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细胞染毒装置

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细胞染毒装置相关的资讯

  • 新碳纳米管装置可检测血液中癌细胞
    微流体装置中这些由碳纳米管做成的微型柱头,能够捕捉任何流经装置的癌细胞或其他细小物质。每个柱头直径为30微米。  一个由哈佛大学和麻省理工学院(MIT)组成的研究小组近日设计出一种小型装置,可检测出血液样本中的癌细胞,这项成果有望帮助医生快速判断癌症是否存在扩散迹象。研究报告发表在近期的Small期刊上。  这种微流体装置只有一枚硬币大小,但可以检测到包括艾滋病病毒在内的多种病毒。据领导该项研究的哈佛大学医学院生物医学工程教授梅米特托纳(Mehmet Toner)表示,这种装置的早期版本诞生于四年前,当时研究小组用硅制成一种微型柱头,将抗体涂在其表面,当病人血液流经这种硅柱,任何接触到柱头的癌细胞便能被抗体捕获。不过在当时,仍有一些细胞完全没有触碰到硅柱。  通过与MIT副教授Brian Wardle的合作,托纳的研究小组用碳纳米管代替硅,在这种装置中置入不同几何形状的碳纳米管簇(nanotube forest),并且每根纳米管的表面都涂满可识别癌细胞的多种抗体,由于碳纳米管的优良吸附性能,使得含有癌细胞的血液样本能充分流经该装置,最终,这种经过改良的装置捕获癌细胞的能力相比之前提高了8倍。  使用碳纳米管的另一个好处还在于,研究人员可以通过改变纳米管的几何结构使这种装置能够捕捉不同大小的物质——大到癌细胞,小至病毒。  在因癌症死亡的人中,有90%是由于癌症扩散最终导致死亡的,而扩散中的癌细胞通常很难被检测到,这种微流体装置或有望改变这种现状。  目前,托纳的小组正在致力于对该装置进行设计调整,以期能检测出艾滋病病毒。(科学网 张笑/编译)  相关仪器:共焦显微镜 荧光显微镜  完成人:梅米特托纳课题组  实验室:美国麻省总医院生物微机电系统资源中心 麻省理工学院航空航天系
  • naica®微滴芯片数字PCR系统量化造血干细胞移植儿童巨细胞病毒感染的病毒载量
    导读中国疾病预防控制中心国家病毒病预防控制研究所和中国首都儿科研究所的科学家在Canadian Journal of Infectious Diseases and Medical Microbiology上发表了题为The Viral Load of Human Cytomegalovirus Infection in Children following Hematopoietic Stem Cell Transplant by Chip Digital PCR的文章。文中应用naica微滴芯片数字PCR系统建立了芯片数字PCR(cdPCR)方法,能够精准定量HSCT前后儿童HCMV感染的病毒载量。质粒pUC57-UL83的cdPCR检测限为103拷贝/ml,qPCR检测限为297拷贝/ml。cdPCR检测HCMV AD169毒株的结果为146拷贝/ml,表明cdPCR的灵敏度高于qPCR。人类巨细胞病毒(HCMV)是一种普遍存在的β-疱疹病毒,已感染发展中国家高达90%的人口。作为一种常见病原体,HCMV感染在免疫抑制个体中引起了显著的发病率和死亡率,特别是在接受了造血干细胞移植(HSCT)的患者中,原因是原发感染后潜伏感染的主要靶细胞是造血细胞。对于HSCT后的高危儿童,应在出现临床症状之前检测HCMV感染,因为HCMV病毒的载量及变化与HSCT儿童HCMV感染的发展和严重程度高度相关。因此,HCMV病毒载量的定量检测对患儿的治疗至关重要。应用亮点:▶ 使用naica微滴芯片数字PCR系统开发了一种快速、直观、简便和准确的检测HSCT前后儿童HCMV病毒的绝对定量方法。▶ 通过质粒和培养毒株验证naica微滴芯片数字PCR系统灵敏度、特异性和重复性。实验方法:作者从首都儿科研究所儿童医院收集了122名异体造血干细胞移植患儿、3名自体造血干细胞移植患儿样本(男/女:73/52),中位年龄7.5岁。该研究通过质粒和培养毒株验证naica微滴芯片数字PCR系统灵敏度、特异性和重复性均优于qPCR。在HSCT前后,通过qPCR和cdPCR检测所有供体和受体血清中的HCMV病毒载量。实验结果:作者通过含有pUC57-UL83基因的质粒DNA分别评估cdPCR和qPCR的动态范围。cdPCR的检测限 (LOD) 为103拷贝/ml (2.0拷贝/反应),qPCR的LOD为297拷贝/ml。结果表明,cdPCR的灵敏度高于qPCR。为了评估cdPCR数据的重现性,作者使用质粒建立了HCMV DNA拷贝数的标准曲线。分析cdPCR检测的变异系数(CV、标准差/平均值)。结果表明,cdPCR检测具有良好的重复性(CV15%)。稀释质粒的预期值与cdPCR检测值之间也具有良好的一致性(cdPCR检测值与稀释质粒的预期值R= 0.979, P 0.05, qPCR检测值与稀释质粒的预期值R= 0.939, P 0.05)。▲图1 通过标准曲线评估cdPCR检测的HCMV DNA拷贝数的变化。黑线显示质粒DNA的标准曲线。不同的散点是通过cdPCR测试到的HCMV DNA拷贝数。作者又使用HCMV AD169毒株验证cdPCR的灵敏度。qPCR可以检测到5.67×10 TCID50/ml HCMV DNA,但不能检测到5.67 TCID50/ml HCMV DNA。cdPCR可以检测5.67 TCID50/ml病毒的HCMV DNA。cdPCR的灵敏度优于qPCR。为了验证cdPCR方法的敏感性以及是否可以用于HSCT患者血液中的HCMV检测,作者通过qPCR和cdPCR检测了125例HSCT后儿童的全血样本。在38份cdPCR阳性样本中,有4份qPCR阴性样本。在91份qPCR阴性样本中,有4份cdPCR阳性。结果如表1所示。HCMV在125个HSCT患儿的检出率为30.40% (38/125),HCMV病毒载量范围为107拷贝/ml-6600拷贝/ml。男性组的检出率为30.14% (22/73),女性组的检出率为30.77% (16/52)。在0-12岁HSCT后HCMV阳性儿童中,HCMV的检出率为89.47% (34/38)。在0-6岁组中,男性的检出率为25.64% (10/39),女性的检出率为22.58% (7/31)。在7-12岁组中,男性的检出率为39.29% (11/28),女性的检出率为40% (6/15)。12岁以上患儿HCMV检出率为33.33% (4/12),男性检出率为16.67% (1/6),女性检出率为50% (3/6)。结果如表3所示。综上所述, cdPCR方法在HCMV检测领域比qPCR更敏感,能快速、直观、简便和准确的检测HSCT患儿HCMV感染率及病毒载量。参考文献:1.P. Griffiffiffiths, I. Baraniak, and M. Reeves, “,e pathogenesis of human cytomegalovirus,” Journal of Pathology, vol. 235, no. 2, pp. 288–297, 2015.2.L. Dupont and M. B. Reeves, “Cytomegalovirus latency and reactivation: recent insights into an age old problem,” Reviews in Medical Virology, vol. 26, no. 2, pp. 75–89, 2016.naica六通道微滴芯片数字PCR系统法国Stilla Technologies公司naica六通道微滴芯片数字PCR系统,源于Crystal微滴芯片式数字PCR技术,自动化微滴生成和扩增,每个样本孔可实现6荧光通道的检测,智能化识别微滴并进行质控,3小时内即可获得至少6个靶标基因的绝对拷贝数浓度。
  • 新装置能操控分化阶段干细胞 或引发新一代基因疗法
    科技日报讯 美国西北大学开发出一种新型电穿孔微流控装置,能对分化中的干细胞进行电穿孔操作,在细胞生命的最重要阶段能够进行分子输送。这提供了研究神经元等原代细胞所必要的条件,为探索神经疾病致病机制打开了一扇门,可能会引发新一代的基因疗法。  电穿孔技术是分子生物学中强有力的技术手段。利用电脉冲在细胞膜上创建一个临时的纳米孔洞,研究人员就能将化学品、药物和DNA(脱氧核糖核酸)直接输送到单个细胞中。  但是,现有的电穿孔技术要用很高的电场强度来保持细胞悬浮在溶液中,打断了细胞通路,使敏感的原代细胞处在恶劣的环境中。因此,研究人员要在细胞持续分化和扩大过程中研究细胞的自然属性几乎没有可能。  据物理学家组织网近日报道,这个新型装置的英文缩写为LEPD,适用于在人工衬底而非自由浮动的培养基中生长的贴壁细胞,这类细胞的生长必需有可以贴附的支持物表面,细胞依靠自身分泌的活培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长和繁殖。  研究人员说:&ldquo 不破坏分化却能推送分子进入贴壁细胞的能力,是生物技术学研究者进一步了解相关基础知识的必要条件,尤其有利于进行最先进的干细胞研究。在生物学和医学研究领域,对细胞进行正确环境下的无损操作是非常关键的技术。&rdquo   相关成果发表在《英国皇家化学学会》杂志上。
  • 沈阳生态所在新型污染物毒理研究中获进展
    纳米塑料作为一种新型环境污染物在自然界中广泛存在,尚无有效的检测和消除手段。纳米塑料易随饮食和呼吸途径进入人和动物体内,并影响生理功能。免疫细胞作为机体抵御外来抗原的重要防线,易受到纳米塑料的攻击,当前未有关于纳米塑料对哺乳动物免疫系统毒性作用的研究报告。  中国科学院沈阳应用生态研究所微生物资源与生态组徐明恺团队在该领域展开了探索性研究,以小鼠免疫细胞为模型,探索不同粒径、不同表面电荷的聚苯乙烯纳米塑料对动物免疫细胞的毒性效应及毒理学机制。  研究发现,不同粒径、不同电荷的聚苯乙烯纳米塑料均可进入小鼠脾淋巴细胞内部,并在高浓度下造成免疫细胞活力的显著降低,诱导发生细胞凋亡。在免疫功能方面,纳米塑料可显著抑制T淋巴细胞的活化,下调细胞表面标志物的表达,抑制CD8+毒性T淋巴细胞的分化及相关细胞因子的分泌。毒理机制方面,纳米塑料显著抑制T淋巴细胞活化的关键信号通路PKCθ-NFκB和IL-2R/STAT5,从而影响其免疫功能的发挥。研究进一步显示,纳米塑料的毒理效应与粒径、表面电荷、染毒浓度和作用时间密切相关。带负电和不带电的纳米塑料可导致胞内活性氧自由基(ROS)的累积从而影响线粒体功能,而带正电的纳米塑料直接导致线粒体膜电位的去极化。该成果可为纳米塑料污染的生态风险预测提供科学依据。  相关研究成果以In vitro study on the toxicity of nanoplastics with different charges to murine splenic lymphocytes为题,发表在Journal of Hazardous Materials上。研究工作得到国家自然科学基金、辽宁省“兴辽英才计划”、沈阳市科技局“中青年科技创新人才支持计划”项目的支持。图1.小鼠脾淋巴细胞中的聚苯乙烯纳米塑料分布图2.聚苯乙烯纳米塑料影响小鼠脾脏淋巴细胞的毒理机制
  • 多功能单细胞显微操作技术在病毒研究中的应用 ——在单病毒粒子--单细胞水平上研究病毒的感染
    病毒的感染研究通常是在大量细胞实验中进行的,一般要将许多培养细胞同时暴露于病毒中,这就使得研究单个病毒侵入事件和研究病毒在单个细胞之间的感染传播十分困难。多功能单细胞显微操作FluidFM技术通过温和的、微通道和力反馈控制的探针,将单个病毒粒子突破性的沉积在选定的单个细胞上,从而实现前所未有的控制,在单个病毒粒子--单个细胞水平上研究病毒感染。FluidFM技术可以帮助阐明关于毒性、病毒复制或宿主免疫应答的基本问题,从而促进新型抗病毒药物和疫苗的开发。放置单个病毒粒子单个病毒粒子可以被放置在您选择的细胞上的确切位置注入单个病毒粒子直接将单个病毒粒子注入特定细胞的细胞质或细胞核中测量生物量的变化测量细胞硬度的变化和单细胞力谱对感染细胞进行分离、提取和分析分离被感染的细胞,或进行单细胞活细胞提取,进而进行测序、质谱等分析观察和监测通过集成的成像系统和追踪软件对细胞进行长时间连续监测 FluidFM技术如何提升您的病毒学实验? 1. 在病毒感染方面获得全新的视角FluidFM技术为病毒学研究引入了新的实验可能性,允许在贴壁细胞培养中控制病毒粒子与您所选择的细胞进行的相互作用。这为我们提供了全新的视角:细胞进入和感染机制方面;细胞反应、病毒协同性和病毒生命周期阶段;增殖,扩散率和细胞间感染方面FluidFM操作病毒的工作原理 2. 量化宿主防御和病毒协同性通过在细胞上放置一定数量的病毒粒子,宿主细胞对病毒的防御就可以被量化。因此,可以研究感染概率、宿主防御的局限性以及病毒粒子之间的合作关系。1个病毒粒子通过FluidFM微管的空心悬臂准备放置。图片由苏黎世联邦理工学院P. Stiefel提供。4个病毒粒子沉积在一个选定的单细胞上。图片由苏黎世联邦理工学院P. Stiefel提供。 3. 监测病毒在细胞间传播FluidFM技术一体机集成了CO2和温度控制的活细胞模块,同时也集成了成像模块。这保证了受感染细胞的细胞培养环境,并与软件支持的自动追踪功能一起,允许长时间观察受感染或操纵受感染细胞。这使得我们可以详细了解病毒感染是如何从宿主细胞传播到邻近细胞乃至传播到其他培养细胞的。 4. 将单个受感染细胞导入正常培养基,或将单个正常细胞导入处理培养基轻柔地从贴壁或悬浮培养中取出单个细胞,以高的精度定位地将其放入另一个孔板中,这样的操作可以充分保证细胞的活力。使得将单个感染细胞引入健康培养基后的进一步研究成为可能。同样的方法也可以用于将健康细胞、耐药细胞或药物处理后的细胞放置于受感染的培养基中。分离单个细胞 5. 单细胞活细胞的提取,以便进一步分析FluidFM技术可以根据形态学或荧光标记从培养物中分离出单个细胞。在保持完全存活的情况下,这些感兴趣的细胞可以在新的培养皿中扩增,或进行进一步的蛋白质组学或转录组学分析。甚至可以进行单细胞活细胞检测,如Live-Seq、TOF等。 6. 从感染的单细胞中获得单细胞力谱FluidFM探针集成了力学反馈功能,允许定量的机械相互作用,可达pN别的力学分辨率。测量由单个细胞感染引起的生物物理变化,如硬度的变化,粘附力的变化,甚至质量的变化。因此,FluidFM可以将病毒在宿主细胞上引起的形态变化与机械变化联系起来。单个细胞从完全贴壁、融合的培养状态中被拽离出来,并记录单细胞力谱。视频由德国Würzburg大学医药与牙医科学院A. Sancho和J. Groll提供参考文献:[1]. Koehler, M., Petitjean, S.J.L., Yang, J., Aravamudhan, P., Somoulay, X., Lo Giudice, C., Poncin, M.A., Dumitru, A.C., Dermody, T.S. & Alsteens, D. Reovirus directly enganges integrin to recruit clathrin for entry into host cells. (2021) Nature communications, 12, 2149.[2]. J. Yang, J. Park, M. Koehler, J. Simpson, D. Luque, J.M. Rodriguez & D. Alsteens. Rotavirus Binding to Cell Surface Receptors Directly recruiting a-integrin. (2021). Advanced Nanobiomed Research.[3]. Guillaume-Gentil, O., Rey, T., Kiefer, P., Ibáñez, A. J., Steinhoff, R., Brönnimann, R., Dorwling-Carter, L., Zambelli, T., Zenobi, R., & Vorholt, J. A. (2017). Single-Cell Mass Spectrometry of Metabolites Extracted from Live Cells by Fluidic Force Microscopy. Analytical Chemistry, acs.analchem.7b00367.[4]. Guillaume-Gentil, O., Grindberg, R. V., Kooger, R., DorwlingCarter, L., Martinez, V., Ossola, D., Pilhofer, M., Zambelli, T., & Vorholt, J. A. (2016). Tunable Single-Cell Extraction for Molecular Analyses. Cell, 166(2), 506–516.[5]. Guillaume-Gentil, O., Zambelli, T., & Vorholt, J. A. (2014). Isolation of single mammalian cells from adherent cultures by fluidic force microscopy. Lab on a Chip, 14(2), 402–414.[6]. Guillaume-Gentil, O., Potthoff, E., Ossola, D., Dörig, P., Zambelli, T., & Vorholt, J. A. (2013). Force-controlled fluidic injection into single cell nuclei. Small, 9(11), 1904–1907.[7]. P. Stiefel, F.I. Schmidt, P. Dörig, P. Behr, T. Zambelli, J. A. Vorholt, and J. Mercer. Cooperative Vaccinia Infection Demonstrated at the Single-Cell Level Using FluidFM. Nano Letters, 2012.
  • 中国检科院张峰团队融合离子淌度质谱和脂质组学技术发现可表征真菌毒素侵染人类细胞的生物标志物
    近日,中国检科院张峰首席专家团队在毒性快速评价研究领域取得科研新进展,构建了一种基于脂质组学和离子淌度质谱的真菌毒素侵染细胞评价模型。真菌毒素及其次级代谢产物种类繁多,分布广,毒性强,并可通过食物链累积和传递,严重威胁着人类健康。目前,真菌毒素的毒性评价主要采用体内模型和体外模型开展,体内模型评价准确性高,但存在成本高、周期长、基质效应强等问题,且低剂量的真菌毒素往往无法满足动物实验毒性评价的用量要求。体外模型具有条件可控、周期性短等优点,但是开展基于真菌毒素侵染细胞毒性模型评价也有一定的局限性,在低剂量真菌毒素侵染时细胞状态变化不显著,难以进行毒性评价。研究团队将脂质组学技术引入体外毒性评价领域,融合离子淌度质谱技术,筛选出真菌毒素侵染人源细胞的生物标志物,并研究了真菌毒素侵染导致的人源细胞脂质变化规律。经统计学差异分析发现,受伏马毒素B1侵染的HepG2细胞模型生物标记物为神经鞘脂类和甘油磷脂类,受黄曲霉毒素B1侵染的细胞模型生物标记物为甘油糖脂类,受赭曲霉毒素A侵染的细胞模型生物标记物以甘油磷脂类为代表类。检测标志物的含量可以用于评价新型真菌毒素的毒性大小。该方法相比于细胞模型毒性评价实验,具有两大优点:一是方法灵敏度高;二是可通过标志物的定性定量分析,精准评价复合毒素的毒性。相关研究由在读研究生陈兰在导师张峰研究员的指导下完成,得到了陈凤明博士等老师的指导帮助,研究成果发表在分析化学领域国际顶级期刊《Analytical Chemistry》(影响因子6.986)2022, 94, 18, 6719–6727,该工作得到了国家重点研发计划项目,国家高层次人才项目的支持。图1 不同真菌毒素侵染细胞脂质组学生物标记物筛查表1 不同毒素侵染细胞的代表性生物标志物FormulaDescriptionAFB1C41H76O5DG(18:2(9Z,12Z)/20:0/0:0)C51H98O6TG(14:0/16:0/18:0)C59H110O6TG(18:0/18:1(9Z)/20:1(11Z))C61H112O6TG(18:1(9Z)/20:1(11Z)/20:1(11Z))C63H116O6TG(18:1(9Z)/20:1(11Z)/22:1(13Z))FB1C32H65NO3Cer(d18:0/14:0)C34H69NO3Cer(d18:0/16:0)C45H76NO6PPE dO-40:9C45H91N2O6PSM(d18:1/22:0)C47H93N2O6PSM(d18:1/24:1(15Z))DONC37H72O4DG(O-16:0/18:1(9Z))C36H69O8PPA(13:0/20:1(11Z))C39H78NO8PPC(10:0/21:0)C35H30O17Thonningianin BC46H82NO8PPC(16:0/22:5(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z))OTAC37H68O4phenolic phthiocerolC36H69O8PPA(13:0/20:1(11Z))C45H76NO6PPE dO-40:9C45H88NO9PPS(O-20:0/19:1(9Z))
  • 细胞培养实验室设备配置及用途
    茂默科学以客户为本、合作共赢的理念,致力于帮忙客户提供整体实验方案。力求解决行业内客户对科学仪器选型难、维护难的处境。通过不断优化公司运作和提升服务质量,目前已赢得业内人士和广大客户广泛认可,拥有广泛而稳固的合作伙伴和客户群体。茂默科学现介绍细胞培养实验室设备配置及用途,想要了解更多仪器、实验室仪器选配、实验室整体打包方案制定,敬请咨询~1. 超净工作台实验室设备目前绝大部分细胞实验室使用超净工作台实现无菌操作,具有操作简单、安装方便、占用空间小且净化效果很好。安徽人和净化为您介绍两种主要超净工作台-侧流式(垂直式)和外流式(水平层流式)。工作原理一般是将室内空气经粗过滤器初滤,由离心风机压入静压箱,再经高效空气过滤器精滤,由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区,从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。(1) 侧流式工作台:空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧,也有从上向下或从下向上流向对侧,形成气流屏障保持工作区无菌,工作台结构为封闭式;(2) 外流式工作台:净化后的空气面向操作者流动,因而外方气流不致混入操作,工作台结构为开放式,但进行有害物质实验操作对操作者不利。 超净工作台应需要定期请有关部门检查洁净度,符合要求的超净工作台其洁净度应达到100级,用尘埃粒子计数仪检测粒径≤5μm的尘埃粒子数量不应超过3.5个/L;空气流量应控制在0.75-1.0m3/s;细菌菌落数平均1个,根据无菌状况必要时需要置换过滤器。 2. 显微镜倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规必备设备,主要用于日常了解细胞的生长情况并观察有无污染发生。如资金允许,建议选用配置有照相系统的高品质相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等,可随时拍摄并记录细胞生长情况。3. 培养箱体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,一般适生长温度为37℃,温差变化不应超过±0.5℃。温度升高2℃时,变不利于细胞生存,温度达到40℃以上细胞将很快死亡。因此,可精确控温的恒温培养箱、CO2培养箱是、佳选择。(1) 恒温培养箱:应选隔水式或晶体管式自控温培养箱,此类培养箱灵敏度高,温度控制较稳定。一般的恒温培养箱价格较便宜,其缺点是只宜于作密闭式培养。(2) CO2培养箱:目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2(常用浓度为5%),易于稳定培养液pH,适用于开放或半开放培养。使用培养瓶时,为使培养瓶内与外界保持通气状态,可将瓶盖略微旋松,为避免细胞被污染,使用这种培养方式时,培养箱内空气必须保持清洁,需定期用紫外线照射或酒精消毒,同时培养箱内应放置盛有无菌蒸馏水的水槽,防止培养液蒸发,保持箱内相对湿度。(3) 细胞培养耗材:培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶。4. 烘箱(干燥箱)用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。5. 水纯化装置细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养、细胞培养相关液体的配制用水以及清洗细胞培养器皿用水都必须事先经过严格的纯化处理。目前有多种纯化方法相结合,可使普通水纯化为纯水和超纯水的纯水装置使用非常灵活方便,可挂壁式、台式、可配储水箱、也可直接用分液枪、还可根据各类实验用水要求选择配置杀菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉热源、内毒素的超滤型纯水装置。6. 冰箱细胞培养实验室必备设备,应专用,不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质,且应保持清洁。一般包括普通冰箱、低温冰箱和超低温冰箱。普通冰箱:储存培养液、生理盐水、Hanks液试剂等培养用的物品,可短期保存组织样本。-20℃低温冰箱、超低温冰箱:用于储存需要冷冻以保持生物活性以及需长时期存放的制剂,如酶、血清等。7. 细胞冷冻储存器储存器常用的液氮容器,根据使用需要分为不同类型和规格。选择液氮容器时需要考虑三个因素:容积大小、取放使用方便、液氮挥发量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以储存1ml的冻存管250-15000个左右。液氮温度、低温度可达-196℃,使用时应注意避免冻伤。由于液氮易挥发,需注意观察剩余液氮量,及时补充,避免液氮不足使细胞受损或死亡。目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择,可配置有电子控制器的液氮储存器,实现冻存自动化;并可监测液氮水平和样品温度,确保样品温度始终处于设定温度点;可配置报警系统,设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警;同时具备热气体旁路系统,防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐,从而更有效地保护样品,防止容器内升温。另外,可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮,保证样品安全。8. 离心机细胞培养时,通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。一般常规配置4000rpm台式离心机;若要做细胞沉降,需要使用80-100G离心力,因为离心力过大会损伤细胞。根据不同要求,有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。9. 天平常用的有精密天平和分析天平。 分析天平的精确度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根据取样量量和精度要求选择合适的天平:取样量大于100mg宜选用精确度0.1mg的天平;取样量100-10mg,选用精确度0.01mg的天平;取样量10mg宜选用精确度0.001mg的天平。天平需要定期校准,可选择有自动校准功能的天平,方便维护。天平使用需要注意清洁,避免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。
  • 细胞增殖检测新技术——EdU 取代BrdU
    直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一,是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法,其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物&mdash &mdash BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期,和细胞一起孵育的BrdU能掺入DNA分子中,再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合,就能够检测到DNA复制活跃的细胞。但BrdU有一大缺点,就是需要变性DNA后才能与抗体结合,但这就破坏了DNA双链结构,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。哈佛大学医学院细胞生物学家Adrian Salic就认为:&ldquo 为了能够暴露BrdU的抗原表位,必须用高浓度的盐酸,乙酸或酶解,但经历了如此严重的处理后,细胞原本精巧细致的结构在显微镜下就变得惨不忍睹了。&rdquo 事实上,现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生&mdash &mdash EdU检测。EdU (5-乙炔基-2&rsquo 脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。Adrian Salic特别强调:&ldquo 与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。&rdquo 细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo?荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA,简单,快速,准确。这种检测方法非常快速,且只需简单的几个步骤,因此也适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。 图1 BrdU 与EdU 检测原理示意图 表1 BrdU 与EdU 检测优缺点比较 图2 BrdU 需要DNA 变性后才能与抗体结合,导致BrdU、Hoechst 染色弥散,边缘模糊不清;而EdU 边缘清晰完整,检测更灵敏、更准确EdU可以检测新合成的DNA,而EU则可以检测新合成的RNA。EU是一种尿嘧啶核苷类似物,能够在RNA转录时期代替尿嘧啶( U )渗入正在合成的RNA分子,基于EU与Apollo?荧光染料的特异性反应进行RNA检测。EU能够在体内和体外水平检测时间和空间上RNA合成的变化,能够更方便地研究RNA转录位点,结合相关抗体标记能够检测与RNA有相互作用的蛋白。结合EdU和EU进行检测新合成的DNA和新合成的RNA,可以深入开展细胞增殖、细胞周期、细胞毒性、DNA复制及修复、信号通路等方面的研究。
  • 如何拯救你 那些被污染的细胞
    污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。  (一)污染的类型  细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。  1、细菌污染  细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素,也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见。  培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡。  2、真菌污染  真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种,最常见的真菌有烟曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。  培养细胞受真菌污染后,可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点,有的散在生长,培养液一般不发生混浊 倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中,有的呈链状排列。  真菌污染后,细胞生长变慢,但最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。  丝状菌污染  3、支原体污染  支原体是介于细菌与病毒之间能独立生活的最小微生物,最小直径0.2&mu m,一般过滤除菌无法去除它,光镜下难以看清它的形态结构。开始不易发现,能在偏碱条件下生存,对青霉素有抗药性。多吸附于细胞表面或散在于细胞之间。  培养细胞受支原体污染后,部分敏感细胞可见细胞生长增殖变慢,部分细胞变圆,从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变化,或略有变化,若不及时处理,还会产生交叉污染。 阳性 阴性  4、病毒污染  组织细胞培养过程中,如果没有除去潜在的病毒,就会产生病毒污染。目前,从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。  尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。  5、非同种细胞污染  由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开,往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前,世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染,致使许多实验宣告无效。  非细胞培养物所造成的化学成分的污染也偶有发生,大多是由于细胞培养所需物品清洗消毒不彻底而带入一些有毒化学物质所致。  (二)污染的鉴别  1、细菌、真菌污染的检测  (1)肉眼观察  细菌、真菌污染常在传代、换液、加样等开放性操作之后发生,而且增生迅速,若有污染,在48小时内可明显观察到,例如培养液变混浊,或略加振荡有很多漂浮物漂起。  (2)接种观察  采用普通肉汤接种或用未加双抗药物的培养液接种,也可发现是否有污染。  (3)镜下观察  在倒置显微镜的高倍镜下可见培养液中有大量圆球状颗粒漂浮,即为细菌污染。  若细胞之间有丝状、管状、树枝状或卵形的物质常为真菌污染。  2、支原体污染的检测  (1)相差显微镜观察  直接取少许培养液滴在载物片上,再盖上盖片观察,支原体在镜下呈暗色微小颗粒,多位于细胞与细胞之间,有时可见类似于布朗运动的表现。应注意与细胞破碎溢出的内容物如线粒体等相区别。  (2)荧光染色法观察  用荧光染料Hoechst33258,此染料能与DNA特异地结合,可使支原体内的DNA着色,荧光显微镜下支原体呈绿色小点,散在于细胞周围或附于细胞表面。  (3)电镜检测  若条件许可,可用扫描电镜或透射电镜观察。一般在细胞培养48~72小时,细胞接近汇合前,用胰酶消化细胞制成细胞悬液后进行固定、包埋、切片后才能进行观察。  支原体扫描电镜图片  (4)培养检测  将细胞悬液5mL加入45mL支原体肉汤培养基,培养14天后观察肉汤培养有无雾状沉淀,然后取0.5ml加入已冷却到50℃的培养基中,再用琼脂培养基做分离培养,37℃培养3天观察有无&ldquo 荷包蛋&rdquo 菌落出现。  3 、病毒的检测  1) 应用电镜技术快速诊断动物病毒病  冠状病毒电镜图  2) 逆转录_聚合酶链反应RT_PCR检测病毒  (三)污染的清除  培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之 在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。  若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。  一、细菌和真菌的清除  1、使用抗生素  抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。预防用药比污染后再用药效果好。预防用药一般用双抗生素,污染后清除用药需采用大于常用量5~10倍的冲洗法,于加药后作用24~48小时,再换常规培养液。此法在污染早期有效。  二、支原体的清除  1、用MRA处理  用MRA(Mycoplasma Removal Agent)处理细胞,每4天换一次液,连续处理15天以确保细胞纯洁健康,效果好.  2、用清洗纯化法清除支原体污染的方法  细胞营养驯化&rarr 优质细胞群的筛选&rarr 细胞清洗&rarr 反复离心洗涤  其原理是利用离心力、细胞、微生物质量和悬液的浮力差达到清除支原体的目的。由于支原体个体小且除发酵支原体外多为细胞外寄生,所以通过反复洗涤细胞和低速离心换液使其中潜在的支原体数量降低至极限。  如结合敏感抗生素的抑杀作用,可达到更好的效果。  3、药物辅助加温处理  先用药物处理后,再将污染的组织培养物放在41℃培养18小时,可杀死支原体,但对细胞有不良影响。  4、使用支原体特异性血清  用5%的兔支原体免疫血清可去除支原体污染,因特异抗体可抑制支原体生长,故经抗血清处理后11天即转为阴性,并且5个月后仍为阴性。但此法比较麻烦,不如用抗生素方便、经济。  (四)、污染的预防  预防是防止细胞培养过程中发生污染的最好办法。只有预防工作做在前,才能将发生污染的可能性降到最小程度。  一般预防可从以下几方面着手:  1、添加抗生素  2、从物品、用品消毒灭菌着手  细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在无菌试验阴性后才能使用。  操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。  3、从操作者做起  (1)进无菌室前要用肥皂洗手,按规定穿隔离衣。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。  (2)操作者动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话,若打喷嚏或咳嗽应转向背面。  (3)操作时要常更换吸管,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕用消毒水浸泡的纱布擦台面。  4、防止细胞交叉污染  在进行多种细胞培养操作时,所用器具要严格区分。  在进行换液或传代操作时,注射器和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口,以免把细胞带到培养液中污染其他细胞。  细胞一旦购置或从别处引入,均应及早留种冻存,一旦发生污染可重新复苏培养。  5、无菌室的彻底消毒  1) 0.1%新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室   2)甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气休对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。
  • 武大医学病毒研究所严银芳团队研制出干细胞抗癌新药
    摘要干细胞治疗癌症可能是最有效的办法,国内外已开始有干细胞治疗肿瘤进入临床应用。但由于肿瘤发生的基因突变机制相当复杂,就目前的技术水平还很难以在基因结构水平上彻底治疗肿瘤。肿瘤属表观遗传学疾病☆。针对癌基因治疗工程应该是以表观遗传学为基础理论手段来彻底根治。要通过表观遗传学手段将癌基因复制持久能转变为其他动能或转移至另一分子,这才是根治癌症最有效途径之一。基因工程量子技术手段为我们制备出安全适用的干细胞抗癌药物增添了新的途径。广谱抗癌新药一抑癌间充质干细胞就是这样一种崭新的全能技术。 间充质干细胞低免疫原性,全能性,是发展成广谱抗肿瘤药物的重要支撑间充质干细胞具有独特 低免疫原性和全能性,在大量的同种异体动物 临床移植实验中都表现出和角膜移植类似的免疫豁免特性。无论采用静脉注射、皮下注射、复合骨诱导或其它方式移植, 间充质干细胞的耐受原效应都不受影响。间充质干细胞属于多能干细胞。具有多向分化潜能、可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞,连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能,间充质干细胞的这种全能性,是发展成广谱抗肿瘤药物的重要支撑。同时干细胞中未分化细胞miRNAs是一类含量丰富的非蛋白编码小分子 RNA, miRNAs主要是与靶 mRNA的 3′UTR区域结合 ,抑制 mRNA的翻译或直接使 mRNA降解 ,能调节多种生物功能。一些 miRNAs,如 miR2 172 92,可能作为致癌基因 而另一些 miRNAs,如 miR2 15,可作为抑癌基因 ,它们在肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用。(在干细胞中有致癌基因,又有抑癌基因怎样发挥抑癌基因作用,又怎样消除致癌基因致癌性,全面统一调控它们抗癌生物活性,这才是抑癌间充质干细胞的独特功能。临床应用干细胞之所以不成功矛盾的地方有赖于此)。抑癌间充质干细胞根治癌症原理抑癌间充质干细胞就是利用基因工程技术敲除间充质干细胞中未分化细胞miRNAs,如 miR2 172 92等致癌基因磷酸化物质。保留利用miRNAs,如 miR2 15等抑癌基因,具有独特低免疫原性和全能性的间充质干细胞。抑癌间充质干细胞是一种广谱抗肿瘤新药。抑癌间充质干细胞抗肿瘤药物原理是利用细胞基因平衡原理一利用抑癌间充质干细胞小分子RNA, miRNAs去平衡沉默癌基因的一种基因工程技术。我们是利用高分子生物滤过装置,在滤过装置中配置高效的活性生物分子药物,对流过癌细胞透析仪的间充质干细胞中的癌基因生长因子直接起到逆转作用,逆转后的间充质干细胞,直接生成抑癌间充质干细胞(抑癌基因}重新输入癌基因原发灶(平衡沉默修复癌基因),彻底性的杀灭原发灶中的癌细胞及重新编辑扶正缺陷免疫细胞的抗癌功能。有句成语叫解铃还须系铃人。比喻谁惹得麻烦就还得需要谁去解决。癌是细胞核DNA裂变。DNA复制持久性增长还得依靠DNA疗法,RNA疗法,蛋白质疗法来解除转移癌的复制持久能。研究癌基因弛豫现象是解除癌症的根本保证。如何解除癌DNA激发态,返回细胞稳定基态不能再通过复制衰变过程,而是要通过分子间转移或将DNA复制能转变为动能或转移至另一分子,这才是根治癌症最有效途径之一。此方法有很多。我们可以从手术切下肿瘤组织、肿瘤术后引流液中、癌性胸腹水获取DNA,RNA来能制取抗癌药物。但都是来自于患者,获取受患者组织局限性不能广泛应用。我们也可以从过继性免疫疗法中获取来解除转移肿瘤复制能。例如肿瘤浸润淋巴细胞TIL、TCR-T以及CAR-T三种过继性免疫疗法中获取免疫球蛋白肽键能,来快速解除DNA核能。但免疫球蛋白分子能比DNA核能小要千万倍。虽然这些方法有很多,但都属制备性技术。不是一种独特的抗癌药物。抑癌间充质干细胞的出现,它意味着抑癌间充质干细胞正在快速成长为一种广谱抗肿瘤药物。抑癌间充质干细胞制备技术抑癌间充质干细胞制备技术及工作原理不同于分子遗传学基因工程技术敲除方法,这种量子生物学技术为我们制备临床安全应用抑间充质干细胞抗癌药物增添了一个新的途径。干细胞开发与化学小分子、生物大分子在内的结构和成分明确药物有着很大的不同,干细胞是活细胞,具有异质性,其大小、形态具有一定的差异,在功能、行为、状态方面也不同。同种间充质干细胞在不同微环境中可以发挥不同作用并有潜在致恶性肿瘤风险.挑战了传统药物开发的一些基本理念和规律。然而抑癌间充质干细胞则不同,它是通过滤过装置中配置高效的活性生物分子药物处理后,消除了干细胞基因中所有的生长因子,只保留了间充质干细胞DNA,RNA分子结构基因和成分.因此是明确并相对稳定的细胞DNA,RNA分子体系。抑癌间充质干细胞全部属抑癌基因结构,质量可控这才是抗癌药物的基础和前提。抑癌间充质干细胞制备方法及工作程序不同于普通透析与过滤。透析(HD)仅仅清除小分子有毒物质排出体外;滤过透析(HDF)是过滤增强对中分子毒素的清除作用。癌细胞透析技术优于单纯透析与过滤。癌细胞透析是在组织液透析的基础上,利用胞质效技术,交换DNA蛋白质分子高低激发态物质来平衡时空的量子技术及药物。抑癌间充质干细胞制备技术由三项专利技术组成:生物时间机器专利技术,癌细胞透析仪专利技术,生物减速剂抗癌技术,可用于生产抑癌间充质干细胞抗肿瘤药物,或者直接应用临床对癌症患者进行癌细胞透析治疗,治疗实体癌细胞及重新编辑扶正缺陷免疫细胞的抗癌功能。治疗设备及活性生物分子药物都是国家在册药典药物,可以直接应用于临床,并且能立杆见影。根治肿瘤疗效100%.不需投资,可以直接临床应用及推广产品。抑癌干细胞抗癌成果初见成效我们从手术切下的肿瘤组织、肿瘤术后引流液、癌性胸腹水中获取DNA,RNA制取抑癌干细胞miRNAs等药物。输入癌细胞原发灶,能修复沉默癌基因,彻底杀灭原发灶中的癌细胞及重新编辑扶正缺陷免疫细胞的抗癌功能。抑癌干细胞miRNAs抗癌实验成果展示 (2013年武大医学院病毒所中心实验室)抑癌间充质干细胞给癌症治疗带来了新希望。如果在肿瘤治疗,干细胞应用上有意向合作的老师和企业家请联系我们。让我们一起为治服肿瘤,安全成功应用干细胞而共同努力。武大医学部病毒学研究所严银芳武汉市武昌东湖路115号联系电话15927431505最近几年尤其是癌症基因组测序项目的实施,使得人们开始重新审视这一理论。人们发现基因被激活或失活,并不一定要通过DNA序列改变,表观遗传调控失常也可和基因突变一样造成致癌后果。
  • 新冠病毒不断进化 安捷伦实时细胞分析技术助力病毒致病机制研究
    p style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="text-indent: 2em "新型冠状病毒疫情的蔓延已经给国人的生活带来了严重的影响。从已经获得的数据资料来看,这种病毒的传播能力相比SARS更强,危害范围更广。众多仪器厂商自发行动,为抗击疫情献出自己的力量。当前,仪器厂商推出仪器或试剂盒产品大多是关于疑似病例确诊的核酸检测。而新型冠状病毒以及类似病原体的不断升级进化,临床和科研迫切需要先进、全面的技术平台用于病毒致病机制研究、诊断治疗、药物研发和疫苗研制。/spanbr//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "仪器信息网:针对此次新型冠状病毒(2019-nCoV)感染肺炎疫情,贵单位推出了什么样的检测仪器、试剂和解决方案?有何特点?/span/strong/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong安捷伦/strong:新型冠状病毒以及类似病原体的不断升级进化,临床和科研迫切需要先进、全面的技术平台用于病毒致病机制研究、诊断治疗、药物研发和疫苗研制。Agilent推出的流式细胞仪和xCELLigence RTCA实时监测系统,在保证研究人员安全的同时,不耽误研究进程,从而协助攻关专家,助力病毒研究。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "xCELLigence RTCA 实时细胞分析技术是一种独特的活细胞检测技术,该技术可实现无标记和持续性的跟踪记录病毒感染细胞过程中CPE(细胞病变效应)的进展,为多种病毒学检测提供异常简易的实验流程,包括但不限于:病毒滴度测定、疫苗研发、中和抗体的检测与定量、抗病毒药物的开发等,可实时电子生物传感检测和多达四个独立的活细胞成像参数,包括1个明场和3个荧光通道。span style="text-indent: 2em "该技术可满足研究人员尽可能少地接触病毒,并可以做到无需研究人员值守的进行病毒研究任务。目前该系统已针对此次新型冠状病毒(2019-nCoV)展开各方面研究支持。/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "Agilent多色流式细胞仪,最高可达4激光25色,最高上样速度可达100,000 events/s,具备千余种临床和科研试剂,配套自动多功能数据分析软件NovoExpress,能够同时检测多种免疫细胞的表型、状态和细胞因子以及病毒的生物学特征和病理机制,可检测多种标本如血液、血清、脑脊液、细胞培养液和肺泡灌洗液等,对标本中的细胞类型、细胞器、蛋白质、核酸等成分进行定性定量的检测。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 199px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/21c14eb1-d0c1-4ee6-a760-3ba1237d913c.jpg" title="Agilent流式细胞仪体积法绝对计数无需绝对计数微球,节省检测成本.png" alt="Agilent流式细胞仪体积法绝对计数无需绝对计数微球,节省检测成本.png" width="600" height="199" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: center "Agilent流式细胞仪体积法绝对计数无需绝对计数微球,节省检测成本/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "新型冠状病毒肺炎诊疗方案和指南中提到免疫检查和监测对于易感人群的筛查以及隔离观察、新冠肺炎患者病情监测、判断细胞因子和炎症反应的产生,预警预测细胞因子风暴的重要性。流式细胞术在临床上可用于新冠肺炎患者的免疫细胞和免疫状态的评估,为筛查诊断、用药治疗和预后评估提供精确指导。应用Agilent流式细胞仪进行无成本淋巴细胞亚群的绝对计数,辅助临床客观、准确地评估细胞和体液免疫功能和免疫状态。临床医生通过免疫检测结果判断患者是否需要隔离,调整激素药物剂量以防止过量激素造成的免疫损伤和副作用,并动态监测治疗过程中新冠肺炎患者的免疫评估患者的治疗效果和评估预后。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "应用Agilent流式细胞仪配套试剂盒软件对新冠肺炎血清细胞因子进行定量检查,细胞因子风暴是导致新冠肺炎患者死亡的重要原因,动态监测细胞因子对细胞因子风暴的预警预测和及时采取相应药物或生物制剂治疗如细胞因子拮抗剂、激素和免疫抑制剂起指导作用。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "Agilent流式细胞仪检测新冠病毒肺炎患者中性粒细胞CD64感染指数可辅助临床诊断和鉴别诊断患者是否合并细菌感染,中性粒细胞CD64感染指数是诊断细菌感染的一项敏感度高、特异性强的新指标,与细菌感染的严重程度、预后及患者的死亡密切相关,监测CD64感染指数为评估病情、抗菌疗效和预后提供参考。Agilent流式细胞仪配合配套试剂检测新冠肺炎患者的中性粒细胞淋巴细胞亚群、细胞因子和CD64感染指数,可快速、精确、自动地出报告,节省检测成本和时间,为临床监测病情、用药指导、疗效和预后评估提供参考,为脓毒症、细胞因子风暴提供预警预测、免疫治疗指导和个性化治疗方案,同时为研发抗病毒药物和设计疫苗提供理论支持和开发新靶点并为药物和疫苗筛选、药效评估、安全性评估和免疫评价等提供高效、准确、客观、可靠的技术平台。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 500px height: 266px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/4c6f331b-070b-45a5-aa93-d29c70811635.jpg" title="Agilent流式细胞仪.png" alt="Agilent流式细胞仪.png" width="500" height="266" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: center "Agilent流式细胞仪/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网:目前,贵单位开展了哪些具体工作?给疫情防控带来了哪些具体帮助?/strong/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong安捷伦/strong:安捷伦从未停止奋斗在对抗疫情、挽救生命、助力科研第一线的步伐,2020年1月27日,大年初三,安捷伦宣布捐赠价值300万元急需的生物仪器设备到临床和科研一线。1月26日(大年初二),多名安捷伦杭州员工自愿放弃与家人团聚的时间,火速赶到公司完成捐赠货物NovoCyte流式细胞仪和实时无标记细胞分析仪的装箱发货,1月27日(大年初三),安捷伦捐赠价值300万元急需的临床与科研设备已经全部运出,并在第一时间完成仪器安装和调试,满足奋斗一线的医护和科研人员的临床样本检测、病毒学研究和抗病毒药物研究的迫切需求。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "同时,安捷伦有幸向中科院武汉病毒所和中国家疾病预防控制中心病毒所捐赠公司的xCELLigence RTCA系统,协助两家国家重点病毒科研单位用于病毒CPE,抗病毒药物和疫苗的研究,集中力量,快速突破,攻克技术难关,遏制病毒蔓延。xCELLigence RTCA实时监测技术可满足研究人员尽可能少地接触病毒,并可以做到无需研究人员值守的进行病毒研究任务。这在保证研究人员安全的同时,不耽误研究进程,从而协助攻关专家,助力病毒研究。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "值得一提的是,为了支持广大相关用户工作的正常运转,安捷伦工程师已提前到岗,以确保用户在特殊时期的仪器服务需求,最大限度降低用户因延期复工造成的损失。span style="text-indent: 2em " /span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网:针对疫情防控,后续还将有哪些工作计划?/strong/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong安捷伦/strong:冠状病毒及类似病原体的不断出现和变异对全球人类健康安全和经济发展造成了严重威胁,作为生命科学、诊断和应用化学市场领域的全球领导者,通过丰富的产品线,安捷伦有义务也有能力,从多方面为战胜疾病、保障人类健康做出贡献。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "接下来,安捷伦将持续支持病毒一线研究工作,利用领先的细胞技术在病毒致病机制研究、诊断治疗、药物研发和疫苗研制工作方面提供强有力的仪器、试剂和技术支持。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "安捷伦也将为此次疫情提供质量控制方面提供的多方面的解决方案。无论是针对疫苗的开发,抑或是在核酸与细胞层面对致病机理的研究,都离不开对蛋白与核酸样本的质量控制。安捷伦自动化电泳产品线以及UV-Vis光谱产品等可快速对DNA、RNA,蛋白样本进行分析。安捷伦液相和毛细管电泳可用于疫苗的质控分析,进行纯度及杂质检测,针对新冠肺炎的研究针分夺秒,可大大节省获取结果的时间,同时保障结果的准确性与重现性。另外,安捷伦顶空气相色谱法测定一次性医疗器械产品中各化学物质残留量,如医用口罩,中的环氧乙烷和2_氯乙醇的残留量,为一次性医疗器械生产过程的质量控制保驾护航。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "此外,针对疫情期间的环境隐患,污染物应急监测,和固废危废检测及其处理相关排放污染物检测等方面等,安捷伦有相应的丰富检测方案,积极配合相关机构进行高效的监测和分析。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "今后,安捷伦将推出更多的临床检测试剂和科研检测技术,并结合安捷伦的多个平台、仪器、软件和专业技能,为临床检测、科学研究、药物和疫苗开发等提出更优更全面的解决方案。赢取此次战役之后,安捷伦期待更多参与并支持国家的公共卫生能力建设,应对公共安全挑战。/p
  • 中大发现M1天然病毒 癌细胞有望精确杀灭
    在杀死癌细胞的同时,也杀死了正常细胞。”这个困惑着全世界医生和癌症病人的难题,终于可望破解。笔者13日从中山大学获悉,中山大学中山医学院教授颜光美课题组于7日在国际期刊《美国科学院院报》发表了天然甲病毒M1具有选择性抗肿瘤作用的最新研究,该研究表明,一种叫做M1的天然病毒能特异性杀死癌细胞而不伤害正常细胞,这种新型溶瘤病毒有望成为新一代抗癌利器全球癌症发病率呈现快速增长态势,现有的治疗手段远远未能满足临床需求。颜光美课题组历经多年研究,从海南岛分离得到一种M1的天然病毒。颜光美团队使用细胞培养方法发现,M1病毒能选择性地感染并杀死包括肝癌、结直肠癌、膀胱癌、黑色素瘤在内的多种癌细胞,而对正常细胞无毒副作用。整体动物模型证明,M1病毒“像长了眼睛一样准确找到肿瘤组织并将其杀灭”,正常细胞则不受影响。XY-EL-Ch1509c鸡间隙连接蛋白26(CX26)ELISA试剂盒 Chicken CX26 (Connexin 26) ELISA Kit XY-EL-Ch1510c鸡金属硫蛋白2 (MT2)ELISA试剂盒Chicken MT2 (Metallothionein 2) ELISA Kit XY-EL-Ch1511c鸡神经激肽A(NKA)ELISA试剂盒Chicken NKA (Neurokinin A) ELISA KitXY-EL-Ch1512c鸡细胞粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)ELISA试剂盒 Chicken CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA KitXY-EL-Ch1513c鸡磷酸二酯酶4D(PDE4D)ELISA试剂盒Chicken PDE4D (Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA KitXY-EL-Ch1514c鸡5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒 Chicken 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA KitXY-EL-Ch1515c鸡γ1肌动蛋白(ACTG1)ELISA试剂盒Chicken ACTg1 (Actin Gamma 1) ELISA KitXY-EL-Ch1516c鸡细胞分裂周期蛋白23(CDC23)ELISA试剂盒Chicken CDC23 (Cell Division Cycle Protein 23) ELISA KitXY-EL-Ch1517c鸡谷胱甘肽S转移酶κ1(GSTκ1)ELISA试剂盒Chicken GSTκ1 (Glutathione S Transferase Kappa 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1518c鸡血管紧张素II受体1(ANG II R1)ELISA试剂盒 Chicken ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1520c鸡染色质区解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)ELISA试剂盒Chicken CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit XY-EL-Ch1521c鸡脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 Chicken LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA KitXY-EL-Ch1523c鸡唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素8(SIGLEC8)ELISA试剂盒Chicken SIGLEC8 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 8) ELISA KitXY-EL-Ch1524c鸡肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 Chicken HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit XY-EL-Ch1525c鸡脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒Chicken LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA KitXY-EL-Ch1526c鸡胸腺五肽(TP5)ELISA试剂盒 Chicken TP5 (Thymopentin) ELISA KitXY-EL-Ch1527c鸡可溶性CD14分子(sCD14)ELISA试剂盒Chicken sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA KitXY-EL-Ch1528c鸡胰岛素(INS)ELISA试剂盒Chicken INS (Insulin) ELISA KitXY-EL-Ch1530c鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒Chicken T4 (Thyroxine) ELISA KitXY-EL-Ch1532c鸡促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒Chicken EPO (Erythropoietin) ELISA Kit XY-EL-Ch1533c鸡甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒 Chicken MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 ) ELISA KitXY-EL-Ch1535c鸡胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)ELISA试剂盒 Chicken IGF2BP3 (Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit XY-EL-Ch1536c鸡T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒Chicken LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA KitXY-EL-Ch1538c鸡激酶锚定蛋白1(AKAP1)ELISA试剂盒 Chicken AKAP1 (A Kinase Anchor Protein 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1539c鸡肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA试剂盒Chicken TSGF (Tumor Specific Growth Facter/Tumor Supplied Group of Factor) ELISA KitXY-EL-Ch1540c鸡胃动蛋白2(GKN2)ELISA试剂盒Chicken GKN2 (Gastrokine 2) ELISA Kit XY-EL-Ch1542c鸡丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)ELISA试剂盒Chicken PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA KitXY-EL-Ch1543c鸡抗丙氨酰tRNA合成酶抗体(Anti-AlaRS/Anti-PL12)ELISA试剂盒 Chicken Anti-AlaRS (Anti-Alanyl-tRNA Synthetase/Anti-PL12-Antibody) ELISA KitXY-EL-Ch1544c鸡脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 Chicken DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit XY-EL-Ch1545c鸡胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒 Chicken FSA (Fetal Sulfoslycoprotein Antigen) ELISA KitXY-EL-Ch1546c鸡酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 Chicken TH (Tyrosine Hydroxylase) ELISA KitXY-EL-Ch1547c鸡α-胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒 Chicken SPTAN1 (Alpha-Fodrin) ELISA Kit 除细胞水平及动物实验之外,课题组还使用临床标本离体活组织培养模型进一步证实了上述新型溶瘤病毒的有效性和特异性。据介绍,更为重要的是,研究工作还证明了M1病毒作用的分子遗传学机制,这个发现为精准的临床用药和实施个体化疗法提供了可靠的科学依据,也极大地增加未来临床试验取得成功的机会。据专家介绍,新型天然溶瘤病毒M1将会安全而有效地治疗癌症,有望成为攻克人类癌症的新一代利器
  • 流式细胞术再显身手!北京协和发布新冠病毒感染者推荐的实验室检查项目!
    点击进入流式细胞仪优选专场——————————————————————————————协和《新冠肺炎诊疗参考方案(2022年12月版)》12月26日,北京协和医院“协和呼吸”发布北京协和医院呼吸与危重症医学科新冠肺炎诊疗参考方案(2022年12月版)。新冠病毒感染的诊断:新冠病毒感染:流行病学史+临床症状+核酸/抗原。新冠病毒肺炎:新冠病毒感染+肺部符合新冠肺炎的新发影像学异常。新冠病毒感染者推荐的实验室检查:必要:生命体征、心电图、血气分析(注意记录吸氧条件)、血常规、凝血、D二聚体、肝功、肾全、LDH、CRP、ESR推荐:铁蛋白、CK、cTnI、NT-proBNP/BNP、TB淋巴细胞亚群、IL-6。可选:IL-8、IL-10、球蛋白、补体;抗MDA5抗体;抗磷脂抗体谱;胸CT(没有72小时之内影像资料且病情危重的患者)重症及危重症的预警:出现严重肺部表现的患者常在症状出现后第2周内发展为危重症,需要警惕。出现以下情况需要考虑病情加重可能:低氧血症加重或吸氧需求增加;呼吸困难症状加重;炎症指标(CRP、铁蛋白、血沉)或乳酸显著升高;心肌酶、肝酶和肌酐水平升高;淋巴细胞计数进行性下降;肺部影像学迅速进展。住院新冠病毒感染患者的管理(参见表2和图2)。表2 住院新冠病毒感染患者的治疗推荐图2. 住院新冠病毒感染患者治疗流程图何时考虑抗细菌治疗?首次就诊的新冠感染患者很少合并细菌感染,新冠本身也可引起长时间发热、脓涕或脓痰,如果患者没有合并白细胞增多、局灶性细菌感染影像表现、PCT升高等,抗菌素不是必须。临床医师应警惕院内感染风险,及时行细菌、真菌等病原学检查。是否进行抗凝治疗?所有新冠住院患者均应检测血小板计数、血色素、PT、aPTT、纤维蛋白原和D-二聚体。除非存在禁忌,否则所有新冠住院患者应接受血栓预防。首选低分子肝素或普通肝素。无VTE证据的患者在出院后无需常规接受血栓预防。华西《新型冠状病毒肺炎诊治手册(试行第一版)》12月25日,四川大学华西医院呼吸与危重症医学科发布《新型冠状病毒肺炎诊治手册(试行第一版)》辅助检查: • 血气、血常规、生化、DIC常规、心肌标志物、BNP、PCT、IL-6、CRP • 病原体检查:甲乙流、呼吸道病原病 毒核酸、痰涂片培养 • 影像学检查:胸部CT 、心电图血常规、⽣化、凝血、心肌标志物、BNP每3-5天⼀次肺部影像学5-7天⼀次临床分型评估:• 非重型:不满足重型或危重型的任何条件• 重型 符合下列任何一条: 1.出现气促,RR≥30 次/分;2.静息状态下,吸空气时指氧饱和度≤93%;3. PaO2/FiO2 ≤300mmHg 4.临床症状进行性加重,肺部影像学显示 24~48 小时 内病灶明显进展50%者• 危重型 符合下列任何一条: 符合以下情况之一者: 1.出现呼吸衰竭,且需要机械通气;2.出现休克;3.合并其他器官功能衰竭需ICU监护治疗。重型/危重型早期预警指标• 低氧血症或呼吸窘迫进行性加重;• 组织氧合指标恶化或乳酸进行性升高;• 外周血淋巴细胞计数进行性降低(600)或外周血炎症标记物如IL-6、CRP、铁蛋白等 进行性上升;• D-二聚体等凝血功能相关指标明显升高;• 胸部影像学显示肺部病变明显进展
  • 你了解不怕水,无制样要求的红外成像吗?无需任何标记鉴别生物样品,病毒、单细胞、活细胞观测统统不在话下!
    近年来,红外光谱和显微成像技术有了突飞猛进的发展,尤其是在生命科学领域,得益于红外光谱技术对于分子结构的敏感性,其能够在无任何标记的情况下实现对生物样品成分的鉴定和分布解析,这对于不便于荧光标记的一些生物样品鉴别十分有利。然而目前大多数的红外光谱空间分辨率受限于红外光的衍射限,只有10-20 μm,且依赖于红外光波波长。另外多数红外检测设备对于生物样品制样过程也有着严格要求,如样品切片厚度,细胞和组织尺寸,含水量,需要荧光染色等,这对于生命科学研究非常不利。 针对上述问题,美国photothermal spectroscopy corp公司经多年潜心攻关,研发出非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统—mirage,该设备凭借其有的光学光热红外(o-ptir, optical photothermal infrared)技术克服了上述问题,将红外光谱的空间分辨率提升至亚微米(~500 nm);无需制备薄片,直接测试较厚样品,大地简化了制样过程、提高测试效率;同时可实现无接触式地快速简易测量,有效避免了传统atr模式下的散射像差和交叉污染。且该设备在反射模式下所得谱图与透射模式下ftir完全一致,还可以选配透射模式,十分适用于液体样品和一些特殊混合样品,大的扩展了光热红外在生命科学领域的应用范围(如图1所示)。这项先进技术让mirage有别于传统的红外测试设备,能够对生命科学领域的常用样本,诸如细胞爬片,病理组织切片,单细胞细菌等有良好的兼容性,并让活细胞观测成为可能。除此之外,mirage还可与拉曼光谱进行联用,实现同时同地相同分辨率的ir和raman测试,且无荧光风险,能够帮助研究者更快速全面的确定所分析生物样品的化学组成信息。图1. o-ptir光学光热红外显微镜,工作原理及钙化乳腺组织的o-ptir红外成像图 光学光热红外o-ptir在生命科学领域应用的显著优势:1.亚微米的空间分辨率;2.可直接获取液体中活细胞的红外成像;3.灵敏度高,可直接观测单细胞 (如细菌、哺乳动物细胞等);4.无米氏散射干扰,即使在细胞边缘也不受影响;5.高的光谱分辨率;6.无需直接接触即可测量软组织的红外光谱;7.可实现红外和拉曼同步测量;8.可实现超过10 μm厚的样品测试,直接置于载玻片上观察分析;9.可配置化的红外光源;典型案例分析:1.感染疟原虫的红细胞表征 疟原虫属寄生虫引起的疟疾是威胁生命的主要疾病之一,而疟原虫引发的感染周期十分复杂,因此在细胞和分子水平观察疟原虫的变化对于研究疟原虫的致病有着重要意义。agnieszka m. banas等人通过使用o-ptir对疟原虫感染的红细胞在亚微米尺度的分子特征变化进行了表征,结果显示正常红细胞的蛋白呈现环状分布,而感染后的红细胞蛋白质则呈现无规则分布。通过对比传统ftir与基于o-ptir技术能够发现,o-ptir能够提供更为详细的图像分辨率并且能够测量红细胞不同位置的光谱信息。而传统ftir受制于米氏散射限制,效果较差。图2. 对比ftir与o-ptir对红细胞成像的结果:(a)红细胞的白光图;(b)图a中红色方块放大的区域;(c,e)ftir的蛋白/脂质空间分布的红外成像;(d,f)o-ptir的蛋白/脂质空间分布的红外成像;(g)红细胞的ftir红外光谱;(h)红细胞的o-ptir红外光谱 (g,i)疟原虫感染红细胞和正常红细胞的pca(pc1&pc2,pc1&pc3)得分;(h,j)疟原虫感染红细胞和正常红细胞的pca(pc1&pc2,pc1&pc3)得分 参考文献:b. [malaria] “comparing infrared spectroscopic methods for the characterization of plasmodium falciparum-infected human erythrocytes” (nature communication chemistry, https://doi.org/10.1038/s42004-021-00567-2). advantages: 1, 3, 4, 5, 6 2.单个病毒的红外成像 受制于红外限分辨率的限制,单个病毒的红外光谱成像一直以来都是十分困难的,对于只有100 nm左右的病毒进行红外光谱成像显得十分无力。yi zhang等人使用o-ptir技术成功实现对单个痘病毒进行了检测,并成功观测到了病毒的外形,并对病毒表面的蛋白的光谱进行了表征。图3.单个痘病毒的光谱和成像表征。(a)痘病毒的干涉散射图像 (b)痘病毒1550cm-1波束下的mip图像 (c)痘病毒1650cm-1波束下的mip图像 (d)随机选取病毒上4个点的光谱 参考文献:“vibrational spectroscopic detection of a single virus by mid-infrared photothermal microscopy” (analytical chemistry, https://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.0c05333). advantages: 1, 3, 4, 5, 6 3. 光学光热红外o-ptir与raman光谱协同分析固定或活的单细胞 英国曼彻斯特大学的peter gardner教授近期发表了他们关于活(和固定)细胞振动光谱分析的新研究结果。作者使用光学光热红外o-ptir与raman光谱,并借助于两个激发源(qcl和opo激光器),对细胞进行了宽光谱范围的覆盖,从而使所有与生物学相关的分子振动都能被检测到,且保持一致的亚微米的空间分辨率。此外,红外光谱采集与拉曼光谱有效的结合起来,在相同的激发位置,形成振动互补,得到一套完整的振动光谱信息。如下图所示,该红外和拉曼的组合方式可以用来分析液体环境中固定或活细胞的亚细胞结构,其中的蛋白质二次结构及富脂体均可以在亚微米尺度上被有效地识别出来。 图4. o-ptir观测固定未染色mia paca-2细胞成像。(a)固定的未染色的mia paca-2细胞的光学图像;(b)红色方块区域的放大图像;(c)opo波束段的o-ptir红外光谱;(d)qcl波束段o-ptir的红外光谱;(e)黑色区域的拉曼和红外光谱 参考文献d. [mammalian cancer cell] “analysis of fixed and live single cells using optical photothermal infrared with concomitant raman spectroscopy” (analytical chemistry, https://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.0c04846). advantages: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 74. o-ptir与s-xrf联用探究阿尔兹海默症阿尔兹海默症是老年痴呆症常见的病因之一,而淀粉样β蛋白沉淀是引发ad的重要病因之一,因此对于淀粉样β蛋白分布的研究就显得十分重要。nadja gustavsson等人通过o-ptir成功观测到了神经中的淀粉样β蛋白分布,并且结合s-xrf分析发现铁簇与淀粉样β-折叠结构和氧化的脂质存在共定位关系。这项研究充分预示了o-ptir/s-xrf联合技术可在ad疾病的研究中发挥重要作用。图5.单个神经元的o-ptir与x光荧光成像。(a)单个神经元的光学(左)与o-ptir图像(中和右)(b)神经元上铜、铁的分布(c)铁与蛋白叠合图(d)铁与脂质的叠合图参考文献[neuron] “correlative optical photothermal infrared and x-ray fluorescence for chemical imaging of trace elements and relevant molecular structures directly in neurons” (“light: science & applications” https://doi.org/10.1038/s41377-021-00590-x) advantages: 1, 3, 4, 5, 6 用户单位: 用户评价:
  • 收到细胞还未开封,疑似污染,应当如何处理
    收到细胞还未开封,疑似污染,应当如何处理?当您收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。如询问后确定无明显污染,请按随货细胞说明书正常操作处理即可。温馨提醒确认细胞无污染,观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态,把静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态,方便后续售后服务。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
  • 死细胞染料超低价现货大促销
    Propidium iodide (PI)和7-aminoactinomycin D (7-AAD)是最常用的死细胞指示剂,可用于荧光显微镜、激光共聚焦、流式细胞仪检测等实验方法。为答谢广大客户对联科的支持和厚爱,联科生物特推出原装进口(Life Technologies)的死细胞染料优惠大酬宾,超低价现货供应PI和7-AAD 死细胞染料。PI通过嵌入碱基与DNA结合,对序列几乎没有偏好性,每4-5个碱基对可结合一个染料。PI也能与RNA结合,通过核酸酶处理可区分RNA和DNA染色。一旦PI与核酸结合,其荧光可增强20-30倍,最大激发光为535nm,最大发射光为617nm。PI为膜不通透性,无法透过活细胞膜,可用于鉴定死细胞或复染及细胞周期检测等。图1 人Jurkat T细胞经Alexa Fluor 488 annexin V和PI染色。人Jurkat T细胞经1 μM camptothecin处理,早期的凋亡细胞磷脂酰丝氨酸(PS)外翻,与Alexa Fluor 488 annexin V(绿色)结合,晚期凋亡细胞和坏死细胞可被PI染色(红色)。7-AAD可与DNA结合,该复合物由488 nm激光激发,最大发射光为647 nm。7-AAD可被活细胞排斥,但也可用于固定破膜的细胞。7-AAD可用于细胞周期检测、死细胞鉴定等实验。7-AAD与DNA的GC区选择性地结合,在多线染色体和染色质中产生不同的带型,用于染色体带型研究。图2 人Jurkat T细胞经10 μM camptothecin处理4h(右图)或未处理(左图),用流式细胞仪进行分析。Camptothecin处理的细胞具有更高比例的凋亡细胞(A)。L=活细胞;D=死细胞。名称 货号 规格 目录价(¥) 促销价(¥) Propidium Iodide - FluoroPure Grade P21493 100 mg 2210 1000 7-Aminoactinomycin D (7-AAD) A1310 1 mg 1916 800 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014070008.html
  • 警方查获上万斤毒花椒 部分已制成火锅底料
    震惊:   送检底料查出“有毒”  3月25日,九龙坡区质监局从重庆火锅研究所食品生产基地送检的某品牌火锅底料、麻辣鱼底料中,检验出均含有害物质“罗丹明B”。  “罗丹明B”,俗称“大红粉”,呈红色粉末状,部分不良商贩将其作为苏丹红替代品,属于非食品原料,会导致人体皮下组织生肉瘤,具有致癌和致突变性。2008年,我国明确规定禁止将其用作食品添加剂。  火锅底料和麻辣鱼底料涉毒,问题出在哪里?随即,同批次底料使用的原材料被送往市计量质量检测研究院。经检测,确定为花椒染毒,劣质花椒被人为染毒后混入了正品花椒中。  仓库内存放着大量的毒花椒  万幸:  染毒底料未流入市场  4月16日,九龙坡警方立即介入调查,局领导亲自挂帅成立专案组。  经查,这批次的花椒原材料,系重庆火锅研究所食品生产基地于今年1月中旬从盘溪农贸市场干副区经营户柏志刚、周佳慧夫妇(均系化名)处购入。当时购买花椒共计880公斤,其中860公斤已用作生产,共制出火锅底料729件和麻辣鱼底料1件。  所幸,由于该批次底料处于送检环节,并未上市销售,警方对这730件涉毒底料全部予以封存。  怀疑:  商贩私藏染毒花椒  与此同时,专案民警迅即控制了柏志刚、周佳慧夫妇,追查毒花椒进货来源和出货去向。出人意料的是,夫妇俩经营的仓库内,再无毒花椒库存。  莫非毒花椒已售罄?销售量到底有多大?接受调查时,柏志刚夫妇称,他们的货源来自成都一家大型花椒市场的一位长期合作的批发商,而且花椒发货时已装袋,他们对花椒掺毒一事并不知情。  民警随即奔赴成都调查,反复查证核对该批发商与柏志刚夫妇的打款记录、资金账本、进出货记录单等。警方发现,柏志刚今年1-3月先后两次从成都购入花椒,第一次进货880公斤,各项记录清晰完整 第二次进货4920公斤,却没有存货出货记录。显然,第二批4920公斤的花椒被柏志刚夫妇“私藏” 了。  此外,民警暗中蹲守发现,成都当地系大批量装袋整包发货,难以部分掺假染毒。民警推断,柏志刚夫妇很可能在说谎。  行动:  查获毒花椒刑拘商贩  随即,民警对柏志刚夫妇加大审讯力度。  前日,对方对“知毒、购毒、售毒”的犯罪事实供认不讳,并带领民警查获了藏于另一货运仓库内的4920公斤“染毒花椒”。  柏志刚交代,为牟取暴利,他以16元/公斤的低价,从别处购入200公斤已掺染“罗丹明B”的劣质花椒,雇人分两次(头次为50公斤、第二次为 150公斤)混入了从成都购进的正品花椒中。其中,第一批次的880公斤“混合染毒花椒”,以52元/公斤的市场价,卖给重庆火锅研究所食品生产基地。第二批次的4920公斤“混合染毒花椒”,还没来得及出手。  目前,这4920公斤花椒中,部分已检测出含“罗丹明B”,被九龙坡警方暂扣。专家介绍,虽然只是少部分花椒掺毒,但由于混合装袋“毒素发酵”,导致所有花椒都易染毒,因此都属于“涉毒花椒”。  目前,柏志刚、周佳慧夫妇因涉嫌销售有毒、有害食品罪,已被刑拘。  染色花椒叫做“颜椒”  常混入正品花椒卖  据业内人士介绍,花椒涂染“罗丹明B”,已成为不少不法商贩牟利的潜规则,对方还对“染毒花椒”取有行话暗语“颜椒”(意为“涂了颜色的花椒”)。  据悉,市面上的正品花椒售价约52元/公斤,而“颜椒”只要16元/公斤。“颜椒”的原料多是未成熟的小红花椒,因个头小,品质差,属于被淘汰的花椒。这种花椒红色鲜艳度不够,与正品花椒有明显差异。不法分子用“罗丹明B”对其染色后,再混入正品中销售,牟取暴利。
  • 广州生物院等在染色质高级结构调控细胞命运机制研究中获进展 成果发表于Cell Reports
    真核生物基因组DNA缠绕在组蛋白八聚体上形成染色质,并在染色质架构蛋白的作用下逐级折叠形成远距离的染色质相互作用(或染色质环)、拓扑相关结构域和染色质区室等染色质高级结构。远距离染色质互作可以调控基因表达,在细胞命运决定过程中具有关键作用。CCCTC结合因子(简称CTCF)最早被认为是绝缘子结合蛋白,随后发现CTCF在转录激活/抑制、基因印记、X染色体失活等方面均发挥重要的调控作用。近年来,CTCF被认为是染色质架构蛋白,与Cohesin复合物等在调控远距离染色质相互作用和维持染色质“成环”等方面起到重要作用。然而,CTCF是否在同一生物学过程中发挥其多重功能至今尚不清楚。4月5日,中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员姚红杰课题组联合美国加州大学圣地亚哥分校教授付向东课题组,在Cell Reports上,发表了题为CTCF functions as an insulator for somatic genes and a chromatin remodeler for pluripotency genes during reprogramming的研究论文。该研究运用体细胞重编程到诱导多能干细胞为模型,结合多维组学技术,并联合生物信息分析,揭示了CTCF介导的染色质绝缘和染色质结构变化协同调控干细胞多能性获得的新机制。研究发现,CTCF在体细胞重编程过程中表达逐渐升高,并发挥促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的作用。在这一过程中,CTCF具有同时抑制体细胞相关基因表达和促进多能性基因网络激活的双重功能。机制分析发现,CTCF通过发挥染色质绝缘功能抑制体细胞相关基因的表达,同时,CTCF具有维持多能性基因染色质开放的作用,CTCF还结合在部分多能性基因启动子区,促进这些多能性基因增强子(Enhancer)和启动子(Promoter)之间的相互作用(EP互作)。此外,该研究还揭示了CTCF与染色质重塑因子SMARCA5形成蛋白复合物,有助于维持多能性基因的染色质开放和多能性转录因子的结合,促进多能性基因网络的激活。研究表明,在体细胞重编程为诱导多能干细胞过程中,CTCF发挥了介导染色质绝缘和染色质重塑的协同调控作用。该研究进一步完善了CTCF的生物学功能,并为后续研究细胞命运决定的调控机理提供了新思路。研究工作得到国家杰出青年科学基金、国家重点研发计划、国家自然科学基金联合基金项目和中科院战略性先导科技专项等的支持。  论文链接 本研究的模式图
  • BINDER培养箱个性化解决方案 成功繁殖人体皮肤细胞
    在生物医学研究和应用中,再生技术属于最具创新性、最有希望的未来领域。再生医学的治疗方法,在于重建、替换有功能障碍的细胞、组织和器官,例如借助经过培育的组织及刺激身体本身的再生和修复过程。洛桑大学医院细胞组织部专门从事实验室环境中的人体皮肤培植工作。培养细胞组织时,首先要从患者身上提取皮肤,放入实验室繁殖,然后再植入患者体内。对于遭受大面积烧伤的患者而言,这项新的治疗模式具有开创性的意义,因为传统的移植过程会形成严重的疤痕,给患者留下终身的印记。  然而迄今为止,人体皮肤的生产成本很高,还必须满足最为严苛的安全要求。皮肤培植过程必须在安全等级最高的 A 级无尘室内进行。只有经过隔离室,工作人员才能进入培养箱所在的无尘室,还必须事先经过长达 30 分钟甚至更长时间的清洁程序。在无尘室内的实际停留时间最长为四个小时,否则可能使试样受到污染。这项程序所花费的不仅是时间,还有高额的成本。  由于人造皮肤的需求量极高,在瑞士一家大学附属医院的提议下,于2009年启动了一个大型项目,旨在大幅提升人体皮肤培植过程的效率。这个想法的基础,在于把无尘室环境限制在隔离装置(手套箱)内,并将培养箱的孵化室作为独立单元集成于隔离装置中。这带来了极大的优势,因为隔离装置的环境只需达到 4 级无尘室标准即可,工作人员不必再经过繁杂的清洁过程。实验室工作人员可以在无尘室中停留八个小时,远高于以往的四个小时,不仅使得这一过程更为高效,而且成本更低。于是就建立了一处人体皮肤培植中心,其中配置有五个隔离装置和五个培养箱。  这一规模宏大建设项目由希森美康公司设计和实施。该公司负责项目的组织工作,协调和掌控所有十家项目合作方的各种任务。BINDER的任务是针对该项目调整 CB 160 培养箱。整个设计阶段的工作极为复杂:采用带有热消毒传感器的 BIN-DER CB 160 气体培养箱作为核心部件。培养箱的不锈钢腔也作为无尘室的组成部分集成里面。实验员将试样从 D级无尘室实验室送入隔离区域(隔离室)。净化隔离室内的空气:抽排空气颗粒,使该区域从 D级升至 A 级。然后,放置试样的滑座将再穿过一个隔离室,进入模块中固定安装有培养箱的 A级无尘室中。通过无尘室外的操作面板,可对该设备进行控制。借助手套接入孔,实验员可将试样放入培养箱内。  任务设置 ● 集成培养箱的隔离装置 ● 安全而高效地培育细胞组织 ● 节省时间和费用 ● 可靠的消毒措施 ● 均匀的温度分布 ● 简便的操作  BINDER 解决方案 ● 根据要求调整 CB 160 培养箱 ● 热消毒传感器 ● 气密型培养箱 ● 带操纵杆的推拉门 ● 可拉出的带不锈钢钩子的托盘 ● 特别开发的托架 ● 一目了然的操作面板 ● APT.Line 空气护罩系统 ● 180° C 热风消毒 带集成培养箱的隔离装置模块  废料容器也集成在无尘室内。由于可能造成污染,当培养箱打开时,绝不能打开废料容器。所以培养箱上配有传感器,可识别废料容器是否打开。此外,集成培养箱的无尘室必须完全密封。“将在无尘室内进行超压测试,检测其密封性, ”BINDER有限责任公司的 Bernd Hofmann 表示。“压力下降的情况必须出现在规定的时间范围内。迄今为止,整个欧洲都采用这项安全方案。”经过调整的 CB 160 培养箱  传感器具有冗余功能。每台培养箱配有两个传感器,用于检测温度、二氧化碳和氧气,在紧急情况下会发出警报。即便如此,还是对 CB 160进行了重大调整。为避免污染,培养箱完全密闭。为节约无尘室内的空间,将以往的平开门改为了推拉门,还专门为此开发了操纵杆。操纵杆可以转动,以避免妨碍实验员使用手套进行工作。  培养箱还配有三个可以拉出的托盘。滚珠轴承不适合无尘室,因而采用了不锈钢钩子固定托盘的特殊设计。从而保证试样不滑落,并为托盘提供稳固支撑。由于存在露水凝结的危险,也撤除了培养箱的玻璃门。培养箱位于专门开发的台架上,安装于隔离装置中,高度可调。为简化操作,全套电气装备被布置于设备下方。
  • 聚焦细胞房7大“雷区”,让污染源无处躲藏!
    体外培养的细胞受到严重污染时,即使想尽办法也难以挽回。如何打赢这场细胞保卫战?最好的方法是从一开始就杜绝污染发生的可能。 本期公开课上,小 E 就手把手教大家完成抵御细胞污染的“战前”部署,将 7 大污染频发的实验“雷区”各个击破,让污染源们无处躲藏!欢迎来到小 E 的细胞实验室!7 大“雷区”你都辨认清楚了吗? 雷区一 细胞实验室入口 除了细胞实验室专门配置的通风系统,入口处就是“无菌净土”与外面“花花世界”的唯一联通之处,这也是我们狙击污染的第一要塞。 身为“无菌净土”,细胞实验室的选址一般都颇有讲究,必须设置在一个僻静的角落,以免人来人往造成干扰。奢华型细胞房配有特制的通风和空调系统。对于标准细胞房,黏性门垫则必不可少。 无论谁都能进入细胞房吗?NO!只有熟记无菌操作要点的人员才能拿到入场券。进入细胞房之前,我们还要向所有与实验无关的随身物品一一告别。经过一番折腾后,大门终于为你打开,赶紧换上细胞房专用的白大褂和拖鞋,然后洗手,消毒,戴上手套,再消毒。 记住,一步都不能少。 雷区二 水浴锅 适宜的温度和生长环境使水浴锅成为了细胞房中各种污染源的最佳“温床”。 水浴锅一直都是细胞实验室污染源聚集的重灾区。因此,对其进行定期消毒是必须的。除此之外,我们还可以向水浴中加入适量的杀菌剂来抑制各种细菌、真菌的滋长。 水浴时,我们必须确保容器的瓶盖不与水接触。因为污染源可能会在此时通过瓶盖的缝隙顺势留在瓶口,等下一次倾倒液体的时候,整个实验就遭了殃。水浴结束后,要记得将盖子盖上。 可能的话,可以用金属浴替代水浴。金属浴的相关设备更易清洁,使用也更加省心。▲ 用恒温孵育器代替水浴锅,确保温控精确性和均一性的同时也减少了污染的概率 雷区三 显微镜 通过显微镜定期检查细胞的汇合程度以及外观和形态是“细胞饲养员”的必修课。但频繁地与不同细胞系接触,使显微镜也成了污染的高发地。 当我们在显微镜下观察细胞或其它培养物时,切忌敞口放置培养皿或培养瓶。这样不仅容易造成溶液飞溅,还有可能在观察时污染物镜,并进一步造成交叉污染。 在显微镜下进行细胞检测,一定要快和稳。在从CO? 培养箱中取出细胞前就提前做好准备工作,可以为镜下作业节省更多时间。 雷区四 CO2 培养箱 CO2 培养箱不仅是细胞的摇篮,同时也是污染的蜜罐,防污染工作不容忽视。 CO2 培养箱是抵御细胞污染的一大重镇,连开关门的操作都须慎之又慎。培养箱的开关门除了会立即影响到箱体温度、湿度和对 pH 的调节外,也让箱外空气的或环境中的污染物有机可趁。因此,培养箱的开门时间能短则短,开门次数越少越好。选择带有玻璃内分门的培养箱可以降低污染的风险,同时也能避免环境条件在开关门后有骤然改变。 不同于生物安全柜,在日常使用过程中,培养箱不能防止空气传播的污染物流入。有些培养箱采用内腔 HEPA 滤器去除箱体内的微生物,但如果滤器没有定期更换,它就会摇身一变成为污染的传染源。除了过滤器,培养箱的承液盘也容易滋生细菌,建议每周使用无菌用水(如: 无菌蒸馏水)更换,并做好定期消毒工作。此外,承液盘本身也必须清洁消毒。承液盘如果呈绿色,须用过氧化氢来清洁和冲洗。 注意! CO2培养箱是不能直接放在地板上的。带脚轮的底座除提供灵活的移动便利性,也保持箱体离开地面,当实验人员开关门时,使地面上的灰尘不易进入箱体内。 许多培养箱箱体内有许多隐蔽的角落、焊缝、风道和风扇,这些地方也是细菌喜欢藏匿的地方,必须格外注意。最好选择配置有高温灭菌的功能的培养箱,可对箱体进行自动消毒。一体成型无焊接缝的铜质箱体的培养箱也可以有效降低污染风险,抑制细菌的生长。▲ 内腔一体式和圆角设计使易培养箱清洁起来更为方便,防止污染形成 实验人员的不规范操作也会使污染风险大增! 首先,在操作培养箱时务必佩戴无菌手套。有可能的话,我们应全部使用培养瓶,以防止抓取培养皿时盖子意外散落,造成溶液飞溅。特别要注意的是,在开放的培养箱前不能交谈,以防止唾液飞溅,造成污染。 每隔 6–8 周,我们应将培养箱完全清空,进行清洗:先用肥皂水和清水清洁箱体和部件,再用 70% 酒精或无腐蚀性的消毒剂来擦拭消毒整个腔体,包括隔板、隔板架等部件。 雷区五 生物安全柜 生物安全柜是我们进行大部分实验操作的场地,因此,所有无菌操作的“金科玉律”在此都会变得更为重要。 通常来说,生物安全柜中的物品排列不应太过拥挤,所有与当前实验无关的东西应清出桌面。试剂和仪器尽可能往里放,留出广阔天地,大干一场,但是,千万不能堵住排风口。在摆放或者实验过程中,出现液体飞溅的情况,应当马上用消毒剂擦拭,以防后患。 在开始实验前,我们必须对超净台进行全面消毒,简单的喷雾可解决不了什么问题,正确的做法是对整个机柜表面进行擦拭。还有一件事必不可少,那就是事先打开安全柜通风系统,流通空气,直到原有的内部浊气都被排出。 消毒完毕后,我们就要给实验用品“分家”了。一般来说,我们可以将超净台分为洁净区、工作区和废弃区三大板块,以免手忙脚乱发生交叉污染。可别一时疏忽,把“脏物”放到洁净区哦!▲ 如果你是右撇子,不妨试着按上图“排兵布阵” 做好一系列准备后,开启实战模式。作战区域不宜选择敞口容器。无菌容器的使用应遵循即用即关的原则。具体操作时,管好你的手,不能伸到容器内部,行动要轻缓,以免动作过大阻碍空气流通。使用明火同样会导致气流紊乱,我们应该尽量避免。 怎么放置容器的瓶盖也很有讲究。如果超净台的桌面干净,可以将瓶盖扣在桌面上;反之,则须倒置瓶盖,当然,这时候就需要避免在瓶盖上方进行操作了。选择能够侧置的瓶盖,就不必再为瓶盖放置问题纠结了。▲ 能够侧置的瓶盖,解救你的选择困难症 在这里,小 E 还是要提醒大家一条最基本的规范:移液时应避免吸头接触试管或培养瓶内部。此外,使用紫外灯时,要注意监测运行时间并及时检修。 掌握了以上安全柜守则, 你的细胞也将更安全。 雷区六 离心机 和显微镜一样,离心机也是交叉污染的重灾区。平日里我们应保持离心机盖关闭,拒污染于千里之外。 离心机内部的小缝隙也是藏污纳垢之处,定期清洁转子和腔室至关重要。 雷区七 窗户 其实,很多细胞房根本没有窗户,即使配有窗户,也基本上就是摆设。 如果你的细胞房恰好有一扇窗,那么你必须注意了,因为无论什么时段,窗户都不允许打开。一旦打开,许多细菌会乘机夹杂在空气中溜入细胞房,后果不堪设想。 阳光的刺激同样会对室内环境造成影响,有窗户的实验室必须紧闭窗门同时拉上窗帘,并做好请勿开启的警示标记。 还记得刚开始进入细胞房做实验的经历吗?每次都得兜兜转转来到实验大楼的一个僻静角落,经过好一番折腾才被师兄师姐允许继续往前,一举一动都小心翼翼地犹如朝圣?? 没错!记住这个感觉! 无菌操作在于细节,更在于态度,即使现在久经沙场的你已经对细胞培养驾轻就熟了,也别因为步骤繁琐就敷衍了事,掉以轻心。 俗话说得好,你今天在无菌操作上省下的时间,都会花在明天细胞污染重做实验上。
  • 阿拉木图机场安装毒品和爆炸物检测装置
    哈萨克斯坦第一大城市阿拉木图的海关监督局新闻处25日说,一套检测毒品和爆炸物的高精度装置当天在阿拉木图国际机场投入运行。  据悉,这种检测仪可识别40多种毒品和爆炸物。当乘客通过检测仪时,仪器产生的微风可将沉积在头发里或附着在衣服及身体上的可疑物质吹向专门的感应区,数秒钟内即可得出分析结果。  阿拉木图海关监督局技术人员指出,跟上一代产品相比,这套检测仪识别速度大大提高,每分钟可检查6人,不会造成机场拥堵。
  • NEPA21进行细胞悬浮/贴壁(原位)转染均获高效
    2012年1月,华粤行仪器有限公司(我司)与合作实验室(陕西东澳生物科技有限公司)联合对NEPA21高效转染系统进行测试,成功进行了Hela细胞悬浮转染及U87细胞悬浮和贴壁转染,均获得很好的效果,客户对NEPA21给予了较高的评价。 实验证明,在国内实验条件下,可重复获得NEPA GENE公司(日本)细胞数据库中提供的高转染效率及高细胞存活率结果。 实验亦证明,细胞在悬浮和贴壁状态下使用NEPA21进行转染,均可获得高转染效率。技术资料:1. 关于悬浮转染: 使用电转染仪进行细胞转染时,常用的转染方式是用电转杯转染,此时细胞处于悬浮转染下,细胞可与DNA溶液360度接触,转染效率最好。2. 关于贴壁转染 有些原代细胞是终末分化的,如原代神经元细胞、乳鼠心肌细胞等。这些细胞一旦从活体组织中分离出来贴壁培养,便不可消化传代,也就无法实现悬浮状态的转染。针对这种情况,NEPA GENE开发了适用于普通细胞培养板的贴壁转染电极。 由于贴壁状态下,细胞不能与DNA溶液360度接触,因此通常认为,细胞在悬浮状态下转染,容易获得更好的转染效率。但实际上,NEPA的贴壁(原位)转染电极效果也很显著。
  • 美制成首个活细胞激光器
    据美国物理学家组织网6月13日(北京时间)报道,美国马萨诸塞州综合医院研究人员成功利用表达了绿色荧光蛋白(GFP)的肾脏细胞产生了一种纳秒级的激光脉冲,首次用单个活细胞作为增益介质产生了激光。相关论文将于近日发表在《自然光子学》杂志上。  产生激光通常要有3个要素,第一是光源,第二是受激产生激光的“增益介质”,第三是将所产生的光聚拢到一起的“光学共振腔”。哈佛医学院皮肤病学副教授、论文作者尹淑贤(韩国名)博士说,激光发明50年来,通常都是用合成材料如晶体、染料、纯净气体作为光学增益介质,光脉冲在两面镜子间来回反射,在这些介质中被放大。而我们选择了能表达绿色荧光蛋白(GFP)的肾脏细胞作为增益介质。  GFP蛋白最初是在水母中发现,可在不添加其他酶的情况下诱导发光。研究人员给一个直径约20微米宽、1英寸(2.5厘米)长的圆筒两边装上镜子作为光学共振腔,共振腔内装满GFP水溶液,再向其中放入肾脏细胞。结果发现,肾脏细胞不仅能产生激光脉冲,而且能像透镜一样将光回聚并诱导激光发射。  更重要的是,该激光设备中的细胞在发光过程中仍然存活,能持续产生数百次激光脉冲。尽管单个激光脉冲比较微弱,仅持续几纳秒,但却很明亮,很容易探测到。  论文主要作者、马萨诸塞州综合医院马尔特加特说,这一成果源于好奇心。由于此前激光均由各种机械装置生成,他和同事就想,“为什么自然界中没有生物能制造激光”,产生了用细胞组织试试看的念头,结果显示这是有可能实现的。  对于这项成果的运用前景,研究人员提出了几种可能。首先,由于不同的细胞结构所产生的激光在光学性质上有差异,可以通过分析最后得到的光,来研究细胞和机体组织 第二,目前医学上有一种光动力疗法,可把对光敏感的药物送到要医治的机体部位,然后用光照来激发药效,如果在这种疗法中能用上“细胞激光器”,也许可以增进疗效。  但要在机体组织内产生激光,还要解决一个问题,即如何在机体组织内形成一个光学共振腔,而不是像本次研究那样利用外部的两面小镜子。“下一步,我们希望能在细胞里植入一种类似于镜盒的结构作为光学共振腔。而我们的长期目标是找到一种方法,将无生命的光通讯和计算机拓展到生物技术领域,这在一些涉及电子与生物组织转换界面的项目上尤其重要。”马尔特加特补充说。
  • 新品首发-纬冉科技I500细胞计数仪
    上海纬冉科技推出创新仪器——纬冉科技I500细胞计数仪一、仪器创新点:●快速便捷:单个计数只需20秒,多个样本一次性计数,节约时间。●准确高效:设备通过严格的质量控制,保证每次使用的可靠性。用户友好型设计,操作简单一目了然,结果易读。●参数全面:细胞密度(总细胞、活细胞、死细胞)、细胞图像、细胞活率、细胞圆度、细胞聚团率、细胞平均直径。●可靠易操作:先进的计数算法,可以区分聚团细胞和各种类型的细胞,使得计数结果更加精确。CI500细胞计数仪是一款高效、准确、易操作、可靠的细胞计数工具。基于台盼蓝染色法,整合先进的图像分析技术,在节约时间的同时,准确地计算出细胞数量,配备数据和图像存储功能,帮助您更好地了解细胞状态的变化趋势。二、仪器适用领域:仪器适用于生物、医学、农业等多个领域,为您的研究和实验带来很大的帮助。纬冉科技了解可靠结果对您的研究的重要性,对产品实施严格的质量控制流程,确保仪器始终提供可靠和一致的结果三、仪器参数:主要指标参数计数时间20秒计数板载量多个样本一次性计数,节约时间数据输出细胞密度(总细胞,活细胞,死细胞)、细胞图像、细胞活率、细胞圆度、细胞聚团率、细胞平均直径四、仪器创新点:●快速便捷:单个计数只需20秒,多个样本一次性计数,节约时间。●准确高效:设备通过严格的质量控制,保证每次使用的可靠性。用户友好型设计,操作简单一目了然,结果易读。●参数全面:细胞密度(总细胞、活细胞、死细胞)、细胞图像、细胞活率、细胞圆度、细胞聚团率、细胞平均直径。●可靠易操作:先进的计数算法,可以区分聚团细胞和各种类型的细胞,使得计数结果更加精确。五、仪器使用流程:●加入混合台盼蓝的细胞悬液。●将计数板插入检测口。●旋转挡位旋钮,选择样本。●软件输出计数结果。▍仪器软件介绍:●纬冉CI500细胞计数仪为用户提供从细胞计数、分析、数据管理到输出的整套解决方案。软件界面简洁、操作简单、输出参数全面,结合全自动化的设计,实现了生物制药和科研领域中细胞计数和活率的快速、准确、标准化分析。●软件默认存储数据和图片,便于溯源统计,掌握细胞变化趋势。●支持查看导出数据与图像,进行数据分析和文献发表。如您对细胞计数仪的仪器感兴趣,可通过仪器信息网400-860-5168转6056联系我们!
  • “干细胞及转化研究”等14个重大专项2017年度项目申报指南公布
    科技部关于发布国家重点研发计划干细胞及转化研究等重点专项2017年度项目申报指南的通知国科发资〔2016〕304号  各省、自治区、直辖市及计划单列市科技厅(委、局),新疆生产建设兵团科技局,国务院各有关部门科技主管司局,各有关单位:  根据国务院印发的《关于深化中央财政科技计划(专项、基金等)管理改革的方案》(国发[2014]64号)的总体部署,按照国家重点研发计划组织管理的相关要求,现将“干细胞及转化研究”等14个重点专项2017年度项目申报指南予以公布。请根据指南要求组织项目申报工作。有关事项通知如下。  一、项目组织申报要求及评审流程  1. 申报单位根据指南支持方向的研究内容以项目形式组织申报,项目可下设任务(或课题)。项目应整体申报,须覆盖相应指南方向的全部考核指标。项目申报单位推荐1名科研人员作为项目负责人,每个任务(或课题)设1名负责人,项目负责人可担任其中1个任务(或课题)负责人。  2. 项目的组织实施应整合集成全国相关领域的优势创新团队,聚焦研发问题,强化基础研究、共性关键技术研发和典型应用示范各项任务间的统筹衔接,集中力量,联合攻关。  3. 国家重点研发计划项目申报评审采取填写预申报书、正式申报书两步进行,具体工作流程如下:  ——项目申报单位根据指南相关申报要求,通过国家科技管理信息系统填写并提交3000字左右的项目预申报书,详细说明申报项目的目标和指标,简要说明创新思路、技术路线和研究基础。项目申报单位与所有参与单位签署联合申报协议,并明确协议签署时间 项目申报单位和项目负责人签署诚信承诺书。从指南发布日到预申报书受理截止日不少于30天。  ——各推荐单位加强对所推荐的项目申报材料审核把关,按时将推荐项目通过国家科技管理信息系统统一报送。  ——专业机构在受理项目预申报后,组织形式审查,并开展首轮评审工作。首轮评审不需要项目负责人进行答辩。根据专家的评审结果,遴选出3-4倍于拟立项数量的申报项目,进入下一步答辩评审。对于未进入答辩评审的申报项目,及时将评审结果反馈项目申报单位和负责人。  ——申报单位在接到专业机构关于进入答辩评审的通知后,通过国家科技管理信息系统填写并提交项目正式申报书。正式申报书受理时间为30天。  ——专业机构对进入正式评审的项目申报书进行形式审查,并组织答辩评审。申报项目的负责人通过网络视频进行报告答辩。根据专家评议情况择优立项。对于支持1-2项的指南方向,如申报项目的评审结果前两位评价相近,且技术路线明显不同,可同时立项支持,并建立动态调整机制,结合过程管理开展中期评估,根据评估结果确定后续支持方式。  二、组织申报的推荐单位  1. 国务院有关部门科技主管司局   2. 各省、自治区、直辖市、计划单列市及新疆生产建设兵团科技主管部门   3. 原工业部门转制成立的行业协会   4. 纳入科技部试点范围并评估结果为A类的产业技术创新战略联盟,以及纳入科技部、财政部开展的科技服务业创新发展行业试点联盟。  各推荐单位应在本单位职能和业务范围内推荐,并对所推荐项目的真实性等负责。国务院有关部门推荐与其有业务指导关系的单位,行业协会和产业技术创新战略联盟、科技服务业创新发展行业试点联盟推荐其会员单位,省级科技主管部门推荐其行政区划内的单位。推荐单位名单在国家科技管理信息系统公共服务平台上公开发布。  三、申请资格要求  1. 牵头申报单位和参与单位应为中国大陆境内注册的科研院所、高等学校和企业等,具有独立法人资格,注册时间为2015年12月31日前,有较强的科技研发能力和条件,运行管理规范。政府机关不得作为申报单位进行申报。申报单位同一个项目只能通过单个推荐单位申报,不得多头申报和重复申报。  2. 项目(含任务或课题)负责人须具有高级职称或博士学位,1957年1月1日以后出生,每年用于项目的工作时间不得少于6个月。  “干细胞及转化研究”、“纳米科技”、“量子调控与量子信息”、“蛋白质机器与生命过程调控”4个重点专项中设立青年科学家项目,青年科学家项目不设课题,项目负责人及参与人员均应为1982年1月1日以后出生。青年科学家项目负责人须同时具有高级职称和博士学位。  3. 项目(含任务或课题)负责人原则上应为该项目(含任务或课题)主体研究思路的提出者和实际主持研究的科技人员。中央和地方各级政府的公务人员(包括行使科技计划管理职能的其他人员)不得申报项目(含任务或课题)。  4. 项目(含任务或课题)负责人限申报1个项目(含任务或课题) 国家重点基础研究发展计划(973计划,含重大科学研究计划)、国家高技术研究发展计划(863计划)、国家科技支撑计划、国家国际科技合作专项、国家重大科学仪器设备开发专项、公益性行业科研专项(以下简称“改革前计划”)以及国家科技重大专项、国家重点研发计划重点专项在研项目(含任务或课题)负责人不得牵头申报项目(含任务或课题)。国家重点研发计划重点专项的在研项目负责人(不含任务或课题负责人)也不得参与申报项目(含任务或课题)。  项目骨干的申报项目和改革前计划、国家科技重大专项、国家重点研发计划在研项目总数不得超过2个 改革前计划、国家科技重大专项、国家重点研发计划的在研项目(含任务或课题)负责人不得因申报国家重点研发计划重点专项项目(含任务或课题)而退出目前承担的项目(含任务或课题)。  计划任务书执行期(包括延期后的执行期)到2017年6月30日之前的在研项目(含任务或课题)不在限项范围内。  5. 特邀咨评委委员不能申报项目(含任务或课题) 参与重点专项实施方案或本年度项目指南编制的专家,不能申报该重点专项项目(含任务或课题)。  6. 受聘于内地单位的外籍科学家及港、澳、台地区科学家可作为重点专项的项目(含任务或课题)负责人,全职受聘人员须由内地聘用单位提供全职聘用的有效证明,非全职受聘人员须由内地聘用单位和境外单位同时提供聘用的有效证明,并随纸质项目预申报书一并报送。  7. 申报项目受理后,原则上不能更改申报单位和负责人。  8. 项目的具体申报要求,详见各重点专项的申报指南。  各申报单位在正式提交项目申报书前可利用国家科技管理信息系统公共服务平台查询相关科研人员承担改革前计划和国家科技重大专项、国家重点研发计划重点专项在研项目(含任务或课题)情况,避免重复申报。  四、具体申报方式  1. 网上填报。请各申报单位按要求通过国家科技管理信息系统公共服务平台进行网上填报。项目管理专业机构将以网上填报的申报书作为后续形式审查、项目评审的依据。预申报书格式在国家科技管理信息系统公共服务平台相关专栏下载。  项目申报单位网上填报预申报书的受理时间为:2016年10月17日8:00至11月14日17:00。申报项目通过首轮评审后,申报单位按要求填报正式申报书,并通过国家科技管理信息系统提交,具体时间和有关要求另行通知。  国家科技管理信息系统公共服务平台:http://service.most.gov.cn   技术咨询电话:010—88659000(中继线)   技术咨询邮箱:program@most.cn。  2. 组织推荐。请各推荐单位于2016年11月16日前(以寄出时间为准),将加盖推荐单位公章的推荐函(纸质,一式2份)、推荐项目清单(纸质,一式2份)寄送科技部信息中心。推荐项目清单须通过系统直接生成打印。  寄送地址:北京市海淀区木樨地茂林居18号写字楼,科技部信息中心协调处,邮编:100038。  联系电话:010—88654074。  3. 材料报送和业务咨询。请各申报单位于2016年11月16日前(以寄出时间为准),将加盖申报单位公章的预申报书(纸质,一式2份),寄送承担项目所属重点专项管理的专业机构。预申报书须通过系统直接生成打印。  各重点专项的咨询电话及寄送地址如下:  (1)“干细胞及转化研究”试点专项:010-88225198、010-88225068。  中国生物技术发展中心,寄送地址:北京市海淀区西四环中路16号院4号楼,邮编:100039。  (2)“纳米科技”重点专项:010-58881072   (3)“量子调控与量子信息”重点专项:010-58881070   (4)“大科学装置前沿研究”重点专项:010-58881079   (5)“蛋白质机器与生命过程调控”重点专项:010-58881071   (6)“全球变化及应对”重点专项:010-58881076。  科学技术部高技术研究发展中心,寄送地址:北京市三里河路一号9号楼,邮编:100044。  (7)“化学肥料和农药减施增效综合技术研发”试点专项:010-59199379   (8)“粮食丰产增效科技创新”重点专项:010-59199380   (9)“农业面源和重金属污染农田综合防治与修复技术研发”重点专项:010-59199367、59199368。  农业部科技发展中心,寄送地址:北京市朝阳区东三环南路96号农丰大厦,邮编:100122。  (10)“七大农作物育种”试点专项:010-68598497   (11)“现代食品加工及粮食收储运技术与装备”重点专项:010-68510207   (12)“畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发”重点专项:010-68598087   (13)“林业资源培育及高效利用技术创新”重点专项:010-68598076   (14)“智能农机装备”重点专项:010-68511832。  中国农村技术开发中心,寄送地址:北京市西城区三里河路54号,邮编:100045。  附件:  1.“干细胞及转化研究”试点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  2.“纳米科技”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  3.“量子调控与量子信息”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  4.“大科学装置前沿研究”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  5.“蛋白质机器与生命过程调控”重点专项2017年(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  6.“全球变化及应对”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  7.“化学肥料和农药减施增效综合技术研发”试点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  8.“粮食丰产增效科技创新”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  9.“农业面源和重金属污染农田综合防治与修复技术研发”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  10.“七大农作物育种”试点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  11.“现代食品加工及粮食收储运技术与装备”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  12.“畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  13.“林业资源培育及高效利用技术创新”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  14.“智能农机装备”重点专项2017年度项目申报指南(指南编制专家名单、形式审查条件要求).pdf  科 技 部  2016年10月9日签发  2016年10月10日发布
  • Cell Rep:细胞尺寸和周期状态或会影响HIV感染机体
    近日,一项刊登在国际杂志Cell Reports上的研究报告中,来自伊利诺伊大学的科学家们通过研究发现,细胞尺寸和细胞的周期状态或许在HIV中扮演着关键的决定性作用。如今抗逆转录病毒药物的开发使得HIV感染成为了一种可控的慢性疾病,然而如果未能及时诊断或治疗,HIV感染就会进化成为AIDS(获得性免疫缺陷综合征),2017年全球大约有100万人因感染HIV而死亡。挽救生命的药物并不能治疗HIV,因为当HIV感染机体后其会偷偷地靶向作用诱发机体抵御任何感染的免疫反应的细胞,尤其是HIV会入侵CD4 T细胞,并不断复制最终接管CD4宿主细胞的DNA。研究者Roy Dar教授说道,当感染CD4 T细胞后HIV会经历两种命运中的一种,其要么会整合成为复制状态,诱发成百上千个感染性病毒颗粒的产生;要么会进入一种休眠状态。这项研究中,研究人员重点分析了如何有效清除HIV潜在的病毒库,因为HIV病毒库会自发激活并且躲避药物疗法的攻击,如果HIV感染者没有严格遵守抗逆转录病毒药物体系的治疗,其机体中的病毒库就会激活从而引发感染者出现一系列疾病症状。截至目前为止,并没有一种有效的方法能够区分出机体中未感染的细胞和潜在感染的细胞,而诸如这种策略就能够支持当前科学家们治疗HIV感染的疗法。这项研究中,研究人员在实验室中调查了被HIV潜在感染的T细胞的重新激活的过程,他们构建出了一种携带绿色荧光蛋白(GFP)的特殊病毒结构,当细胞重新激活时GFP就会发生表达。研究者所开发的延时单细胞成像技术能够通过计算GFP的平均荧光强度来监测单个细胞从沉默状态到活跃状态的重新激活过程;一旦研究人员鉴别出重新激活的细胞后,他们就会对细胞的尺寸进行计算,并确定重新激活所需要的细胞平均参数,结果发现,在潜伏的细胞群体中,只有较大尺寸的细胞会恢复活性,而较小的细胞则会保持沉默。据研究者介绍,较大的宿主细胞尺寸或能提供一种天然的细胞机制来帮助增强病毒表达所需要的细胞裂解量,同时当病毒决策发生偏离时也能够帮助破坏病毒的潜伏状态。Dar说道,这项研究中我们提出了一种被动性的宿主细胞主导病毒制定决策的案例,当宿主细胞尺寸较小时病毒就不会发起攻击,只有当宿主细胞尺寸较大时病毒才会被重新激活。此外,研究者还发现,细胞从潜伏状态过渡到活性状态依赖于细胞的周期(即细胞中DNA复制的阶段),同时其还受到了药物疗法的调节;研究者表示,我们可以使用药物疗法来调节特定细胞周期状态内外的细胞数量,从而感染HIV的激活决策;本文研究结果有望帮助研究人员开发抑制HIV感染的新型策略和疗法,后期研究人员还希望通过更为深入的研究来阐明细胞尺寸和周期状态如何影响HIV的感染决策。
  • 太赫兹应用:无标记识别脑胶质瘤细胞
    近日,由上海交通大学朱卫仁教授与重庆西南医院神经外科冯华教授/陈图南副教授团队、爱德万测试(中国)管理有限公司三方合作在国际高水平期刊《Biosensors and Bioelectronics》上发表题为“Highly sensitive detection of malignant glioma cells using metamaterial-inspired THz biosensor based on electromagnetically induced transparency”的研究结果,首次展示了一种针对不同胶质瘤分子分型细胞进行无标记识别的太赫兹超材料检测方法,该研究也得到了天津大学姚建铨院士团队的指导和支持。胶质瘤是颅内最常见的、造成最多死残病例的中枢神经系统肿瘤,目前临床主张进行整合诊断,将胶质瘤分为多个特定的分子亚类,其中IDH是与肿瘤进展、治疗反应和预后密切相关的经典分子分型标记。快速早期无标记区分IDH1野生/突变两种胶质瘤对于术中和术后早期精准诊疗具有重要价值。研究团队提出了一种无标记的脑胶质瘤细胞“分子分型(IDH1野生/突变)”生物传感超材料,通过在生物传感器表面加载人原代胶质瘤细胞进行太赫兹波谱探测,其频率偏移和峰幅变化与不同类型细胞及其浓度呈现相关性;通过观察超材料传感器共振频率的变化,可以区分不同分子分型的胶质瘤细胞,这种识别是在没有引入抗体等生化标记方法的情况下,在多个不同细胞浓度下实现的。基于该项研究结果,太赫兹超材料生物传感器在识别胶质瘤细胞类型中显示出了巨大的潜力,基于肿瘤分子分型的太赫兹波谱识别策略也拓展了新的太赫兹波生物传感技术发展方向。太赫兹技术在生命科学领域有广阔的应用前景,第十届光谱网络会议(iCS2021)邀请了四位来自国内外高校的专家学者们,届时,专家将介绍太赫兹技术的更多应用,点击下方链接立即报名哦。5月25-28日 光谱网络会议相约十年(iCS2021)专家报告推荐之光谱在生命科学领域的应用1、《太赫兹生物医学与生物物理发展概况》(中国生物物理学会-太赫兹生物物理分会 何明霞副会长/秘书长)2、《纳米-生物界面作用的定量分析》(中国科学院高能物理研究所 王黎明研究员)3、《面向生物医学检测的LIBS/Raman联用装置与方法研发》(四川大学 林庆宇副教授)4、《新型冠状病毒核酸检测技术研究进展》(阿尔伯塔大学 庞博博士)立即报名(免费哦):https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/iCS2021/
  • 大咖面对面丨细胞代谢组学新法 助力新污染物筛查和风险评估
    大咖面对面丨细胞代谢组学新法 助力新污染物筛查和风险评估去年5月,国务院办公厅印发了《新污染物治理行动方案》,标志着我国新污染物治理步入“快车道”。新污染物通常具有生物毒性、环境持久性和生物累积性等特点,它们在环境中主要以痕量/超痕量形式存在。因此,如何选择高灵敏度和高选择性的检测技术,识别新污染物的毒性效应,评估潜在环境风险,从而更好地服务政府决策和企业生产成为一个重要课题。近日我们采访了华东理工大学资源与环境工程学院镇华君副教授,他分享了团队开展的新污染物环境风险筛查和评估的研究工作,并评述了科学仪器在其中发挥的作用。华东理工大学资源与环境工程学院 镇华君副教授新污染物监测的挑战从留学美国到加入华东理工大学资源与环境工程学院,镇华君持续致力于新污染物的生态效应和健康风险研究。他表示:美国的国家环境保护署是其主要化学品管理机构,负责审查在美国境内流通的化学品对健康、安全和环境的影响,并预防未知风险。我国是化学品生产和使用大国,工业生产活动是新污染物的一个重要来源。新污染物在环境中大多以痕量/超痕量水平存在,对于分析仪器的性能要求较高,通常需要高灵敏、高选择性的色谱-质谱联用仪甚至高分辨质谱仪。目前,大部分的新污染物仍缺乏常规监测,甚至缺少相应的监测方法标准;人们对工业生产过程产生新污染物的来源、排放途径以及在环境介质中的传播规律及毒性效应的研究都尚不充分,这为我国新污染物治理带来了诸多挑战。细胞代谢组学技术助力新污染物筛查和风险评估近期,镇华君在Environmental Science & Technology上发表论文,将基于细胞代谢组学的实验方法应用于环境水质安全评估。目前,大多数环境污染物的毒性数据仍有限,仅靠化学监测方法无法有效评估污染物复合暴露产生的环境风险;而传统环境监测采用的生物监测方法,主要关注致死率等传统毒理学指标或其他单一的生物学评价终点,缺乏面向环境复合污染水体的综合毒性评估技术。为此,课题组发展了联合细胞体外暴露实验和脂质组学分析的研究方法,来评估污染物复合暴露对斑马鱼肝细胞的影响,并应用于全美地表水的环境风险筛查和评估。联合斑马鱼肝细胞体外暴露实验和脂质组学技术评估地表水水质安全 Environmental Science & Technology 55 (2021)(点击查看大图)镇华君谈到该研究遇到的三个关键问题:“首先,如何采集到更丰富、更稳定的小分子代谢物的质谱信号?课题组通过优化样品的前处理过程、仪器条件和参数,解决了该问题。“其次,如何处理采集到的大量质谱数据?课题组开发了基于R语言的高分辨质谱代谢组数据处理程序包。通过该程序包,可有效去除背景以及仪器波动所产生的信号干扰,从而保留有效的质谱信号信息。“第三,如何从发生变化的小分子代谢物的质谱信号中,挖掘隐藏其后的生物学信息,进而揭示环境污染暴露特征。在分析脂质组学的相关数据时,课题组通过充分的文献调研和数据挖掘鉴定出一些和特定亚细胞器相关的脂类生物标志物。通过测定细胞中上述生物标志物的丰度变化,揭示了污染物复合暴露对细胞线粒体、溶酶体、内质网、过氧化物酶体等亚细胞器产生的不良影响。结缘赛默飞 助推新污染物筛查与风险评估研究谈到和赛默飞分析仪器的结缘,得从在美国环保署国家暴露研究实验室开展博士后研究工作时说起。那时候,镇华君所在实验室有两台赛默飞质谱,一台是早期型号的Orbitrap静电场轨道阱高分辨质谱仪,另外一台是TSQ三重四极杆气质联用仪。镇华君说道“当时,我的工作是使用这两台仪器分析样品,并负责仪器的日常维护。我对赛默飞产品最深刻的认识就是功能先进,尤其是Orbitrap质谱仪的分辨率在当时的行业处于领先地位。”赛默飞仪器给镇华君的另一个印象是稳定,俗话说就是“皮实耐用”。“有一个细节,当时我们实验室源源不断地接收到从美国各地运送来的一些环境样品以及生物样本。为了按时完成这些样品的分析,很多时候仪器需要长时间高负荷运行。”镇华君说道“在大多数情况下,两台赛默飞质谱仪都能较好地完成任务;在偶尔的一些时间段,当仪器需要检修或维护保养的时候,赛默飞工程师都能够第一时间赶到,对仪器进行功能检测和故障排查,确保能尽快恢复正常运行。”有了这两台仪器的关键助力,镇华君博士后期间的研究工作得以顺利开展。赛默飞Orbitrap Exploris 240 质谱仪回国之后,在学校和学院的支持下,镇华君所在的国家环境保护化工过程环境风险评价与控制重点实验室、上海市环境保护化学污染物环境标准与风险管理重点实验室添置了赛默飞Orbitrap Exploris 240 质谱仪,继续围绕新污染物的环境过程、效应及风险开展研究。“我衷心期待与赛默飞加强合作,深入开展新污染物的筛查和风险评估研究,并共建更多新方法、新应用。”参考文献:1、Untargeted Lipidomics for Determining Cellular and Subcellular Responses in Zebrafish (Danio rerio) Liver Cells Following Exposure to Complex Mixtures in U.S. Streams. Environmental Science & Technology, Volume 55, Issue 12, 15 June 2021, Pages 7757-8458. 2、Multi-omic responses of fish exposed to complex chemical mixtures in the Shenandoah River watershed. Science of The Total Environment, Volume 902, 1 December 2023, 165975如需合作转载本文,请文末留言。
  • 1500万!2023年广州市疾病预防控制体系实验室检验检测能力提升(三年行动计划仪器设备购置)项目
    一、项目基本情况项目编号:GZJK-2023HW-07项目名称:2023年广州市疾病预防控制体系实验室检验检测能力提升(三年行动计划仪器设备购置)项目采购方式:公开招标预算金额:15,000,000.00元采购需求:合同包1(正置荧光显微镜等仪器设备):合同包预算金额:2,204,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1显微镜正置荧光显微镜1(台)详见采购文件780,000.00-1-2其他分析仪器核酸提取仪1(台)详见采购文件150,000.00-1-3其他试验仪器及装置生物样品均质器1(台)详见采购文件80,000.00-1-4显微镜体视荧光显微镜1(台)详见采购文件550,000.00-1-5其他仪器仪表智能试剂安全柜1(台)详见采购文件250,000.00-1-6其他试验仪器及装置凝胶电泳及成像系统1(套)详见采购文件250,000.00-1-7其他分析仪器常规PCR仪1(台)详见采购文件128,000.00-1-8其他试验机掌上离心机2(台)详见采购文件16,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包2(荧光定量PCR等仪器设备):合同包预算金额:2,206,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)2-1其他计量仪器荧光定量PCR1(台)详见采购文件888,000.00-2-2其他仪器仪表内循环生物安全柜1(台)详见采购文件160,000.00-2-3其他分析仪器纯水仪1(台)详见采购文件120,000.00-2-4其他分析仪器流式细胞仪1(台)详见采购文件800,000.00-2-5其他试验机高速冷冻大容量离心机1(台)详见采购文件200,000.00-2-6其他试验仪器及装置八连排加液器2(台)详见采购文件18,000.00-2-7其他试验仪器及装置微量加液器(套)4(套)详见采购文件20,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包3(测汞仪、高效液相色谱仪):合同包预算金额:1,030,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)3-1其他计量仪器测汞仪1(台)详见采购文件380,000.00-3-2色谱仪高效液相色谱仪1(台)详见采购文件650,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包4(低速普通离心机等仪器设备):合同包预算金额:492,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)4-1其他试验机低速普通离心机2(台)详见采购文件30,000.00-4-2分析天平及专用天平万分之一天平1(台)详见采购文件22,000.00-4-3其他试验仪器及装置冷冻干燥仪1(台)详见采购文件48,000.00-4-4其他试验仪器及装置土壤研磨器与筛分器1(台)详见采购文件180,000.00-4-5其他试验仪器及装置土壤风干柜2(台)详见采购文件70,000.00-4-6其他试验机超纯水机1(台)详见采购文件100,000.00-4-7其他光学仪器可见分光光度计2(台)详见采购文件17,000.00-4-8其他光学仪器紫外可见分光光度计1(台)详见采购文件18,000.00-4-9其他试验仪器及装置氟离子测定仪1(台)详见采购文件7,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包5(超级微波):合同包预算金额:1,590,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)5-1其他仪器仪表超级微波1(台)详见采购文件1,590,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包6(气相色谱串联质谱联用仪、隧道式笼盒清洗机):合同包预算金额:2,321,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)6-1色谱仪气相色谱串联质谱联用仪1(台)详见采购文件1,721,000.00-6-2其他试验机隧道式笼盒清洗机1(台)详见采购文件600,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包7(自动式吸入染毒柜等仪器设备):合同包预算金额:801,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)7-1其他试验仪器及装置自动式吸入染毒柜1(台)详见采购文件600,000.00-7-2其他试验仪器及装置培养箱1(台)详见采购文件40,000.00-7-3其他试验机洗板机1(台)详见采购文件30,000.00-7-4其他试验仪器及装置静脉可视小鼠尾注固定器1(台)详见采购文件6,000.00-7-5其他试验机扫频超声波清洗机1(台)详见采购文件43,000.00-7-6其他试验机96孔板瞬时离心机1(台)详见采购文件5,000.00-7-7其他试验机小型掌上离心机2(台)详见采购文件4,000.00-7-8分析天平及专用天平千分之一天平1(台)详见采购文件25,000.00-7-9其他试验仪器及装置振荡器2(台)详见采购文件6,000.00-7-10其他试验仪器及装置多样品涡旋混合器1(台)详见采购文件32,000.00-7-11其他试验仪器及装置64位浓缩灌支架1(台)详见采购文件10,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包8(背负式蓄电池超低容量喷雾机等仪器设备):合同包预算金额:394,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)8-1其他试验机背负式蓄电池超低容量喷雾机5(台)详见采购文件125,000.00-8-2其他试验机手提式电动超低容量喷雾器(插电)4(台)详见采购文件20,000.00-8-3其他试验机手压式常量喷雾器20(台)详见采购文件14,000.00-8-4其他试验机全域地形车杀虫喷雾系统1(台)详见采购文件235,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包9(微电极拉制仪等仪器设备):合同包预算金额:1,662,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)9-1其他试验仪器及装置微电极拉制仪1(台)详见采购文件160,000.00-9-2其他试验仪器及装置磨针仪1(台)详见采购文件80,000.00-9-3显微镜显微操作仪1(台)详见采购文件290,000.00-9-4其他试验仪器及装置微量自动注射仪1(台)详见采购文件160,000.00-9-5显微镜通用显微镜适配器1(台)详见采购文件20,000.00-9-6其他试验仪器及装置常规PCR仪1(台)详见采购文件120,000.00-9-7其他光学仪器微量紫外可见分光光度计1(台)详见采购文件170,000.00-9-8其他试验机低温冷冻高速离心机1(台)详见采购文件250,000.00-9-9其他试验仪器及装置凝胶成像系统1(套)详见采购文件250,000.00-9-10其他试验机迷你型离心机1(台)详见采购文件5,000.00-9-11其他试验仪器及装置多功能电泳仪1(台)详见采购文件5,000.00-9-12其他分析仪器便携式比色计余氯检测仪2(台)详见采购文件12,000.00-9-13其他试验仪器及装置普通冰箱2(台)详见采购文件10,000.00-9-14其他试验仪器及装置超低温冰箱1(台)详见采购文件120,000.00-9-15其他光学仪器紫外线照度计2(台)详见采购文件10,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。合同包10(环境模拟舱):合同包预算金额:2,300,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)10-1其他试验仪器及装置环境模拟舱1(套)详见采购文件2,300,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订后60天内交货。二、获取招标文件时间: 2023年04月28日 至 2023年05月08日 ,每天上午 00:00:00 至 12:00:00 ,下午 12:00:00 至 18:00:00 (北京时间,法定节假日除外)地点:广东省政府采购网https://gdgpo.czt.gd.gov.cn/方式:在线获取售价: 免费获取三、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名 称:广州市疾病预防控制中心地 址:广东省广州市白云区启德路1号联系方式: 36052333转52042.采购代理机构信息名 称:广东省华粤采购科技有限公司地 址:广州市天河区体育西路191号中石化大厦B塔603-611房联系方式:020-62313760-8053.项目联系方式项目联系人:黄小姐电 话:020-62313760-805
  • NEPA21进行水牛细胞转染获得高效
    水牛是一种分布于热带和亚热带气候条件下的一种家畜,可为人类提供奶、役力和牛肉。全世界水牛总数约为15.8亿头,亚洲存养的水牛数占世界的97%。 由于其经济效益和应用价值,繁殖动物学家需要对牛、羊等大型动物进行研究。近年来,转基因经济动物,如转基因牛、乳腺发生器等研究非常热门。但牛不是一种常规实验室的模式生物,所以在细胞转染和基因改造时,可参考的经验不多。 文献表明,脂质体转染法对水牛细胞的转染效率不高,常规的电穿孔仪常带来较高的细胞死亡率、且转染率也不理想。一些新型的电转染仪,虽然能为许多难转染的细胞带来福音,但其转染试剂盒多针对人、鼠等动物开发,没有专用于牛的试剂盒。 NEPA21不需要转染试剂盒,利用优化的程序即可达到高的转染效率,为水牛甚至其它经济动物的转基因研究带来了便利。 2012年4月,华粤行仪器有限公司在广西大学展开水牛胎儿成纤维细胞的转染试用活动,获得了较高的转染效率和细胞存活率。实验者对NEPA21的转染效果给予了较高的评价。 GFP标准质粒转染水牛胎儿成纤维细胞效果图
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