光射向棱镜。光线进入棱镜后，进行色散。色散后回来的光线，再经过准直镜反射，就会聚在出光狭缝上，再通过聚光镜后进入比色皿，光线一部分被吸收，透过的光进入光电管，产生相应的光电流，经放大后在微安表上读出。721型分光光度计的使用方法 ①首先接通电源，打开电源开关1，指示灯亮，打开比色皿暗箱盖8，预热20分钟。 ②波长选择旋钮6，选择所需的单色光波长，用灵敏度旋钮2选择所需的灵敏档。 ③放入比色皿，旋转零位旋钮5调零，将比色皿暗箱盖合上，推进比色皿拉杆3，使参比比色皿处于空白校正位置，使光电管见光，旋转透光率调节旋钮4，使微安表9指针准确处于100%。按上述方法连续几次调整零位和100%位，即可进行测定工作(仪器面板见 图5-6)。 721型分光光度计使用和维护中应注意事项： ①连续使用仪器的时间不应超过2小时，最好是间歇0.5小时后，再继续使用。 ②比色皿每次使用完毕后，要用去离子水洗净并倒置晾干后，存放在比色皿盒内。在日常使用中应注意保护比色皿的透光面，使其不受损坏或产生划痕，以免影响透光率。 ③仪器不能受潮。在日常使用中，应经常注意单色器上的防潮硅胶(在仪器的底部)是否变色，如硅胶的颜色已变红，应立即取出烘干或更换。 ④在托运或移动仪器时，应注意小心轻放

我们实验室测总氮用双光束分光光度计比色时，首先校零。老师操作是这样的：1、两个比色皿都盛纯化水然后校零；2、靠近自己的一侧比色皿拿出来换盛空白试剂，点击测量；3、靠里面的比色皿拿出来换盛空白试剂，点击校零；4、靠外一侧换盛样品开始测量……我想问一下第一步可不可以省掉？第2,3步可不可以合并为同时盛放空白试剂点击校零，然后靠近自己一侧开始测定样品？如果不可以为什么？纯净水校零有必要么？请教一下校零的具体操作？

传统分光光度计：样品体积要求大，绝大部分要50μL以上需使用比色皿每次换样品时，比色杯需要清洗，工作繁重光程一般为10mm，样品需要稀释，测量浓度范围小灯源一般由氘灯(紫外)和钨灯(可见)组成，寿命短需要预热半个小时以上显示吸光度值，不显示浓度值仪器体积大，质量重超微量分光光度计所需样品体积小，仅需1～2μL不需要比色皿，用移液枪直接将样品滴加到检测平台上，测量时样品自动形成液柱，检测完成后只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可具有1mm和0.2mm两个光程(电机控制自动选择光程)，样品无需稀释，测量范围可达到常规分光光度计的50倍氙气闪光灯为灯源，寿命长,性能稳定不需要预热，可随时检测显示吸光度值的同时，程序直接给出浓度值（核酸、蛋白和荧光染料）体积小：相当于一本字典大小，仅占16.5厘米实验室空间市场常见的欧美品牌市场上比较畅销的超微量分光光度计有：美国ThermoScientific的Nanodrop系列产品,英国Picodrop公司的CUBE和P200系列产品，美国QUAWELL的Q3000 5000 6000+系列以及其它一些品牌。（选自网络）

大家平时做分光光度计的自校吗，怎么自校，从那些参数考虑

紫外分光光度计的波长校正和检定由于温度变化对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83、 253.65、 275.28、296.73、313.16、334.15、365.02、404.66、435.83、546.07与576.96nm，或用仪器中氘灯的486.02与656.10nm谱线进行校正,钬玻璃在279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、536.2与637.5nm波长处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用,但因来源不同会有微小的差别，使用时应注意。 吸收度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120摄氏度干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，按下表规定的波长处测定并计算其吸收系数。 规定的吸收系数如下表，相对偏差可在±百分之1以内。波长（nm）:235（最小） 257（最大） 313（最小） 350（最大）吸收系数E百分之1 1cm：124.5 144.0 48.62 106.6 （与上面数值一一对应）杂散光的检查可按下表的试剂和浓度，配制成水溶液,置1cm石英吸收池中，在下表规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。试剂 浓度（g/ml） 测定用波长（nm） 透光率碘化银 百分之1.00 220 百分之0.8亚硝酸钠 百分之5.00 380 百分之0.8

各位版友，紫外分光光度计版面迎来一位新专家——青栀 ！ @青栀 青栀 熟悉分光光度计的使用及质量控制等，为@abcpgf 推荐。现上任紫外分光光度计版面的专家职位！欢迎各位版友来与 青栀 多多交流！ 欢迎来捧场！散积分啦！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~特别注明：仪器论坛各版面版主专家招募火热进行中，如果您喜爱仪器论坛，如果你愿意在这里结识朋友促进交流，请您别害羞，快来自荐申请吧！！（为保证公平性，版主申请要求必须为非厂商人员）申请方式：1.全国自费热线：010-51654077-80582.免费站短信箱： 又又1990或山河永寂3.回复本贴说明4.与现任各位版主私下表明心意5.各版面版主专家申请入口：http://bbs.instrument.com.cn/resume/

分光光度计的基本工作原理是基于物质对光（对光的波长）的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。 T = I/Io lg（Io/I）=εcb式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度，A为消光值（吸光度），ε为吸收系数，b为溶液的光径长度，c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化的。721型分光光度计的构造721型分光光度计允许的测定波长范围在360～800nm，其构造比较简单，测定的灵敏度和精密度较高。因此，应用比较广泛。721型分光光度计的仪器构造见图5-5。从光源灯发出的连续辐射光线，射到聚光透镜上，会聚后，再经过平面镜转角90°，反射至入射狭缝。由此入射到单色器内，狭缝正好位于球面准直物镜的焦面上，当入射光线经过准直物镜反射后，就以一束平行光射向棱镜。光线进入棱镜后，进行色散。色散后回来的光线，再经过准直镜反射，就会聚在出光狭缝上，再通过聚光镜后进入比色皿，光线一部分被吸收，透过的光进入光电管，产生相应的光电流，经放大后在微安表上读出。721型分光光度计的使用方法①首先接通电源，打开电源开关1，指示灯亮，打开比色皿暗箱盖8，预热20分钟。②波长选择旋钮6，选择所需的单色光波长，用灵敏度旋钮2选择所需的灵敏档。③放入比色皿，旋转零位旋钮5调零，将比色皿暗箱盖合上，推进比色皿拉杆3，使参比比色皿处于空白校正位置，使光电管见光，旋转透光率调节旋钮4，使微安表9指针准确处于100%。按上述方法连续几次调整零位和100%位，即可进行测定工作。721型分光光度计使用和维护中应注意事项：①连续使用仪器的时间不应超过2小时，最好是间歇0.5小时后，再继续使用。②比色皿每次使用完毕后，要用去离子水洗净并倒置晾干后，存放在比色皿盒内。在日常使用中应注意保护比色皿的透光面，使其不受损坏或产生划痕，以免影响透光率。③仪器不能受潮。在日常使用中，应经常注意单色器上的防潮硅胶（在仪器的底部）是否变色，如硅胶的颜色已变红，应立即取出烘干或更换。④在托运或移动仪器时，应注意小心轻放。

使用多年后，由于溶液滴洒等原因，我们用的光度计面板光度计面板多少有些腐蚀，很是难看，曾经有人告诉我们用石蜡防腐，效果虽好，但是平时很难看。大家有什么简单有效的防腐方法吗？

1)若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”然后再测量。2)指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。3)比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。4)操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。5)1900型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光 电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在 预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。6)放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。7)比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法 如下分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色杯；220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色杯：700nm处装蒸馏水， 将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，若超出此范围 应考虑其对测试结果的影响。