色谱科填空柱

微生物知识、消毒与灭菌知识填空试题一、填空题（每空2分、共50分）1．微生物（microorganism, microbe）是一些肉眼看不见的 的总称。2．微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可分成三大类： 、 、 。　3．微生物的形态结构： 、 、 、 、 。　4．微生物的营养包括： 、 、 、 、 。　5．对______ 和______ 进行更加严格的控制对于针剂生产洁净室非常重要。6．辐射灭菌法：辐射有两种类型：一种是______ ，如紫外线、红外线、微波；一种是______ ，如可引起被照射物电离的X射线、γ射线。7．过滤除菌的效果与滤膜的______ 、______ 、______ 、______ 等因素有关。　8．高压蒸汽灭菌法：超过一个大气压时，水的沸点高于______ ，反之亦然。此法适用于　______ 和______ 的物品。 有兴趣的跟帖做一下，标准答案以后帖出。建议版主：如答案全对者能否适当给加分！

求助，请在（）内填空，参照17025：1、实验室应配置（）和人员健康保护所需的安全保护设施；2、校准物质的使用要（）并能溯源到国家（国际）基准的标准物质；3、样品的接收，应检查样品标记，（）与合同规定相符。

[align=center]装填空气过滤柱[/align]在需要过滤空气中的二氧化碳和水分时，我们就需要一节空气过滤柱；[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]的淋洗液为保证日间8小时的重复性，确保淋洗液长时间（24小时）的性质不发生较大改变；方法简便，材料易得，效果又好。所以我们把装柱方法分享给大家。准备：5mL注射器/脱脂棉/钠石灰；[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211301401435214_6517_5638282_3.jpeg[/img][/align]第一步，撕成两团脱脂棉，拔出注射器推杆，准备好钠石灰；[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211301401428001_6511_5638282_3.jpeg[/img][/align]第二步：用推杆将一团脱脂棉推入注射器底部，推紧压实；下部绵团需要厚度1cm以上，并且要压紧压实，避免钠石灰漏下去引入杂质；钠石灰可以购买小颗粒，或进处理压碎成小块，筛去细粉末；准备填充注射器的针管[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211301401430953_5975_5638282_3.jpeg[/img][/align]第三步 将钠石灰填充进注射器中，尽量填充均匀，细密，保证良好的吸收二氧化碳和水的效果；并且将另一棉团，塞进注射器尾部，用推杆压紧。此时简易的空气过滤柱就完成了。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211301401442354_5153_5638282_3.jpeg[/img][/align]第四步 如图，将注射器插入专用的接口中，拧紧后保证气密性，就能起到保护淋洗液的作用；若使用比较频繁，可增大注射器针管的体积，这样能填充更多的钠石灰；当然这个过滤柱的吸收量是一定的，在使用过程中，随着吸收二氧化碳和水，钠石灰的颜色会慢慢变淡，由粉红色逐渐向粉白色过渡，因此在柱管中由相当一部分钠石灰变色后，就需要装填新的过滤柱。只要用镊子取下上端绵团，倒出旧的钠石灰，然后同样方法进行装填，即可恢复如初；

一般情况下，我们在购买色谱柱时，很少考虑色谱柱孔径方面的信息，其实，色谱柱填料孔径对分析也有些影响，具体如下：*HPLC吸附介质是多孔的颗粒，绝大多数的反应表面于孔内。因此，分析物必须进入孔内才能被吸附和分离*孔径小，含孔率高，则比表面积大，碳载量高，色谱柱分离性能也随之提高*另外，孔径大小必须和分子大小相匹配。一般情况下，分子量小于2000的分析物使用100 Å 或更小；分子量在2000-10000之间的分析物使用100-200 Å的填料；大于10000的包括多肽，蛋白质等需要选用300 Å或更大的孔径。为了达到最佳分离，一般要求孔径直径是分子直径的3倍以上

[color=#444444]有两个问题想咨询下，如下：[/color][color=#444444]现在的色谱柱填料多为有孔的，孔径一般为5 um或者3um。[/color][color=#444444]1. 不知道这个孔是指的填料颗粒表面凹凸不平的凹槽，只是为了增大与样品的接触面积？还是填料颗粒上确实有一个个的小孔，样品分子可以穿透过去？[/color][color=#444444]2. 如果是一个个的小孔，那么样品是从填料颗粒之间通过，还是从小孔中通过？上述两种通过方式是不是存在保留差异？[/color]

[align=center][b]C18柱的填料对色谱柱的影响[/b][/align]柱填料的物理性能对填料色谱行为有重要影响。填料主要的物理性能包括如下：颗粒度、孔径、孔体积、键合相化学、含碳量及烷基化处理。(1)颗粒度是指柱填料的颗粒直径的大小。实际上色谱柱上所标的粒径是一个平均值。如粒径“5μm”并不是柱中填料所有的颗粒直径都是5μm，实际上有一个颗粒分布度。这种分布度对柱反压及柱效有重要作用。一般来说，平均颗粒度越小，颗粒分布度越小，色谱柱效越高，反压亦越高。目前C18柱填料粒径在4～10μm之间。(2)孔径是指填料颗粒间的孔间隙。一般所说的孔径是指填料的平均孔径。球形填料装柱后平均孔径分布比较窄，柱床结构均匀，柱效高，重现性好；无定形填料平均孔径分布较宽，柱床结构不均匀，流动相线性速度不均匀，谱带扩宽。平均孔径的大小对分离大分子化合物有较大的影响，在分离含有较大分子的样品时可能会有分子排阻效应，或产生吸附效应从而影响定量的回收率及准确度。因而在用反相色谱分离诸如蛋白或多肽样品时应考虑选用大孔径(如30 nm)的反相柱填料。孔体积作为硅胶多孔性的参数，在分离分析较大分子化合物时可作参考，选用较大孔体积的反相柱填料。(3)化学键合相填料在高效液相色谱法中占有极重要的地位。它可以键合极性较大的有机基团，采用极性较小的溶剂作流动相。亦可键合极性较小的有机基团，选用极性较大的溶剂作流动相。C18色谱柱是以硅烷化键合型(Si-O-Si-C)存在的，这类键合反应目前应用最为普遍。(4)碳含量即填料中的含碳量。传统的测量技术是将填料加热到碳氢键断裂，然后通过测定损失的重量或形成的二氧化碳来计算碳含量。可以通过增加碳键的长度或增加键合密度来增加碳含量。碳含量增加，柱子的保留值增加。键合相的色谱行为与键合密度有关，也与硅胶的密度及填料的表面积有关，填料的密度越高，填柱所需的硅胶量越多，柱子的含碳量也越高。如果用2种不同密度相同碳含量的填料填充柱子，其保留行为将明显不同。因此，单独以碳含量来预测色谱行为是不够的。(5)C18硅烷化试剂是一个大于2 nm大分子，因此会与已键合在相邻的硅醇基上的C18硅烷化试剂产生严重的立体位阻。其结果导致在硅胶表面有大量的残留硅醇基没有与硅烷化试剂反应，这些极性的硅醇基在一定色谱条件下会与碱性化合物相互作用引起峰形拖尾，从而可影响定量分析结果。这些问题在一定程度上可以通过烷基化处理加以克服。烷基化处理是在键合相上完成的独立反应，以减少在硅胶表面的硅醇基。烷基化处理采用小分子(如三甲硅烷)的试剂，其空间位阻远小于C18基团。大多数固定相仅有30%可覆盖的键合位置。据报道，通过某些极活跃的化学试剂及特殊的反应条件，最高的覆盖量可达50%。很好地了解硅胶键合相的物理特性将有助于在高效液相色谱的反应中选择合适的色谱柱。表面上看C18柱虽然化学官能团相同，而实际上不同品牌的C18柱性能可能有很大差别，从而产生不同的分离结果。本文节选于微信公众号《化工仪器网》，对部分内容进行了修改

请问有谁知道奥泰克色谱柱的填料是什么吗，会不会损坏微膜抑制器呢，谢谢

请问大侠们哪个厂家有悟空微球填充色谱柱？玻璃微球、二氧化硅微球都可以。谢谢！

“核壳型填料液相色谱柱以其尖锐的峰型，快速的分析速度和低使用压力受到广大高速高通量液相分析用户的喜爱。”你知道什么叫核壳型填料吗？

近几年，液相色谱仪器在硬件方面最大了突破就是推出了UHPLC或UPLC系统;但在色谱柱填料及形式方面也还是有一些新的技术，我收集了相关资料，简单回顾一下此方面相关的新技术。　　一、色谱柱填料新技术　　1、亚2微米填料　　首当其冲就是很热门的亚2微米填料。根据色谱速率理论，粒径越小，柱效越高，而且当粒径小到亚2微米左右时，线速度的提高，其分离度就不再降低，而亚2微米填料的优势也正在与此。这个理论很早就有，但是为什么UPLC或UHPLC直到2004年才出现呢?原因主要是粒径减小，柱压的急剧升高，因此亚2微米填料对系统的耐压性能要求很高，长久以来，材料及工艺不能满足亚2微米填料对系统的要求。　　随着材料及技术的进步，2004年沃特世推出了首款商品化地UPLC系统及配套的亚2微米填料的色谱柱。如今已有沃特世、安捷伦、赛默飞（戴安）、岛津、日立、珀金埃尔默等10余家公司推出UHPLC系统;国内上海伍丰也推出了国内首台UHPLC系统。但在填料方面，相比于常规的液相色谱填料，能够生产亚2微米色谱柱的公司还不是很多，色谱柱的种类也偏少。但毫无疑问，UPLC或UHPLC、亚2微米填料是液相色谱发展的主流。沃特世公司首席科学官Thomas E.Wheat先生认为，“未来10-15年，UPLC有可能完全取代HPLC。”　　2、核壳型填料　　最近，多家公司推出了一种新型液相色谱填料——核壳型填料。这种填料的优势在于，其可以缩短分析时间，提高柱效，但是对系统压力的增加却不是很多。换句话说，可以部分实现亚2微米填料的优势，但是由于对系统耐压要求不高，其可以在常规的HPLC上运行，可视为UPLC/UHPLC好的替代品。　　核壳型填料就是在坚实的硅胶核心上生成一个均匀的多孔外壳。由于核心硅球是实心的，这样样品在通过色谱柱时，只需要花费少量的时间便能扩散出硅球表面的颗粒孔中，在较短时间完成扩散，更快地传质，因此分析速度及柱效都较原来普通的色谱柱有很大提高。目前，生产和供应核壳型填料的厂家有安捷伦、菲罗门、Sigma-Aldriich等。　　3、整体柱(monolithic column)　　整体住也是近年来液相色谱柱填料研究的又一大方向。整体柱,又称为棒状柱、连续床层、无术塞术，是一种用有机或无机聚合方法在色谱柱内进行原位聚合的连续床固定相。与常规装填的液相色谱柱相比具有更好的多孔性和渗透性，以及具有灌注色谱的特点，即色谱柱中既有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔(几十个纳米)，目前多应用于对生物大分子进行快速分离分析，应用还具有一定的局限性。目前，商品化的整体柱产品也不是很多，主要还处于科研阶段。在售的整体柱比较有名的是默克公司的ChromolithTM。　　二、色谱柱新形式　　1、色谱饼　　色谱饼这一说法源自西北大学现代分离科学研究所、现代分离科学陕西省重点实验室耿信笃教授课题组，其与普通的色谱柱最大区别在于，其柱直径远远大于柱长，因而呈现饼的形状，故称为色谱饼。　　此种形式的改变带来的好处是，色谱柱的平衡时间、进样、洗脱及色谱柱的平衡时间都显著地缩短，从而实现了快速。当然使用色谱饼的前提是，分离度不能有很大的损失。目前，这一形式的色谱柱在分析蛋白方面有很好地效果。　　2、固定相优化液相色谱(Phase Optinized Liquid Chromatography POPLC)　　固定相优化色谱产品来自于德国BISCHOFF公司，上海通微是该产品在中国的代理。POPLC改变了我们原来创建分析方法的传统思路，不从改变流动相或更换色谱柱来改善分析效果的角度出发，而是从“优化固定相”的角度出发来摸索分析方法。据悉，目前商品化的固定相种类非常多，如何从中选出适合的固定相是头疼的问题。研发者希望通过固定相的组合能帮助方法开发人员更快更好地找到适合的固定相。　　德国BISCHOFF公司开发的POPLC系统由迷你柱管、填装不同填料的可替换短柱芯和分析软件三部分组成。在实验中，先选择几根装有不同填料的短柱芯作为一个实验组，通过单根柱子先做基础实验，然后用配套软件计算可能的柱连接方式(即将各种固定相串联)，再预测分离效果，最后做验证实验。实验表明，这种方式可以有效缩短分离时间，相应提高检测灵敏度。

如果填料颗粒大小减半，则理论塔板数加倍（假设柱长不变）。如果填料颗粒大小减半，则柱压增加为原来的四倍。 如果柱长加倍，则理论塔板数加倍。如果柱长加倍，则分析时间加倍。随着柱长增加，柱压也线性地增加。 以下是一个根据上述信息选择色谱柱的示例： 一个装填 10um 填料的长度为 200mm 的色谱柱可生成 6000 块理论塔板，这是在很多情况下能提供比较适当的分离的色谱柱效率。将颗粒大小由 10um 减小到 5um，柱长仍为 200mm，则可生成 12000 块理论塔板。然而，这个色谱柱可生成相当于原来四倍的柱压。通常情况下不需要生成 12000 块塔板，因此柱长可减半至 100mm，结果生成 6000 块塔板，同时分析时间也缩短一半；柱压仅比最初装填 10um 填料的长度为 200mm 的色谱柱高两倍。请大家提出新的见解或不同意见，请指正。

新的色谱科20%OV-101涂布Cormsorb WHP填充柱，我要接TCD检测器，请问填充柱还需要老化么？老化方法是怎样的？请各位高手指点，谢谢。[em61]

3um的色谱柱填料之间的孔径有多大？建议使用多少孔径的滤膜？

色谱柱填料的粒径越小，是不是孔径也越小呢？

沃特世公司隆重推出CORTECS 2.7 μm硅胶实心核颗粒色谱柱产品，该系列产品为HPLC色谱柱性能树立了全新的标杆。与此同时，新产品也扩充了CORTECS色谱柱家族，沃特世曾于2013年推出了首个1.6 μm实心核颗粒系列色谱柱。沃特世在刚刚结束的HPLC 2014大会上展出了最新的色谱柱产品。沃特世公司推出实心核颗粒色谱柱，难道原来的填料颗粒是空心的？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif

[color=#444444]过小颗粒填充入色谱柱会堵塞管路，那么该如何去除小于2微米的颗粒呢？[/color]

填料孔径越小，允许的流动相线速度越高。最佳流动相线速度取决于固定相的颗粒大小。在最佳线速度时，色谱柱生成的理论塔板数最多。对于内径为 4.6mm 的色谱柱，10um 的颗粒流动相线速度为 0.75ml/min 或 5um 的颗粒流动相线速度为 1.5ml/min 时，塔板数最多。 请大家提出新的见解或不同意见，请指正。

现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对不同类型色谱柱填料的特点有一定的认识和了解。 一、硅胶基质填料1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团(NH2,APS)和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。 由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷（Hexane）,氯仿（Chloroform）,二氯甲烷（Methylene Chloride）等。2、反相色谱反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18（ODS）、C8（MOS）、C4（B）、C6H5（Phenyl）等。 二、聚合物填料聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要优点是在PH值为1～14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的疏水性；大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。 三、其他无机填料其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质，一般仅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相，石墨化碳的表面即是保留的基础，不再需其它的表面改性，该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强，石墨化碳可用于分离某些几何导构体，又由于HPLC流动相中不会被溶解，这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC，氧化铝微粒刚性强，可制成稳定的色谱柱柱床，其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强，应用范围受到一定的限制，所以未能广泛应用，新型氧化锆填料也可用于HPLC，商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱，应用PH范围1～14，温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究，加之面临的实验难度，其重要用途与优势尚在进行中。

高效液相色谱(HPLC)是一种现代分离、分析方法。20世纪60年代以来，HPLC作为一种分析技术在生命科学、环境科学、药物分析等领域的应用日益普遍。其中色谱填料可谓是色谱技术的核心，它不仅是色谱方法建立的基础，而且是一种重要的消耗品。色谱柱作为色谱填料的载体，当之无愧被称为色谱仪器的“心脏”。高性能的液相色谱填料一直是色谱研究中最丰富、最有活力、最富于创造性的研究方向之一。　　近年来，液相色谱填料技术呈现二大趋势。 第一个趋势是快速液相，利用亚 2um小粒径硅胶、核壳型硅胶；第二大趋势是越来越丰富的选择性。下面就这二大趋势做一个简单介绍。　　(一)快速液相色谱填料技术　　硅胶基质的色谱填料因为其优异的色谱性能是目前应用最为广泛的液相色谱填料，尤其是针对有机小分子的分离和分析，硅胶基质的色谱填料占据绝大多数的市场份额。最近10年，这个领域最激动人心的进展是基于以下二个方向的快速液相技术的发展。　　1、超高效液相色谱(UHPLC)填料技术　　从2004年Waters公司推出UPLC仪器，超高效液相色谱技术以其快速、高分离度和高灵敏度的优势得到了广泛的应用。而这种技术的核心是基于亚 2um小粒径硅胶的色谱填料。当填料颗粒小于2um时，不仅柱效明显提高，而且随着流速的增加，分离效率并不降低。采用高流速可将分离速度和峰容量扩展到一个新的极限，但同时柱压也显著升高。小粒径填料需要使用压力更高的超高效液相色谱仪系统，对色谱柱的生产工艺也有更高的要求，必须解决色谱柱的装填难度大、柱头容易漏液、填料容易堵塞等问题。目前，除了国际知名色谱仪器和色谱柱公司(如Waters、Agilent、Phenomenex)生产UHPLC色谱柱，国内的色谱柱厂家也陆续推出此类产品。虽然UHPLC仪器还是国际知名品牌垄断市场的情况， 但是国产的UHPLC色谱柱已经可以取代进口品牌。 图1为月旭公司Ultimate® XB-C18 UHPLC色谱柱(2.1×100 mm, 1.8um)对奶制品中黄曲霉毒素M 1、M 2测定的色谱图。http://bimg.instrument.com.cn/show/NewsImags/images/2014699042.jpg　　2、核壳型色谱填料　　核壳型(core-shell)色谱填料是由著名色谱科学家 Jack Kirkland 在2006年研制成功的一种新型色谱填料。它是将多孔硅壳熔融到实心的硅核表面而制备的。这些多孔的“光环”状颗粒具有极窄的粒径分布和扩散路径，可以同时减小轴向和纵向扩散，允许使用更短的色谱柱和较高的流速以达到快速、高分辨率分离。并且，核壳型色谱柱所产生的反压明显低于UHPLC色谱柱，低反压可以使仪器承受压力降低，使得在常规的液相仪上就能够实现超高效液相仪的分离效果。但是，核壳型色谱柱对仪器的柱外死体积要求高、且柱容量小于全多孔色谱填料，因而并不适用于大规模的制备液相分离需求。　　过去3-5年全球的色谱研究人员发表了大量的有关核壳型色谱填料的学术文章，但是其在工业界的应用是一个渐进式推进的过程，不会一下子大面积被采用。国内还没有报道有国内厂家生产核壳型填料。http://bimg.instrument.com.cn/show/NewsImags/images/2014699116.jpg　　(二)具有丰富选择性的色谱填料　　液相色谱技术的广泛应用也得力于近年来各种色谱填料技术的发展为色谱分离提供了越来越多样的选择性。近年来人们制备了大量的含有不同键合基团的色谱填料以增强色谱柱的选择性，从而满足实际样品分离的需要，例如亲水作用色谱(HILIC)填料、立体保护键合色谱填料、极性嵌入反相色谱填料、有机-无机杂化色谱填料、亲水性体积排阻色谱填料、混合模式色谱填料、手性色谱填料以及聚合物基质色谱柱填料等。　　1、HILIC色谱填料。它采用极性固定相和含有一定水的水溶性有机溶剂为流动相，不仅克服了正相色谱和反相色谱对极性化合物分离的不足，而且提供了与反相色谱截然不同选择性，在强极性和离子型化合物如氨基酸、碳水化合物和多肽等的分离中发挥着重要作用。并且，由于其流动相含有高浓度的有机溶剂，有利于增强电喷雾离子源质谱的离子化效率，进而提高其灵敏度，与质谱具有很好的兼容性。过去5-6年HILIC模式色谱柱的应用增长非常快。目前商品化的HILIC色谱填料种类繁多，基于硅胶基质的HILIC填料包括裸硅胶、氨基、氰基、二醇基、酰胺型以及两性离子型等。目前生产HILIC色谱填料的国内公司主要有月旭、艾杰尔、迪马以及赛分等公司。http://bimg.instrument.com.cn/show/NewsImags/images/2014699132.jpg　　2、极性嵌入反相色谱填料。它通过在硅胶键合烷基链的中下部镶嵌一些极性基团，如烷基胺、酰胺、季铵或者氨基甲酸酯等极性基团来降低未反应硅醇基活性和改善对极性化合物的保留能力。这种填料具有的最大优势是减少了填料表面游离硅羟基与碱性化合物间的“次级保留”作用，从而改善碱性化合物峰型的拖尾，而且由于极性基团的嵌入，增强了对极性化合物的保留，提供和普通C18很不一样的选择性。月旭公司的Ultimate® Polar-RP色谱柱装填的即为该类型色谱填料。　　3、立体保护键合相。它是在硅胶的烷基链侧链键合含异丙基和异丁基的C18固定相。由于在C18烷基链上引入了较大的基团以及立体效应，阻碍了硅醇基与分析物的相互作用，因而对碱性化合物的分离呈现出对称的峰型并具有良好的柱效，防止碱性化合物在色谱柱上的拖尾，并且在低pH值时有较高的水解稳定性。月旭Ultimate® LP色谱柱填充的即为此类型的色谱柱填料，特别适合在极低pH条件下(例如pH=0.8)分离极性化合物。此款色谱柱可以很好地取代市场上广泛应用的安捷伦 Zorbax SB 色谱柱。　　4、有机-无机杂化色谱填料。它是在超高纯全多孔硅胶微球基质表面涂覆一层厚度均匀的有机-无机杂化层，进而提高填料的pH耐受范围和应用能力的一种填料(其填料结构示意图如图4所示)。这种类型的填料能够耐受pH值很高的流动相，并且具有很好的pH值稳定性，它的pH耐受范围可以达到1.5-12，而常规的硅胶基质色谱填料pH值范围一般仅为2-8;它能够耐受各种缓冲液体系，柱寿命长。目前，月旭科技的Xtimate®反相填料、菲罗门公司的Gemini NX®均是属于此类有机-无机杂化硅胶色谱填料。Waters 公司的X-Bridge 色谱填料采用的是其专有的有机-无机整体杂化技术，不是表面涂覆。http://bimg.instrument.com.cn/show/NewsImags/images/201469920.jpg　　5、亲水性体积排阻(SEC)色谱填料。它是在超高纯全多孔硅胶表面包覆一层具有良好稳定性的亲水性聚合物的体积排阻色谱填料，其填料的作用基团为二醇基(填料结构示意图如图5所示)。其填料表面因受二醇基官能团保护而不与蛋白质相互作用。使得蛋白、生物酶、多肽等样品的非特异性吸附极小;因而广泛应用于生物大分子的分离。月旭Xtimate® SEC填料即为此类型的色谱填料。目前已有120 Å、300 Å、500 Å和1000 Å等四种孔径尺寸规格的SEC色谱柱产品。国内外也有一些色谱柱厂家成功研发了该类型产品，例如TOSOH公司的TSK gel SW-型色谱填料、安捷伦公司的ZORBAX GF色谱填料。http://bimg.instrument.com.cn/show/NewsImags/images/2014699221.jpg[size

一、填空题1、气相色谱柱的老化温度要高于分析时最高柱温 ℃，并低于 的最高使用温度，老化时，色谱柱要与 断开。2、气相色谱法分析非极性组分时应首先选用 固定液，组分基本按 顺序出峰，如为烃和非烃混合物，同沸点的组分中 大的组分先流出色谱柱。3、气相色谱分析中等极性组分首先选用 固定液，组分基本按 顺序流出色谱柱。4、一般说，沸点差别越小、极性越相近的组分其保留值的差别就 ，而保留值差别最小的一对组分就是 物质对。5、气相色谱法所测组分和固定液分子间的氢键力实际上也是一种 力，氢键力在气液色谱中占有 地位。

最近实验需要用到正相高效液相色谱，但面临一个柱子型号的选择问题，因为刚开始接触液相，所以很多知识还不懂。我想向各位前辈请教一下，关于液相色谱的长度，内径大小以及填充物颗粒的尺寸是怎么影响物质的分离的呢，它们各自对分离有怎样的影响的？

Kromasil柱Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生产的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。 Kromasil是一种高纯度球形硅胶填料，金属杂质含量极低，减少了有些金属螯合物在硅胶基质上的络合作用。 Kromasil硅胶的表面由独特的硅羟基基团组成，硅烷的覆盖率高，在较高的或较低的PH条件下不易水解和分解，可在PH=1.5～9.5条件下稳定使用。 Kromasil的含碳量高，表面极性小，分离效能高。通常在分析碱性样品时，与酸性硅羟基反应会产生不利的拖尾现象，而Kromasil化学纯度极高，它的表面由分布独特、相对中生的硅羟基基团组成，并使不需要的酸性硅羟基基团减少到最低，从而使之具有良好的峰对称性种较高的柱效。Hypersil BDSHypersil BDS 类色谱填料是极好的反相柱填料，有很好的耐久性及重现性，应用范围极其广泛。Hypersil BDS 硅胶担体键合前经过专门的碱钝化处理，将残余硅羟基降至极限，这种改善的表面，使得键合后的硅胶具有很高的配位度，大大降低了硅羟基与分析物之间的相互作用，改善了色谱峰形，降低了色谱峰的拖尾程度，提高了峰的对称性。Hypersil BDS填料的特征：l 对碱性化合物有更好的峰型。l 更长的寿命。l 更好的稳定性。l 同碱性化合物一样，酸性和中性化合物也有非常优异的峰值--真正的通用柱填料。紧管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命。且对于简单的两元流动相(如甲醇/水)，当样品为酸性、中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度。但当分析药物等样品中的强极性含氮的化合物时，样品峰型就极查，拖尾严重，并导致定量分析精度下降，时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中，造成该现象的原因是固定相上尚有残余的硅羟基。尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应，即所谓的“封尾”，以减小残余硅羟基的作用，但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响。Hypersil公司开发的将残余的硅羟基降至极限的Hypersil BDS(Base Deactived Silica,碱纯化硅胶)系列产品，并用现代衍生反应技术生产出特别适用于碱性化合物的真正均一反相填料。Hypersil 300A 填料是基于5um和10um,孔径为300A 的硅胶为基质的HPLC填料适合越来越多的生物大分子分离与分析的需要,现可提供C18 C8 C4 的填料*Hypersil 300A C18　适合亲水性强的分子量大于5000的小肽酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析*Hypersil 300A C4　　适合疏水性的小肽及大分子的多肽分析*Hypersil 300A C8　　选择性介于C18和C4之间适用于亲水性及弱疏水性的小肽和蛋白质酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析。 Hypersil ODS填料Hypersil 填料是基于粒度为3um 、5um和10um, 孔径为120A的硅胶为基质的HPLC填料其生产过程的质量控制标准非常严格全世界数千个实验室使用Hypersil色谱柱已长达20多年很多应用实例可以从多种文献及著名杂志上查到。大量的试验测试已经证实Hypersil ODS2填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料无论是在酸性还是碱性样品的分析上选择性与峰型几乎与其保持一致。LiChrosorb填料常规色谱分析柱产品介绍： LiChrosorb是德国MERCH公司出品的一种多孔无定型硅胶基质填料品牌，在过去的25年中非常成功地应用于液相色谱分离。产品特点：LiChrosorb RP-8和RP-18适合于碱性样品的色谱分析。技术参数：LiChrosorb填料参数

1958年第一根毛细管色谱柱问世以来，已经四十五年了。四十五年来毛细管柱及相应的仪器发展很快。特别是石英毛细管柱，无论在柱效、惰性和热稳定性方面，都是填充柱无法比拟的。然而，为什么至今填充柱在大量常规分析中仍占有主导地位？（尤其在我国是如此）。这主要是由于一般毛细管柱的样品负荷量比填充柱低1~3个数量级，要求分流进样（分流进样一般不适用于沸程超过十个碳数的混合物）。而Crob无分流进样法，虽在一定程度上克服了分流进样的不足，但操作不便，使用上也有一定限制。另外，填充柱可选用上百种固定液，以改善柱的选择，使之满足分析上的要求。这些可能就是毛细管柱至今还不能普遍替代填充柱的主要原因。所以我们还是有必要了解一下填充柱分析的相关知识。 填充柱填料为可分为气—固色谱柱填料及气—液色谱柱填料。 气－固色谱柱填料分为分子筛（5A、13X等），硅胶，三氧化二铝，碳分子（TDX-01，TDX-02等），高分子聚合物（如GDX系列，有机担体系列，Porapak系列，Chromosorb系列等）。 气－液色谱填料的固定液分为有机酸酯（DDP，DNP，Tween-60,Tween-so,DEGS等），聚硅氧烷系列（如OV系列SE系列），聚乙二醇（PEG1500，PEG6000，PEG20M等），脂肪烷类（角鲨烷，阿皮松系列等），腈及腈醚类（如ββ’氧二丙腈，癸二腈等）及其他类（如有机皂土等）。

[align=center][b]色谱柱质量控制的难点分析[/b][/align]本人认为，色谱柱在生产的过程中面临两大难点，一为填料，二为装填。色谱柱的生产过程严格意义上是材料科学的一部分。在色谱填料的生产过程中，通过一定的质量控制手段聚合成为一定粒径的硅胶球做担体，这一过程中，需要极其精细的条件控制，进而保证多孔硅胶球长的不仅要圆，而且直径分布也要均匀。在后续的烧结、活化、键合、封端过程中，也需要精细的条件进行控制，以保证产品的品质。Kromasil及其母公司是以精细化工见长的跨国公司，在材料合成这一领域是有发言权的。搞过有机合成的人都知道，在合成过程中，每一个外部条件的控制都对最后的结果有很大的影响。这些细微的条件控制用一句佛语讲，就是不可云，不可云！在这些步骤中，每一步都有自身独特的秘诀。往往这些技术都受专利保护。色谱柱的装填是一项技术活，需要专业的装填设备和熟练的技术工人。相比而言，色谱填料的质量控制是难点，这个是关键中的关键。好的色谱填料在电镜下的图片非常好看，不好的色谱填料硅胶球的直径跨度非常大，色谱的重现性非常差！