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移液器是实验室的必备常规设备,是每一位科研工作者,特别是生物、药物、化学等行业科研工作者每天都使用的工具,它的耐用性和精确度是大部分使用者最关心的,为了帮助大家选择适合的移液器、正确使用移液器、延长移液器使用寿命、确保移液精度,莱贝此文从介绍移液器最基础的知识开始,将会对移液器做一系列介绍。俗话说简单的也是最重要的,此篇虽简短,对后面知识的理解具有“地基”的作用,希望大家耐心看完。 工作原理:移液器的工作原理非常简单——通过弹簧的伸缩力量使活塞上下活动,排出或吸取液体。 移液器的结构:一般包括控制按钮(不同厂家设计不同,通常也通过此按钮进行吸液体积调解)、吸头推卸按钮、体积显示窗、套筒、弹性吸嘴、吸头。移液模式:随着移液操作的广泛应用,可移取液体范围不断扩大,对精度要求越来越高,目前主要有2种移液器技术,以满足不同液体精确移液的需求: 1. 内置活塞式移液模式——常规液体顾名思义,活塞位于移液器套筒内,液体与活塞之间有一段空气隔离,活塞与液体不接触。这是实验室最常见的移液器,使用时需注意不要让样品污染活塞,否则会造成样品的交叉污染。优点很多,例如吸头一般通用等等;不足也不少,例如不适宜移取高粘稠度液体、挥发性较大的液体、易发生交叉污染、错误的使用习惯易造成移液器精度不准甚至移液器内部腐蚀等等。 http://www.labbok.com/wordpress/wp-content/uploads/2012/04/pipettor11.jpg内置活塞式移液模式2. 外置活塞式移液模式——粘稠度较大的液体顾名思义,活塞位于移液器套筒外,位于吸嘴内部,活塞与液体之间没有空气段,活塞为一次性的,对于粘稠度较大的液体,也能实现精确移液,由于无空气间隔,避免了样品于空气接触可能发生的气雾交叉污染,因此也非常适合是珍贵的试剂、生物样品的移取。 http://www.labbok.com/wordpress/wp-content/uploads/2012/04/pipettor2.jpg 外置活塞式移液模式
移液管、移液器都是大家平时配标准品和量取液体的常用实验器具。但是要问移液管与移液器(枪)哪个更精确?大家可能会各有意见,有人说,移液管准确,对移液器持怀疑态度。认为移液器成本更高。并且移液器用一段时间后,就需要校准,换句话说,如果移液器太久没校准,误差会很大;而也有人认为移液器更准确,能更好的避免人为误差,比如量2ml的液体,移液枪好操作,移液管不同人操作误差大。今天小编就搜集有关资料跟大家说道说道,到底我们该如何选择?移液管与移液器比较之大家怎么看?对于两者的比较,也有人说,两者都不是绝对的准确,要因人而异,移液管不准的因素大部分来自于操作人,移液枪的不准确性很可能来自移液器本身。单把移液管跟移液枪放那里比,是没有哪个准、哪个不准的讲法。(当然是指经检定符合精度要求的移液管),只不过移液枪的刻度在连续可调时往往要优于移液管。不可否认的是,移液枪除了与移液管一样存在操作误差外,还存在仪器内部存在的一个误差,而且据悉后者引起溶液配制不准导致后续结果不准的现象在实验室内会经常发生。而移液管只要操作正确、熟练,基本没什么误差,比如,移液管的下端部分误差较大,放液的时候有技巧,如果是5ml的,你只要取1ml。你可以取到5ml,然后放到4ml。对移液器的误解!因为对移液器了解较少,国内很多实验室人员固执地认为,移液器只能用于一般性的粗略的计量,此外,还因成本以及实验环境要求等综合因素,导致移液器没有被大范围、普遍性地介入实验活动中。也因为这些原因,导致国内很多有关移液器专业知识的介绍、推广以及对其应用的研究等等,在国际上都相对落后了一段较长的时间。现实便是,还有相当多的实验室或实验人员,对移液器持怀疑态度。配标液是否用移液枪?配制标液比如单标配混标,17种元素,用移液枪方便了,只要换枪头。那么是否大家都在配制标液时使用移液枪?小编跟很多实验室分析人员探讨过这个问题,但答案却出乎意料,多数人认为,如果配标准溶液一般用移液管,其它对准确度要求不高的用移液枪,如做重金属前处理加浓硝酸和双氧水用移液枪很方便,做灰分实验加硝酸时也很方便。很多实验室都会采用移液枪来配置标液,使用移液枪,大都会关注移液枪是否校准过,除此以外,你是否自己校准过呢?校准方法:用同一支移液枪吸取同样的溶液在天平上称量,计算重复性和准确度。刚学习使用移液枪的时候,觉得很神奇,认为肯定非常精确,后来配有机试剂的时候发现,非常难控制,稍不留神就挥发了。即使不挥发,用水校准的移液枪,用来取有机试剂肯定是不准的。移液枪要送到计量单位校准的,一般不支持没通过自校培训的人进行自校准。为确保万无一失,移液枪会每个月自己做一次验证,很有必要,通过移取一定体积的水,称其重量来确定其是否还准确。移液枪和移液管比较首先,从使用的舒适性来说,移液器完胜于移液管。现在的手持式移液器,其外观设计中,已越来越多地掺入了人体工程学原理,使得移液器使用起来更为方便,更显人性化。其次,从计量准确度来说,移液器的准确度,已经远远高于移液管。现在的微小容量移液器,已经能够计量到0.1微升级,完全能够代替移液管从事要求严格的实验活动。事实上,对于很多要求较高的实验活动,移液管的准确度是无法达到要求的。这主要来源于两个方面,其一,移液管一般采用玻璃材质,而玻璃的导热系数高于移液器的塑料壳体,也就是说,这个外界的温度,将直接传递给移液管内的液体,从而导致其体积的改变;其二,因为移液管自身的玻璃管壁存在一个厚度,而玻璃又无法完全避免因光线在玻璃内传输过程中的折射,因此,从移液管外表面观测到的液体高度与实际液体高度存在差异。而这两点,因为移液器的不同设计,从而得到几乎完全避免。当然,移液器在带来如此多的益处同时,也有不足之处,比如,其价格要比移液管高,因此,对于具体的实验活动来说,应根据实验时间、要求来据实选择,但总的来说,移液器已经完全具备取代移液管的能力!移液器的正确使用方法1.设定移液体积从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可; 从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积,这样可以保证移液器的精确度。2.装配移液枪头将移液枪垂直插入吸头,左右旋转半圈,上紧即可。 (注意:用移液器撞击吸头的方法是非常不可取的,长期这样操作回导致移液器的零件因撞击而松散,严重会导致调节刻度的旋钮卡住。)3.吸液及放液垂直吸液;吸头尖端浸入液面3mm以下,吸液前枪头先在液体中预润洗2-3次确保移液的精度和准度 (因为吸头内壁会残留一层”液膜”,造成排液量偏小而产生误差);慢吸慢放,以防突然松开溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气; 放液时如果量很小则应吸头尖端可靠容器内壁。(使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常。)4.浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。(可采用反向移液技术移取高粘度液体)5.吸有液体的移液枪不应平放,枪头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈6.移液枪在每次实验后应将刻度调至最大,让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命7. 移液枪校正 可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g.8. 移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如浓酸、浓碱、有机物等)。9. 严禁使用移液器吹打混匀液体。10. 不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度;同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。11. 如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物;定期清洁移液枪外壁,可以用95%酒精或60%的异丙醇,再用蒸馏水擦拭,自然晾干。移液器容量允许误差和测量重复性http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061507_572560_1253919_3.jpg移液器注意事项http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061508_572561_1253919_3.jpg移液管的使用方法(1)洗涤:使用移液管前,应先用铬酸洗液润洗,以除去管内壁的油污。然后用自来水冲洗残留的洗液,再用蒸馏水洗净。洗净后的移液管内壁应不挂水珠。(2)润洗:移取溶液前,用滤纸将尖端内外的水除去,然后用待移取的溶液将移液管润洗三次,润洗过的溶液应从尖口放出,弃去(3)移液:以右手拇指及中指捏住管颈标线以上的地方,将移液管插入供试品溶液液面下约1cm,不应伸入太多,以免管尖外壁粘有溶液过多,也不应伸入太少,以免液面下降后而吸空。先把橡皮吸球(一般用60ml洗耳球)内空气尽量压出,再紧插在管口上。这时,左手拿橡皮吸球轻轻将溶液吸上,眼睛注意正在上升的液面位置,移液管应随容器内液面下降而下降。当液面上升到刻度标线以上约1cm时,迅速移去洗耳球,用右手食指堵住管口,取出移液管,用滤纸条拭干移液管下端外壁,并使与地面垂直,稍微松开右手食指,使液面缓缓下降,此时视线应平视标线,直到弯月面与标线相切,立即按紧食指,使液体不再流出,并使出口尖端接触容器外壁,以除去尖端外残留溶液(
移液器的精确度一般使用纯水及天平称量的方法来检验。因此我们推荐使用正向移液技术移取水性溶液,如缓冲液,稀释酸或碱。当吸取不同液体时,由于由于不同液体的物性有所不同,因此可能会影响移液器的量程,从而造成不精确的表现。比如 一些生物溶液,粘度较高的化学溶剂,胶水等粘度较高液体的移液,可能会在移液器尖端或试管中产生气泡或泡沫,这将使移液量产生偏差。并且有可能对移液器造成不好的反应,从而对移液器有所损坏。在这种情况下,我们推荐使用反向移液技术移取高粘度或者容易产生泡沫的液体。反向移液技术能够减少喷溅,泡沫和气泡形成。这种方法尤其应用在小剂量的溶液方面,能够更突出的表现出来。http://www.lab55.cn/UpLoad/201112/2011122253328325.jpg 下面先介绍一下正向移液和反向移液技术的操作。http://www.bio-equip.com/imgatl/201181213141.gif1.将移液器的按钮压至第一停点。深度可根据所要吸取的液体容量来控制,这主要根据平时使用情况而定。2.将移液器吸头浸入液面下1cm处,缓慢释放移液器按钮使其滑回原位,从而移取相当容量的溶液。将吸头从液体中移出,接触容器边缘除去多余的液体。3.排液时,吸头紧贴容器壁先轻按按钮至第一停点,略作停顿后,将按钮按至第二停点(这个操作会将吸头内的液体彻底排尽),将吸头从容器中沿容器壁移出。4.松开按钮至准备位置。http://www.bio-equip.com/imgatl/201181213573.gif1.将按钮压至第二停点。2.将吸头浸入液面1cm处,缓慢释放按钮使其滑回原位。这将时液体充满吸头。将吸头从液体中取出,接触容器边缘去掉多余液体。3.放液到接收容器时平稳地轻按按钮至第一停点。保持在这个位置。一些液体会残留在吸头中不能被放出。4.残留在吸头内的液体能够被吹回原溶剂中或者同吸头一起丢弃。5.松开按钮到准备位置。 移液的精确程度跟操作人员所使用的移液器有一定的关系,移液器在操作的过程中的可操控程度也是影响移液精准的很大因素 而移液器操作的可控程度是与移液器空腔内的摩擦力有关的,这也是为什么我们有的移液器会很涩,有的移液器按钮按下去会很轻便的区别,摩擦力大的移液器在操作过程中会造出按下去的力加大,如果使用的时间长或者频率很快的话会对拇指造成很大的反向力,从而有得职业病的风险。而移液器的长短则会决定使用者的使用便利问题,过长的移液器再配合吸管以后,取液必定会很不方便,需要使用者伸长胳膊或移动较大距离,当然也不是越短的移液器就越好,移液器身长越短他体内空腔就越短,这样就会造成移液的过程中由于动力不足而取液不够不精准等问题,因此移液器的长短能否符合人体工学,是一个很重要的参数,也是决定一个移液器好坏的因素。大家有什么好的移液器来介绍介绍撒