质谱碎片检索

未知物顶空进样定性分析 TG-5ms柱，死时间不久 出现一个峰，AMDIS扣背景检索是 s-环氧丙烷（正匹配884，逆匹配947），不过质谱图多了个81，83峰（较小）。这个81，83是什么碎片，检索的s-环氧丙烷可靠吗？提取了81质量色谱图和TIC图峰顶有些不同，是不是就可以认定81是另个物质的碎片？[img=,690,371]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907171444596791_5165_2103464_3.png!w690x371.jpg[/img][img=,690,331]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907171445003071_943_2103464_3.png!w690x331.jpg[/img]

近来用单位的GC MS 2010测了几个样，图库检索无合适匹配，买了试剂纯标样（也只有80%），发现化合物的碎片一样，但强度不一样，能认为是同一物质吗？附件为质谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412011814_525435_1616855_3.jpg

我的质谱仪是安捷伦7890A-5975c型号。仪器突然出现以下问题： 在测试样品的时候总粒子流峰会出现类似于图一中很尖锐的峰，时间是9.5,10.5,12.0,13.5,14.5的那些峰，这些峰对应的质谱图里面基本除了有一个很高的峰，而且还有如图50-550都是密密麻麻的离子碎片峰， 图2是之后的测试谱图，发现那些密密麻麻的碎片峰变得越多并且越高。另外总离子流峰的基线也比较高，而且看起来很丑， 但是样品峰对应的离子碎片峰里却没有那些密密麻麻的小峰，这是什么原因？ 调谐都很好，都可以通过呀。求助各位大神。谢谢http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/01/201401082238_487189_2832609_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/01/201401082239_487191_2832609_3.jpg

[align=center][size=32px][font=宋体][color=#000000]例说[/color][/font][font=宋体][color=#000000]谱库检索相似度不高的[/color][/font][font=宋体][color=#000000]常见[/color][/font][font=宋体][color=#000000]原因[/color][/font][font=宋体][color=#000000]和应对措施[/color][/font][/size][/align][size=18px]概述：在质谱分析中，常常会遇到谱库检索相似度不高的情况，那么常见的原因有哪些呢？又该怎样来解决呢？我们借助图例来讨论一下（工作站为岛津GCMSsolution工作站）。[/size][size=18px]1. 检索时未扣除背景噪音。例如下图中的苯，未扣减背景，仅用峰顶的基础质谱图来检索，相似度只有89。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036415302_6251_2592430_3.png[/img][/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036417010_9276_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]而扣减背景后，相似度达98。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036420576_6431_2592430_3.png[/img][/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036420809_3682_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]应对措施：无论是手动定性还是自动定性，都应该设置扣除基线背景。[/size][size=18px]2. 样品的浓度太低，质谱图受基线干扰大，导致相似度较低。[/size][size=18px]例如下图：为浓度较高的苯，相似度为97，很高。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036421678_3558_2592430_3.png[/img][/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036423749_2987_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]如下图中的苯甲醛二甲缩醛，浓度很低，峰强度本身就不高，相似度只有88。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036423641_8767_2592430_3.png[/img][/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036424569_6874_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]应对措施：提高目标物质的浓度；调小方法中的分流比；使用不分流进样的方式；适当提高MS方法中的检测器电压值。[/size][size=18px]3. 样品浓度太高，导致检测器饱和，某个或某些离子信号封顶。这时会导致质谱图的离子比率失真，从而检索的相似度下降。[/size][size=18px]如下图丙酮的m/z 43的碎片饱和。此时以较高点作为基础质谱图，扣背景后检索，相似度只有89。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036426923_4766_2592430_3.png[/img][/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036426766_4558_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]而如果以较低点（离子未饱和）为基础质谱图，扣背景后检索，相似度则达98。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036427938_7383_2592430_3.png[/img][/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036428788_7998_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]应对措施：降低目标物质的浓度；调大分流比；适当降低检测器电压。[/size][size=18px]4. MS的采集方法为SIM而非SCAN方式。俗语说“窥一斑而知全豹”，在MS中是不合适的。在SIM方式中，采集的离子碎片比较少，检索时难以匹配到正确的物质。因为只考察少量离子碎片的话，可能谱库中很多物质都有。[/size][size=18px]数据文件查看采集方式的操作如下：在再解析程序中，点“视图”——“数据采集设置”——“仪器参数”[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036429696_1620_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]下图中红圈中即可以看出此数据文件的采集方式。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036430965_8665_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]应对措施：定性必须以SCAN方式采集数据。[/size][size=18px]5. 扫描m/z范围未涵盖目标物的主要特征碎片。比如下图中的甲醇，主要特征碎片是29、31、32。如果设置的m/z从32以上开始，得到的相似度会很低，甚至找不到。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036431815_9280_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]应对措施：SCAN方法的设置范围应该将目标物质的主要离子碎片包含在内。[/size][size=18px]6. 不同的物质出峰时间有部分或者完全重叠。这时会有个比较有趣的现象，就是如果基础质谱图选择的不同位置，观察到的质谱图离子比例会有明显变化。[/size][size=18px]例如，下图的TIC峰实际是两种物质叠加的，当我们进行相似度检索时选择的是基础点为偏左侧时，质谱图如下：[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036433808_1218_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]当选中间最高点时：[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036434795_7555_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]当选择右侧点时：[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036434657_6608_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]可以看出，三个位置扣减背景之后的质谱图明显不同。实际是因为这个峰是两种物质碎片的叠加，所以选不同的位置时，碎片比例都会不同。[/size][size=18px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009102036435507_7223_2592430_3.png[/img][/size][size=18px]应对措施：使用碎片表或者差减法分别找出两种物质。可参考：[/size][size=18px][url]https://bbs.instrument.com.cn/topic/7612465_1[/url]。[/size][size=18px]6. 谱库中并未录入目标物。这也是有可能的，不过遇到的比较少。[/size][size=18px]应对措施：准备更丰富的谱库，或者自建一些化合物的谱库。自建谱库可参考：[/size][size=18px][url]https://bbs.instrument.com.cn/topic/7613148_1[/url]。[/size][size=18px][b]小结：[/b]谱库检索相似度不高的常见原因解析及应对措施。[/size]

使用岛津GCMS-QP2010SE直接进样得到scan图谱，为35种挥发有机物（对间二甲苯分不开，视为一种，所以共34种）。[img=,690,357]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222022086953_1494_2592430_3.png!w690x357.jpg[/img]有32个比较大的峰，其中可以比较容易直接检索确定30种。有1、2、17、18号物质未确定对应的峰。[img=,384,419]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222038352063_4896_2592430_3.png!w384x419.jpg[/img]在4.3min和16.8min有两个未定性的TIC峰[img=,690,357]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222045014742_670_2592430_3.png!w690x357.jpg[/img][img=,690,357]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222045585448_8992_2592430_3.png!w690x357.jpg[/img]以4.3min峰为例，若直接检索，得到的结果相似度不高，目标组分的碎片离子比标准谱库的多很多种，所以怀疑是多个峰重叠在一起了。[img=,690,459]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222047485893_3785_2592430_3.png!w690x459.jpg[/img]右键选择“扣减”，得到扣减后的质谱图[img=,690,109]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222057439033_7940_2592430_3.png!w690x109.jpg[/img]继续在扣减结果上右键“对差减结果相似度检索”，得到相似度很高的结果。[img=,690,414]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222059484618_2863_2592430_3.png!w690x414.jpg[/img]因此可以判断其中一种物质是1，1，2-三氯-1，2，2-三氟乙烷，CAS号76 - 13 - 1。回到未扣减的谱图界面，向下找到CAS为76-13-1的相似度检索结果（若未检索出，可以点“处理”——“登记谱库质谱图到组分列表”，在谱库中选择到刚才所确定的物质，需要提前查出系列号），再做扣减——检索。[img=,690,410]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904222108126975_6427_2592430_3.png!w690x410.jpg[/img]、就找到了另一种成分1，2-二氯乙烯，CAS号75-35-4。通过碎片表可以看出这两种物质的最大特征离子碎片（分别为101和61）的质量图：[img=,690,362]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904232225410400_6962_2592430_3.png!w690x362.jpg[/img]同样的方式可以检索出16.8min的峰为1，1，2-三氯乙烷和四氯乙烯。所有物质找到。